本發(fā)明涉及使得容易將核酸導(dǎo)入到例如細(xì)胞內(nèi)等的陽(yáng)離子性脂質(zhì)、包含該陽(yáng)離子性脂質(zhì)的組合物等。
背景技術(shù)：
：陽(yáng)離子性脂質(zhì)是具有脂質(zhì)親和性區(qū)域和親水性區(qū)域的兩親性分子，所述脂質(zhì)親和性區(qū)域含有一個(gè)或多個(gè)烴基，所述親水性區(qū)域含有至少一個(gè)帶正電的極性首基(headgroup)。陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸等巨大分子通過形成以總電荷計(jì)帶正電的復(fù)合體，使得核酸等巨大分子容易通過細(xì)胞的原生質(zhì)膜進(jìn)入細(xì)胞質(zhì)，因此陽(yáng)離子性脂質(zhì)是有用的?？稍隗w外及體內(nèi)進(jìn)行的該過程作為轉(zhuǎn)染而被人們知曉。專利文獻(xiàn)1～4公開了一種陽(yáng)離子性脂質(zhì)及包含該脂質(zhì)的脂質(zhì)粒子，所述陽(yáng)離子性脂質(zhì)對(duì)于用于在體內(nèi)將核酸送達(dá)至細(xì)胞內(nèi)而言、以及對(duì)于用于在適于治療疾病的核酸-脂質(zhì)粒子組合物中使用而言是有用的。專利文獻(xiàn)1中公開了例如2,2-二亞油基-4-(2-二甲基氨基乙基)-[1,3]-二氧戊環(huán)(2,2-dilinoleyl-4-(2-dimethylaminoethyl)-[1,3]-dioxolane；DLin-KC2-DMA，結(jié)構(gòu)式如下所示)等陽(yáng)離子性脂質(zhì)，[化學(xué)式1]專利文獻(xiàn)2中公開了例如4-(二甲基氨基)丁酸(6Z,9Z,28Z,31Z)-三十七碳-6,9,28,31-四烯-19-基酯((6Z,9Z,28Z,31Z)-heptatriaconta-6,9,28,31-tetraen-19-yl4-(dimethylamino)butanoate；DLin-MC3-DMA，結(jié)構(gòu)式如下所示)等陽(yáng)離子性脂質(zhì)，[化學(xué)式2]專利文獻(xiàn)3中公開了例如1-甲基-3,3-雙{[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基氧基]甲基}氮雜環(huán)丁烷(1-methyl-3,3-bis{[(9Z,12Z)-octadeca-9,12-diene-1-yloxy]methyl}azetidine，結(jié)構(gòu)式如下所示)等陽(yáng)離子性脂質(zhì)，[化學(xué)式3]專利文獻(xiàn)4中公開了例如二[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基]氨基甲酸2-(1-甲基吡咯烷-2-基)乙基酯(2-(1-methylpyrrolidin-2-yl)ethyldi[(9Z,12Z)-octadeca-9,12-dienyl]carbamate，結(jié)構(gòu)式如下所示)等陽(yáng)離子性脂質(zhì)，[化學(xué)式4]現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)專利文獻(xiàn)1：國(guó)際公開第2010/042877號(hào)專利文獻(xiàn)2：國(guó)際公開第2010/054401號(hào)專利文獻(xiàn)3：國(guó)際公開第2012/108397號(hào)專利文獻(xiàn)4：國(guó)際公開第2014/007398號(hào)技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供使得容易將核酸導(dǎo)入到例如細(xì)胞內(nèi)等的陽(yáng)離子性脂質(zhì)、包含該陽(yáng)離子性脂質(zhì)的組合物等。本發(fā)明涉及以下的(1)～(35)。(1)式(I)表示的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，[化學(xué)式5][式中，R1及R2相同或不同，為碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或者炔基、或C7-C20烷基氧基C1-C3烷基或者C7-C20炔基氧基C1-C3烷基，R3為氫原子、碳原子數(shù)1～3的烷基、式(A)或式(B)，[化學(xué)式6](式(A)中，R4及R5相同或不同，為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，或者R4及R5可以與所鍵合的氮原子一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，n3為2～6的整數(shù))，[化學(xué)式7](式(B)中，R6及R7相同或不同，為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，或者R6及R7可以與所鍵合的氮原子一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，n4為1～6的整數(shù))，n1為0～4的整數(shù)，n2為1～4的整數(shù)(其中，n1為0、n2為1的情況除外)]。(2)如上述(1)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，R1及R2相同或不同，選自由十四烷基、十六烷基、(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基及(Z)-二十二碳-13-烯基組成的組。(3)如上述(1)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，R1及R2相同或不同，選自由(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基及(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基組成的組。(4)如上述(1)～(3)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，R3為碳原子數(shù)1～3的烷基或式(A)。(5)如上述(1)～(4)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，R1及R2相同。(6)如上述(1)～(5)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，n1為1，n2為1～3的整數(shù)。(7)如上述(1)～(5)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，n1及n2均為1。(8)式(I’)表示的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，[化學(xué)式8][式中，R1’及R2’相同或不同，為碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或者炔基、或C7-C20烷基氧基C1-C3烷基、C7-C20鏈烯基氧基C1-C3烷基或者C7-C20炔基氧基C1-C3烷基，R3為氫原子、碳原子數(shù)1～3的烷基、式(A)或式(B)，[化學(xué)式9](式(A)中，R4及R5相同或不同，為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，或者R4及R5可以與所鍵合的氮原子一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，n3為2～6的整數(shù))，[化學(xué)式10](式(B)中，R6及R7相同或不同，為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，或者R6及R7可以與所鍵合的氮原子一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，n4為1～6的整數(shù))，n1為0～4的整數(shù)，n2為1～4的整數(shù)(其中，n1為0、n2為1的情況除外)]。(9)如上述(8)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，R1’及R2’相同或不同，選自由十四烷基、十六烷基、(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基及(Z)-二十二碳-13-烯基組成的組。(10)如上述(8)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，R1’及R2’相同或不同，選自由(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基及(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基組成的組。(11)如上述(8)～(10)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，R3為碳原子數(shù)1～3的烷基或式(A)。(12)如上述(8)～(11)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，R1’及R2’相同。(13)如上述(8)～(12)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，n1為1，n2為1～3的整數(shù)。(14)如上述(8)～(12)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，n1及n2均為1。(15)式(I”)表示的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，[化學(xué)式11][式中，R1’及R2’相同或不同，為碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或者炔基、或C7-C20烷基氧基C1-C3烷基、C7-C20鏈烯基氧基C1-C3烷基或者C7-C20炔基氧基C1-C3烷基，R3’為氫原子、碳原子數(shù)1～3的烷基、羥基C2-C4烷基、C1-C3二烷基氨基C2-C4烷基、式(A)或式(B)，[化學(xué)式12](式(A)中，R4及R5相同或不同，為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，或者R4及R5可以與所鍵合的氮原子一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，n3為2～6的整數(shù))，[化學(xué)式13](式(B)中，R6及R7相同或不同，為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，或者R6及R7可以與所鍵合的氮原子一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，n4為1～6的整數(shù))，n1為0～4的整數(shù)，n2為1～4的整數(shù)(其中，n1為0、n2為1的情況除外)，Z1在所鍵合的每個(gè)碳原子上各自獨(dú)立地為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，Z2在所鍵合的每個(gè)碳原子上各自獨(dú)立地為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基]。(16)如上述(15)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，R1’及R2’相同或不同，選自由十四烷基、十六烷基、(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基及(Z)-二十二碳-13-烯基組成的組。(17)如上述(15)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，R1’及R2’相同或不同，選自由(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基及(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基組成的組。(18)如上述(15)～(17)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，R3’為碳原子數(shù)1～3的烷基或式(A)。(19)如上述(15)～(18)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，R1’及R2’相同。(20)如上述(15)～(19)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，n1為1，n2為1～3的整數(shù)。(21)如上述(15)～(19)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，其中，n1及n2均為1。(22)一種組合物，其包含上述(1)～(21)中任一項(xiàng)所述的陽(yáng)離子性脂質(zhì)及核酸。(23)如上述(22)所述的組合物，其中，所述陽(yáng)離子性脂質(zhì)與所述核酸形成復(fù)合體，或者在所述陽(yáng)離子性脂質(zhì)中組合有中性脂質(zhì)及/或高分子而成的物質(zhì)與所述核酸形成復(fù)合體。(24)如上述(22)所述的組合物，其中，所述陽(yáng)離子性脂質(zhì)與所述核酸形成復(fù)合體，或者在所述陽(yáng)離子性脂質(zhì)中組合有中性脂質(zhì)及/或高分子而成的物質(zhì)與所述核酸形成復(fù)合體，所述組合物含有將所述復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜。(25)如上述(22)～(24)中任一項(xiàng)所述的組合物，其中，核酸為具有利用了RNA干擾(RNAi)的、靶基因表達(dá)抑制作用的核酸。(26)如上述(25)所述的組合物，其中，靶基因是在肝臟、肺、腎臟或脾臟中表達(dá)的基因。(27)使用上述(22)～(26)中任一項(xiàng)所述的組合物將所述核酸導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)的方法。(28)如上述(27)所述的方法，其中，細(xì)胞為哺乳動(dòng)物的肝臟、肺、腎臟或脾臟中的細(xì)胞。(29)如上述(27)或(28)所述的方法，其中，向細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入的方法是通過靜脈內(nèi)施予所述組合物來向細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入的方法。(30)肝臟、肺、腎臟或脾臟相關(guān)疾病的治療方法，包括將上述(26)所述的組合物施予至哺乳動(dòng)物的步驟。(31)如上述(30)所述的方法，其中，施予方法為靜脈內(nèi)施予。(32)一種藥物，用于治療疾病，所述藥物包含上述(25)所述的組合物。(33)如上述(32)所述的藥物，其用于靜脈內(nèi)施予。(34)肝臟、肺、腎臟或脾臟相關(guān)疾病的治療劑，所述治療劑包含上述(26)所述的組合物。(35)如上述(34)所述的肝臟、肺、腎臟或脾臟相關(guān)疾病的治療劑，其用于靜脈內(nèi)施予。通過將包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)及核酸的組合物施予至哺乳動(dòng)物等，能夠?qū)⒃摵怂崛菀椎貙?dǎo)入例如細(xì)胞內(nèi)等。附圖說明[圖1]表示將實(shí)施例21及22中得到的制劑(分別使用了化合物1、2、4～7的制劑)分別以相當(dāng)于0.03mg/kgsiRNA的量施予至小鼠48小時(shí)后的血漿中FactorVII蛋白的濃度?？v軸表示將生理鹽水施予組作為100時(shí)的血漿中FactorVII蛋白的濃度的相對(duì)值。橫軸表示化合物編號(hào)。[圖2]表示將實(shí)施例22中得到的制劑(分別使用了化合物2、4的制劑)分別以相當(dāng)于0.3mg/kgsiRNA的量施予至小鼠48小時(shí)后的血漿中FactorVII蛋白的濃度。縱軸表示將生理鹽水施予組作為100時(shí)的血漿中FactorVII蛋白的濃度的相對(duì)值。橫軸表示化合物編號(hào)。[圖3]表示將實(shí)施例23中得到的制劑(使用了化合物1的制劑)及比較例1中得到的制劑(使用了化合物A的制劑)分別以相當(dāng)于0.3mg/kg和0.03mg/kgsiRNA的量施予至小鼠48小時(shí)后的血漿中FactorVII蛋白的濃度。縱軸表示將生理鹽水施予組作為100時(shí)的血漿中FactorVII蛋白的濃度的相對(duì)值。橫軸表示化合物編號(hào)。具體實(shí)施方式本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)是式(I)、或式(I’)、或式(I”)表示的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，[化學(xué)式14](式(I)中，R1及R2相同或不同，為碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或者炔基、或C7-C20烷基氧基C1-C3烷基或者C7-C20炔基氧基C1-C3烷基，R3為氫原子、碳原子數(shù)1～3的烷基、式(A)或式(B)，[化學(xué)式15](式(A)中，R4及R5相同或不同，為氫原子、碳原子數(shù)1～3的烷基、或者R4及R5可以與所鍵合的氮原子一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，n3為2～6的整數(shù))，[化學(xué)式16](式(B)中，R6及R7相同或不同，為氫原子、碳原子數(shù)1～3的烷基、或者R6及R7可以與所鍵合的氮原子一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，n4為1～6的整數(shù))，n1為0～4的整數(shù)，n2為1～4的整數(shù)(其中，n1為0、n2為1的情況除外))，[化學(xué)式17][式(I’)中，R1’及R2’相同或不同，為碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或者炔基、或C7-C20烷基氧基C1-C3烷基、C7-C20鏈烯基氧基C1-C3烷基或者C7-C20炔基氧基C1-C3烷基，R3為氫原子、碳原子數(shù)1～3的烷基、式(A)或式(B)，[化學(xué)式18](式(A)中，R4及R5相同或不同，為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，或者R4及R5可以與所鍵合的氮原子一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，n3為2～6的整數(shù))，[化學(xué)式19](式(B)中，R6及R7相同或不同，為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，或者R6及R7可以與所鍵合的氮原子一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，n4為1～6的整數(shù))，n1為0～4的整數(shù)，n2為1～4的整數(shù)(其中，n1為0、n2為1的情況除外)][化學(xué)式20][式(I”)中，R1’及R2’相同或不同，為碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或者炔基、或C7-C20烷基氧基C1-C3烷基、C7-C20鏈烯基氧基C1-C3烷基或者C7-C20炔基氧基C1-C3烷基，R3’為氫原子、碳原子數(shù)1～3的烷基、羥基C2-C4烷基、C1-C3二烷基氨基C2-C4烷基、式(A)或式(B)，[化學(xué)式21](式(A)中，R4及R5相同或不同，為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，或者R4及R5可以與所鍵合的氮原子一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，n3為2～6的整數(shù))，[化學(xué)式22](式(B)中，R6及R7相同或不同，為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，或者R6及R7可以與所鍵合的氮原子一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，n4為1～6的整數(shù))，n1為0～4的整數(shù)，n2為1～4的整數(shù)(其中，n1為0、n2為1的情況除外)，Z1在所鍵合的每個(gè)碳原子上各自獨(dú)立地為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，Z2在所鍵合的每個(gè)碳原子上各自獨(dú)立地為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基]。以下，有時(shí)也將式(I)表示的化合物稱為化合物(I)，將式(I’)表示的化合物稱為化合物(I’)，將式(I”)表示的化合物稱為化合物(I”)。對(duì)于其他化學(xué)式編號(hào)的化合物也同樣。作為碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基，可以舉出例如辛基、癸基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、2,6,10-三甲基十一烷基、十五烷基、3,7,11-三甲基十二烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基、6,10,14-三甲基十五烷-2-基、十九烷基、2,6,10,14-四甲基十五烷基、二十烷基、3,7,11,15-四甲基十六烷基、二十一烷基、二十二烷基、二十三烷基、二十四烷基等，優(yōu)選舉出癸基、十二烷基、十四烷基、十六烷基、十八烷基、二十烷基等，更優(yōu)選地舉出十四烷基、十六烷基。作為碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的鏈烯基，只要是含有1個(gè)以上的雙鍵的碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的鏈烯基即可，可以舉出例如(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基、3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基、3,7,11,15-四甲基十六碳-2-烯基、(Z)-二十二碳-13-烯基等，優(yōu)選舉出(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基、(Z)-二十二碳-13-烯基等。