本發(fā)明涉及用于從微生物生物質(zhì)中回收脂質(zhì)的方法以及涉及使用該回收脂質(zhì)的方法生產(chǎn)脂質(zhì)的方法。
背景技術(shù)：
：：已知某些微生物如細(xì)菌、真菌和酵母將有機(jī)分子轉(zhuǎn)化為脂質(zhì)。通過(guò)異養(yǎng)微生物產(chǎn)生的油通常稱作單細(xì)胞油或微生物油，以及產(chǎn)生脂質(zhì)的微生物稱為產(chǎn)油微生物(oleaginousmicrobe)。用于生產(chǎn)單細(xì)胞油的過(guò)程一般包括培養(yǎng)微生物、使細(xì)胞能夠累積脂質(zhì)、收獲富含脂質(zhì)的細(xì)胞以及從微生物細(xì)胞中回收脂質(zhì)的步驟?；谖⑸锏闹|(zhì)(即單細(xì)胞油)可以用作用于生產(chǎn)生物燃料如生物柴油、可再生柴油或生物航空燃料的原材料。在生長(zhǎng)介質(zhì)上培養(yǎng)的產(chǎn)油微生物可以包含最高達(dá)它們的總的干物質(zhì)含量的80％的脂質(zhì)。用于從微生物生物質(zhì)中回收脂質(zhì)的方法的效率對(duì)于通過(guò)微生物的發(fā)酵的經(jīng)濟(jì)可行的生產(chǎn)是至關(guān)緊要的。用于脂質(zhì)回收的方法將提供約95％的油產(chǎn)率以在經(jīng)濟(jì)上可行。而且，用于回收脂質(zhì)的方法不應(yīng)破壞由其提取了油的殘留生物質(zhì)的價(jià)值或降低提取的油的質(zhì)量，其可以進(jìn)一步加工或原樣使用。脂質(zhì)回收過(guò)程一般包括從培養(yǎng)介質(zhì)中收獲微生物細(xì)胞、破壞微生物細(xì)胞以及回收油以得到粗微生物油和殘留生物質(zhì)部分的步驟?？梢詮臐駶?rùn)的生物質(zhì)中回收油或在干燥提取的情況下，在回收油之前使微生物生物質(zhì)脫水。殘留的生物質(zhì)部分由于其包含有價(jià)值的蛋白質(zhì)部分可以用作動(dòng)物飼料，或可以用于通過(guò)燃燒產(chǎn)生能量?；厥罩|(zhì)的方法基本上決定了殘留生物質(zhì)作為動(dòng)物飼料的價(jià)值，因?yàn)樵诙鄠€(gè)處理步驟中微生物生物質(zhì)的蛋白質(zhì)容易降解。收獲步驟用于從培養(yǎng)介質(zhì)中分離微生物細(xì)胞。常規(guī)的收獲技術(shù)包括過(guò)濾和離心。在回收脂質(zhì)之前，也可以通過(guò)機(jī)械脫水裝置在干燥步驟之前濃縮微生物生物質(zhì)。通常通過(guò)用溶劑如亞臨界或超臨界狀態(tài)的二氧化碳或液體烴如己烷提取，從收獲的微生物細(xì)胞中回收油。在用多種方法如超聲處理、滲透性沖擊、機(jī)械剪切力如擠出、冷壓和熱沖擊，提取脂質(zhì)之前，微生物細(xì)胞也可能被破壞。完全破壞微生物細(xì)胞的需要取決于用于提取脂質(zhì)的溶劑。在不能完全破壞細(xì)胞的情況下，可以在提取中使用非極性和極性溶劑的混合物。在干燥提取中，在溶劑提取之前干燥收獲的生物質(zhì)以除去盡可能多的游離水。也可以從濕潤(rùn)的生物質(zhì)中提取脂質(zhì)。在干燥提取中，在溶劑提取之前，一般干燥微生物生物質(zhì)至高于90％的干物質(zhì)含量。在濕潤(rùn)途徑提取中，溶劑提取步驟中的生物質(zhì)的干物質(zhì)含量可以低至5％。在濕潤(rùn)提取的情況下，如果將其用于有附加值的應(yīng)用，需要干燥得到的濕潤(rùn)的殘留生物質(zhì)部分。傳統(tǒng)細(xì)胞收獲技術(shù)如過(guò)濾和離心通常產(chǎn)生干物質(zhì)含量為15％至最高達(dá)40％的生物質(zhì)。通過(guò)干燥可以進(jìn)一步增加收獲的生物質(zhì)的干物質(zhì)含量，然而，這消耗許多的能量。通過(guò)加熱、冷凍干燥或噴霧干燥可以執(zhí)行干燥(Farr,W.E.andProctor,A.,GreenVegetableOilProcessing,2012,AOCSPress)。通常，具有低于30w-％的干物質(zhì)含量的生物質(zhì)不能認(rèn)為是經(jīng)濟(jì)地干燥。干燥和濕潤(rùn)途徑提取之間的選擇取決于從微生物生物質(zhì)中除去過(guò)多液體的難易。如果不能將生物質(zhì)機(jī)械脫水至高于30％的干物質(zhì)含量，則往往優(yōu)選的是濕潤(rùn)途徑提取。如果殘留的生物質(zhì)的后續(xù)處理不需要進(jìn)一步干燥，例如如果需通過(guò)厭氧消化或通過(guò)水熱液化處理生物質(zhì)，則濕潤(rùn)提取也是優(yōu)選的。從濕潤(rùn)的微生物生物質(zhì)中除去水的難易取決于微生物生物質(zhì)中的微生物的類型。認(rèn)為絲狀生物由于它們大的細(xì)胞尺寸而更容易地收獲，而已知藻類生物質(zhì)由于小的細(xì)胞尺寸而具有不良的過(guò)濾性。EP2450424A1中建議將濕潤(rùn)途徑提取作為用于藻類生物質(zhì)的有效脂質(zhì)回收方法，如其清楚陳述的，在提取之前沒(méi)有必要干燥濕潤(rùn)的微生物生物質(zhì)。因此，EP2450424A1在提取之前沒(méi)有涉及過(guò)濾和干燥步驟。此外，由于使用了丙烷(在提取步驟中需要至少20巴的壓力以保持提取劑/溶劑為液態(tài))，該文獻(xiàn)本身引用了升高的提取壓力。對(duì)于加熱步驟，沒(méi)有提及使用的精確壓力。根據(jù)該文獻(xiàn)的實(shí)施例顯示了使用文獻(xiàn)中公開(kāi)的方法的相當(dāng)?shù)偷闹|(zhì)產(chǎn)率，且沒(méi)有提到從生物質(zhì)中提取的油中的氮含量。已知存在于收獲的細(xì)胞中的水降低溶劑提取的效率，因?yàn)槠渥璧K疏水性脂質(zhì)與溶劑接觸。另外，水趨向于與溶劑形成乳液，這進(jìn)一步降低提取效率并使得更難以從剩余的液相中分離提取的脂質(zhì)。因此，如果可以將微生物生物質(zhì)機(jī)械脫水至高于30％的干物質(zhì)含量，則相對(duì)于濕潤(rùn)提取，往往優(yōu)選的是干燥提取。之前Davies(Davies,R.1992.ScaleUpofYeastOilTechnology.IndustrialApplicationsofSingleCellOils.Editedby:D.J.KyleandC.Ratledge,AOCSPublishing)已經(jīng)公開(kāi)了當(dāng)在干重基礎(chǔ)上生物質(zhì)的含油量超過(guò)35％時(shí)，一般用于釀造和烘焙酵母工業(yè)來(lái)收獲酵母的噴嘴盤分離器(nozzlediscseparator)對(duì)于收獲產(chǎn)油酵母(oleaginousyeast)是無(wú)效的。對(duì)于具有高于干重基礎(chǔ)上35％的含油量的產(chǎn)油酵母生物質(zhì)，建議交叉流過(guò)濾(crossflowfiltration)。然而，該收獲方法具有低通量和膜積垢的缺點(diǎn)，這意味著需要大的膜面積。即使將噴嘴盤分離器用于收獲干重基礎(chǔ)上含油量在35％以下的產(chǎn)油酵母，得到的濃縮酵母漿具有15-20％的干物質(zhì)含量。普遍認(rèn)為太低的用于干燥的干物質(zhì)含量是不經(jīng)濟(jì)的。為此，對(duì)于使用噴嘴盤分離器收獲的含油量低于干重基礎(chǔ)上35％的產(chǎn)油酵母，常常優(yōu)選的是濕潤(rùn)提取。WO2011/143380公開(kāi)了用于從藻類細(xì)胞中分離油的方法，在該方法中，使?jié)駶?rùn)的藻類生物質(zhì)經(jīng)受水熱碳化處理(hydrothermalcarbonizationtreatment)(HTC)，通過(guò)過(guò)濾從含水部分分離得到的結(jié)合油和焦(char)部分，以及通過(guò)溶劑提取從焦部分分離油。在170至225℃的溫度下進(jìn)行水熱碳化處理。該方法具有其產(chǎn)生在生長(zhǎng)階段可以作為營(yíng)養(yǎng)物重新使用的富含氮、磷和鉀的含水部分的優(yōu)點(diǎn)。沒(méi)有報(bào)告水熱碳化處理對(duì)生物質(zhì)的過(guò)濾性或提取步驟的效率具有任何影響。然而，文獻(xiàn)看起來(lái)舉例說(shuō)明了基于過(guò)程蒸餾顆粒(processdistillergrain)和其他原材料的方法。這類原材料不包含很多的脂質(zhì)并因而將在過(guò)濾濕潤(rùn)生物質(zhì)中不存在任何困難，其中該方法不包括過(guò)濾之前的熱處理步驟。此外，為了實(shí)現(xiàn)脂肪酸甲酯(FAME)的高產(chǎn)率，需要提取干燥的焦以及含水濾液。此外，相對(duì)于例如氮或磷含量，沒(méi)有參考關(guān)于重新得到的油的質(zhì)量。實(shí)際上，該文獻(xiàn)清楚地陳述了含水產(chǎn)物包含原始存在于生物質(zhì)中的大部分的氮、磷和鉀且提取水相將清楚地產(chǎn)生與原始生物質(zhì)的氮含量相同水平(inlevelwith)的氮含量。也常在收獲步驟中巴氏殺菌微生物生物質(zhì)以殺死微生物和滅活酶，這可能另外破壞脂質(zhì)結(jié)構(gòu)。在US2003/014369公開(kāi)的方法中，通過(guò)將生物質(zhì)生長(zhǎng)介質(zhì)中的生物質(zhì)加熱至60-100℃的溫度持續(xù)最高達(dá)90分鐘進(jìn)行巴氏殺菌。沒(méi)有報(bào)告巴氏殺菌對(duì)隨后的脫水或脂質(zhì)提取步驟具有任何影響。EP2450426涉及用于純化已從生物材料得到的脂質(zhì)材料的純化方法。該方法包括使用至少一種極性溶劑和至少一種非極性溶劑，并表明了多種反應(yīng)條件是怎樣影響純化的油中的磷和金屬含量。然而，該文獻(xiàn)沒(méi)有關(guān)于提取的油的氮含量的記載且沒(méi)有關(guān)于從生物質(zhì)提取油的任何方法或提取期間的任何條件怎樣可以影響例如提取的油中的氮含量的記載。