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植物抗逆性相關蛋白TabZIP14及其編碼基因與應用的制作方法

文檔序號:12608795閱讀:583來源:國知局
植物抗逆性相關蛋白TabZIP14及其編碼基因與應用的制作方法與工藝
本發(fā)明屬于植物基因工程領域,涉及一種植物抗逆性相關蛋白TabZIP14及其編碼基因與應用。
背景技術
:非生物脅迫是影響作物生長發(fā)育和產量的主要因素之一,開發(fā)和利用抗逆品種在鹽堿地和缺水地區(qū)顯得尤為重要。最近幾年,在提高植物抗逆性的基因方面取得一些進展。轉錄因子也是響應植物非生物脅迫逆境的關鍵調節(jié)因子,而且過表達一些轉錄因子基因可以提高植物的抗逆性。bZIP就是存在于植物中的一種轉錄因子。在逆境脅迫下植物體內會產生一系列應答反應,伴隨著許多生理生化及發(fā)育上的變化。明確植物對逆境的反應機制,將為抗逆基因工程研究和應用提供科學論據。目前,植物抗逆性研究已逐漸深入到細胞、分子水平,并與遺傳學和遺傳工程研究相結合,探索用生物技術來改進植物生長特性,其目的是提高植物對逆境的適應能力。因此,利用現代分子生物技術,挖掘抗逆關鍵基因,通過基因工程改良植物特別是農作物的抗逆性,對于保障國家糧食安全具有重要意義。技術實現要素:本發(fā)明的目的是提供一種植物抗逆性相關蛋白TabZIP14及其編碼基因與應用。本發(fā)明所提供的TabZIP14蛋白來源于小麥(TriticumaestivumL.)品種中國春,具體可為如下(a)或(b):(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質;(b)將序列1的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加,且與植物抗逆性相關的由序列1衍生的蛋白質。為了便于上述(a)中所示蛋白質的純化,可在由序列表中序列1的氨基酸殘基序列組成的蛋白質的氨基末端或羧基末端連接上如下表所示的標簽。表:標簽的序列標簽殘基序列Poly-Arg5-6(通常為5個)RRRRRPoly-His2-10(通常為6個)HHHHHHFLAG8DYKDDDDKStrep-tagII8WSHPQFEKc-myc10EQKLISEEDL上述(b)中的蛋白質可人工合成,也可先合成其編碼基因,再進行生物表達得到。上述(b)中的蛋白質的編碼基因可通過將序列表中序列2所示的DNA序列中缺失一個或幾個氨基酸殘基的密碼子,和/或進行一個或幾個堿基對的錯義突變。編碼所述蛋白質的核酸分子也屬于本發(fā)明的保護范圍。所述核酸分子可以是DNA,如cDNA、基因組DNA或重組DNA;所述核酸分子也可以是RNA,如mRNA、hnRNA或tRNA等。在本發(fā)明的一個實施例中,所述核酸分子具體為編碼所述蛋白質的基因,所述基因具體可為如下1)-4)中任一的DNA分子:1)序列表中序列2所示的DNA分子;2)序列表中序列2的第181-1383位所示的DNA分子;3)在嚴格條件下與1)或2)限定的DNA分子雜交且編碼抗逆性相關蛋白的DNA分子;4)與1)-3)中任一限定的DNA序列具有90%以上同一性,且編碼抗逆性相關蛋白的DNA分子。其中,序列2由1576個核苷酸組成,第181-1383位為ORF,編碼序列表中序列1所示的蛋白質。含有上述核酸分子的重組載體、表達盒、轉基因細胞系或重組微生物也屬于本發(fā)明的保護范圍。所述重組載體可為重組表達載體,也可為重組克隆載體。所述重組表達載體可用現有的植物表達載體構建。所述植物表達載體包括雙元農桿菌載體和可用于植物微彈轟擊的載體等,如pGreen0029、pCAMBIA3301、pCAMBIA1300、pBI121、pBin19、pCAMBIA2301、pCAMBIA1301-UbiN或其它衍生植物表達載體。所述植物表達載體還可包含外源基因的3’端非翻譯區(qū)域,即包含聚腺苷酸信號和任何其它參與mRNA加工或基因表達的DNA片段。所述聚腺苷酸信號可引導聚腺苷酸加入到mRNA前體的3’端。