作為碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的炔基，只要是含有1個(gè)以上的三鍵的碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的炔基即可，可以舉出例如十二碳-11-炔基、十四碳-6-炔基、十六碳-7-炔基、十六碳-5,7-二炔基、十八碳-9-炔基等。作為C7-C20烷基氧基C1-C3烷基中的C7-C20烷基部分，可以舉出例如庚基、辛基、癸基、十二烷基、十三烷基、十四烷基、2,6,10-三甲基十一烷基、十五烷基、3,7,11-三甲基十二烷基、十六烷基、十七烷基、十八烷基、6,10,14-三甲基十五烷-2-基、十九烷基、2,6,10,14-四甲基十五烷基、二十烷基、3,7,11,15-四甲基十六烷基等，作為C1-C3烷基部分可以舉出與甲基、乙基、丙基等對(duì)應(yīng)的亞烷基。作為C7-C20鏈烯基氧基C1-C3烷基中的C7-C20鏈烯基部分，可以舉出例如(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基、3,7,11-三甲基十二碳-2,6,10-三烯基、3,7,11,15-四甲基十六碳-2-烯基等，優(yōu)選舉出(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基等，作為C1-C3烷基部分可以舉出與甲基、乙基、丙基等對(duì)應(yīng)的亞烷基。作為C7-C20炔基氧基C1-C3烷基中的C7-C20炔基部分，可以舉出例如十二碳-11-炔基、十四碳-6-炔基、十六碳-7-炔基、十六碳-5,7-二炔基、十八碳-9-炔基等，作為C1-C3烷基部分可以舉出甲基、乙基、丙基等。另外，本發(fā)明中，碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的鏈烯基也包含以下基團(tuán)：所述基團(tuán)具有在碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的鏈烯基的雙鍵上在形式上加成亞甲基雙自由基(methylenebiradical)而得的環(huán)丙烷環(huán)。此外，對(duì)于C7-C20鏈烯基氧基C1-C3烷基中的C7-C20鏈烯基部分也同樣。例如，可以舉出與(Z)-十六碳-9-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(8Z,11Z)-十七碳-8,11-二烯基對(duì)應(yīng)的以下的具有環(huán)丙烷環(huán)的基團(tuán)等，[化學(xué)式23][化學(xué)式24]及[化學(xué)式25]作為碳原子數(shù)1～3的烷基，可以舉出甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基等。作為羥基C2-C4烷基中的C2-C4烷基部分，可以舉出與乙基、丙基、丁基等對(duì)應(yīng)的亞烷基。作為C1-C3二烷基氨基C2-C4烷基中的C1-C3烷基部分，可以舉出甲基、乙基、丙基等，它們可以相同或不同。另外，作為C1-C3二烷基氨基C2-C4烷基中的C2-C4烷基部分，可以舉出與乙基、丙基、丁基等對(duì)應(yīng)的亞烷基。作為碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，可以舉出氮雜環(huán)丙烷環(huán)、氮雜環(huán)丁烷環(huán)、吡咯烷環(huán)、哌啶環(huán)、哌嗪環(huán)、氮雜環(huán)庚烷(azepane)環(huán)等。需要說明的是，R1及R2更優(yōu)選相同或不同地為碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基或者鏈烯基、或C7-20烷基氧基C1-C3烷基，進(jìn)一步優(yōu)選相同或不同地為直鏈狀的碳原子數(shù)8～24的鏈烯基。另外，更優(yōu)選R1及R2相同，在此情況下，R1及R2更優(yōu)選為碳原子數(shù)12～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或者炔基，進(jìn)一步優(yōu)選為碳原子數(shù)12～24的直鏈狀的鏈烯基。另外，R1’及R2’更優(yōu)選相同或不同地為碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基或者鏈烯基、或C7-20烷基氧基C1-C3烷基或者C7-C20鏈烯基氧基C1-C3烷基，進(jìn)一步優(yōu)選相同或不同地為直鏈狀的碳原子數(shù)8～24的鏈烯基。另外，更優(yōu)選R1’及R2’相同，在此情況下，R1’及R2’更優(yōu)選為碳原子數(shù)12～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或者炔基，進(jìn)一步優(yōu)選為碳原子數(shù)12～24的直鏈狀的鏈烯基。R1及R2以及R1’及R2’不同的情況下，R1及R1’為碳原子數(shù)16～24的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或者炔基，R2及R2’為碳原子數(shù)8～12的直鏈狀或支鏈狀的烷基、鏈烯基或者炔基，這也是本發(fā)明的優(yōu)選方式之一。在該情況下，更優(yōu)選R1及R1’為碳原子數(shù)16～24的直鏈狀的鏈烯基、R2及R2’為碳原子數(shù)8～12的直鏈狀的烷基，最優(yōu)選R1及R1’為(Z)-十八碳-9-烯基或(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、R2及R2’為辛基、癸基或十二烷基。對(duì)于R1及R2以及R1’及R2’而言，在相同或不同地為碳原子數(shù)8～24的直鏈狀或者支鏈狀的烷基或者鏈烯基的情況下，優(yōu)選相同或不同地為癸基、十二烷基、十四烷基、十六烷基、十八烷基、二十烷基、(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基或(Z)-二十二碳-13-烯基，更優(yōu)選相同或不同地為十四烷基、十六烷基、(Z)-十四碳-9-烯基、(Z)-十六碳-9-烯基、(Z)-十八碳-6-烯基、(Z)-十八碳-9-烯基、(E)-十八碳-9-烯基、(Z)-十八碳-11-烯基、(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基、(9Z,12Z,15Z)-十八碳-9,12,15-三烯基、(Z)-二十碳-11-烯基、(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯基或(Z)-二十二碳-13-烯基。R3及R3’優(yōu)選為碳原子數(shù)1～3的烷基、或上述式(A)，更優(yōu)選為甲基、乙基、丙基或環(huán)丙基，進(jìn)一步優(yōu)選為甲基或乙基，最優(yōu)選為甲基。并且，R3為式(A)的情況下，R4及R5優(yōu)選相同或不同地為氫原子、或碳原子數(shù)1～3的烷基，R3為式(B)的情況下，R6及R7優(yōu)選相同或不同地為氫原子、或者碳原子數(shù)1～3的烷基。作為R4和R5與所鍵合的氮原子一起形成的、碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)，可以優(yōu)選舉出氮雜環(huán)丁烷環(huán)、吡咯烷環(huán)、哌啶環(huán)、氮雜環(huán)庚烷環(huán)。需要說明的是，R4未與R5一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)的情況下，R5優(yōu)選為甲基或乙基，更優(yōu)選為甲基，最優(yōu)選的是R4和R5各自為甲基。另外，R4與R5一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)的情況下，優(yōu)選形成吡咯烷環(huán)或哌啶環(huán)。n3優(yōu)選為2～4的整數(shù)，更優(yōu)選為3。上述式(B)中的R6未與R7一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)的情況下，R7優(yōu)選為甲基或乙基，更優(yōu)選為甲基，最優(yōu)選的是R6和R7各自為甲基。另外，R6與R7一起形成碳原子數(shù)2～6的含氮雜環(huán)的情況下，優(yōu)選形成吡咯烷環(huán)或哌啶環(huán)。n4優(yōu)選為2～4的整數(shù)，更優(yōu)選為3。n1優(yōu)選為1。在該情況下，n2優(yōu)選為1～3的整數(shù)，更優(yōu)選為1。對(duì)于Z1而言，優(yōu)選的是，在所鍵合的每個(gè)碳原子上各自獨(dú)立地為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，更優(yōu)選為氫原子或甲基，進(jìn)一步優(yōu)選為氫原子。此處，用語(yǔ)“在所鍵合的每個(gè)碳原子上各自獨(dú)立”是指，在式(I”)中存在2個(gè)以上的Z1的情況下，對(duì)于Z1所鍵合的每個(gè)碳原子，各自的Z1相同或不同，可以選擇氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基。例如，在式(I”)中存在2個(gè)Z1的情況下，不僅意味著各個(gè)Z1可以選擇相同的取代基，還意味著也包含一個(gè)Z1為氫原子、另一個(gè)Z1為碳原子數(shù)1～3的烷基的情況。對(duì)于Z2而言，優(yōu)選的是，在所鍵合的每個(gè)碳原子上各自獨(dú)立地為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基，更優(yōu)選為氫原子或甲基，進(jìn)一步優(yōu)選為氫原子。此處，用語(yǔ)“在所鍵合的每個(gè)碳原子上各自獨(dú)立”是指，在式(I”)中存在2個(gè)以上的Z2的情況下，對(duì)于Z2所鍵合的每個(gè)碳原子，各自的Z2相同或不同，可以選擇氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基。例如，在式(I”)中存在2個(gè)Z2的情況下，不僅意味著各個(gè)Z2可以選擇相同的取代基，還意味著也包含一個(gè)Z2為氫原子、另一個(gè)Z2為碳原子數(shù)1～3的烷基的情況。另外，n1和n2均為1時(shí)，優(yōu)選的是，Z1和Z2各自相同或不同，為氫原子或甲基，更優(yōu)選的是，Z1為氫原子或甲基、Z2為氫原子，最優(yōu)選的是，Z1與Z2同樣為氫原子。接下來，對(duì)本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的制造方法進(jìn)行說明。需要說明的是，在以下所示的制造方法中，定義過的基團(tuán)在該制造方法的條件下發(fā)生改變或不適于實(shí)施該制造方法時(shí)，可以通過采用有機(jī)合成化學(xué)中常用的導(dǎo)入及除去保護(hù)基團(tuán)的方法[例如，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis，第三版，T.W.Greene著，JohnWiley&SonsInc.(1999年)等中記載的方法]等來制造目標(biāo)化合物。此外，也可以根據(jù)需要改變導(dǎo)入取代基等反應(yīng)步驟的順序。制造方法1化合物(I)中，n1及n2均為1、R3為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基的化合物(Ia)可以通過以下方法來制造。需要說明的是，化合物(I’)中，n1及n2均為1、R3為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。此外，化合物(I”)中，n1及n2均為1、Z1及Z2均為氫原子、R3’為氫原子、碳原子數(shù)1～3的烷基、羥基C2-C4烷基或C1-C3二烷基氨基C2-C4烷基的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。[化學(xué)式26](式中，R1及R2分別與上文所述的含義相同，R3a為氫原子或與上述R3為碳原子數(shù)1～3的烷基的情況的含義相同的碳原子數(shù)1～3的烷基，X1、X2及X3相同或不同，表示氯原子、溴原子、碘原子、三氟甲磺酰氧基、甲磺酰氧基、苯磺酰氧基、對(duì)甲苯磺酰氧基等離去基團(tuán))步驟1及2化合物(IIa)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，在1～10當(dāng)量的堿的存在下，于室溫與200℃之間的溫度，使丙二酸二甲酯與化合物(IIIa)反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)。并且，化合物(IIb)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，在1～10當(dāng)量的堿的存在下，于室溫與200℃之間的溫度，使化合物(IIa)與化合物(IIIb)反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)。作為溶劑，可以舉出例如甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、甲苯、乙酸乙酯、乙腈、乙醚、四氫呋喃、1,2-二甲氧基乙烷、二氧雜環(huán)己烷、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、吡啶等，它們可以單獨(dú)使用或者混合使用。作為堿，可以舉出例如碳酸鉀、碳酸銫、氫氧化鉀、氫氧化鈉、甲醇鈉、叔丁醇鉀、氫化鈉、三乙胺、二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉、吡啶、1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-7-十一碳烯(DBU)等?；衔?IIIa)及化合物(IIIb)也可以以市售品的形式得到，或者可以通過已知方法(例如，《第5版實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座13有機(jī)化合物的合成I》(第5版実験化學(xué)講座13有機(jī)化合物の合成I)，第5版，p.374，丸善(2005年))或者以其為基準(zhǔn)的方法、或后述的制造方法得到。R1和R2相同時(shí)的化合物(IIb)可以通過在步驟1中使用2當(dāng)量以上的化合物(IIIa)得到。丙二酸二甲酯可以以市售品的形式得到。步驟3化合物(IIc)可以如下制造：在溶劑中，根據(jù)需要在催化劑量～10當(dāng)量的添加劑的存在下，于-20℃與150℃之間的溫度，使化合物(IIb)與4當(dāng)量～大大過量的氫化物還原劑反應(yīng)5分鐘～72小時(shí)。此處，所謂催化劑量，表示0.01當(dāng)量～0.5當(dāng)量。作為氫化物還原劑，可以舉出例如氫化鋁鋰、硼氫化鋰、三乙基硼氫化鋰、二異丁基氫化鋁、雙(2-甲氧基乙氧基)氫化鋁鈉等。作為溶劑，可以舉出例如甲苯、二氯甲烷、乙醚、四氫呋喃、1,2-二甲氧基乙烷、1,4-二氧雜環(huán)己烷等，它們可以單獨(dú)使用或者混合使用。作為添加劑，可以使用氯化鋁、氯化鈰、四氯化鈦、四異丙醇鈦等。步驟4化合物(IId)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，根據(jù)需要在優(yōu)選為1～10當(dāng)量的堿的存在下，及根據(jù)需要在優(yōu)選為1～10當(dāng)量的添加劑的存在下，于-20℃與150℃之間的溫度，使化合物(IIc)與2當(dāng)量以上的鹵化試劑或擬鹵化試劑反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)。作為鹵化試劑或擬鹵化試劑，可以舉出例如亞硫酰氯、磺酰氯、三氯化磷、五氯化磷、三氯氧化磷、三溴化磷、溴化氫、碘化氫、甲磺酸酐、甲磺酰氯、對(duì)甲苯磺酸酐、苯磺酰氯、苯磺酸酐、對(duì)甲苯磺酰氯、三氟甲磺酸酐等。作為溶劑，可以舉出步驟3中示例的溶劑。作為堿，可以舉出例如吡啶、2,6-二甲基吡啶、2,4,6-三甲基吡啶、三乙胺、N,N-二異丙基乙胺等。作為添加劑，可以舉出例如氯化鈉、溴化鈉、溴化鋰、氯化鋰等。步驟5化合物(Ia)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，于室溫與200℃之間的溫度，使化合物(IId)與1當(dāng)量～大大過量的化合物(IVa)反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)。作為溶劑，可以舉出步驟1及步驟2中示例的溶劑?；衔?IVa)可以以市售品的形式得到。制造方法2化合物(I)中，n1及n2均為1、R3為式(A)的化合物(Ic)可以通過以下方法來制造。需要說明的是，化合物(I’)中，n1及n2均為1、R3為式(A)的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。此外，化合物(I”)中，n1及n2均為1、Z1及Z2均為氫原子、R3’為式(A)的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。[化學(xué)式27](式中，R1、R2、R4、R5及n3分別與上文所述的含義相同，Ar表示對(duì)硝基苯基、鄰硝基苯基、對(duì)氯苯基等取代苯基或無取代苯基)步驟6化合物(VII)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，根據(jù)需要在優(yōu)選為1～10當(dāng)量的添加劑的存在下，及/或根據(jù)需要在優(yōu)選為1～10當(dāng)量的堿的存在下，于-20℃與150℃之間的溫度，使化合物(V)與化合物(VI)反應(yīng)5分鐘～72小時(shí)。作為溶劑，可以舉出例如二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、甲苯、乙酸乙酯、乙腈、乙醚、四氫呋喃、1,2-二甲氧基乙烷、1,4-二氧雜環(huán)己烷、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、二甲基亞砜等，它們可以單獨(dú)使用或者混合使用。作為添加劑，可以舉出例如1-羥基苯并三唑、4-二甲基氨基吡啶等。作為堿，可以舉出例如碳酸鉀、氫氧化鉀、氫氧化鈉、甲醇鈉、叔丁醇鉀、三乙胺、二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉、吡啶、1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-7-十一碳烯(DBU)等。化合物(V)可以以市售品的形式得到?；衔?VI)可以以市售品的形式得到，或者可以通過已知方法(例如，《第5版實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座14有機(jī)化合物的合成II》，第5版，p.1，丸善(2005年))或者以其為基準(zhǔn)的方法得到。步驟7化合物(Ic)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，根據(jù)需要在1～10當(dāng)量的添加劑的存在下，及/或根據(jù)需要在1～10當(dāng)量的堿的存在下，于-20℃與150℃之間的溫度，使化合物(Ib)與化合物(VII)反應(yīng)5分鐘～72小時(shí)?；衔?Ib)可以通過在制造方法1的步驟5中將氨用作化合物(IVa)來制造，或通過制造方法7來制造。作為溶劑、添加劑及堿，分別可以舉出步驟6中示例的溶劑、添加劑及堿。制造方法3化合物(I)中，n1及n2均為1、R3為式(B)的化合物(Id)可以通過以下方法來制造。需要說明的是，化合物(I’)中，n1及n2均為1、R3為式(B)的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。此外，化合物(I”)中，n1及n2均為1、Z1及Z2均為氫原子、R3’為式(B)的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。[化學(xué)式28](式中，R1、R2、R6、R7及n4分別與上文所述的含義相同)步驟8化合物(IIe)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，根據(jù)需要在優(yōu)選為1～10當(dāng)量的堿的存在下，于-20℃與150℃之間的溫度，使化合物(Ib)與化合物(VIII)反應(yīng)5分鐘～72小時(shí)。作為溶劑，可以舉出步驟6中示例的溶劑。作為堿，可以舉出步驟4中示例的堿?；衔?VIII)可以以市售品的形式得到。步驟9化合物(Id)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，根據(jù)需要在1～10當(dāng)量的堿的存在下，于室溫與200℃之間的溫度，使化合物(IIe)與1～20當(dāng)量的化合物(VIb)反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)?；衔?VIb)可以以市售品的形式得到。作為溶劑，可以舉出步驟1及步驟2中示例的溶劑。作為堿，可以舉出步驟6中示例的堿。制造方法4化合物(IIIa)及化合物(IIIb)中，R1及/或R2為C7-C20烷基氧基C2-C3烷基或者C7-C20炔基氧基C2-C3烷基的化合物(IIId)可以通過以下的方法制造。需要說明的是，相當(dāng)于在制造化合物(I’)及化合物(I”)中的、R1’及/或R2’為C7-C20烷基氧基C2-C3烷基、C7-C20鏈烯基氧基C2-C3烷基或者C7-C20炔基氧基C2-C3烷基的化合物時(shí)使用的化合物(IIId)的化合物也同樣可以通過以下的方法制造。[化學(xué)式29](式中，X4及X5與上述X1含義相同，R9為與上述C7-C20烷基氧基C1-C3烷基中的C7-C20烷基部分的含義相同的碳原子數(shù)7～20的烷基、與上述C7-C20鏈烯基氧基C1-C3烷基中的C7-C20鏈烯基部分的含義相同的碳原子數(shù)7～20的鏈烯基、或者與上述C7-C20炔基氧基C1-C3烷基中的C7-C20炔基部分的含義相同的碳原子數(shù)7～20的炔基，Y表示亞乙基或亞丙基)步驟10化合物(X)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，根據(jù)需要在1～10當(dāng)量的堿的存在下，于室溫與200℃之間的溫度，使化合物(IIIc)與化合物(IX)反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)。作為溶劑及堿，可以分別舉出步驟6中示例的溶劑及堿?；衔?IIIc)可以以市售品的形式得到，或者可以通過已知方法(例如，《第5版實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座14有機(jī)化合物的合成II》，第5版，p.1，丸善(2005年))或者以其為基準(zhǔn)的方法得到?；衔?IX)可以以市售品的形式得到。步驟11化合物(IIId)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，根據(jù)需要在優(yōu)選為1～10當(dāng)量的堿及根據(jù)需要在優(yōu)選為1～10當(dāng)量的添加劑的存在下，于-20℃與150℃之間的溫度，使化合物(X)與鹵化試劑或擬鹵化試劑反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)。