本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域,涉及一種檢測(cè)試劑,具體涉及一種腺苷脫氨酶檢測(cè)試劑。
背景技術(shù):
腺苷脫氨酶(ADA)是一種與機(jī)體細(xì)胞免疫活性有重要關(guān)系的核酸代謝酶。測(cè)定血液、體液中的ADA及其同工酶水平對(duì)某些疾病的診斷、鑒別診斷、治療及免疫功能的研究日趨受到臨床重視。ADA活性是反映肝損傷的敏感指標(biāo),可作為肝功能常規(guī)檢查項(xiàng)目之一,與ALT或GGT等組成肝酶譜能較全面地反映肝臟病的酶學(xué)改變。
近十幾年來(lái),隨著對(duì)ADA的深入研究,檢測(cè)方法也不斷發(fā)展。目前已發(fā)展了四代。對(duì)于第一代ADA測(cè)試方法,由于高底物濃度造成吸光度過高,該法僅適用于腺苷濃度低于40μM。如此低的底物濃度達(dá)不到底物飽和要求,造成ADA活性檢測(cè)失真。因此,該法不適用于臨床應(yīng)用。對(duì)于第二代ADA測(cè)試方法,所需試劑易配制,儀器簡(jiǎn)單,但靈敏度低,易受外源性NH3影響,空白過高,不能直接測(cè)定紅細(xì)胞ADA活性。同樣原因,對(duì)于ADA偶聯(lián)谷氨酸脫氫酶(Glutamate Dehydrogenase,GLDH)反應(yīng)方法來(lái)說,其是通過測(cè)量340nm處NADPH吸光度下降的速度來(lái)測(cè)算ADA活性。該法也因血清含氨干擾,以及測(cè)試系統(tǒng)中過高NADPH造成非特異性氧化而無(wú)成算。對(duì)于第三代ADA測(cè)試方法,在293nm時(shí)血清吸光度太高,造成臨床應(yīng)用不便。第四代ADA測(cè)試該法克服了以往ADA測(cè)試的困難,然而,鑒于試劑成本高,阻礙了實(shí)際臨床使用。
鑒于現(xiàn)有技術(shù)的上述技術(shù)缺陷,迫切需要研制一種新型的腺苷脫氨酶測(cè)試方法。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的缺點(diǎn),提供一種腺苷脫氨酶檢測(cè)試劑,該檢測(cè)試劑具有測(cè)定精密度高、抗干擾能力強(qiáng)、適合自動(dòng)化快速測(cè)定。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:一種腺苷脫氨酶檢測(cè)試劑,該檢測(cè)試劑的組成為:嘌呤核苷磷酸化酶6-10u/L;甘氨酸緩沖液20-40mmol/L;甘露醇20-30mmol/L;苯甲酸鈉20-40mmol/L;黃嘌呤氧化酶10-20u/L;乙二胺四乙酸二鈉0.05g/L;甘油醛10-20g/L;疊氮鈉0.3g/L;磷酸氫二鈉20-100mmol/L;過氧化物酶50-100u/L;KCl 80-90mmol/L;N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺鈉鹽2mmol/L;防腐劑0.4-0.5ml/L;腺苷80-95mmol/I;4-氨基替比林5-8mmol/L;顯色劑20-30mmol/L;腺嘌呤核苷50-70mmol/L;牛血清白蛋白6-8g/L;聚乙二醇6000 0.3g/L。
與現(xiàn)有的腺苷脫氨酶測(cè)試方法相比,本發(fā)明的腺苷脫氨酶檢測(cè)試劑具有如下有益技術(shù)效果:
1、其顯色效果好,反應(yīng)迅速、穩(wěn)定,因此,測(cè)定精密度高、抗干擾能力強(qiáng)。
2、其使用方便。
3、其試劑穩(wěn)定、易存儲(chǔ)、保質(zhì)期長(zhǎng)。
4、其價(jià)格低、能減輕患者負(fù)擔(dān)、便于推廣應(yīng)用。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)一步說明,實(shí)施例的內(nèi)容不作為對(duì)本發(fā)明的保護(hù)范圍的限制。
實(shí)施例1
該實(shí)施例的腺苷脫氨酶檢測(cè)試劑的組成為:嘌呤核苷磷酸化酶6u/L;甘氨酸緩沖液20mmol/L;甘露醇20mmol/L;苯甲酸鈉20mmol/L;黃嘌呤氧化酶10u/L;乙二胺四乙酸二鈉0.05g/L;甘油醛10g/L;疊氮鈉0.3g/L;磷酸氫二鈉20mmol/L;過氧化物酶50u/L; KCl 80mmol/L;N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺鈉鹽2mmol/L;防腐劑0.4ml/L;腺苷80mmol/L;4-氨基替比林5mmol/L;顯色劑20mmol/L;腺嘌呤核苷50mmol/L;牛血清白蛋白6g/L;聚乙二醇60000.3g/L。
實(shí)施例2
該實(shí)施例的腺苷脫氨酶檢測(cè)試劑的組成為:嘌呤核苷磷酸化酶10u/L;甘氨酸緩沖液40mmol/L;甘露醇30mmol/L;苯甲酸鈉40mmol/L;黃嘌呤氧化酶20u/L;乙二胺四乙酸二鈉0.05g/L;甘油醛20g/L;疊氮鈉0.3g/L;磷酸氫二鈉100mmol/L;過氧化物酶100u/L;KCl 90mmol/L;N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺鈉鹽2mmol/L;防腐劑0.5ml/L;腺苷95mmol/L;4-氨基替比林8mmol/L;顯色劑30mmol/L;腺嘌呤核苷70mmol/L;牛血清白蛋白8g/L;聚乙二醇6000 0.3g/L。
實(shí)施例3
該實(shí)施例的腺苷脫氨酶檢測(cè)試劑的組成為:嘌呤核苷磷酸化酶8u/L;甘氨酸緩沖液30mmol/L;甘露醇25mmol/L;苯甲酸鈉30mmol/L;黃嘌呤氧化酶15u/L;乙二胺四乙酸二鈉0.05g/L;甘油醛15g/L;疊氮鈉0.3g/L;磷酸氫二鈉60mmol/L;過氧化物酶80u/L;KCl 85mmol/L;N-乙基-N-(2-羥基-3-磺丙基)-3-甲基苯胺鈉鹽2mmol/L;防腐劑0.45ml/L;腺苷88mmol/L;4-氨基替比林7mmol/L;顯色劑25mmol/L;腺嘌呤核苷60mmol/L;牛血清白蛋白7g/L;聚乙二醇6000 0.3g/L。
采用本發(fā)明的腺苷脫氨酶檢測(cè)試劑對(duì)病人進(jìn)行測(cè)試實(shí)驗(yàn),發(fā)現(xiàn):與現(xiàn)有的測(cè)試試劑相比,其測(cè)試速度更快、準(zhǔn)確度更高、顯示更清晰,且易存儲(chǔ)、保質(zhì)期長(zhǎng);而且,抗干擾能力強(qiáng)、更穩(wěn)定。
本發(fā)明的上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說明本發(fā)明所作的舉例,而并非是對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式的限定。對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái) 說,在上述說明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)。這里無(wú)法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉。凡是屬于本發(fā)明的技術(shù)方案所引伸出的顯而易見的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之列。