使用所述基因構建重組表達載體時,在其轉錄起始核苷酸前可加上任何一種增強型、組成型、組織特異型或誘導型啟動子,例如花椰菜花葉病毒(CAMV)35S啟動子、泛素基因Ubiquitin啟動子(pUbi)、脅迫誘導型啟動子rd29A等,它們可單獨使用或與其它的植物啟動子結合使用;此外,使用本發(fā)明的基因構建重組表達載體時,還可使用增強子,包括翻譯增強子或轉錄增強子,這些增強子區(qū)域可以是ATG起始密碼子或鄰接區(qū)域起始密碼子等,但必需與編碼序列的閱讀框相同,以保證整個序列的正確翻譯。所述翻譯控制信號和起始密碼子的來源是廣泛的,可以是天然的,也可以是合成的。翻譯起始區(qū)域可以來自轉錄起始區(qū)域或結構基因。為了便于對轉基因植物細胞或植物進行鑒定及篩選,可對所用重組表達載 體進行加工,如加入可在植物中表達的編碼可產生顏色變化的酶或發(fā)光化合物的基因、具有抗性的抗生素標記物或是抗化學試劑標記基因等。也可不加任何選擇性標記基因,直接以逆境篩選轉化植株。在本發(fā)明中,所述重組表達載體中啟動所述基因轉錄的啟動子具體為35S啟動子。進一步,所述重組表達載體為將pEarleyGate100載體的attR1和attR2之間的小片段替換為所述基因后得到的重組質粒。更加具體的,所述重組表達載體是將所述基因(序列2的第181-1383位)通過BP反應重組到入門載體上,得到入門質粒;再將入門質粒與目標載體通過LR反應得到的目的重組質粒;所述入門載體具體為pDONR/Zeo(該載體具體為invitrogen公司產品,產品目錄號為12535-035);所述目標載體具體為pEarleyGate100(該載體具體為自invitrogen公司產品);所述pEarleyGate100在文獻“ZhangL,ZhangL,XiaC,ZhaoG,LiuJ,JiaJ,KongX.AnovelwheatbZIPtranscriptionfactor,TabZIP60,confersmultipleabioticstresstolerancesintransgenicArabidopsis.PhysiolPlant.2015,153(4):538-554.”中公開過。所述表達盒由能夠啟動所述基因表達的啟動子,所述基因,以及轉錄終止序列組成。所述轉基因細胞系為轉入所述基因的非繁殖材料。所述蛋白質或所述核酸分子或所述重組載體、表達盒、轉基因細胞系或重組微生物在如下任一中的應用也屬于本發(fā)明的保護范圍:(a)調控植物抗逆性;(b)選育抗逆性提高的植物品種。在(a)中,所述調控植物的抗逆性具體體現在:在所述植物體內,若所述基因或所述蛋白的表達量越高,則所述植物的抗逆性越強;若所述基因或所述蛋白的表達量越低,則所述植物的抗逆性越弱。在(b)中,所述選育抗逆性增強的植物品種的方法,具體可包括將所述基因或所述蛋白表達量較高的植株作為親本進行雜交的步驟。本發(fā)明還提供了一種培育抗逆性提高的轉基因植物的方法。本發(fā)明所提供的培育抗逆性提高的轉基因植物的方法,具體可包括如下(a1)和(a2)的步驟:(a1)向受體植物中導入所述蛋白質的編碼基因,得到表達所述編碼基因的轉基因植物;(a2)從步驟(a1)所得轉基因植物中得到與所述受體植物相比,抗逆性提高的轉基因植物。所述蛋白質在所述轉基因植物中的表達量高于所述受體植物;編碼所述蛋白質的基因是如下1)-4)中任一的DNA分子:1)序列表中序列2所示的DNA分子;2)序列表中序列2的第181-1383位所示的DNA分子;3)在嚴格條件下與1)或2)限定的DNA分子雜交且編碼抗逆性相關蛋白的DNA分子;4)與1)-3)中任一限定的DNA序列具有90%以上同一性,且編碼抗逆性相關蛋白的DNA分子。所述基因具體可通過上述任一所述重組表達載體導入所述受體植物中,得到所述轉基因植物。具體可通過使用Ti質粒、Ri質粒、植物病毒載體、直接DNA轉化、顯微注射、電導、農桿菌介導、基因槍等常規(guī)生物學方法將所述重組表達載體轉化植物細胞或組織,并將轉化的植物組織培育成植株。