本發(fā)明涉及從產(chǎn)油酵母生物質(zhì)中回收脂質(zhì)以及涉及使用該回收脂質(zhì)的方法生產(chǎn)脂質(zhì)的方法。Davies(Davies,R.1992.ScaleUpofYeastOilTechnology.IndustrialApplicationsofSingleCellOils.Editedby:D.J.KyleandC.Ratledge,AOCSPublishing)報(bào)告了當(dāng)生物質(zhì)中的脂質(zhì)含量在干重基礎(chǔ)上超過(guò)35％時(shí)，產(chǎn)油酵母細(xì)胞的不良回收率。由于酵母生物質(zhì)的軟細(xì)胞結(jié)構(gòu)導(dǎo)致的過(guò)濾膜的立即堵塞，所以用閉端(deadend)微過(guò)濾器收獲產(chǎn)油酵母細(xì)胞是不可能的。實(shí)驗(yàn)還指出可以用交叉流過(guò)濾配置收獲產(chǎn)油酵母細(xì)胞，但是過(guò)濾結(jié)果是不良的，具有收獲的生物質(zhì)的僅28％的干物質(zhì)含量，通常認(rèn)為這對(duì)于隨后的干燥步驟來(lái)說(shuō)太低。還發(fā)現(xiàn)待收獲的生物質(zhì)懸浮液中存在的木質(zhì)纖維素材料或剩余的木質(zhì)纖維素材料使膜積垢更糟糕。因此，需要用于從產(chǎn)油酵母生物質(zhì)中以及尤其從具有以下的高脂質(zhì)含量的酵母生物質(zhì)中回收脂質(zhì)的有效方法：即在干重基礎(chǔ)上超過(guò)35％、如例如在干重基礎(chǔ)上至少約40％、或如例如在干重基礎(chǔ)上至少約50％、如例如在干重基礎(chǔ)上至少約60％、如例如在干重基礎(chǔ)上至少約70％、如例如在干重基礎(chǔ)上至少約80％。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的一個(gè)目的是提供用于從產(chǎn)油酵母生物質(zhì)中回收脂質(zhì)的有效方法。相應(yīng)地，本發(fā)明的第一方面涉及用于從產(chǎn)油酵母生物質(zhì)中回收微生物脂質(zhì)的方法，所述方法包括以下步驟：(i)提供包含含有產(chǎn)油酵母生物質(zhì)的發(fā)酵肉湯的含水懸浮液，(ii)在高于5巴的壓力下在至少160℃的溫度下使所述懸浮液經(jīng)受水熱處理1秒至360分鐘，(iii)使水熱處理的懸浮液經(jīng)受分離步驟以得到液體部分和酵母生物質(zhì)部分，(iv)使酵母生物質(zhì)部分經(jīng)受干燥步驟以得到干燥的酵母生物質(zhì)部分，(v)用液體溶劑使干燥的生物質(zhì)部分經(jīng)受提取步驟以產(chǎn)生包含微生物脂質(zhì)的液體部分和包含殘留的酵母生物質(zhì)部分的固體部分，(vi)從步驟(v)的液體部分中回收微生物脂質(zhì)，(vii)可選地，從步驟(v)的產(chǎn)物中分離殘留的生物質(zhì)部分。本發(fā)明的第二目的是提供使用用于從產(chǎn)油酵母生物質(zhì)中回收脂質(zhì)的方法用產(chǎn)油酵母生產(chǎn)微生物脂質(zhì)的方法。相應(yīng)地，本發(fā)明的第二方面涉及用于生產(chǎn)微生物脂質(zhì)的方法，該方法包括：(i)提供培養(yǎng)介質(zhì)，(ii)通過(guò)在培養(yǎng)介質(zhì)中接種產(chǎn)油酵母提供發(fā)酵肉湯來(lái)產(chǎn)生產(chǎn)油酵母生物質(zhì)，(iii)孵育接種了所述產(chǎn)油酵母的所述介質(zhì)使脂質(zhì)能夠累積，(iv)通過(guò)根據(jù)本文所描述的用于回收微生物脂質(zhì)的方法中的任一種的方法從所述產(chǎn)油酵母生物質(zhì)中回收微生物脂質(zhì)。本發(fā)明的進(jìn)一步方面涉及由本發(fā)明的方法可得到的殘留生物質(zhì)。本發(fā)明的又進(jìn)一步的方面涉及通過(guò)本發(fā)明的方法可得到的微生物脂質(zhì)。與現(xiàn)有技術(shù)相反，本發(fā)明使提取之前的水的量最小化。這具有用干燥的生物質(zhì)更有效地進(jìn)行提取的優(yōu)點(diǎn)，因?yàn)橐阎c脂質(zhì)形成乳液，這妨礙使用有機(jī)溶劑的提取步驟并使得難以從液相/水相分離有機(jī)相。此外，通過(guò)本發(fā)明的流程，提供了更能量有效的方法，因?yàn)樵诟稍锏玫降纳镔|(zhì)之前通過(guò)過(guò)濾除去了盡可能多的水。本發(fā)明還涉及在不需要分離的液體部分的任何提取的情況下提取干燥的生物質(zhì)。而且，通過(guò)本發(fā)明的方法提供了高質(zhì)量的油，其例如指的是提取的油的低氮含量。因?yàn)楦唠s質(zhì)含量，如例如氮，將阻礙重新得到的油至燃料的催化過(guò)程，所以從進(jìn)一步處理重新得到的油的觀點(diǎn)看這是重要的。對(duì)于提取的油中的雜質(zhì)如例如金屬殘留，這也是適用的。應(yīng)理解低水平的例如氮的含義是指該水平低于存在于原始生物質(zhì)中的氮的量。本發(fā)明還提供了在提取期間不需要應(yīng)用壓力的方法并因此不涉及提取過(guò)程中的溶劑(其在正常壓力(1atm)下具有低沸點(diǎn))。具有低沸點(diǎn)溫度的溶劑的一個(gè)實(shí)例是丙烷，其需要外部壓力以在正常溫度如約20℃至約100℃的范圍內(nèi)的溫度下保持液態(tài)。具體實(shí)施方式在本發(fā)明的實(shí)施方式的描述中，為了清楚，將采用具體的專業(yè)術(shù)語(yǔ)。然而，本發(fā)明不旨在限于所選擇的具體術(shù)語(yǔ)，并且應(yīng)理解各具體術(shù)語(yǔ)包括以類似的方式操作來(lái)實(shí)現(xiàn)類似目的的所有技術(shù)等價(jià)物。當(dāng)描述本發(fā)明的實(shí)施方式時(shí)，沒(méi)有明確描述所有可能的實(shí)施方式的組合和改變(permutation)。雖然如此，在互相不同的從屬權(quán)利要求中陳述的或在不同實(shí)施方式中所描述的某些測(cè)量的唯一事實(shí)不表示不可以使用這些測(cè)量的組合來(lái)獲利。本發(fā)明預(yù)見(jiàn)了所描述的實(shí)施方式的所有可能組合和改變。本發(fā)明的第一方面提供了用于從產(chǎn)油酵母生物質(zhì)中回收微生物脂質(zhì)的方法，所述方法包括以下步驟：(i)提供包含含有產(chǎn)油酵母生物質(zhì)的發(fā)酵肉湯的含水懸浮液，(ii)在高于5巴的壓力下在至少160℃的溫度下使所述懸浮液經(jīng)受水熱處理1秒至360分鐘，(iii)使水熱處理的懸浮液經(jīng)受分離步驟以得到液體部分和酵母生物質(zhì)部分，(iv)使酵母生物質(zhì)部分經(jīng)受干燥步驟以得到干燥的酵母生物質(zhì)部分，(v)用液體溶劑使干燥的生物質(zhì)部分經(jīng)受提取步驟以產(chǎn)生包含微生物脂質(zhì)的液體部分和包含殘留的酵母生物質(zhì)部分的固體部分，(vi)從步驟(v)的液體部分中回收微生物脂質(zhì)，(vii)可選地，從步驟(v)的產(chǎn)物中分離殘留的生物質(zhì)部分。因此，在本發(fā)明的一個(gè)方面，沒(méi)有用溶劑提取步驟(iii)中得到的液體部分來(lái)得到任何油。本發(fā)明的另一方面涉及用于生產(chǎn)微生物脂質(zhì)的方法，該方法包括：(a)提供培養(yǎng)介質(zhì)，(b)通過(guò)在培養(yǎng)介質(zhì)中接種產(chǎn)油酵母來(lái)提供發(fā)酵肉湯以產(chǎn)生產(chǎn)油酵母生物質(zhì)，(c)孵育接種了所述產(chǎn)油酵母的所述介質(zhì)使脂質(zhì)能夠累積，(d)通過(guò)本文所描述的用于從產(chǎn)油酵母生物質(zhì)中回收微生物脂質(zhì)的方法從所述產(chǎn)油酵母生物質(zhì)中回收微生物脂質(zhì)。因此，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式涉及用于生產(chǎn)微生物脂質(zhì)的方法，該方法包括：(a)提供培養(yǎng)介質(zhì)，(b)通過(guò)在培養(yǎng)介質(zhì)中接種產(chǎn)油酵母以提供發(fā)酵肉湯來(lái)產(chǎn)生產(chǎn)油酵母生物質(zhì)，(c)孵育接種了所述產(chǎn)油酵母的所述介質(zhì)使脂質(zhì)能夠累積，(i)提供包含含有步驟(c)的產(chǎn)油酵母生物質(zhì)的發(fā)酵肉湯的含水懸浮液，(ii)在高于5巴的壓力下在至少160℃的溫度下使所述懸浮液經(jīng)受水熱處理1秒至360分鐘，(iii)使水熱處理的懸浮液經(jīng)受分離步驟以得到液體部分和酵母生物質(zhì)部分，(iv)使酵母生物質(zhì)部分經(jīng)受干燥步驟以得到干燥的酵母生物質(zhì)部分，(v)用液體溶劑使干燥的生物質(zhì)部分經(jīng)受提取步驟以產(chǎn)生包含微生物脂質(zhì)的液體部分和包含殘留的酵母生物質(zhì)部分的固體部分，(vi)從步驟(v)的液體部分中回收微生物脂質(zhì)，(vii)可選地，從步驟(v)的產(chǎn)物中分離殘留的生物質(zhì)部分。在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，將包含在由步驟(iii)得到的液體部分中的營(yíng)養(yǎng)物再循環(huán)至培養(yǎng)介質(zhì)(a)。本發(fā)明的進(jìn)一步方面提供了通過(guò)根據(jù)本發(fā)明的方法可得到的殘留生物質(zhì)。在本發(fā)明的又進(jìn)一步的方面，沒(méi)有用溶劑提取步驟(iii)中得到的液體部分。本發(fā)明的發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)在步驟(iv)中的干燥和/或步驟(v)中的提取之前，用水洗滌步驟(iii)中分離的酵母生物質(zhì)部分是有利的。