本發(fā)明涉及一種化合物，其為p38有絲分裂原活化蛋白質(zhì)激酶家族例如其α和γ激酶亞型及酪氨酸激酶的Src家族的抑制劑(本文中稱為p38MAP激酶抑制劑)，還涉及其治療的用途，包括用于藥物組合，尤其是治療炎性疾病，特別是肺部的炎性疾病，如哮喘及COPD，以及胃腸道的炎性疾病，如潰瘍性結(jié)腸炎、易激性腸病(IBD)及克羅恩氏病及眼睛的炎性疾病，如葡萄膜炎。
背景技術(shù)：
：四種p38MAPK同工型(分別為α，β，γ及δ)，業(yè)經(jīng)證實(shí)各自于人類展現(xiàn)不同的組織表達(dá)形式。該p38MAPKα及β同工型經(jīng)發(fā)現(xiàn)于身體內(nèi)無(wú)所不在，存在于許多不同類型的細(xì)胞中。該α同工型的顯著特征在于其在炎癥中的作用。雖然使用在小鼠中的化學(xué)遺傳學(xué)方法的研究顯示，該p38MAPKβ同工型未于炎癥中起作用(O’Keefe,S.J.etal.,J.Biol.Chem.,2007,282(48),34663-71)，但它可能經(jīng)由調(diào)節(jié)COX2的表達(dá)而參與疼痛機(jī)制(Fitzsimmons，B.L.etal.,Neuroreport,2010,21(4),313-7)。這些同工型被很多先前描述的小分子量化合物抑制。早期的抑制劑種類毒性大，這是由于這些同工型的廣泛組織分布造成的，導(dǎo)致了該化合物的多種脫靶效應(yīng)。再者，由于在臨床研究中不可接受的安全特性，相當(dāng)數(shù)量抑制劑的開(kāi)發(fā)業(yè)已中止(Pettus,L.H.及Wurz,R.P.,Curr.Top.Med.Chem.,2008,8(16),1452-67)。由于這些不利的影響隨化學(xué)類型而變化，且該化合物具有獨(dú)特的激酶選擇性模式，觀察到的毒性可以是結(jié)構(gòu)相關(guān)的，而不是以p38的機(jī)制為基礎(chǔ)的。最近，已經(jīng)開(kāi)發(fā)對(duì)于p38α/βMAPK具有較大功效及特異性的化合物；然而，當(dāng)治療慢性炎性疾病，包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(SCIO-469,Genoveseetal.,J.Rheumatol.,2011,38,846-54；Pamapimod,Cohenetal.,ArthritisRheum.,2009,60,335-344；BMS-582949,Schievenetal.,ArthritisRheum.,2010,62,Suppl.10：1513)及COPD(Losmapimod,Watzetal.,LancetResp.Med.,2014,2,63-72)，所達(dá)到的功效水平一直令人失望。再者，值得注意的是，發(fā)現(xiàn)p38MAPK抑制劑于一周的治療后提供給IBD患者的益處沒(méi)有持續(xù)經(jīng)歷四周的治療期(BIRB-796,Schreiber,S.etal.,Clin.Gastro.Hepatology,2006,4,325-334)。從這些研究中得到的重要結(jié)論是，使用靶標(biāo)特異性的激酶抑制劑可能不足以在復(fù)雜的炎性疾病中達(dá)到并維持治療效益，這種情況下，多個(gè)免疫炎性通路的異常調(diào)節(jié)及生物適應(yīng)可規(guī)避單一靶標(biāo)機(jī)制的封鎖，從而導(dǎo)致反應(yīng)損失?？梢赃@樣說(shuō)，對(duì)于復(fù)雜的炎性疾病如COPD，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎及IBD，靶向?qū)τ谡{(diào)節(jié)與病理相關(guān)的不同的免疫炎性機(jī)制關(guān)鍵的一組激酶的抑制劑將有更大的潛力以達(dá)到功效及持續(xù)治療的反應(yīng)。p38MAPK-α在調(diào)節(jié)炎性途徑中的作用已被廣泛研究，并良好建立。關(guān)于p38MAPKγ及δ同工型了解較少，不同于α及β同工酶，γ及δ同工型在特定的組織及細(xì)胞中表達(dá)。該p38MAPK-δ同工型在胰腺、睪丸、肺部、小腸和腎臟中表達(dá)更多。其也富含于巨噬細(xì)胞并可在嗜中性粒細(xì)胞、CD4+T細(xì)胞及內(nèi)皮細(xì)胞中檢測(cè)到(Shmueli，O.etal.,ComptesRendusBiologies,2003,326(10-11),1067-1072；Smith,S.J.Br.J.Pharmacol.,2006，149,393-404；Hale,K.K.,J.Immunol.,1999,162(7),4246-52；Wang,X.S.etal.,J.Biol.Chem.,1997,272(38),23668-23674)。對(duì)于p38MAPKγ的分布所知甚少，盡管它在腦部、骨骼肌及心臟，以及于淋巴細(xì)胞及巨噬細(xì)胞中表達(dá)更多(Shmueli,O.etal.,ComptesRendusBiologies,2003,326(10-11),1067-1072；Hale,K.K.,J.Immunol.,1999,162(7),4246-52；Court,N.W.etal.,J.Mol.Cell.Cardiol.,2002,34(4),413-26；Mertens,S.etal.,FEBSLett.,1996,383(3),273-6)。證據(jù)顯示，p38MAPK-γ及P38MAPK-δ激酶在免疫重要且促炎性細(xì)胞類型中表達(dá)，這引起了對(duì)于它們相對(duì)于P38MAPK-α的功能的興趣。目前沒(méi)有p38MAPKγ及p38MAPKδ的選擇性小分子抑制劑用于藥理上評(píng)估這些激酶的作用，盡管以前公開(kāi)的一個(gè)化合物，BIRB796，已知具有泛同工型抑制活性。于較高的化合物濃度時(shí)觀察到p38MAPKγ及δ同工型的抑制，所述濃度高于抑制p38MAPKα及p38β所需的濃度(Kuma,Y.,J.Biol.Chem.,2005,280,19472-19479)。此外，BIRB796還通過(guò)上游激酶MKK6或MKK4損害p38MAPK或JNK的磷酸化。Kuma討論了以下可能性，抑制劑結(jié)合至MAPK蛋白質(zhì)所造成的構(gòu)象改變可以影響其磷酸化位置及上游活化劑的?？课恢脙烧叩慕Y(jié)構(gòu)，從而損害p38MAPK或JNK的磷酸化。p38MAP激酶被認(rèn)為在許多信號(hào)通路中起到舉足輕重的作用，所述信號(hào)通路參與引起及維持人類疾病中(例如，嚴(yán)重哮喘中及COPD中)的慢性、持續(xù)性炎癥(Chung,F.,Chest,2011,139(6),1470-1479)?，F(xiàn)有大量的文獻(xiàn)證明p38MAP激酶由一系列促炎性細(xì)胞因子來(lái)活化，且其活化造成額外促炎性細(xì)胞因子的募集及釋放。例如，Smith說(shuō)明p38MAP激酶抑制劑對(duì)于人類PBMC的TNFα釋放的抑制功效。然而，由吸煙者及戒煙者分離出來(lái)的肺部組織巨噬細(xì)胞生成某些細(xì)胞因子(IL-8及GM-CSF)對(duì)于p38α/βMAPK抑制劑相對(duì)不敏感，且Smith建議，表達(dá)于這些細(xì)胞的大量p38MAPK-δ可以解釋該化合物削弱的功效(Smithetal.,Br.J.Pharmacol.,2006,149,393-404)。Risco等，(Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.,2012,109,11200-11205)使用p38MAPK-γ及p38MAPK-δ基因敲除小鼠來(lái)研究這些p38同工型在調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞的細(xì)胞因子生成的通路中的作用。這些研究證明，在小鼠中，兩種激酶都是包括促炎性細(xì)胞因子生成的先天免疫炎性反應(yīng)所必須。更近的，Criado，G.等，(ArthritisRheum.,2014,66(5),1208-17)證明了，在炎性關(guān)節(jié)炎小鼠模型中，與正常對(duì)照小鼠相比，p38γ/δ-/-小鼠的疾病嚴(yán)重性降低與較少細(xì)胞因子生成及免疫激活有關(guān)聯(lián)，表示p38MAPKγ及p38MAPKδ為炎性關(guān)節(jié)病理學(xué)的重要調(diào)節(jié)劑。這些結(jié)果顯示，除了p38MAPKα，p38MAPKγ及p38MAPKδ為復(fù)雜疾病的潛在治療標(biāo)靶，所述復(fù)雜疾病涉及先天及適應(yīng)性免疫反應(yīng)，如COPD。使用p38MAP激酶抑制劑治療慢性阻塞性肺病(COPD)也已被研究。靶向p38MAPKα/β的小分子抑制劑已被證明可有效降低得自COPD患者(其通常為皮質(zhì)類固醇不敏感)的細(xì)胞及組織中(Smith,S.J.,Br.J.Pharmacol.,2006,149,393-404)以及多種體內(nèi)動(dòng)物模型中(Underwood,D.C.etal.,Am.J.Physiol.,2000,279,L895-902；Nath,P.etal.,Eur.J.Pharmacol.,2006,544,160-167)的多種炎性參數(shù)。Irusen及其同事也提及由于細(xì)胞核中降低的糖皮質(zhì)激素受體(GR)的結(jié)合親和力，p38MAPKα/β可能與皮質(zhì)類固醇不敏感性有關(guān)(Irusen,E.etal.,J.AllergyClin.Immunol.,2002,109,649-657)。一系列p38MAP激酶抑制劑的臨床經(jīng)驗(yàn)，包括AMG548、BIRB796、VX702、SCIO469及SCIO323已被描述(Lee,M.R.andDominguez,C.,CurrentMed.Chem.,2005,12,2979-2994)。COPD病況中，潛在的炎癥據(jù)報(bào)實(shí)質(zhì)上對(duì)于吸入式皮質(zhì)類固醇的抗炎性功效具有抗性。因此，治療COPD的較佳策略是開(kāi)發(fā)出干預(yù)作用，其同時(shí)具有固有的抗炎性功效及提高COPD患者肺部組織對(duì)于吸入的皮質(zhì)類固醇的敏感性的能力。最近，Mercado的公開(kāi)(Mercado,N.,etal.,Mol.Pharmacol.,2011,80(6),1128-1135)證實(shí)，沉默p38MAPK-γ具有恢復(fù)對(duì)于皮質(zhì)類固醇敏感性的潛力。P38MAPKα(Mercado,N.etal.,PLoSONE,2012,7(7),e41582,1-9)及JNK(Papietal.,J.AllergyClin.Immunol.,2013,132,1075-1085)已被報(bào)導(dǎo)具有調(diào)節(jié)皮質(zhì)類固醇不敏感性的作用，且Armstrong等(JPET,2011,338,732-740)已表明混合的p38同工型抑制劑BIRB-796及皮質(zhì)類固醇地塞米松對(duì)于COPD肺泡巨噬細(xì)胞具有協(xié)同的抗炎作用。因此，使用較少p38α-特異性的MAP激酶抑制劑以治療COPD及嚴(yán)重哮喘時(shí)，可能對(duì)患者有益。許多被診斷罹患哮喘或罹患COPD的患者繼續(xù)經(jīng)受不受控制的癥狀及可能由于住院治療而導(dǎo)致的其醫(yī)療狀況的惡化。盡管使用最先進(jìn)的目前可用的治療方案，包括吸入性皮質(zhì)類固醇及長(zhǎng)效β-激動(dòng)劑的組合產(chǎn)品，這種情況仍發(fā)生。在過(guò)去十年中累積的數(shù)據(jù)顯示，未能有效管理肺部疾病的潛在炎性組分是病情加重的最可能的原因。鑒于皮質(zhì)類固醇作為抗炎性劑的確定功效及，特別是，吸入式皮質(zhì)類固醇在治療哮喘中的確定功效，這些發(fā)現(xiàn)引起了深入的研究。所得到的研究證實(shí)，某些環(huán)境刺激引起患者肺部的對(duì)皮質(zhì)類固醇不敏感的炎性改變。例如起因于病毒介導(dǎo)的上呼吸道感染(URTI)的反應(yīng)，其對(duì)于增加哮喘及COPD相關(guān)發(fā)病率特別重要。流行病學(xué)研究揭露上呼吸道的病毒感染與已診斷罹患慢性呼吸道疾病的患者的大比例的病情加重之間有很強(qiáng)的關(guān)聯(lián)性。一些在這方面最引人注目的數(shù)據(jù)來(lái)源于罹患哮喘的兒童的縱向研究(Papadopoulos，N.G.etal.,Paediatr.Respir.Rev.,2004，5(3)，255-260)。多種額外的研究所支持的結(jié)論是病毒感染可促進(jìn)病情加重且提高疾病的嚴(yán)重性。例如已報(bào)道鼻病毒實(shí)驗(yàn)性臨床感染造成哮喘患者對(duì)組胺的支氣管過(guò)度反應(yīng)，該哮喘患者對(duì)于皮質(zhì)類固醇治療無(wú)反應(yīng)(Grunberg,K.,etal.,Am.J.Respir.Crit.CareMed.,2001,164(10),1816-1822)。更多的證據(jù)來(lái)源于罹患囊性纖維化的患者病情加重與HRV感染之間所觀察到的關(guān)聯(lián)性(Wat,D.etal.,J.Cyst.Fibros.,2008,7,320-328)。與該主體數(shù)據(jù)一致的另外發(fā)現(xiàn)是呼吸道病毒感染，包括鼻病毒，代表獨(dú)立的風(fēng)險(xiǎn)因子，其與小兒肺移植接受者的12月存活率為負(fù)相關(guān)(Liu,M.etal.,Transpl.Infect.Dis.,2009,11(4),304-312)。TLR3為核內(nèi)體病原模式識(shí)別受體，其可感應(yīng)病毒感染期間生成的病毒dsRNA。人類支氣管上皮細(xì)胞(BEAS2B)中，該TLR3途徑響應(yīng)鼻病毒感染(RV1B及RV39)而被激活(Wangetal.,J.Immunol.,2009,183,6989-6997)。證實(shí)有實(shí)驗(yàn)性哮喘的過(guò)敏性小鼠中，吸入性dsRNA及鼻病毒感染引起嗜中性粒細(xì)胞加重(Mahmutovic-Perssonetal.,Allergy,2014,69(3),348-358)。在過(guò)敏性哮喘模型中，感染鼻病毒TLR3敲除小鼠證實(shí)了與TLR3陽(yáng)性對(duì)照相比降低的肺部嗜中性粒細(xì)胞及巨噬細(xì)胞的浸潤(rùn)和顯著較低的呼吸道炎癥(Wang,Q.etal.,PLoSPathog.,7(5),e1002070)。綜合以上觀察結(jié)果，顯示TLR3-途徑的激活在呼吸道炎癥的發(fā)展及呼吸道疾病響應(yīng)鼻病毒介導(dǎo)的呼吸道感染而加重之中可能起重要作用。在人類鼻病毒感染的細(xì)胞中，TLR3的活化已顯示涉及c-Src激酶的受體募集及激活，其介導(dǎo)多種下游細(xì)胞效應(yīng)。已有少數(shù)的研究將細(xì)胞Src(Src1或p60-Src)或Src家族激酶的激活與感染病毒后的特定反應(yīng)聯(lián)系起來(lái)。這些包括以下報(bào)告，通過(guò)c-Src依賴機(jī)制，腺病毒引起由PI3激酶介導(dǎo)的Akt的激活。Syk激酶活性據(jù)報(bào)導(dǎo)在HRV感染中由作為上游激酶的c-Src控制(Lauetal.,J.Immunol.,2008,180,870-880)。還有提議稱，鼻病毒-39所誘導(dǎo)的上皮細(xì)胞中IL-8的生成依賴于Src激酶的激活(Bentley,J.K.etal.,J.Virol.,2007,81,1186-1194)。最后，已提出，Src激酶的激活涉及誘導(dǎo)在上皮細(xì)胞及粘膜下腺體中由鼻病毒-14生成粘蛋白(Inoue,D.etal.,Respir.Physiol.Neurobiol.,2006,154(3),484-499)。之前已公開(kāi)了抑制p59-HCK的化合物可有效對(duì)抗流感病毒復(fù)制(Charron,C.E.etal.,WO2011/070369)。某些p38MAPK抑制劑也被描述為呼吸道合胞病毒的復(fù)制抑制劑(Cass,L.etal.,WO2011/158039)。由于以上總結(jié)的原因，旨在治療慢性呼吸道疾病并合并c-Src及p59-HCK激酶的抑制及p38MAPK的抑制的化合物，預(yù)計(jì)將特別有效。除了在控制促炎途徑活性的細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)事件中具有重要作用，現(xiàn)今激酶也被認(rèn)定可調(diào)節(jié)一系列細(xì)胞功能的活性。其中，近來(lái)已討論過(guò)DNA完整性的維持(Shilo,Y.Nat.Rev.Cancer,2003,3,155-168)和細(xì)胞分裂的復(fù)雜過(guò)程的協(xié)調(diào)。