本發(fā)明屬于醫(yī)藥化工領域，涉及新型廣譜抗病毒感染藥物及其在制備預防和/或治療多種病毒引起的病毒性疾病藥物中的用途。
背景技術：
：自從1899年馬丁烏斯·貝杰林克首次提出病毒一詞以來，迄今全世界已經(jīng)有超過6000多種病毒得到鑒定，其中艾滋病毒、肝炎病毒、流感病毒、嚴重急性呼吸綜合征(severeacuterespiratotysyndromes，SARS)病毒、腸道病毒EV71以及正在西非各國肆虐的高致死率的埃博拉病毒等已成為人類健康的天敵。病毒在流行初期會即會造成巨大的危害，包括人員的損傷、社會的恐慌、經(jīng)濟的波動等，給國民經(jīng)濟和社會安定造成嚴重影響。此時即便是只有微弱治療作用的防治藥物，也會對人員損傷的減少，尤其是安定社會的恐慌和經(jīng)濟波動起到難以估量的作用。而降低這種新發(fā)突發(fā)公共衛(wèi)生安全事件危害最佳的選擇，是發(fā)展廣譜性的抗病毒的藥物。病毒的繁殖離不開宿主細胞，大部分病毒進入宿主細胞主要通過網(wǎng)格蛋白介導型內吞作用(Clathrin-mediatedendocytosis，CME)、胞膜窖介導型內吞作用(Caveolin-mediatedendocytosis)、網(wǎng)格蛋白和胞膜窖非依賴型內吞作用(ClathrinandCaveolin-independentendocytosis)以及巨胞飲作用途徑(Macropinocytosis)。而CME作用是腸道病毒EV71、登革病毒、丙肝病毒等諸多病毒進入細胞的主要途徑。由于其功能和機制與病毒本身無關，不易隨病毒變異產(chǎn)生耐藥，是近年來廣譜抗病毒的潛在靶標。在CME中，網(wǎng)格蛋白、銜接蛋白與發(fā)動蛋白等都是必不可少的關鍵分子。目前病毒依賴網(wǎng)格蛋白介導型內吞作用入胞機制研究的比較清 晰，整個內吞過程大體上可以分為四個階段：1)網(wǎng)格蛋白包被小窩核化(nucleationofcla-coatedpits)：此階段需要FCHo1/2、eps15和交叉蛋白-1復合體的參與，復合體在網(wǎng)格包形成前匯集在包被小窩核的位置，通過eps15上的諸多AP-2結合位點來募集AP-2。此后，網(wǎng)格蛋白再次被AP-2募集到胞質膜表面，使得網(wǎng)格蛋白的局部濃度超過網(wǎng)格蛋白三腿復合體聚合的閾值濃度，開始進行小范圍的網(wǎng)格蛋白包被的組裝。網(wǎng)格蛋白在穩(wěn)定網(wǎng)格蛋白包被小窩形狀和牽引膜內陷是必不可少的。2)在包被小窩里被轉運體捕獲(cargocaptureincoatedpits)：病毒作為被轉運體與細胞膜表面識別病毒的特異受體結合而被捕獲和扣留。網(wǎng)格蛋白網(wǎng)格的形成觸發(fā)了銜接蛋白聯(lián)合激酶1(AAK1)，此激酶可以磷酸化AP-2的μ2亞單位，使其更加牢固地結合到膜的PIP2，暴露μ2的被轉運體結合位點。被轉運體與AP-2結合的復合物可以激活PIPKIγ，提高包被區(qū)膜的PIP2濃度，產(chǎn)生充足的與AP-2、epsin以及其他和CME有關的蛋白結合的膜位點，來維持CCP的增長。3)彎曲誘導與細胞膜內陷：膜最初的變形可能發(fā)生在網(wǎng)格蛋白包被小窩核化的階段，F(xiàn)CHo通過F-BAR結構域使細胞膜產(chǎn)生一個小的彎曲。彎曲可能需要很多膜結合蛋白及網(wǎng)格蛋白包被的介導，其中包括epsin與amphiphysin等。包被附近的細胞膜彎曲，在細胞膜表面形成增長的芽，當細胞膜內陷出芽成囊泡狀的時候，一個管狀的頸部區(qū)開始在胞膜表面形成，此區(qū)域無被網(wǎng)格蛋白包被和包含自由的PIP2，但是仍有很高的彎曲率，可以吸引含有彎曲敏感N-BAR結構域的蛋白。4)囊泡剪切和去包被(vesiclescissionanduncoating)：網(wǎng)格蛋白包被囊泡在擁有充足的彎曲度以后，發(fā)動蛋白能夠在囊泡的頸部形成一個環(huán)狀結構，通過GTP水解驅動機制產(chǎn)生向內擠壓的力量，在amphiphysin等蛋白的參加下進行剪切囊泡，被剪切的囊泡很快即被去包被。去包被機制可能是前期endophilin募集具有磷酸酶活性的突觸小泡磷酸酶到囊泡，進而破壞AP-2/PIP2之間的高親和力，使得PIP2轉化為PI(4)P，GAK/輔助蛋白(auxilin)可以通過PTEN樣結構域結 合到新形成的PI(4)P上并募集Hsc70伴侶分子到包被囊泡與AP-2及網(wǎng)格蛋白相互作用，進而完成囊泡去包被過程。失去包被的囊泡聚合或者直接地與內涵體進行融合，隨后再與溶酶體融合，內容物被降解，膜受體與病毒配體進行分離，完成整個病毒入胞的過程。因此，對網(wǎng)格蛋白進行抑制可以起到阻斷病毒內吞進程的作用，本發(fā)明的目的在于合成新型網(wǎng)格蛋白抑制劑，以用于制備預防和/或治療多種病毒引起的病毒性疾病的廣譜抗病毒藥物。技術實現(xiàn)要素：本發(fā)明的第一方面涉及式I所示化合物、其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，X為C或N原子；代表單鍵或雙鍵；R1、R2各自獨立地為氫或苯環(huán)，其中苯環(huán)任選地被1、2、3、4或5個相同或不同的R3取代，R3各自獨立地選自以下基團：氫、鹵素、羥基、烷基、鹵代烷基、烷氧基、氨基、被烷基單取代或雙取代的氨基、羧基、酰胺基、苯基，當X為C、代表雙鍵、R1為氫時，并且R3在苯環(huán)上的4位單取代時，R3不為溴原子。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明所述的式I化合物、其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中R1、R2不同時為氫。