這將產(chǎn)生在隨后將油反應(yīng)成例如燃料產(chǎn)物之前幾乎不需要或不需要進(jìn)一步純化的更高純度的提取油。發(fā)明人出乎意料地發(fā)現(xiàn)通過(guò)在高于160℃的溫度下使包含產(chǎn)油酵母生物質(zhì)的含水懸浮液經(jīng)受水熱處理(HTT)可以解決與收獲具有高脂質(zhì)含量的產(chǎn)油酵母生物質(zhì)有關(guān)的問(wèn)題。在水熱處理期間，酵母生物質(zhì)的密度降低且細(xì)胞組合在一起形成團(tuán)塊(flock)，這使得能夠通過(guò)常規(guī)的過(guò)濾或離心方法有效分離液體部分。在不受任何理論約束的情況下，認(rèn)為由于熱處理，酵母的細(xì)胞內(nèi)分子被提取至水相，這增加油份額(oilshare)并降低生物質(zhì)的密度。還提出水熱處理改變酵母細(xì)胞的表面結(jié)構(gòu)和表面電荷，這導(dǎo)致形成能夠通過(guò)過(guò)濾分離的細(xì)胞團(tuán)塊。還發(fā)現(xiàn)使用用于模擬從木質(zhì)纖維素生物質(zhì)提取糖類的強(qiáng)度系數(shù)(severityfactor)可以表達(dá)合適的熱處理?xiàng)l件(溫度和處理時(shí)間作為變量)。使用式(1)可以計(jì)算強(qiáng)度系數(shù)logR0(Pedersen,M.andA.S.Meyer(2010).Lignocellulosepretreatmentseverity-relatingpHtobiomatrixopening.NewBiotechnology27(6):739-750.)。在高于5巴、如6至25巴的范圍內(nèi)、例如10至25巴的范圍內(nèi)、如10至15巴的范圍內(nèi)的壓力下進(jìn)行水熱處理(步驟(ii))?？商鎿Q地，水熱處理期間的壓力可以是例如在約6.0巴至約20.0巴的范圍內(nèi)，如例如約6.0巴至約7.0巴、如例如約10.0巴至約11.0巴、如例如約13.0巴至約18巴、如例如約16巴至約19巴。因此，可以例如根據(jù)以下分配上述壓力，當(dāng)反應(yīng)溫度是約160℃時(shí)，壓力可以是例如約6.2巴至約6.8巴，或當(dāng)溫度是約180℃時(shí)，壓力可以是例如約10.3巴至約11.0巴，或當(dāng)溫度是約190℃時(shí)，壓力可以是例如約13.7巴至約18巴，或當(dāng)溫度是約200℃時(shí)，壓力可以是例如約16.2巴，或當(dāng)溫度是約210℃時(shí)，壓力可以是例如約19.6巴。進(jìn)行水熱處理(步驟(ii))持續(xù)1秒至360分鐘，如5分鐘至240min的范圍、例如10分鐘至120min的范圍。在一個(gè)實(shí)施方式中，在160至180℃范圍內(nèi)的溫度下進(jìn)行水熱處理(步驟(ii))持續(xù)30min至180min，如160℃下180min或180℃下30至60min。因此，在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，在對(duì)應(yīng)于至少約3.5、優(yōu)選地至少約3.9的強(qiáng)度系數(shù)logR0的條件下進(jìn)行水熱處理。在一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方式中，強(qiáng)度系數(shù)在約3.5至約5.5的范圍內(nèi)，如例如約4至約4.5。一般在密閉容器中進(jìn)行熱處理。發(fā)明人還出乎意料地發(fā)現(xiàn)通過(guò)包括在160℃以上的溫度下水熱處理酵母生物質(zhì)和隨后溶劑提取的方法回收的脂質(zhì)包含非常少的量的磷和金屬雜質(zhì)。發(fā)現(xiàn)水熱處理使得能夠有效收獲高脂質(zhì)含量的微生物細(xì)胞和高產(chǎn)率地回收高質(zhì)量微生物油。因此，本發(fā)明涉及以下方法，其中，基于存在于生物質(zhì)中的油或脂質(zhì)的含量，提取的油或脂質(zhì)的產(chǎn)率在至少約70％、如例如約至少80％、如例如約至少90％、如例如約至少95％、如例如約至少98％、如例如約100％的范圍內(nèi)。發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的方法能夠在不大量損失微生物脂質(zhì)的情況下有效地收獲具有高含量的微生物脂質(zhì)(如脂質(zhì)含量大于35％)的產(chǎn)油酵母生物質(zhì)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，酵母生物質(zhì)具有按細(xì)胞團(tuán)(cellmass)的重量計(jì)至少20％的脂質(zhì)含量。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，酵母生物質(zhì)具有按細(xì)胞團(tuán)的重量計(jì)至少30％的脂質(zhì)含量。在一個(gè)更加優(yōu)選的實(shí)施方式中，酵母生物質(zhì)具有按細(xì)胞團(tuán)的重量計(jì)的至少35％、如例如在干重基礎(chǔ)上至少約40％、或如例如在干重基礎(chǔ)上至少約50％、如例如在干重基礎(chǔ)上至少約60％、如例如在干重基礎(chǔ)上至少約70％、如例如在干重基礎(chǔ)上至少約80％的脂質(zhì)含量。使用任何傳統(tǒng)的溶劑如乙醇或烴可以執(zhí)行脂質(zhì)的提取。優(yōu)選地使用己烷提取，因?yàn)槠浔ＷC良好的提取產(chǎn)率和油質(zhì)量。可以用常規(guī)的方式進(jìn)行提取步驟。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，使用烴溶劑，如包含低級(jí)烷烴、優(yōu)選地脂肪族C2-C8烷烴的烴溶劑，進(jìn)行提取步驟(v)。更加優(yōu)選的是C5-C8烷烴，如例如戊烷、己烷、庚烷或辛烷。而且，發(fā)明人出乎意料地發(fā)現(xiàn)在含水懸浮液包含由在包含木質(zhì)纖維素水解產(chǎn)物的培養(yǎng)介質(zhì)中培養(yǎng)產(chǎn)油酵母得到的發(fā)酵肉湯的情況下，水熱處理增加殘留生物質(zhì)的量。這表示存在于發(fā)酵肉湯中的溶解的木質(zhì)纖維素材料在水熱處理期間轉(zhuǎn)變?yōu)楣虘B(tài)并在隨后的分離步驟中與殘留的生物質(zhì)分離。從含水懸浮液中將溶解的木質(zhì)纖維素材料回收至固體生物質(zhì)部分具有增加由回收過(guò)程得到的有價(jià)值的殘留生物質(zhì)部分的量的優(yōu)點(diǎn)。同時(shí)，這降低由使用木質(zhì)纖維素材料或水解產(chǎn)物的產(chǎn)油酵母生產(chǎn)得到的廢水部分的化學(xué)需氧量(chemicaloxygendemand)。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，由在包含木質(zhì)纖維素材料的培養(yǎng)介質(zhì)中培養(yǎng)產(chǎn)油酵母得到發(fā)酵肉湯。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，由在包含木質(zhì)纖維素水解產(chǎn)物的培養(yǎng)介質(zhì)中培養(yǎng)產(chǎn)油酵母得到發(fā)酵肉湯。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)包括水熱處理能夠通過(guò)常規(guī)收獲方式如過(guò)濾和離心從含水懸浮液中有效地收獲具有高脂質(zhì)含量的產(chǎn)油酵母生物質(zhì)。有效的收獲是指收獲的生物質(zhì)具有高干物質(zhì)含量且在收獲過(guò)程中沒(méi)有損失油或含油細(xì)胞。結(jié)果，需要在隨后的提取步驟之前通過(guò)干燥除去僅少量的水且在處理期間油不會(huì)損失。本發(fā)明從而能夠經(jīng)濟(jì)可行地從具有高脂質(zhì)含量的產(chǎn)油酵母生物質(zhì)中回收脂質(zhì)，因?yàn)樗疅崽幚硎箤?duì)于干燥的需要最小化，已知其是回收過(guò)程中最耗能的步驟。產(chǎn)油酵母可以是能夠累積細(xì)胞間脂質(zhì)的任何酵母使得當(dāng)在合適的條件下培養(yǎng)時(shí)脂質(zhì)占酵母的總生物質(zhì)(每細(xì)胞干重)的至少15％(w/w)。產(chǎn)油酵母包括以下種屬的產(chǎn)油酵母物種：棒孢酵母屬(Clavispora)、地絲菌屬(Geotrichum)、Deparyomyces、管囊酵母屬(Pachysolen)、克魯維酵母屬(Kluyveromyces)、耐堿酵母屬(Galactomyces)、漢遜酵母屬(Hansenula)、白冬孢酵母屬(Leucosporidium)、釀酒酵母屬(Saccharomyces)、擲孢酵母屬(Sporobolomyces)、鎖擲酵母屬(Sporidiobolus)、Waltomyces、擬內(nèi)胞霉屬(Endomycopsis)、隱球酵母屬(Cryptococcus)如彎曲隱球酵母屬(Cryptococcuscurvatus)、紅冬孢酵母屬(Rhodosporidium)如串珠狀紅冬孢酵母屬(Rhodosporidiumtoruloides)或Rhodosporidiumfluviale、薔薇色酵母屬(Rhodotorula)如紅酵母屬(Rhodotorulaglutinis)、耶氏酵母屬(Yarrowia)如解脂耶氏酵母屬(Yarrowialipolytica)、畢赤氏酵母屬(Pichia)如樹(shù)干畢赤氏酵母屬(Pichiastipitis)、假絲酵母屬(Candida)如彎曲假絲酵母屬(Candidacurvata)、油脂酵母屬(Lipomyces)如斯氏油脂酵母屬(Lipomycesstarkeyi)以及絲孢酵母屬(Trichosporon)如皮狀絲孢酵母屬(Trichosporoncutaneum)或出芽絲孢酵母屬(Trichosporonpullulans)。