最近的發(fā)現(xiàn)的例子是，在出版物中描述了一系列的作用于所謂的“Olaharsky激酶”的抑制劑對(duì)于體外微核形成頻率的影響(Olaharsky,A.J.etal.,PLoSComput.Biol.,2009,5(7),e1000446)。微核形成牽涉于或有關(guān)于有絲分裂過(guò)程的破壞，且因此為不需要的潛在毒性的表現(xiàn)。發(fā)現(xiàn)糖原合酶激酶3α(GSK3α)的抑制是提高激酶抑制劑促進(jìn)微核形成的可能性的特別顯著的因素。近來(lái)，用RNAi來(lái)抑制激酶GSK3β也被報(bào)導(dǎo)可促進(jìn)微核形成(Tighe,A.etal.,BMCCellBiology,2007,8：34)。有可能通過(guò)優(yōu)化劑量和/或通過(guò)改變給藥途徑而減弱與Olaharsky激酶如GSK3α的藥物相互作用所產(chǎn)生的不利影響。然而，更有利的是確認(rèn)治療上有用的分子，該分子證實(shí)針對(duì)這些靶外酶具有很低或不可檢測(cè)到的活性，且因而對(duì)于有絲分裂過(guò)程僅引起很小破壞或無(wú)破壞，如在有絲分裂分析中所測(cè)定的。考慮本文中所引述的文獻(xiàn)，顯而易見(jiàn)的是仍然需要確定及開(kāi)發(fā)新的p38MAP激酶抑制劑，其較目前可用的治療具有改善的治療潛力。想要的化合物為那些通過(guò)至少發(fā)揮出與先前藥物相等有利的功效而表現(xiàn)出優(yōu)異的治療指數(shù)，但在一個(gè)或多個(gè)方面，在相關(guān)的治療劑量時(shí)毒性較低的化合物。因此，本發(fā)明的目的是提供如此的新穎化合物，該化合物可抑制p38MAP激酶的酶活性，例如具有某些亞類型特異性(特別為α及γ)，以及抑制Src家族內(nèi)的酪氨酸激酶(如p59-HCK，且特別為c-Src)的酶活性，因而具有良好抗炎特性且適于治療使用。本發(fā)明化合物對(duì)于Olaharsky激酶，如GSK3α具有弱抑制活性或不具抑制活性，且對(duì)于SYK激酶具有弱抑制活性或不具抑制活性，這有助于其預(yù)期的良好的安全性。發(fā)明概述根據(jù)本發(fā)明，提供了式(I)化合物：(I)或其藥學(xué)上可接受的鹽。式(I)化合物與其藥學(xué)上可接受的鹽于本文中有時(shí)稱為“本發(fā)明化合物”或類似者。附圖簡(jiǎn)述圖1顯示2型的式(I)化合物馬來(lái)酸鹽樣品的IR光譜(微ATR)圖2顯示2型的式(I)化合物馬來(lái)酸鹽樣品的粉末XRD圖，圖3顯示1型的式(I)化合物馬來(lái)酸鹽樣品的粉末XRD圖圖4顯示2型的式(I)化合物馬來(lái)酸鹽樣品的DSC曲線圖5顯示2型的式(I)化合物馬來(lái)酸鹽樣品的TGA曲線圖6顯示2型的式(I)化合物馬來(lái)酸鹽樣品的DVS重迭圖7顯示2型的式(I)化合物馬來(lái)酸鹽樣品的DVS動(dòng)力學(xué)圖圖8顯示對(duì)各種含有本發(fā)明化合物(游離堿及馬來(lái)酸鹽形式)的組合物進(jìn)行化學(xué)穩(wěn)定性測(cè)試的結(jié)果圖9顯示測(cè)試化合物對(duì)于BEAS2B細(xì)胞中鼻病毒誘導(dǎo)的IL-8釋放的功效。本發(fā)明的詳細(xì)說(shuō)明式(I)化合物可以藥學(xué)上可接受的鹽的形式制備或使用，包括式(I)化合物能夠形成的治療活性的無(wú)毒性酸加成鹽。這些藥學(xué)上可接受的酸加成鹽可通過(guò)用適當(dāng)?shù)乃嵊谶m當(dāng)溶劑或溶劑混合物中處理該游離堿形式而方便地得到。適當(dāng)酸包括，例如，無(wú)機(jī)酸如氫鹵酸，如鹽酸或氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等；或有機(jī)酸，例如，醋酸、丙酸、羥基醋酸、乳酸、丙酮酸、丙二酸、琥珀酸、馬來(lái)酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、環(huán)拉酸、水楊酸、對(duì)氨基水楊酸、雙羥萘酸等。優(yōu)選，式(I)化合物以其馬來(lái)酸鹽形式使用。相反，該鹽形式可通過(guò)用適當(dāng)堿處理而轉(zhuǎn)化為游離堿形式。本文中所提供的本發(fā)明延伸至式(I)化合物的所有立體異構(gòu)體。本文中所使用的術(shù)語(yǔ)“立體異構(gòu)體”指具有相同分子式及鍵合原子順序(結(jié)構(gòu))，而不同之處僅在于其原子在空間的三維取向的異構(gòu)分子。如本文中所使用，式(I)化合物的定義意欲包括該化合物的所有互變異構(gòu)體，及該化合物的溶劑合物(包括該化合物的鹽的溶劑合物)，除非文中另有明確說(shuō)明。溶劑合物的實(shí)例包括水合物。本文中所提供的本發(fā)明延伸至該式(I)化合物的前藥，也就是，在體內(nèi)分解和/或代謝而提供活性式(I)化合物的化合物。本發(fā)明另一方面提供式(I)化合物的一種或多種代謝產(chǎn)物，特別是保留式(I)化合物的一種或多種治療活性的代謝產(chǎn)物。代謝產(chǎn)物，如本文中所使用，是在體內(nèi)由式(I)化合物代謝而產(chǎn)生的化合物，例如但不限于氧化代謝產(chǎn)物和/或例如由O-去烷基化而產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物。所公開(kāi)的化合物包括其中所指定的原子為天然存在或非天然存在的同位素的化合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，該同位素為穩(wěn)定的同位素。因此所公開(kāi)的化合物包括例如含氘化合物等。所公開(kāi)的內(nèi)容也延伸至本文中定義的該化合物的所有多晶形式。制備式(I)化合物或其經(jīng)保護(hù)的衍生物的第一個(gè)方法包括將式(II)化合物或其經(jīng)保護(hù)的衍生物其中LG1代表離去基團(tuán)；與式(III)化合物或其經(jīng)保護(hù)的衍生物進(jìn)行反應(yīng)；且任選將產(chǎn)物去保護(hù)而得到式(I)化合物。在式(II)化合物中，離去基團(tuán)LG的實(shí)例包括鹵素(尤其是Cl，Br)及芳基氧基-，尤其是苯氧基-。適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基及其去除方式如下文所述。式(II)及(III)化合物的反應(yīng)的適當(dāng)條件包括將(II)及(III)的混合物于適當(dāng)溶劑如THF、DCM或醋酸異丙酯中用三乙胺或Hunig氏堿處理并將反應(yīng)溫?zé)嶂寥?0°C的溫度。制備式(I)化合物的第二個(gè)方法包括將式(IV)化合物或其經(jīng)保護(hù)的衍生物，與式(V)化合物其中LG2代表離去基團(tuán)，如鹵素且尤其是Cl，或其經(jīng)保護(hù)的衍生物進(jìn)行反應(yīng)，且任選將產(chǎn)物去保護(hù)而得到式(I)化合物。適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基及其去除方式如下文所述。式(IV)及(V)化合物的反應(yīng)的適當(dāng)條件包括那些通常用于Buchwald反應(yīng)的條件，即將溶劑如1,4-二噁烷中的(IV)及(V)的溶液用鈀源及配體如Pd2(dba)3及BINAP和堿(如叔丁醇鈉或碳酸銫)于升高溫度下處理。備選的配體包括二苯基膦二茂鐵及三苯基膦；備選的鈀源包括醋酸鈀(II)及四（三苯基膦）鈀(0)；備選的堿包括雙(三甲基甲硅烷基)氨基鋰及磷酸鉀；備選的溶劑包括THF及甲苯。關(guān)于更廣泛的條件，參見(jiàn)Surry,D.S.,Buchwald,S.L.(2008),"BiarylPhosphaneLigandsinPalladium-CatalyzedAmination",Angew.Chem.Int.Ed.,47,6338-6361，及其中的參考文獻(xiàn)。式(II)化合物可通過(guò)將式(VI)化合物與式LG1C(=O)LG3化合物進(jìn)行反應(yīng)而制備，其中LG3代表離去基團(tuán)，如鹵素且尤其是Cl。式(VI)化合物與式LG1C(=O)LG3化合物(其中，LG1為PhO且LG3為Cl)的反應(yīng)的適當(dāng)條件包括將式(VI)化合物于溶劑如醋酸異丙酯中的溶液及無(wú)機(jī)堿如碳酸鈉的水溶液的混合物用氯甲酸苯酯處理。式(VI)化合物為已知的，或可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備。制備式(III)化合物的第一個(gè)方法包括將式(VII)化合物還原，還原式(VII)化合物的適當(dāng)條件包括在披鉑碳催化劑上用氫氣處理。此反應(yīng)可在升高壓力下于溶劑(如用醋酸酸化的THF)中進(jìn)行。替代地，其可于溶劑如DCM/MeOH中用H-cube氫化器于流動(dòng)條件下進(jìn)行。制備式(III)化合物的第二個(gè)方法包括將式(VIII)化合物去保護(hù)，其中P1代表胺保護(hù)基團(tuán)。適當(dāng)?shù)谋Ｗo(hù)基及其去除方式如下文所述。最適合的保護(hù)基為Boc，其可通過(guò)用酸如TFA或HCl處理而去除。制備式(VII)化合物的第一個(gè)方法包括將式(IX)化合物與式(X)化合物進(jìn)行反應(yīng)，其中Hal代表鹵素，尤其是Cl。式(IX)與(X)化合物的反應(yīng)的適當(dāng)條件包括上述式(IV)與(V)化合物的反應(yīng)所用的條件。制備式(VII)化合物的第二個(gè)方法包括將式(XI)化合物其中Hal代表鹵素，尤其是Cl，與式(XII)化合物進(jìn)行反應(yīng)，式(XI)與(XII)化合物的反應(yīng)的適當(dāng)條件包括將(XI)及(XII)在溶劑如1,4-二噁烷中的溶液用鈀源及配體如Pd2(dba)3及BINAP和堿(如叔丁醇鈉或碳酸銫)于升高溫度下處理。制備式(VIII)化合物的第一個(gè)方法包括將式(XIII)化合物與式(X)化合物進(jìn)行反應(yīng)，其中Hal代表鹵素，尤其是Cl。式(XIII)與(X)化合物反應(yīng)的適當(dāng)條件與上述式(IX)與(X)化合物的反應(yīng)所用條件相同。制備式(VIII)化合物的第二個(gè)方法包括將式(XIV)化合物其中Hal代表鹵素，尤其是Cl，與式(XII)化合物進(jìn)行反應(yīng)，式(XIV)與(XII)化合物的反應(yīng)的適當(dāng)條件與上述式(XI)與(XII)化合物的反應(yīng)所用條件相同。式(IX)化合物可如下列流程所示來(lái)制備：此方法的試劑為已知化合物。Mitsunobu條件包括將苯酚及醇的混合物于溶劑如THF中用三苯基膦及偶氮二甲酸二異丙酯處理。更大范圍的條件，參見(jiàn)Swamy,K.C.；Kumar,N.N.；Balaraman,E.；Kumar,K.V.(2009)."MitsunobuandRelatedReactions：AdvancesandApplications"ChemicalReviews109(6)：2551-2651，及其中的參考文獻(xiàn)。式(XI)化合物可如下列流程所示而制備：此方法的試劑為已知化合物。Mitsunobu條件包括上述那些條件。式(XIII)化合物可如下列流程所示而制備：其中LG4為離去基團(tuán)，如鹵素，尤其是Cl。此方法的試劑為已知化合物。烷基化條件包括將苯酚及烷基鹵化物的混合物用堿如碳酸銫或碳酸鉀于溶劑如乙腈或DMF中任選于升高溫度下處理。式(XIV)化合物可如下列流程所示而制備：其中LG5為離去基團(tuán)，如上文關(guān)于LG4提及的那些。此方法的試劑為已知化合物。烷基化的條件包括上述那些條件。式(IV)、(V)、(VI)、(X)及(XII)化合物為已知的，或可通過(guò)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備。關(guān)于式(IV)化合物，參見(jiàn)例如WO2010/067131，特別是稱為“中間體A”的化合物結(jié)構(gòu)。關(guān)于式(VI)化合物，參見(jiàn)例如WO00/043384，特別為式LXVII化合物。外觀穩(wěn)定的本發(fā)明化合物的游離堿形式的結(jié)晶非溶劑合物形式可通過(guò)由在乙腈中的溶液(優(yōu)選為熱的，如回流溫度)再結(jié)晶而得到。如果生成其它形式，此形式可通過(guò)在乙腈中漿化而得到。如上所述，馬來(lái)酸鹽為特別重要的本發(fā)明化合物的形式。該馬來(lái)酸鹽可通過(guò)將本發(fā)明化合物的游離堿形式用馬來(lái)酸于適當(dāng)溶劑中處理而制備。優(yōu)選的方法中，該馬來(lái)酸鹽通過(guò)將本發(fā)明化合物的2-丁酮溶液用馬來(lái)酸的2-丁酮溶液處理而制備。使得發(fā)生結(jié)晶，可通過(guò)加晶種幫助結(jié)晶。呈其2型結(jié)晶多晶型物的馬來(lái)酸鹽依此方式制備。該2型結(jié)晶多晶型物也可通過(guò)將本發(fā)明化合物的馬來(lái)酸鹽于2-丁酮中的熱溶液冷卻(如由50°C冷卻至室溫)而得到。使得發(fā)生結(jié)晶，可通過(guò)加晶種幫助結(jié)晶。本發(fā)明化合物的馬來(lái)酸鹽的2型結(jié)晶多晶型物的特征在于粉末XRD圖具有于4.2，8.4，8.7，11.0，11.5，12.6，14.4，14.9，16.0，17.0，17.4，18.8，19.5，20.2，21.7，22.4，23.8，25.8及26.3(±0.2)度2-θ的峰位(參見(jiàn)圖2)。8.4及8.7(±0.2)度2-θ的峰(雙峰)為2型結(jié)晶多晶型物的特別具有特征性的峰，因?yàn)檫@些位置的峰不存在于1型結(jié)晶多晶型物的XRD圖。2型結(jié)晶多晶型物具有高熔點(diǎn)(大約199°C)，具有似平板的形態(tài)。本發(fā)明化合物的馬來(lái)酸鹽的另一結(jié)晶形式由THF中再結(jié)晶出來(lái)后確認(rèn)，其較2型具有較少有利性質(zhì)。其具有似針狀形態(tài)及較低熔點(diǎn)，大約148°C。此結(jié)晶形式稱為1型。該本發(fā)明化合物的馬來(lái)酸鹽的1型結(jié)晶多晶型物的特征在于粉末XRD圖中具有于3.8，6.3，7.8，9.3，9.9，10.7，11.2，12.7，15.4，16.5，17.9，19.2及19.6(±0.2)度的峰位(參見(jiàn)圖3)。6.3，7.8及9.9(±0.2)度2-θ的峰為1型結(jié)晶多晶型物的特別具有特征性的峰，因?yàn)檫@些位置的峰不存在于2型結(jié)晶多晶型物的XRD圖中。因此該2型多晶型物的特征在于具有XRD衍射圖，其含有10，11，12，13，14，15，16，17，18或更優(yōu)選為19個(gè)選自以下的峰位：4.2，8.4，8.7，11.0，11.5，12.6，14.4，14.9，16.0，17.0，17.4，18.8，19.5，20.2，21.7，22.4，23.8，25.8及26.3(±0.2)度2-θ，優(yōu)選包括于8.4及8.7(±0.2)度2-θ的峰，但不含有于6.3，7.8及9.9(±0.2)度2-θ的峰。關(guān)于圖2及3，應(yīng)了解XRD圖中的強(qiáng)度變化可能由于影響強(qiáng)度的過(guò)程而出現(xiàn)，如樣品的處理歷史。結(jié)晶的但較馬來(lái)酸鹽不重要的本發(fā)明化合物的鹽包括氫溴酸鹽、磷酸鹽、酒石酸鹽、富馬酸鹽及甲磺酸鹽。一種或多種上述反應(yīng)期間，可能需要保護(hù)基來(lái)保護(hù)化學(xué)敏感基團(tuán)，以確保該方法有效。因此，如果想要或必須，中間體化合物(包括前文強(qiáng)調(diào)的式(II)至(V)化合物，以及式(VI)至(XIV)化合物)可使用常規(guī)保護(hù)基來(lái)保護(hù)。保護(hù)基及其去除方式描述于“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”，byTheodoraW.GreeneandPeterG.M.Wuts,publishedbyJohnWiley&SonsInc；4thRevEd.,2006,ISBN-10：0471697540。因此例證性的胺保護(hù)基團(tuán)包括Boc，其可通過(guò)TFA而去除，且例證性的醇保護(hù)基為THP，其可通過(guò)HCl而去除。式(III)化合物(連同其氨基基團(tuán)經(jīng)保護(hù)的衍生物，如式(VIII)化合物)及式(VII)化合物為新穎的。這些新穎化合物，連同其鹽類(包括藥學(xué)上可接受的鹽)作為本發(fā)明的各個(gè)方面而要求保護(hù)。式(I)化合物為p38MAP激酶抑制劑(尤其是α亞型的抑制劑)，且于一方面，本發(fā)明化合物提供來(lái)用作藥物，如治療炎性疾病，例如COPD和/或哮喘。式(I)化合物預(yù)期為體內(nèi)有效。通常，至今開(kāi)發(fā)的現(xiàn)有技術(shù)的化合物意欲用于口服給藥。此策略包括優(yōu)化藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特征，以便達(dá)到足夠的作用時(shí)間。