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明所述的式I化合物、其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其可 以為式Ia所示化合物，其中，X為C或N原子；代表單鍵或雙鍵；R1為氫或苯環(huán)，其中苯環(huán)任選地被1、2、3或4個相同或不同的R3取代，R3各自獨立地選自以下基團：氫、鹵素、羥基、C1-8烷基、鹵代C1-8烷基、C1-8烷氧基、氨基、被C1-8烷基單取代或雙取代的氨基、羧基、R’(C＝O)NH-、苯基，其中R’為C1-8烷基，當X為C、代表雙鍵、R1為氫時，并且R3在苯環(huán)上的4位單取代時，R3不為溴原子。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明所述的式I化合物可以為式Ib、式Ic或式Id所示化合物、或其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3為苯環(huán)上任選地存在的1、2、3或4個相同或不同的取代基，R3各自獨立地選自以下基團：氫、鹵素、羥基、C1-8烷基、鹵代C1-8烷基、C1-8烷氧基、氨基、被C1-8烷基單取代或雙取代的氨基、羧基、R’(C＝O)NH-、苯基，其中R’為C1-8烷基，當式I化合物為式Ib所示化合物、或其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物時，并且式Ib中R3在苯環(huán)上的4位單取代時，R3不為溴原子。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明所述的式I化合物可以式Ib所示化合物、或其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3為苯環(huán)上任選地存在的1、或2、3或4個相同或不同的取代基，R3各自獨立地選自以下基團：氫、鹵素、羥基、C1-8烷基、鹵代C1-8烷基、C1-8烷氧基、氨基、被C1-8烷基單取代或雙取代的氨基、羧基、R’(C＝O)NH-、苯基，其中R’為C1-8烷基，并且，當R3在苯環(huán)上的4位單取代時，R3不為溴原子。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明所述的式I化合物可以為式Ic所示化合物、或其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3為苯環(huán)上任選地存在的1、2、3或4個相同或不同的取代基，R3各自獨立地選自以下基團：氫、鹵素、羥基、C1-8烷基、鹵代C1-8烷基、C1-8烷氧基、氨基、被C1-8烷基單取代或雙取代的氨基、羧基、R’(C＝O)NH-、苯基，其中R’為C1-8烷基。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方式中，本發(fā)明所述的式I化合物可以為式Id所示化合物、或其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3為苯環(huán)上任選地存在的1、2、3或4個相同或不同的取代基，R3各自獨立地選自以下基團：氫、鹵素、羥基、C1-8烷基、鹵代C1-8烷基、C1-8烷氧基、氨基、被C1-8烷基單取代或雙取代的氨基、羧基、R’(C＝O)NH-、苯基，其中R’為C1-8烷基。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3為苯環(huán)上任選地存在的1個取代基。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3為苯環(huán)上任選地存在的2個相同或不同的取代基。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3各自獨立地選自以下基團：氫、鹵素、羥基、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基、氨基、被C1-6烷基單取代或雙取代的氨基、羧基、R’(C＝O)NH-、苯基，其中R’為C1-6烷基。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3各自獨立地選自以下基團：氫、鹵素、羥基、C1-4烷基、鹵代C1-4烷基、C1-4烷氧基、氨基、被C1-4烷基單取代或雙取代的氨基、羧基、R’(C＝O)NH-、苯基，其中R’為C1-4烷基。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3各自獨立地選自以下基團：氫、氟、氯、溴、羥基、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氨基、甲基氨基、二甲基氨基、乙基氨基、二乙基氨基、丙基氨基、羧基、CH3(C＝O)NH-、C2H5(C＝O)NH-、苯基。在本發(fā)明的另一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3各自獨立地選自以下基團：氫、氟、氯、溴、羥基、甲氧基、氨基、二乙基氨基、丙基氨基、羧基、CH3(C＝O)NH-、苯基。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3為苯環(huán)上任選地存在的1、2或3個相同或不同的取代基，R3各自獨立地選自以下基團：氫、鹵素、羥基、C1-6烷基、鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基、氨基、被C1-6烷基單取代或雙 取代的氨基、羧基、R’(C＝O)NH-、苯基，其中R’為C1-6烷基。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3為苯環(huán)上任選地存在的1或2相同或不同的取代基，R3各自獨立地選自以下基團：氫、鹵素、羥基、C1-4烷基、鹵代C1-4烷基、C1-4烷氧基、氨基、被C1-4烷基單取代或雙取代的氨基、羧基、R’(C＝O)NH-、苯基，其中R’為C1-4烷基。