作為溶劑及堿，分別可以舉出步驟6中示例的溶劑及堿。作為鹵化試劑或擬鹵化試劑，可以舉出步驟4中示例的鹵化試劑或擬鹵化試劑。作為添加劑，可以舉出步驟4中示例的添加劑。制造方法5化合物(I)中，n1為1、R3為碳原子數(shù)1～3的烷基的化合物(Ie)可以通過以下方法來制造。需要說明的是，化合物(I’)中，n1為1、R3為碳原子數(shù)1～3的烷基的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。此外，化合物(I”)中，n1為1、Z1及Z2均為氫原子、R3’為碳原子數(shù)1～3的烷基的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。[化學(xué)式30](式中，R1、R2、n2、X1及X2分別與上文所述的含義相同，X6與上述X1含義相同，R10表示與上述R3為碳原子數(shù)1～3的烷基的情況含義相同的碳原子數(shù)1～3的烷基)步驟12化合物(XIb)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，在1～10當(dāng)量的堿的存在下，于室溫與200℃之間的溫度，使化合物(XIa)與化合物(IIIe)反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)。作為溶劑及堿，可以分別舉出步驟1及步驟2中示例的溶劑及堿?；衔?XIa)及化合物(IIIe)分別可以以市售品的形式得到。步驟13及步驟14化合物(XIc)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，在1～10當(dāng)量的堿的存在下，于室溫與200℃之間的溫度，使化合物(XIb)與化合物(IIIa)反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)。此外，化合物(XId)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，在1～10當(dāng)量的堿的存在下，于室溫與200℃之間的溫度，使化合物(XIc)與化合物(IIIb)反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)。作為溶劑，可以舉出步驟3中示例的溶劑。作為堿，可以舉出二異丙基胺基鋰、六甲基二硅基胺基鋰、六甲基二硅基胺基鈉、正丁基鋰等。R1和R2相同時(shí)的化合物(XId)可以通過在步驟13中使用2當(dāng)量以上的化合物(IIIa)得到。步驟15化合物(Ie)可以如下制造：在溶劑中，根據(jù)需要在催化劑量～10當(dāng)量的添加劑的存在下，于-20℃與150℃之間的溫度，使化合物(XId)與4～100當(dāng)量的氫化物還原劑反應(yīng)5分鐘～72小時(shí)。此處，催化劑量與上文所述的含義相同。作為氫化物還原劑、添加劑及溶劑，可以舉出步驟3中示例的氫化物還原劑、添加劑及溶劑。制造方法6化合物(I)中，n1及n2相同或不同地為1～4的整數(shù)(其中，n1為1、n2為1的情況除外)、R3為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基的化合物(If)可以通過以下方法來制造。需要說明的是，化合物(I’)中，n1及n2相同或不同地為1～4的整數(shù)(其中，n1為1、n2為1的情況除外)、R3為氫原子或碳原子數(shù)1～3的烷基的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。此外，化合物(I”)中，n1及n2相同或不同地為1～4的整數(shù)(其中，n1為1、n2為1的情況除外)、Z1及Z2均為氫原子、R3’為氫原子、碳原子數(shù)1～3的烷基、羥基C2-C4烷基或C1-C3二烷基氨基C2-C4烷基的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。[化學(xué)式31][式中，R1、R2、R3a、X1、X2及X3分別與上文所述的含義相同，m1及m2相同或不同地為1～4的整數(shù)(其中，m1為1、m2為1的情況除外)、P1及P2相同或不同，表示保護(hù)基團(tuán)]步驟16及步驟17對(duì)于化合物(XIIb)，可以使用化合物(XIIa)代替丙二酸二甲酯，通過與步驟1同樣的方法得到。對(duì)于化合物(XIIc)，可以使用化合物(XIIb)代替化合物(IIa)，通過與步驟2同樣的方法得到。對(duì)于R1和R2相同時(shí)的(XIIc)，可以通過在步驟16中使用2當(dāng)量以上的化合物(IIIa)得到。此處，作為P1及P2，可以使用有機(jī)合成化學(xué)中常用的保護(hù)基團(tuán)[例如，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis，第3版，T.W.Greene著，JohnWiley&SonsInc.(1999年)等中記載的保護(hù)基團(tuán)]。另外，化合物(XIIa)可以通過已知方法[例如，《新實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座14有機(jī)化合物的合成與反應(yīng)(II)》，初版，p.751，丸善(1977年)]或者以其為基準(zhǔn)的方法得到。步驟18化合物(XIId)可以通過將化合物(XIIc)用已知方法[例如，《新實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座15氧化與還原(II)》，初版，丸善(1977年)]或者以其為基準(zhǔn)的方法進(jìn)行還原得到。步驟19化合物(XIIe)可以通過將化合物(XIId)的保護(hù)基團(tuán)P1及P2分別用合適的方法除去來得到。作為除去保護(hù)基團(tuán)的方法，可以使用有機(jī)合成化學(xué)中常用的除去保護(hù)基團(tuán)的方法[例如，ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis，第3版，T.W.Greene著，JohnWiley&SonsInc.(1999年)等中記載的除去方法]，由此可以制造目標(biāo)化合物。步驟20對(duì)于化合物(XIIf)，可以使用化合物(XIIe)代替化合物(IIc)，通過與步驟4同樣的方法得到。步驟21對(duì)于化合物(If)，可以使用化合物(XIIf)代替化合物(IId)，通過與步驟5同樣的方法得到。制造方法7化合物(I)中，n1及n2為1、R3為氫原子的化合物(Ib)可以通過以下方法來制造。需要說明的是，化合物(I’)中，n1及n2為1、R3為氫原子的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。此外，化合物(I”)中，n1及n2為1、Z1及Z2均為氫原子、R3’為氫原子的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。[化學(xué)式32](式中，R1、R2、X1、X2及X3分別與上文所述的含義相同，P3表示叔丁氧基羰基、鄰硝基苯磺?；?qū)谆交酋；缺Ｗo(hù)基團(tuán))步驟22及23化合物(XIIIa)可以通過使氰基乙酸乙酯與化合物(IIIa)在與步驟1同樣的條件下反應(yīng)來制造。此外，化合物(XIIIb)可以通過使化合物(XIIIa)與化合物(IIIb)在與步驟2同樣的條件下反應(yīng)來制造。R1和R2相同時(shí)的化合物(XIIIb)可以通過在步驟22中使用2當(dāng)量以上的化合物(IIIa)得到。氰基乙酸乙酯可以以市售品的形式得到?；衔?IIIa)及化合物(IIIb)與制造方法1中記載的化合物(IIIa)及化合物(IIIb)相同。步驟24化合物(XIIIc)可以通過使化合物(XIIIb)在與步驟3同樣的條件下進(jìn)行反應(yīng)來制造。步驟25化合物(XIIId)可以如下制造：在溶劑中，在1～10當(dāng)量的堿的存在下，于0℃與200℃之間的溫度，使化合物(XIIIc)與1～10當(dāng)量的碳酸二叔丁氧基羰基酯(日文為“炭酸ジtert-ブトキシカルボニル”)、鄰硝基苯磺酰氯或?qū)谆交酋Ｂ鹊确磻?yīng)5分鐘～100小時(shí)進(jìn)行制造。作為溶劑，可以舉出步驟6中示例的溶劑。作為堿，可以舉出步驟4中示例的堿。步驟26化合物(XIIIe)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，根據(jù)需要在優(yōu)選為1～10當(dāng)量的堿的存在下，于0℃與150℃之間的溫度，使化合物(XIIId)與1當(dāng)量以上的鹵化試劑或擬鹵化試劑反應(yīng)5分鐘～100小時(shí)。作為鹵化試劑或擬鹵化試劑，可以舉出步驟4中示例的鹵化試劑或擬鹵化試劑。作為溶劑，可以舉出步驟3中示例的溶劑。作為堿，可以舉出步驟4中示例的堿。步驟27化合物(XIIIf)可以如下制造：在無溶劑條件下或在溶劑中，根據(jù)需要在優(yōu)選為1～10當(dāng)量的堿的存在下，于0℃與150℃之間的溫度，使化合物(XIIIe)進(jìn)行分子內(nèi)反應(yīng)5分鐘～72小時(shí)。作為堿，可以舉出例如碳酸鉀、氫氧化鉀、氫氧化鈉、甲醇鈉、叔丁醇鉀、三乙胺、二異丙基乙胺、N-甲基嗎啉、吡啶、1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-7-十一碳烯(DBU)、二異丙基胺基鋰、六甲基二硅基胺基鋰、六甲基二硅基胺基鈉、正丁基鋰等。作為溶劑，可以舉出步驟1及步驟2中示例的溶劑。步驟28化合物(Ib)可以通過將化合物(XIIIf)的保護(hù)基團(tuán)P3用合適的方法除去而得到。作為除去保護(hù)基團(tuán)的方法，可以使用有機(jī)合成化學(xué)中常用的除去保護(hù)基團(tuán)的方法[例如，ProtectiveGroupsinOrg-anicSynthesis，第3版，T.W.Greene著，JohnWiley&SonsInc.(1999年)等中記載的除去方法]，由此可以制造目標(biāo)化合物。制造方法8化合物(I)中，n1及n2為1、R3為碳原子數(shù)1-3的烷基的(Ig)可以通過以下方法來制造。需要說明的是，化合物(I’)中，n1及n2為1、R3為碳原子數(shù)1-3的烷基的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。此外，化合物(I”)中，n1及n2為1、Z1及Z2均為氫原子、R3’為碳原子數(shù)1-3的烷基的化合物也同樣可以通過以下方法來制造。[化學(xué)式33][式中，R1、R2分別與上文所述的含義相同，R11為氫原子、甲基或乙基，R12為氫原子或甲基，或者R11和R12與相鄰的碳原子一起形成環(huán)丙基環(huán)(其中，R11為氫原子或乙基時(shí)，R12不是甲基)]步驟29化合物(Ig)可以如下制造：在溶劑中，在優(yōu)選為1當(dāng)量～大大過量的還原劑及根據(jù)需要優(yōu)選為1～10當(dāng)量的酸的存在下，于-20℃與150℃之間的溫度，使化合物(Ib)與優(yōu)選為1～10當(dāng)量的化合物(XIX)反應(yīng)5分鐘～72小時(shí)。作為溶劑，可以舉出例如甲醇、乙醇、二氯甲烷、氯仿、1,2-二氯乙烷、甲苯、乙酸乙酯、乙腈、乙醚、四氫呋喃、1,2-二甲氧基乙烷、二氧雜環(huán)己烷、N,N-二甲基甲酰胺、N,N-二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、水等，它們可以單獨(dú)使用或者混合使用。作為還原劑，可以舉出例如三乙酰氧基硼氫化鈉、氰基硼氫化鈉等。作為酸，可以舉出例如鹽酸、乙酸等?；衔?XIX)可以以市售品的形式得到。制造方法9化合物(I”)中，n1及n2為1、R3’為氫、Z1為碳原子數(shù)1～3的烷基、Z2為氫原子的化合物(I”b)可以通過以下方法來制造。[化學(xué)式34](式中，R1’、R2’、X3及P3分別與上文所述的含義相同，Z1a為與上述Z1為碳原子數(shù)1～3的烷基的情況含義相同的碳原子數(shù)1～3的烷基，M表示鋰、溴化鎂、氯化鎂等。)步驟30化合物(XIIIh)可以如下制造：在溶劑中，于0℃與150℃之間的溫度，使化合物(XIIIg)與1～10當(dāng)量的氧化劑反應(yīng)5分鐘～72小時(shí)。作為氧化劑，可以舉出例如戴斯-馬丁(Dess-Martin)試劑、氯鉻酸吡啶鎓、二鉻酸吡啶鎓、四丙基高釕酸銨(Tetrapropylammoniumperruthenate)等。作為溶劑，可以舉出步驟6中示例的溶劑?；衔?XIIIg)可以通過與制造方法7中的化合物(XIIId)同樣的方法進(jìn)行制造。步驟31化合物(XIIIi)可以如下制造：在溶劑中，于-78℃與100℃之間的溫度，使化合物(XIIIh)與1～10當(dāng)量的有機(jī)金屬試劑反應(yīng)5分鐘～72小時(shí)。作為有機(jī)金屬試劑，可以舉出例如甲基鋰、乙基鋰等烷基鋰試劑、甲基溴化鎂、乙基溴化鎂等格氏試劑(Grignardreagent)、二甲基鋅、二乙基鋅等有機(jī)鋅試劑等。作為溶劑，可以舉出步驟3中示例的溶劑。步驟32化合物(XIIIj)可以通過與步驟26同樣的方法制造。步驟33化合物(XIIIk)可以通過與步驟27同樣的方法制造。步驟34化合物(I”b)可以通過與步驟28同樣的方法制造。制造方法10化合物(I”)中，n1及n2為1、R3’為碳原子數(shù)1-3的烷基、Z1為碳原子數(shù)1～3的烷基、Z2為氫原子的化合物(I”g)可以通過以下方法制造。另外，n1及n2為1、R3’為式(A)、Z1為碳原子數(shù)1～3的烷基、Z2為氫原子的化合物(I”c)可以通過以下方法來制造。此外，n1及n2為1、R3’為式(B)、Z1為碳原子數(shù)1～3的烷基、Z2為氫原子的化合物(I”d)可以通過以下方法來制造。[化學(xué)式35](式中，R1’、R2’、R4、R5、R6、R7、R11、R12、n3、n4、Ar及Z1a分別與上文所述的含義相同)步驟35化合物(I”g)可以通過與步驟29同樣的方法來制造。步驟36化合物(I”c)可以通過與步驟7同樣的方法來制造。步驟37化合物(II’e)可以通過與步驟8同樣的方法來制造。步驟38化合物(I”d)可以通過與步驟9同樣的方法來制造。需要說明的是，化合物(I)、(I’)、(I”)中，上述化合物(Ia)～(Ig)及(I”b)～(I”d)以外的化合物可以通過采用適于目標(biāo)化合物的結(jié)構(gòu)的原料、試劑等，以上述制造方法為基準(zhǔn)，或者適用有機(jī)合成化學(xué)中常用的一般的制造方法，由此進(jìn)行制造。上述各制造方法中的中間體及目標(biāo)化合物可以通過有機(jī)合成化學(xué)中常用的分離純化法，例如過濾、萃取、洗滌、干燥、濃縮、重結(jié)晶、各種色譜法等進(jìn)行分離純化。此外，中間體也可以不特別經(jīng)過純化而供給于后續(xù)反應(yīng)。本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)中，可以在結(jié)構(gòu)中的氮原子上的孤對(duì)電子上配位氫離子，在該情況下，也可以與制藥上可允許的陰離子(與上文所述的含義相同)形成鹽，本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)中，還包括在該氮原子上的孤對(duì)電子上配位有氫離子的化合物。本發(fā)明中，作為制藥上可允許的陰離子，可以舉出例如氯化物離子、溴化物離子、硝酸離子、硫酸離子、磷酸離子等無機(jī)離子，乙酸離子、草酸離子、馬來酸離子、富馬酸離子、檸檬酸離子、苯甲酸離子、甲磺酸離子等有機(jī)酸離子等。本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)中，還包括可以存在幾何異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體等立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體等的物質(zhì)，本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)包含包括這些異構(gòu)體在內(nèi)的全部可能的異構(gòu)體及它們的混合物。本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)中的各原子的一部分或全部可以分別被對(duì)應(yīng)的同位素原子取代，化合物(I)也包含被這些同位素原子取代了的化合物。例如，化合物(I)中的氫原子的一部分或全部可以是原子量為2的氫原子(氘原子)。對(duì)于本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)中的各原子的一部分或全部分別被對(duì)應(yīng)的同位素原子取代了的化合物，可以使用市售的結(jié)構(gòu)單元(buildingblock)通過與上文所述的各制造方法同樣的方法來制造。此外，對(duì)于化合物(I)中的氫原子的一部分或全部被氘原子取代了的化合物，也可以采用例如使用銥絡(luò)合物作為催化劑、使用重水作為氘源將醇、羧酸等進(jìn)行氘化的方法[參見J.Am.Chem.Soc.,Vol.124,No.10,2092(2002)]等來合成。本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的具體例子示于表1～表3。但是，本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)并不限定于這些。[表1]表1[表2]表2[表3]表3此外，作為本發(fā)明中使用的核酸，只要是例如核苷酸及/或與核苷酸具有同等功能的分子進(jìn)行聚合而得到的分子，則可以為任何分子，可以舉出例如作為核糖核苷酸的聚合物的核糖核酸(RNA)、作為脫氧核糖核苷酸的聚合物的脫氧核糖核酸(DNA)、由RNA和DNA形成的嵌合核酸、及上述核酸中的至少一個(gè)核苷酸被與該核苷酸具有同等功能的分子取代而得到的核苷酸聚合物等。此外，含有至少一部分核苷酸及/或與核苷酸具有同等功能的分子進(jìn)行聚合而得到的分子的結(jié)構(gòu)的衍生物也包括在本發(fā)明的核酸中。需要說明的是，本發(fā)明中，尿嘧啶U和胸腺嘧啶T可分別互換而讀出。作為與核苷酸具有同等功能的分子，可以舉出例如核苷酸衍生物等。作為核苷酸衍生物，只要是例如對(duì)核苷酸進(jìn)行了修飾的分子，則可以為任何分子，例如與RNA或DNA比較，為了提高核酸酶耐性或使其免受其他分解因子的影響而穩(wěn)定化、為了提高與互補(bǔ)鏈核酸的親和性、為了提高細(xì)胞透過性、或者為了使其可見，可優(yōu)選使用對(duì)核糖核苷酸或脫氧核糖核苷酸進(jìn)行了修飾的分子等。作為核苷酸衍生物，可以舉出例如糖部修飾核苷酸、磷酸二酯鍵修飾核苷酸、堿基修飾核苷酸等。作為糖部修飾核苷酸，只要是例如對(duì)核苷酸的糖的化學(xué)結(jié)構(gòu)的一部分或全部用任意的取代基進(jìn)行了修飾或取代的核苷酸、或者用任意的原子進(jìn)行了取代的核苷酸，則可以為任意的核苷酸，優(yōu)選使用2’-修飾核苷酸。作為糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)，例如，可以舉出2’-氰基、2’-烷基、2’-取代烷基、2’-鏈烯基、2’-取代鏈烯基、2’-鹵素、2’-O-氰基、2’-O-烷基、2’-O-取代烷基、2’-O-鏈烯基、2’-O-取代鏈烯基、2’-S-烷基、2’-S-取代烷基、2’-S-鏈烯基、2’-S-取代鏈烯基、2’-氨基、2’-NH-烷基、2’-NH-取代烷基、2’-NH-鏈烯基、2’-NH-取代鏈烯基、2’-SO-烷基、2’-SO-取代烷基、2’-羧基、2’-CO-烷基、2’-CO-取代烷基、2’-Se-烷基、2’-Se-取代烷基、2’-SiH2-烷基、2’-SiH2-取代烷基、2’-ONO2、2’-NO2、2’-N3、2’-氨基酸殘基(從氨基酸的羧酸中除去羥基而得到的基團(tuán))、2’-O-氨基酸殘基(與上述氨基酸殘基的含義相同)等。作為糖部修飾核苷酸，可以舉出通過在糖部導(dǎo)入橋聯(lián)結(jié)構(gòu)從而具有2個(gè)環(huán)狀結(jié)構(gòu)的橋聯(lián)結(jié)構(gòu)型人工核酸(BridgedNucleicAcid)(BNA)，具體而言，可以舉出2’位的氧原子與4’位的碳原子介由亞甲基橋聯(lián)而得的鎖人工核酸(LockedNucleicAcid)(LNA)[TetrahedronLetters，第38卷，第50期，1997，8735-8738頁(yè)；及Tetrahedron，第54卷，第14期，1998，3607-3630頁(yè)]、亞乙基橋聯(lián)結(jié)構(gòu)型人工核酸(Ethylenebridgednucleicacid)(ENA)[NucleicAcidResearch,32,e175(2004)]等。此外，作為糖部修飾核苷酸，還可以舉出肽核酸(PNA)[Acc.Chem.Res.,32,624(1999)]、氧基肽核酸(OPNA)[J.Am.Chem.Soc.,123,4653(2001)]、肽核糖核酸(PRNA)[J.Am.Chem.Soc.,122,6900(2000)]等。作為糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)，優(yōu)選為2’-氰基、2’-鹵素、2’-O-氰基、2’-烷基、2’-取代烷基、2’-O-烷基、2’-O-取代烷基、2’-O-鏈烯基、2’-O-取代鏈烯基、2’-Se-烷基、2’-Se-取代烷基等，更優(yōu)選為2’-氰基、2’-氟、2’-氯、2’-溴、2’-三氟甲基、2’-O-甲基、2’-O-乙基、2’-O-異丙基、2’-O-三氟甲基、2’-O-[2-(甲氧基)乙基]、2’-O-(3-氨基丙基)、2’-O-[2-(N,N-二甲基氨基氧基)乙基]、2’-O-[3-(N,N-二甲基氨基)丙基]、2’-O-{2-[2-(N,N-二甲基氨基)乙氧基]乙基}、2’-O-[2-(甲基氨基)-2-氧代乙基]、2’-Se-甲基等，進(jìn)一步優(yōu)選為2’-O-甲基、2’-O-乙基、2’-氟等，最優(yōu)選為2’-O-甲基及2’-O-乙基。此外，糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)也可以從其大小考慮來定義優(yōu)選的范圍，優(yōu)選相當(dāng)于從氟的大小至-O-丁基的大小的基團(tuán)，較優(yōu)選相當(dāng)于從-O-甲基的大小至-O-乙基的大小的基團(tuán)。作為糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)中的烷基，可以舉出碳原子數(shù)1～6的烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、新戊基、己基等碳原子數(shù)1～6的烷基。作為糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)中的鏈烯基，可以舉出碳原子數(shù)3～6的鏈烯基，可以舉出例如烯丙基、1-丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基等。