本發(fā)明涉及藥學(xué)領(lǐng)域，具體地，涉及手性藥物拆分，更具體地，涉及一種分離氧氟沙星對映異構(gòu)體的方法。
背景技術(shù)：
氧氟沙星(式1所示化合物)是一類喹諾酮類廣譜抗菌藥物，主要通過選擇性抑制細菌DNA回旋酶的活性，阻礙細菌DNA的合成，從而達到殺菌的效果。藥品氧氟沙星是其左旋和右旋異構(gòu)體的消旋體化合物，其中左旋的抗菌活性更強。左氧氟沙星最早于1993年在日本上市，該藥治療呼吸道感染、泌尿生殖系統(tǒng)感染和皮膚軟組織感染等。
目前尚未見到有關(guān)模擬移動床色譜拆分制備氧氟沙星的技術(shù)方法。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明旨在至少在一定程度上解決相關(guān)技術(shù)中的技術(shù)問題之一。為此，本發(fā)明的一個目的在于提出一種分離氧氟沙星對映異構(gòu)體的方法，該方法可以將氧氟沙星的左旋體與右旋體分開，純度可達到90％以上。本發(fā)明工藝簡單，產(chǎn)品藥物的成份和含量更準(zhǔn)確，藥物的效果更穩(wěn)定可靠，可用于工業(yè)化大生產(chǎn)。
在本發(fā)明的一個方面，本發(fā)明提供了一種分離氧氟沙星對映異構(gòu)體的方法。根據(jù)本發(fā)明的實施例，該方法包括：(1)將氧氟沙星樣品進行溶解，以便得到氧氟沙星溶液；(2)利用模擬移動床色譜系統(tǒng)分離所述氧氟沙星溶液中的氧氟沙星對映異構(gòu)體，色譜條件如下：色譜柱：Chiralcel OD-H手性柱；固定相：表面涂布有纖維素-三[3,5-二甲苯基氨基甲酸酯]的硅膠；流動相：含有乙醇、正己烷和磷酸的混合液。
根據(jù)本發(fā)明實施例的分離氧氟沙星對映異構(gòu)體的方法，能夠使左旋氧氟沙星和右旋氧氟沙星得以高效拆分，左旋氧氟沙星和右旋氧氟沙星的純度高。并且，該方法的工藝十分簡便，可實現(xiàn)連續(xù)生產(chǎn)，產(chǎn)品質(zhì)量穩(wěn)定好。此外，采用乙醇、正己烷和磷酸的混合物作為 流動相，無毒無害，流動相可充分回收利用，綠色環(huán)保，節(jié)約成本。
另外，根據(jù)本發(fā)明實施例的模擬移動床色譜分離制備氧氟沙星的方法，還可以具有以下附加技術(shù)特征：
在本發(fā)明的一些實施例中，所述含有乙醇、正己烷和磷酸的混合液中，所述乙醇、所述正己烷和所述磷酸的體積比為(0-100)：(0-100)：(0-100)，優(yōu)選為(80-100)：(0-20)：(0.5-1)，更優(yōu)選為95；5：0.5。由此有利于分離。
在本發(fā)明的一些實施例中，所述模擬移動床色譜系統(tǒng)包括：色譜柱區(qū)：所述色譜柱區(qū)由4～12根色譜柱組成，并且所述色譜柱區(qū)分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ區(qū)，其中，每區(qū)均包括：1～3根色譜柱；進樣泵；洗脫泵；萃取泵；以及電磁閥。色譜柱的數(shù)目越多，分離效果越好，但分離時間也更長，發(fā)明人大量研究發(fā)現(xiàn)，色譜柱區(qū)由4～12根色譜柱組成，達到分離效果和分離時間的最佳組合。
參考圖1，在本發(fā)明的一些實施例中，所述模擬移動床色譜系統(tǒng)由4～12根色譜柱組成，分為Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ區(qū)，每區(qū)有1～3根色譜柱。其中，Ⅰ區(qū)位于洗脫液入口與萃取液出口之間，在Ⅰ區(qū)主要實現(xiàn)右旋氧氟沙星的解吸；Ⅱ區(qū)位于萃取液出口與進樣口之間，在Ⅱ區(qū)使右旋氧氟沙星反復(fù)吸附、解析、濃縮；Ⅲ區(qū)位于進樣口和萃余液出口之間，在Ⅲ區(qū)得到左旋氧氟沙星；Ⅳ區(qū)位于萃余液出口得洗脫液入口之間，一方面Ⅲ區(qū)的洗脫液進入Ⅳ區(qū)可循環(huán)利用，另一方面，Ⅳ區(qū)將Ⅲ區(qū)和Ⅰ區(qū)隔開，從而防止萃余液中的左旋氧氟沙星進入Ⅰ區(qū)。
在本發(fā)明的一些實施例中，該方法包括：(1)將所述氧氟沙星樣品溶于流動相，以便得到所述氧氟沙星溶液，其中，所述氧氟沙星溶液中氧氟沙星的濃度為0.1～200mg/ml；(2)根據(jù)所述電磁閥的切換時間的調(diào)整，以便分離得到左旋氧氟沙星和右旋氧氟沙星產(chǎn)品。