在本發(fā)明中,所述基因是通過重組農桿菌導入的,所述重組農桿菌是將所述重組表達載體導入農桿菌得到的;所述農桿菌具體為農桿菌GV3101-pMP90,該菌在文獻“XuZ,KimS,HyeonD,KimD,etal.TheArabidopsisthalianaNACtranscriptionfactorfamily:structure–functionrelationshipsanddeterminantsofANAC019stresssignaling.Biochem.J.2010,426:183-196.”中公開過。在上述應用或方法中,所述抗逆性為如下中的至少一種:抗凍性、抗鹽性。在本發(fā)明中,所述抗凍性中的“凍”具體體現為-10℃處理3h。在本發(fā)明中,所述抗鹽性中的“鹽”具體體現為150-200mMNaCl處理。在上述應用或方法中,所述植物可為雙子葉植物,也可為單子葉植物。如:小麥、煙草或擬南芥等。在本發(fā)明中,所述植物為擬南芥,具體為擬南芥Columbia-0亞型。實驗證明,將可表達序列表中序列2所示DNA分子(TabZIP14基因)的重組表達載體轉化擬南芥得到的轉基因植株,與相同條件下的野生型植株相比:在抗凍性實驗(-10℃處理3h)中,野生型植株的存活率為16%,轉TabZIP14基因的株系的存活率為79%。在抗鹽實驗中,150mMNaCl處理后,野生型擬南芥的根長明顯受到抑制,T3代轉TabZIP14基因擬南芥L1、L2和L3株系的根長分別是野生型植株根長的1.4倍、1.3倍和1.4倍,部分野生型的擬南芥葉子呈現白化現象,白化率為37%±0.5%,而T3代轉TabZIP14基因擬南芥葉片全部保持綠色;200mMNaCl處理后,T3代轉TabZIP14基因擬南芥L1、L2和L3株系的根長比分別是野生型植株根長的1.2倍、1.3倍和1.3倍,野生型植株的葉片幾乎全部呈白化現象,白化率為98%±0.4%,而T3代轉TabZIP14基因擬南芥葉片基本呈現綠色狀態(tài)。以上結果說明轉TabZIP14基因擬南 芥的抗鹽性明顯提高。本發(fā)明所提供的TabZIP14蛋白及其編碼基因在提高植物抗逆性方面具有重要意義,將在培育高抗逆性如強抗凍性和強抗鹽性植物品種中發(fā)揮重要作用。附圖說明圖1為PEG脅迫下小麥TabZIP14基因的相對表達量。圖2為鹽脅迫下小麥TabZIP14基因的相對表達量。圖3為低溫脅迫下小麥TabZIP14基因的相對表達量。圖4為ABA脅迫下小麥TabZIP14基因的相對表達量。圖5為T3代轉TabZIP14基因擬南芥的RNA水平鑒定結果。圖6為低溫脅迫下擬南芥的表型。圖7為鹽脅迫下擬南芥的表型。具體實施方式下述實施例中所使用的實驗方法如無特殊說明,均為常規(guī)方法。下述實施例中所用的材料、試劑等,如無特殊說明,均可從商業(yè)途徑得到。KOD-Plus高保真酶:TOYOBO公司產品,產品目錄號為KOD-201。入門載體pDONR/Zeo:invitrogen公司產品,產品目錄號為12535-035。BPClonaseTMⅡEnzymeMix:invitrogen公司產品,產品目錄號為11789-013。目標載體pEarleyGate100:在文獻“ZhangL,ZhangL,XiaC,ZhaoG,LiuJ,JiaJ,KongX.AnovelwheatbZIPtranscriptionfactor,TabZIP60,confersmultipleabioticstresstolerancesintransgenicArabidopsis.PhysiolPlant.2015,153(4):538-554.”中公開過,公眾可從中國農業(yè)科學院作物科學研究所獲得。LRClonaseTMⅡEnzymeMix:invitrogen公司產品,產品目錄號為11791-019。農桿菌GV3101-pMP90:在文獻“XuZ,KimS,HyeonD,KimD,etal.TheArabidopsisthalianaNACtranscriptionfactorfamily:structure–functionrelationshipsanddeterminantsofANAC019stresssignaling.Biochem.J.2010,426:183-196.”中公開過,公眾可從中國農業(yè)科學院作物科學研究所獲得。