作為糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)中的鹵素，可以舉出例如氟原子、氯原子、溴原子、碘原子等。作為氨基酸殘基中的氨基酸，可以舉出例如脂肪族氨基酸(具體而言，甘氨酸、丙氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸等)、羥基氨基酸(具體而言，絲氨酸、蘇氨酸等)、酸性氨基酸(具體而言，天冬氨酸、谷氨酸等)、酸性氨基酸酰胺(具體而言，天冬酰胺、谷氨酰胺等)、堿性氨基酸(具體而言，賴氨酸、羥基賴氨酸、精氨酸、鳥氨酸等)、含硫氨基酸(具體而言，半胱氨酸、胱氨酸、蛋氨酸等)、亞氨基酸(具體而言，脯氨酸、4-羥基脯氨酸等)等。作為糖部修飾核苷酸的修飾基團(tuán)中的取代烷基及取代鏈烯基的取代基，可以舉出例如鹵素(與上文所述的含義相同)、羥基、硫烷基、氨基、氧代(oxo)、-O-烷基(該-O-烷基的烷基部分與上述碳原子數(shù)1～6的烷基含義相同)、-S-烷基(該-S-烷基的烷基部分與上述碳原子數(shù)1～6的烷基含義相同)、-NH-烷基(該-NH-烷基的烷基部分與上述碳原子數(shù)1～6的烷基含義相同)、二烷基氨基氧基(該二烷基氨基氧基的兩個(gè)烷基部分相同或不同，與上述碳原子數(shù)1～6的烷基含義相同)、二烷基氨基(該二烷基氨基的兩個(gè)烷基部分相同或不同，與上述碳原子數(shù)1～6的烷基含義相同)、二烷基氨基烷基氧基(該二烷基氨基烷基氧基的兩個(gè)烷基部分相同或不同，與上述碳原子數(shù)1～6的烷基含義相同，亞烷基部分表示從上述烷基中除去1個(gè)氫原子而得到的基團(tuán))等，取代數(shù)優(yōu)選為1～3。作為磷酸二酯鍵修飾核苷酸，只要是對(duì)核苷酸的磷酸二酯鍵的化學(xué)結(jié)構(gòu)的一部分或全部用任意的取代基進(jìn)行了修飾或取代的核苷酸、或者用任意的原子進(jìn)行了取代的核苷酸，則可以為任意的核苷酸，可以舉出例如磷酸二酯鍵被硫代磷酸酯鍵取代的核苷酸、磷酸二酯鍵被二硫代磷酸酯鍵取代的核苷酸、磷酸二酯鍵被磷酸烷基酯鍵取代的核苷酸、磷酸二酯鍵被氨基磷酸酯鍵取代的核苷酸等。作為堿基修飾核苷酸，只要是對(duì)核苷酸的堿基的化學(xué)結(jié)構(gòu)的一部分或全部用任意的取代基進(jìn)行了修飾或者取代的核苷酸、或者用任意的原子進(jìn)行了取代的核苷酸，則可以為任意的核苷酸，可以舉出例如堿基內(nèi)的氧原子被硫原子取代的核苷酸、氫原子被碳原子數(shù)1～6的烷基取代的核苷酸、甲基被氫原子或碳原子數(shù)2～6的烷基取代的核苷酸、氨基被碳原子數(shù)1～6的烷基、碳原子數(shù)1～6的烷酰基等保護(hù)基團(tuán)保護(hù)的核苷酸等。進(jìn)而，作為核苷酸衍生物，還可以舉出在核苷酸或糖部、磷酸二酯鍵或堿基的至少一方被修飾了的核苷酸衍生物中加成其他化學(xué)物質(zhì)(如脂質(zhì)、磷脂、吩嗪、葉酸、菲啶、蒽醌、吖啶、熒光素、羅丹明、香豆素、色素等)而得到的物質(zhì)，具體而言，可以舉出5’-多胺加成核苷酸衍生物、膽固醇加成核苷酸衍生物、甾體加成核苷酸衍生物、膽汁酸加成核苷酸衍生物、維生素加成核苷酸衍生物、綠色熒光素(Cy3)加成核苷酸衍生物、紅色熒光素(Cy5)加成核苷酸衍生物、熒光素(fluoroscein)(6-FAM)加成核苷酸衍生物及生物素加成核苷酸衍生物等。此外，本發(fā)明中使用的核酸中，核苷酸或核苷酸衍生物可以與該核酸內(nèi)的其他核苷酸或核苷酸衍生物形成亞烷基結(jié)構(gòu)、肽結(jié)構(gòu)、核苷酸結(jié)構(gòu)、醚結(jié)構(gòu)、酯結(jié)構(gòu)、及組合了這些結(jié)構(gòu)中的至少一種的結(jié)構(gòu)等的交聯(lián)結(jié)構(gòu)。作為本發(fā)明中使用的核酸，優(yōu)選舉出抑制靶基因表達(dá)的核酸，更優(yōu)選舉出具有利用了RNA干擾(RNAi)的靶基因表達(dá)抑制作用的核酸。作為本發(fā)明中的靶基因，只要是產(chǎn)生mRNA并進(jìn)行表達(dá)的基因，則沒有特別限定，優(yōu)選為例如與腫瘤或炎癥相關(guān)的基因，可以舉出例如編碼血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(vascularendothelialgrowthfactor，以下簡(jiǎn)稱為VEGF)、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(vascularendothelialgrowthfactorreceptor，以下簡(jiǎn)稱為VEGFR)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體、來自血小板的生長(zhǎng)因子、來自血小板的生長(zhǎng)因子受體、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體、Kruppel樣因子(Kruppel-likefactor，以下簡(jiǎn)稱為KLF)、表達(dá)序列標(biāo)簽(Ets)轉(zhuǎn)錄因子、核因子、低氧誘導(dǎo)因子、細(xì)胞周期相關(guān)因子、染色體復(fù)制相關(guān)因子、染色體修復(fù)相關(guān)因子、微管相關(guān)因子、生長(zhǎng)信號(hào)途徑相關(guān)因子、生長(zhǎng)相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子、凋亡相關(guān)因子等蛋白質(zhì)的基因等，具體而言可以舉出VEGF基因、VEGFR基因、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體基因、來自血小板的生長(zhǎng)因子基因、來自血小板的生長(zhǎng)因子受體基因、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子基因、肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體基因、KLF基因、Ets轉(zhuǎn)錄因子基因、核因子基因、低氧誘導(dǎo)因子基因、細(xì)胞周期相關(guān)因子基因、染色體復(fù)制相關(guān)因子基因、染色體修復(fù)相關(guān)因子基因、微管相關(guān)因子基因(例如CKAP5基因等)、生長(zhǎng)信號(hào)途徑相關(guān)因子基因(例如KRAS基因等)、生長(zhǎng)相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子基因、凋亡相關(guān)因子基因(例如BCL-2基因等)等。此外，作為本發(fā)明中的靶基因，優(yōu)選例如在肝臟、肺、腎臟或脾臟中表達(dá)的基因，更優(yōu)選在肝臟中表達(dá)的基因，可以舉出例如上述與腫瘤或炎癥相關(guān)的基因、乙型肝炎病毒基因組、丙型肝炎病毒基因組、編碼下述蛋白質(zhì)的基因等，所述蛋白質(zhì)為載脂蛋白(APO)、羥甲基戊二酸單酰(HMG)CoA還原酶、kexin9型絲氨酸蛋白酶(PCSK9)、第12因子、胰高血糖素受體、糖皮質(zhì)激素受體、白三烯受體、血栓烷A2受體、組胺H1受體、碳酸酐酶、血管緊張肽轉(zhuǎn)變酶、腎素、p53、酪氨酸磷酸酶(PTP)、鈉依賴性葡萄糖運(yùn)輸載體、腫瘤壞死因子、白細(xì)胞介素、鐵調(diào)素(hepcidin)、甲狀腺素運(yùn)載蛋白(transthyretin)、抗凝血酶、蛋白質(zhì)C、matriptase酶(例如TMPRSS6基因等)等。作為抑制靶基因表達(dá)的核酸，只要是例如含有與編碼蛋白質(zhì)等的基因(靶基因)的mRNA的一部分的堿基序列互補(bǔ)的堿基序列、并且抑制靶基因表達(dá)的核酸，則可以使用例如siRNA(短干擾RNA，shortinterferenceRNA)、miRNA(微型RNA，microRNA)等雙鏈核酸、shRNA(短發(fā)夾RNA，shorthairpinRNA)、反義核酸、核酶等單鏈核酸等任意的核酸，優(yōu)選為雙鏈核酸。將含有與靶基因的mRNA的一部分堿基序列互補(bǔ)的堿基序列的核酸稱為反義鏈核酸，將含有與反義鏈核酸的堿基序列互補(bǔ)的堿基序列的核酸稱為有義鏈核酸。有義鏈核酸是指由靶基因的一部分堿基序列形成的核酸本身等、能夠與反義鏈核酸配對(duì)形成雙鏈形成部的核酸。所謂雙鏈核酸，是指兩根鏈配對(duì)從而具有雙鏈形成部的核酸。所謂雙鏈形成部，是指構(gòu)成雙鏈核酸的核苷酸或其衍生物構(gòu)成堿基對(duì)并且形成雙鏈的部分。關(guān)于構(gòu)成雙鏈形成部的堿基對(duì)，通常為15～27個(gè)堿基對(duì)，優(yōu)選為15～25個(gè)堿基對(duì)，更優(yōu)選為15～23個(gè)堿基對(duì)，進(jìn)一步優(yōu)選為15～21個(gè)堿基對(duì)，特別優(yōu)選為15～19個(gè)堿基對(duì)。作為雙鏈形成部的反義鏈核酸，優(yōu)選使用例如包含靶基因的mRNA的一部分序列的核酸、或者在該核酸中取代、缺失或添加1～3個(gè)堿基、優(yōu)選1～2個(gè)堿基、更優(yōu)選1個(gè)堿基、并且具有靶蛋白質(zhì)的表達(dá)抑制活性的核酸。構(gòu)成雙鏈核酸的單鏈的核酸通常包含15～30個(gè)堿基(核苷)的序列，優(yōu)選為15～29個(gè)堿基，更優(yōu)選為15～27個(gè)堿基，進(jìn)一步優(yōu)選為15～25個(gè)堿基，特別優(yōu)選為17～23個(gè)堿基，最優(yōu)選為19～21個(gè)堿基。構(gòu)成雙鏈核酸的反義鏈、有義鏈中的任一方、或者雙方的核酸可以在與雙鏈形成部連續(xù)的3’側(cè)或5’側(cè)具有未形成雙鏈的額外的核酸。所述未形成雙鏈的部分也稱為突出部(overhang，突出端)。作為具有突出部的雙鏈核酸，可以使用例如在至少一方的鏈的3’末端或5’末端具有包含1～4個(gè)堿基、通常包含1～3個(gè)堿基的突出部的雙鏈核酸，優(yōu)選使用具有包含2個(gè)堿基的突出部的雙鏈核酸，更優(yōu)選使用具有包含dTdT或UU的突出部的雙鏈核酸。突出部可以僅在反義鏈一方具有，可以僅在有義鏈一方具有，也可以在反義鏈和有義鏈雙方均具有，優(yōu)選使用在反義鏈和有義鏈雙方具有突出部的雙鏈核酸。此外，也可以使用與雙鏈形成部連續(xù)且與靶基因的mRNA的堿基序列的一部分或全部一致的序列、或者與雙鏈形成部連續(xù)且與靶基因的mRNA的互補(bǔ)鏈的堿基序列的一部分或全部一致的序列。此外，作為抑制靶基因表達(dá)的核酸，也可以使用例如通過Dicer等核糖核酸酶的作用生成上述雙鏈核酸的核酸分子(國(guó)際公開第2005/089287號(hào))、或者不具有3’末端或5’末端的突出部的雙鏈核酸等。此外，上述雙鏈核酸為siRNA時(shí)，優(yōu)選的是，反義鏈中，由5’末端側(cè)向3’末端側(cè)至少第1～17個(gè)堿基(核苷)的序列為與靶基因的mRNA的連續(xù)17個(gè)堿基的序列互補(bǔ)的堿基的序列；更優(yōu)選的是，該反義鏈中，由5’末端側(cè)向3’末端側(cè)第1～19個(gè)堿基的序列為與靶基因的mRNA的連續(xù)19個(gè)堿基的序列互補(bǔ)的堿基的序列，或者第1～21個(gè)堿基的序列為與靶基因的mRNA的連續(xù)21個(gè)堿基的序列互補(bǔ)的堿基的序列，或者第1～25個(gè)堿基的序列為與靶基因的mRNA的連續(xù)25個(gè)堿基的序列互補(bǔ)的堿基的序列。進(jìn)而，本發(fā)明中使用的核酸為siRNA時(shí)，優(yōu)選該核酸中的糖的10～70％、更優(yōu)選15～60％、進(jìn)一步優(yōu)選20～50％為在2’位被修飾基團(tuán)取代的核糖。本發(fā)明中的在2’位被修飾基團(tuán)取代的核糖是指核糖的2’位的羥基被修飾基團(tuán)取代，可以與核糖的2’位的羥基的立體構(gòu)型相同或不同，優(yōu)選與核糖的2’位的羥基的立體構(gòu)型相同。作為在2’位被修飾基團(tuán)取代的核糖的修飾基團(tuán)，可以舉出糖部修飾核苷酸中的2’-修飾核苷酸的修飾基團(tuán)的定義中示例的修飾基團(tuán)及氫原子，優(yōu)選2’-氰基、2’-鹵素、2’-O-氰基、2’-烷基、2’-取代烷基、2’-O-烷基、2’-O-取代烷基、2’-O-鏈烯基、2’-O-取代鏈烯基、2’-Se-烷基、2’-Se-取代烷基等，更優(yōu)選2’-氰基、2’-氟、2’-氯、2’-溴、2’-三氟甲基、2’-O-甲基、2’-O-乙基、2’-O-異丙基、2’-O-三氟甲基、2’-O-[2-(甲氧基)乙基]、2’-O-(3-氨基丙基)、2’-O-[2-(N,N-二甲基)氨基氧基]乙基、2’-O-[3-(N,N-二甲基氨基)丙基]、2’-O-{2-[2-(N,N-二甲基氨基)乙氧基]乙基}、2’-O-[2-(甲基氨基)-2-氧代乙基]、2’-Se-甲基、氫原子等，進(jìn)一步優(yōu)選2’-O-甲基、2’-O-乙基、2’-氟、氫原子等，最優(yōu)選2’-O-甲基及2’-O-氟。本發(fā)明中使用的核酸中包括：核酸的結(jié)構(gòu)中的磷酸部、酯部等中含有的氧原子等被取代為例如硫原子等其他原子的衍生物。此外，鍵合于反義鏈及有義鏈的5’末端的堿基的糖中，各個(gè)5’位的羥基可以被磷酸基或上述修飾基團(tuán)、或者通過生物體內(nèi)的核酸分解酶等被轉(zhuǎn)化為磷酸基或上述修飾基團(tuán)的基團(tuán)修飾。此外，鍵合于反義鏈及有義鏈的3’末端的堿基的糖中，各個(gè)3’位的羥基可以被磷酸基或上述修飾基團(tuán)、或者通過生物體內(nèi)的核酸分解酶等被轉(zhuǎn)化為磷酸基或上述修飾基團(tuán)的基團(tuán)修飾。作為單鏈的核酸，只要是例如包含由靶基因的連續(xù)15～27個(gè)堿基(核苷)、優(yōu)選15～25個(gè)堿基、更優(yōu)選15～23個(gè)堿基、進(jìn)一步優(yōu)選15～21個(gè)堿基、特別優(yōu)選15～19個(gè)堿基組成的序列的互補(bǔ)序列的核酸、或者在該核酸中有1～3個(gè)堿基、優(yōu)選1～2個(gè)堿基、更優(yōu)選1個(gè)堿基被取代、缺失或添加，并且具有靶蛋白質(zhì)的表達(dá)抑制活性的核酸，則可以為任意的核酸。該單鏈的核酸優(yōu)選使用包含15～30個(gè)連續(xù)堿基(核苷)、更優(yōu)選15～27個(gè)堿基、進(jìn)一步優(yōu)選15～25個(gè)堿基、特別優(yōu)選15～23個(gè)堿基的單鏈核酸。作為單鏈核酸，也可以使用將構(gòu)成上述雙鏈核酸的反義鏈及有義鏈經(jīng)間隔序列(間隔寡核苷酸)連接而得到的核酸。作為間隔寡核苷酸，優(yōu)選6～12個(gè)堿基的單鏈核酸分子，優(yōu)選其5’末端側(cè)的序列為2個(gè)U。作為間隔寡核苷酸的例子，可以舉出包含UUCAAGAGA序列的核酸。關(guān)于經(jīng)由間隔寡核苷酸連接的反義鏈及有義鏈的順序，任一方成為5’側(cè)均可。作為該單鏈核酸，優(yōu)選為例如通過莖環(huán)結(jié)構(gòu)具有雙鏈形成部的shRNA等單鏈核酸。shRNA等單鏈核酸通常為50～70個(gè)堿基長(zhǎng)度。也可以使用70個(gè)堿基長(zhǎng)度以下、優(yōu)選50個(gè)堿基長(zhǎng)度以下、進(jìn)一步優(yōu)選30個(gè)堿基長(zhǎng)度以下的核酸，其被設(shè)計(jì)為通過核糖核酸酶等的作用而形成上述單鏈核酸或雙鏈核酸。需要說明的是，本發(fā)明中使用的核酸可以采用已知的RNA或DNA合成方法、及RNA或DNA修飾方法進(jìn)行制造。本發(fā)明的組合物為包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)及核酸的組合物，可以舉出例如包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體、或者組合本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與中性脂質(zhì)及/或高分子所得的物質(zhì)與核酸的復(fù)合體的組合物、包含該復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜的組合物等。該脂質(zhì)膜為脂單層膜(脂質(zhì)單分子膜)或脂雙層膜(脂質(zhì)雙分子膜)均可。需要說明的是，該脂質(zhì)膜中可以含有本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)、中性脂質(zhì)及/或高分子。此外，該復(fù)合體及/或該脂質(zhì)膜中也可以含有除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)。此外，作為本發(fā)明的組合物，還可以舉出例如包含除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體、或者組合除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與中性脂質(zhì)及/或高分子所得的物質(zhì)與核酸的復(fù)合體以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜、且該脂質(zhì)膜中含有本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的組合物等。此時(shí)的脂質(zhì)膜也為脂單層膜(脂質(zhì)單分子膜)或脂雙層膜(脂質(zhì)雙分子膜)均可。此外，該脂質(zhì)膜中也可以含有除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)、中性脂質(zhì)及/或高分子。本發(fā)明的組合物中，更優(yōu)選包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體的組合物，包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜、且該脂質(zhì)膜中含有本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的組合物，以及包含除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜、且該脂質(zhì)膜中含有本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的組合物；進(jìn)一步優(yōu)選包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體的組合物，以及包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜、且該脂質(zhì)膜中含有本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的組合物；最優(yōu)選包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜、且該脂質(zhì)膜中含有本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的組合物。需要說明的是，在任意情況下，該脂質(zhì)膜中均可以含有中性脂質(zhì)及/或高分子。此外，該復(fù)合體及/或該脂質(zhì)膜中也可以含有除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)。作為復(fù)合體的形態(tài)，可以舉出例如核酸與由脂單(單分子)層形成的膜(逆膠束)的復(fù)合體、核酸與脂質(zhì)體的復(fù)合體、核酸與膠束的復(fù)合體等，優(yōu)選舉出核酸與由脂單層形成的膜的復(fù)合體、或者核酸與脂質(zhì)體的復(fù)合體。作為包含復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜的組合物，可以舉出例如該復(fù)合體以及用脂雙層膜將該復(fù)合體封入而得到的脂質(zhì)體等。需要說明的是，本發(fā)明的組合物中，可以使用一種或多種本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，此外，也可以在本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)中混合除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)。作為除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，可以舉出例如日本特開昭61-161246號(hào)公報(bào)(美國(guó)專利5049386號(hào)說明書)中公開的、N-[1-(2,3-二油基氧基)丙基]-N,N,N-三甲基氯化銨(DOTMA)、N-(2,3-二-(9-(Z)-十八碳烯?；趸?)-丙-1-基-N,N,N-三甲基氯化銨(DOTAP)等，國(guó)際公開第91/16024號(hào)及國(guó)際公開第97/019675號(hào)中公開的、N-[1-(2,3-二油基氧基丙基)]-N,N-二甲基-N-羥基乙基溴化銨(DORIE)、2,3-二油基氧基-N-[2-(精胺羧基酰胺)乙基]-N,N-二甲基-1-丙基-三氟乙酸銨(DOSPA)等，國(guó)際公開第2005/121348號(hào)中公開的DLinDMA等，國(guó)際公開第2009/086558號(hào)中公開的DLin-K-DMA、國(guó)際公開第2011/136368號(hào)中公開的(3R,4R)-3,4-雙((Z)-十六碳-9-烯基氧基)-1-甲基吡咯烷、N-甲基-N,N-雙(2-((Z)-十八碳-6-烯基氧基)乙基)胺等，優(yōu)選舉出DOTMA、DOTAP、DORIE、DOSPA、1,2-二亞油基氧基-N,N-二甲基氨基丙烷(DLinDMA)、2,2-二亞油基-4-二甲基氨基甲基-[1,3]-二氧戊環(huán)(DLin-K-DMA)等具有包含2個(gè)未取代烷基的叔胺部位或包含3個(gè)未取代烷基的季銨部位的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，更優(yōu)選舉出具有所述叔胺部位的陽(yáng)離子性脂質(zhì)。所述叔胺部位及所述季銨部位的未取代烷基更優(yōu)選為甲基。需要說明的是，本發(fā)明的組合物可以包含核酸，也可以包含與核酸化學(xué)性地近似的化合物。本發(fā)明的組合物可以采用已知的制造方法或以其為基準(zhǔn)的方法進(jìn)行制造，可以是采用任何制造方法制造的組合物。例如，對(duì)于作為組合物之一的包含脂質(zhì)體的組合物的制造，可以適用已知的脂質(zhì)體的制備方法。作為已知的脂質(zhì)體的制備方法，可以舉出例如Bangham等的脂質(zhì)體制備法[參見“J.Mol.Biol.”，1965年，第13卷，p.238-252]、乙醇注入法[參見“J.CellBiol.”，1975年，第66卷，p.621-634、法蘭西加壓法[參見“FEBSLett.”，1979年，第99卷，p.210-214]、凍融法[參見“Arch.Biochem.Biophys.”，1981年，第212卷，p.186-194]、逆向蒸發(fā)法[參見“Proc.Natl.Acad.Sci.USA”，1978年，第75卷，p.4194-4198]或pH梯度法(參見例如日本專利第2572554號(hào)公報(bào)、日本專利第2659136號(hào)公報(bào)等)等。