在本發(fā)明的一些實施例中，根據(jù)模擬移動床色譜系統(tǒng)中電磁閥的切換時間調(diào)整，分離得到左旋氧氟沙星和右旋氧氟沙星產(chǎn)品。
在本發(fā)明的一些實施例中，所述色譜柱中填料的粒徑為10～60μm，優(yōu)選為20～30μm。由此，可以進一步提高氧氟沙星中各手性組分的分離度。粒徑越小，分離效果越好。但粒徑過小，會增加柱壓。當(dāng)填料的粒徑為10～60μm，尤其是20～30μm時，分離效果好，柱壓適當(dāng)。
在本發(fā)明的一些實施例中，步驟(3)可分別對左旋氧氟沙星溶液和右旋氧氟沙星溶液進行進一步濃縮、重結(jié)晶、過濾、干燥，以便得到純度在95％以上的左旋氧氟沙星與右旋氧氟沙星。
在本發(fā)明的一些實施例中，所述模擬移動床色譜系統(tǒng)中洗脫泵流量為0ml/min～100ml/min，壓力0～10MPa；進樣泵流量為0ml/min～50ml/min，壓力0～10MPa；萃取泵 流量為0ml/min～100ml/min，壓力0～10MPa。由此，可以進一步提高氧氟沙星中各手性組分的分離度。
在本發(fā)明的一些實施例中，所述電磁閥的切換時間為5min～20min。由此，便于得到高純度的左旋氧氟沙星與右旋氧氟沙星。
在本發(fā)明的一些實施例中，所述模擬移動床色譜系統(tǒng)的操作溫度為20～40℃，優(yōu)選25～30℃。由此，可以進一步提高氧氟沙星中各手性組分的分離度。
在本發(fā)明的一些實施例中，所述模擬移動床色譜系統(tǒng)由PLC程序控制實現(xiàn)連續(xù)進料、連續(xù)出料。
本發(fā)明實施例的分離氧氟沙星對映異構(gòu)體的方法，至少具有以下有益效果之一：
(1)利用模擬移動床色譜技術(shù)將氧氟沙星的左旋體與右旋體分開，氧氟沙星的左旋體與右旋體純度可達到90％以上。
(2)工藝流程十分簡便，可實現(xiàn)連續(xù)生產(chǎn)，產(chǎn)品中氧氟沙星的左旋體與右旋體的含量準(zhǔn)確，藥物的質(zhì)量更穩(wěn)定。
(3)整個工藝不涉及有毒有害物質(zhì)，采用乙醇、正己烷和磷酸的混合物作為流動相，可充分回收利用，綠色環(huán)保、節(jié)約成本。
本發(fā)明的附加方面和優(yōu)點將在下面的描述中部分給出，部分將從下面的描述中變得明顯，或通過本發(fā)明的實踐了解到。
附圖說明
圖1顯示了根據(jù)本發(fā)明的實施例的模擬移動床色譜系統(tǒng)的結(jié)構(gòu)示意圖。
具體實施方式
下面詳細描述本發(fā)明的實施例。下面描述的實施例是示例性的，僅用于解釋本發(fā)明，而不能理解為對本發(fā)明的限制。實施例中未注明具體技術(shù)或條件的，按照本領(lǐng)域內(nèi)的文獻所描述的技術(shù)或條件或者按照產(chǎn)品說明書進行。所用試劑或儀器未注明生產(chǎn)廠商者，均為可以通過市購獲得的常規(guī)產(chǎn)品。
本發(fā)明實施例中所用的氧氟沙星原料為申請人自制。
一般方法：
1、設(shè)備及條件選擇
采用模擬移動床色譜系統(tǒng)，該系統(tǒng)由洗脫泵、進樣泵、萃取泵、色譜柱、電磁閥、單向閥、控溫器和PLC系統(tǒng)控制器及計算機組成。樣品溶液和洗脫液分別從樣品液入口和洗脫液入口注入系統(tǒng)，氧氟沙星的兩個對映體單體分別從萃余液和萃取液兩個出口中流出，每 隔一定的時間，樣品液和洗脫液入口、萃取液和萃余液出口沿流動相流動的方向切換至下一支色譜柱。
2、色譜柱填料及流動相(溶劑)選擇
以纖維素-三[3,5-二甲苯基氨基甲酸酯]的硅膠為手性固定相，填料粒度為10～60μm，流動相為乙醇、正己烷和磷酸的混合物。
3、分離步驟
(1)樣品用流動相溶解后，通過進樣泵進入系統(tǒng)，系統(tǒng)分為4個區(qū)，色譜柱數(shù)目越多分離純度越高，但系統(tǒng)的復(fù)雜度及系統(tǒng)壓力越高，最適合的是4～16支，通過模擬移動床色譜系統(tǒng)的控制器，定期控制電磁閥的開閉，使洗脫口、進樣口、萃取液和萃余液出口沿流動相方向定時切換，使氧氟沙星的兩個對映體單體從萃取液和萃余液出口流出系統(tǒng)；
(2)得到的產(chǎn)品溶液，經(jīng)過濃縮、重結(jié)晶得到純度在90％以上的合格產(chǎn)品；