擬南芥(Arabidopsisthaliana)(Columbia-0亞型):在文獻“HeY,LiW,LvJ,JiaY,WangMandXiaG.EctopicexpressionofawheatMYBtranscriptionfactorgene,TaMYB73,improvessalinitystresstoleranceinArabidopsisthaliana.JExpBot,2012,63(3):1511–1522.”中公開過,公眾可從中國農業(yè)科學院作物科學研究所獲得。中國春小麥(ChineseSpringWheat):在文獻“KobayashiaF,MaetaaE,TerashimaaA,TakumS.PositiveroleofawheatHvABI5orthologinabioticstressresponseofseedlings.PhysiolPlant,2008,134:74–86.”中公開過,公眾可從中國農業(yè)科學院作物 科學研究所獲得。實施例1、TabZIP14蛋白及其編碼基因的發(fā)現為了研究小麥bZIP基因在植物抗逆方面的功能,通過生物信息學的方法,從發(fā)明人所在實驗室已經測序的30000條非冗余的小麥全長cDNA序列中篩選出22個編碼小麥bZIP蛋白的基因。通過半定量PCR的方法,對該22個小麥bZIP基因在逆境條件下的表達模式進行研究,篩選出受逆境誘導表達的TabZIP14基因。TabZIP14基因全長cDNA為1576bp,序列如序列表中序列2所示。其開放閱讀框為序列2的自5’末端起第181-1383位核苷酸,編碼序列表中序列1所示的TabZIP14蛋白,序列1共由400個氨基酸殘基組成。實施例2、TabZIP14基因在不同逆境脅迫下的轉錄水平表達模式一、TabZIP14基因在PEG脅迫下的表達模式對兩葉一心期的中國春小麥幼苗置于16.1g/100ml的PEG6000水溶液中進行處理,分別在處理前(0h)、處理后1、3、6、12、24和48小時提取小麥幼苗根組織的RNA,反轉錄成cDNA,以其cDNA為模板,以上游引物1和下游引物2為引物,進行實時定量PCR分析,得到TabZIP14基因的相對表達量,內參是小麥Tubulin基因。用于檢測TabZIP14基因的引物如下:上游引物1:5’-CGGCTTGCTGATGTTAATC-3’;下游引物2:5’-TCGCTTGTGGAGAAGTAAG-3’。用于檢測內參Tubulin基因的引物如下:Tubulin-F:5’-TTAGACTTGCGAAGCCAGCA-3’;Tubulin-R:5’-AAATGCCCTTGAGGTTTCCC-3’。結果如圖1所示,由圖可見TabZIP14基因響應PEG脅迫誘導。二、TabZIP14基因在鹽脅迫下的表達模式對兩葉一心期的中國春小麥幼苗置于250mMNaCl水溶液中進行處理,分別在處理前(0h)、處理后1、3、6、12、24和48小時提取小麥幼苗根組織的RNA,反轉錄成cDNA,以其cDNA為模板,以上游引物1和下游引物2為引物,進行實時定量PCR分析,得到TabZIP14基因的相對表達量,內參是小麥Tubulin基因。具體引物序列參見步驟一。結果如圖2所示,由圖可見TabZIP14基因響應鹽脅迫誘導。三、TabZIP14基因在低溫脅迫下的表達模式對兩葉一心期的中國春小麥幼苗置于4℃處理,分別在處理前(0h)、處理后1、3、6、12、24和48小時提取小麥幼苗葉子組織的RNA,反轉錄成cDNA,以其cDNA為模板,進行實時定量PCR分析,得到TabZIP14基因的相對表達量,內參是小麥Tubulin基因。具體引物序列參見步驟一。結果如圖3所示,由圖可見TabZIP14基因響應低溫脅迫誘導。四、TabZIP14基因在ABA脅迫下的表達模式對兩葉一心期的中國春小麥幼苗置于200μMABA水溶液中進行處理,分別在處理前(0h)、處理后1、3、6、12、24和48小時提取小麥幼苗根組織的RNA,反轉錄成cDNA,以其cDNA為模板,以上游引物1和下游引物2為引物,進行實時定量PCR分析,得到TabZIP14基因的相對表達量,內參是小麥Tubulin基因。具體引物序列參見步驟一。