優(yōu)選地，酵母菌株是屬于假絲酵母、薔薇色酵母、絲孢酵母、紅冬孢酵母、油脂隱球酵母或釀酒酵母的那些。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，酵母是紅冬孢酵母屬、薔薇色酵母屬、油脂隱球酵母屬或釀酒酵母屬中的酵母。在進(jìn)一步的實(shí)施方式中，通過(guò)本發(fā)明的方法使用的產(chǎn)油酵母是產(chǎn)油酵母中的兩種或更多種物種的混合物。在高于160℃的溫度下的水熱處理還破壞酵母細(xì)胞并能夠在沒(méi)有單獨(dú)的細(xì)胞破壞步驟的情況下有效提取脂質(zhì)。發(fā)現(xiàn)由水熱處理的酵母生物質(zhì)提取的油包含少量的磷和金屬雜質(zhì)，這對(duì)于隨后將脂質(zhì)加工成燃料組分是必要的并且這降低對(duì)于用于原微生物油的進(jìn)一步純化步驟的需要。木質(zhì)纖維素材料術(shù)語(yǔ)“木質(zhì)纖維素生物質(zhì)”或“木質(zhì)纖維素材料”意味著包括但不限于木本植物或非木本植物的草本植物或包含纖維素和/或半纖維素的其他材料：材料可以是農(nóng)業(yè)殘留(如麥秸、稻秸、谷殼、外殼、玉米秸、甘蔗渣、甘蔗梢(sugarcanetop)和葉)、專門的能源作物(如柳枝黍(switchgrass)、芒草(Miscanthus)、蘆竹(Arundodonax)、虉草(reedcanarygrass)、楊柳(willow)、水風(fēng)信子(waterhyacinth)、能源甘蔗(energycane)、能源高粱(energysorghum))、木材或殘留(包括鋸木廠和紙漿和/或造紙廠殘留或部分，如半纖維素、廢棄的亞硫酸鹽廢液、廢纖維和/或初級(jí)污泥(primarysludge))、苔蘚或腐葉土或市政紙張廢物。術(shù)語(yǔ)木質(zhì)纖維素材料還包含低木質(zhì)素材料、如大型藻類生物質(zhì)的材料。另外，材料還包含來(lái)自工業(yè)實(shí)踐的半纖維素或纖維素部分。術(shù)語(yǔ)木質(zhì)纖維素材料包含任何種類的纖維素部分。根據(jù)本公開(kāi)，可以將原材料或某些部分如來(lái)自不同來(lái)源、植物物種或工業(yè)過(guò)程的原材料的半纖維素和/或纖維素混合在一起并用于用于培養(yǎng)微生物生物質(zhì)的原材料。一般，木質(zhì)纖維素中的木質(zhì)素含量高于5％。木質(zhì)纖維素生物質(zhì)還可以包含淀粉，例如在完整植物的情況下。術(shù)語(yǔ)木質(zhì)纖維素材料包含至少50wt％的木質(zhì)纖維素、優(yōu)選地至少60wt％的木質(zhì)纖維素、更優(yōu)選地至少70wt％的木質(zhì)纖維素、最優(yōu)選地至少80wt％的木質(zhì)纖維素。通常，木質(zhì)纖維素材料包含60-95wt％的木質(zhì)纖維素、一般70-90wt％或80-90wt％的木質(zhì)纖維素。包含木質(zhì)纖維素材料的培養(yǎng)介質(zhì)“包含木質(zhì)纖維素材料的培養(yǎng)介質(zhì)”是指用于培養(yǎng)微生物的培養(yǎng)介質(zhì)，該介質(zhì)包含木質(zhì)纖維素、纖維素的片段或包含來(lái)源于蛋白質(zhì)的氮化合物和金屬的木質(zhì)木質(zhì)纖維素的水解產(chǎn)物、以及用于培養(yǎng)所述微生物必須的其他組分如氮、磷、無(wú)機(jī)鹽和/或微量元素的來(lái)源、消泡劑。木質(zhì)纖維素可以用作用于所述微生物的碳源，但是在培養(yǎng)介質(zhì)中也可以具有其他功能。水解“水解”在此處是指將聚合糖糖化為糖低聚物和單體。一般在兩個(gè)階段中進(jìn)行糖化：首先通過(guò)熱化學(xué)或化學(xué)方法，然后通過(guò)使用能夠水解聚合糖的酶來(lái)水解底物，即木質(zhì)纖維素材料或木質(zhì)纖維素?？商鎿Q地以及根據(jù)木質(zhì)纖維素材料，可以通過(guò)使用熱化學(xué)或化學(xué)方法或通過(guò)能夠水解聚合糖的酶或這些方法的一些組合執(zhí)行糖化。化學(xué)方法包括但不限于酸處理。水解產(chǎn)物術(shù)語(yǔ)“水解產(chǎn)物”或“水解材料”在此處是指已經(jīng)經(jīng)歷水解的材料。木質(zhì)纖維素水解產(chǎn)物術(shù)語(yǔ)“木質(zhì)纖維素水解產(chǎn)物”在此處是指包括纖維素和/或半纖維素、低聚糖、單糖和/或二糖、乙酸、甲酸、其他有機(jī)酸、呋喃甲醛、羥基甲基呋喃甲醛、乙酰丙酸、酚化合物的木質(zhì)纖維素或木質(zhì)纖維素材料的水解產(chǎn)物、由木質(zhì)素、纖維素、半纖維素和/或木質(zhì)纖維素的其他組分形成的其他水解和/或降解產(chǎn)物、來(lái)源于蛋白質(zhì)的氮化合物、金屬和/或木質(zhì)纖維素的非水解或部分水解的片段。水熱處理“水熱處理”或“水熱加工”在此處同義地使用且是指將包含微生物生物質(zhì)的含水懸浮液加熱至至少160℃的溫度并在高于5巴的壓力下使包含所述微生物生物質(zhì)的含水懸浮液經(jīng)受至少160℃的溫度1s至360分鐘的過(guò)程。應(yīng)注意在本發(fā)明的背景下，上述方法，即熱化學(xué)處理、蒸汽噴發(fā)(steamexplosion)、熱水提取、自動(dòng)水解、亞臨界水處理、超臨界水處理、強(qiáng)酸處理、弱酸處理、堿處理(例如石灰、氨)、有機(jī)溶劑處理(例如醇、有機(jī)酸)、機(jī)械處理、機(jī)械熱處理和離子液體處理不在水熱加工(或水熱處理，熱處理，HTT)的定義內(nèi)。強(qiáng)度系數(shù)術(shù)語(yǔ)“強(qiáng)度系數(shù)(severityfactor)”在此處是指參數(shù)LogR0，其是基于以下等式計(jì)算的并在溫度和時(shí)間方面描述水熱條件。式(1)：其中，R0是強(qiáng)度系數(shù)，T(t)是以℃計(jì)的處理溫度以及t是以分鐘計(jì)的處理時(shí)間。產(chǎn)油微生物術(shù)語(yǔ)“產(chǎn)油微生物”是指產(chǎn)生脂質(zhì)的微生物。因此，產(chǎn)油酵母是指產(chǎn)生脂質(zhì)的微生物。當(dāng)將產(chǎn)生脂質(zhì)的微生物用于單細(xì)胞油生產(chǎn)時(shí)，微生物生物質(zhì)是來(lái)自單細(xì)胞油生產(chǎn)過(guò)程的殘留生物質(zhì)。本文所涉及的以及目前使用的產(chǎn)油酵母可以容易地累積脂質(zhì)或被遺傳改性以累積脂質(zhì)或改善脂質(zhì)的累積。優(yōu)選地，使用能夠利用C6和C5糖的產(chǎn)油酵母。在本發(fā)明的背景下，產(chǎn)油酵母是指當(dāng)在合適的條件下培養(yǎng)時(shí)能夠累積細(xì)胞間脂質(zhì)使得脂質(zhì)占酵母的總生物質(zhì)的至少15％(w/w)(每細(xì)胞干重)的酵母。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，產(chǎn)油微生物能夠累積微生物的總生物質(zhì)的至少20％(w/w)(每細(xì)胞干重)。在一個(gè)更加優(yōu)選的實(shí)施方式中，產(chǎn)油酵母能夠累積酵母的總生物質(zhì)的至少35％(w/w)(每細(xì)胞干重)。在又進(jìn)一步的優(yōu)選的實(shí)施方式中，產(chǎn)油酵母能夠累積干重基礎(chǔ)上至少約40％(w/w)、或如例如干重基礎(chǔ)上至少約50％(w/w)、如例如干重基礎(chǔ)上至少約60％(w/w)、如例如干重基礎(chǔ)上至少約70％(w/w)、如例如干重基礎(chǔ)上至少約80％(w/w)總生物質(zhì)(每細(xì)胞干重)的脂質(zhì)。微生物脂質(zhì)或脂質(zhì)在本發(fā)明的背景下，“微生物脂質(zhì)”、“脂質(zhì)”或“細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)”或“油產(chǎn)物”是指脂肪物質(zhì)，其分子通常包含(作為一部分)溶解在非極性有機(jī)溶劑中但較差地溶于水中的脂肪族烴鏈。脂質(zhì)是活細(xì)胞中的大分子的必需基團(tuán)。脂質(zhì)是例如脂肪、油、蠟、蠟酯、固醇、類萜、類異戊二烯、類葉紅素、聚羥基烷酸酯、核酸、脂肪酸、脂肪醇、脂肪醛、脂肪酸酯、磷脂、糖脂、鞘脂和甘油酯(acylglycerol，酰基甘油)如三-甘油酯、甘油二酯或甘油單酯。本發(fā)明中優(yōu)選的脂質(zhì)是脂肪、油、蠟、甘油酯和脂肪酸及它們的衍生物，特別是三酰甘油酯和蠟酯。在本發(fā)明的背景下，通過(guò)在微生物中累積合成脂質(zhì)(細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì))。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方式中，通過(guò)微生物合成脂質(zhì)和通過(guò)微生物分泌脂質(zhì)(細(xì)胞外脂質(zhì))。關(guān)于本發(fā)明，將單細(xì)胞油用作脂質(zhì)和脂肪的同義詞。術(shù)語(yǔ)“甘油酯”是指甘油和脂肪酸的酯。甘油酯作為脂肪和脂肪油天然出現(xiàn)。甘油酯的實(shí)例包括三酰甘油酯(TAG，甘油三酯)、甘油二酯(甘油二酸酯)和甘油單酯(甘油單酸酯)。生物質(zhì)在本發(fā)明的背景下，術(shù)語(yǔ)“生物質(zhì)(biomass)”(或“細(xì)胞團(tuán)(cellmass)”)是指源自活的有機(jī)體或非活的有機(jī)體的生物材料?！敖湍干镔|(zhì)(yeastbiomass)”因此是指源自酵母的生物質(zhì)?？梢杂山湍傅膯蝹€(gè)物種或酵母的不同物種的集合得到微生物生物質(zhì)。