此方法中，足夠高的藥物濃度被建立并維持于劑量之間，以提供持續(xù)的臨床益處。這種方法不可避免的結(jié)果是，所有的身體組織，且尤其是肝臟及消化道，有可能會(huì)暴露于超治療活性濃度的藥物，無(wú)論它們是否受到所治療疾病的不利影響。備選的策略是設(shè)計(jì)治療模式，其中，該藥物被直接給藥至炎性器官，即，利用局部給藥。雖然此法不適于治療所有慢性炎性疾病，其業(yè)已用于肺部病癥，如哮喘及COPD；皮膚疾病，例如，對(duì)抗特應(yīng)性皮炎及牛皮癬；鼻疾病，以過(guò)敏性鼻炎為代表；及胃腸道疾病，如潰瘍性結(jié)腸炎、IBD及克羅恩氏病；及眼睛的炎性疾病，如葡萄膜炎。局部治療中，可達(dá)到功效的其中一種方法為通過(guò)使用具有持續(xù)作用時(shí)間并被保持在相關(guān)器官中的藥物，從而將全身毒性的風(fēng)險(xiǎn)降到最小?；蛘撸谀承┣闆r中，可以開(kāi)發(fā)產(chǎn)生活性藥物的“儲(chǔ)存庫(kù)”的制劑，其可維持想要的效果。第一種方法由抗膽堿能藥物噻托溴銨（Spiriva）例證。此化合物局部給藥至肺部作為COPD的治療方法，并且對(duì)于其標(biāo)靶受體具有異常高的親和力而導(dǎo)致非常慢的分離速率，且因此顯示持續(xù)的作用時(shí)間。一方面，所公開(kāi)的式(I)化合物特別適用于局部遞送，如局部遞送至肺部，特別是用來(lái)治療呼吸道疾病，例如慢性呼吸道疾病，如COPD和/或哮喘。一個(gè)實(shí)施方案中，式(I)化合物適用于使患者對(duì)皮質(zhì)類固醇治療敏感，而該患者已經(jīng)對(duì)于這樣的治療方案而言變得難治。式(I)化合物可有抗病毒的特性，例如能防止小核糖核酸病毒，特別是鼻病毒、流感或呼吸道合胞病毒感染細(xì)胞(如呼吸道上皮細(xì)胞)。因此該化合物被認(rèn)為是抗病毒劑，特別是適用于防止、治療或改善小核糖核酸病毒的感染，如鼻病毒感染，流感或呼吸道合胞病毒感染。一個(gè)實(shí)施方案中，式(I)化合物可降低由病毒感染誘導(dǎo)的炎癥，如鼻病毒感染且特別是導(dǎo)致細(xì)胞因子如IL-8釋放(尤其是體內(nèi))的病毒感染。此活性可例如使用鼻病毒誘導(dǎo)的IL-8分析于體外測(cè)試，描述于本文中的實(shí)施例。一個(gè)實(shí)施方案中，式(I)化合物可降低由鼻病毒誘導(dǎo)的ICAM1表達(dá)，尤其是體內(nèi)。ICAM1為所謂的大溝鼻病毒血清型用于感染細(xì)胞的受體機(jī)制。此活性可例如通過(guò)本文實(shí)施例中描述的方法來(lái)測(cè)定。預(yù)期上述性能使得式(I)化合物特別適于用來(lái)在具有一種或多種慢性病況，如充血性心臟衰竭、COPD、哮喘、糖尿病、癌癥的患者和/或免疫抑制患者中例如器官移植后，治療(包括預(yù)防)炎性疾病的加重，特別是病毒病情加重，或治療病毒感染。該用途可與抗病毒劑，如扎那米韋、奧塞米韋(例如磷酸奧塞米韋)、帕拉米韋或拉尼米韋組合。通常，式(I)化合物可用于治療一種或多種具有炎性組分的病況，其適當(dāng)?shù)乜赏ㄟ^(guò)局部療法而治療。特別是，式(I)化合物可用于治療一種或多種呼吸道病癥，包括COPD(包括慢性支氣管炎和肺氣腫)、哮喘、小兒哮喘、囊性纖維化、結(jié)節(jié)病、特發(fā)性肺纖維化、過(guò)敏性鼻炎、鼻炎及鼻竇炎，尤其是哮喘，或COPD(包括慢性支氣管炎和肺氣腫)。因此，式(I)化合物可用于治療患有囊性纖維化的受試者的肺部炎性(及其癥狀)。該式(I)化合物可用于治療眼睛疾病或病癥包括干燥性角結(jié)膜炎(干眼癥)、過(guò)敏性結(jié)膜炎、結(jié)膜炎、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、黃斑水腫(包括濕性黃斑水腫及干性黃斑水腫)、術(shù)后白內(nèi)障炎癥或特別為葡萄膜炎(包括后、前及全葡萄膜炎)。該式(I)化合物可用于治療皮膚疾病或病癥，包括過(guò)敏性皮炎、接觸性皮炎、特應(yīng)性皮炎或牛皮癬。該式(I)化合物可用于治療胃腸道疾病或病癥，包括潰瘍性結(jié)腸炎、IBD或克羅恩氏病。該式(I)化合物可用于治療關(guān)節(jié)疾病或病癥，包括類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或骨關(guān)節(jié)炎且特別為繼發(fā)于此病況的炎性關(guān)節(jié)。該式(I)化合物可用于治療癌癥，包括胃癌，及用于抑制腫瘤的生長(zhǎng)及轉(zhuǎn)移，包括肺癌(如非小細(xì)胞肺癌)、胃癌、結(jié)腸直腸癌及惡性黑色素瘤。也預(yù)期式(I)化合物可用于治療某些其它病況，包括牙周炎、牙齦炎及咽炎。式(I)化合物也可以當(dāng)患者的病情對(duì)于皮質(zhì)類固醇的治療而言已經(jīng)變得難治時(shí)使患者的病情對(duì)于皮質(zhì)類固醇的治療再敏感。再者，本發(fā)明提供藥物組合物，其包含根據(jù)本公開(kāi)內(nèi)容的化合物，任選連同一種或多種藥學(xué)上可接受的稀釋劑或載體。稀釋劑及載體可包括適用于經(jīng)胃腸外、口服、局部、粘膜及直腸給藥的那些。本發(fā)明也提供制備該藥物組合物(例如供胃腸外、口服、局部、粘膜或直腸給藥的藥物組合物)的方法，該方法包含將成份混合。如上所述，該組合物可制備如供胃腸外、皮下、肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)或關(guān)節(jié)周圍給藥，特別為液態(tài)溶液或懸浮液形式；供口服給藥，特別為片劑或膠囊形式或液態(tài)溶液或懸浮液形式；供局部如肺部或鼻內(nèi)給藥，特別為粉末、水溶液或懸浮液、鼻滴劑或水性或非水性氣溶膠形式；供經(jīng)皮給藥，如貼劑、乳膏、軟膏；供粘膜給藥，如給藥至口腔、舌下或陰道粘膜；及供直腸給藥，如以栓劑、乳膏、軟膏或泡沫的形式給藥。該組合物可方便地以單位或多劑量形式給藥且可通過(guò)任何制藥領(lǐng)域熟知的方法制備，例如描述于Remington'sPharmaceuticalSciences,17thed.,MackPublishingCompany,Easton,PA.,(1985)的方法。供胃腸外給藥的制劑可含有作為賦形劑的無(wú)菌水或鹽水，亞烷基二醇如丙二醇，聚亞烷基二醇如聚乙二醇，植物來(lái)源的油，氫化萘等。經(jīng)鼻給藥的制劑可以是固體且可含有賦形劑，例如乳糖或葡聚糖，或可為水性或油性溶液或懸浮液以用作為鼻滴劑或計(jì)量噴霧劑形式。供口腔給藥時(shí)，通常賦形劑包括糖、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、預(yù)膠化淀粉等。適用于口服給藥的組合物可包括一種或多種生理上相容的載體和/或賦形劑且可為固體或液體形式?？捎靡韵聛?lái)制備片劑及膠囊：粘合劑，例如，糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨糖醇、黃蓍膠或聚乙烯吡咯烷酮；填充劑，如乳糖、蔗糖、玉米淀粉、磷酸鈣、山梨糖醇或甘氨酸；潤(rùn)滑劑，如硬脂酸鎂、滑石、聚乙二醇或二氧化硅；及表面活性劑，如月桂基硫酸鈉。液態(tài)組合物可含有常規(guī)添加劑如懸浮劑，例如山梨糖醇糖漿、甲基纖維素、糖漿、明膠、羧甲基-纖維素或食用脂；乳化劑如卵磷脂或阿拉伯膠；植物油如杏仁油、椰子油、鱈魚(yú)肝油或花生油；防腐劑如丁基化的羥基苯甲醚(BHA)及丁基化的羥基甲苯(BHT)。液態(tài)組合物可被封裝在例如明膠中以提供單位劑量形式。固體口服劑量形式包括片劑、兩部分的硬殼膠囊及軟彈性明膠(SEG)膠囊。干殼制劑通常包括約40%至60%w/w濃度的明膠，約20%至30%濃度的增塑劑(如甘油、山梨糖醇或丙二醇)及約30%至40%濃度的水。其它物質(zhì)如防腐劑、染料、遮光劑和調(diào)味劑也可存在。液態(tài)填充物質(zhì)包括諸如礦物油、植物油、三酸甘油酯、二醇、多元醇及表面活性劑的介質(zhì)或介質(zhì)組合中的固體藥物或液體藥物，所述固體藥物已溶解、增溶或分散(利用懸浮劑如蜂蠟、氫化蓖麻油或聚乙二醇4000)。適當(dāng)?shù)?，?I)化合物局部給藥至肺部、眼睛或腸道。因此，我們根據(jù)本發(fā)明提供藥物組合物，其包含本發(fā)明化合物，任選連同一種或多種局部可接受的稀釋劑或載體。局部給藥至肺部可通過(guò)使用氣溶膠制劑來(lái)實(shí)現(xiàn)。氣溶膠制劑通常包括懸浮或溶解于適當(dāng)氣溶膠推進(jìn)劑的活性成份，所述推進(jìn)劑如氯氟烴(CFC)或氫氟烴(HFC)。適當(dāng)CFC推進(jìn)劑包括三氯單氟甲烷(推進(jìn)劑11)、二氯四氟甲烷(推進(jìn)劑114)及二氯二氟甲烷(推進(jìn)劑12)。適當(dāng)HFC推進(jìn)劑包括四氟乙烷(HFC-134a)及七氟丙烷(HFC-227)。以總吸入組合物的重量計(jì)，該推進(jìn)劑通常占40%-99.5%，如40%-90%。該制劑可包括賦形劑，包括共溶劑(如乙醇)及表面活性劑(如卵磷脂、去水山梨醇三油酸酯等)。其它可能的賦形劑包括聚乙二醇、聚乙烯吡咯烷酮、甘油等。氣溶膠制劑封裝于罐中且通過(guò)計(jì)量閥(如由Bespak，Valois或3M提供或替代地由Aptar，Coster或Vari提供)而遞送適當(dāng)劑量。局部給藥至肺部也可通過(guò)使用非加壓制劑如水溶液或懸浮液而實(shí)現(xiàn)。這些可通過(guò)噴霧器給藥，如可手持且便攜或家庭用或醫(yī)院用(即非便攜)的噴霧器。該制劑可包括賦形劑如水、緩沖劑、張力調(diào)節(jié)劑、pH調(diào)節(jié)劑、表面活性劑及共溶劑。懸浮液體及氣溶膠制劑(無(wú)論是加壓還是不加壓)通常含有細(xì)微分散形式的本發(fā)明化合物，例如，D50為0.5-10μm如大約1-5μm。粒徑分布可使用D10、D50及D90值來(lái)表示。該粒徑分布的D50中值定義為以微米表示的將分布分為兩半的粒徑。源自激光衍射的測(cè)量更準(zhǔn)確地描述為體積分布，且因此，使用此方法所得到的D50值更具有意義地稱為Dv50值(體積分布的中值)。如本文中使用的，Dv值指使用激光衍射測(cè)量的粒徑分布。類似的，有關(guān)激光衍射所使用的D10及D90值分別用來(lái)指Dv10及Dv90值，且指10%分布在D10值以下的粒徑和90%分布在D90值以下的粒徑。局部給藥至肺部也可通過(guò)使用干粉制劑來(lái)實(shí)現(xiàn)。干粉制劑將含有呈精細(xì)分散形式的本公開(kāi)的化合物，通常具有1-10μm的質(zhì)量平均直徑(MMAD)或0.5-10μm，如約1-5μm的D50。呈精細(xì)分散形式的本發(fā)明化合物粉末可通過(guò)微粉化方法或類似的尺寸降低方法來(lái)制備。微粉化可通過(guò)使用噴射研磨機(jī)來(lái)進(jìn)行，如HosokawaAlpine制備的噴射研磨機(jī)。所產(chǎn)生的粒徑分布可使用激光衍射來(lái)測(cè)量(如用MalvernMastersizer2000S儀器)。該制劑通常含有局部可接受的稀釋劑，如乳糖、葡萄糖或甘露醇(優(yōu)選為乳糖)，該稀釋劑通常具有相對(duì)較大粒徑，如50μm或更大的質(zhì)量平均直徑(MMAD)，如100μm或更大；或40-150μm的D50。如本文中所使用，術(shù)語(yǔ)“乳糖”指含有乳糖的組分，包括α-乳糖單水合物、β-乳糖單水合物、無(wú)水α-乳糖、無(wú)水β-乳糖及無(wú)定形乳糖。乳糖組分可通過(guò)微粉化、過(guò)篩、碾磨、壓制、凝結(jié)或噴霧干燥加工。也涵蓋市售可得的各種乳糖形式，例如Lactohale?(吸入級(jí)乳糖；DFEPharma)，InhaLac?70(干粉吸入器使用的過(guò)篩乳糖；Meggle)，Pharmatose?(DFEPharma)及Respitose?(過(guò)篩吸入等級(jí)的乳糖；DFEPharma)產(chǎn)品。一個(gè)實(shí)施方案中，該乳糖組分選自：α-乳糖單水合物、無(wú)水α-乳糖及無(wú)定形乳糖。優(yōu)選，該乳糖為α-乳糖單水合物。干粉制劑也可含有其它賦形劑。因此，一個(gè)實(shí)施方案中，根據(jù)本公開(kāi)內(nèi)容的干粉制劑包括硬脂酸鎂或硬脂酸鈣。該制劑可具有優(yōu)異的化學(xué)和/或物理穩(wěn)定性，尤其是當(dāng)該制劑也含有乳糖時(shí)。干粉制劑通常使用干粉吸入器(DPI)裝置來(lái)遞送。干粉遞送系統(tǒng)的實(shí)例包括SPINHALER?、DISKHALER?、TURBOHALER?、DISKUS?、SKYEHALER?、ACCUHALER?及CLICKHALER?。干粉遞送系統(tǒng)的其它實(shí)例包括ECLIPSE、NEXT、ROTAHALER、HANDIHALER、AEROLISER、CYCLOHALER、BREEZHALER/NEOHALER、MONODOSE、FLOWCAPS、TWINCAPS、X-CAPS、TURBOSPIN、ELPENHALER、MIATHALER、TWISTHALER、NOVOLIZER、PRESSAIR、ELLIPTA、ORIEL干粉吸入器、MICRODOSE、PULVINAL、EASYHALER、ULTRAHALER、TAIFUN、PULMOJET、OMNIHALER、GYROHALER、TAPER、CONIX、XCELOVAIR及PROHALER。一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物以微粉化干粉制劑來(lái)提供，例如包含適當(dāng)級(jí)別的乳糖。因此，本發(fā)明另一方面提供藥物組合物，其包含顆粒形式的本發(fā)明化合物以及顆粒乳糖，該組合物任選包含硬脂酸鎂。一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物以微粉化干粉制劑提供，包含適當(dāng)級(jí)別的乳糖及硬脂酸鎂，該制劑填充至例如DISKUS的裝置中。適當(dāng)?shù)?，該裝置為多劑量裝置，例如，該制劑填充至泡中用于多單位劑量裝置，如DISKUS。另一實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物提供為微粉化的干粉制劑，例如包含適當(dāng)級(jí)別的乳糖，填充至硬殼膠囊中以供用于單一劑量裝置，如AEROLISER。另一實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物提供為微粉化的干粉制劑，包含適當(dāng)級(jí)別的乳糖及硬脂酸鎂，填充至硬殼膠囊中以供用于單一劑量裝置，如AEROLISER。另一實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物提供為細(xì)粉末以供用于吸入性劑量形式中，其中，該粉末為D50為0.5-10μm（如約1-5μm）的細(xì)顆粒，其通過(guò)非噴射研磨微粉化的尺寸減小過(guò)程生成，該過(guò)程如噴霧干燥，噴霧冷凍，微流化，高壓均質(zhì)化，超臨界流體結(jié)晶化，超聲結(jié)晶化或這些方法的組合，或其它適當(dāng)?shù)谋绢I(lǐng)域已知的用來(lái)制造空氣動(dòng)力學(xué)粒徑為0.5-10μm的細(xì)顆粒的顆粒形成法。所產(chǎn)生的粒徑分布可用激光衍射(如用MalvernMastersizer2000S儀器)來(lái)測(cè)量。該顆?？蓡为?dú)包括該化合物或還包括適當(dāng)?shù)目捎兄诩庸さ钠渌x形劑。所產(chǎn)生的細(xì)顆?？尚纬勺罱K制劑以遞送至人體或可任選進(jìn)一步與其它適當(dāng)?shù)馁x形劑調(diào)制以利于用可接受的劑量形式來(lái)遞送。本發(fā)明化合物也可經(jīng)直腸給藥，例如以栓劑或灌腸劑形式，其包括水性或油性溶液以及懸浮液及乳狀液及泡沫。該組合物根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的標(biāo)準(zhǔn)程序來(lái)制備。例如，栓劑可通過(guò)將活性成份與常規(guī)栓劑基質(zhì)，如可可脂或其它甘油酯混合而制備。在這種情況下，該藥物與適當(dāng)?shù)臒o(wú)刺激性的賦形劑混合，該賦形劑在常溫時(shí)為固體但在直腸溫度時(shí)則為液體，且因此在直腸中融化而釋放藥物。該物質(zhì)為可可脂及聚乙二醇。通常，當(dāng)組合物意欲以滴眼液或眼藥膏形式局部給藥至眼睛時(shí)，本發(fā)明化合物的總量為約0.0001至小于4.0%(w/w)。優(yōu)選，對(duì)于眼睛局部給藥，該根據(jù)本發(fā)明給藥的組合物可調(diào)制成溶液、懸浮液、乳狀液及其它劑量形式。通常優(yōu)選為水溶液，這是基于調(diào)制容易，以及患者能通過(guò)將一至兩滴該溶液滴注至受影響的眼睛而容易地給予該組合物。然而，該組合物也可為懸浮液、粘稠或半粘稠凝膠，或其它類型的固體或半固體組合物。懸浮液可優(yōu)選用于略溶于水的化合物。