本發(fā)明涉及用于治療或預(yù)防疼痛病癥、癌癥和自身免疫性疾病的flt3受體拮抗劑。
背景技術(shù)：
諸如暖和、寒冷、輕輕觸摸和疼痛的軀體感覺各自通過感覺神經(jīng)元的激活引發(fā)。特定類型的感覺神經(jīng)元(其細(xì)胞體位于背根和三叉神經(jīng)節(jié))有助于不同的感覺形態(tài)。稱為傷害感受器的專門感覺神經(jīng)元負(fù)責(zé)皮膚的疼痛熱和機(jī)械刺激的轉(zhuǎn)導(dǎo)。關(guān)于疼痛的熱和機(jī)械刺激的正常轉(zhuǎn)導(dǎo)所必需的分子和離子通道的知識仍然是不完全的。已經(jīng)假定trp家族的熱敏離子通道對于感受傷害的感覺神經(jīng)元對有害的熱或冷的轉(zhuǎn)導(dǎo)是重要的(jordt等人，2003)。對于可由有害范圍內(nèi)的熱刺激激活的辣椒素激活的離子通道trpv1，存在最完整的證據(jù)。缺乏trpv1的小鼠具有改變的疼痛行為并且對有害的刺激性辣椒素沒有反應(yīng)。疼痛的一個(gè)重要特征是損傷和炎癥導(dǎo)致對通常只是輕微疼痛的刺激高度敏感的事實(shí)。該現(xiàn)象被稱為痛覺過敏，并且痛覺過敏的預(yù)防是有效鎮(zhèn)痛的標(biāo)志。trpv1可能成為重要的鎮(zhèn)痛靶點(diǎn)，因?yàn)樵撏ǖ朗潜磉_(dá)由炎癥誘發(fā)的熱痛覺過敏所需要的(caterina等人，2000；davis等人，2000)。
此外，諸如神經(jīng)生長因子(ngf)的在發(fā)炎組織中上調(diào)的分子可使外周傷害感受器對熱刺激敏感。通過它的受體酪氨酸激酶trka的ngf信號傳導(dǎo)構(gòu)成炎性痛覺過敏的生理介體。多年來已知，需要ngf的背根神經(jīng)節(jié)(drg)神經(jīng)元都是傷害感受器。ngf可在人類和動(dòng)物中產(chǎn)生深刻和持久的熱和機(jī)械痛覺過敏。ngf還可在離體的drg神經(jīng)元中增強(qiáng)trpv1介導(dǎo)的和有害的熱激活離子電流。事實(shí)上，注射到動(dòng)物中的ngf產(chǎn)生需要存在trpv1的熱痛覺過敏(chuang等人，2001)。
成年人drg中大約一半的傷害感受器具有trka受體；由c-ret的表達(dá)所定義的剩余部分在出生后早期發(fā)育期間下調(diào)trka。受體酪氨酸激酶c-ret介導(dǎo)由神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(gdnf)配體家族誘發(fā)的信號。c-ret受體和它的輔助受體gfrα2和3存在于感受傷害的神經(jīng)元中，其中的一些是熱敏的并表達(dá)trpv1受體。事實(shí)上，有一些證據(jù)表明gdnf家族配體神經(jīng)生長因子(neurturin)和artemin在通過感覺神經(jīng)元調(diào)節(jié)有害熱轉(zhuǎn)導(dǎo)中的作用(malin等人，2006)。
除了trk和c-ret受體之外，已知感覺神經(jīng)元表達(dá)其他受體酪氨酸激酶如c-kit(用于干細(xì)胞因子(scf)的受體)。因此，歐洲專利申請?zhí)杄p2068152公開了scf和它的受體c-kit在調(diào)節(jié)感覺神經(jīng)元對自然刺激的反應(yīng)性中的核心作用，并且公開了現(xiàn)在可將c-kit分組于包括c-ret和trka的受體酪氨酸激酶的小家族，其控制感覺神經(jīng)元的轉(zhuǎn)導(dǎo)性質(zhì)。所述專利申請要求保護(hù)諸如小分子藥物伊馬替尼的c-kit受體拮抗劑在治療或預(yù)防選自疼痛、痛覺過敏和炎性疼痛的病癥中的用途。
wo2011/083124(valmier等人)首次提供證據(jù)證明fl通過它與flt3的特異性相互作用在體內(nèi)調(diào)節(jié)有害的熱和機(jī)械疼痛敏感性中起關(guān)鍵作用，并建議flt”受體拮抗劑用于疼痛的治療和預(yù)防。
flt3受體拮抗劑是已知的并在許多出版物和專利申請中進(jìn)行描述，例如，sternberg等人，2004和wo2002032861、wo2002092599、wo2003035009、wo2003024931、wo2003037347、wo2003057690、wo2003099771、wo2004005281、wo2004016597、wo2004018419、wo2004039782、wo2004043389、wo2004046120、wo2004058749、wo2004058749、wo2003024969、wo2006/138155、wo2007/048088和wo2009/095399。