作為制造脂質(zhì)體時(shí)將脂質(zhì)體分散的溶液，可以使用例如水、酸、堿、各種緩沖液、生理鹽水或氨基酸輸注液等。此外，制造脂質(zhì)體時(shí)，還可以添加例如檸檬酸、抗壞血酸、半胱氨酸或乙二胺四乙酸(EDTA)等抗氧化劑、例如丙三醇、葡萄糖或氯化鈉等等滲劑等。此外，也可以通過例如下述方法制造脂質(zhì)體：將本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)、或者本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的混合物等溶解在例如乙醇等有機(jī)溶劑中，蒸餾除去溶劑后，添加生理鹽水等，振蕩攪拌，形成脂質(zhì)體。此外，本發(fā)明的組合物可以通過下述方法來制造，所述方法為例如將本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)、或者本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的混合物預(yù)先溶解在氯仿中，接著加入核酸的水溶液和甲醇并進(jìn)行混合，形成陽(yáng)離子性脂質(zhì)/核酸的復(fù)合體，進(jìn)而取出氯仿層，向其中加入聚乙二醇化磷脂、中性脂質(zhì)和水，形成油包水型(W/O)乳液，采用逆向蒸發(fā)法進(jìn)行處理從而進(jìn)行制造的方法(參見日本特表2002-508765號(hào)公報(bào))；將核酸溶解在酸性電解質(zhì)水溶液中，加入例如本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)、或者本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的混合物(乙醇中)，降低乙醇濃度至20v/v％從而制備內(nèi)含上述核酸的脂質(zhì)體，進(jìn)行尺寸過濾，通過透析除去過量的乙醇后，進(jìn)一步提高試樣的pH，透析除去附著在組合物表面的核酸從而進(jìn)行制造的方法(參見日本特表2002-501511號(hào)公報(bào)及BiochimicaetBiophysicaActa，2001年，第1510卷，p.152-166)等。本發(fā)明的組合物中，包含含有本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體、或者組合本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與中性脂質(zhì)及/或高分子所得的物質(zhì)與核酸的復(fù)合體、以及將該復(fù)合體封入的脂雙層膜的脂質(zhì)體的組合物，可以按照例如國(guó)際公開第02/28367號(hào)及國(guó)際公開第2006/080118號(hào)等中記載的制造方法進(jìn)行制造。此外，本發(fā)明的組合物中，例如包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體、或者組合本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與中性脂質(zhì)及/或高分子所得的物質(zhì)與核酸的復(fù)合體、以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜的組合物，包含除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體、或者組合除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與中性脂質(zhì)及/或高分子所得的物質(zhì)與核酸的復(fù)合體、以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜、且該脂質(zhì)膜中含有本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的組合物等，可如下得到：按照國(guó)際公開第02/28367號(hào)及國(guó)際公開第2006/080118號(hào)等中記載的制造方法，制造各復(fù)合體，將所述復(fù)合體在不溶解的狀態(tài)下分散至水或0～40％乙醇水溶液中(A液)，另將各脂質(zhì)膜成分溶解在例如乙醇水溶液中(B液)，將等量或體積比為1:1～7:3的A液和B液混合，進(jìn)而適當(dāng)?shù)丶铀?，由此得到。需要說明的是，作為A液及B液中的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，可以使用一種或多種本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)或除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)，此外，也可以將本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)組合來混合使用。需要說明的是，本發(fā)明中，在包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體、或者組合本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與中性脂質(zhì)及/或高分子所得的物質(zhì)與核酸的復(fù)合體、以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜的組合物，包含除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體、或者組合除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與中性脂質(zhì)及/或高分子所得的物質(zhì)與核酸的復(fù)合體、以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜、且該脂質(zhì)膜中含有本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的組合物等的制造中及制造后，由于復(fù)合體中的核酸與脂質(zhì)膜中的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的靜電相互作用、復(fù)合體中的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與脂質(zhì)膜中的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的融合，復(fù)合體及膜的結(jié)構(gòu)會(huì)發(fā)生位移，所得的物質(zhì)也分別被包括在包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體、或組合本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與中性脂質(zhì)及/或高分子所得的物質(zhì)與核酸的復(fù)合體、以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜的組合物，或者包含除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體、或組合除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)與中性脂質(zhì)及/或高分子所得的物質(zhì)與核酸的復(fù)合體、以及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜、且該脂質(zhì)膜中含有本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的組合物等中。按照國(guó)際公開第02/28367號(hào)及國(guó)際公開第2006/080118號(hào)等中記載的制造方法，制造核酸(與上文所述的含義相同)、優(yōu)選為雙鏈核酸、與包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)及/或除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的脂質(zhì)體的復(fù)合體，將該復(fù)合體在不溶解的狀態(tài)下分散至水或0～40％乙醇水溶液中(A液)，另將本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)及/或除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)溶解在乙醇水溶液中(B液)，將等量或體積比為1:1～7:3的A液和B液混合，或者進(jìn)而適當(dāng)?shù)丶铀?，由此也可以得到包含該核酸和該?yáng)離子性脂質(zhì)的組合物。該組合物優(yōu)選為包含陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體、及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜的組合物，或包含該核酸與由含有該陽(yáng)離子性脂質(zhì)的脂單層形成的膜(逆膠束)的復(fù)合體、及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜的組合物。這些情況下的脂質(zhì)膜為脂單層膜(脂質(zhì)單分子膜)或脂雙層膜(脂質(zhì)雙分子膜)均可。此外，關(guān)于本公開文本中的該核酸與該脂質(zhì)體的復(fù)合體中的脂質(zhì)體，優(yōu)選為預(yù)先將大小調(diào)節(jié)成平均粒徑10nm～400nm、更優(yōu)選20nm～110nm、進(jìn)一步優(yōu)選30nm～80nm的脂質(zhì)體。此外，該復(fù)合體及/或脂質(zhì)膜中，也可以含有中性脂質(zhì)及/或高分子。此外，A液只要能形成脂質(zhì)體與該核酸的復(fù)合體即可，乙醇濃度可以為20～70％。此外，代替將等量的A液和B液混合，可以以成為將A液和B液混合后復(fù)合體不溶解、且B液中的陽(yáng)離子性脂質(zhì)不溶解的乙醇濃度的比例將A液和B液進(jìn)行混合。優(yōu)選以成為復(fù)合體不溶解、B液中的陽(yáng)離子性脂質(zhì)不溶解、且乙醇濃度為30～60％的乙醇水溶液的比例將A液和B液混合，或者也可以以成為將A液和B液混合后復(fù)合體不溶解的乙醇濃度的比例將A液和B液混合，進(jìn)而加水，由此調(diào)配成B液中的陽(yáng)離子性脂質(zhì)不溶解的乙醇濃度。本公開文本中的該A液中的核酸與脂質(zhì)體的復(fù)合體，在將A液和B液混合、進(jìn)而適當(dāng)?shù)丶铀螅湫螒B(tài)變成了由含有陽(yáng)離子性脂質(zhì)的脂單層形成的膜(逆膠束)與核酸的復(fù)合體。采用本公開文本中的制造方法得到的包含該核酸和該陽(yáng)離子性脂質(zhì)的組合物，優(yōu)選為包含陽(yáng)離子性脂質(zhì)與核酸的復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜的組合物，或者，為包含由含有陽(yáng)離子性脂質(zhì)的脂單層形成的膜(逆膠束)與核酸的復(fù)合體、及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜、且該脂質(zhì)膜中含有陽(yáng)離子性脂質(zhì)的組合物，其制造性(收率及/或均勻性)優(yōu)異。本發(fā)明的組合物中，復(fù)合體中的本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的分子總數(shù)優(yōu)選相對(duì)于該核酸的磷原子數(shù)為0.5～4倍，更優(yōu)選為1.5～3.5倍，進(jìn)一步優(yōu)選為2～3倍。此外，該復(fù)合體中的本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)及除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的分子總數(shù)優(yōu)選相對(duì)于該核酸的磷原子數(shù)為0.5～4倍，更優(yōu)選為1.5～3.5倍，進(jìn)一步優(yōu)選為2～3倍。本發(fā)明的組合物中，包含復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜的組合物中的本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的分子總數(shù)優(yōu)選相對(duì)于該核酸的磷原子數(shù)為1～10倍，更優(yōu)選為2.5～9倍，進(jìn)一步優(yōu)選為3.5～8倍。此外，該組合物中的本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)及除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的分子總數(shù)優(yōu)選相對(duì)于該核酸的磷原子數(shù)為1～10倍，更優(yōu)選為2.5～9倍，進(jìn)一步優(yōu)選為3.5～8倍。作為中性脂質(zhì)，可以為單純脂質(zhì)、復(fù)合脂質(zhì)或衍生脂質(zhì)中的任一種，可以舉出例如磷脂、甘油糖脂、神經(jīng)鞘糖脂、鞘氨基醇(sphingoid)或甾醇等，但不限定于這些。本發(fā)明的組合物中包含中性脂質(zhì)時(shí)，中性脂質(zhì)的分子總數(shù)優(yōu)選相對(duì)于本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)及除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的分子總數(shù)為0.1～2倍，更優(yōu)選為0.2～1.5倍，進(jìn)一步優(yōu)選為0.3～1.2倍。本發(fā)明的組合物均可以將中性脂質(zhì)包含在復(fù)合體中，也可以包含在將復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜中，更優(yōu)選至少包含在將復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜中，進(jìn)一步優(yōu)選在復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜中的任一方中均有包含。作為中性脂質(zhì)中的磷脂，可以舉出例如磷脂酰膽堿(phosphatidylcholine)(具體而言，大豆磷脂酰膽堿(soybeanphosphatidylcholine)、蛋黃磷脂酰膽堿(eggyolkphosphatidylcholine)(EPC)、二硬脂酰磷脂酰膽堿(distearoylphosphatidylcholine)(DSPC)、二棕櫚酰磷脂酰膽堿(dipalmitoylphosphatidylcholine)(DPPC)、棕櫚酰油酰磷脂酰膽堿(palmitoyloleoylphosphatidylcholine)(POPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿(dimyristoylphosphatidylcholine)(DMPC)、二油酰磷脂酰膽堿(dioleoylphosphatidylcholine)(DOPC)等)、磷脂酰乙醇胺(phosphatidylethanolamine)(具體而言，二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(distearoylphosphatidylethanolamine)(DSPE)、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺(dipalmitoylphosphatidylethanolamine)(DPPE)、二油酰磷脂酰乙醇胺(dioleoylphosphatidylethanolamine)(DOPE)、二肉豆蔻酰磷酸乙醇胺(dimyristoylphosphoethanolamine)(DMPE)、16-0-單甲基PE(16-0-monomethylPE)、16-0-二甲基PE(16-0-dimethylPE)、18-1-反式PE(18-1-transPE)、棕櫚酰油酰-磷脂酰乙醇胺(palmitoyloleoyl-phosphatidylethanolamine)(POPE)、1-硬酯酰-2-油酰-磷脂酰乙醇胺(1-stearoyl-2-oleoyl-phosphatidylethanolamine)(SOPE)等)、甘油磷脂(glycerophospholipid)(具體而言，磷脂酰絲氨酸(phosphatidylserine)、磷脂酸(phosphatidicacid)、磷脂酰甘油(phosphatidylglycerol)、磷脂酰肌醇(phosphatidylinositol)、棕櫚酰油酰磷脂酰甘油(palmitoyloleoylphosphatidylglycerol)(POPG)、溶血磷脂酰膽堿(lysophosphatidylcholine)等)、神經(jīng)鞘氨醇磷脂(sphingophospholipid)(具體而言，神經(jīng)鞘磷脂(sphingomyelin)、磷酸乙醇胺神經(jīng)酰胺(ceramidephosphoethanolamine)、神經(jīng)酰胺磷酸甘油(ceramidephosphoglycerol)、磷酸甘油磷酸神經(jīng)酰胺(ceramidephosphoglycerophosphate)等)、甘油磷酸脂(glycerophosphonolipid)、神經(jīng)鞘磷酸脂(sphingophosphonolipid)、天然卵磷脂(naturallecithin)(具體而言蛋黃卵磷脂(eggyolklecithin)、大豆卵磷脂(soybeanlecithin)等)或者氫化磷脂(hydrogenatedphospholipid)(具體而言，氫化大豆磷脂酰膽堿(hydrogenatedsoybeanphosphatidylcholine)等)等天然或者合成的磷脂。作為中性脂質(zhì)中的甘油糖脂，可以舉出例如硫氧基核糖基甘油酯(sulfoxyribosylglyceride)、二糖基甘油二酯(diglycosyldiglyceride)、二半乳糖甘油二酯(digalactosyldiglyceride)、半乳糖甘油二酯(galactosyldiglyceride)或糖基甘油二酯(glycosyldiglyceride)等。作為中性脂質(zhì)中的鞘糖脂，可以舉出例如半乳糖基腦苷脂(galactosylcerebroside)、乳糖腦苷脂(lactosylcerebroside)或者神經(jīng)節(jié)苷脂(ganglioside)等。作為中性脂質(zhì)中的鞘氨基醇，可以舉出例如鞘氨糖(sphingan)、二十鞘氨糖(icosasphingan)、鞘氨醇(sphingosine)或者它們的衍生物等。作為衍生物，可以舉出將例如鞘氨糖、二十鞘氨糖或者鞘氨醇等的-NH2轉(zhuǎn)化為-NHCO(CH2)xCH3(式中，x為0～18的整數(shù)，其中優(yōu)選6、12或18)的產(chǎn)物等。作為中性脂質(zhì)中的甾醇，可以舉出例如膽固醇(cholesterol)、二氫膽甾醇(dihydrocholesterol)、羊毛甾醇(lanosterol)、β-谷甾醇(β-sitosterol)、菜油甾醇(campesterol)、豆甾醇(stigmasterol)、菜子甾醇(brassicasterol)、麥角鈣化甾醇(ergocasterol)、巖藻甾醇(fucosterol)或者3β-[N-(N’,N’-二甲基氨基乙基)氨基甲酰基]膽固醇(3β-[N-(N’,N’-dimethylaminoethyL)carbamoyl]cholesterol)(DC-ChoL)等。作為高分子，可以舉出包含例如蛋白質(zhì)、白蛋白、葡聚糖、polyfect、脫乙酰殼多糖(chitosan)、硫酸葡聚糖(dextransulfate)、例如聚-L-賴氨酸、聚乙烯亞胺、聚天冬氨酸、苯乙烯馬來酸共聚物、異丙基丙烯酰胺-丙烯基吡咯烷酮共聚物、聚乙二醇修飾樹狀聚體(dendrimer)、聚乳酸、聚乳酸聚乙醇酸或聚乙二醇化聚乳酸等高分子或者它們的鹽的一種以上形成的膠束等。此處，高分子中的鹽，包括例如金屬鹽、銨鹽、酸加成鹽、有機(jī)胺加成鹽、氨基酸加成鹽等。作為金屬鹽，可以舉出例如鋰鹽、鈉鹽、鉀鹽等堿金屬鹽，鎂鹽、鈣鹽等堿土金屬鹽，鋁鹽或鋅鹽等。作為銨鹽，可以舉出例如銨或四甲基銨等鹽。作為酸加成鹽，可以舉出例如鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽或磷酸鹽等無機(jī)酸鹽，及乙酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽或檸檬酸鹽等有機(jī)酸鹽。作為有機(jī)胺加成鹽，可以舉出例如嗎啉或哌啶等的加成鹽。作為氨基酸加成鹽，可以舉出例如甘氨酸、苯基丙氨酸、天冬氨酸、谷氨酸或賴氨酸等的加成鹽。此外，本發(fā)明的組合物均優(yōu)選包含例如選自糖、肽、核酸及水溶性高分子中的一種以上的物質(zhì)的脂質(zhì)衍生物或者脂肪酸衍生物或表面活性劑等，可以包含在復(fù)合體中，也可以包含在將復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜中，更優(yōu)選在復(fù)合體及將該復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜中均有包含。本發(fā)明的組合物包含選自糖、肽、核酸及水溶性高分子中的一種以上的物質(zhì)的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物時(shí)，選自糖、肽、核酸及水溶性高分子中的一種以上的物質(zhì)的脂質(zhì)衍生物及脂肪酸衍生物的分子總數(shù)優(yōu)選相對(duì)于本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)及除本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)以外的陽(yáng)離子性脂質(zhì)的分子總數(shù)為0.01～0.3倍，更優(yōu)選為0.02～0.25倍，進(jìn)一步優(yōu)選為0.03～0.15倍。作為選自糖、肽、核酸及水溶性高分子中的一種以上的物質(zhì)的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物或者表面活性劑，優(yōu)選舉出糖脂、或水溶性高分子的脂質(zhì)衍生物或者脂肪酸衍生物，更優(yōu)選舉出水溶性高分子的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物。