結果如圖4所示,由圖可見TabZIP14基因響應ABA誘導表達。實施例3、轉TabZIP14基因植株的獲得和耐逆性鑒定一、利用Gateway技術構建過表達載體1、attB引物設計上游引物3:5’-GCATGGAGCGCGGCGTCTTC-3’下游引物4:5’-CTACGAGGTCGATCCGGATG-3’2、根據Gateway技術構建表達載體的需要,在上游引物3和下游引物4的5'端分別加入attB1和attB2重組位點(下劃線標注部分為attB1和attB2重組位點),分別得到上游引物5和下游引物6。上游引物5:5’-GGGGACAAGTTTGTACAAAAAAGCAGGCTGCATGGAGCGCGGCGTCTTC-3’下游引物6:5’-GGGGACCACTTTGTACAAGAAAGCTGGGTCTACGAGGTCGATCCGGATG-3’3、以中國春小麥的cDNA為模板,用上游引物5和下游引物6進行PCR擴增,得到attBPCR產物,為保證PCR過程的保真性,使用KOD-Plus高保真酶進行PCR反應,PCR反應體系和反應程序如下:4、按照如下體系和程序進行BP重組反應,得到BP反應產物:5、入門質粒的獲得將2.5μlBP反應產物加入50μlTOP10感受態(tài)細胞進行轉化,冰浴30min,42℃熱擊90s,然后迅速置于冰上2min。加入500μlLB培養(yǎng)液,37℃,210rpm/min復蘇50min,復蘇液均勻涂布于加有Zeocin(濃度為40μg/ml)的固體LB選擇培養(yǎng)基表面,37℃倒置培養(yǎng)過夜。pDONRTM/Zeo載體自身帶有致死基因,不能在培養(yǎng)基上生存。通過步驟4的BP重組反應目標基因片段會取代致死基因,最終得到的克隆即為入門克隆(entryclone),質粒為入門質粒,將入門質粒送測序,結果正確。6、按照如下體系和程序進行LR重組反應,得到LR反應產物:7、目標質粒的獲得轉化過程同步驟5,只是將zeocin替換為卡那霉素(濃度為50μg/ml)。pEarleyGate100載體同樣帶有致死基因,通過LR重組反應致死基因將會被目標基因片段取代,得到的克隆即為目標克隆(destinationclone),質粒為目標質粒,將目標質粒命名為pEarleyGate100-TabZIP14。pEarleyGate100-TabZIP14的測序結果表明pEarleyGate100-TabZIP14含有序列表中序列2的第181-1383位所示DNA片段。pEarleyGate100-TabZIP14為TabZIP14基因表達載體,啟動子是花椰菜花葉病毒35S啟動子。二、轉TabZIP14基因擬南芥的獲得1、將步驟一獲得的目標質粒轉化農桿菌GV3101-pMP90,得到重組農桿菌。2、擬南芥侵染及轉基因植株篩選及鑒定(1)擬南芥的培養(yǎng)將擬南芥(Arabidopsisthaliana)(Columbia-0亞型)種子用滅菌水(含有體積百分含量為10%次氯酸鈉以及10%吐溫-20的水溶液)搖動消毒15min,在超凈工作臺中用滅菌水清洗上述消毒的種子至少5次。將清洗完的種子均勻播種在MS培養(yǎng)基上。MS平板于4℃春化3d,然后置于22℃光照培養(yǎng)箱培養(yǎng)一周。待小苗長出四片真葉后移栽至營養(yǎng)缽中培養(yǎng),保濕2-3d。擬南芥的生長對溫度比較敏感,20-22℃為比較適宜的培養(yǎng)溫度。當擬南芥植株生長至大部分花蕾處于即將開花狀態(tài)時,進行農桿菌侵染。(2)擬南芥的侵染采用沾花法用步驟1所得的重組農桿菌對步驟(1)得到的擬南芥進行侵染,將侵染過的擬南芥平放于托盤中,黑暗保濕培養(yǎng)24h,然后放于正常培養(yǎng)條件下培養(yǎng)。擬南芥侵染1周后根據擬南芥的生長狀態(tài)可再次侵染以提高轉化效率,得到轉TabZIP14基因擬南芥。(3)陽性轉TabZIP14基因擬南芥的初步篩選①收集轉TabZIP14基因擬南芥T0代種子,于37℃烘箱中烘干(6-8d),然后4℃春化3d。②將種子直接撒播在營養(yǎng)缽中,22℃保濕培養(yǎng)1周。