flt3受體拮抗劑可存在于flt3激酶抑制劑中。flt3激酶抑制劑的實(shí)例包括ag1295和ag1296；來他替尼(還稱為cep-701，以前稱為kt-5555，kyowahakko，授權(quán)給cephalon)；cep-5214和cep-7055(cephalon)；chir-258(chironcorp.)；gtp14564(merckbiosciencesuk)。米哚妥林(還稱為pkc412novartisag)；mln-608(millenniumusa)；mln-518(以前稱為ct53518，cortherapeuticsinc.，授權(quán)給millenniumpharmaceuticalsinc.)；mln-608(millenniumpharmaceuticalsinc.)；su-11248(pfizerusa)；su-11657(pfizerusa)；su-5416和su-5614；thrx-165724(theravanceinc.)；ami-10706(theravanceinc.)；vx-528和vx-680(vertexpharmaceuticalsusa，授權(quán)給novartis(瑞士)，merck&cousa)；和xl999(exelixisusa)。
選擇性flt3受體拮抗劑的實(shí)例在zarrinkar等人，2009以及在國際專利申請?zhí)杦o2007/109120和wo2009/061446中進(jìn)行描述。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供了具有高效力的新型選擇性flt3受體拮抗劑。
該化合物具有通式(1)：
其中各個(gè)取代基如下面定義的。
本發(fā)明還涉及作為藥物的通式(1)的化合物。通式(1)的化合物可用于治療疼痛病癥，特別是慢性疼痛和神經(jīng)性疼痛。
通式i的化合物還用于癌癥的治療。
通式i的化合物還用于自身免疫性疾病的治療。
本發(fā)明還涉及包含根據(jù)本發(fā)明的新化合物的藥物組合物。
本發(fā)明還涉及一種用于治療疼痛病癥的方法，包括對有需要的受試者施用本文定義的化合物。
本發(fā)明還涉及一種用于治療癌癥的方法，包括對有需要的受試者施用本文定義的化合物。
本發(fā)明還涉及一種用于治療自身免疫性疾病的方法，包括對有需要的受試者施用本文定義的化合物。
具體實(shí)施方式
定義：
在整個(gè)說明書中，采用了幾個(gè)術(shù)語并且在以下段落中進(jìn)行定義。
術(shù)語“flt3”或“flt3受體”(fms相關(guān)的酪氨酸激酶3)，還稱為cd135、ly72、flk-2、flt-3或b230315g04，可互換使用并且具有它們在本領(lǐng)域中的一般含義。flt3受體可來自任何來源，但通常是哺乳動(dòng)物(例如，人和非人靈長類動(dòng)物)flt3受體，特別是人flt3受體。
術(shù)語“fl”或“flt3-配體”可互換使用并且具有它們在本領(lǐng)域中的一般含義。它們是指作為flt3受體的天然配體的細(xì)胞因子。fl可來自任何來源，但通常是哺乳動(dòng)物(例如，人和非人靈長類動(dòng)物)fl，特別是人fl。
術(shù)語“flt3受體拮抗劑”包括這樣的化合物，其在施用患者時(shí)導(dǎo)致與flt3受體在患者中被fl激活相關(guān)的生物活性的抑制或下調(diào)，包括以其他方式通過fl結(jié)合至flt3受體所致的任何下游生物效應(yīng)。
在本發(fā)明的上下文中，當(dāng)與諸如c-kit受體的其他酪氨酸激酶受體相比時(shí)，flt3受體拮抗劑對flt3受體具有選擇性。“選擇性”是指拮抗劑對flt3受體的親和力比對其他酪氨酸激酶受體(c-kit受體)的親和力高至少10倍，優(yōu)選地25倍，更優(yōu)選地100倍，仍更優(yōu)選地150倍。
如本文所用，術(shù)語“受試者”表示哺乳動(dòng)物，例如嚙齒動(dòng)物、貓科動(dòng)物、犬科動(dòng)物和靈長類動(dòng)物。優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的受試者是人。
在它最廣泛的含義中，術(shù)語“治療(treating)”或“治療(treating)”是指逆轉(zhuǎn)、減輕、抑制這種術(shù)語所適用的病癥或病況或者這種病癥或病況的一種或多種癥狀的進(jìn)展或預(yù)防它們。
特別地，疼痛的“預(yù)防”可以是指施用本發(fā)明的化合物預(yù)防疼痛的癥狀。
“藥學(xué)上”或“藥學(xué)上可接受的”是指當(dāng)適當(dāng)?shù)厥┯貌溉閯?dòng)物，尤其是人時(shí)不產(chǎn)生不利的、過敏的或其他不良反應(yīng)的分子實(shí)體和組合物。藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑是指無毒的固體、半固體或液體填充劑、稀釋劑、包封材料或任何類型的制劑助劑。
本發(fā)明涉及通式(1)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，
其中
x選自鍵、co、nh、conh、nhco和包含2或3個(gè)n原子的5-或6-元雜芳族基團(tuán)；
y表示so2或鍵；
r1、r2、r3、r4和r5相同或不同，并且選自h、oh、烷基、鹵素、氰基、三氟甲基、烷氧基、芳基、芳基烷基、?；?、coor11、o-(ch2)p–o-烷基、1h-四唑基；po4h2、脒基和n-羥基脒基；
