本發(fā)明涉及新的替諾福韋鹽。
背景技術：
：替諾福韋富馬酸鹽(TDF，tenofovirdisoproxilfumarate，或稱為富馬酸替諾福韋酯)是化學名為9-[2-(R)-[[雙[[(異丙氧羰基)氧基]甲氧基]磷酰基]甲氧基]丙基]腺嘌呤富馬酸鹽(1:1)的化合物，是在吸收時待水解的前藥，并且是可用于治療HIV-1感染和慢性乙型肝炎的膦?；籽趸塑账犷愃莆铩DF被批準作為用于治療AIDS的治療劑，然后被美國食品和藥物管理局批準作為用于治療乙型肝炎的治療劑。替諾福韋是TDF的活性代謝物，在對拉夫米定(Zeffix)有耐受性的患者中具有高的抑制乙型肝炎病毒DNA的能力，并且是屬于如由美國食品和藥物管理局(FDA)分類的妊娠B類(這是在動物研究中被發(fā)現(xiàn)沒有胎兒風險的藥物)的抗病毒劑，用于評估由藥物造成的胎兒損傷的風險。然而，已知確保替諾福韋的物理化學穩(wěn)定性是困難的。如在已公開的文獻(PharmaceuticalResearch,2001,18,234-237；PharmaceuticalResearch,2000,17,1098-1103)中所報導的，替諾福韋在水的存在下水解得到甲醛，然后經(jīng)過與替諾福韋的N6-胺基進行縮合反應，從而產(chǎn)生作為雜質的替諾福韋二聚體。通常，為了預期藥物的一致效應，不僅在藥物制造后必須防止活性成分的量的分解，而且在其儲存期間要防止活性成分的量的分解，并且此外，雜質或在相同時期內作為活性成分降解產(chǎn)物的相關物質的量的增加必須被抑制。因此，防止雜質摻入藥物被認為在藥物的質量控制方面非常重要。對于各國關于純度測試的官方匯編規(guī)定，韓國藥典在純度試驗部分對相關物質有單獨的規(guī)定以及美國藥典對“普通雜質”有規(guī)定，其中將相關物質的總量設定為2.0％以下，或者其中在藥品的各文章中根據(jù)各藥物的相關化合物和色譜純度調節(jié)相關物質的量。此外，歐洲和英國藥典規(guī)定了相關物質，并且日本藥典在純度測試中規(guī)定了相關物質及其含量。因此，本發(fā)明人已經(jīng)研究了新的鹽，其即使在長期儲存時能夠使相關物質的產(chǎn)生最小化并使溶解度最大化，同時表現(xiàn)出等于或優(yōu)于常規(guī)替諾福韋富馬酸鹽的物理化學性質，引領了使用乙二磺酸鹽的新的替諾福韋乙二磺酸鹽的開發(fā)。公開技術問題因此，本發(fā)明旨在提供一種新的替諾福韋鹽化合物，其具有與替諾福韋富馬酸鹽相同或更好的物理化學性質，可以即使在長期儲存時也能使相關物質的產(chǎn)生最小化，并且可以使溶解度最大化。技術方案本發(fā)明提供了由以下化學式1表示的替諾福韋乙二磺酸鹽。<化學式1>9-[(R)-2-[[雙[[(異丙氧羰基)氧基]甲氧基]磷?；鵠甲氧基]丙基]腺嘌呤半乙二磺酸鹽在本發(fā)明的一個實施方案中，所述化學式1的化合物可以是半乙二磺酸鹽，其中替諾福韋和乙二磺酸鹽以1:0.5的摩爾比結合。在本發(fā)明的另一個實施方案中，所述化學式1的化合物可具有以下1H核磁共振(NMR)峰：1HNMR(500MHz,DMSO)8.44(s,1H),8.33(s,1H),5.54-5.45(m,4H),4.82-4.77(m,2H),4.38-4.35(dd,1H),4.25-4.4.21(dd,1H),4.01-3.90(m,3H),2.67(s,2H),1.23-1.22(d,12H),和1.09-1.08(d,3H)ppm。在本發(fā)明的又一個實施方案中，所述化學式1的化合物可具有以下X射線粉末衍射峰值：4.14°、10.40°、11.67°、12.64°、12.90°、13.24°、15.64°、16.30°、16.86°、18.69°、18.74°、19.19°、19.82°、20.74°、21.36°、21.89°、22.46°、23.19°、23.72°、24.88°、25.56°、26.21°和27.04°。