選自糖、肽、核酸及水溶性高分子中的一種以上的物質(zhì)的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物或者表面活性劑優(yōu)選為下述具有兩面性的物質(zhì)，所述物質(zhì)具有分子的一部分與組合物的其他構(gòu)成成分通過例如疏水性親和力、靜電相互作用等結(jié)合的性質(zhì)，并且具有其他部分與制造組合物時(shí)的溶劑通過例如親水性親和力、靜電相互作用等結(jié)合的性質(zhì)。作為糖、肽或核酸的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物，可以舉出例如蔗糖、山梨醇、乳糖等糖、例如來自酪蛋白的肽、來自蛋清的肽、來自大豆的肽、谷胱甘肽等肽、或者例如DNA、RNA、質(zhì)粒、siRNA、ODN等核酸、與上述組合物的定義中舉出的中性脂質(zhì)或者本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)或例如硬脂酸、棕櫚酸、肉豆蔻酸、月桂酸等脂肪酸結(jié)合而成的物質(zhì)等。此外，作為糖的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物，還包括例如上述組合物的定義中舉出的甘油糖脂或神經(jīng)鞘糖脂等。作為水溶性高分子的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物，可以舉出例如聚乙二醇、聚甘油、聚乙烯亞胺、聚乙烯醇、聚丙烯酸、聚丙烯酰胺、寡糖、糊精、水溶性纖維素、葡聚糖、硫酸軟骨素、聚甘油、脫乙酰殼多糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚天冬酰胺、聚-L-賴氨酸、甘露聚糖、普魯蘭多糖、寡甘油等或它們的衍生物、與上述組合物的定義中舉出的中性脂質(zhì)或者本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)、或例如硬脂酸、棕櫚酸、肉豆蔻酸或月桂酸等脂肪酸結(jié)合而成的物質(zhì)、它們的鹽等，更優(yōu)選舉出聚乙二醇或聚甘油等的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物及它們的鹽，進(jìn)一步優(yōu)選舉出聚乙二醇的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物及它們的鹽。作為聚乙二醇的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物，可以舉出例如聚乙二醇化脂質(zhì)[具體而言，聚乙二醇-磷脂酰乙醇胺(更具體而言，1,2-二硬脂酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](PEG-DSPE)、1,2-二肉豆蔻酰-sn-甘油-3-磷酸乙醇胺-N-[甲氧基(聚乙二醇)-2000](PEG-DMPE)等)、聚氧乙烯氫化蓖麻油60、聚氧乙烯蓖麻油(CREMOPHOREL)等]、聚乙二醇失水山梨糖醇脂肪酸酯類(具體而言，聚氧乙烯山梨醇酐單油酸酯等)或聚乙二醇脂肪酸酯類等，更優(yōu)選舉出聚乙二醇化脂質(zhì)。作為聚甘油的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物，可以舉出例如聚甘油化脂質(zhì)(具體而言，聚甘油-磷脂酰乙醇胺等)或聚甘油脂肪酸酯類等，更優(yōu)選舉出聚甘油化脂質(zhì)。作為表面活性劑，可以舉出例如聚氧乙烯山梨醇酐單油酸酯(具體而言，聚山梨酸酯80等)、聚氧乙烯聚氧丙烯二醇(具體而言，普朗尼克(Pluronic)F68等)、失水山梨糖醇脂肪酸酯(具體而言，失水山梨糖醇單月桂酸酯、失水山梨糖醇單油酸酯等)、聚氧乙烯衍生物(具體而言，聚氧乙烯氫化蓖麻油60、聚氧乙烯月桂醇等)、丙三醇脂肪酸酯或聚乙二醇烷基醚等，優(yōu)選舉出聚氧乙烯聚氧丙烯二醇、丙三醇脂肪酸酯或聚乙二醇烷基醚等。此外，對(duì)于本發(fā)明的組合物中的復(fù)合體及脂質(zhì)膜，還可以任意地進(jìn)行利用例如水溶性高分子等的表面改性[參見D.D.Lasic、F.Martin編，“StealthLiposomes”(美國(guó))，CRCPressInc，1995年，p.93-102]。作為可用于表面改性的水溶性高分子，可以舉出例如聚乙二醇、聚甘油、聚乙烯亞胺、聚乙烯醇、聚丙烯酸、聚丙烯酰胺、寡糖、糊精、水溶性纖維素、葡聚糖、硫酸軟骨素、聚甘油、脫乙酰殼多糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚天冬酰胺、聚-L-賴氨酸、甘露聚糖、普魯蘭多糖、寡甘油等，優(yōu)選舉出葡聚糖、普魯蘭多糖、甘露聚糖、支鏈淀粉或羥基乙基淀粉等。此外，表面改性中，可以使用選自糖、肽、核酸及水溶性高分子中的一種以上的物質(zhì)的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物(與上文所述的含義相同)等。該表面改性是使本發(fā)明的組合物中的復(fù)合體及脂質(zhì)膜中包含選自糖、肽、核酸及水溶性高分子中的一種以上的物質(zhì)的脂質(zhì)衍生物或脂肪酸衍生物或者表面活性劑的方法之一。此外，也可以任選地通過將經(jīng)靶向化的配體以共價(jià)鍵鍵合于本發(fā)明的組合物的脂質(zhì)成分的極性首殘基而將該經(jīng)靶向化的配體直接鍵合于本發(fā)明的組合物的表面(參見國(guó)際公開第2006/116107號(hào))。本發(fā)明的組合物中的復(fù)合體或?qū)?fù)合體封入的脂質(zhì)膜的平均粒徑可以根據(jù)需要自由選擇，優(yōu)選為下文所述的平均粒徑。作為調(diào)節(jié)平均粒徑的方法，可以舉出例如擠出法、將較大的多層膜脂質(zhì)體(MLV)等機(jī)械粉碎(具體而言，使用MantonGaulin、高壓微射流均質(zhì)機(jī)(Microfluidizer)等)的方法[參見R.H.Muller、S.Benita、B.Bohm編著，“EmulsionandNanosuspensionsfortheFormulationofPoorlySolubleDrugs”，德國(guó)，ScientificPublishersStuttgart，1998年，p.267-294]等。關(guān)于本發(fā)明的組合物中的復(fù)合體的大小，平均粒徑優(yōu)選為約5nm～200nm，更優(yōu)選為約20nm～150nm，進(jìn)一步優(yōu)選為約30nm～100nm。關(guān)于本發(fā)明的組合物(將復(fù)合體封入的脂質(zhì)膜)的大小，平均粒徑優(yōu)選為約10nm～300nm，更優(yōu)選為約30nm～200nm，進(jìn)一步優(yōu)選為約50nm～150nm。對(duì)于本發(fā)明的組合物中的復(fù)合體或?qū)?fù)合體封入的脂質(zhì)膜的平均粒徑，可采用例如動(dòng)態(tài)光散射法進(jìn)行測(cè)定。通過將本發(fā)明的組合物導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的細(xì)胞，能夠?qū)⒈景l(fā)明的組合物中的核酸導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)。在體內(nèi)將本發(fā)明的組合物向哺乳動(dòng)物的細(xì)胞中的導(dǎo)入可以按照能夠在體內(nèi)進(jìn)行的已知的轉(zhuǎn)染的步驟進(jìn)行。例如，通過將本發(fā)明的組合物靜脈內(nèi)施予至包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物，能夠送達(dá)至例如產(chǎn)生腫瘤或炎癥的臟器或部位，將本發(fā)明的組合物中的核酸導(dǎo)入送達(dá)臟器或部位的細(xì)胞內(nèi)。作為產(chǎn)生腫瘤或炎癥的臟器或部位，沒有特別限定，可以舉出例如胃、大腸、肝臟、肺、脾臟、胰腺、腎臟、膀胱、皮膚、血管、眼球等。此外，通過將本發(fā)明的組合物靜脈內(nèi)施予至包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物，能夠送達(dá)至例如肝臟、肺、脾臟及/或腎臟，將本發(fā)明的組合物中的核酸導(dǎo)入送達(dá)臟器或部位的細(xì)胞內(nèi)。肝臟、肺、脾臟及/或腎臟的細(xì)胞可以為正常細(xì)胞、與腫瘤或者炎癥相關(guān)的細(xì)胞或與其他疾病相關(guān)的細(xì)胞中的任一種。本發(fā)明的組合物中的核酸只要是具有利用了RNA干擾(RNAi)的靶基因表達(dá)抑制作用的核酸，則能夠在體內(nèi)將抑制靶基因的表達(dá)的該核酸等導(dǎo)入哺乳動(dòng)物的細(xì)胞內(nèi)，能夠抑制靶基因的表達(dá)。施予對(duì)象優(yōu)選為人。此外，本發(fā)明中的靶基因只要是在例如肝臟、肺、腎臟或脾臟中表達(dá)的基因、優(yōu)選在肝臟中表達(dá)的基因，則能夠?qū)⒈景l(fā)明的組合物用作肝臟、肺、腎臟或脾臟相關(guān)疾病的治療劑或預(yù)防劑、優(yōu)選肝臟相關(guān)疾病的治療劑或預(yù)防劑。即，本發(fā)明還提供肝臟、肺、腎臟或脾臟相關(guān)疾病的治療方法，其中，將上文說明過的本發(fā)明的組合物施予至哺乳動(dòng)物。施予對(duì)象優(yōu)選為人，更優(yōu)選罹患肝臟、肺、腎臟或脾臟相關(guān)疾病的人。此外，本發(fā)明的組合物還可以用作在關(guān)于肝臟、肺、腎臟或脾臟相關(guān)疾病的治療劑或預(yù)防劑的體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)模型中用于驗(yàn)證抑制靶基因的有效性的工具。本發(fā)明的組合物還可以用作以例如血液成分等生物體成分(例如血液、消化道等)中的上述核酸的穩(wěn)定化、副作用的降低、或者增大對(duì)包含靶基因的表達(dá)部位的組織或臟器的藥物蓄積性等為目的的制劑。將本發(fā)明的組合物用作藥品中的肝臟、肺、腎臟或脾臟相關(guān)疾病等的治療劑或預(yù)防劑時(shí)，作為施予途徑，優(yōu)選使用在治療時(shí)最有效的施予途徑，可以舉出例如口腔內(nèi)、氣管內(nèi)、直腸內(nèi)、皮下、肌肉內(nèi)或靜脈內(nèi)等非口服施予或口服施予，優(yōu)選舉出靜脈內(nèi)施予或肌肉內(nèi)施予，更優(yōu)選舉出靜脈內(nèi)施予。施予量根據(jù)施予對(duì)象的癥狀、年齡、施予途徑等的不同而不同，例如可以以換算為核酸的1天施予量約為0.1μg～1000mg的方式施予。作為適合于靜脈內(nèi)施予或肌肉內(nèi)施予的制劑，可以舉出例如注射劑，可以將通過上述方法制備的組合物的分散液直接以例如注射劑等的形態(tài)使用，也可以從該分散液中通過例如過濾、離心分離等除去溶劑進(jìn)行使用，也可以將該分散液冷凍干燥進(jìn)行使用，及/或?qū)⒓尤肓死绺事短谴?、乳糖、海藻糖、麥芽糖或甘氨酸等賦形劑的分散液冷凍干燥進(jìn)行使用。為注射劑時(shí)，優(yōu)選向上述組合物的分散液或上述除去溶劑或冷凍干燥而得的組合物中混合例如水、酸、堿、各種緩沖液、生理鹽水或氨基酸輸注液等來制備注射劑。此外，也可以添加例如檸檬酸、抗壞血酸、半胱氨酸或者EDTA等抗氧化劑或甘油、葡萄糖或氯化鈉等等滲劑等來制備注射劑。此外，也可以加入例如甘油等冷凍保存劑進(jìn)行冷凍保存。接下來，通過實(shí)施例、參考例及試驗(yàn)例具體地說明本發(fā)明。但是，本發(fā)明并不限定于這些實(shí)施例、參考例及試驗(yàn)例。需要說明的是，實(shí)施例及參考例中所示的質(zhì)子核磁共振光譜(1HNMR)是在270MHz、300MHz、400MHz或500MHz下測(cè)得的，根據(jù)化合物及測(cè)定條件的不同，有時(shí)未能清楚地觀測(cè)到交換性質(zhì)子。需要說明的是，作為信號(hào)多重度的表述，使用通常所用的表述方式。參考例12,2-雙[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基]丙烷-1,3-二醇(化合物IIc-1)將丙二酸二甲酯(東京化成工業(yè)公司制，0.50g，3.78mmol)溶解于四氫呋喃(20mL)中，加入甲磺酸(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基酯(Nu-ChekPrep,Inc公司制，3.26g，9.46mmol)、氫化鈉(NacalaiTesque公司制，油性60％，0.454g，11.4mmol)及四丁基碘化銨(和光純藥工業(yè)公司制，0.280g，0.757mmol)，于70℃攪拌3小時(shí)。在反應(yīng)混合物中加入飽和氯化銨水溶液，用庚烷萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，進(jìn)行減壓濃縮。通過將得到的殘?jiān)枚讨?shortcolumn)進(jìn)行純化，從而得到2,2-雙[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基]丙二酸二甲酯的粗產(chǎn)物。將得到的粗產(chǎn)物溶解于四氫呋喃(4mL)中，在冰冷卻下加入氫化鋁鋰(東京化成工業(yè)公司制，0.826g，21.8mmol)，攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中依次加入水(0.75mL)、15％氫氧化鈉水溶液(0.75mL)、水(2.25mL)，停止反應(yīng)。通過過濾除去產(chǎn)生的不溶物。對(duì)濾液進(jìn)行減壓濃縮，將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(庚烷/乙酸乙酯＝80/20)進(jìn)行純化，由此得到化合物IIc-1(1.51g，收率70％)。ESI-MSm/z:573(M+H)+實(shí)施例11-甲基-3,3-雙[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基]氮雜環(huán)丁烷(化合物1)步驟1將參考例1中得到的化合物IIc-1(1.00g，1.75mmol)溶解于二氯甲烷(5mL)中，加入吡啶(和光純藥工業(yè)公司制，1.41mL，17.5mmol)及二甲基氨基吡啶(NacalaiTesque公司制，0.0210g，0.175mmol)。在冰冷卻下加入三氟甲磺酸酐(NacalaiTesque公司制，0.855mL，5.24mmol)，攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，用庚烷萃取3次。用氯化銨水溶液、飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾。對(duì)濾液進(jìn)行減壓濃縮，由此得到雙(三氟甲磺酸)2,2-雙[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基]丙烷-1,3-二基酯的粗產(chǎn)物(1.50g，收率100％)。步驟2將步驟1中得到的粗產(chǎn)物(0.500g，0.597mmol)溶解于N,N-二甲基乙酰胺(3mL)中，加入甲胺(東京化成工業(yè)公司制，約9.8mol/L的甲醇溶液，3.05mmol，29.9mmol)，在油浴上于60℃攪拌1小時(shí)。冷卻至室溫后，向反應(yīng)混合物中加入水，用己烷萃取。用無水硫酸鎂干燥有機(jī)層后，進(jìn)行過濾。對(duì)濾液進(jìn)行減壓濃縮，將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(NH硅膠，己烷/乙酸乙酯＝100/0～70/30)進(jìn)行純化，由此得到化合物1(0.32g，收率94％)。ESI-MSm/z:568(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝6.8Hz),1.12-1.38(36H,m),1.48-1.55(4H,m),2.05(8H,q,J＝6.8Hz),2.30(3H,s),2.78(4H,t,J＝6.8Hz),2.93(4H,s),5.29-5.43(8H,m).實(shí)施例23,3-雙[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基]-1-丙基氮雜環(huán)丁烷(化合物2)步驟1將參考例1中得到的化合物IIc-1(3.50g，6.11mmol)溶解于二氯甲烷(15mL)中，在冰冷卻下加入三乙胺(和光純藥工業(yè)公司制，2.55mL，18.3mmol)及甲磺酰氯(東京化成工業(yè)公司制，1.12mL，15.3mmol)，攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，用庚烷萃取。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后，進(jìn)行過濾。對(duì)濾液進(jìn)行減壓濃縮，將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(氯仿/甲醇＝100/0～97/3)進(jìn)行純化，由此得到二甲磺酸2,2-雙[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基]丙烷-1,3-二基酯(3.30g，收率74％)。步驟2將步驟1中得到的二甲磺酸2,2-雙[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基]丙烷-1,3-二基酯(0.200g，0.274mmol)溶解于N,N-二甲基乙酰胺(0.5mL)中，加入丙胺(0.451mL，5.49mmol)，使用微波反應(yīng)裝置于130℃攪拌6小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，用庚烷萃取。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥，進(jìn)行過濾。對(duì)濾液進(jìn)行減壓濃縮，將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(NH硅膠，庚烷/乙酸乙酯＝100/0～80/20)進(jìn)行純化，由此得到化合物2(14.8mg，收率9％)。ESI-MSm/z:597(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.84-0.92(9H,m),1.11-1.41(38H,m),1.49-1.56(4H,m),2.05(8H,q,J＝6.6Hz),2.36(2H,t,J＝7.7Hz),2.77(4H,t,J＝5.9Hz),2.90(4H,s),5.27-5.45(8H,m).實(shí)施例33,3-雙[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基]氮雜環(huán)丁烷(化合物3)采用與實(shí)施例1同樣的方法，使用氨(Sigma-Aldrich公司制，約7mol/L的甲醇溶液，4.27mL，29.9mmol)代替甲胺，得到化合物3(0.0750g，收率23％)。ESI-MSm/z:554(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝7.0Hz),1.12-1.38(36H,m),1.53-1.58(4H,m),2.05(8H,q,J＝6.8Hz),2.78(4H,t,J＝6.8Hz),3.28(4H,s),5.31-5.41(8H,m).實(shí)施例43,3-雙[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基]氮雜環(huán)丁烷-1-甲酸3-(二甲基氨基)丙基酯(化合物4)將實(shí)施例3中得到的化合物3溶解于乙腈(2mL)中，加入采用以“JournaloftheAmericanChemicalSociety(J.Am.Chem.Soc.)”，1981年，第103卷，p.4194-4199中記載的方法為基準(zhǔn)的方法合成的4-硝基苯基碳酸3-(二甲基氨基)丙基酯鹽酸鹽(化合物VII-1)(0.0620g，0.203mmol)及三乙胺(0.0570mL，0.406mmol)，于80℃攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，用水洗滌。用無水硫酸鎂干燥有機(jī)層后過濾，進(jìn)行減壓濃縮。將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(NH硅膠，己烷/乙酸乙酯＝80/20)進(jìn)行純化，由此得到化合物4(0.0580g，收率63％)。ESI-MSm/z:683(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝6.8Hz),1.13-1.22(4H,m),1.25-1.39(32H,m),1.49-1.55(4H,m),1.73-1.81(2H,m),2.05(8H,q,J＝6.8Hz),2.22(6H,s),2.33(2H,t,J＝7.6Hz),2.77(4H,t,J＝6.8Hz),3.58(4H,s),4.08(2H,t,J＝6.5Hz),5.29-5.42(8H,m).參考例22,2-雙[(Z)-十八碳-9-烯-1-基]丙烷-1,3-二醇(化合物IIc-2)采用與參考例1同樣的方法，使用甲磺酸(Z)-十八碳-9-烯-1-基酯(Nu-ChekPrep,Inc公司制，4.50g，13.0mmol)代替甲磺酸(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基酯，得到化合物IIc-2(1.06g，收率35％)。ESI-MSm/z:577(M+H)+實(shí)施例51-甲基-3,3-雙[(Z)-十八碳-9-烯-1-基]氮雜環(huán)丁烷(化合物5)采用與實(shí)施例1同樣的方法，使用參考例2中得到的化合物IIc-2(0.300g，0.520mmol)代替參考例1中得到的化合物IIc-1，得到化合物5(0.272g，收率92％)。ESI-MSm/z:572(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.88(6H,t,J＝6.8Hz),1.14-1.35(48H,m),1.50-1.53(4H,m),2.02(8H,q,J＝6.8Hz),2.31(3H,s),2.94(4H,s),5.31-5.39(4H,m).參考例32,2-雙[(Z)-十六碳-9-烯-1-基]丙烷-1,3-二醇(化合物IIc-3)采用與參考例1同樣的方法，使用甲磺酸(Z)-十六碳-9-烯-1-基酯(Nu-ChekPrep,Inc公司制，5.00g，15.7mmol)代替甲磺酸(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基酯，得到化合物IIc-3(2.07g，收率59％)。ESI-MSm/z:521(M+H)+實(shí)施例63,3-雙[(Z)-十六碳-9-烯-1-基]-1-甲基氮雜環(huán)丁烷(化合物6)采用與實(shí)施例1同樣的方法，使用參考例3中得到的化合物IIc-3(0.300g，0.576mmol)代替參考例1中得到的化合物IIc-1，得到化合物6(0.263g，收率89％)。ESI-MSm/z:516(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝6.8Hz),1.14-1.35(40H,m),1.50-1.53(4H,m),2.02(8H,q,J＝6.8Hz),2.31(3H,s),2.94(4H,s),5.31-5.39(4H,m).