條件是r1至r5中的至少一個(gè)不同于h；
或r1如上所定義，并且來自r2和r3或r3和r4或r4和r5中的兩個(gè)與它們所連接的碳原子一起形成包含5至6個(gè)成員的芳族環(huán)，且來自r2至r5中的其他表示h；
或r1或r5與來自x的n或c原子一起形成包含1或2個(gè)n原子和任選的一個(gè)o原子的芳族雜環(huán)或非芳族環(huán)；且來自r2至r4的其他如上所定義；
r6選自h、鹵素、羥基、烷基、羥基烷基和烷氧基，或
r1與r6一起形成o或nh鏈，并且
當(dāng)y是so2時(shí)，
r7選自h、烷基、環(huán)烷基、苯基、芐基和(ch2)q-r12，
r8選自h、烷基、環(huán)烷基/金剛烷基)、吡啶基和(ch2)r-r13；
或r7和r8與它們連接的n原子一起形成下式的基團(tuán)：
其中z是鍵或z選自chr14、ch2chr14、nr14、ch2nr14和o，
r10選自h、烷基、羥基、鹵素、三氟甲基、芳基；羥基烷基，或兩個(gè)相鄰的r10基團(tuán)與它們連接的環(huán)原子一起形成芳基；或
當(dāng)y是鍵時(shí)，r7是h、烷基、羥基烷基，或表示任選被一至三個(gè)選自烷基、芳基烷基和羥基烷基的基團(tuán)取代的單環(huán)或雙環(huán)任選橋連的環(huán)烷基環(huán)，且r8是so2r16，r12選自oh、cooh、co-烷基、苯基、嗎啉基、nh2、nh-烷基、n-(烷基)2nh(nh)nh2和ch2coo-烷基；
r13選自oh和苯基；
r14選自h、烷基、環(huán)烷基、芳基和芳基烷基，其中環(huán)烷基或芳基環(huán)可在環(huán)狀結(jié)構(gòu)中包含一個(gè)或兩個(gè)選自n和o的雜原子，并且可被一個(gè)或多個(gè)選自烷基、鹵素、氰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、硝基、三氟甲基、芳基、烷基-芳基、?；?、烷氧基或芳氧基的取代基取代；
r16表示選自烷基、羥基烷基、芳基、雜芳基和芳基烷基的基團(tuán)；
n是0、1、2或3；
p是0、1、2、3或4；
q是0、1、2、3或4；
r是0、1、2、3或4；
y相對于x基團(tuán)位于間位，并且r6相對于x基團(tuán)在任何位置，排除以下化合物：
n‐(2‐羥基‐5‐甲基苯基)‐3‐(哌啶‐1‐磺?；?苯甲酰胺；
3‐(二乙基氨磺?；?‐n‐(2‐羥基‐5‐甲基苯基)苯甲酰胺；
n‐(2‐羥基‐5‐甲基苯基)‐3‐(吡咯烷‐1‐磺?；?苯甲酰胺；
n‐(5‐氯‐2‐羥基苯基)‐3‐(哌啶‐1‐磺?；?苯甲酰胺；
n‐(2‐羥基苯基)‐4‐甲基‐3‐(哌啶‐1‐磺?；?苯甲酰胺；
2‐氯‐n‐(2‐羥基苯基)‐5‐(哌啶‐1‐磺?；?苯甲酰胺；
n‐(2‐羥基苯基)‐3‐(哌啶‐1‐磺?；?苯甲酰胺；
n‐(5‐叔丁基‐2‐羥基苯基)‐3‐(哌啶‐1‐磺?；?苯甲酰胺；
n‐(2‐羥基‐4‐甲基苯基)‐3‐(哌啶‐1‐磺?；?苯甲酰胺；
n‐(2‐羥基‐5‐甲基苯基)‐3‐(哌啶‐1‐磺?；?苯甲酰胺；
n‐(2‐羥基‐5‐甲基苯基)‐4‐甲氧基‐3‐(哌啶‐1‐磺酰基)苯甲酰胺；
3‐(氮雜環(huán)庚烷‐1‐磺酰基)‐n‐(2‐羥基‐5‐甲基苯基)‐4‐甲氧基苯甲酰胺。
其中排除的化合物是可商購的化合物。
沒有描述與這些化合物有關(guān)的藥理活性。
更具體地，本發(fā)明涉及通式(2)的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽：
其中
x選自鍵、co、nh、conh、nhco和包含2或3個(gè)n原子的5-或6-元雜芳族基團(tuán)；
y表示so2或鍵；
q選自下式的基團(tuán)：
r1選自or11、coor11、鹵素、1h-四唑基；po4h2、脒基和n-羥基脒基；
r2選自h、烷基、鹵素、or11和cor11；
r3選自h、or11、鹵素和o-(ch2)p–o-烷基；
r4選自h、烷基、鹵素、co-烷基(c1-c6)、cn、三氟甲基、co-烷基、苯基和芐基；
r5為h；
或r1如上所定義，并且來自r2和r3或r3和r4或r4和r5中的兩個(gè)與它們所連接的碳原子一起形成包含5至6個(gè)成員的芳族環(huán)，且來自r2至r5中的其他表示h；
r6選自h、oh、鹵素、烷基、羥基烷基和烷氧基，
或r1與r6一起形成o或nh鏈；
當(dāng)y表示so2時(shí)，
r7選自h、烷基、環(huán)烷基、苯基、芐基、(ch2)q-r12
r8選自h、烷基、環(huán)烷基/金剛烷基)、吡啶基和(ch2)r-r13；
或r7和r8與它們連接的n原子一起形成下式的基團(tuán)：
其中z是鍵或z選自chr14、ch2chr14、nr14、ch2nr14和o，
r10選自h、烷基、羥基、鹵素、三氟甲基、芳基和羥基烷基，
或兩個(gè)相鄰的r10基團(tuán)與它們連接的環(huán)原子一起形成芳基；
當(dāng)y是鍵時(shí)，
r7是h、烷基、羥基烷基或表示任選被一至三個(gè)選自烷基、芳基烷基和羥基烷基的基團(tuán)取代的單環(huán)或雙環(huán)任選橋連的環(huán)烷基環(huán)，且