另外，本發(fā)明提供了一種替諾福韋乙二磺酸鹽的結晶形式，其具有如圖5所示的X-射線粉末衍射峰值：3.32°、4.18°、5.13°、7.31°、8.59°、10.01°、10.42°、10.97°、11.56°、12.64°、12.95°、13.25°、14.67°、15.53°、16.39°、17.33°、18.15°、18.75°、19.28°、19.93°、20.44°、20.81°、21.37°、22.03°、22.49°、22.84°、23.28°、23.75°、24.66°、25.00°、25.65°、26.36°、27.1°、27.76°、28.16°、28.79°、30.31°、和31.17°。本發(fā)明提供了一種替諾福韋乙二磺酸鹽的結晶形式，其具有如圖6所示的X-射線粉末衍射峰值。本發(fā)明提供了一種用于預防或治療與病毒感染相關的疾病的藥物組合物，所述組合物包含治療有效量的替諾福韋乙二磺酸鹽。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述病毒可包括HIV、HBV、CMV、HSV-1、HSV-2、或人類皰疹病毒。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述藥物組合物可以片劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、滴丸劑、散劑、丸劑、酊劑或糊劑的劑型提供。本發(fā)明提供了一種預防或治療哺乳動物中的病毒感染的方法，包括向需要其的哺乳動物施用治療有效量的替諾福韋乙二磺酸鹽。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述病毒可包括HIV、HBV、CMV、HSV-1、HSV-2、或人類皰疹病毒。有益效果根據(jù)本發(fā)明，與替諾福韋富馬酸鹽相比，替諾福韋乙二磺酸鹽可以使相關物質隨時間的產(chǎn)生最小化，由此在含有本發(fā)明的鹽化合物的產(chǎn)品的儲存期間可顯著降低雜質的產(chǎn)生，從而提高藥物的穩(wěn)定性并避免了對毒性作用進行另外研究的需要。盡管pH、耐濕性和溶解性發(fā)生變化，本發(fā)明的鹽化合物的穩(wěn)定性可極大地改善，并且可以表現(xiàn)出優(yōu)異的物理化學性質，并且因此可以用作用于治療HIV-1感染和慢性乙型肝炎的藥物組合物的活性成分，與藥學上可接受的載體一起構成藥物組合物。此外，與其他替諾福韋鹽(例如乳清酸鹽、天冬氨酸鹽、馬尿酸鹽等)相比，本發(fā)明的鹽化合物甚至在pH變化時也具有非常高的溶解度。此外，即使當使用簡單的方法制備本發(fā)明的替諾福韋乙二磺酸鹽時，在酸加成鹽的合成期間可以獲得更純的替諾福韋。附圖說明圖1a示出了替諾福韋半乙二磺酸鹽的1HNMR光譜；圖1b示出了根據(jù)本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽和替諾福韋單乙二磺酸鹽的結構的比較；圖1c示出了替諾福韋半乙二磺酸鹽和替諾福韋單乙二磺酸鹽的穩(wěn)定性的評價結果的圖；圖2示出了依賴于pH變化的替諾福韋富馬酸鹽(TDF，對比例1)穩(wěn)定性的測定結果的圖；圖3示出了依賴于pH變化的替諾福韋半乙二磺酸鹽(TDE，實施例1)的穩(wěn)定性的測量結果的圖；圖4a示出了替諾福韋富馬酸鹽的X射線衍射分析結果；圖4b示出了替諾福韋單乙二磺酸鹽的X射線衍射分析結果；圖5示出了替諾福韋半乙二磺酸鹽A的X射線衍射分析結果；圖6示出了替諾福韋半乙二磺酸鹽B的X射線衍射分析結果；圖7a示出了替諾福韋富馬酸鹽的差示掃描量熱法(DSC)測量值；圖7b示出了替諾福韋單乙二磺酸鹽的DSC測量值；和圖8示出了替諾福韋半乙二磺酸鹽的DSC測量值。