酵母生物質(zhì)可以以活的或非活的狀態(tài)存在。在本發(fā)明的背景下，已經(jīng)經(jīng)受水熱熱處理(HTT)的酵母生物質(zhì)是非活的狀態(tài)。殘留的細(xì)胞團(tuán)在本發(fā)明的背景下，“殘留的細(xì)胞團(tuán)”或“殘留的生物質(zhì)部分”是指固體、半固體或流動(dòng)材料部分，其包含由其回收細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)的微生物。干物質(zhì)“DM”或“干重”在此處是指干物質(zhì)并是當(dāng)經(jīng)受基本除去材料中的水(即材料完全干燥)的處理時(shí)的材料的質(zhì)量的測(cè)量。包含微生物生物質(zhì)的含水懸浮液的水熱處理和后續(xù)加工可以水熱加工原樣(assuch)來(lái)自培養(yǎng)的包含生物質(zhì)的含水懸浮液，或可以首先濃縮懸浮液。還可以在這時(shí)調(diào)節(jié)懸浮液的pH。更酸性的pH能夠更好地溶解固體材料，導(dǎo)致與在較高的pH下相比在更低的溫度下浮起(flotation)一些酵母。盡管pH調(diào)節(jié)不影響使這些酵母可過(guò)濾所需的強(qiáng)度系數(shù)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，步驟(i)中的含水懸浮液的pH值低于6、優(yōu)選地低于5。然而，在本發(fā)明的另一方面，不需要外部酸化使得添加酸性組分以調(diào)節(jié)或調(diào)整反應(yīng)混合物的pH?？梢酝ㄟ^(guò)直接或間接加熱進(jìn)行生物質(zhì)懸浮液的水熱加工。在直接加熱中，可以用蒸汽加熱懸浮液。在間接加熱中，可以通過(guò)包含懸浮液的容器的壁或通過(guò)熱交換器的管或殼循環(huán)懸浮液加熱懸浮液。可以在密閉的連續(xù)或間歇系統(tǒng)中進(jìn)行加熱。含水懸浮液一般具有至少3％、優(yōu)選地至少10％如15至35％的干物質(zhì)含量。水熱加工之后，可以通過(guò)多種方法如離心或過(guò)濾從液體中分離包含油的固體材料。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，通過(guò)離心執(zhí)行分離步驟(iii)或分離步驟(iii)包括離心的步驟。在另一個(gè)實(shí)施方式中，通過(guò)過(guò)濾執(zhí)行分離步驟(iii)或分離步驟(iii)包括過(guò)濾的步驟。過(guò)濾是優(yōu)選的，因?yàn)槭褂脡簽V機(jī)可以得到最高達(dá)70％的固體材料的高干物質(zhì)含量。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，由分離步驟(iii)得到的酵母生物質(zhì)部分具有至少50％、如至少60％的干物質(zhì)含量。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，由步驟(iii)得到的酵母生物質(zhì)部分具有至少65％的干物質(zhì)含量。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方式中，由步驟(iii)得到的酵母生物質(zhì)部分具有至少70％的干物質(zhì)含量。使用水洗滌收獲的濕潤(rùn)生物質(zhì)以進(jìn)一步減少提取的油的雜質(zhì)(參見(jiàn)實(shí)施例9)。因此，在一個(gè)實(shí)施方式中，在提取步驟(v)之前，使由水熱處理步驟得到的酵母生物質(zhì)部分經(jīng)受水洗步驟。在使用烴溶劑、最優(yōu)選地己烷提取之前，將固體材料干燥至>90％的干物質(zhì)含量。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，干燥的生物質(zhì)部分(步驟(iv)的)具有至少90％、優(yōu)選地至少95％的干物質(zhì)含量?？梢允褂萌魏我阎母稍锛夹g(shù)，但是選擇可以影響提取的油的質(zhì)量(參見(jiàn)實(shí)施例9)。發(fā)現(xiàn)通過(guò)在油提取步驟之前優(yōu)化生物質(zhì)的干燥可以調(diào)節(jié)提取的微生物油中的雜質(zhì)的量，尤其是氮的量。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，在低于100℃、優(yōu)選地低于90℃的溫度下進(jìn)行干燥步驟(iv)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，在低于90℃、優(yōu)選地低于50℃的溫度下進(jìn)行提取步驟(v)。在另一個(gè)實(shí)施方式中，在真空中以及在低于90℃、優(yōu)選地低于70℃的生物質(zhì)的溫度下進(jìn)行干燥步驟(iv)。在一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方式中，在低于90℃、優(yōu)選地低于70℃的溫度下進(jìn)行提取步驟(v)。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式中，使用烴溶劑，如包含低級(jí)烷烴、優(yōu)選地脂肪族C2-C8烷烴的烴溶劑，進(jìn)行提取步驟(v)?？梢允褂萌魏我阎奶崛〖夹g(shù)進(jìn)行提取步驟。提取過(guò)程產(chǎn)生原始微生物油(rawmicrobialoil)和提取出油的殘留生物質(zhì)，在進(jìn)一步使用之前需要去溶劑。通過(guò)本發(fā)明的方法可得到的微生物脂質(zhì)如本文提到的，發(fā)明人出乎意料地發(fā)現(xiàn)通過(guò)包括在160℃以上的溫度下水熱處理酵母生物質(zhì)和隨后溶劑提取的方法回收的脂質(zhì)包含非常少的量的磷和金屬雜質(zhì)。相應(yīng)地，本發(fā)明的進(jìn)一步的方面涉及通過(guò)本發(fā)明的方法可得到的微生物脂質(zhì)。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)如果通過(guò)本方法得到微生物脂質(zhì)，元素磷的量減少。相應(yīng)地，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式涉及通過(guò)本發(fā)明的方法可得到的微生物脂質(zhì)，其中，元素磷的濃度不多于20mg/kg的微生物脂質(zhì)、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg元素磷/kg微生物脂質(zhì)。發(fā)明人進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)如果通過(guò)本方法得到微生物脂質(zhì)，則元素氮的量減少。相應(yīng)地，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方式涉及通過(guò)本發(fā)明的方法可得到的微生物脂質(zhì)，其中，元素氮的濃度不多于600mg元素氮/kg微生物脂質(zhì)、更優(yōu)選地不多于200mg/kg、最優(yōu)選地不多于100mg元素氮/kg微生物脂質(zhì)。在一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方式中，微生物油中的元素鐵、鈉、硅、鈣、鎂、錳或鉀的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油中的元素鐵的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油中的元素鈉的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油中的元素硅的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油中的元素鈣的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油中的元素鎂的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油中的元素錳的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油中的元素鉀的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。又進(jìn)一步的方面涉及微生物油產(chǎn)品。在本發(fā)明的實(shí)施方式中，微生物油產(chǎn)品中的元素磷的濃度不多于20mg/kg的微生物脂質(zhì)、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg元素磷/kg微生物油產(chǎn)物。在本發(fā)明的第二實(shí)施方式中，微生物油產(chǎn)物中的元素氮的濃度不多于600mg元素氮/kg微生物脂質(zhì)、更優(yōu)選地不多于200mg/kg、最優(yōu)選地不多于100mg元素氮/kg微生物油產(chǎn)物。在一個(gè)進(jìn)一步的實(shí)施方式中，微生物油產(chǎn)物中的元素鐵、鈉、硅、鈣、鎂、錳或鉀的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油產(chǎn)品中的元素鐵的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油產(chǎn)品中的元素鈉的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油產(chǎn)品中的元素硅的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油產(chǎn)品中的元素鈣的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油產(chǎn)品中的元素鎂的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油產(chǎn)品中的元素錳的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。