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3為苯環(huán)上任選地存在的1或2相同或不同的取代基，R3各自獨立地選自以下基團：氫、氟、氯、溴、羥基、甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、三氟甲基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氨基、甲基氨基、二甲基氨基、乙基氨基、二乙基氨基、丙基氨基、羧基、CH3(C＝O)NH-、C2H5(C＝O)NH-、苯基。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3為苯環(huán)上任選地存在的1或2相同或不同的取代基，R3各自獨立地選自以下基團：氫、氟、氯、溴、羥基、甲氧基、氨基、二乙基氨基、丙基氨基、羧基、CH3(C＝O)NH-、苯基。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3任選地在苯環(huán)上的3位單取代。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3任選地在苯環(huán)上的4位單取代。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的 鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3任選地在苯環(huán)上的2位單取代。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3任選地在苯環(huán)上的2、4位雙取代。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3任選地在苯環(huán)上的3、4位雙取代。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物，或者它們的消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其中，R3任選地在苯環(huán)上的2、6位雙取代。本發(fā)明中，R3在苯環(huán)上的取代位置如下所示：在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式I化合物、消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，其選自以下化合物：N-[5-(2，4-二氯苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物1)，N-[5-(3-甲氧基-4-羥基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物2)，N-[5-(2-羥基-4-二乙氨基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物3)，N-[5-(4-氯苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物4)，N-[5-(4-羧基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物5)，N-[5-(3-羥基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物6)，N-[5-(3-羥基-4-甲氧基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物7)，N-[5-(3-溴-4-羥基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物8)，N-[5-(2，6-二甲氧基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物9)，N-[5-(2-氯-4-氟苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物10)，N-[5-聯(lián)苯亞甲基-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物11)，N-[5-(4-乙酰氨基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物12)，N-(5-苯氨基-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基)萘-1-磺酰胺(化合物13)，N-[5-(1-苯基-4-溴苯次甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物14)。本發(fā)明第一方面所述的式I所示化合物可以根據(jù)需要采用常規(guī)的合成路線制備。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式Ib化合物、其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物可示例性地通過下面的反應路線制備：例如，以式i所示2-亞氨基-4(5H)-噻唑啉酮為起始原料，在加入三乙胺的四氫呋喃中與1-萘磺酰氯縮合生成式ii化合物，式ii化合物在含有哌啶催化劑的乙醇溶液中與式iii化合物縮合生成式Ib化合物，式iii化合物為任選被R3單取代或多取代苯甲醛，其中R3的定義如本發(fā)明第一方面所述。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式Ic化合物、其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物可示例性地通過下 面的反應路線制備：例如，以式ii化合物為原料，式ii化合物在含有氯仿和乙酸乙酯的混合液中，加入鹵化銅(優(yōu)選溴化銅)反應生成式iv化合物，式iv化合物在碳酸鉀的DMF溶液中與式v所示的苯胺反應生成式Ic化合物，式v化合物為任選被R3單取代或多取代苯胺，其中R3的定義如本發(fā)明第一方面，式iv中Hal為鹵素(優(yōu)選為Br)。