具體實施方式最佳方式下面將詳細描述本發(fā)明。本發(fā)明的一個方面涉及由以下化學式1表示的替諾福韋乙二磺酸鹽：<化學式1>9-[(R)-2-[[雙[[(異丙氧羰基)氧基]甲氧基]磷?；鵠甲氧基]丙基]腺嘌呤半乙二磺酸鹽。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述化學式1的化合物優(yōu)選為半乙二磺酸鹽，其中替諾福韋和乙二磺酸鹽以1:0.5的摩爾比結合。在本發(fā)明的另一個實施方案中，所述化學式1的化合物可以是具有以下1HNMR峰的替諾福韋乙二磺酸鹽：1HNMR(500MHz,DMSO)8.44(s,1H),8.33(s,1H),5.54-5.45(m,4H),4.82-4.77(m,2H),4.38-4.35(dd,1H),4.25-4.4.21(dd,1H),4.01-3.90(m,3H),2.67(s,2H),1.23-1.22(d,12H),和1.09-1.08(d,3H)ppm。在本發(fā)明的又一個實施方案中，所述化學式1的化合物可具有以下X射線粉末衍射峰值：4.14°、10.40°、11.67°、12.64°、12.90°、13.24°、15.64°、16.30°、16.86°、18.69°、18.74°、19.19°、19.82°、20.74°、21.36°、21.89°、22.46°、23.19°、23.72°、24.88°、25.56°、26.21°、和27.04°。另外，本發(fā)明提供了一種替諾福韋乙二磺酸鹽的結晶形式，其具有如圖5所示的X-射線粉末衍射峰值：3.32°、4.18°、5.13°、7.31°、8.59°、10.01°、10.42°、10.97°、11.56°、12.64°、12.95°、13.25°、14.67°、15.53°、16.39°、17.33°、18.15°、18.75°、19.28°、19.93°、20.44°、20.81°、21.37°、22.03°、22.49°、22.84°、23.28°、23.75°、24.66°、25.00°、25.65°、26.36°、27.1°、27.76°、28.16°、28.79°、30.31°、和31.17°。本發(fā)明也提供了一種替諾福韋乙二磺酸鹽的結晶形式，其具有如圖6所示的X-射線粉末衍射峰值。本發(fā)明的另一方面涉及用于預防或治療與病毒感染相關的疾病的藥物組合物，所述組合物包含治療有效量的替諾福韋乙二磺酸鹽。在本發(fā)明的一個實施方案中，所述病毒可包括HIV、HBV、CMV、HSV-1、HSV-2或人類皰疹病毒，本發(fā)明的藥物組合物可特別用于治療HIV-1感染和慢性乙型肝炎。除了治療有效量的替諾福韋乙二磺酸鹽外，本發(fā)明的藥物組合物還可包含藥學上可接受的賦形劑。根據(jù)需要，所述藥物組合物可以進一步包含另外的抗病毒劑和另外的治療成分或輔助成分，如免疫刺激劑、肝保護劑和L-肉毒堿及其鹽。藥學上可接受的賦形劑可以包括但不限于選自粘合劑、稀釋劑、崩解劑、防腐劑、分散劑、助流劑(脫模劑)和潤滑劑中的任何一種或多種。通常，本發(fā)明的藥物組合物可以口服、直腸內、陰道內、鼻內、局部(例如眼內、口內和舌下)或腸胃外(例如皮下、肌內、靜脈內、皮內、脊柱內或硬膜外)施用?？诜o藥是優(yōu)選的。本發(fā)明的藥物組合物可優(yōu)選以片劑、膠囊劑、粉劑、顆粒劑、滴丸劑、散劑、丸劑、酊劑或糊劑的劑型提供。片劑優(yōu)選以典型片、包衣片、分散片、泡騰片、緩釋片、控釋片或腸溶衣片的形式提供。膠囊劑優(yōu)選以典型膠囊、持續(xù)釋放膠囊、控釋膠囊或腸溶衣膠囊的形式提供。當本發(fā)明的藥物組合物是片劑或膠囊劑時，單位劑型中作為活性成分的替諾福韋乙二磺酸鹽的量可以根據(jù)多種因素而變化，如癥狀和年齡。