例如，微生物油產(chǎn)品中的元素鉀的濃度不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg。通過(guò)以下非限制性項(xiàng)目示出本發(fā)明。項(xiàng)目1.一種用于從產(chǎn)油酵母生物質(zhì)中回收微生物脂質(zhì)的方法，所述方法包括以下步驟：(i)提供包含含有產(chǎn)油酵母生物質(zhì)的發(fā)酵肉湯的含水懸浮液，(ii)在高于5巴的壓力下在至少160℃的溫度下使所述懸浮液經(jīng)受水熱處理1秒至360分鐘，(iii)使水熱處理的懸浮液經(jīng)受分離步驟以得到液體部分和酵母生物質(zhì)部分，(iv)使酵母生物質(zhì)部分經(jīng)受干燥步驟以得到干燥的酵母生物質(zhì)部分，(v)用液體溶劑使干燥的生物質(zhì)部分經(jīng)受提取步驟以產(chǎn)生包含微生物脂質(zhì)的液體部分和包含殘留的酵母生物質(zhì)部分的固體部分，(vi)從步驟(v)的液體部分中回收微生物脂質(zhì)，(vii)可選地，從步驟(v)的產(chǎn)物中分離殘留的生物質(zhì)部分。項(xiàng)目2.根據(jù)項(xiàng)目1的方法，其中，由在包含木質(zhì)纖維素材料的培養(yǎng)介質(zhì)中的產(chǎn)油酵母的培養(yǎng)得到發(fā)酵肉湯。項(xiàng)目3.根據(jù)項(xiàng)目1的方法，其中，由在包含木質(zhì)纖維素水解產(chǎn)物的培養(yǎng)介質(zhì)中的產(chǎn)油酵母的培養(yǎng)得到發(fā)酵肉湯。項(xiàng)目4.根據(jù)項(xiàng)目1-3中任一項(xiàng)的方法，其中，由分離步驟得到的酵母生物質(zhì)部分具有至少50％、優(yōu)選地至少60％的干物質(zhì)含量。項(xiàng)目5.根據(jù)項(xiàng)目1-4中任一項(xiàng)所述的方法，其中，干燥的生物質(zhì)部分具有至少90％、優(yōu)選地至少95％的干物質(zhì)含量。項(xiàng)目6.根據(jù)項(xiàng)目1-5中任一項(xiàng)的方法，其中，在密閉容器中進(jìn)行熱處理。項(xiàng)目7.根據(jù)項(xiàng)目1-6中任一項(xiàng)的方法，其中，在對(duì)應(yīng)于至少3.5、優(yōu)選地至少3.9的強(qiáng)度系數(shù)LogR0的條件下進(jìn)行水熱處理。項(xiàng)目8.根據(jù)項(xiàng)目1-7中任一項(xiàng)所述的方法，其中，酵母生物質(zhì)具有按細(xì)胞團(tuán)的重量計(jì)至少20％、優(yōu)選地至少30％、最優(yōu)選地至少35％的脂質(zhì)含量。項(xiàng)目9.根據(jù)項(xiàng)目1-8中任一項(xiàng)所述的方法，其中，在提取步驟之前，使由水熱處理步驟得到的酵母生物質(zhì)部分經(jīng)受水洗步驟。項(xiàng)目10.根據(jù)項(xiàng)目1-9中任一項(xiàng)的方法，其中，含水懸浮液具有至少3％、優(yōu)選地至少10％的干物質(zhì)含量。項(xiàng)目11.根據(jù)項(xiàng)目1-10中任一項(xiàng)的方法，其中，酵母是紅冬孢酵母屬、薔薇色酵母屬、油脂酵母屬、隱球酵母屬或釀酒酵母屬。項(xiàng)目12.根據(jù)項(xiàng)目5-11中任一項(xiàng)的方法，其中，液體溶劑是烴溶劑，包括低級(jí)烷烴、優(yōu)選地脂肪族C2-C8烷烴。項(xiàng)目13.根據(jù)前述項(xiàng)目中任一項(xiàng)的方法，其中，通過(guò)離心執(zhí)行分離(iii)或分離(iii)包括離心步驟。項(xiàng)目14.根據(jù)前述項(xiàng)目中任一項(xiàng)的方法，其中，通過(guò)過(guò)濾執(zhí)行分離(iii)或分離(iii)包括過(guò)濾步驟。項(xiàng)目15.根據(jù)前述項(xiàng)目中任一項(xiàng)的方法，其中，在真空中并在低于90℃、優(yōu)選地低于70℃的生物質(zhì)溫度下進(jìn)行干燥步驟(iv)。項(xiàng)目16.根據(jù)前述項(xiàng)目中任一項(xiàng)的方法，其中，在低于90℃、優(yōu)選地低于70℃的溫度下進(jìn)行提取步驟(v)。項(xiàng)目17.根據(jù)前述項(xiàng)目中任一項(xiàng)的方法，其中，步驟(i)中的含水懸浮液的pH值低于約6、優(yōu)選地低于約5。項(xiàng)目18.通過(guò)根據(jù)項(xiàng)目1-17中任一項(xiàng)的方法可得到的殘留生物質(zhì)。項(xiàng)目19.一種用于生產(chǎn)微生物脂質(zhì)的方法，該方法包括(a)提供培養(yǎng)介質(zhì)，(b)通過(guò)在培養(yǎng)介質(zhì)中接種產(chǎn)油酵母以提供發(fā)酵肉湯來(lái)產(chǎn)生產(chǎn)油酵母生物質(zhì)，(c)孵育接種了所述產(chǎn)油酵母的所述介質(zhì)使脂質(zhì)能夠累積，(d)用根據(jù)項(xiàng)目1-18中任一項(xiàng)的方法由所述產(chǎn)油酵母生物質(zhì)回收微生物脂質(zhì)。項(xiàng)目20.根據(jù)項(xiàng)目19的方法，其中，將包含在由分離步驟得到的液體部分中的營(yíng)養(yǎng)物再循環(huán)至培養(yǎng)介質(zhì)。項(xiàng)目21.通過(guò)根據(jù)項(xiàng)目1-20中任一項(xiàng)的方法能夠得到的微生物脂質(zhì)。項(xiàng)目22.一種微生物油產(chǎn)品，其中，油包含不多于20mg/kg的元素磷、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg的元素磷。項(xiàng)目23.根據(jù)項(xiàng)目22的微生物油產(chǎn)品，其中，油包含不多于600mg/kg的元素氮、更優(yōu)選地不多于200、最優(yōu)選地不多于100mg/kg的元素氮。項(xiàng)目24.根據(jù)項(xiàng)目22或23的微生物油產(chǎn)品，其中，油包含不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg的元素鐵、鈉、硅、鈣、鎂、錳或鉀中的任一種。本發(fā)明還涉及根據(jù)以下條款的具體實(shí)施方式：條款(article)1.一種用于從產(chǎn)油酵母生物質(zhì)中回收微生物脂質(zhì)的方法，所述方法包括以下步驟：(i)提供包含含有產(chǎn)油酵母生物質(zhì)的發(fā)酵肉湯的含水懸浮液，(ii)在高于5巴的壓力下在至少160℃的溫度下使所述懸浮液經(jīng)受水熱處理1秒至360分鐘，(iii)使水熱處理的懸浮液經(jīng)受分離步驟以得到液體部分和酵母生物質(zhì)部分，(iv)使酵母生物質(zhì)部分經(jīng)受干燥步驟以得到干燥的酵母生物質(zhì)部分，(v)用液體溶劑使干燥的生物質(zhì)部分經(jīng)受提取步驟以產(chǎn)生包含微生物脂質(zhì)的液體部分和包含殘留的酵母生物質(zhì)部分的固體部分，(vi)從步驟(v)的液體部分中回收微生物脂質(zhì)，(vii)可選地，從步驟(v)的產(chǎn)物中分離殘留的生物質(zhì)部分。2.根據(jù)條款1的方法，其中，由在包含木質(zhì)纖維素水解產(chǎn)物的培養(yǎng)介質(zhì)中的產(chǎn)油酵母的培養(yǎng)得到發(fā)酵肉湯。3.根據(jù)條款1或2中任一項(xiàng)的方法，其中，由分離步驟得到的酵母生物質(zhì)部分具有至少50％、優(yōu)選地至少60％的干物質(zhì)含量。4.根據(jù)條款1-3中任一項(xiàng)的方法，其中，干燥的生物質(zhì)部分具有至少90％、優(yōu)選地至少95％的干物質(zhì)含量。5.根據(jù)條款1-4中任一項(xiàng)的方法，其中，在對(duì)應(yīng)于至少3.5、優(yōu)選地至少3.9的強(qiáng)度系數(shù)LogR0的條件下進(jìn)行水熱處理。6.根據(jù)條款1-5中任一項(xiàng)的方法，其中，酵母生物質(zhì)具有按細(xì)胞團(tuán)的重量計(jì)至少20％、優(yōu)選地至少30％、最優(yōu)選地至少35％的脂質(zhì)含量。7.根據(jù)條款1-6中任一項(xiàng)的方法，其中，含水懸浮液具有至少3％、優(yōu)選地至少10％的干物質(zhì)含量。8.根據(jù)條款1-7中任一項(xiàng)的方法，其中，酵母是紅冬孢酵母屬、薔薇色酵母屬、油脂酵母屬、隱球酵母屬或釀酒酵母屬。9.根據(jù)前述條款中任一項(xiàng)的方法，其中，通過(guò)離心執(zhí)行分離(iii)或分離(iii)包括離心步驟。10.根據(jù)前述條款中任一項(xiàng)的方法，其中，通過(guò)過(guò)濾執(zhí)行分離(iii)或分離(iii)包括過(guò)濾步驟。11.根據(jù)前述條款中任一項(xiàng)的方法，其中，在真空中并在低于90℃、優(yōu)選地低于70℃的生物質(zhì)溫度下進(jìn)行干燥步驟(iv)。12.根據(jù)前述條款中任一項(xiàng)的方法，其中，在低于90℃、優(yōu)選地低于70℃的溫度下進(jìn)行提取步驟(v)。13.根據(jù)前述條款中任一項(xiàng)的方法，其中，步驟(i)中的含水懸浮液的pH值低于約6、優(yōu)選地低于約5。14.