給藥至眼睛的替代方法為將本發(fā)明化合物的溶液或懸浮液進(jìn)行玻璃體內(nèi)注射。此外，本發(fā)明化合物也可通過(guò)眼部植入物或插入物而引入。根據(jù)本發(fā)明給藥的組合物也可包括各種其它成份，包括但不限于，張度劑、緩沖劑、表面活性劑、穩(wěn)定聚合物、防腐劑、共溶劑及粘度構(gòu)建劑。本發(fā)明適當(dāng)?shù)乃幬锝M合物包括本發(fā)明化合物，其與張度劑及緩沖劑一起調(diào)制。本發(fā)明藥物組合物可進(jìn)一步任選包括表面活性劑和/或緩和劑和/或穩(wěn)定聚合物?？墒褂酶鞣N張度劑來(lái)調(diào)整組合物的張力，優(yōu)選調(diào)整成為用于眼科組合物的天然淚液的張力。例如，氯化鈉、氯化鉀、氯化鎂、氯化鈣、單糖如右旋糖、果糖、半乳糖，和/或簡(jiǎn)單的多元醇如糖醇甘露醇、山梨糖醇、木糖醇、乳糖醇、異麥芽糖醇、麥芽糖醇及氫化淀粉水解產(chǎn)物可添加至組合物中以接近生理張力。張度劑的量將根據(jù)所添加的特定試劑而變化。然而，通常該組合物將具有足以使最終組合物具有眼用可接受的滲透壓的量(通常為約150-450mOsm，優(yōu)選為250-350mOsm且最優(yōu)選為約290mOsm)的張度劑。通常，本發(fā)明張度劑的存在范圍為2至4%w/w。本發(fā)明優(yōu)選的張度劑包括單糖或糖醇，如D-甘露醇。適當(dāng)?shù)木彌_系統(tǒng)(如磷酸鈉、醋酸鈉、檸檬酸鈉、硼酸鈉或硼酸)可添加至組合物中以防止pH在儲(chǔ)存條件下偏移。特定的濃度將根據(jù)所使用的試劑而變化。然而，優(yōu)選選擇緩沖劑以便使目標(biāo)pH維持在pH5至8的范圍，且更優(yōu)選為使目標(biāo)pH維持在pH5至7的范圍。可任選使用表面活性劑以遞送較高濃度的本發(fā)明化合物。表面活性劑用于增溶化合物并穩(wěn)定膠體分散液，如膠束溶液、微乳液、乳液及懸浮液?？扇芜x使用的表面活性劑的實(shí)例包括聚山梨酸酯、泊洛沙姆、聚乙二醇40硬脂酸酯、聚乙二醇蓖麻油、泰洛沙泊、Triton及脫水山梨糖醇單月桂酸酯。用于本發(fā)明的優(yōu)選表面活性劑具有的親水/親油/平衡"HLB"范圍為由12.4至13.2且可接受作為眼用，如TritonX114及泰洛沙泊?？商砑又帘景l(fā)明化合物的眼科組合物中的額外試劑為緩和劑，其用作穩(wěn)定聚合物。該穩(wěn)定聚合物應(yīng)為優(yōu)先供眼局部使用的離子/荷電的實(shí)例，更具體地，為其表面帶有負(fù)電的可表現(xiàn)出(–)10–50mV的ζ-電勢(shì)以具有物理穩(wěn)定性并能在水中形成分散液(即水可溶)的聚合物。本發(fā)明優(yōu)選的穩(wěn)定聚合物是聚電解質(zhì)，或超過(guò)一種聚電解質(zhì)，來(lái)自交聯(lián)聚丙烯酸酯類，如卡波姆及皮姆琳(R)，特別是卡波姆974p(聚丙烯酸)，以0.1-0.5%w/w使用。其它化合物也可添加至本發(fā)明化合物的眼科組合物中以提高載體的粘度。粘度增強(qiáng)劑的實(shí)例包括但不限于：多糖類，如透明質(zhì)酸及其鹽類、硫酸軟骨素及其鹽類、葡聚糖、纖維素類的各種聚合物；乙烯基聚合物；及丙烯酸聚合物。局部眼科產(chǎn)品通常以多劑量形式包裝。因此需要防腐劑來(lái)防止使用期間的微生物污染。適當(dāng)?shù)姆栏瘎┌ǎ罕皆蠕@、氯丁醇、芐基十二烷基二甲基銨溴化物、對(duì)羥基苯甲酸甲酯、對(duì)羥基苯甲酸丙酯、苯乙醇、依地酸二鈉、山梨酸、聚季銨鹽-1或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它試劑。該防腐劑通常以0.001至1.0%w/v的濃度使用。本發(fā)明的單位劑量組合物無(wú)菌，但通常未防腐。因此，該組合物通常不含有防腐劑。醫(yī)師或其它技術(shù)人員將能決定本發(fā)明化合物的適當(dāng)劑量，從而決定應(yīng)包括于任何特定的藥物制劑中的本發(fā)明化合物的量(無(wú)論是單位劑量形式或其它)。式(I)化合物具有治療活性。因此，另一方面，本發(fā)明提供如本文中所述的用于治療一種或多種上述病況的化合物。另一方面，本發(fā)明提供如本文中所述的化合物用于制備治療一種或多種上述病況的藥物的用途。另一方面，本發(fā)明提供治療一種或多種上述病況的方法，包括將有效量的本發(fā)明化合物或包含該化合物的藥物組合物給藥至受試者。術(shù)語(yǔ)“治療”意欲包括預(yù)防以及治療性處理。治療病況或病癥也包括治療其加重的情況。本發(fā)明化合物也可與一種或多種其它活性成份一起給藥，所述其它活性成份如適于治療上述病況的活性成份。例如，治療呼吸道病癥的可能的組合包括與以下物質(zhì)的組合：類固醇(如布地奈德(budesonide)、二丙酸倍氯米松(beclomethasonedipropionate)、丙酸氟替卡松(fluticasonepropionate)、糠酸莫米松(mometasonefuroate)、糠酸氟替卡松(fluticasonefuroate)、環(huán)索奈德(ciclesonide))、β激動(dòng)劑(如特布他林(terbutaline)、沙丁胺醇(salbutamol)、沙美特羅(salmeterol)、福莫特羅(formoterol)、維蘭特羅(vilanterol)、歐達(dá)特羅(olodaterol)、茚達(dá)特羅(indacaterol)、瑞普特羅(reproterol)、非諾特羅(fenoterol))、黃嘌呤（如茶堿)、抗膽堿能藥物或毒蕈堿拮抗劑(如異丙托溴銨(ipratropium)、噻托溴銨(tiotropium)、阿地溴銨(aclidinium)、蕪地溴銨(umeclidinium)或甘羅溴銨(glycopyrronium)(例如呈溴鹽形式))、PI3激酶抑制劑及抗病毒劑(如扎那米韋(zanamivir)、奧司他韋(oseltamivir)(例如呈磷酸鹽形式)、帕拉米韋(peramivir)及拉尼米韋(laninamivir))。一個(gè)實(shí)施方案中，提供本發(fā)明化合物用作藥物與一種或多種其它活性成份合并給藥，所述其它活性成份如選自皮質(zhì)類固醇、β激動(dòng)劑、黃嘌呤、毒蕈堿拮抗劑及PI3激酶抑制劑。適當(dāng)?shù)?，該β激?dòng)劑為β2激動(dòng)劑。一個(gè)實(shí)施方案中，所公開(kāi)的化合物通過(guò)吸入給藥且皮質(zhì)類固醇經(jīng)口給藥或通過(guò)吸入給藥，可組合或分開(kāi)給藥。一個(gè)實(shí)施方案中，所公開(kāi)的化合物通過(guò)吸入給藥且β2激動(dòng)劑經(jīng)口給藥或通過(guò)吸入給藥，可組合或分開(kāi)給藥。一個(gè)實(shí)施方案中，所公開(kāi)的化合物通過(guò)吸入給藥且毒蕈堿拮抗劑經(jīng)口給藥或通過(guò)吸入給藥，可組合或分開(kāi)給藥。一個(gè)實(shí)施方案中，所公開(kāi)的化合物通過(guò)吸入給藥，其與均口服或吸入給藥的皮質(zhì)類固醇、β2激動(dòng)劑及毒蕈堿拮抗劑中的一種或多種組合或分開(kāi)給藥。再者，治療胃腸道病癥時(shí)(如克羅恩氏病或潰瘍性結(jié)腸炎)，可能的組合包括與例如一種或多種選自下列的藥物的組合：-5-氨基水楊酸，或其前藥(如柳氮磺吡啶(sulfasalazine)、奧色拉嗪(olsalazine)或巴柳氮(bisalazide)；-皮質(zhì)類固醇(如潑尼松龍(prednisolone)、甲基潑尼松龍(methylprednisolone)或布地奈德(budesonide))；-免疫抑制劑(如環(huán)孢菌素、他克莫司(tacrolimus)、甲氨蝶呤(methotrexate)、硫唑嘌呤(azathioprine)或6-巰基嘌呤(6-mercaptopurine))；-抗-TNFα抗體(如英夫利昔單抗(infliximab)、阿達(dá)木單抗(adalimumab)、賽妥珠單抗(certolizumabpegol)或戈利木單抗(golimumab))；-抗-IL12/IL23抗體(如優(yōu)特克單抗(ustekinumab))或小分子IL12/IL23抑制劑(如阿吡莫德(apilimod))；-抗-α4β7抗體(如維多珠單抗(vedolizumab))；-MAdCAM-1阻斷劑(如PF-00547659)；-對(duì)抗細(xì)胞粘附分子α4-整合素的抗體(如那他珠單抗(natalizumab))；-對(duì)抗IL2受體α亞單位的抗體(如達(dá)克珠單抗(daclizumab)或巴利昔單抗(basiliximab))；-JAK3抑制劑(如托法替尼(tofacitinib)或R348)；-Syk抑制劑及其前藥(如扶坦替尼(fostamatinib)及R-406)；-磷酸二酯酶-4抑制劑(如替托司特(tetomilast))；-HMPL-004；-益生菌；-德莎拉秦(Dersalazine)；-塞馬莫德(semapimod)/CPSI-2364；及-蛋白質(zhì)激酶C抑制劑(如AEB-071)。治療眼睛病癥(如干燥性角結(jié)膜炎或葡萄膜炎)時(shí)，可能的組合包括與例如一種或多種選自下列的藥物的組合：-皮質(zhì)類固醇(如地塞米松(dexamethasone)、潑尼松龍、曲安奈德(triamcinoloneacetonide)、二氟潑尼酯(difluprednate)或醋酸氟輕松(fluocinoloneacetonide))；-免疫抑制劑(如環(huán)孢菌素、伏環(huán)孢素(voclosporin)、硫唑嘌呤、甲氨蝶呤、嗎替麥考酚酯或他克莫司)；-抗-TNFα抗體(如英夫利昔單抗、阿達(dá)木單抗、賽妥珠單抗、ESBA-105或戈利木單抗)；-抗-IL-17A抗體(如蘇金單抗(secukinumab))；-mTOR抑制劑(如西羅莫司(sirolimus))；-VGX-1027；-JAK3抑制劑(如妥扶替尼(tofacitinib)或R348)；及-蛋白質(zhì)激酶C抑制劑(如AEB-071)。因此，本發(fā)明另一方面提供式(I)化合物，其與一種或多種其它活性成份，例如一種或多種上述活性成份組合。類似的，本發(fā)明另一方面提供組合產(chǎn)品，其包含：(A)本發(fā)明化合物；及(B)一種或多種其它治療劑，其中，組分(A)及(B)各與藥學(xué)上可接受的輔劑、稀釋劑或載體混合調(diào)制。本發(fā)明的這一方面中，該組合產(chǎn)品可為單一(組合)藥物制劑或部件的套裝。因此，本發(fā)明此方面涵蓋藥物制劑，所述藥物制劑包括與藥學(xué)上可接受的輔劑、稀釋劑或載體混合的本發(fā)明化合物及其它治療劑(該制劑于下文中稱為“組合制劑”)。也涵蓋包含以下組分的部件的套裝：(i)藥物制劑，其包括與藥學(xué)上可接受的輔劑、稀釋劑或載體混合的本發(fā)明化合物；及(ii)藥物制劑，其包括與藥學(xué)上可接受的輔劑、稀釋劑或載體混合的一種或多種其它治療劑，其中組分(i)及(ii)各自提供為適合于與另一組分結(jié)合給藥的形式。因此，部件的套裝的組分(i)為混合藥學(xué)上可接受的輔劑、稀釋劑或載體的上述組分(A)。類似的，組分(ii)為混合藥學(xué)上可接受的輔劑、稀釋劑或載體的上述組分(B)。該一種或多種其它治療劑(即上述組分(B))可例如為任何上述與治療呼吸道、胃腸道及眼睛病癥有關(guān)聯(lián)的藥物。如果組分(B)為多于一種的其它治療劑，這些其它治療劑可互相調(diào)制在一起或與組分(A)調(diào)制，或它們可分別調(diào)制。一個(gè)實(shí)施方案中，組分(B)為一種其它治療劑。另一實(shí)施方案中，組分(B)為兩種其它治療劑。本發(fā)明此方面的組合產(chǎn)品(組合制劑或部件的套裝)可用于治療或預(yù)防炎性疾病，如上述炎性疾病，例如：-呼吸病癥，包括COPD(包括慢性支氣管炎和肺氣腫)、哮喘、小兒哮喘、囊性纖維化、結(jié)節(jié)病、特發(fā)性肺纖維化、過(guò)敏性鼻炎、鼻炎及鼻竇炎，尤其是哮喘或COPD(包括慢性支氣管炎和肺氣腫)；-眼睛疾病或病癥，包括過(guò)敏性結(jié)膜炎、結(jié)膜炎、干燥性角結(jié)膜炎(干眼癥)、青光眼、糖尿病性視網(wǎng)膜病變、黃斑水腫(包括糖尿病性黃斑水腫)、視網(wǎng)膜中央靜脈阻塞(CRVO)、干性和/或濕性年齡相關(guān)性黃斑變性(AMD)、術(shù)后白內(nèi)障炎癥或特別為葡萄膜炎(包括后、前及全葡萄膜炎)、角膜移植及角膜緣細(xì)胞移植排斥反應(yīng)；-皮膚疾病或病癥，包括過(guò)敏性皮炎、接觸性皮炎、特應(yīng)性皮炎或牛皮癬；及-胃腸道疾病或病癥，包括麩質(zhì)敏感性腸病(乳糜瀉疾病)、嗜酸性食道炎、腸移植物抗宿主疾病或特別為潰瘍性結(jié)腸炎或克羅恩氏病。本文中所述的本發(fā)明諸多方面(如上述化合物、組合、方法及用途)可具有的優(yōu)點(diǎn)是，治療本文中所述的病況時(shí)，與現(xiàn)有技術(shù)已知的用于治療那些病況的類似的化合物、組合、方法(治療)或用途等相比，可以使醫(yī)生和/或患者更方便，更加有效，毒性更低，更長(zhǎng)效，具有更好的選擇性，具有更寬范圍的活性，更高效能，產(chǎn)生的副作用更少，具有更好的藥代動(dòng)力學(xué)和/或藥效學(xué)特征，具有更適合的固態(tài)性質(zhì)，具有更好的穩(wěn)定性，或可具有其它有用的藥理學(xué)性質(zhì)。相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)的化合物，在至少一些實(shí)施方案中，該式(I)化合物預(yù)期將有一種或多種下列特性：-其具有特別適用于局部(topical)/局部(local)給藥的特性(如局部(topical)/局部(local)給藥后，產(chǎn)生式(I)化合物的高的靶組織濃度，但低的血漿或全身濃度，和/或式(Ⅰ)化合物由血漿或全身循環(huán)的快速清除)；-在靜脈給藥之后，具有降低的血管外暴露的風(fēng)險(xiǎn)(如由于式(I)化合物的低體積分布)；-其對(duì)于選擇的激酶和/或一系列的激酶，如p38MAPKα、p38MAPKγ、Src及p59-HCK具有優(yōu)異效能；-其具有低的或不具有對(duì)抗Olaharsky激酶，特別為GSK3α的抑制活性；-其具有低的或不具有對(duì)抗Syk激酶的抑制活性；-其具有降低的β-連環(huán)鏈蛋白誘導(dǎo)和/或細(xì)胞有絲分裂抑制；-其對(duì)于細(xì)胞色素P450超家族的成員不具有或具有較低的時(shí)間依賴性抑制；和/或-其產(chǎn)生問(wèn)題較少(如毒性較小)的代謝產(chǎn)物，例如在給藥至患者后。實(shí)驗(yàn)部分本文中所使用的縮寫(xiě)定義如下(表1)。任何未定義的縮寫(xiě)旨在傳達(dá)其通常接受的含義。表1：縮寫(xiě)化學(xué)實(shí)施例一般程序所有的起始原料及溶劑從商業(yè)來(lái)源獲得或根據(jù)所引述文獻(xiàn)制備。除非另有說(shuō)明，所有反應(yīng)均要攪拌。有機(jī)溶液按常規(guī)經(jīng)無(wú)水硫酸鎂干燥。氫化反應(yīng)于ThalesH-cube流動(dòng)反應(yīng)器上在所述條件下進(jìn)行。柱色譜法于預(yù)填充的二氧化硅(230-400目，40-63μm)柱筒上以所注明的量進(jìn)行。SCX購(gòu)自Supelco且于使用前用1M鹽酸處理。除非另有說(shuō)明，首先將要被純化的反應(yīng)混合物用MeOH稀釋且用數(shù)滴AcOH使其呈酸性。將此溶液直接加載至SCX上并用MeOH清洗。然后通過(guò)用0.7M的NH3/MeOH清洗，將想要的物質(zhì)洗脫。制備型反相高效液相色譜如下進(jìn)行：使用于215及254nm的UV檢測(cè)，用WatersX-SelectPrep-C18，5μm，19x50mm柱，用含有0.1%v/v甲酸的H2O-MeCN梯度洗脫10分鐘；或用WatersX-BridgePrep-C18，5μm，19x50mm柱，用含有0.1%碳酸氫銨的H2O-MeCN梯度洗脫10分鐘。分析方法反相高效液相色譜方法1：WatersXSelectCSHC182.5μm(4.6x30mm)，40°C；流速2.5-4.5mLmin-1，用含有0.1%v/v甲酸的H2O-MeCN梯度于4分鐘期間洗脫，使用254nm的UV檢測(cè)。梯度信息：0-3.00min，由95%H2O-5%MeCN漸變至5%H2O-95%MeCN；3.00-3.01min，保持5%H2O-95%MeCN，流速提高至4.5mLmin-1；3.01-3.50min，保持5%H2O-95%MeCN；3.50-3.60min，恢復(fù)到95%H2O-5%MeCN，流速降低至3.50mLmin-1；3.60-3.90min，保持95%H2O-5%MeCN；3.90-4.00min，保持95%H2O-5%MeCN，流速降低至2.5mLmin-1。方法2：WatersXBridgeBEHC18，2.5μm(4.6x30mm)，40°C；流速2.5-4.5mLmin-1，用含有10mM碳酸氫銨的H2O-MeCN梯度于4分鐘期間洗脫，使用254nm的UV檢測(cè)。