通常，在口服給藥時，單劑量的活性成分的劑量范圍為5mg至300mg，并且優(yōu)選5mg至150mg。此外，片劑或膠囊還可包含填充劑(如淀粉、蔗糖、乳糖等)，粘合劑(如水、醇、聚乙烯吡咯烷酮、預膠化淀粉等)，崩解劑(如微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮等)，和潤滑劑(如硬脂酸鎂、滑石粉、二氧化硅等)。當本發(fā)明的藥物組合物是片劑或膠囊劑時，其優(yōu)選包含堿性藥物載體，包括堿式碳酸鹽和堿式氫氧化物。堿式碳酸鹽的優(yōu)選實例是碳酸鈣、碳酸鎂、碳酸鋅、碳酸亞鐵或碳酸鋁。堿式氫氧化物的優(yōu)選實例是氫氧化鎂、氫氧化鈣、氫氧化鋁或氫氧化亞鐵。當本發(fā)明的藥物組合物是分散片時，崩解劑選擇性地以約0.5至60％的量存在，以實現(xiàn)快速崩解。本發(fā)明的藥物組合物的劑型可以是用于注射的無菌粉末或注射溶液。劑型可以通過注射施用。本發(fā)明的另一方面涉及預防或治療哺乳動物中的病毒感染的方法，包括向需要其的哺乳動物施用治療有效量的替諾福韋乙二磺酸鹽。本發(fā)明的又一方面涉及替諾福韋乙二磺酸鹽在制備用于預防或治療與病毒感染相關的疾病的藥物中的用途。在本發(fā)明中，病毒包括HIV、HBV、CMV、HSV-1、HSV-2和人類皰疹病毒，并且優(yōu)選包括HIV或HBV。本發(fā)明的替諾福韋乙二磺酸鹽特別適用于治療HIV-1感染和慢性乙型肝炎。根據(jù)本發(fā)明，替諾福韋乙二磺酸鹽、結晶形式、結晶組合物和藥物組合物優(yōu)選適用于溫血動物，并且更優(yōu)選人類。此外，本發(fā)明涉及一種制備替諾福韋乙二磺酸鹽的方法，包括使替諾福韋與乙二磺酸鹽二水合物反應。替諾福韋和乙二磺酸鹽二水合物優(yōu)選以1:0.5-1.5的摩爾比反應。更優(yōu)選地，制備替諾福韋乙二磺酸鹽的方法包括使替諾福韋與乙二磺酸鹽二水合物以1:0.5-0.6的摩爾比反應。發(fā)明方式通過以下實施例可以獲得對本發(fā)明的更好理解，所述實施例用于說明，但不應解釋為限制本發(fā)明的范圍，并且可以由本領域技術人員在本發(fā)明的范圍內適當?shù)匦薷暮透淖儭?lt;實施例1>替諾福韋半乙二磺酸鹽的制備將200mL無水乙醇、10.0g替諾福韋和1.98g1,1-乙二砜二水合物(1,1-ethanedisulfonedihydrate)置于500mL反應器中，在20至30℃下攪拌1小時，冷卻至0至5℃，攪拌0.5小時，過濾，用20mL無水乙醇洗滌，并在40℃下減壓干燥4小時，從而得到11.2g白色替諾福韋半乙二磺酸鹽(純度為99.68％)。1HNMR(500MHz,DMSO)8.44(s,1H),8.33(s,1H),5.54-5.45(m,4H),4.82-4.77(m,2H),4.38-4.35(dd,1H),4.25-4.4.21(dd,1H),4.01-3.90(m,3H),2.67(s,2H),1.23-1.22(d,12H),1.09-1.08(d,3H)ppm。圖1a示出了替諾福韋半乙二磺酸鹽的1HNMR光譜。<對比例1>替諾福韋富馬酸鹽的制備替諾福韋富馬酸鹽是從中國購買的制備好的API。<對比例2>替諾福韋單乙二磺酸鹽的制備按照如下制備替諾福韋單乙二磺酸鹽。在100mL反應器中，放入30mL的去離子水、3.0g的替諾福韋和1.2g(1.1當量)的1,1-乙二砜二水合物，在20至30℃下攪拌1小時。反應終止后，濃縮反應產(chǎn)物以除去去離子水，加入30mL甲苯，再次濃縮，從而除去剩余的去離子水。將濃縮的殘留物在室溫下溶解在6mL甲醇中，與6mL異丙醚一起攪拌30分鐘，結晶，過濾并在40℃下減壓干燥4小時，從而得到3.4g白色替諾福韋單乙二磺酸鹽(純度97.51％)。