在本發(fā)明的一個優(yōu)選的實施方式中，式Id化合物、其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物可示例性地通過下面的反應路線制備：例如，可以以式Ib化合物為原料，將式Ib化合物加入到無水四氫呋喃中，加入催化量的氯化亞銅，零下20℃下，滴加式vi化合物反應生成式Id化合物，其中R3的定義如本發(fā)明第一方面所述，式vi中X為鹵素(優(yōu)選為Br)。本發(fā)明的第二方面涉及藥物組合物，其中至少包括本發(fā)明第一方面任一項所述的式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物、其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物，以及一種或多種藥學上可接受的載體或賦形劑。本發(fā)明的第三方面涉及本發(fā)明第一方面任一項所述的式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物、消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物或者本發(fā)明第三方面所述的藥物組合物在 制備用于治療和/或預防與病毒感染有關的疾病或病癥的藥物中的用途。其中所述的病毒感染包括但不限于：鼻病毒、腸道病毒、心臟病毒、肝炎病毒、流感病毒、SARS病毒、埃博拉病毒、出血熱病毒、人類免疫缺陷性病毒等病毒引起的感染。其中所述的與病毒感染有關的疾病或病癥選自呼吸系統(tǒng)疾病(包括但不限于：普通感冒(例如夏季感冒)、咽炎、扁桃腺炎和義膜性喉炎)、消化系統(tǒng)疾病、出血熱疾病、腦膜炎/腦炎、免疫缺陷性疾病、肝炎等。本發(fā)明第四方面涉及本發(fā)明第一方面任一項所述的式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物、其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物或者本發(fā)明第三方面所述的藥物組合物，所述化合物、其消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物或者所述的藥物組合物用于治療和/或預防與病毒感染有關的疾病或病癥。其中所述的病毒感染包括但不限于：鼻病毒、腸道病毒、心臟病毒、肝炎病毒、流感病毒、SARS病毒、埃博拉病毒、出血熱病毒、人類免疫缺陷性病毒等病毒引起的感染。其中所述的與病毒感染有關的疾病或病癥選自呼吸系統(tǒng)疾病(包括但不限于：普通感冒(例如夏季感冒)、咽炎、扁桃腺炎和義膜性喉炎)、消化系統(tǒng)疾病、出血熱疾病、腦膜炎/腦炎、免疫缺陷性疾病、肝炎等。本發(fā)明第五方面涉及治療和/或預防與病毒感染有關的疾病或病癥的方法，所述方法包括給予需要這種治療的患者治療有效量的至少一種本發(fā)明第一方面任一項所述的式I、式Ia、式Ib、式Ic或式Id所示化合物、消旋體或旋光異構體、其藥學可接受的鹽、溶劑合物、水合物。其中所述的病毒感染包括但不限于：鼻病毒、腸道病毒、心臟病毒、肝炎病毒、流感病毒、SARS病毒、埃博拉病毒、出血熱病毒、人類免疫缺陷性病毒等病毒引起的感染。其中所述的與病毒感染有關的疾病或病癥選自呼吸系統(tǒng)疾病(包括但不限于：普通感冒(例如夏季感冒)、咽炎、扁桃腺炎和義膜性喉炎)、消化系統(tǒng)疾病、出血熱疾病、腦膜炎/腦炎、免疫缺陷性疾病、肝炎等。本發(fā)明任一方面或該任一方面的任一子方面所具有的特征同樣適 用于其它任一方面或該其它任一方面的任一子方面。在本發(fā)明中，例如，提及“本發(fā)明第一方面”時，該“任一子方面”是指本發(fā)明第一方面的任一子方面，在其它方面以類似方式提及時，亦具有相同含義。下面對本發(fā)明的各個方面和特點作進一步的描述。本發(fā)明所引述的所有文獻，它們的全部內容通過引用并入本文，并且如果這些文獻所表達的含義與本發(fā)明不一致時，以本發(fā)明的表述為準。此外，本發(fā)明使用的各種術語和短語具有本領域技術人員公知的一般含義，即便如此，本發(fā)明仍然希望在此對這些術語和短語作更詳盡的說明和解釋，提及的術語和短語如有與公知含義不一致的，以本發(fā)明所表述的含義為準。如本文所述的，術語“藥學可接受的”例如在描述“藥學可接受的鹽”時，表示該鹽其不但是受試者生理學上可接受，而且還可指在藥學上有使用價值的合成物質。本文中使用的術語“烷基”是指飽和的直鏈或支鏈一價烴基，優(yōu)選具有1-12個碳原子，進一步優(yōu)選具有1-10，1-8，1-6，1-4或1-3個碳原子。術語“C1-8烷基”是指具有指定數(shù)目碳原子數(shù)的烷基，其為直鏈或支鏈的烷基，并且其可包括其子基團，例如C1-6烷基、C1-4烷基、C1-3烷基、C1-2烷基、C2-5烷基、C2-4烷基等?！巴榛钡牡湫蛯嵗ǖ幌抻诩谆?，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，異丁基，仲丁基、叔丁基，正戊基，叔戊基，新戊基，己基，庚基，辛基等。如本文所述的，術語“鹵素”、“鹵素原子”、“鹵代”等表示氟、氯、溴或碘，特別是表示氟、氯或溴。本文中使用的術語“氨基”意指-NH2。本文中使用的術語“羥基”意指-OH。本文中使用的術語“羧基”意指-C(O)OH。本文所用的術語“鹵代烷基”意指被鹵素例如氟，氯，溴或碘單或多取代的烷基。優(yōu)選的鹵代烷基為氯甲基、氯乙基、二氯乙基、三氟甲基、二氟甲基、單氟甲基等。本文所用的術語“烷氧基”意指基團-OR”，其中R”為如本文所定 義的烷基?！巴檠趸钡牡湫蛯嵗ǖ幌抻诩籽趸?，乙氧基，正丙氧基，異丙氧基，正丁氧基，異丁氧基，叔丁氧基，仲丁氧基，正戊氧基，正己氧基，1，2-二甲基丁氧基等。上述本文各個術語所限定的基團還可以任選地被-CN、-OH、-NH2、C1-4烷基、C1-4烷氧基或鹵素單或多取代。本文中使用的術語“酰氨基”意指基團R’(C＝O)NH-，其中R’為本文所定義的烷基，優(yōu)選為C1-8烷基?！