梯度信息：0-3.00min，由95%H2O-5%MeCN漸變至5%H2O-95%MeCN；3.00-3.01min，保持5%H2O-95%MeCN，流速提高至4.5mLmin-1；3.01-3.50min，保持5%H2O-95%MeCN；3.50-3.60min，恢復(fù)到95%H2O-5%MeCN，流速降低至3.50mLmin-1；3.60-3.90min，保持95%H2O-5%MeCN；3.90-4.00min，保持95%H2O-5%MeCN，流速降低至2.5mLmin-1。1HNMR光譜1HNMR光譜于BrukerAvanceIII光譜儀上，于400MHz，用殘留的未氘化的溶劑作為參考從而得到，且除非另有說(shuō)明，于DMSO-d6中運(yùn)行。實(shí)施例實(shí)施例1A：1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲中間體A：3-叔丁基-1-對(duì)甲苯基-1H-吡唑-5-胺向含有對(duì)甲苯基肼鹽酸鹽(100g，630mmol)于EtOH(1251mL)中的經(jīng)攪拌的溶液中加入4,4-二甲基-3-氧代戊腈(88g，699mmol)及HCl(62.5mL，750mmol)。將產(chǎn)生的混合物于回流中攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫并于真空濃縮至約原體積的1/3。然后，將反應(yīng)混合物于冰浴中冷卻并用6M的NaOH水溶液調(diào)節(jié)到約pH8-9。將反應(yīng)混合物用乙醚(500mL)萃取并將有機(jī)相用水(2x300mL)清洗，之后經(jīng)硫酸鎂干燥并于真空濃縮而得到橙色固體。將固體懸浮于異己烷中并于回流中攪拌2.5h，之后冷卻并于仍然熱時(shí)過(guò)濾而得到呈淡褐色固體的小標(biāo)題的產(chǎn)物3-叔丁基-1-對(duì)甲苯基-1H-吡唑-5-胺(76.5g，52%)；Rt1.31min(方法1)；m/z230(M+H)+(ES+)；1HNMRδ：1.20(9H，s)，2.32(3H，s)，5.10(2H，brs)，5.35(1H，s)，7.24(2H，d)，7.42(2H，m)。中間體B：(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苯酯將含有3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-胺(中間體A)(20g，87.0mmol)于醋酸異丙酯(240mL)中的溶液添加至含有碳酸鈉(11.3g，106mmol)于水(80mL)中的經(jīng)攪拌的溶液中。10分鐘后，將氯甲酸苯酯(12.1mL，96mmol)加入并將產(chǎn)生的混合物于環(huán)境溫度攪拌過(guò)夜。將反應(yīng)混合物用水(160mL)稀釋，將各層分離并將有機(jī)層用水(2x80mL)，鹽水(80mL)清洗，干燥(MgSO4)并于真空濃縮。將產(chǎn)生的黃色固體懸浮于10%乙醚/異己烷(320mL)中并攪拌直到得到均勻懸浮液。將固體通過(guò)過(guò)濾法收集并用異己烷清洗而得到呈白色粉末的小標(biāo)題的化合物(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苯酯(27.3g，88%)；Rt2.65min(方法1)；m/z350(M+H)+(ES+)；1HNMRδ：1.29(9H，s)，2.37(3H，s)，6.35(1H，s)，7.10-7.23(3H，重迭m)，7.33-7.46(6H，重迭m)，9.99(1H，s)。中間體C：(4-((2-氯吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯向含有2-氯-4-(氯甲基)吡啶(30g，185mmol)及(4-羥基萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(40.0g，154mmol)于乙腈(200mL)中的混合物中加入碳酸銫(75g，231mmol)并將產(chǎn)生的混合物加熱至55°C。16小時(shí)后，將反應(yīng)混合物用30%MeOH/DCM(600mL)及水(400mL)稀釋。將各層分離并將水層用額外量的30%MeOH/DCM(2x600mL)萃取，并將有機(jī)層于真空濃縮而得到粗產(chǎn)物。將粗產(chǎn)物用MeOH(200mL)研磨，聲處理約5分鐘并漿化1天。將產(chǎn)生的固體通過(guò)過(guò)濾法收集并用MeOH(2x10mL)清洗而得到呈黃色固體的小標(biāo)題的化合物(4-((2-氯吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(43g，70%)；Rt2.60min(方法1)；m/z383(M-H)-(ES-)；1HNMRδ：1.47(9H，s)，5.41(2H，s)，6.98(1H，d)，7.36(1H，d)，7.55-7.61(3H，重迭m)，7.65(1H，m)，7.94(1H，m)，8.29(1H，m)，8.45(1H，m)，9.00(1H，bs)。中間體D(經(jīng)保護(hù))：(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯將含有(4-((2-氯吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(中間體C)(1050mg，2.73mmol)，6-乙基吡嗪-2-胺(437mg，3.55mmol)，及碳酸銫(1333mg，4.09mmol)于1,4-二噁烷(15mL)中的混合物用氮脫氣5分鐘。將含有Pd2(dba)3(125mg，0.136mmol)及BINAP(170mg，0.273mmol)于1,4-二噁烷(5mL)中的溶液加入，并將反應(yīng)混合物于90°C攪拌6小時(shí)。將反應(yīng)混合物冷卻并于室溫?cái)嚢?6小時(shí)，然后用10%MeOH/DCM(25mL)稀釋并經(jīng)由硅藻土塞過(guò)濾，用額外的10%MeOH/DCM(15mL)清洗。將溶劑于真空去除并將粗產(chǎn)物與MeOH(15mL)合并且漿化3小時(shí)。將產(chǎn)生的橙色固體通過(guò)過(guò)濾法分離，然后與MeOH/EtOH(5mL)溶液合并且攪拌72小時(shí)。再次將產(chǎn)生的橙色固體通過(guò)過(guò)濾法分離，然后將丙酮(20mL)加入并將混合物漿化2小時(shí)。將殘留的固體過(guò)濾出來(lái)，并將濾出液蒸發(fā)而得到小標(biāo)題的化合物(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(360mg，27%)；Rt2.6min(方法2)；m/z472(M+H)+(ES+)；1HNMRδ：1.18(3H，t)，1.47(9H，s)，2.63(2H，q)，5.36(2H，s)，6.99(1H，d)，7.06(1H，d)，7.36(1H，d)，7.53-7.63(2H，m)，7.90-8.06(3H，重迭m)，8.29(1H，d)，8.36(1H，m)，8.91(1H，s)，8.96(1H，s)，10.06(1H，s)。中間體D：N-(4-(((4-氨基萘-1-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)-6-乙基吡嗪-2-胺將TFA(1.485mL，19.09mmol)添加至含有(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(中間體D(經(jīng)保護(hù)))(360mg，0.763mmol)于DCM(15mL)中的溶液中，并將反應(yīng)混合物于室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后于真空濃縮。將殘留物與飽和碳酸氫鈉溶液合并且于室溫?cái)嚢?6小時(shí)。將固體過(guò)濾出來(lái)，用乙腈清洗，并于真空干燥而得到呈米黃色固體的小標(biāo)題的化合物N-(4-(((4-氨基萘-1-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)-6-乙基吡嗪-2-胺(200mg，69%)；Rt2.14min(方法2)；m/z372(M+H)+(ES+)；1HNMRδ：1.20(3H，t)，2.64(2H，q)，5.18-5.24(4H，重迭m)，6.59(1H，d)，6.82(1H，d)，7.03(1H，d)，7.41-7.51(2H，重迭m)，7.98-8.01(2H，m)，8.04(1H，m)，8.22-8.29(2H，重迭m)，8.91(1H，s)，10.04(1H，s)。1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲于40°C，將三乙胺(0.013mL，0.093mmol)添加至含有(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苯酯(中間體B)(0.042g，0.121mmol)及N-(4-(((4-氨基萘-1-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)-6-乙基吡嗪-2-胺(中間體D)(0.093g，0.250mmol)于THF(1.5mL)中的溶液中。將反應(yīng)混合物于40°C攪拌40分鐘，然后冷卻至室溫并攪拌3天，然后于真空濃縮。將粗產(chǎn)物通過(guò)硅膠色譜法(12g柱，0至5%MeOH/DCM)純化而得到灰白色-褐色的固體。將產(chǎn)物通過(guò)制備型HPLC(Gilson，酸性(0.1%甲酸)，酸性，WatersX-SelectPrep-C18，5μm，19x50mm柱，45-75%MeCN/水)再純化而得到呈灰白色固體的標(biāo)題化合物1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲(0.029g，49%)；Rt2.26min(方法1)；m/z627(M+H)+(ES+)，625(M-H)-(ES-)；1HNMRδ：1.18(3H，t)，1.28(9H，s)，2.40(3H，s)，2.63(2H，q)，5.36(2H，s)，6.36(1H，s)，7.02(1H，d)，7.07(1H，dd)，7.37(2H，m)，7.45(2H，m)，7.56-7.67(3H，重迭m)，7.94(1H，m)，7.99(1H，s)，8.02(1H，s)，8.30(1H，d)，8.39(1H，m),8.60(1H，s)，8.81(1H，s)，8.92(1H，s)，10.08(1H，s)。實(shí)施例1B：1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲(不同批次)于22°C，將1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲(10.0g)于乙腈(770mL)中攪拌。將非均相混合物以3°C/分鐘的速率加熱至回流溫度并維持回流2.5小時(shí)。將混合物加晶種1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲(100mg)。將混合物于18小時(shí)期間線性冷卻至20°C然后再次加熱至回流溫度并回流2小時(shí)然后于18小時(shí)期間線性冷卻至22°C。將固體產(chǎn)物過(guò)濾出來(lái)，用乙腈(77mL)清洗并于45°C真空干燥18小時(shí)而得到1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲(8.73g)。實(shí)施例2A：1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲馬來(lái)酸鹽(2型)中間體C：(4-((2-氯吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯將乙腈(420mL)添加至2-氯-4-(氯甲基)吡啶(1.05eq，59.5g)中，并將混合物于20°C攪拌。將(4-羥基萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(90.8g)添加至混合物中然后將碳酸鉀(72.6g)加入。將非均相混合物以1.0K/分鐘的速率加熱至55°C。將混合物于55°C攪拌16小時(shí)然后將反應(yīng)混合物冷卻至22°C。將水(1260mL)于30分鐘內(nèi)加入并將混合物于22°C攪拌30分鐘。將沉淀過(guò)濾出來(lái)并用200mL水清洗2次。將產(chǎn)物于50°C真空干燥20小時(shí)而得到(4-((2-氯吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(100.0g，90.6%)。中間體D(經(jīng)保護(hù))：(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯將二噁烷(125mL)添加至(4-((2-氯吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(中間體C)(9.6g)中并將混合物于20°C攪拌。于20°C，將碳酸銫(2eq，16.3g)及2-氨基-6-乙基吡嗪(1.5eq，4.8g)添加至該攪拌的混合物中。將氬氣吹掃通過(guò)反應(yīng)混合物。將三（二亞芐基丙酮）二鈀(0)(0.05eq，1.14g)及外消旋BINAP(0.10eq，1.56g)添加至反應(yīng)混合物中。于20°C，將混合物再攪拌15分鐘。將混合物以1.5K/分鐘的速率加熱至90°C，然后于90°C攪拌12小時(shí)。將混合物冷卻至20°C并再繼續(xù)攪拌6小時(shí)。將非均相混合物經(jīng)由寅氏鹽過(guò)濾，并將濾出物用二噁烷(兩次5mL)清洗。將濾液于20毫巴真空及50°C濃縮。將殘留物溶解于乙醇(150mL)。發(fā)生了自發(fā)結(jié)晶。將非均相混合物于22°C攪拌3小時(shí)。將沉淀過(guò)濾并用乙醇(10mL)清洗。將產(chǎn)物于50°C真空干燥20小時(shí)而得到(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(9.05g，76.8%)。中間體D：N-(4-(((4-氨基萘-1-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)-6-乙基吡嗪-2-胺將乙腈(200mL)添加至(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)氨基甲酸叔丁酯(中間體D(經(jīng)保護(hù)))(10.5g)中并將非均相混合物于20°C攪拌。將硫酸(4.5eq，5.5mL)于20°C經(jīng)2小時(shí)加入。于20°C，將非均相混合物再攪拌2小時(shí)。于15分鐘期間將氨水(10eq，17mL)添加至該反應(yīng)混合物中并將溫度通過(guò)冷卻而維持于20°C。于20°C，將水(33.4mL)于5分鐘期間添加至該非均相混合物中。于20°C攪拌30分鐘后，將混合物冷卻至5°C并于5°C再攪拌2小時(shí)。將沉淀過(guò)濾出來(lái)并用水(33.4mL)及2-丙醇(18mL)清洗。將產(chǎn)物于50°C真空干燥24小時(shí)而得到N-(4-(((4-氨基萘-1-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)-6-乙基吡嗪-2-胺(6.2g，75%)。1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲將2-甲基四氫呋喃(1809mL)添加至N-(4-(((4-氨基萘-1-基)氧基)甲基)吡啶-2-基)-6-乙基吡嗪-2-胺(中間體D)(41.3g)中并將混合物于20°C攪拌。將(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)氨基甲酸苯酯(1.2eq，51.3g)添加至混合物中。將三乙胺(0.25eq，3.9mL)加入并于20°C將混合物再攪拌10分鐘。將非均相反應(yīng)混合物于30分鐘期間加熱至48°C并維持于48°C達(dá)3.5小時(shí)。于48°C下10分鐘后，該混合物變得均勻并加入晶種1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲(60mg)。將反應(yīng)混合物冷卻至20°C并再攪拌16小時(shí)。將形成的沉淀過(guò)濾出來(lái)并用2-甲基四氫呋喃(兩次139mL)清洗。將產(chǎn)物于45°C真空干燥18小時(shí)而得到1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲(54.1g，77.5%)。1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲馬來(lái)酸鹽(2型)于20°C，將2-丁酮(4442mL)添加至1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲(111.04g)中并攪拌。