圖1b顯示了根據(jù)本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽和替諾福韋單乙二磺酸鹽的結構。<試驗例1>依賴于相關物質的產(chǎn)生的穩(wěn)定性(壓力條件)的評價(1)與替諾福韋富馬酸鹽的比較為了評價穩(wěn)定性(壓力條件)，根據(jù)ICH指南，使用本發(fā)明的替諾福韋乙二磺酸鹽(實施例1：TDE)和作為對照組的替諾福韋富馬酸鹽(對比例1：TDF)，并如美國藥典(USP)中所述使用高效液相色譜(HPLC)進行分析。結果示于下表1中(壓力條件：60±2℃)。[表1]從表1可以看出，與替諾福韋富馬酸鹽(disoproxilfumarate)相比，本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽在壓力條件下非常穩(wěn)定。特別地，由替諾福韋富馬酸鹽產(chǎn)生的相關物質極少在本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽中產(chǎn)生，從中可以推斷本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽保持高純度。在初始階段出現(xiàn)的相關物質中，僅替諾福韋單酯的量增加，而其它相關物質很少增加。此外，替諾福韋半乙二磺酸鹽含有主要降解產(chǎn)物，即替諾福韋單酯，含量為0.37％，因此顯著提高了穩(wěn)定性。(2)替諾福韋單乙二磺酸鹽以與上述(1)相同的方式，評價作為測試組的本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽(實施例1：TDE(半鹽))，和作為對照組的替諾福韋單乙二磺酸鹽(對比例2：TDE(單鹽))的穩(wěn)定性3周。結果如圖1c所示。如圖1c所示，與替諾福韋單乙二磺酸鹽相比，本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽在壓力條件下非常穩(wěn)定。特別地，本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽隨時間的變化幾乎不產(chǎn)生相關物質，因此保持了其高純度，并且在第3周產(chǎn)生非常少量的0.37的相關物質，從而表現(xiàn)出比替諾福韋單乙二磺酸鹽高至少15倍的穩(wěn)定性，其中在相同時期觀察到5.62的相關物質。因此，可以確認本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽是能夠使相關物質的產(chǎn)生最小化從而能夠在有利于相關物質的量增加相關的條件下進行儲存的一種藥物，并且還使得能夠長期儲存。<試驗例2>溶解性的評價溶解度在制造藥物方面被認為是重要的。在具有高功效的藥物具有低溶解度的情況下，產(chǎn)品的研發(fā)可能變得困難。如果藥物具有低溶解度，其可能沉淀并且因此口服吸收可能顯著降低。評價本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽(實施例1)和作為對照組的替諾福韋富馬酸鹽(對比例1)的飽和溶解度。結果示于下表2中。[表2]替諾福韋DW(去離子水)pH1.2pH4.0pH6.8富馬酸鹽(mg/mL)13.539.213.29.4半乙二磺酸鹽(mg/mL)2200268022802400<試驗例3>依賴于pH變化的穩(wěn)定性的評價當藥物口服施用時，其通過胃、十二指腸、小腸等在體內吸收。因此，依賴于pH變化的穩(wěn)定性對藥物的釋放速率具有很大影響。在本發(fā)明中，使用去離子水和三種不同的pH緩沖溶液(pH1.2、4.0和6.8)測量穩(wěn)定性用于釋放測試。