通過(guò)根據(jù)條款1-13中任一項(xiàng)的方法可得到的殘留生物質(zhì)。15.通過(guò)根據(jù)條款1-13中任一項(xiàng)的方法可得到的微生物脂質(zhì)。16.一種微生物油產(chǎn)品，包含不多于20mg/kg的元素磷、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg的元素磷。17.根據(jù)條款16的微生物油產(chǎn)品，其中，油包含不多于600mg/kg的元素氮、更優(yōu)選地不多于200、最優(yōu)選地不多于100mg/kg的元素氮。18.一種根據(jù)條款16或17的微生物油產(chǎn)品，其中，油包含不多于20mg/kg、優(yōu)選地不多于10mg/kg、更加優(yōu)選地不多于5mg/kg、最優(yōu)選地不多于1mg/kg的元素鐵、鈉、硅、鈣、鎂、錳或鉀中的任一種。實(shí)施例通過(guò)以下非限制性實(shí)施例示出本發(fā)明。本發(fā)明可以應(yīng)用于除了實(shí)施例示出的那些之外的微生物。應(yīng)理解在以上說(shuō)明書(shū)和實(shí)施例中給出的實(shí)施方式僅用于示出目的，且各種變化和修改可以在本發(fā)明的范圍內(nèi)。實(shí)施例1在純糖上培養(yǎng)紅冬孢酵母生物質(zhì)用于熱收獲實(shí)驗(yàn)在中試發(fā)酵罐(pilotfermentor)中在通風(fēng)下使串珠狀紅冬孢酵母(Rhodosporidiumtoruloides)菌株CBS8587(或其他由公認(rèn)的微生物菌種保藏中心容易獲得的串珠狀紅冬孢酵母菌株)生長(zhǎng)。使用葡萄糖作為碳源作為批次進(jìn)料發(fā)酵進(jìn)行發(fā)酵。24h批次階段之后，在143h培養(yǎng)期間將葡萄糖漿定期添加到發(fā)酵罐中。用酵母提取物(8g/l)、(NH4)2SO4(3g/l)、MgCl2(2g/l)、K2HPO4(9g/l)和CaCl2(0,4g/l)以及微量礦物ZnSO4(0,0003g/l)、CuCl(0,0002g/l)和MnCl2(0,03g/l)補(bǔ)充生長(zhǎng)介質(zhì)。在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，生物質(zhì)中的含油量是細(xì)胞的干重的46,8％。巴氏殺菌得到的生物質(zhì)懸浮液并將其用于以下實(shí)施例中的熱收獲測(cè)試。實(shí)施例2在木質(zhì)纖維素糖上培養(yǎng)紅冬孢酵母生物質(zhì)用于熱收獲實(shí)驗(yàn)批號(hào)1：在中試發(fā)酵罐中在通風(fēng)下使串珠狀紅冬孢酵母菌株CBS8587(或其他由公認(rèn)的微生物菌種保藏中心容易獲得的串珠狀紅冬孢酵母菌株)生長(zhǎng)。使用木質(zhì)纖維素水解產(chǎn)物糖漿作為碳源，作為批次進(jìn)料發(fā)酵進(jìn)行發(fā)酵。12h批次發(fā)酵之后，在144h培養(yǎng)期間定期將木質(zhì)纖維素水解產(chǎn)物糖漿添加到發(fā)酵罐中。用酵母提取物(17g/l)、(NH4)2SO4(2,1g/l)、(NH4)2HPO4(2,1g/l)MgCl2(3,3g/l)、K2HPO4(5g/l)和CaCl2(0,2g/l)以及微量礦物ZnSO4(0,0005g/l)、CuCl(0,0003g/l)和MnCl2(0,05g/l)補(bǔ)充生長(zhǎng)介質(zhì)。在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，生物質(zhì)中的含油量是細(xì)胞的干重的34,6％。巴氏殺菌得到的生物質(zhì)懸浮液并將其用于以下實(shí)施例中的熱收獲測(cè)試。批號(hào)2：在中試發(fā)酵罐中在通風(fēng)下使串珠狀紅冬孢酵母菌株CBS8761(或其他由公認(rèn)的微生物菌種保藏中心容易獲得的串珠狀紅冬孢酵母菌株)生長(zhǎng)。使用木質(zhì)纖維素水解產(chǎn)物糖漿作為碳源，作為批次進(jìn)料發(fā)酵進(jìn)行發(fā)酵。在154h培養(yǎng)期間定期將木質(zhì)纖維素水解產(chǎn)物糖漿添加到發(fā)酵罐中。用酵母提取物(8.3g/l)、(NH4)2SO4(1.3g/l)、(NH4)2HPO4(2.0g/l)、MgCl2(1.7g/l)、KH2PO4(1.8g/l)以及微量礦物ZnSO4(0,0005g/l)、CuCl2(0,0003g/l)和MnCl2(0,05g/l)、Na2MoO4(0.0003g/l)補(bǔ)充生長(zhǎng)介質(zhì)。在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，生物質(zhì)中的含油量是細(xì)胞的干重的47.7％。巴氏殺菌得到的生物質(zhì)懸浮液并將其用于以下實(shí)施例中的熱收獲測(cè)試。實(shí)施例3在純糖上培養(yǎng)隱球酵母生物質(zhì)用于熱收獲實(shí)驗(yàn)將三個(gè)隱球酵母生物質(zhì)批次用于熱收獲測(cè)試批號(hào)1：在中試發(fā)酵罐中在通風(fēng)下使彎曲隱球酵母(Cryptococcuscurvatus)菌株CBS5324(或其他由公認(rèn)的微生物菌種保藏中心容易獲得的彎曲隱球酵母菌株)生長(zhǎng)。使用葡萄糖作為碳源作為批次進(jìn)料發(fā)酵進(jìn)行發(fā)酵。在119h培養(yǎng)期間定期將葡萄糖漿添加到發(fā)酵罐中。用酵母提取物(10g/l)、麥芽提取物(3g/l)、(NH4)2SO4(1,5g/l)、(NH4)2HPO4(1,5g/l)、MgCl2(1,8g/l)、KH2PO4(3g/l)、K2HPO4(1g/l)和CaCl2(0,4g/l)以及微量礦物ZnSO4(0,0003g/l)、CuCl(0,0002g/l)和MnCl2(0,03g/l)補(bǔ)充生長(zhǎng)介質(zhì)。在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，生物質(zhì)中的含油量是細(xì)胞的干重的38,5％。巴氏殺菌得到的生物質(zhì)懸浮液并將其用于以下實(shí)施例中的熱收獲測(cè)試。批號(hào)2：在中試發(fā)酵罐中在通風(fēng)下使彎曲隱球酵母菌株CBS5324TKK突變體40(或其他由公認(rèn)的微生物菌種保藏中心容易獲得的彎曲隱球酵母菌株)生長(zhǎng)。使用葡萄糖作為碳源作為批次進(jìn)料發(fā)酵進(jìn)行發(fā)酵。在114h培養(yǎng)期間定期將葡萄糖漿添加到發(fā)酵罐中。用酵母提取物(6g/l)、(NH4)2SO4(1,8g/l)、(NH4)2HPO4(1,8g/l)、MgCl2(1,8g/l)、KH2PO4(3g/l)和CaCl2(0,3g/l)以及微量礦物ZnSO4(0,0003g/l)、CuCl(0,0002g/l)和MnCl2(0,03g/l)補(bǔ)充生長(zhǎng)介質(zhì)。在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，生物質(zhì)中的含油量是細(xì)胞的干重的47,9％。巴氏殺菌得到的生物質(zhì)懸浮液并將其用于以下實(shí)施例中的熱收獲測(cè)試。批號(hào)3：在中試發(fā)酵罐中在通風(fēng)下使彎曲隱球酵母菌株CBS5324TKK突變體40(或其他由公認(rèn)的微生物菌種保藏中心容易獲得的彎曲隱球酵母菌株)生長(zhǎng)。使用葡萄糖作為碳源作為批次進(jìn)料發(fā)酵進(jìn)行發(fā)酵。在90h培養(yǎng)期間定期將葡萄糖漿添加到發(fā)酵罐中。用酵母提取物(6g/l)、(NH4)2SO4(1,8g/l)、(NH4)2HPO4(1,8g/l)、MgCl2(1,8g/l)、KH2PO4(3g/l)和CaCl2(0,3g/l)以及微量礦物ZnSO4(0,0003g/l)、CuCl(0,0002g/l)和MnCl2(0,03g/l)補(bǔ)充生長(zhǎng)介質(zhì)。在培養(yǎng)結(jié)束時(shí)，生物質(zhì)中的含油量是細(xì)胞的干重的40.3％。巴氏殺菌得到的生物質(zhì)懸浮液并將其用于以下實(shí)施例中的熱收獲測(cè)試。實(shí)施例4水熱處理對(duì)酵母生物質(zhì)的過(guò)濾性的影響使用用于模擬從木質(zhì)纖維素生物質(zhì)提取糖類的強(qiáng)度系數(shù)表示熱處理?xiàng)l件(溫度和處理時(shí)間作為變量)。使用式(1)(PedersenandMeyer,2010)計(jì)算強(qiáng)度系數(shù)logR0。在1升壓力反應(yīng)器(ParrInstruments)中在不同的強(qiáng)度下處理含水酵母懸浮液。在攪拌(500rpm)下加熱反應(yīng)器并在某些強(qiáng)度LogR0值下取出樣品。用2um過(guò)濾器測(cè)試取出的樣品的過(guò)濾性(filterability)。HTT對(duì)酵母生物質(zhì)懸浮液的過(guò)濾性的影響示于表1-3中。表1.實(shí)施例1的紅冬孢酵母生物質(zhì)的過(guò)濾性固體DW5.93wt％，pH5.75表2.實(shí)施例2的批次1的紅冬孢酵母生物質(zhì)的過(guò)濾性固體DW3.8wt％，pH5，9表3.實(shí)施例3的批次1的隱球酵母生物質(zhì)的過(guò)濾性固體DW7.09wt％，pH5.5基于實(shí)施例4的結(jié)果，制造包含可過(guò)濾的酵母生物質(zhì)的含水懸浮液的水熱處理(HTT)的所需要的強(qiáng)度系數(shù)取決于酵母種屬以及一定程度上取決于含水懸浮液的pH值。通常，需要HTT的LogR0>3.9的強(qiáng)度系數(shù)來(lái)制造包含可過(guò)濾的酵母生物質(zhì)的含水懸浮液。實(shí)施例5水熱處理對(duì)微生物油的提取產(chǎn)率的影響。使實(shí)施例1的紅冬孢酵母懸浮液經(jīng)受不同的水熱處理以研究HTT強(qiáng)度對(duì)脂質(zhì)的提取產(chǎn)率的影響。