將非均相混合物加熱至65°C并成為均相溶液。將SilicaMetSThiol(金屬清除劑)(5.55g)加入并將該混合物于65°C攪拌30分鐘。將NoritASupra(活性炭)(5.55g)加入并將該混合物于65°C再攪拌20分鐘。將混合物用寅氏鹽趁熱過(guò)濾。將濾出物用溫2-丁酮(1555mL)(60°C)清洗。將2-丁酮(2887mL)添加至濾液中并達(dá)到60°C，同時(shí)攪拌。將馬來(lái)酸(1.0eq，20.56g)溶解于2-丁酮(555mL)中。于65°C，將馬來(lái)酸溶液于80分鐘期間添加至1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲溶液中。在10%的馬來(lái)酸溶液加入后，將混合物添加晶種1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲馬來(lái)酸鹽(2型)。將混合物于60°C持續(xù)攪拌1小時(shí)，然后于6小時(shí)期間以2.3的指數(shù)非線性冷卻至5°C。將沉淀過(guò)濾出來(lái)并用2-丁酮(278mL)清洗兩次。將產(chǎn)物于45°C真空干燥20小時(shí)而得到1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲馬來(lái)酸鹽(2型)(113.8g，86.5%)。實(shí)施例2B：1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲馬來(lái)酸鹽(2型)(不同批次)將2-丁酮(750mL)添加至1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲(7.50g)中并將混合物攪拌。將混合物于20分鐘期間加熱至60°C。將含有馬來(lái)酸(1.39g)于2-丁酮(12mL)中的溶液于5分鐘期間添加至該混合物中。約加入一半馬來(lái)酸溶液后發(fā)生自發(fā)結(jié)晶。將混合物于60°C攪拌30分鐘然后于6小時(shí)期間以指數(shù)坡度(指數(shù)=2.3)冷卻至5°C，然后于5°C攪拌30分鐘，然后于30分鐘期間加熱至65°C，然后于65°C攪拌30分鐘，然后于6小時(shí)期間以指數(shù)坡度(指數(shù)=2.3)冷卻至5°C，然后于5°C攪拌30分鐘，然后于30分鐘期間加熱至65°C，然后于65°C攪拌30分鐘，然后于6小時(shí)期間以指數(shù)坡度(指數(shù)=2.3)冷卻至5°C。將產(chǎn)物過(guò)濾出來(lái)并用2-丁酮(50mL)清洗兩次，隨即于45°C真空干燥而得到1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲馬來(lái)酸鹽(2型)(7.0g)。實(shí)施例2C：1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲馬來(lái)酸鹽(1型)于50°C，將1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲馬來(lái)酸鹽(15mg)溶解于THF(100vol.)中并將溫度于50°C和室溫之間循環(huán)24小時(shí)(每一溫度4小時(shí))。然后將溶液保存在冰箱中24小時(shí)，之后將固體物質(zhì)(1型)分離。實(shí)施例2D：1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲馬來(lái)酸鹽(1型)(不同批次)于50°C，將1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲溶解于THF(40vol.)中并將1eq馬來(lái)酸加入。將樣品置于室溫和50℃之間(每一溫度4小時(shí))熟化2天。將固體物質(zhì)(1型)分離。實(shí)施例3：微粉化批次實(shí)施例3A：微粉化形式的1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲微粉化的1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲是通過(guò)將來(lái)自實(shí)施例1B的物質(zhì)于HosokawaAlpineSpiralJetMill50AS(5cm)微粉化設(shè)備(壓力1.0巴)(手動(dòng)進(jìn)料)中進(jìn)行微粉化而制備的。通過(guò)激光衍射使用MalvernMastersizer2000S(分散于水/吐溫80，0.1%w/v)測(cè)定的粒徑體積參數(shù)提供于下表：Dv10(微米)Dv50(微米)Dv90(微米)0.151.5410.76實(shí)施例3B：微粉化形式的1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲馬來(lái)酸鹽2型微粉化的1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲馬來(lái)酸鹽(2型)是通過(guò)將來(lái)自實(shí)施例2B的物質(zhì)于HosokawaAlpineSpiralJetMill50AS(5cm)微粉化設(shè)備(壓力1.0巴)(手動(dòng)進(jìn)料)中進(jìn)行微粉化而制備的。通過(guò)激光衍射使用MalvernMastersizer2000S(分散于水/吐溫80，0.1%w/v)測(cè)定的輸入和輸出物質(zhì)的粒徑體積參數(shù)提供于下表：實(shí)施例4：適用于吸入的，含有1-(3-(叔丁基)-1-(對(duì)甲苯基)-1H-吡唑-5-基)-3-(4-((2-((6-乙基吡嗪-2-基)氨基)吡啶-4-基)甲氧基)萘-1-基)脲游離堿及馬來(lái)酸鹽(2型)的含乳糖的組合物通過(guò)摻混如下成份而制備組合物：*LactohaleLH200**來(lái)源：PeterGreven(級(jí)別：LigamedMF-2V；植物等級(jí))實(shí)施例5：表征及穩(wěn)定性測(cè)試活性成份的物理表征紅外光譜(IR)-微型衰減全反射(微ATR)使用適當(dāng)?shù)奈TR配件來(lái)分析樣品。掃描次數(shù)：32分辨率：1cm-1波長(zhǎng)范圍：4000至400cm-1儀器：ThermoNexus670FTIR光譜儀檢測(cè)器：具有KBr窗的DTGS分光鏡：Ge/KBr微ATR配件：具有Si晶體的HarrickSplitPea實(shí)施例2A物質(zhì)的樣品的紅外光譜示于圖1，反映出實(shí)施例1的馬來(lái)酸鹽的分子結(jié)構(gòu)的振動(dòng)模式。粉末XRD2型物質(zhì)的粉末X-射線衍射(XPD)分析用PANanalytical(Philips)X’PertPROMPD衍射儀進(jìn)行。該儀器配備有CuLFFX-射線管?；衔镤佋诹惚尘皹悠分Ъ苌稀x器參數(shù)：發(fā)生器電壓：45kV發(fā)生器電流強(qiáng)度：40mA幾何：Bragg-Brentano臺(tái)(stage)：旋轉(zhuǎn)器臺(tái)(spinnerstage)測(cè)量條件：掃描模式：連續(xù)掃描范圍：3至50o2θ步長(zhǎng)：0.02o/步計(jì)算時(shí)間：30秒/步旋轉(zhuǎn)器旋轉(zhuǎn)時(shí)間：1秒輻射型：CuKα1型物質(zhì)的粉末X-射線衍射(XPD)分析在BrukerAXSC2GADDS衍射儀上進(jìn)行?；衔锉惠p微地壓在載玻片上。儀器參數(shù)：發(fā)生器電壓：40kV發(fā)生器電流強(qiáng)度：40mA幾何：反射(=Bragg-Brentano)臺(tái)：自動(dòng)化XYZ臺(tái)測(cè)量條件：掃描模式：連續(xù)掃描范圍：3至30o2θ步長(zhǎng)：0.05o/步計(jì)算時(shí)間：120秒輻射型：CuKα檢測(cè)器：HiStar2-維單G?bel多層鏡偶聯(lián)0.3mm的針孔準(zhǔn)直器實(shí)施例2A物質(zhì)樣品的粉末XRD圖示于圖2，顯示無(wú)鹵素存在的衍射峰，表明化合物作為結(jié)晶產(chǎn)物存在。該XRD圖為結(jié)晶多晶型物2型的特征。實(shí)施例2D物質(zhì)樣品的粉末XRD圖示于圖3，顯示無(wú)鹵素存在的衍射峰，表明化合物作為結(jié)晶產(chǎn)物存在。該XRD圖為結(jié)晶多晶型物1型的特征。差示掃描量熱(DSC)將約3mg測(cè)試化合物轉(zhuǎn)移至標(biāo)準(zhǔn)鋁TA-儀器樣品皿中。將樣品皿用適當(dāng)蓋子密封并用裝備有RCS冷卻單元的TA-InstrumentsQ1000MTDSC來(lái)記錄DSC曲線。使用下列參數(shù)：起始溫度：25°C加熱速率：10°C/分鐘最終溫度：300°C氮流：50mL/分鐘實(shí)施例2A物質(zhì)樣品的DSC曲線示于圖4，顯示產(chǎn)物于約198.6°C熔化并分解(2型)。熱重分析(TGA)將測(cè)試化合物轉(zhuǎn)移至鋁樣品皿中。用TAInstrumentsQ500熱重儀記錄熱重曲線。使用下列參數(shù)：起始溫度：室溫加熱速率：20°C/min分辨率：4最終條件：300°C或<80[(w/w)%]實(shí)施例2A物質(zhì)樣品的TGA圖示于圖5。由室溫至高達(dá)175°C的溫度范圍內(nèi)沒(méi)有重量損失的記錄。高于175°C的重量損失是由于產(chǎn)物的蒸發(fā)和分解。動(dòng)態(tài)蒸氣吸附(DVS)將大約20mg的測(cè)試化合物轉(zhuǎn)移進(jìn)行SMS動(dòng)態(tài)蒸氣吸附并記錄于25°C時(shí)相對(duì)于大氣濕度的重量變化。使用下列參數(shù)：干燥：在干燥氮?dú)庀?0min平衡：60min/步驟。RH(%)測(cè)量點(diǎn)：第一組：5,10,20,30,40,50,60,70,80,90,95,90,80,70,60,50,40,30,20,10,5第二組：10,20,30,40,50,60,70,80,90,95,90,80,70,60,50,40,30,20,10,5,0DVS測(cè)試用實(shí)施例2A物質(zhì)的樣品進(jìn)行(參見(jiàn)圖6和7)。在最初的干燥步驟期間，記錄的重量損失為0.3%。該產(chǎn)物沒(méi)有顯示吸濕。DVS之后的產(chǎn)物通過(guò)XRD及IR進(jìn)行研究且試驗(yàn)前后保持在相同的固體狀態(tài)形式(數(shù)據(jù)未顯示)。沒(méi)有觀察到鹽的解離跡象。掃描電子顯微鏡(SEM)對(duì)于SEM實(shí)驗(yàn)，在PhenomPro掃描電子顯微鏡上收集數(shù)據(jù)。使用導(dǎo)電雙面膠帶將少量樣品安裝到鋁樁(stub)上。用濺射涂布機(jī)涂布金薄層(20mA，120sec)。將本發(fā)明化合物的馬來(lái)酸鹽的1型和2型物質(zhì)的樣品通過(guò)SEM檢測(cè)。1型產(chǎn)物具有針樣形態(tài)。2型產(chǎn)物具有平板樣形態(tài)。2型的平板樣形態(tài)較1型的針樣形態(tài)更適合制備吸入產(chǎn)品?；钚猿煞莸奈锢肀碚鹘Y(jié)果概述根據(jù)XRD，測(cè)試物質(zhì)為結(jié)晶，并且在約198.6°C熔化并分解。于室溫和175°C之間通過(guò)TGA未觀察到重量損失。該物質(zhì)顯示不吸濕。沒(méi)有該鹽的固態(tài)轉(zhuǎn)化或解離的證據(jù)。這些特性證實(shí)式(I)化合物馬來(lái)酸鹽適合作為候選藥物。微粉化形式的活性成份的物理表征將實(shí)施例3B物質(zhì)的樣品通過(guò)IR、粉末XRD、DSC、TGA及DVS，依照上述對(duì)實(shí)施例2A物質(zhì)所述的相似方法進(jìn)行研究。IR及粉末XRD結(jié)果基本相同(數(shù)據(jù)未顯示)。根據(jù)XRD，測(cè)試物質(zhì)為結(jié)晶，并且根據(jù)DSC在約194.6°C熔化并分解。該物質(zhì)顯示不吸濕(數(shù)據(jù)未顯示)。沒(méi)有該鹽的固態(tài)轉(zhuǎn)化或解離的證據(jù)(數(shù)據(jù)未顯示)。這些特性證實(shí)了微粉化形式的式(I)化合物馬來(lái)酸鹽適合作為候選藥物。物理穩(wěn)定性測(cè)試–乳糖共混物的穩(wěn)定性將實(shí)施例4a、4b及4c的組合物于40°C/75%RH，50°C/80%RH及50°C/環(huán)境RH的條件下儲(chǔ)存3、6及13周。于時(shí)間零點(diǎn)及三個(gè)時(shí)間點(diǎn)獲得XRD圖及IR光譜(測(cè)試參數(shù)與上述活性成份表征所述的相同)。在時(shí)間零點(diǎn)和任何時(shí)間點(diǎn)之間都沒(méi)有觀察到XRD圖或IR光譜的相關(guān)差異(數(shù)據(jù)未顯示)。未觀察到該鹽的固態(tài)形式變化或解離?；瘜W(xué)穩(wěn)定性測(cè)試-活性成份及共混物的穩(wěn)定性用于降解測(cè)定的UPLC方法將樣品用溶劑混合物(DMSO/水80：20)(7mL)于10mL小瓶中萃取。使用下列參數(shù)進(jìn)行UPLC色譜法：柱：SupelcoAscentisExpressC18，150mm長(zhǎng)x3.0mmi.d.，2.7μm粒徑柱溫度：30°C自動(dòng)進(jìn)樣器溫度：5°C流速：0.40mL/min流動(dòng)相：溶劑A：10mM醋酸銨(0.771g/L)+0.1%v/v三氟醋酸/水溶劑B：乙腈/異丙醇70：30(v/v)梯度：分析運(yùn)行時(shí)間：36min數(shù)據(jù)收集時(shí)間：30min注入體積：5μL波長(zhǎng)：于200和400nm之間掃描用來(lái)計(jì)算含量均勻度的波長(zhǎng)：334.0nm實(shí)施例4d、4e、4f、4g、4h及4i的組合物于50°C/75%RH，60°C/30%RH，60°C/50%RH，70°C/10%RH，70°C/75%RH及80°C/50%RH條件下儲(chǔ)存14和30天。在時(shí)間零點(diǎn)及時(shí)間點(diǎn)7，14及30天通過(guò)UPLC測(cè)量降解，結(jié)果示于圖8，圖片A至F。含有活性成份馬來(lái)酸鹽2型的組合物的總降解百分比總是比含有活性成份游離堿的等價(jià)的組合物低，說(shuō)明馬來(lái)酸鹽2型在這些制劑中更穩(wěn)定。這些制劑中，含有活性成份馬來(lái)酸鹽2型的組合物在較高濃度的總降解百分比低于含有活性成份馬來(lái)酸鹽2型的組合物在較低濃度的總降解百分比。實(shí)施例1B及實(shí)施例2B物質(zhì)的類似研究中(即未微粉化和未共混的物質(zhì))，樣品于50oC/75%RH，60°C/50%RH，70°C/10%RH，70°C/75%RH及80°C/50%RH的條件下儲(chǔ)存至多30天，得到類似的定性結(jié)果，即，馬來(lái)酸鹽的總降解百分比總是低于游離堿(數(shù)據(jù)未顯示)。由這些結(jié)果看來(lái)，本發(fā)明化合物的馬來(lái)酸鹽(單獨(dú)及與乳糖組合)比游離堿形式更加化學(xué)穩(wěn)定。實(shí)施例6：生物測(cè)試生物測(cè)試的實(shí)驗(yàn)方法酶抑制分析本文所公開(kāi)化合物的酶抑制活性通過(guò)FRET使用標(biāo)記有供體及受體熒光團(tuán)的合成肽來(lái)測(cè)定(Z-LYTE，LifeTechnologies，Paisley，UK)。p38MAPKα酶抑制本發(fā)明化合物對(duì)抗p38MAPKα同工型的抑制活性(MAPK14：LifeTechnologies)通過(guò)測(cè)定p38MAPKα下游分子MAPKAP-K2的靶標(biāo)肽的活化/磷酸化水平而間接地評(píng)估。該酶(40ng/mL，2.5μL)與測(cè)試化合物(2.5μL，以下任一濃度：40μg/mL，12μg/mL，4μg/mL，1.2μg/mL，0.4μg/mL，0.12μg/mL，0.04μg/mL，0.012μg/mL，0.004μg/mL或0.0012μg/mL)于室溫培養(yǎng)2小時(shí)。然后將FRET肽(8μM，2.5μL)及p38α非活性靶標(biāo)MAPKAP-K2(LifeTechnologies，2000ng/mL)，及適當(dāng)?shù)腁TP溶液(2.5μL，40μM)添加至酶/化合物混合物中并于室溫培養(yǎng)1小時(shí)。在熒光微量讀板器(EnVision，PerkinElmer，Waltham，MA，USA)中檢測(cè)之前的1小時(shí)添加顯影劑(蛋白酶，5μL)。p38MAPKγ酶抑制本發(fā)明化合物對(duì)抗p38MAPKγ(MAPK12：LifeTechnologies)的抑制活性通過(guò)測(cè)量靶標(biāo)肽的活化/磷酸化水平而評(píng)估。