r8是so2r16，
r11是h或烷基；
r12選自oh、cooh、co-烷基、苯基、嗎啉基、nh2、nh-烷基、n-(烷基)2nh(nh)nh2、ch2coo-烷基，
r13選自oh和苯基；
r14選自h、烷基、環(huán)烷基、芳基和芳基烷基，其中環(huán)烷基或芳基環(huán)可在環(huán)狀結(jié)構(gòu)中包含一個(gè)或兩個(gè)選自n和o的雜原子，并且可被一個(gè)或多個(gè)選自烷基、鹵素、氰基、氨基、烷基氨基、二烷基氨基、硝基、三氟甲基、芳基、烷基-芳基、酰基、烷氧基或芳氧基的取代基取代；
r15表示選自h、鹵素、oh和烷氧基的基團(tuán)；
r16表示選自烷基、羥基烷基、芳基、雜芳基和芳基烷基的基團(tuán)；
q1和q2中的一個(gè)是ch且另一個(gè)是n；
q3選自o、s、n和nh；
q4選自c和n以及co；
q5選自c和n；
n是0、1或2；
p是1、2、3或4；
q是0、1、2、3或4；
r是0、1、2、3或4；
s是0、1、2或3。
在上述通式(1)或(2)中：
烷基表示含有1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈基團(tuán)。合適的烷基的實(shí)例是甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、新戊基等。
烷基優(yōu)選包含不超過4個(gè)碳原子。
環(huán)烷基表示包含3至12個(gè)碳原子的環(huán)烷基，其可以是單環(huán)或雙環(huán)或橋連的。
優(yōu)選的基團(tuán)是環(huán)丙基、環(huán)戊基、環(huán)己基和金剛烷基。
芳基表示包含5至10個(gè)碳原子的芳族單環(huán)或雙環(huán)基團(tuán)，即苯基、芐基、甲苯甲?；?。
芳基優(yōu)選是苯基。
烷基氨基和二烷基氨基分別表示式-nrr’的基團(tuán)，其中r為h且r’為烷基(單氨基)，或者相同或不同的r和r’二者表示烷基。
芳基烷基表示式-rr’的基團(tuán)，其中r是含有1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子，優(yōu)選地1至4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈，且r’是如上定義的芳基。
烷基芳基表示式-rr’的基團(tuán)，其中r是芳基部分，且r’是如上定義的含有1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子，優(yōu)選地1至4個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基。
?；硎臼絩co-的基團(tuán)，其中r是如上定義的烷基或芳基。
烷氧基表示式-or的基團(tuán)，其中r是如上定義的烷基。
芳氧基表示式-or’的基團(tuán)，其中r’是如上定義的芳基。
羥基烷基表示式-roh的基團(tuán)，其中r是如上定義的含有1、2、3、4、5或6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基鏈。
羥基芳基表示式-r’oh的基團(tuán)，其中r’是如上定義的芳基部分。
鹵素表示選自氟、氯、溴和碘的鹵素原子，特別是氟或氯。
5-元雜芳基優(yōu)選選自吡唑、異噁唑、三唑、噁唑、噻唑、咪唑、硫代苯基和呋喃基；
6-元雜芳基優(yōu)選選自吡啶基、噠嗪和嘧啶基。
包含2或3個(gè)n原子的5元雜芳基優(yōu)選選自吡唑基、咪唑基和三唑基，并且最優(yōu)選是1h-咪唑基和1h-1,2,4-三唑基。
根據(jù)本發(fā)明的最優(yōu)選的化合物是具有一個(gè)或幾個(gè)以下特征的化合物：
x是co-nh或x表示三唑基環(huán)，優(yōu)選地1h-1,2,4-三唑基環(huán)，
y是so2，
q是下式的基團(tuán)：
r1表示oh，r2選自h、鹵素和or11，且r3選自h和鹵素，且r3選自h，r4選自h、烷基、鹵素、co-烷基(c1-c6)、cn、三氟甲基、co-烷基、苯基和芐基；r5是h；或
r1表示oh或鹵素，并且來自r2和r3或r3和r4或r4和r5中的兩個(gè)與它們所連接的碳原子一起形成包含5至6個(gè)成員的芳族環(huán)，且來自r2至r5中的其他表示h；
q是式q的基團(tuán)，選自下式的基團(tuán)：
r15是鹵素原子，優(yōu)選地氯、氟或溴，
r7和r8是烷基，優(yōu)選地甲基；r7是h且r8是羥烷基，優(yōu)選地羥乙基，或r7是h或諸如甲基的烷基，r8是環(huán)烷基，優(yōu)選地環(huán)己基或金剛烷基；或r7是h，且r8選自吡啶基，優(yōu)選地2-吡啶基、苯基乙基和苯基丁基；或r7和r8與它們連接的n原子一起形成下式的基團(tuán)：
其中r10和n如上定義，且r10優(yōu)選為烷基、羥基、鹵素、羥基烷基，或
或r7和r8與它們連接的n原子一起形成下式的基團(tuán)：
其中z是nr14且nr14選自苯基、芐基和嘧啶基，優(yōu)選地2-嘧啶基；