以如下方式進行試驗方法，將本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽和作為對照組的替諾福韋富馬酸鹽各5mg精確稱量，完全溶解在1mL乙腈和水(1:19)的混合物中，然后分別加入9mL的上述pH緩沖溶液。將如此制備的各個樣品置于30℃的小室中，并使用HPLC對其隨時間的量的變化進行定量。圖2和圖3示出了依賴于pH變化的替諾福韋半乙二磺酸鹽(實施例1：TDE)和替諾福韋富馬酸鹽(對比例1：TDF)的穩(wěn)定性的結果。如圖2和3所示，本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽顯示出與常規(guī)替諾福韋富馬酸鹽產(chǎn)物相同的穩(wěn)定性。<試驗例4>PXRD(粉末X射線衍射，X射線衍射分析)對于X射線粉末衍射，當材料的晶體結構和化合物形式不同時，衍射圖案變化。將其結果與標準材料的結果進行比較，從而確認材料的晶體結構。使用RigakuMiniFlex600分析本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽和對照組，即替諾福韋富馬酸鹽和替諾福韋單乙二磺酸鹽。本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽A具有圖5所示的X射線粉末衍射峰值，具有在4.14°、10.40°、11.67°、12.64°、12.90°、13.24°、15.64°、16.30°、16.86°、18.69°、18.74°、19.19°、19.82°、20.74°、21.36°、21.89°、22.46°、23.19°、23.72°、24.88°、25.56°、26.21°、和27.04°的那些。本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽B具有圖6所示的X射線粉末衍射峰值，具有在3.32°、4.18°、5.13°、7.31°、8.59°、10.01°、10.42°、10.97°、11.56°、12.64°、12.95°、13.25°、14.67°、15.53°、16.39°、17.33°、18.15°、18.75°、19.28°、19.93°、20.44°、20.81°、21.37°、22.03°、22.49°、22.84°、23.28°、23.75°、24.66°、25.00°、25.65°、26.36°、27.1°、27.76°、28.16°、28.79°、30.31°、和31.17°的那些。發(fā)現(xiàn)其具有不同于替諾福韋富馬酸鹽(US5935946)和替諾福韋單乙二磺酸鹽的結晶形式。圖4a示出了替諾福韋富馬酸鹽的X射線衍射分析結果。圖4b示出了替諾福韋單乙二磺酸鹽的X射線衍射分析結果。圖5示出了替諾福韋半乙二磺酸鹽A的X射線衍射分析結果。圖6示出了替諾福韋半乙二磺酸鹽B的X射線衍射分析結果。<試驗例5>DSC(差示掃描量熱法)DSC廣泛用于測量熱流相對于溫度的變化，與材料的熱傳遞相關。使用SCINCODSCN650，在氮氣條件下以20℃/min的加熱速率測量本發(fā)明的替諾福韋半乙二磺酸鹽和對照組，即替諾福韋富馬酸鹽和替諾福韋單乙二磺酸鹽。圖7a示出了替諾福韋富馬酸鹽的DSC測量值，圖7b示出了替諾福韋單乙二磺酸鹽的DSC測量值，并且圖8示出了替諾福韋半乙二磺酸鹽的DSC測量值。工業(yè)實用性根據(jù)本發(fā)明，與替諾福韋富馬酸鹽相比，替諾福韋乙二磺酸鹽可以使相關物質隨時間的產(chǎn)生最小化，由此在含有本發(fā)明鹽化合物的產(chǎn)品儲存期間雜質的產(chǎn)生可以顯著降低，因此提高了藥物的穩(wěn)定性并且避免了對毒性作用進行另外的研究的需要。當前第1頁1 2 3