將酶(800ng/mL，2.5μL)與測(cè)試化合物(2.5μL，以下任一濃度：40μg/mL，12μg/mL，4μg/mL，1.2μg/mL，0.4μg/mL，0.12μg/mL，0.04μg/mL，0.012μg/mL，0.004μg/mL或0.0012μg/mL)于室溫培養(yǎng)2小時(shí)。然后將FRET肽(8μM，2.5μL)，及適當(dāng)ATP溶液(2.5μL，400μM)添加至酶/化合物混合物中并于室溫培養(yǎng)1小時(shí)。在熒光微量讀板器(EnVision，PerkinElmer)中檢測(cè)前的1小時(shí)添加顯影劑(蛋白酶，5μL)。Hck，c-Src及Syk酶抑制本發(fā)明化合物對(duì)抗Hck、c-Src及Syk酶(LifeTechnologies)的抑制活性以前文所描述的類似方式進(jìn)行評(píng)估。將相關(guān)的酶(分別為1000ng/mL，1400ng/mL或2000ng/mL，2.5μL)與測(cè)試化合物(40μg/mL，12μg/mL，4μg/mL，1.2μg/mL，0.4μg/mL，0.12μg/mL，0.04μg/mL，0.012μg/mL，0.004μg/mL或0.0012μg/mL，各2.5μL)于室溫培養(yǎng)2小時(shí)。然后將FRET肽(8μM，2.5μL)，及適當(dāng)?shù)腁TP溶液(2.5μL，對(duì)于c-Src為800μM的ATP，對(duì)于HCK及Syk為60μM的ATP)添加至酶/化合物混合物中并于室溫培養(yǎng)1小時(shí)。在熒光微量讀板器(EnVision，PerkinElmer)中檢測(cè)前1小時(shí)添加顯影劑(蛋白酶，5μL)。GSK3α酶抑制本發(fā)明化合物對(duì)抗GSK3α酶同工型(LifeTechnologies)的抑制活性以前文所述的類似方式來(lái)評(píng)估。將GSK3α蛋白質(zhì)(500ng/mL，2.5μL)與測(cè)試化合物(2.5μL，以下任一濃度：40μg/mL，12μg/mL，4μg/mL，1.2μg/mL，0.4μg/mL，0.12μg/mL，0.04μg/mL，0.012μg/mL，0.004μg/mL或0.0012μg/mL)于室溫培養(yǎng)2小時(shí)。然后將FRET肽(8μM，2.5μL)(其為GSK3α的磷酸化靶標(biāo))及ATP(40μM，2.5μL)添加至酶/化合物混合物中并將產(chǎn)生的混合物于室溫培養(yǎng)1小時(shí)。在熒光微量讀板器(EnVision，PerkinElmer)中檢測(cè)前1小時(shí)添加顯影劑(蛋白酶，5μL)。所有情況中，該位點(diǎn)特異性的蛋白酶僅裂解未磷酸化的肽并消除FRET信號(hào)。各反應(yīng)的磷酸化水平使用香豆素發(fā)射(供體)與熒光素發(fā)射(受體)的比率來(lái)計(jì)算，其中低比率表示高的磷酸化水平而高比率表示低的磷酸化水平。相對(duì)于未抑制的對(duì)照來(lái)計(jì)算各反應(yīng)的抑制百分比，然后由濃度-反應(yīng)曲線來(lái)計(jì)算50%抑制濃度(IC50值)。細(xì)胞分析(使用于實(shí)施例中)使用下列細(xì)胞分析以評(píng)估本發(fā)明化合物且結(jié)果列于下文。d-U937細(xì)胞中LPS誘導(dǎo)的TNFα/IL-8釋放將U937細(xì)胞，人類單核細(xì)胞系，通過(guò)與PMA(100-200ng/mL)培養(yǎng)48至72小時(shí)而分化成巨噬細(xì)胞型細(xì)胞。將細(xì)胞與最終濃度的測(cè)試化合物預(yù)培養(yǎng)2小時(shí)，然后用LPS(0.1μg/mL；來(lái)自E.Coli：O111：B4，Sigma)刺激4小時(shí)。收集上層清液，通過(guò)三明治ELISA(Duo-set，R&Dsystems)以測(cè)定TNFα及IL-8濃度。以在各濃度的測(cè)試化合物下由10μg/mL的BIRB796獲得的結(jié)果與載體對(duì)照相比所得的百分比計(jì)算TNFα產(chǎn)生的抑制。相對(duì)50%有效濃度(REC50)由得到的濃度-反應(yīng)曲線來(lái)確定。通過(guò)與載體對(duì)照相比較計(jì)算各濃度的測(cè)試化合物下的IL-8產(chǎn)生的抑制。50%抑制濃度(IC50)由得到的濃度-反應(yīng)曲線來(lái)確定。BEAS2B細(xì)胞中PolyI：C誘導(dǎo)的ICAM-1表達(dá)PolyI：C作為簡(jiǎn)單的RNA病毒模擬物用于這些研究中。PolyI：C-Oligofectamine混合物(2%Oligofectamine±1μg/mLPolyI：C，25μL；分別來(lái)自LifeTechnologies和InvivogenLtd.,SanDiego，CA)轉(zhuǎn)染至BEAS2B細(xì)胞(人類支氣管上皮細(xì)胞，ATCC)中。將細(xì)胞與最終濃度的測(cè)試化合物預(yù)培養(yǎng)2小時(shí)并通過(guò)基于細(xì)胞的ELISA來(lái)測(cè)定細(xì)胞表面上的ICAM-1表達(dá)水平。于polyI：C轉(zhuǎn)染后18小時(shí)的時(shí)間點(diǎn)，將細(xì)胞用4%甲醛/PBS(100μL)固定，然后通過(guò)添加含有0.1%疊氮化鈉及1%過(guò)氧化氫的清洗緩沖液(100μL，0.05%吐溫/PBS：PBS-吐溫)猝滅內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。用清洗緩沖液(3x200μL)清洗細(xì)胞。用5%奶/PBS-吐溫(100μL)阻斷孔1小時(shí)后，將細(xì)胞與抗人類ICAM-1抗體(50μL；CellSignalingTechnology，Danvers，MA)/1%BSAPBS于4°C培養(yǎng)過(guò)夜。將細(xì)胞用PBS-吐溫(3x200μL)清洗并與第二抗體(100μL；HRP-共軛抗兔IgG，DakoLtd.,Glostrup，Denmark)培養(yǎng)。然后將細(xì)胞與底物(50μL)培養(yǎng)2-20min，接著添加終止溶液(50μL，1NH2SO4)。通過(guò)使用分光光度計(jì)讀取相對(duì)于參考波長(zhǎng)655nm的450nm的吸光度以檢測(cè)ICAM-1信號(hào)。然后，將細(xì)胞用PBS-吐溫(3x200μL)清洗，在用結(jié)晶紫染色(50μL的2%的PBS溶液)并用1%的SDS的PBS溶液(100μL)洗脫后通過(guò)讀取于595nm的吸光度而確定各孔的總細(xì)胞數(shù)目。所測(cè)得的OD450-655讀數(shù)通過(guò)除以各孔的OD595讀數(shù)而針對(duì)細(xì)胞數(shù)進(jìn)行校正。于各濃度的測(cè)試化合物下，通過(guò)與載體對(duì)照相比較而計(jì)算ICAM-1表達(dá)的抑制。50%抑制濃度(IC50)由所得到的濃度-反應(yīng)曲線來(lái)確定。細(xì)胞有絲分裂分析將來(lái)自健康個(gè)體的外周血液?jiǎn)魏思?xì)胞(PBMC)使用密度梯度(Histopaque?-1077，Sigma-Aldrich，Poole，UK)由全血(Quintiles，London，UK)中分離。隨即將PBMC(每一樣品中三百萬(wàn)個(gè)細(xì)胞)用2%PHA(Sigma-Aldrich，Poole，UK)處理48小時(shí)，接著暴露于各種濃度的測(cè)試化合物20小時(shí)。在收集前2小時(shí)，將PBMC用地美可辛(0.1μg/mL；LifeTechnologies，Paisley，UK,)處理以捕獲分裂中期的細(xì)胞。為了觀察有絲分裂的細(xì)胞，將PBMC透化并通過(guò)加入Intraprep(50μL；BeckmanCoulter，F(xiàn)rance)而固定，并用抗磷酸化組蛋白3(0.26ng/L；#9701；CellSignalling)及碘化丙啶(1mg/mL；Sigma-Aldrich)如前所述來(lái)染色(MuehlbauerP.A.etal.,MutationRes.,2003，537，117-130)。使用ATTUNE流式細(xì)胞儀(LifeTechnologies)觀察熒光，選通淋巴細(xì)胞。計(jì)算各處理相對(duì)于載體(0.5%DMSO)處理的有絲分裂抑制百分比。測(cè)試化合物對(duì)于細(xì)胞存活力的影響：MTT分析在兩個(gè)方案中將經(jīng)分化的U937細(xì)胞與各測(cè)試化合物(最終濃度10μg/mL，于200μL下述介質(zhì)中)預(yù)培養(yǎng)：第1個(gè)方案-于5%FCSRPMI1640介質(zhì)中預(yù)培養(yǎng)4小時(shí)，第2個(gè)方案-于10%FCSRPMI1640介質(zhì)中預(yù)培養(yǎng)24小時(shí)。將上層清液用新的介質(zhì)(200μL)替換并將MTT儲(chǔ)備溶液(10μL，5mg/mL)添加至各孔中。培養(yǎng)1小時(shí)后，將介質(zhì)去除，將DMSO(200μL)添加至各孔中并將板輕輕地?fù)u動(dòng)1小時(shí)后于550nm讀取吸光度。計(jì)算各孔中相對(duì)于載體(0.5%DMSO)處理的細(xì)胞存活力的損失百分比。結(jié)果，藥物處理相對(duì)于載體的細(xì)胞存活力的明顯增加表示為負(fù)百分比。來(lái)自COPD患者的經(jīng)LPS-處理的痰液巨噬細(xì)胞中的細(xì)胞因子生成COPD患者使用超聲霧化器(Devilbiss，Carthage，MO)潮式呼吸5分鐘，吸入3%(w/v)高滲鹽水的霧化溶液。此步驟最多重復(fù)3次直到得到足夠的痰液。用旋渦混合器將該痰液樣品于0.02%v/v二硫蘇糖醇(DTT)溶液中均質(zhì)化并劇烈混合。將樣品再懸浮于PBS(40mL)中，接著以1500rpm于4°C離心10分鐘而得到痰液細(xì)胞團(tuán)。將該細(xì)胞團(tuán)用PBS(40mL)清洗。然后將痰液細(xì)胞再懸浮于4mL巨噬細(xì)胞無(wú)血清介質(zhì)(巨噬細(xì)胞-SFM，Lifetechnologies，含有20U/mL青霉素，0.02mg/mL鏈霉素及5μg/mL兩性霉素B)中并接種至高結(jié)合(highbound)96孔板上，接著于37°C及5%CO2下培養(yǎng)1小時(shí)以允許巨噬細(xì)胞附著至板的底部。將板上的細(xì)胞用新鮮巨噬細(xì)胞-SFM(200μL/孔)清洗以去除嗜中性粒細(xì)胞及其它被污染的細(xì)胞。將板上的粘附細(xì)胞(主要為痰液巨噬細(xì)胞)用于進(jìn)一步的分析。痰液的誘導(dǎo)在Guys醫(yī)院(GuysHospital)的Quintiles藥物研究單位(QuintilesDrugResearchUnit)進(jìn)行，倫理委員會(huì)的批準(zhǔn)及簽署的知情同意書(shū)由Quintiles獲得。適當(dāng)時(shí)，將1μL含有所說(shuō)明濃度的測(cè)試化合物或參考制品的溶液(0.1μg/mL，0.01μg/mL，或0.001μg/mL)或替代地作為載體對(duì)照的1μLDMSO添加至各個(gè)孔(200μL，介質(zhì)中)并將細(xì)胞培養(yǎng)2小時(shí)。將細(xì)胞用LPS溶液(50μL，最終濃度：1μg/mL)刺激并于37°C及5%CO2下培養(yǎng)18小時(shí)。然后收集上層清液并保持于-80°C。使用適當(dāng)?shù)膌uminex試劑盒測(cè)量所選擇的分析物。將上層清液解凍后，將磁性抗體小球擴(kuò)增(multiplexed)并于96-孔板中與標(biāo)準(zhǔn)背景溶液或適當(dāng)體積的樣品在4°C振搖培養(yǎng)過(guò)夜。每一孔以200μL由試劑盒所提供的清洗緩沖液用磁性洗板器清洗兩次后，將小球于室溫與試劑盒所提供的生物素結(jié)合抗體溶液振搖培養(yǎng)1小時(shí)。將鏈霉親和素溶液于室溫振搖添加30分鐘。各孔用200μL清洗緩沖液清洗后，將小球再懸浮于鞘液(150μL)中并立刻分析。用XcelFit軟件以4或5-參數(shù)方程式使用各標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)計(jì)算上層清液的各分析物的濃度。通過(guò)與載體對(duì)照相比較計(jì)算各濃度下各細(xì)胞因子生成的抑制。鼻病毒誘導(dǎo)的IL-8釋放人類鼻病毒RV16得自AmericanTypeCultureCollection(Manassas，VA)。通過(guò)用HRV感染MRC5細(xì)胞直到80%細(xì)胞產(chǎn)生病變從而生成病毒儲(chǔ)備液。將BEAS2B細(xì)胞用HRV以1.2的MOI感染，并于33°C輕微振蕩下培養(yǎng)1小時(shí)以促進(jìn)吸收。然后將細(xì)胞用PBS清洗，將新鮮介質(zhì)加入并將細(xì)胞再培養(yǎng)72小時(shí)。收集上層清液以供使用DuosetELISA開(kāi)發(fā)試劑盒(R&D系統(tǒng)，Minneapolis，MN)分析IL-8濃度。HRV感染前2小時(shí)加入化合物，感染后1小時(shí)洗出未感染的HRV。細(xì)胞分析（在實(shí)施例中未采用)下列細(xì)胞分析可用來(lái)評(píng)估本發(fā)明的化合物：鼻病毒誘導(dǎo)的IL-8釋放(上述方法的變化)及ICAM-1表達(dá)人類鼻病毒RV16得自AmericanTypeCultureCollection(Manassas，VA)。通過(guò)用HRV感染Hela細(xì)胞直到80%細(xì)胞產(chǎn)生病變從而生成病毒儲(chǔ)備液。BEAS2B細(xì)胞用HRV以5的MOI感染，并于33°C輕微振蕩培養(yǎng)1至2小時(shí)以促進(jìn)吸收。然后將細(xì)胞用PBS清洗，將新鮮介質(zhì)加入并將細(xì)胞再培養(yǎng)72小時(shí)。收集上層清液以供使用DuosetELISA開(kāi)發(fā)試劑盒(R&D系統(tǒng)，Minneapolis，MN)分析IL-8濃度。細(xì)胞表面ICAM-1表達(dá)的水平通過(guò)基于細(xì)胞的ELISA來(lái)測(cè)定。感染后72小時(shí)，將細(xì)胞用4%甲醛/PBS固定。通過(guò)添加0.1%疊氮化鈉及1%過(guò)氧化氫猝滅內(nèi)源性過(guò)氧化物酶之后，將孔用清洗緩沖液(0.05%吐溫/PBS：PBS-吐溫)清洗。用5%奶/PBS-吐溫阻斷孔1小時(shí)后，將細(xì)胞與抗人類ICAM-1抗體/5%BSAPBS-吐溫(1：500)培養(yǎng)過(guò)夜。將孔用PBS-吐溫清洗并與第二抗體(HRP-共軛抗兔IgG，DakoLtd.)培養(yǎng)。通過(guò)添加底物并使用分光光度計(jì)以參考波長(zhǎng)655nm讀取450nm的讀數(shù)以檢測(cè)ICAM-1信號(hào)。然后用PBS-吐溫清洗孔，在結(jié)晶紫染色和用1%SDS溶液洗脫后通過(guò)讀取595nm的吸光度測(cè)定每孔的總細(xì)胞數(shù)。測(cè)得的OD450-655讀數(shù)通過(guò)除以各孔的OD595讀數(shù)從而針對(duì)細(xì)胞數(shù)進(jìn)行校正。HRV感染前2小時(shí)加入化合物，感染后1至2小時(shí)洗出未感染的HRV。PBMC細(xì)胞中LPS誘導(dǎo)的TNFα/IL-8釋放將來(lái)自健康個(gè)體的外周血液?jiǎn)魏思?xì)胞(PBMC)用密度梯度(Lymphoprep，Axis-ShieldHealthcare)從全血中分離。在標(biāo)準(zhǔn)組織培養(yǎng)條件下(37°C,5%CO2)，將PBMC接種于96孔板中并用所需濃度的化合物處理2小時(shí)，然后添加1ng/mLLPS(EscherichiaColi0111:B4，來(lái)自SigmaAldrich)24小時(shí)。收集上層清液用于通過(guò)三明治ELISA(Duo-set,R&D系統(tǒng))測(cè)定TNFα濃度，并在熒光微讀板器(Varioskan?Flash，ThermoFisherScientific)上讀數(shù)。IL-8及TNFα生成的50%抑制(IC50)濃度由劑量反應(yīng)曲線計(jì)算得到。CD3/CD28刺激的PBMC細(xì)胞中IL-2及IFNγ的釋放將來(lái)自健康個(gè)體的PBMC使用密度梯度(Lymphoprep，Axis-ShieldHealthcare)由全血中分離。將細(xì)胞添加至用CD3/CD28單克隆抗體(分別為0.3μg/mLeBioscience及3μg/mLBDPharmingen)混合物預(yù)涂布的96孔板中。然后將所需濃度的化合物添加至孔中并將板置于標(biāo)準(zhǔn)組織培養(yǎng)條件下3天。收集上層清液并通過(guò)三明治ELISA(Duo-set，R&D系統(tǒng))測(cè)定IL-2及IFNγ的釋放。IC50由劑量反應(yīng)曲線來(lái)確定。