本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種胡蘿卜葉蛋白的制備方法。

技術(shù)背景

胡蘿卜，別名紅蘿卜、丁香蘿卜、葫蘆菔金，又被稱為胡蘆菔、紅菜頭、黃蘿卜等，有地下“小人參”之稱，是傘形二年生草本植物，以呈肉質(zhì)的根作為蔬菜來食用。

胡蘿卜葉叢生于短縮莖上，為三回羽狀復(fù)葉。葉柄細(xì)長，葉色濃綠，葉面積小，占胡蘿卜總體的40%以上。

胡蘿卜的葉子的功效

1、胡蘿卜葉子可以治便秘:胡蘿卜葉子中有一些葉綠素、膳食纖維以及葉酸存在，另外還有多種維生素，人們食用胡蘿卜葉子以后，會加快胃腸的運(yùn)動(dòng)，也能讓人體生成的大便軟化，減少它們在人體中積存的時(shí)間，讓大便快速排出體外，從而也就起到了緩解和治療便秘的作用。

2、胡蘿卜葉子可理氣止痛:理氣止痛也是胡蘿卜葉子的重要功效，綜可以用于人類的脘腹疼痛的治療，具體治療方法是把干燥以后的胡蘿卜葉子加三十到六十克，另入適量的清水，慢慢煎制，煎好藥液進(jìn)行過濾，一天飲用一次，連用七天止痛效果出色。

3、胡蘿卜葉子可以利水:利水也是胡蘿卜葉子的重工功效之一，它可以緩解人類的浮腫和小便不利以及淋痛等多種疾病的癥狀，也能預(yù)防這些疾病的發(fā)生，想讓胡蘿卜葉子起到利水的作用，除了可以煎制飲用以外，還可以把它切成碎末以后放在鍋中蒸熟后當(dāng)配菜食用。

因此，胡蘿卜葉具有很重要的食用和藥用價(jià)值。但現(xiàn)實(shí)生活中常被廢棄掉或做為飼料，十分可惜。

胡蘿卜葉的粗蛋白含量可達(dá)全葉干重的45.65%，是一種很好的植物蛋白原料，目前尚無對胡蘿卜葉蛋白利用的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于針對現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足，提供了一種胡蘿卜葉蛋白的制備方法，其特征在于，是通過以下步驟實(shí)現(xiàn)的：

(1) 打漿、酶解、過濾：采用料液比1: 3-5，用打漿機(jī)將洗凈瀝干的胡蘿卜葉打漿3-5min，然后加入（胡蘿卜葉漿質(zhì)量0.1-0.3%）蛋白酶充分?jǐn)嚢韬箪o置1-2 h 進(jìn)行酶解后， 用 800-2000 目濾網(wǎng)過濾取上清液備用。

（2）加熱、發(fā)酵：將(1) 所取上清液迅速放入沸水中加熱到40-45℃后加入保加利亞乳酸桿菌((1) 所取上清液質(zhì)量0.01-0.03%)、嗜熱鏈球菌((1) 所取上清液質(zhì)量0.01-0.03%)、在密閉條件下發(fā)酵 36-48 小時(shí)。

（3）膜分離：將經(jīng)（2）發(fā)酵過的胡蘿卜葉液用10000-50000 道爾頓膜超濾，分離出乳清溶液和蛋白溶液。

（4）吸附、酶氧化脫色：將經(jīng)（3）分離出的蛋白溶液中放入活性炭粉吸附5-10 min，然后過濾將活性炭粉清除，再加入( 蛋白溶液質(zhì)量0.3-0.5%) 脂肪氧合酶充分?jǐn)嚢韬箪o置1-2 h 進(jìn)行酶解。

（5）干燥：將經(jīng)（4）吸附、酶氧化脫色后的胡蘿卜葉蛋白溶液采用真空冷凍干燥制得白色胡蘿卜葉蛋白粉。凍干工藝參數(shù)：物料厚度8-9 mm，預(yù)凍溫度-35--40℃，預(yù)凍時(shí)間2-2.5h，升華時(shí)加熱板溫度45-50℃，干燥倉工作壓力22-26Pa，解析時(shí)加熱板溫度60-65℃。

步驟（1）中的蛋白酶含量為胡蘿卜葉漿質(zhì)量的0.1-0.3%。

步驟（2）中保加利亞乳酸桿菌含量為所取步驟(1) 上清液質(zhì)量0.01-0.03%、嗜熱鏈球菌含量為步驟(1) 所取上清液質(zhì)量0.01-0.03%。

步驟（4）中脂肪氧合酶含量為蛋白溶液質(zhì)量的0.3-0.5%。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn) ：本發(fā)明以胡蘿卜葉為原料經(jīng)→打漿→酶解→過濾→加熱→發(fā)酵→膜分離→吸附→酶氧化脫色→真空冷凍干燥，得到的胡蘿卜葉蛋白的提取率為50.32%，胡蘿卜葉蛋白得率為7.45%，胡蘿卜葉蛋白的顏色為白色，無草腥味，蛋白質(zhì)量分?jǐn)?shù)為63.24%。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