參考例42,2-雙[(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯-1-基]丙烷-1,3-二醇(化合物IIc-4)采用與參考例1同樣的方法，使用甲磺酸(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯-1-基酯(Nu-ChekPrep,Inc公司制，5.00g，13.4mmol)代替甲磺酸(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基酯，得到化合物IIc-4(2.07g，收率59％)。ESI-MSm/z:629(M+H)+實(shí)施例73,3-雙[(11Z,14Z)-二十碳-11,14-二烯-1-基]-1-甲基氮雜環(huán)丁烷(化合物7)采用與實(shí)施例1同樣的方法，使用參考例4中得到的化合物IIc-4(0.300g，0.477mmol)代替參考例1中得到的化合物IIc-1，得到化合物7(0.256g，收率86％)。ESI-MSm/z:624(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝6.4Hz),1.16-1.37(44H,m),1.50-1.54(4H,m),2.05(8H,q,J＝6.8Hz),2.31(3H,s),2.78(4H,t,J＝6.4Hz),2.94(4H,s),5.30-5.42(8H,m).實(shí)施例83-(3,3-二((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基)丙烷-1-醇(化合物8)采用與實(shí)施例1同樣的方法，使用3-氨基丙烷-1-醇(東京化成工業(yè)公司制，0.468mL，6.16mmol)代替甲胺，得到化合物8(0.237g，收率63％)。ESI-MSm/z:613(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝6.8Hz),1.13-1.39(40H,m),1.50-1.56(2H,m),2.05(8H,q,J＝6.8Hz),2.69(2H,t,J＝5.4Hz),2.77(4H,t,J＝6.3Hz),2.93(4H,s),3.75(2H,t,J＝5.4Hz),5.27-5.44(8H,m).實(shí)施例92-(3,3-二((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基)乙烷-1-醇(化合物9)采用與實(shí)施例2同樣的方法，使用2-氨基乙醇(東京化成工業(yè)公司制，0.800g，13.1mmol)代替甲胺，得到化合物9(0.012g，收率13％)。ESI-MSm/z:598(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝6.8Hz),1.14-1.42(40H,m),2.05(8H,q,J＝6.5Hz),2.59(2H,t,J＝5.3Hz),2.77(4H,t,J＝5.9Hz),2.96(4H,s),3.48(2H,t,J＝5.3Hz),5.28-5.44(8H,m).參考例52-癸基-2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)丙烷-1,3-二醇(化合物IIc-5)步驟1將丙二酸二甲酯(0.400g，3.03mmol)溶解于乙腈(10mL)中，加入甲磺酸(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基酯(1.25g，3.63mmol)、碳酸銫(和光純藥工業(yè)公司制，1.97g，6.06mmol)及四丁基碘化銨(1.34g，3.63mmol)，于60℃攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，用己烷萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，進(jìn)行減壓濃縮。將得到的殘?jiān)弥V法(己烷/乙酸乙酯＝90/10)進(jìn)行純化，由此得到2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)丙二酸二甲酯(0.800g，收率69％)。ESI-MSm/z:381(M+H)+；步驟2將步驟1中得到的2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)丙二酸二甲酯(0.400g，1.05mmol)溶解于四氫呋喃(2mL)中，加入1-溴癸烷(東京化成工業(yè)公司制，0.326g，1.58mmol)、氫化鈉(油性60％，0.063g，1.58mmol)及四丁基碘化銨(0.280g，0.757mmol)，于70℃攪拌3小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，用己烷萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后，進(jìn)行過濾。對(duì)濾液進(jìn)行減壓濃縮，由此得到2-癸基-2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)丙二酸二甲酯的粗產(chǎn)物。將得到的粗產(chǎn)物溶解于四氫呋喃(3mL)中，在冰冷卻下加入氫化鋁鋰(0.122g，3.23mmol)，攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中依次加入水(0.1mL)、15％氫氧化鈉水溶液(0.1mL)、水(0.3mL)，停止反應(yīng)。通過過濾除去產(chǎn)生的不溶物。對(duì)濾液進(jìn)行減壓濃縮，將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝90/10～50/50)進(jìn)行純化，由此得到化合物IIc-5(0.265g，收率53％)。ESI-MSm/z:465(M+H)+實(shí)施例103-癸基-1-甲基-3-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氮雜環(huán)丁烷(化合物10)采用與實(shí)施例1同樣的方法，使用參考例5中得到的化合物IIc-5(0.265g，0.570mmol)代替參考例1中得到的化合物IIc-1，得到化合物10(0.206g，收率79％)。ESI-MSm/z:460(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.84-0.93(6H,m),1.11-1.40(34,m),1.50-1.55(4H,m),2.05(4H,q,J＝6.8Hz),2.30(3H,s),2.77(2H,t,J＝6.5Hz),2.93(4H,s),5.29-5.43(4H,m).實(shí)施例113-(3,3-二((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基)-N,N-二甲基丙烷-1-胺(化合物11)采用與實(shí)施例1同樣的方法，使用N,N-二甲基-1,3-丙二胺(東京化成工業(yè)公司制，0.427mL，4.18mmol)代替甲胺，得到化合物11(0.091g，收率34％)。ESI-MSm/z:639(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.86(6H,t,J＝7.0Hz),1.08-1.18(4H,m),1.21-1.38(32H,m),1.56-1.60(4H,m),1.61-1.69(2H,m),2.01(8H,q,J＝6.8Hz),2.21(6H,s),2.31(2H,t,J＝7.1Hz),2.65-2.72(2H,m),2.75(4H,t,J＝6.7Hz),3.20(4H,s),5.25-5.40(8H,m).實(shí)施例122-(3,3-二((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-基)-N,N-二甲基乙烷-1-胺(化合物12)采用與實(shí)施例1同樣的方法，使用N,N-二甲基乙二胺(東京化成工業(yè)公司制，0.709mL，6.51mmol)代替甲胺，得到化合物12(0.312g，收率77％)。ESI-MSm/z:625(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝7.0Hz),1.11-1.20(4H,m),1.23-1.39(32H,m),1.49-1.55(4H,m),2.05(8H,q,J＝6.8Hz),2.21(6H,s),2.22-2.26(2H,m),2.52-2.58(2H,m),2.77(4H,t,J＝6.7Hz),2.93(4H,s),5.28-5.43(8H,m).參考例62-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)-2-十八烷基丙烷-1,3-二醇(化合物IIc-6)采用與參考例5同樣的方法，使用1-溴十八烷(東京化成工業(yè)公司制，0.394g，1.18mmol)代替1-溴癸烷，得到化合物IIc-6(0.186g，總收率(日文為“通し収率”)28％)。ESI-MSm/z:577(M+H)+實(shí)施例131-甲基-3-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)-3-十八烷基氮雜環(huán)丁烷(化合物13)采用與實(shí)施例1同樣的方法，使用參考例6中得到的化合物IIc-6(0.186g，0.322mmol)代替參考例1中得到的化合物IIc-1，得到化合物13(0.030g，收率16％)。ESI-MSm/z:572(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.84-0.90(6H,m),1.10-1.22(4H,m),1.23-1.38(46H,m),1.56-1.62(4H,m),2.04(4H,q,J＝6.8Hz),2.51(3H,s),2.76(2H,t,J＝6.7Hz),3.25(4H,s),5.28-5.42(4H,m).參考例71-((2-硝基苯基)磺酰基)-3,3-雙(2-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)乙基)氮雜環(huán)丁烷(化合物XIIIf-1)步驟1將采用國(guó)際公開第2012/108397號(hào)中記載的方法合成的2-((9Z,12)-十八碳-9,12-二烯-1-基氧基)乙醇(2.30g，7.41mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)中，在冰冷卻下加入三乙胺(1.55mL，11.1mmol)、2-硝基苯-1-磺酰氯(2.13g，9.63mmol)，攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，用乙酸乙酯萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，進(jìn)行減壓濃縮。將得到的殘?jiān)弥V法(己烷/乙酸乙酯＝90/10)進(jìn)行純化，由此得到2-硝基苯磺酸2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基氧基)乙基酯(1.93g，收率53％)。ESI-MSm/z:496(M+H)+步驟2將步驟1中得到的2-硝基苯磺酸2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基氧基)乙基酯(1.93g，3.89mmol)溶解于N,N-二甲基甲酰胺(8mL)中，加入2-氰基乙酸乙酯(東京化成工業(yè)公司制，0.189ml，1.77mmol)、碳酸銫(1.73g，5.30mmol)，于100℃攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，用己烷萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后，進(jìn)行過濾。對(duì)濾液進(jìn)行減壓濃縮，由此得到2-氰基-4-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)-2-(2-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)乙基)丁酸乙基酯的粗產(chǎn)物。將得到的粗產(chǎn)物溶解于四氫呋喃(8mL)中，在冰冷卻下加入氫化鋁鋰(0.239g，6.30mmol)，于室溫?cái)嚢?小時(shí)。向反應(yīng)混合物中依次加入水(0.24mL)、15％氫氧化鈉水溶液(0.24mL)、水(0.72mL)，停止反應(yīng)。通過過濾除去產(chǎn)生的不溶物。對(duì)濾液進(jìn)行減壓濃縮，將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝99/1～50/50)進(jìn)行純化，由此得到2-(氨基乙基)-4-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)-2-(2-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)乙基)丁烷-1-醇(0.350g，收率34％)。ESI-MSm/z:660(M+H)+步驟3將步驟2中得到的2-(氨基乙基)-4-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)-2-(2-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)乙基)丁烷-1-醇(0.53g，0.803mmol)溶解于二氯甲烷(4mL)中，在冰冷卻下加入三乙胺(0.168mL，1.20mmol)、2-硝基苯-1-磺酰氯(0.231g，1.04mmol)，攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，用己烷萃取水層。用水、飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后，進(jìn)行過濾。濃縮濾液，由此得到N-(2-(羥基甲基)-4-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)-2-(2-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)乙基)丁基)-2-硝基苯磺酰胺的粗產(chǎn)物。將得到的粗產(chǎn)物溶解于四氫呋喃(4mL)中，加入三苯基膦(NacalaiTesque公司制，0.340g，1.30mmol)、偶氮二甲酸二異丙酯(東京化成工業(yè)公司制，40％甲苯溶液，1.9mol/L，0.682mL，1.30mmol)，于室溫?cái)嚢?5分鐘。向反應(yīng)混合物中加入水，用己烷萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，進(jìn)行減壓濃縮。將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝95/5～70/30)進(jìn)行純化，由此得到化合物XIIIf-1(0.585g，收率82％)。ESI-MSm/z:827(M+H)+實(shí)施例143,3-雙(2-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)乙基)氮雜環(huán)丁烷(化合物14)將參考例7中得到的化合物XIIIf-1(0.585g，0.707mmol)溶解于乙腈(7mL)中，加入1-十二烷基硫醇(東京化成工業(yè)公司制，0.412mL，1.77mmol)、1,8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]-7-十一碳烯(Naca-laiTesque公司制，0.246mL，1.77mmol)，于70℃攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，用己烷萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，進(jìn)行減壓濃縮。將得到的殘?jiān)肗H硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝99/1～30/70)進(jìn)行純化，由此得到化合物14(0.045g，收率10％)。ESI-MSm/z:642(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝7.0Hz),1.24-1.39(32H,m),1.50-1.57(4H,m),1.91(4H,t,J＝7.0Hz),2.05(8H,q,J＝6.9Hz),2.77(4H,t,J＝6.6Hz),3.38(4H,t,J＝6.7Hz),3.41(4H,s),3.46(4H,t,J＝7.0Hz),5.28-5.44(8H,m).實(shí)施例151-甲基-3,3-雙(2-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)乙基)氮雜環(huán)丁烷(化合物15)將實(shí)施例14中得到的化合物14(0.134g，0.209mmol)溶解于1,2-二氯乙烷(1mL)和甲醇(1mL)中，加入甲醛(和光純藥工業(yè)公司制，37％水溶液，0.076mL，1.04mmol)、三乙酰氧基硼氫化鈉(東京化成工業(yè)公司制，0.111g，0.522mmol)，于室溫?cái)嚢柽^夜。向反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用氯仿萃取水層。用無水硫酸鎂干燥有機(jī)層后過濾，進(jìn)行減壓濃縮。將得到的殘?jiān)肗H硅膠柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝90/10)進(jìn)行純化，由此得到化合物15(0.088g，收率64％)。ESI-MSm/z:656(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝6.8Hz),1.24-1.40(32H,m),1.49-1.57(4H,m),1.87(4H,t,J＝6.8Hz),2.05(8H,q,J＝6.9Hz),2.30(3H,s),2.77(4H,t,J＝6.3Hz),3.04(4H,s),3.37(4H,t,J＝6.7Hz),3.44(4H,t,J＝7.0Hz),5.28-5.44(8H,m).參考例81-((2-硝基苯基)磺酰基)-3,3-雙(3-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)丙基)氮雜環(huán)丁烷(化合物XIIIf-2)步驟1將甲磺酸(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基酯(10.0g、29.0mmol)溶解于1,4-二氧雜環(huán)己烷(20mL)中，加入1,3-丙二醇(和光純藥工業(yè)公司制，55.2g，726mmol)，在加熱回流下攪拌2天。向反應(yīng)混合物中加入水，用氯仿萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，進(jìn)行減壓濃縮。將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝90/10)進(jìn)行純化，由此得到3-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基氧基)丙烷-1-醇(4.96g，收率53％)。ESI-MSm/z:324(M+H)+；步驟2將步驟1中得到的3-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基氧基)丙烷-1-醇(4.95g，15.3mmol)溶解于二氯甲烷(20mL)中，在冰冷卻下加入三乙胺(4.25mL，30.5mmol)、甲磺酰氯(2.36mL，30.5mmol)，于0℃攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，用乙酸乙酯萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，進(jìn)行減壓濃縮。將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝90/10)進(jìn)行純化，由此得到甲磺酸3-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基氧基)丙基酯(5.47g，收率89％)。ESI-MSm/z:403(M+H)+；步驟3采用與參考例7的步驟2、步驟3同樣的方法，使用步驟2中得到的甲磺酸3-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基氧基)丙基酯(1.57g，3.89mmol)代替2-硝基苯磺酸2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基氧基)乙基酯，得到化合物XIIIf-2(0.109g，總收率7.6％)。ESI-MSm/z:855(M+H)+；實(shí)施例163,3-雙(3-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)丙基)氮雜環(huán)丁烷(化合物16)采用與實(shí)施例14同樣的方法，使用化合物XIIIf-2(0.109g，0.135mmol)代替化合物XIIIf-1，得到化合物16(0.062g，收率69％)。ESI-MSm/z:670(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝7.0Hz),1.22-1.40(32H,m),1.44-1.67(12H,m),2.05(8H,q,J＝6.8Hz),2.77(4H,t,J＝6.7Hz),3.31(4H,s),3.39(8H,t,J＝6.7Hz),5.28-5.45(8H,m).實(shí)施例171-甲基-3,3-雙(3-(((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)丙基)氮雜環(huán)丁烷(化合物17)采用與實(shí)施例15同樣的方法，使用化合物16(0.062g，0.093mmol)代替化合物14，得到化合物17(0.056g，收率88％)。ESI-MSm/z:684(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝6.8Hz),1.23-1.40(32H,m),1.42-1.62(12H,m),2.05(8H,q,J＝6.9Hz),2.31(3H,s),2.77(4H,t,J＝6.7Hz),2.96(4H,s),3.35-3.43(8H,m),5.25-5.47(8H,m).實(shí)施例182-二甲基-3,3-二((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氮雜環(huán)丁烷(化合物18)步驟1將氰基乙酸乙酯(2.00g，17.7mmol)溶解于乙腈(50mL)中，加入甲磺酸(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基酯(13.4g，38.9mmol)、碳酸銫(17.3g，53.1mmol)，于60℃攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，用己烷萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，對(duì)所得濾液進(jìn)行減壓濃縮，由此得到(11Z,14Z)-2-氰基-2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)二十碳-11,14-二烯酸乙酯的粗產(chǎn)物。