n是0或1；
q是1、2或3；
r是0、1、2、3或4；
s是0、1或2；
其他優(yōu)選的式(1)的化合物是那些化合物，其中：
x是co-nh或三唑基，優(yōu)選地1h-1,2,4-三唑基環(huán)
y是so2，
q1和q2是ch
r1表示oh，
r2表示h，
r3和r4如權(quán)利要求1中所定義，條件是r3和r4中的一個(gè)是h；
r5是h；或者
r1表示oh，并且來自r2和r3或r3和r4或r4和r5中的兩個(gè)與它們所連接的碳原子一起形成包含5至6個(gè)成員的芳族環(huán)，且來自r2至r5中的其他表示h；或者
r7和r8表示烷基，優(yōu)選地甲基，或者
r7和r8與它們連接的n原子一起形成下式的基團(tuán)：
其中r10如權(quán)利要求1中所定義，優(yōu)選地是烷基、羥基、鹵素或羥基烷基，或
r7和r8與它們連接的n原子一起形成下式的基團(tuán)：
其中z是nr14基團(tuán)，其中r14選自苯基、芐基和嘧啶基，優(yōu)選地2-嘧啶基，或者
r7是h且r8是環(huán)烷基，優(yōu)選地環(huán)己基和金剛烷基，
n是1，
特別優(yōu)選的一組化合物是通式(2a)的那些
其中x、z、r4、r6和r10以及n如上所定義。
特別優(yōu)選的另外一組化合物是通式(2b)的那些
其中z、r1-5、r6和r10以及n如上所定義。
特別優(yōu)選的另外一組化合物是通式(2c)的那些
其中z、r1-5、r6和r13以及r如上所定義。
特別優(yōu)選的另外一組化合物是通式2(d)的通式的那些
其中q1、q2、r6、r7、r8如上所定義且x表示鍵、conh或nh。
最優(yōu)選的化合物是下列：
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氟-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-溴-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(2-羥基-5-苯基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-芐基-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-[2-羥基-5-(三氟甲基)苯基]-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氰基-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-乙?；?2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-[5-(1,1-二甲基丙基)-2-羥基-苯基]-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(2-羥基-4-甲氧基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(3-羥基-2-萘基)-3-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-(2-羥基-1-萘基)-3-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(哌啶-1-羰基)苯甲酰胺；
5-氯-2-羥基-n-[3-(1-哌啶基磺酰基)苯基]苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-4-甲基-3-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(二甲基氨磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(環(huán)己基氨磺酰基)苯甲酰胺；
3-(氮雜環(huán)庚烷-1-基磺?；?-n-(5-氯-2-羥基-苯基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[(2-甲基-1-哌啶基)磺?；鵠苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[(3-甲基-1-哌啶基)磺?；鵠苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[(4-甲基-1-哌啶基)磺?；鵠苯甲酰胺；
3-[(4-芐基-1-哌啶基)磺?；鵠-n-(5-氯-2-羥基-苯基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[[4-(1-哌啶基)-1-哌啶基]磺?；鵠苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(4-甲基哌嗪-1-基)磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(4-苯基哌嗪-1-基)磺?；?苯甲酰胺；