(3)成品分析
流動相：乙醇：正己烷：磷酸＝95：5：0.5
流速：0.5mL/min
泵：10ml分析泵
色譜柱：Chiralcel OD-H(4.6*250mm，20μm)
檢測器：紫外檢測器
柱溫：25℃
檢測波長：294nm。
實施例1
流動相：乙醇：正己烷：磷酸＝95：5：0.5
流速：1ml/min
進樣濃度：氧氟沙星消旋體：0.2mg/ml
進樣液流速：V1＝0.1ml/min
流動相流速：V2＝1.0ml/min
沖洗液流速：V3＝2.0ml/min
F泵壓力：6.8MPa
P泵壓力：7.5MPa
D泵壓力：6.8MPa
切換時間：8.5min
柱溫：25℃
成品分析
采用手性柱Chiralcel OD-H分析萃取液和萃余液組成，其中，左旋氧氟沙星或右旋氧氟沙星的含量分別為100％，98％。
實施例2
流動相：乙醇：正己烷：磷酸＝85：15：1
流速：1ml/min
進樣濃度：氧氟沙星消旋體：0.2mg/ml
進樣液流速：V1＝0.1ml/min
流動相流速：V2＝1.0ml/min
沖洗液流速：V3＝0.5ml/min
F泵壓力：6.5MPa
P泵壓力：4.5MPa
D泵壓力：6.5MPa
切換時間：8.5min
柱溫：25℃
成品分析
采用手性柱Chiralcel OD-H分析萃取液和萃余液組成，其中，左旋氧氟沙星或右旋氧氟沙星的含量分別為90％，100％。
實施例3
流動相：乙醇：正己烷：磷酸＝90：10：0.5
流速：1ml/min
進樣濃度：氧氟沙星消旋體：0.2mg/ml
進樣液流速：V1＝0.1ml/min
流動相流速：V2＝1.0ml/min
沖洗液流速：V3＝2.0ml/min
F泵壓力：6.8MPa
P泵壓力：7.5MPa
D泵壓力：7.0MPa
切換時間：8.5min
柱溫：25℃
成品分析
采用手性柱Chiralcel OD-H分析萃取液和萃余液組成，其中，左旋氧氟沙星或右旋氧氟沙星的含量分別為100％，90％。
對比實施例1
流動相：乙醇：正己烷：磷酸＝75：5：0.5
流速：1ml/min
進樣濃度：氧氟沙星消旋體：0.2mg/ml
進樣液流速：V1＝0.1ml/min
流動相流速：V2＝1.0ml/min
沖洗液流速：V3＝2.0ml/min
F泵壓力：6.1MPa
P泵壓力：8.2MPa
D泵壓力：6.6MPa
切換時間：9min
柱溫：25℃
成品分析
采用手性柱Chiralcel OD-H分析萃取液和萃余液組成，其中，左旋氧氟沙星或右旋氧氟沙星的含量分別為75％，85％，左旋氧氟沙星或右旋氧氟沙星的純度低，分離效果顯著低于實施例1-3的分離效果。
在本發(fā)明的描述中，需要理解的是，術(shù)語“第一”、“第二”僅用于描述目的，而不能理解為指示或暗示相對重要性或者隱含指明所指示的技術(shù)特征的數(shù)量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隱含地包括一個或者更多個該特征。在本發(fā)明的描述中，“多個”的含義是兩個或兩個以上，除非另有明確具體的限定。
在本說明書的描述中，參考術(shù)語“一個實施例”、“一些實施例”、“示例”、“具體示例”、或“一些示例”等的描述意指結(jié)合該實施例或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點包含于本發(fā)明的至少一個實施例或示例中。在本說明書中，對上述術(shù)語的示意性表述不必須針對的是相同的實施例或示例。而且，描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點可以在任一個或多個實施例或示例中以合適的方式結(jié)合。此外，在不相互矛盾的情況下，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以將本說明書中描述的不同實施例或示例以及不同實施例或示例的特征進行結(jié)合和組合。
盡管上面已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例，可以理解的是，上述實施例是示例性的，不能理解為對本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員在本發(fā)明的范圍內(nèi)可以對上述實施例進行變化、修改、替換和變型。