將得到的粗產(chǎn)物溶解于四氫呋喃(5mL)中，在冰冷卻下加入氫化鋁鋰(2.49g，65.6mmol)，攪拌30分鐘。向反應(yīng)混合物中依次加入水(2.5mL)、15％氫氧化鈉水溶液(2.5mL)、水(7.5mL)，停止反應(yīng)。通過過濾除去產(chǎn)生的不溶物。對(duì)濾液進(jìn)行減壓濃縮，將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(氯仿/甲醇＝99/1～90/10)進(jìn)行純化，由此得到(11Z,14Z)-2-(氨基乙基)-2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)二十碳-11,14-二烯-1-醇(2.50g，收率25％)。ESI-MSm/z:572(M+H)+步驟2將步驟1中得到的(11Z,14Z)-2-(氨基乙基)-2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)二十碳-11,14-二烯-1-醇(2.50g，4.37mmol)溶解于四氫呋喃(20mL)中，加入三乙胺(1.83mL，13.1mmol)、二碳酸叔丁酯(渡邊化學(xué)公司制，1.12mL，4.81mmol)，于室溫?cái)嚢柽^夜。在減壓下對(duì)反應(yīng)混合物進(jìn)行濃縮，將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝95/5)進(jìn)行純化，由此得到((11Z,14Z)-2-(羥基甲基)-2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)二十碳-11,14-二烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(2.65g，收率90％)。ESI-MSm/z:672(M+H)+步驟3將步驟2中得到的((11Z,14Z)-2-(羥基甲基)-2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)二十碳-11,14-二烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(2.10g，3.12mmol)溶解于二氯甲烷(10mL)中，在冰冷卻下加入戴斯-馬丁試劑(東京化成工業(yè)公司制，1.72g，4.06mmol)，于室溫?cái)嚢?小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入水，用己烷萃取。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，在減壓下進(jìn)行濃縮。將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝100/0～80/20)進(jìn)行純化，由此得到((11Z,14Z)-2-甲酰基-2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)二十碳-11,14-二烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(2.00g，收率96％)。ESI-MSm/z:670(M+H)+步驟4將步驟3中得到的((11Z,14Z)-2-甲酰基-2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)二十碳-11,14-二烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(0.432g，0.645mmol)溶解于四氫呋喃(2mL)中，在冰冷卻下加入甲基溴化鎂(關(guān)東化學(xué)工業(yè)公司制，mol/L，0.258mL，0.774mmol)。之后，冷卻至-50℃，加入甲基溴化鎂(3mol/L，0.150mL，0.451mmol)，攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入飽和氯化銨水溶液，使反應(yīng)停止，然后用乙酸乙酯萃取。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，進(jìn)行減壓濃縮。將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝95/5～50/50)進(jìn)行純化，由此得到((11Z,14Z)-2-(1-羥基乙基)-2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)二十碳-11,14-二烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(0.200g，收率45％)。ESI-MSm/z:686(M+H)+步驟5將步驟4中得到的((11Z,14Z)-2-(1-羥基乙基)-2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)二十碳-11,14-二烯-1-基)氨基甲酸叔丁酯(0.290g，0.423mmol)溶解于二氯甲烷(2mL)中，在冰冷卻下加入吡啶(0.171mL，2.11mmol)、甲磺酰氯(0.049mL，0.634mmol)，于0℃攪拌30分鐘。接著，依次添加吡啶(0.171mL，2.11mmol)、甲磺酰氯(0.098mL，1.27mmol)，使反應(yīng)結(jié)束。向反應(yīng)混合物中加入水，用乙酸乙酯萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后，進(jìn)行過濾。對(duì)所得濾液進(jìn)行減壓濃縮，由此得到甲磺酸(12Z,15Z)-3-(((叔丁氧基羰基)氨基)甲基)-3-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)二十一碳-12,15-二烯-2-基酯的粗產(chǎn)物。將得到的粗產(chǎn)物溶解于N,N-二甲基甲酰胺(8mL)中，在冰冷卻下加入氫化鈉(油性60％，8mg，0.335mmol)。之后，于50℃攪拌1小時(shí)，于室溫?cái)嚢柽^夜。向反應(yīng)混合物中加入飽和氯化銨水溶液，用乙酸乙酯萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，進(jìn)行減壓濃縮。將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝95/5～50/50)進(jìn)行純化，由此得到2-甲基-3,3-二((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.070g，收率31％)。ESI-MSm/z:668(M+H)+步驟6將步驟5中得到的2-甲基-3,3-二((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氮雜環(huán)丁烷-1-甲酸叔丁酯(0.090g，0.135mmol)溶解于二氯甲烷(2mL)中，在冰冷卻下加入三氟乙酸(0.500mL，6.49mmol)，于0℃攪拌30分鐘。向反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用氯仿萃取。用無水硫酸鎂干燥有機(jī)層后過濾，進(jìn)行減壓濃縮。將得到的殘?jiān)肗H硅膠柱色譜法(氯仿/甲醇＝100/0～90/10)進(jìn)行純化，由此得到化合物18(0.030g，收率39％)。ESI-MSm/z:568(M+H)+；實(shí)施例191,2-二甲基-3,3-二((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氮雜環(huán)丁烷(化合物19)采用與實(shí)施例15同樣的方法，使用化合物18(0.030g，0.053mmol)代替化合物14，得到化合物19(0.020g，收率65％)。ESI-MSm/z:582(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝6.8Hz),1.03(3H,d,J＝6.6Hz),1.07-1.65(40H,m),2.05(8H,q,J＝6.8Hz),2.27(3H,s),2.39(1H,d,J＝6.8Hz),2.69-2.81(5H,m),3.21(1H,d,J＝6.6Hz),5.28-5.44(8H,m).參考例92-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)-2-((((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)甲基)丙烷-1,3-二醇(化合物IIc-7)步驟1采用與參考例5同樣的方法，使用2-(氯甲氧基)乙基三甲基硅烷(0.210mL,1.18mmol)代替1-溴癸烷，由此得到2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)丙烷-1,3-二醇(0.312g，總收率87％)。ESI-MSm/z:455(M+H)+步驟2將步驟1中得到的2-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)丙烷-1,3-二醇(0.312g，0.686mmol)溶解于四氫呋喃(4mL)中，在冰冷卻下加入氫化鈉(油性60％，0.063g，1.58mmol)及甲磺酸(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯基酯(0.355g，1.03mmol)，于60℃攪拌2小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入飽和氯化銨水溶液，用己烷萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，在減壓下進(jìn)行濃縮。將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝99/1～70/30)進(jìn)行純化，由此得到(11Z,14Z)-2-((((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)二十碳-11,14-二烯-1-醇(0.230g，收率48％)。ESI-MSm/z:703(M+H)+步驟3將步驟2中得到的(11Z,14Z)-2-((((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)甲基)-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)二十碳-11,14-二烯-1-醇(0.230g，0.327mmol)溶解于二氯甲烷(2mL)中，在冰冷卻下加入三氟化硼乙醚絡(luò)合物(東京化成工業(yè)公司制，0.207mL，1.64mmol)，于0℃攪拌1小時(shí)。向反應(yīng)混合物中加入飽和碳酸氫鈉水溶液，用乙酸乙酯萃取水層。用飽和食鹽水洗滌有機(jī)層，用無水硫酸鎂干燥后過濾，在減壓下進(jìn)行濃縮。將得到的殘?jiān)霉枘z柱色譜法(己烷/乙酸乙酯＝99/1～50/50)進(jìn)行純化，由此得到化合物IIc-7(0.150g，收率76％)。ESI-MSm/z:603(M+H)+實(shí)施例201-甲基-3-((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)-3-((((9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基)氧基)甲基)氮雜環(huán)丁烷(化合物20)采用與實(shí)施例1同樣的方法，使用參考例8中得到的化合物IIc-7(0.140g，0.232mmol)代替參考例1中得到的化合物IIc-1，得到化合物20(0.080g，收率58％)。ESI-MSm/z:598(M+H)+；1H-NMR(CDCl3)δ:0.89(6H,t,J＝7.0Hz),1.17-1.40(34H,m),1.52-1.61(4H,m),2.02-2.08(8H,m),2.30(3H,s),2.77(4H,t,J＝6.6Hz),2.90(2H,d,J＝7.6Hz),3.10(2H,d,J＝7.6Hz),3.39-3.45(4H,m),5.27-5.44(8H,m).實(shí)施例21使用實(shí)施例1中得到的化合物1，如下所述制備組合物。所使用的核酸是含有有義鏈[5’-rGrGrAfUfCrAfUfCfUfCrArArGfUfCfUfUrAfCdTdT-3’(帶有r、d及f的堿基上所鍵合的糖分別為核糖、脫氧核糖及2’位的羥基被氟取代的核糖，由5’末端側(cè)向3’末端側(cè)第20個(gè)堿基上所鍵合的脫氧核糖與第21個(gè)堿基上所鍵合的脫氧核糖之間的鍵為硫代磷酸酯鍵)]、和反義鏈[5’-rGfUrArArGrAfCfUfUrGrArGrAfUrGrAfUfCfCdTdT-3’(帶有r、d及f的堿基上所鍵合的糖分別為核糖、脫氧核糖及2’的羥基被氟取代的核糖，由5’末端側(cè)向3’末端側(cè)第20個(gè)堿基上所鍵合的脫氧核糖與第21個(gè)堿基上所鍵合的脫氧核糖之間的鍵為硫代磷酸酯鍵)]的、抑制凝血因子VII(BloodCoagulationFactorVII，以下表示為f7)基因的表達(dá)的抗f7siRNA，從GeneDesign公司獲得(以下稱為f7siRNA-1)。核酸用蒸餾水制備成24mg/mL進(jìn)行使用。稱量各試樣使其懸浮在含有鹽酸及乙醇的水溶液中，使得化合物1/PEG-DMPENa(日油公司制)＝57.3/5.52mmol/L，用vortex攪拌混合器進(jìn)行攪拌，并且反復(fù)進(jìn)行加熱，得到均勻的懸浮液。于室溫下將該懸浮液通過0.05μm聚碳酸酯膜濾器，得到化合物1/PEG-DMPENa的粒子(脂質(zhì)體)的分散液。使用粒徑測(cè)定裝置對(duì)得到的脂質(zhì)體的平均粒徑進(jìn)行測(cè)定，確認(rèn)其平均粒徑在30nm～100nm的范圍內(nèi)。將得到的脂質(zhì)體的分散液與f7siRNA-1溶液以脂質(zhì)體的分散液：f7siRNA-1溶液＝3:1的比例混合，再加入3倍量的蒸餾水并進(jìn)行混合，由此制備化合物1/PEG-DMPENa/f7siRNA-1復(fù)合體的分散液。另一方面，稱量各試樣使其溶解在乙醇中，使得化合物1/PEG-DMPENa(日油公司制)/DSPC(日油公司制)/膽固醇(日油公司制)＝8.947/0.147/5.981/14.355mmol/L，制備脂質(zhì)膜構(gòu)成成分的溶液。將得到的脂質(zhì)膜構(gòu)成成分的溶液與得到的化合物1/PEG-DMPENa/f7siRNA-1復(fù)合體的分散液以1:1的比例混合，再混合數(shù)倍量的蒸餾水，得到粗制劑。對(duì)于得到的粗制劑，使用AmiconUltra(Millipore公司制)進(jìn)行濃縮后，用生理鹽水稀釋，在凈化工作臺(tái)內(nèi)用0.2μm的過濾器(東洋濾紙公司制)進(jìn)行過濾。對(duì)得到的組合物的siRNA濃度進(jìn)行測(cè)定，根據(jù)施予濃度使用生理鹽水進(jìn)行稀釋，由此得到制劑(包含化合物1及f7siRNA-1的組合物)。實(shí)施例22分別使用實(shí)施例2及4～7中得到的化合物即化合物2及4～7，與實(shí)施例21同樣地操作，得到制劑(包含化合物2及4～7中的各化合物、及f7siRNA-1的組合物)。使用粒徑測(cè)定裝置對(duì)實(shí)施例21及22中得到的制劑(組合物)的平均粒徑進(jìn)行測(cè)定，其結(jié)果示于表4。[表4]表4化合物編號(hào)124567得到的制劑的粒徑(nm)113116127115123128實(shí)施例23將實(shí)施例21中使用的f7siRNA-1變更為f7siRNA-2，所述f7siRNA-2中有義鏈為5’-CCCUGUCUUGGUUUCAAUUAA-3’(鍵合于堿基的糖全部為核糖)，反義鏈為5’-AAUUGAAACCAAGACAGGGUG-3’(鍵合于堿基的糖全部為核糖。5’末端用磷酸基修飾。)，除此以外，采用與實(shí)施例21同樣的方法制備制劑。比較例1將化合物1變更為采用以專利文獻(xiàn)3記載的方法為基準(zhǔn)的方法合成的1-甲基-3,3-雙{[(9Z,12Z)-十八碳-9,12-二烯-1-基氧基]甲基}氮雜環(huán)丁烷(化合物A)，除此以外，采用與實(shí)施例23同樣的方法制備制劑。使用粒徑測(cè)定裝置對(duì)實(shí)施例23和比較例1中得到的制劑(組合物)的平均粒徑進(jìn)行測(cè)定，其結(jié)果示于表5。[表5]表5試驗(yàn)例1對(duì)于實(shí)施例21及22中得到的各制劑(包含化合物1、2、4～7中的各化合物、和f7siRNA-1的組合物)，分別通過以下的方法實(shí)施體內(nèi)藥效評(píng)價(jià)試驗(yàn)。需要說明的是，對(duì)于各制劑，與試驗(yàn)相應(yīng)地用生理鹽水稀釋后進(jìn)行使用。對(duì)小鼠(Balb/c，從CLEAJapan獲得)進(jìn)行馴化飼育后，將各制劑以按siRNA濃度計(jì)為0.03mg/kg、及/或0.3mg/kg的劑量靜脈內(nèi)施予至小鼠。于施予開始48小時(shí)后采血，使用微量高速冷凍離心機(jī)(TOMYMX305:Tomyseiko公司制)，于4℃以8000rpm對(duì)采集的血液離心分離8分鐘。使用BIOPHENVIIkit(ANIARA公司制cat#：A221304)，按照制品的說明書中記載的方法，采用ARVO(405nm)測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)液及血漿樣品中的吸光度。根據(jù)得到的吸光度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，算出血漿中的FactorVII蛋白濃度。需要說明的是，例數(shù)為各組3只。算出的血漿中的FactorVII蛋白濃度的結(jié)果示于圖1及圖2。試驗(yàn)例2將實(shí)施例21及22中得到的各制劑變更為實(shí)施例23及比較例1中得到的各制劑，除此以外，與試驗(yàn)例1同樣地操作，實(shí)施試驗(yàn)例2。算出的血漿中的FactorVII蛋白濃度的結(jié)果示于圖3。由圖1及圖2可知，通過施予實(shí)施例21及22中得到的各制劑(包含化合物1、2、4～7中的各化合物、和f7siRNA-1的組合物)，F(xiàn)actorVII基因的表達(dá)被強(qiáng)烈抑制。另外，由圖3可知，實(shí)施例23中得到的制劑(包含化合物1、和f7siRNA-2的組合物)較之比較例1中得到的制劑(包含化合物A和f7siRNA-2的組合物)而言，更強(qiáng)烈地抑制了FactorVII基因的表達(dá)。因此，確認(rèn)了本發(fā)明的組合物能夠?qū)⒑怂釋?dǎo)入細(xì)胞內(nèi)等，可知本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)能夠容易地在體內(nèi)將核酸送達(dá)細(xì)胞內(nèi)。產(chǎn)業(yè)上的可利用性通過將包含本發(fā)明的陽(yáng)離子性脂質(zhì)及核酸的組合物施予至哺乳動(dòng)物等，能夠?qū)⒃摵怂崛菀椎貙?dǎo)入例如細(xì)胞內(nèi)等。序列表自由文本序列號(hào)1-凝血因子VIIsiRNA-1有義鏈序列號(hào)2-凝血因子VIIsiRNA-1反義鏈序列號(hào)3-凝血因子VIIsiRNA-2有義鏈序列號(hào)4-凝血因子VIIsiRNA-2反義鏈序列表<110>協(xié)和發(fā)酵麒麟株式會(huì)社<120>陽(yáng)離子性脂質(zhì)<130>1000P12337<150>JP2014-133913<151>2014-06-30<160>4<210>1<211>21<212>DNA<213>人工序列<220><223>凝血因子VIIsiRNA-1有義鏈<220><221>misc_feature<222>(1)..(19)<223>RNA<220><221>misc_feature<222>(4)..(4)<223>n=尿嘧啶<220><221>misc_feature<222>(7)..(7)<223>n=尿嘧啶<220><221>misc_feature<222>(9)..(9)<223>n=尿嘧啶<220><221>misc_feature<222>(14)..(14)<223>n=尿嘧啶<220><221>misc_feature<222>(16)..(17)<223>n=尿嘧啶<220><221>modified_base<222>(4)..(5)<223>2'-氟<220><221>modified_base<222>(7)..(10)<223>2'-氟<220><221>modified_base<222>(14)..(17)<223>2'-氟<220><221>modified_base<222>(19)..(19)<223>2'-氟<220><221>misc_feature<222>(21)..(21)<223>5'-硫代磷酸化胸苷<400>1ggancancncaagncnnactt21<210>2<211>21<212>DNA<213>人工序列<220><223>凝血因子VIIsiRNA-1反義鏈<220><221>misc_feature<222>(1)..(19)<223>RNA<220><221>misc_feature<222>(2)..(2)<223>n=尿嘧啶<220><221>misc_feature<222>(8)..(9)<223>n=尿嘧啶<220><221>misc_feature<222>(14)..(14)<223>n=尿嘧啶<220><221>misc_feature<222>(17)..(17)<223>n=尿嘧啶<220><221>modified_base<222>(2)..(2)<223>2'-氟<220><221>modified_base<222>(7)..(9)<223>2'-氟<220><221>modified_base<222>(14)..(14)<223>2'-氟<220><221>modified_base<222>(17)..(19)<223>2'-氟<220><221>misc_feature<222>(21)..(21)<223>5'-硫代磷酸化胸苷<400>2gnaagacnngagangancctt21<210>3<211>21<212>RNA<213>人工序列<220><223>凝血因子VIIsiRNA-2有義鏈<400>3cccugucuugguuucaauuaa21<210>4<211>21<212>RNA<213>人工序列<220><223>凝血因子VIIsiRNA-2反義鏈<220><221>misc_feature<222>(1)..(1)<223>5'-O-磷酸化腺嘌呤<400>4nauugaaaccaagacagggug21當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3