(1) 打漿、酶解、過濾：采用料液比1: 3，用打漿機(jī)將洗凈瀝干的胡蘿卜葉打漿3min，然后加入（胡蘿卜葉漿質(zhì)量0.1%）蛋白酶充分?jǐn)嚢韬箪o置1h 進(jìn)行酶解后， 用 800 目濾網(wǎng)過濾取上清液備用。

（2）加熱、發(fā)酵：將(1) 所取上清液迅速放入沸水中加熱到40℃后加入保加利亞乳酸桿菌((1) 所取上清液質(zhì)量0.01%)、嗜熱鏈球菌((1) 所取上清液質(zhì)量0.01%)，在密閉條件下發(fā)酵 36 小時(shí)。

（3）膜分離：將經(jīng)（2）發(fā)酵過的胡蘿卜葉液用10000 道爾頓膜超濾，分離出乳清溶液和蛋白溶液。

（4）吸附、酶氧化脫色：將經(jīng)（3）分離出的蛋白溶液中放入活性炭粉吸附5 min，然后過濾將活性炭粉清除，再加入( 蛋白溶液質(zhì)量0.3%) 脂肪氧合酶充分?jǐn)嚢韬箪o置1 h進(jìn)行酶解。

（5）干燥：將經(jīng)（4）吸附、酶氧化脫色后的胡蘿卜葉蛋白溶液采用真空冷凍干燥制得白色胡蘿卜葉蛋白粉。凍干工藝參數(shù)：物料厚度8 mm，預(yù)凍溫度-35℃，預(yù)凍時(shí)間2h，升華時(shí)加熱板溫度45℃，干燥倉工作壓力22Pa，解析時(shí)加熱板溫度60℃。

實(shí)施例2

(1) 打漿、酶解、過濾：采用料液比1: 5，用打漿機(jī)將洗凈瀝干的胡蘿卜葉打漿5min，然后加入（胡蘿卜葉漿質(zhì)量0.3%）蛋白酶充分?jǐn)嚢韬箪o置2 h 進(jìn)行酶解后， 用2000 目濾網(wǎng)過濾取上清液備用。

（2）加熱、發(fā)酵：將(1) 所取上清液迅速放入沸水中加熱到45℃后加入保加利亞乳酸桿菌((1) 所取上清液質(zhì)量0.02%)、嗜熱鏈球菌((1) 所取上清液質(zhì)量0.02%)，在密閉條件下發(fā)酵48 小時(shí)。

（3）膜分離：將經(jīng)（2）發(fā)酵過的胡蘿卜葉液用50000 道爾頓膜超濾，分離出乳清溶液和蛋白溶液。

（4）吸附、酶氧化脫色：將經(jīng)（3）分離出的蛋白溶液中放入活性炭粉吸附10 min，然后過濾將活性炭粉清除，再加入( 蛋白溶液質(zhì)量0.5%) 脂肪氧合酶充分?jǐn)嚢韬箪o1-2 h進(jìn)行酶解。

（5）干燥：將經(jīng)（4）吸附、酶氧化脫色后的胡蘿卜葉蛋白溶液采用真空冷凍干燥制得白色胡蘿卜葉蛋白粉。凍干工藝參數(shù)：物料厚度9 mm，預(yù)凍溫度-40℃，預(yù)凍時(shí)間2.5 h，升華時(shí)加熱板溫度50℃，干燥倉工作壓力26Pa，解析時(shí)加熱板溫度65℃。

實(shí)施例3

(1) 打漿、酶解、過濾：采用料液比1: 4，用打漿機(jī)將洗凈瀝干的胡蘿卜葉打漿4min，然后加入（胡蘿卜葉漿質(zhì)量0.2%）蛋白酶充分?jǐn)嚢韬箪o置1.5 h 進(jìn)行酶解后， 用 1500 目濾網(wǎng)過濾取上清液備用。

（2）加熱、發(fā)酵：將(1) 所取上清液迅速放入沸水中加熱到42℃后加入保加利亞乳酸桿菌((1) 所取上清液質(zhì)量0.03%)、嗜熱鏈球菌((1) 所取上清液質(zhì)量0.03%)，在密閉條件下發(fā)酵 40 小時(shí)。

（3）膜分離：將經(jīng)（2）發(fā)酵過的胡蘿卜葉液用30000 道爾頓膜超濾，分離出乳清溶液和蛋白溶液。

（4）吸附、酶氧化脫色：將經(jīng)（3）分離出的蛋白溶液中放入活性炭粉吸附5-10min，然后過濾將活性炭粉清除，再加入( 蛋白溶液質(zhì)量0.4%) 脂肪氧合酶充分?jǐn)嚢韬箪o置1.5 h 進(jìn)行酶解。

（5）干燥：將經(jīng)（4）吸附、酶氧化脫色后的胡蘿卜葉蛋白溶液采用真空冷凍干燥制得白色胡蘿卜葉蛋白粉。凍干工藝參數(shù)：物料厚度8 mm，預(yù)凍溫度-37℃，預(yù)凍時(shí)間2 h，升華時(shí)加熱板溫度47℃，干燥倉工作壓力24Pa，解析時(shí)加熱板溫度62℃。

以上關(guān)于本發(fā)明的具體描述，僅用于說明本發(fā)明而并非受限于本發(fā)明實(shí)施例索描述的技術(shù)方案，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，仍然可以對本發(fā)明進(jìn)行修改或等同替換。