③待小苗長出4片真葉后,通過噴灑除草劑(basta)進行陽性轉TabZIP14基因擬南芥篩選,非陽性轉TabZIP14基因擬南芥在噴灑3天后開始出現萎蔫并停止生長,2周后基本死亡。為了將非陽性轉TabZIP14基因擬南芥苗徹底除凈,可連續(xù)噴灑2-3次,每次間隔2-3d。(4)陽性轉TabZIP14基因擬南芥的鑒定A.DNA水平鑒定CTAB法提取步驟(3)初步篩選獲得的陽性轉TabZIP14基因擬南芥葉片的基因組DNA,以其為模板,以TabZIP14基因特異性的正向引物7和反向引物8進行PCR擴增,得到PCR擴增產物,將PCR擴增產物進行瓊脂糖凝膠電泳。正向引物7:5’-CAGAAGATGATGATATGGAAGG-3’;反向引物8:5’-TCGCTTGTGGAGAAGTAAG-3’。電泳結果表明,步驟(3)初步篩選獲得的陽性轉TabZIP14基因擬南芥在PCR擴增之后有約445bp的目的條帶,進一步確定為轉TabZIP14基因擬南芥。將野生型擬南芥進行上述鑒定實驗無目的條帶。用上述方法進行鑒定,直至獲得T3代純合轉TabZIP14基因擬南芥(以下簡稱 T3代轉TabZIP14基因擬南芥),從所得T3代轉TabZIP14基因擬南芥中隨機選取3各株系,記為L1、L2和L3。B.RNA水平鑒定對basta除草劑篩選獲得的T3代純合轉基因植株,隨機選取三株,提取總RNA,并進行第一鏈cDNA的合成,以上游引物1和下游引物2為引物,進行實時定量PCR分析,得到TabZIP14基因的相對表達量,內參是小麥Tubulin基因。具體引物序列參見實施例2步驟一。結果顯示:轉TabZIP14基因的T3代純合植株,利用RT-qPCR檢測,結果表明其純合株系L1,L2和L3中TabZIP14基因的表達比較相近??梢岳^續(xù)后續(xù)功能鑒定。轉TabZIP14基因的L1、L2和L3株系的RNA水平鑒定結果具體如圖5所示。三、轉TabZIP14基因擬南芥的抗逆鑒定1、抗凍性分析將野生型擬南芥(WT)以及三個T3代轉TabZIP14基因擬南芥(L1,L2,L3)的種子在22℃,12h光照下進行培養(yǎng),得到3周幼苗,然后將各幼苗在-10℃處理3小時,再恢復培養(yǎng)4天。觀察各組擬南芥冷處理前后的幼苗生長狀態(tài)并統(tǒng)計其存活率。實驗重復三次,每次重復每個株系12株。冷處理前后的各幼苗的生長狀態(tài)如圖6所示,由圖可以看出,與野生型擬南芥相比,轉TabZIP14基因擬南芥的抗凍性明顯提高??箖鎏幚砗?,野生型植株的存活率為16%,轉TabZIP14的株系存活率為79%(L1、L2和L3這三個株系的存活率均值)。2、抗鹽性分析將野生型擬南芥(WT)以及三個T3代轉TabZIP14基因擬南芥(L1,L2,L3)的種子在22℃,12h光照下進行垂直培養(yǎng),得到5天幼苗,將各幼苗轉移到含150和200mMNaCl的MS培養(yǎng)基上垂直培養(yǎng),并分別以在不含NaCl的MS培養(yǎng)基上垂直培養(yǎng)得到的幼苗為對照。觀察各組擬南芥幼苗生長狀態(tài)并統(tǒng)計植株根長和植株白化率(鹽脅迫處理后有白化葉片的植株株數與鹽脅迫處理前植株株數之比)。實驗重復三次,每次重復每個株系8株。各組擬南芥幼苗的狀態(tài)如圖7所示,由圖可以看出,150mMNaCl處理后,野生型擬南芥的根長明顯受到抑制,T3代轉TabZIP14基因擬南芥L1、L2和L3株系的根長分別是野生型植株根長的1.4倍、1.3倍和1.4倍。部分野生型的擬南芥葉子呈現白化現象,白化率為37%±0.5%。而T3代轉TabZIP14基因擬南芥葉片全部保持綠色。200mMNaCl處理后,T3代轉TabZIP14基因擬南芥L1、L2和L3株系的根長比分別是野生型植株根長的1.2倍、1.3倍和1.3倍。野生型植株的葉片幾乎全部呈現白化現在,白化率為98%±0.4%;而T3代轉TabZIP14基因擬南芥葉片基本呈現綠色狀態(tài)。 以上結果說明轉TabZIP14基因擬南芥的抗鹽性明顯提高。當前第1頁1 2 3 
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