磅０被钡牡湫蛯嵗ǖ幌抻诩柞０被?，乙酰氨基。本文中使用的化合物名稱與化學結構式不一致時，以化學結構式為準。如本文所述的，術語“有效量”是指可在受試者中實現(xiàn)治療和/或預防本發(fā)明所述疾病或病癥的劑量。如本文所述的，術語“藥物組合物”，其還可以是指“組合物”，其可用于在受試者特別是哺乳動物中實現(xiàn)治療和/或預防本發(fā)明所述疾病或病癥。如本文所述的，術語“受試者”可以指患者或者其它接受本發(fā)明式I化合物或其藥物組合物以治療和/或預防本發(fā)明所述疾病或病癥的動物，特別是哺乳動物，例如人、狗、喉、牛、馬等。如本文所述的，如未特別指明，“％”是指重量/重量的百分比，特別是在描述固體物質的情況下。當然，在描述液體物質時，該“％”可以指重量/體積的百分比(對于固體溶于液體的情形)，或者可以指體積/體積百分比(對于液體溶于液體的情形)。本發(fā)明中，所述的病毒感染包括但不限于：鼻病毒、腸道病毒、心臟病毒、肝炎病毒、流感病毒、SARS病毒、埃博拉病毒、出血熱病毒、人類免疫缺陷性病毒(艾滋病毒)等病毒引起的感染。本發(fā)明中，所述的與病毒感染有關的疾病或病癥選自呼吸系統(tǒng)疾病(包括但不限于：普通感冒(例如夏季感冒)、咽炎、扁桃腺炎和義膜性喉炎)、消化系統(tǒng)疾病、出血熱疾病、腦膜炎/腦炎、免疫缺陷性疾病、 肝炎等。在本發(fā)明的一個實施方案中，涉及預防和/或治療包括鼻病毒、腸道病毒、艾滋病毒、肝炎病毒、流感病毒、SARS病毒、埃博拉病毒、出血熱病毒等病毒感染有關疾病的藥物，其包括將預防和/或治療有效量的至少一種式I化合物或其藥用鹽或其水合物給予需要預防和/或治療包括鼻病毒、腸道病毒、艾滋病毒、肝炎病毒、流感病毒、SARS病毒、埃博拉病毒、出血熱病毒等病毒感染有關的疾病的患者。本發(fā)明化合物是一類新型的廣譜抗病毒抑制劑，該類化合物的突出特點是既可治療鼻病毒、腸道病毒、艾滋病毒、肝炎病毒、流感病毒、SARS病毒、埃博拉病毒、出血熱病毒等病毒引起的疾病。所述病毒引起的疾病包括但不限于：呼吸系統(tǒng)疾病、消化系統(tǒng)疾病、出血熱疾病、腦膜炎/腦炎、免疫缺陷性疾病、肝炎等。所述呼吸病癥包括但不限于：普通感冒(夏季感冒)，咽炎，扁桃腺炎，和義膜性喉炎。根據(jù)本發(fā)明，本發(fā)明化合物的藥用組合物可以以下面的任意方式施用：口服、噴霧吸入、直腸用藥、鼻腔用藥、頰部用藥、陰道用藥、局部用藥、非腸道用藥如皮下、靜脈、肌內、腹膜內、鞘內、心室內、胸骨內和顱內注射或輸入、或借助一種外植儲器用藥。其中優(yōu)選口服、腹膜內或靜脈內用藥方式。另外，為使本發(fā)明化合物有效治療神經(jīng)中樞神經(jīng)體統(tǒng)紊亂病癥，可優(yōu)選心室內途徑用藥以克服化合物可能低的血腦屏障透過率。當口服用藥時，本發(fā)明化合物可制成任意口服可接受的制劑形式，包括但不限于片劑、膠囊、水溶液或水懸浮液。其中，片劑一般使用的載體包括乳糖和玉米淀粉，另外也可加入潤滑劑如硬質酸鎂。膠囊制劑一般使用的稀釋劑包括乳糖和干燥玉米淀粉。水懸浮液制劑則通常是將活性成分與適宜的乳化劑和懸浮劑混合使用。如果需要，以上口服制劑形式中還可加入一些甜味劑、芳香劑或著色劑。當直腸用藥時，本發(fā)明化合物一般可制成栓劑的形式，其通過將藥物與一種適宜的非刺激性賦形劑混合而制得。該賦形劑在室溫下呈現(xiàn)固 體狀態(tài)，而在直腸溫度下熔化釋出藥物。該類賦形劑包括可可脂、蜂蠟和聚乙二醇。當局部用藥時，特別是治療局部外敷容易達到的患面或器官，如眼睛、皮膚或下腸道神經(jīng)性疾病時，本發(fā)明化合物可根據(jù)不同的患面或器官制成不同的局部用藥制劑形式，具體說明如下：當眼部局部施用時，本發(fā)明化合物可配制成一種微粉化懸浮液或溶液的制劑形式，所使用載體為等滲的一定pH的無菌鹽水，其中可加入也可不加防腐劑如氯化芐基烷醇鹽。此外對于眼用，也可將化合物制成膏劑形式如凡士林膏。當皮膚局部施用時，本發(fā)明化合物可制成適當?shù)能浉唷⑾磩┗蛩獎┲苿┬问?，其中活性成分懸浮或溶解于一種或多種載體中。這里軟膏即可使用的載體包括但不限于：礦物油、液體凡士林、白凡士林、丙二醇、聚氧化乙烯、聚氧化丙烯、乳化蠟和水；洗劑或霜劑可使用的載體包括但不限于：礦物油、脫水山梨糖醇單硬脂酸酯、吐溫60、十六烷酯蠟、十六碳烯芳醇、2-辛基十二烷醇、芐醇和水。當下腸道局部施用時，本發(fā)明化合物可制成如上所述的直腸栓劑制劑或適宜的灌腸制劑形式，另外也可使用局部透皮貼劑。本發(fā)明化合物還可以無菌注射制劑形式用藥，包括無菌注射水或油懸浮液，或無菌注射溶液。其中，可使用的載體和溶劑包括水，林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。另外，滅菌的非揮發(fā)油也可用作溶劑或懸浮介質，如單甘油酯或二甘油酯。另外需要指出，本發(fā)明化合物針對不同患者的特定使用劑量和使用方法決定于諸多因素，包括患者的年齡，體重，性別，自然健康狀況，營養(yǎng)狀況，化合物的活性強度，服用時間，代謝速率，病癥的嚴重程度以及診治醫(yī)師的主觀判斷。這里優(yōu)選使用劑量介于0.01-100mg/kg體重/天。具體實施方式通過下面的實施例和試驗例可以對本發(fā)明進行進一步的描述。然而， 本發(fā)明的范圍并不限于下述實施例或試驗例。本領域的專業(yè)人員能夠理解，在不背離本發(fā)明的精神和范圍的前提下，可以對本發(fā)明進行各種變化和修飾。本發(fā)明對試驗中所使用到的材料以及試驗方法進行一般性和/或具體的描述。雖然為實現(xiàn)本發(fā)明目的所使用的許多材料和操作方法是本領域公知的，但是本發(fā)明仍然在此作盡可能詳細描述。對于以下全部實施例，可以使用本領域技術人員已知的標準操作和純化方法。除非另有說明，所有溫度以℃(攝氏度)表示?；衔锏慕Y構是通過核磁共振(NMR)或質譜(MS)來確定的。化合物熔點m.p.由RY-1型熔點儀測定，溫度計未經(jīng)校正，m.p.是以℃給出。1HNMR由日本電子JNM-ECA-400型核磁共振儀測定。