3-(4-芐基哌嗪-1-基)磺?；?n-(5-氯-2-羥基-苯基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-4-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氯-1h-吲哚-7-基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
5-氯-3-[3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰基]-1h-苯并咪唑-2-酮；
3-(1-金剛烷基氨磺?；?-n-(5-氯-2-羥基-苯基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[環(huán)己基(甲基)氨磺?；鵠苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[[2-(羥基甲基)-1-哌啶基]磺酰基]苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(4-嘧啶-2-基哌嗪-1-基)磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[(3-苯基-1-哌啶基)磺酰基]苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[[3-(羥基甲基)-1-哌啶基]磺?；鵠苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-吡咯烷-1-基磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-嗎啉代磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-吲哚啉-1-基磺?；?苯甲酰胺；
n-(2-氯苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(2,5-二氯苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-n-甲基-3-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-氟-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(4-氯-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
2-氯-n-(5-氯-2-羥基-苯基)-5-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-[(1s,2s)-2-羥基環(huán)己基]-3-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-2-氟-5-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(環(huán)己基氨磺?；?-4-甲基-苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(2-吡啶基氨磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-2-甲基-5-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-[(2-羥基苯基)甲基]-3-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-(4-羥基-3-吡啶基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
2-羥基-n-(2-羥基苯基)-5-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(2-苯基乙基氨磺酰基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(4-苯基丁基氨磺酰基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(2-羥基乙基氨磺酰基)苯甲酰胺；
n-(3-氯苯基)-2-羥基-5-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
4-氯-2-[[3-(1-哌啶基磺酰基)苯基]甲基氨基]苯酚；
n-[3-(1-哌啶基磺酰基)苯基]-1h-吲唑-3-胺；
4-氯-2-[2-[3-(1-哌啶基磺?；?苯基]-1h-咪唑-5-基]苯酚；
3-[芐基(環(huán)己基)氨磺?；鵠-n-(5-氯-2-羥基-苯基)苯甲酰胺；
2-[[3-[(5-氯-2-羥基-苯基)氨基甲?；鵠苯基]磺?；?環(huán)己基-氨基]乙酸叔丁酯；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[環(huán)己基(3-苯基丙基)氨磺酰基]苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(4-羥基丁基氨磺酰基)苯甲酰胺；