首先，用Sorvall離心機(jī)在10000rpm/20min下離心巴氏殺菌的(80℃，15min)生物質(zhì)懸浮液以得到具有25％的固體干物質(zhì)含量的懸浮液。將得到的固體材料干燥至98％固體干物質(zhì)含量，因此生成在不使用水熱處理的情況下收獲的酵母生物質(zhì)。這個(gè)實(shí)施例中的該生物質(zhì)在表4中稱為“無(wú)HTT”。另外，使用不同的強(qiáng)度系數(shù)水熱處理實(shí)施例1的酵母懸浮液。通過(guò)在密閉的壓力反應(yīng)器(1升Parr反應(yīng)器，攪拌500rpm)中處理酵母生物質(zhì)懸浮液針對(duì)確定的溫度和時(shí)間進(jìn)行該水熱處理，冷卻至室溫。用布氏過(guò)濾器(Buchnerfiter)(2um過(guò)濾器)由處理的酵母生物質(zhì)懸浮液過(guò)濾生物質(zhì)固體，并將分離的固體干燥至95％的固體干物質(zhì)含量。在Retch實(shí)驗(yàn)室研磨機(jī)中將來(lái)自各個(gè)水熱處理的生物質(zhì)固體研磨成粉末。在50℃下用庚烷提取研磨的固體(固體/庚烷比1:5w/w)1小時(shí)，離心以分離固體和溶劑-油相。另外用新鮮的庚烷洗滌固體，離心并將分離的溶劑-油相與來(lái)自提取步驟的溶劑-油相結(jié)合。蒸發(fā)溶劑以得到粗微生物油部分。表4中呈現(xiàn)了來(lái)自原始干燥的酵母生物質(zhì)(稱為“無(wú)HTT”)和水熱處理的生物質(zhì)的提取產(chǎn)率。從表4可以看出，由于無(wú)效的細(xì)胞破壞，來(lái)自原始干燥生物質(zhì)的油產(chǎn)率低。在140℃/15min下處理生物質(zhì)對(duì)于破壞細(xì)胞也是不夠的且油產(chǎn)率同樣不良。在足夠強(qiáng)的條件(logR0>3.6)下HTT之后，可以提取生物質(zhì)中的所有油。當(dāng)反應(yīng)溫度是140℃時(shí)，壓力是約5巴。當(dāng)溫度是160℃時(shí)，壓力是6.2巴至6.8巴。當(dāng)溫度是180℃時(shí)，壓力是10.3巴至11.0巴。當(dāng)溫度是210℃時(shí)，壓力是19.6巴。表4.不同的水熱處理、用庚烷提取油之后來(lái)自在純糖上生長(zhǎng)的串珠狀紅冬孢酵母的油產(chǎn)率水熱處理強(qiáng)度，LogR0油產(chǎn)率(原始生物質(zhì)中的油％)無(wú)HTT025％140℃/15min2,626％160℃/3h4,0101％180℃/30min4,0100％180℃/1h4,298％210℃/0min4,5103％*原始生物質(zhì)中的油＝通過(guò)GC分析的總脂肪酸。實(shí)施例6水熱處理對(duì)從酵母生物質(zhì)中提取的油的質(zhì)量的影響由三組粗微生物油分析雜質(zhì)。在第一比較實(shí)施例中，通過(guò)ICP分析從如之前的實(shí)施例5所描述的紅冬孢酵母生物質(zhì)中提取的粗微生物油的雜質(zhì)(金屬、磷)。在第二比較實(shí)施例中，針對(duì)相同的雜質(zhì)分析來(lái)自如實(shí)施例3所描述的在純糖上生長(zhǎng)并與實(shí)施例5中的紅冬孢酵母生物質(zhì)類似地水熱處理的隱球酵母生物質(zhì)批次1和2的粗微生物油。在第三比較實(shí)施例中，針對(duì)雜質(zhì)分析來(lái)自如實(shí)施例2所描述的在木質(zhì)纖維素糖上生長(zhǎng)并與實(shí)施例5中的紅冬孢酵母生物質(zhì)類似地水熱處理的紅冬孢酵母生物質(zhì)批次1和2的粗微生物油。從水熱處理的生物質(zhì)中提取的油具有與來(lái)自非水熱處理的生物質(zhì)的油一樣良好的質(zhì)量。在一些雜質(zhì)(P、Ca、Mg和N)方面，從表5、6和7中呈現(xiàn)的分析結(jié)果可以看出，水熱處理的油甚至比沒(méi)有經(jīng)受水熱處理的微生物油更純。對(duì)于酵母隱球酵母和紅冬孢酵母兩者，熱收獲看起來(lái)在生產(chǎn)具有可忽略量的金屬和磷的油中是非常有效的，因此在將微生物油催化轉(zhuǎn)化為燃料或化學(xué)品之前需要最少的預(yù)處理。通過(guò)改變水熱處理?xiàng)l件，尤其是溫度，可以改變油質(zhì)量。通過(guò)降低溫度，更少的氮化合物引入到油中，盡管廢水中的氮的含量與在較高溫度下進(jìn)行的熱處理一樣高。表5.由水熱處理的和非水熱處理的實(shí)施例5的糖生長(zhǎng)的串珠狀紅冬孢酵母生物質(zhì)提取的微生物油之間的比較表6.由水熱處理的和非水熱處理的實(shí)施例3的糖生長(zhǎng)的彎曲隱球酵母生物質(zhì)提取的微生物油之間的比較表7.由水熱處理的和非水熱處理的實(shí)施例2的木質(zhì)纖維素生長(zhǎng)的串珠狀紅冬孢酵母生物質(zhì)提取的微生物油之間的比較實(shí)施例7水熱處理對(duì)于從酵母在木質(zhì)纖維素水解產(chǎn)物上生長(zhǎng)的水相中除去溶解的木質(zhì)纖維素材料的影響在不同的強(qiáng)度下在實(shí)驗(yàn)室規(guī)模中水熱處理實(shí)施例2的串珠狀紅冬孢酵母懸浮液批次1。該加工之后，通過(guò)過(guò)濾除去固體，因此生成上清液體流股。作為第一比較情況，在沒(méi)有水熱處理的情況下通過(guò)離心以及在沒(méi)有巴氏殺菌懸浮液(表8中的“無(wú)HTT”)的情況下從酵母懸浮液中回收液體上清液。作為第二比較情況，首先巴氏殺菌酵母懸浮液并在沒(méi)有水熱處理的情況下通過(guò)離心(表8中的“巴氏殺菌105C/5min”)從酵母懸浮液中回收液體上清液。表8示出了上清液的特征是怎樣被不同的加工條件改變的。在180℃/1h下水熱處理酵母懸浮液中，液體上清液的上清液化學(xué)需氧量(COD)降低了21％，以及在250℃/1h下的水熱處理中降低了47％。水熱處理的強(qiáng)度越高，在處理期間存在于培養(yǎng)介質(zhì)中的越多溶解的材料固化，并可以通過(guò)過(guò)濾通過(guò)酵母生物質(zhì)回收。相反，僅巴氏殺菌從生物質(zhì)中釋放材料到液體，因此生成如表8所示的在名稱為“初始的DW-％”行中的更多溶解的材料。不是所有的溶解的材料轉(zhuǎn)化為作為溶解的材料的一部分的可分離的固體生物質(zhì)部分，且生物質(zhì)還在熱處理期間氣化。氣體的量是初始干物質(zhì)的2-5％，且氣體大部分由一氧化碳、二氧化碳、氧和各種烴組成。表8.在不同的條件下水熱處理之后針對(duì)分離的上清液體的分析結(jié)果實(shí)施例8洗滌水熱處理的微生物生物質(zhì)對(duì)提取的油的質(zhì)量的影響如表9所示，該實(shí)施例示出了在油提取之前水洗水熱處理的酵母生物質(zhì)降低油中的氮和金屬的量。這非常有利地和顯著地減少對(duì)于純化的需要且甚至可以消除在將粗微生物油轉(zhuǎn)化為燃料或化學(xué)品之前對(duì)預(yù)處理步驟的需要。表9.在具有或不具有水洗的情況下由水熱處理的生物質(zhì)提取的酵母油之間的比較實(shí)施例10干燥和油提取溫度對(duì)提取的油的質(zhì)量的影響發(fā)現(xiàn)可以通過(guò)在油提取步驟之前優(yōu)化生物質(zhì)的干燥(表10)和通過(guò)優(yōu)化油提取溫度(表11)可以調(diào)節(jié)提取的微生物油中的雜質(zhì)的量，尤其是氮的量。結(jié)果示出較低的干燥和提取溫度對(duì)于提取油的質(zhì)量是有益的。表10.在使用不同的干燥條件之后使用正己烷從水熱處理的酵母生物質(zhì)中提取的微生物油之間的比較表11.使用正庚烷作為溶劑在不同的提取溫度下從水熱處理的酵母生物質(zhì)中提取的微生物油之間的比較該實(shí)施例的結(jié)果示出了通過(guò)在低于85℃的溫度下干燥水熱處理的生物質(zhì)，可以顯著降低提取的微生物油中的氮的量。還示出通過(guò)在室溫下進(jìn)行油提取，與在較高溫度下的提取相比，提取的微生物油中的氮的量進(jìn)一步降低。實(shí)施例11pH調(diào)節(jié)對(duì)水熱收獲和提取的油的質(zhì)量的影響在水熱收獲期間，看出懸浮液的pH自然降低，如從表12可以看出的。還可以在水熱收獲之前調(diào)節(jié)懸浮液的pH，這增加在加熱期間變得可溶于懸浮液的生物質(zhì)的量。通過(guò)一些測(cè)試的酵母生物質(zhì)，在HTT之前使生物質(zhì)更酸性使得酵母細(xì)胞在較短的處理時(shí)間和較低的溫度下浮起(float)。盡管，該較早和較容易的浮起沒(méi)有改變使這些酵母可過(guò)濾所需的強(qiáng)度，且因此pH調(diào)節(jié)僅在認(rèn)為必需通過(guò)離心分離酵母細(xì)胞時(shí)產(chǎn)生優(yōu)勢(shì)。應(yīng)注意在這種情況下，強(qiáng)度系數(shù)不夠高以能夠有效地破壞細(xì)胞，并因此油產(chǎn)率保持較低。pH的調(diào)節(jié)也可以對(duì)最終的油的質(zhì)量具有影響。在表13中，對(duì)于兩種生物質(zhì)懸浮液的水熱處理的強(qiáng)度系數(shù)相同，但是在水熱處理之前將其他生物質(zhì)懸浮液的pH調(diào)節(jié)為酸性。從后面的生物質(zhì)中提取的油的氮含量稍微地較高。表12.在HTT之前生物質(zhì)懸浮液(培養(yǎng)在糖上的串珠狀紅冬孢酵母)的pH調(diào)節(jié)對(duì)生物質(zhì)至液相的溶解速率的影響表13.在HTT之前生物質(zhì)懸浮液(在糖上培養(yǎng)的彎曲隱球酵母，批次2)的pH調(diào)節(jié)對(duì)油質(zhì)量的影響。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3 當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3