質譜由API3000(ESI)型質譜儀測定。所有反應用溶劑未注明都經(jīng)標準化預處理。實施例1N-[5-(2，4-二氯苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺的合成(化合物1)1.1N-(4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基)萘-1-磺酰胺的合成將1-萘磺酰氯(30.95g，0.14mol)、2-亞氨基-4(5H)-噻唑啉酮(16.00g，0.14mol)和三乙胺(40ml)加入到四氫呋喃(800ml)中，加熱至回流，反應過夜。將反應液冷卻，加入乙酸乙酯(1500ml)，用水洗三次，得有機層，用無水硫酸鈉干燥，過濾，濃縮殘余物用硅膠柱層析純化，得黃褐色固體，干燥稱重10.70g，收率25％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：12.54(s，1H)，8.60(d，1H)，8.29-8.23(dd，2H)，8.10(d，1H，)，7.71-7.67(m，3H)，4.04(s，2H)。ESI-MS(m/z)：307.3[M+H]+。1.2N-[5-(2，4-二氯苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物1)的合成將化合物N-(4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基)萘-1-磺酰胺(0.31g，1.0mmol)、2，4-二氯苯甲醛(0.21g，1.2mmol)和乙醇(20ml)加入到反應瓶中，攪拌下加入2滴哌啶，回流反應8h，冷卻過濾，濾餅用丙酮、乙醚洗滌，得黃色固體0.27g，收率63.0％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：8.59(d，1H)，8.30(d，1H)，8.28(d，1H)，8.12(d，1H，)， 7.89(s，1H)，7.79-7.68(m，6H)，7.34(s，1H)。ESI-MS(m/z)：461.0[M-H]-。實施例2N-[5-(3-甲氧基-4-羥基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物2)的合成按上述實施例1中1.2的方法，將反應物中的2，4-二氯苯甲醛用3-甲氧基-4-羥基苯甲醛替換，得黃色固體0.25g，收率56.8％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：10.13(s，1H)，8.60(d，1H)，8.30(dd，2H)，8.12(d，1H)，7.73-7.69(m，4H)，7.27(m，1H)，7.18(m，1H)，7.00(m，1H)，4.04(s，3H)。ESI-MS(m/z)：439.0[M-H]-。實施例3N-[5-(2-羥基-4-二乙氨基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物3)的合成按上述實施例1中1.2的方法，將反應物中的2，4-二氯苯甲醛用2-羥基-4-二乙氨基苯甲醛替換，得紅色固體0.25g，收率51.9％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：12.76(s，1H)，10.42(s，1H)，8.60(d，1H)，8.30(dd，2H)，8.11(d，1H)，7.91(s，1H)，7.70(m，3H)，7.26(d，1H)，6.49(m，1H)，6.20(s，1H)，3.38(q，4H)，1.14(t，6H)。ESI-MS(m/z)：480.1[M-H]-。實施例4N-[5-(4-氯苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物4)的合成按上述實施例1中1.2的合成方法，將反應物中的2，4-二氯苯甲醛用4-氯苯甲醛替換，得黃色固體0.27g，收率62.9％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：8.70(d，1H)，8.18(d，1H)，8.12(d，1H)，8.00(d，1H)，7.63-7.55(m，8H)，7.34(s，1H)。ESI-MS(m/z)：427.0[M-H]-。實施例5N-[5-(4-羧基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物5)的合成按上述實施例1中1.2的合成方法，將反應物中的2，4-二氯苯甲醛用4-羧基苯甲醛替換，得黃色固體0.25g，收率57.1％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：8.60(d，1H)，8.30(d，2H)，8.12(m，2H)，8.10(s，1H)，7.81-7.67(m，6H)。ESI-MS(m/z)：437.0[M-H]-。實施例6N-[5-(3-羥基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1- 磺酰胺(化合物6)的合成按上述實施例1中1.2的合成方法，將反應物中的2，4-二氯苯甲醛用3-羥基苯甲醛替換，得黃色固體0.24g，收率58.5％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：10.01(s，1H)，8.60(d，1H)，8.31(dd，2H)，8.12(d，1H)，7.78-7.67(m，4H)，7.37(m，1H)，7.12(m，2H)，6.93(m，1H)。ESI-MS(m/z)：409.0[M-H]-。實施例7N-[5-(3-羥基-4-甲氧基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物7)的合成按上述實施例1中1.2的合成方法，將反應物中的2，4-二氯苯甲醛用3-羥基-4-甲氧基苯甲醛替換，得黃色固體0.25g，收率56.8％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：13.06(brs，1H)，9.73(s，1H)，8.59(d，1H)，8.30(d，2H)，8.12(d，1H)，7.77-7.69(m，3H)，7.63(s，1H)，7.16-7.12(m，3H)，3.86(s，3H)。