HT29細(xì)胞中IL-1β誘導(dǎo)的IL-8的釋放將HT29細(xì)胞，人類結(jié)腸腺癌細(xì)胞系，接種于96孔板中(24小時(shí))并用所需濃度的化合物預(yù)處理2小時(shí)，之后添加5ng/mLIL-1β(Abcam)24小時(shí)。收集上層清液，通過(guò)三明治ELISA(Duo-set，R&D系統(tǒng))定量測(cè)定IL-8。IC50由劑量反應(yīng)曲線來(lái)確定。T細(xì)胞增殖將來(lái)自健康個(gè)體的PBMC使用密度梯度(Lymphoprep，Axis-ShieldHealthcare)由全血中分離。首先將淋巴細(xì)胞部分通過(guò)負(fù)磁性細(xì)胞分選而富集CD4+T細(xì)胞，按制造商的說(shuō)明(MiltenyiBiotec130-091-155)進(jìn)行。然后使用微珠用CD45RA+細(xì)胞的正磁性選擇將自然的CD4+T細(xì)胞分離，按制造商的說(shuō)明(130-045-901)進(jìn)行。將細(xì)胞以每孔2x105個(gè)細(xì)胞在100μLRPMI/10%FBS中接種至96孔平底板上(CorningCostar)。將25μL測(cè)試化合物在標(biāo)準(zhǔn)介質(zhì)中稀釋至適當(dāng)濃度(8x最終濃度)且添加至板的重復(fù)的孔中以達(dá)到0.03ng/mL–250ng/mL劑量反應(yīng)范圍。加入DMSO作為陰性對(duì)照。將板預(yù)培養(yǎng)2小時(shí)，之后用1μg/mL抗-CD3(OKT3；eBioscience)來(lái)刺激。72小時(shí)后，將各孔的介質(zhì)替換為150μL含有10μMBrdU(Roche)的新鮮介質(zhì)。16小時(shí)后，將上層清液去除，將板干燥并通過(guò)添加100μL固定/變性溶液至各孔20分鐘而將細(xì)胞固定，根據(jù)制造商的說(shuō)明(Roche)進(jìn)行。將板用PBS清洗一次，然后添加抗-BrdU檢測(cè)抗體，并于室溫培養(yǎng)90分鐘。然后將板用供應(yīng)的清洗緩沖液輕輕地清洗三次，通過(guò)添加100μL底物溶液顯影。通過(guò)添加50μL的1MH2SO4停止該反應(yīng)，并于450nm在讀板器(Varioskan?Flash，ThermoFisherScientific)上讀取吸光度。IC50由劑量反應(yīng)曲線來(lái)確定。人類活檢分析腸粘膜活檢得自IBD患者的結(jié)腸的炎癥區(qū)。將活檢材料切成小片(2-3mm)并于無(wú)血清介質(zhì)中在5%CO2/95%O2氣氛中于37°C置于器官培養(yǎng)室中的鋼網(wǎng)格上。將DMSO對(duì)照或所需濃度的測(cè)試化合物添加至組織并于器官培養(yǎng)室中培養(yǎng)24小時(shí)。收集上層清液以通過(guò)R&DELISA來(lái)測(cè)定IL-6，IL-8，IL-1β及TNFα水平。相對(duì)于對(duì)DMSO對(duì)照(100%)測(cè)得的細(xì)胞因子釋放來(lái)計(jì)算測(cè)試化合物的細(xì)胞因子釋放抑制百分比。來(lái)自IBD患者的CD3/CD28刺激的LPMC細(xì)胞中的IL-2及IFNγ的釋放如下將鼓膜中層單核細(xì)胞(LPMC)由手術(shù)樣品的炎癥IBD粘膜或由手術(shù)樣品的正常粘膜分離并純化：用解剖刀將粘膜由手術(shù)樣品的較深層去除，并切割成3-4mm大小的片段。通過(guò)在磁力攪拌器攪拌下用1mMEDTA(Sigma-Aldrich，Poole，UK)/HBSS(Sigma-Aldrich)清洗組織片段三次而去除上皮，于每次清洗后棄去上層清液。然后于37°C，將樣品用1A型膠原酶(1mg/mL；Sigma-Aldrich)攪拌處理1小時(shí)。然后將得到的細(xì)胞懸浮液用100μm細(xì)胞過(guò)濾器過(guò)濾，清洗兩次，再懸浮于含有10%胎牛血清，100U/mL青霉素及100μg/mL鏈霉素的RPMI-1640介質(zhì)(Sigma-Aldrich)中，并用于細(xì)胞培養(yǎng)。在DMSO對(duì)照或適當(dāng)濃度的化合物存在時(shí)，將新鮮分離的LPMC(2x105細(xì)胞/孔)用1μg/mLα-CD3/α-CD28刺激48小時(shí)。48小時(shí)后，將上層清液去除并通過(guò)R&DELISA來(lái)分析TNFα及IFNγ的存在。相對(duì)于對(duì)DMSO對(duì)照(100%)測(cè)得的細(xì)胞因子釋放來(lái)計(jì)算測(cè)試化合物的細(xì)胞因子釋放抑制百分比。由IBD患者分離的肌成纖維細(xì)胞的細(xì)胞因子釋放的抑制將來(lái)自炎癥IBD粘膜的肌成纖維細(xì)胞如下分離：將粘膜解剖并丟棄，且于37°C，將1mm-大小的粘膜樣品于潮濕的CO2培養(yǎng)箱中在補(bǔ)充有20%FBS，1%非必須氨基酸(Invitrogen，Paisley，UK)，100U/mL青霉素，100μg/mL鏈霉素，50μg/mL慶大霉素，及1μg/mL兩性霉素(Sigma-Aldrich)的Dulbecco’s改良的Eagle’s介質(zhì)(DMEM，Sigma-Aldrich)中培養(yǎng)。將所建立的肌成纖維細(xì)胞群體接種至25cm2培養(yǎng)瓶中并于補(bǔ)充有20%FBS及抗生素的DMEM中培養(yǎng)到至少第4代以提供足夠的量供刺激實(shí)驗(yàn)使用。然后，將肌成纖維細(xì)胞的亞匯合的單層以每孔3x105細(xì)胞接種至12-孔板中并于37°C，5%CO2下在無(wú)血清介質(zhì)中經(jīng)受饑餓24小時(shí)，然后在DMSO對(duì)照或適當(dāng)濃度的化合物存在下培養(yǎng)24小時(shí)。24小時(shí)后，將上層清液移出并通過(guò)R&DELISA分析IL-8及IL-6的存在。相對(duì)于對(duì)DMSO對(duì)照(100%)所測(cè)定的細(xì)胞因子釋放來(lái)計(jì)算測(cè)試化合物的細(xì)胞因子釋放的抑制百分比。人類嗜中性粒細(xì)胞脫粒嗜中性粒細(xì)胞如下由人類外周血液中分離：通過(guò)靜脈穿刺收集血液并通過(guò)添加1：1EDTA：無(wú)菌磷酸鹽緩沖鹽水(PBS，無(wú)Ca+/Mg+)抗凝。加入葡聚糖(3%w/v)(1份葡聚糖溶液至4份血液)并將血液于室溫放置約20分鐘。小心地將上層清液以密度梯度(Lymphoprep，Axis-ShieldHealthcare)分層并離心(15min，2000rpm，無(wú)制動(dòng))。將上層清液吸除并將細(xì)胞團(tuán)塊再懸浮于無(wú)菌鹽水(0.2%)中不超過(guò)60秒(以裂解污染的紅血球)。然后加入10倍體積的PBS并將細(xì)胞離心(5min，1200rpm)。將細(xì)胞再懸浮于HBSS+(Hank’s平衡鹽溶液(不含酚紅)，含有細(xì)胞松弛素B(5μg/mL)及1mMCaCl2)以達(dá)到5x106細(xì)胞/mL。在V-底96孔板的每孔中加入5x104細(xì)胞并與適當(dāng)濃度的測(cè)試化合物(0.3-1000ng/mL)或載體(DMSO，0.5%最終濃度)培養(yǎng)(30min，37°C)。通過(guò)加入fMLP(最終濃度1μM)刺激脫粒，進(jìn)一步培養(yǎng)后(30min，37°C)將細(xì)胞通過(guò)離心(5min，1500rpm)移出并將上層清液轉(zhuǎn)移至平底96孔板。加入等體積的四甲基聯(lián)苯胺(TMB)并于10分鐘后，通過(guò)添加等體積的硫酸(0.5M)而終止反應(yīng)并讀取于450nm的吸光度(減去655nm的背景)。50%抑制濃度(IC50)由所得到的濃度-反應(yīng)曲線來(lái)測(cè)定。細(xì)胞的細(xì)胞毒性試驗(yàn)將5x104TK6細(xì)胞(成淋巴細(xì)胞T細(xì)胞系)在195μL介質(zhì)(補(bǔ)充有10%胎牛血清的RPMI)中添加至96孔板的適當(dāng)數(shù)目的孔中。將5μL的DMSO對(duì)照(最終濃度0.5%v/v)或測(cè)試化合物(最終濃度為5或1μg/mL)添加至孔中并于37°C，5%CO2下培養(yǎng)。24小時(shí)后，將板以1300rpm離心3分鐘并將上層清液棄去。然后將細(xì)胞再懸浮于7.5μg/mL碘化丙啶(PI)/PBS中。15分鐘后，將細(xì)胞通過(guò)流式細(xì)胞儀(BDaccuri)來(lái)分析。%存活力以基于DMSO對(duì)照歸一化的測(cè)試孔中PI陰性的細(xì)胞的百分比計(jì)。體內(nèi)檢查：藥效學(xué)及抗炎活性(用于實(shí)施例中)下列體內(nèi)檢查用于評(píng)估本發(fā)明化合物且結(jié)果如下。小鼠中LPS誘導(dǎo)的嗜中性粒細(xì)胞聚集于指定時(shí)間(2-8小時(shí)內(nèi))，將未禁食的Balb/c小鼠經(jīng)由氣管內(nèi)途徑給予載體或測(cè)試物質(zhì)，之后通過(guò)施用LPS挑戰(zhàn)刺激炎性反應(yīng)。于T=0時(shí)，將小鼠置于暴露室，暴露于LPS(7.0mL，0.5mg/mL的PBS溶液，30min)。再8小時(shí)后，將動(dòng)物麻醉，對(duì)其氣管插管，通過(guò)經(jīng)由氣管導(dǎo)管灌注再由其肺部抽取1.0mL的PBS以提取BALF。用Neubaur血球計(jì)來(lái)測(cè)量BALF樣品中總的及分化的白細(xì)胞計(jì)數(shù)。BALF樣品的細(xì)胞離心涂片通過(guò)于室溫以200rpm離心5分鐘制備，并用DiffQuik染色系統(tǒng)(DadeBehring)染色。將細(xì)胞用油浸式顯微鏡計(jì)數(shù)。BAL中嗜中性粒細(xì)胞數(shù)的數(shù)據(jù)以平均值±S.E.M.(平均值的標(biāo)準(zhǔn)誤差)表示。相對(duì)于載體處理計(jì)算各處理的嗜中性粒細(xì)胞聚集的抑制百分比。香煙煙霧模型將A/J小鼠(雄性，5周大)暴露于香煙煙霧(4%香煙煙霧，用空氣稀釋)30分鐘每天，共11天，使用供小動(dòng)物用的TobaccoSmokeInhalationExperimentSystem(煙草煙霧吸入實(shí)驗(yàn)系統(tǒng))(ModelSIS-CS；SibataScientificTechnology，Tokyo，Japan)進(jìn)行。最后的香煙煙霧暴露后，將測(cè)試物質(zhì)每天一次經(jīng)鼻內(nèi)(35μL的于10%DMSO/PBS中的溶液)給予3天。最后一次給藥后12小時(shí)，將每只動(dòng)物麻醉，氣管插管并收集支氣管肺泡灌洗液(BALF)。使用抗小鼠MOMA2抗體(巨噬細(xì)胞)或抗小鼠7/4抗體(嗜中性粒細(xì)胞)，通過(guò)FACS分析(EPICS?ALTRAII，BeckmanCoulter，Inc.,Fullerton，CA，USA)來(lái)測(cè)定肺泡巨噬細(xì)胞及嗜中性粒細(xì)胞的數(shù)目。將BALF離心并收集上層清液。使用Quantikine?小鼠KCELISA試劑盒(R&D系統(tǒng)，Inc.,Minneapolis，MN，USA)來(lái)定量測(cè)定BALF中角化細(xì)胞化學(xué)引誘物(keratinocytechemoattractant)(KC；CXCL1)的水平。體內(nèi)檢查：藥效學(xué)及抗炎活性(未用于實(shí)施例中)下列體內(nèi)檢查可用來(lái)評(píng)估本發(fā)明的化合物：小鼠中DSS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎在通過(guò)用DSS處理刺激炎性反應(yīng)前一天(-1天)，將未禁食的10-12周大的雄性BDF1小鼠通過(guò)每天兩次的經(jīng)口管飼給予載體、參照物(5-ASA)或測(cè)試化合物。在研究的0天，將DSS(5%w/v)于飲用水中給予，接著B(niǎo)ID給予載體(5mL/kg)，參照物(100mg/kg)或測(cè)試化合物(5mg/kg)7天。該含有DSS的飲用水每3天補(bǔ)充一次。研究期間，將動(dòng)物每天稱重并觀察糞便且根據(jù)糞便稠度來(lái)記錄得分。在+6天處死時(shí)，將大腸取出并記錄長(zhǎng)度及重量。取結(jié)腸部分進(jìn)行MPO分析以測(cè)定嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)或進(jìn)行組織病理學(xué)評(píng)分來(lái)確定疾病嚴(yán)重性。小鼠中TNBS誘導(dǎo)的結(jié)腸炎在通過(guò)用2,4,6-三硝基苯磺酸(TNBS)(15mg/mL，于50%乙醇/50%鹽水中)處理刺激炎性反應(yīng)前一天(-1天)，將未禁食的10-12周大的雄性BDF1小鼠通過(guò)每天兩次的經(jīng)口管飼給予載體(5mL/kg)、參照物(布地縮松2.5mg/kg)或測(cè)試化合物(1、5或50mg/kg)。在研究的0天，將TNBS(200μL)經(jīng)塑料導(dǎo)管經(jīng)結(jié)腸內(nèi)給予，接著B(niǎo)ID給予載體，參照物或測(cè)試化合物2或4天。研究期間，將動(dòng)物每天稱重并觀察糞便且根據(jù)糞便稠度來(lái)記錄得分。在第2天(或第4天)處死時(shí)，將大腸取出并記錄長(zhǎng)度及重量。取結(jié)腸部分進(jìn)行MPO分析以測(cè)定嗜中性粒細(xì)胞浸潤(rùn)或進(jìn)行組織病理學(xué)研究，包括評(píng)分來(lái)確定疾病嚴(yán)重性。小鼠的繼承性轉(zhuǎn)移于研究的第0天，將雌性Balb/C小鼠殺死并取得脾臟以供CD45RBhigh細(xì)胞分離(使用SCIDIBD細(xì)胞分離方案)。然后將大約4x105細(xì)胞/mL的CD45RBhigh細(xì)胞IP注入(100μL/小鼠)雌性SCID動(dòng)物。于研究的第14天，將小鼠稱重并根據(jù)體重隨機(jī)分成治療組。于第21天，將化合物于花生油載體中以下面所列劑量水平及5mL/kg的劑量體積經(jīng)口管飼BID給藥。繼續(xù)處理直到研究的第42天，該時(shí)間點(diǎn)，將動(dòng)物于上午給藥后4小時(shí)進(jìn)行尸檢。記錄結(jié)腸長(zhǎng)度及重量，用作研究的第二終點(diǎn)，測(cè)量結(jié)腸水腫。然后將結(jié)腸分成六個(gè)截面，將其中四個(gè)用于組織病理學(xué)評(píng)分(初步終點(diǎn))，將兩個(gè)均質(zhì)化供細(xì)胞因子分析。所示數(shù)據(jù)為天然(na?ve)動(dòng)物和載體動(dòng)物之間誘導(dǎo)窗口的抑制%，其中，較高的抑制暗示更接近非疾病的天然的表現(xiàn)型。體外及體內(nèi)檢查結(jié)果本發(fā)明化合物(游離堿形式)的體外檢查結(jié)果見(jiàn)以下表2、表3、表4及表5以及圖9。與結(jié)構(gòu)上相關(guān)的參考化合物N-(4-(4-(3-(3-叔丁基-1-對(duì)甲苯基-1H-吡唑-5-基)脲基)萘-1-基氧基)吡啶-2-基)-2-甲氧基乙酰胺(WO2010/112936的實(shí)施例1)對(duì)比，該參考化合物先前已經(jīng)被描述為具有抗病毒功效的有效的抗炎劑，還與熟知的抗炎劑丙酸氟替卡松對(duì)比。表2：測(cè)試化合物的p38MAPKα及γ，HCK，c-Src，Syk及GSK3α酶特性表3：測(cè)試化合物的LPS誘導(dǎo)的TNFα及IL-8釋放及PolyIC誘導(dǎo)的ICAM-表達(dá)的抑制表4：測(cè)試化合物對(duì)細(xì)胞存活力的影響1.細(xì)胞存活力檢查：–ve及+ve分別指在指定的時(shí)間點(diǎn)在10μg/mL下，該值低于和高于無(wú)顯著影響的閾值，所述閾值定義為30%的抑制。2.平均±SEM表5：測(cè)試化合物對(duì)于來(lái)自COPD患者的LPS處理的痰液巨噬細(xì)胞的細(xì)胞因子產(chǎn)生的影響體外及體內(nèi)檢查結(jié)果概述本發(fā)明化合物在體外及體內(nèi)分析中證明了符合良好抗炎活性的特性。其對(duì)于Syk及GSK3α激酶具有很弱的活性(表2和3)。本發(fā)明化合物在測(cè)量其對(duì)于細(xì)胞存活力的影響的分析系統(tǒng)中顯示出顯著較低的活性，表明其很可能比參考化合物具有更優(yōu)良的治療指數(shù)(表4)。本發(fā)明化合物在使用的分析系統(tǒng)中與丙酸氟替卡松相比顯示出更優(yōu)良的抗炎活性(表5)。本發(fā)明化合物顯示HRV誘導(dǎo)的IL-8的劑量依賴性抑制(圖9)。綜上所述，這些結(jié)果顯示本發(fā)明化合物具有與以上公開(kāi)的參考化合物類似的抗炎性質(zhì)且有利地伴有更好的治療指數(shù)。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3