ESI-MS(m/z)：439.0[M-H]-。實施例8N-[5-(3-溴-4-羥基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物8)的合成按上述實施例1中1.2的合成方法，將反應物中的2，4-二氯苯甲醛用3-溴-4-羥基苯甲醛替換，得黃色固體0.26g，收率53.1％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：11.05(brs，1H)，8.67(d，1H)，8.22(m，3H)，8.07(d，1H)，7.71-7.64(m，4H)，7.44(m，2H)，7.12(d，1H)。ESI-MS(m/z)：488.9[M-H]-。實施例9N-[5-(2，6-二甲氧基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物9)的合成按上述實施例1中1.2的合成方法，將反應物中的2，4-二氯苯甲醛用2，6-二甲氧基苯甲醛替換，得黃色固體0.27g，收率59.4％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：8.60(d，1H)，8.30(m，2H)，8.12(m，2H)，7.77-7.68(m，3H)，7.30(m，1H)，6.78(d，1H)，6.74(d，1H)，3.87(s，3H)，3.75(s，3H)。ESI-MS(m/z)：453.1[M-H]-。實施例10N-[5-(2-氯-4-氟苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物10)的合成按上述實施例1中1.2的合成方法，將反應物中的2，4-二氯苯甲醛用2-氯-4-氟苯甲醛替換，得黃色固體0.25g，收率56.0％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：8.70(d，1H)，8.16(m，3H)，8.02(d，1H)，7.66-7.60(m，4H)，7.52(m，1H)，7.40(m，1H)。ESI-MS(m/z)：445.0[M-H]-。實施例11N-[5-聯(lián)苯亞甲基-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物11)的合成按上述實施例1中1.2的合成方法，將反應物中的2，4-二氯苯甲醛用聯(lián)苯甲醛替換，得紅黃色固體0.28g，收率60.2％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：8.61(d，1H，J＝8.1Hz)，8.31(m，2H)，8.12(d，1H，J＝8.1Hz)，7.92(d，2H，J＝8.4Hz)，7.83(s，1H)，7.80-7.70(m，7H)，7.54-7.42(m，3H)。ESI-MS(m/z)：469.1[M-H]-。實施例12N-[5-(4-乙酰氨基苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物12)的合成按上述實施例1中1.2的合成方法，將反應物中的2，4-二氯苯甲醛用4-乙酰氨基苯甲醛替換，得黃色固體0.26g，收率57.6％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：10.28(s，1H)，8.64(d，1H，J＝8.4Hz)，8.27(d，1H，J＝7.3Hz)，8.22(d，1H，J＝8.2Hz)，7.77-7.53(m，8H)，2.90(s，3H，CH3)。ESI-MS(m/z)：450.1[M-H]-。實施例13N-(5-苯氨基-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基)萘-1-磺酰胺(化合物13)的合成13.1N-(5-溴-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基)萘-1-磺酰胺的合成將化合物N-(4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基)萘-1-磺酰胺(6.10g，20.0mmol)加入到氯仿和乙酸乙酯(體積比1∶1)的混合液(300ml)中，加熱至回流，再加入溴化酮(9.5g，42.0mmol)，回流反應過夜。反應結束后，趁熱過濾，濾液濃縮，殘留物經(jīng)硅膠柱色譜分離(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇(體積比9∶1))，得白色固體2.15g，收率28.1％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：8.61(d，1H)，8.28(dd，2H)，8.12(d，1H)，7.73(m，3H)，5.95(s，1H)；ESI-MS(m/z)：384.9[M-H]-。13.2N-(5-苯氨基-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基)萘-1-磺酰胺(化合 物13)的合成將化合物N-(5-溴-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基)萘-1-磺酰胺(0.77g，2.0mmol)、苯胺(0.19g，2.0mmol)和碳酸鉀(0.55g，4.0mmol)加入到DMF(15ml)中，室溫攪拌反應2天后，加水(30ml)，用二氯甲烷(30ml)提取三次，合并有機層用無水硫酸鈉干燥，過濾，濾液減壓除去溶劑，得油狀物，加乙酸乙酯攪拌，析出固體粗品，再經(jīng)硅膠柱色譜分離(洗脫劑：二氯甲烷/甲醇(體積比8∶1))，得黃色色固體0.15g，收率18.9％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：12.29(brs，1H)，8.56(d，1H)，8.27(d，1H)，8.23(d，1H)，8.10(d，1H)，7.70(m，3H)，7.18(m，2H)，7.00(d，1H)，6.79(m，1H)，6.53(d，2H)，6.38(d，1H)；ESI-MS(m/z)：396.0[M-H]-。實施例14N-[5-(1-苯基-4-溴苯次甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺(化合物14)的合成將化合物N-[5-(4-溴苯亞甲基)-4-氧代-4，5-二氫噻唑-2-基]萘-1-磺酰胺加入四氫呋喃(15ml)中，加催化量的氯化亞銅，零下20℃下，滴加1.0mol/L苯基溴化鎂四氫呋喃溶液2ml，滴加完畢后反應4小時后，升至室溫，加入冰水淬滅反應，用二氯甲烷提取，得有機層干燥，過濾，濃縮，殘留物再經(jīng)硅膠柱色譜分離純化，得黃色固體0.15g，收率13.6％。1H-NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：12.06(brs，1H)，8.48(d，1H)，8.31(d，1H)，8.18(m，2H)，7.70(m，3H)，7.48(m，1H)，7.31-7.13(m，7H)，7.20(m，1H)，5.56(m，1H)，4.83(m，1H)。ESI-MS(m/z)：551.0[M-H]-。實施例1-14制備的化合物1-14以及陽性對照藥pitstop2的化學名稱及結構式如下表所示。實施例15本發(fā)明化合物在體外模型上的抗病毒活性15.1測試項目：化合物抗腸道病毒EV71活性篩選測試原理：分別以Vero細胞、MRC-5細胞、RD細胞為病毒宿主，測定樣品抑制病毒引起細胞病變程度(CPE)。1.病毒株：腸道病毒EV71(深圳98株中國疾病預防控制中心提供)Vero細胞、MRC-5細胞、RD細胞培養(yǎng)(中國科學院細胞庫提供)傳 代，-80℃保存。2.樣品處理化合物1-14樣品溶于DMSO或稀釋液配成母液，母液-20℃保存，臨用前用培養(yǎng)液配成適宜初始濃度，再用培養(yǎng)液作3倍稀釋，各8個稀釋度。3.陽性對照藥：Con1(pitstop2)(購自英國艾美捷科技有限公司，Abcam)，廣譜抗病毒抑制劑。4.測試方法：治療作用：細胞接種96孔培養(yǎng)板，置5％CO2，37℃培養(yǎng)24小時。細胞分別加入約100TCID50腸道病毒EV71，37℃吸附1小時后棄病毒液，分別加入不同稀釋度藥物。設病毒對照和細胞對照，37℃培養(yǎng)，待病毒對照組病變程度(CPE)達4+時觀察各組細胞病變程度(CPE)，計算各樣品對腸道病毒EV71的半數(shù)抑制濃度(IC50)。預防作用：細胞接種96孔培養(yǎng)板，置5％CO2，37℃培養(yǎng)24小時。細胞分別加入不同稀釋度藥物，37℃培養(yǎng)2小時后棄去藥物，加入約100TCID50腸道病毒EV71，37℃吸附1.5小時后棄病毒液，換上不含藥物的維持液，設病毒對照和細胞對照，37℃培養(yǎng)，待病毒對照組病變程度(CPE)達4+時觀察各組細胞病變程度(CPE)，計算各樣品對腸道病毒EV71的半數(shù)抑制濃度(IC50)。陽性對照藥Con1與實施例中化合物1-14活性篩選數(shù)據(jù)見下表：治療作用的活性篩選數(shù)據(jù)見表1-1至表1-3，預防作用的活性篩選數(shù)據(jù)見表2-1至表2-2。表1-1目標化合物抗EV71活性(Vero細胞的治療作用)測定結果表1-2目標化合物抗EV71活性(MRC-5細胞的治療作用)測定結果表1-3目標化合物的抗EV71活性(RD細胞的治療作用)測定結果表2-1目標化合物抗EV71活性(Vero細胞的預防作用)測定結果表2-2目標化合物抗EV71活性(RD細胞的預防作用)測定結果注：表1-1至表1-3、表2-1至表2-2中(1)“-”表示樣品在最大無毒劑量無抗病毒活性；(2)TC50：藥物半數(shù)有毒濃度；IC50：藥物對病毒半數(shù)抑制濃度；SI：選擇指數(shù)，SI＝TC50/IC50。15.2測試項目：化合物抑制網(wǎng)格蛋白內吞作用的活性評價1.實驗原理：轉鐵蛋白是網(wǎng)格蛋白介導的內吞作用的關鍵蛋白。因此測定化合物對HeLa細胞中轉鐵蛋白的影響來評價化合物對網(wǎng)格蛋白介導的內吞作用的活性作用。2.樣品處理：化合物1-14樣品溶于DMSO或稀釋液配成母液，母液-20℃保存，臨用前用培養(yǎng)液配成適宜初始濃度，再用培養(yǎng)液作3倍稀釋，各10個稀釋度。4.測試方法：HeLa細胞(中國科學院細胞庫提供)接種于含有0.1毫克/毫升的多聚賴氨酸的24孔培養(yǎng)板中，然后無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)一 夜。2.5-30μmol/L受試化合物或0.1v/v％二甲基亞砜(DMSO)預處理15min，隨后加入20μg/mlalexa568轉鐵蛋白(Transferrin，TF，SIGMA-ALDRICH公司)，細胞37℃孵育15分鐘。然后用活細胞成像溶液(LCIS，Invitrogen公司)和低pH值酸洗滌(含有0.5％乙酸的0.5MNaCl溶液)依次各洗30s，隨后用冷的甲醇固定，在熒光顯微鏡下觀察。5.實驗結果測試了五種化合物，包括化合物3、10、13、14和pitstop2(Con1)對HeLa細胞轉鐵蛋白內化作用的影響。當HeLa細胞暴露在Alexa568轉鐵蛋白中時能高效地內化轉鐵蛋白到核周回收內涵體。而化合物3、10、14和pitstop2表現(xiàn)出抑制轉鐵蛋白的內化作用，且作用效果呈劑量依賴性。當20μM的化合物3、10、14作用于細胞后，HeLa細胞的轉鐵蛋白內化作用被完全抑制，抑制率見表3。表320μM的化合物對網(wǎng)格蛋白調節(jié)的轉鐵蛋白內吞的抑制作用化合物編號抑制率3100％10100％1350％14100％Con150％當前第1頁1 2 3