2-[[3-[(5-氯-2-羥基-苯基)氨基甲?；鵠苯基]磺?；?環(huán)己基-氨基]乙酸
2-[3-(1-哌啶基磺酰基)苯基]-3h-苯并咪唑-4-醇；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-2-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(環(huán)己基磺酰基氨基)苯甲酰胺；
3-[3-氨基丙基(環(huán)己基)氨磺酰基]-n-(5-氯-2-羥基-苯基)苯甲酰胺；
n-(3-氨基丙基)-3-(5-氯-1,3-苯并噁唑-2-基)-n-環(huán)己基-苯磺酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[環(huán)己基(3-胍基丙基)氨磺酰基]苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-2-(1-哌啶基磺?；谆?苯甲酰胺；
n-(4,5-二氯-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
5-氯-n-[3-(1-哌啶基磺酰基)苯基]-1h-吲唑-3-胺；
n-(3-氯-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
3-氯-8-(1-哌啶基磺?；?-5h-苯并[b][1,4]苯并氧氮雜卓(benzoxazepin)-6-酮；
n-[(5-氯-2-羥基-苯基)甲基]-3-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
3-氯-8-(1-哌啶基磺?；?-5,11-二氫苯并[b][1,4]苯并二氮雜卓-6-酮；
5-氯-2-[3-(1-哌啶基磺酰基)苯基]-1,3-苯并噁唑；
4-氯-2-[3-[3-(1-哌啶基磺酰基)苯基]-1h-1,2,4-三唑-5-基]苯酚；
7-氯-2-[3-(1-哌啶基磺?；?苯基]-3h-苯并咪唑-4-醇；
5,7-二氯-2-[3-(1-哌啶基磺酰基)苯基]-3h-苯并咪唑-4-醇；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；谆?苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-2-(環(huán)己基磺?；被?苯甲酰胺；
4-[[3-[(5-氯-2-羥基-苯基)氨基甲?；鵠苯基]磺?；?環(huán)己基-氨基]丁酸；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[環(huán)己基(5-苯基戊基)氨磺酰基]苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[環(huán)己基(3-羥基丙基)氨磺酰基]苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-2-[2-(1-哌啶基磺?；?苯基]乙酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-甲基-5-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-6-(環(huán)己基磺?；被?吡啶-2-甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-5-(環(huán)己基磺?；被?吡啶-3-甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[環(huán)戊基(甲基)氨磺?；鵠苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-1,1-二氧代-2,3-二氫-1,2-苯并噻唑-6-甲酰胺；
3-[2-氨基乙基(環(huán)己基)氨磺酰基]-n-(5-氯-2-羥基-苯基)苯甲酰胺；
n-(2-氨基乙基)-3-(5-氯-1,3-苯并噁唑-2-基)-n-環(huán)己基-苯磺酰胺；
3-[4-氨基丁基(環(huán)己基)氨磺?；鵠-n-(5-氯-2-羥基-苯基)苯甲酰胺；
n-(4-氨基丁基)-3-(5-氯-1,3-苯并噁唑-2-基)-n-環(huán)己基-苯磺酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[環(huán)庚基(甲基)氨磺?；鵠苯甲酰胺；
n-(3-氨基丙基)-3-[5-(5-氯-2-羥基-苯基)-1h-1,2,4-三唑-3-基]-n-環(huán)己基-苯磺酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(環(huán)己基磺?；被?-5-甲氧基-苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[環(huán)己基-[3-(二甲基氨基)丙基]氨磺?；鵠苯甲酰胺；
3-(5-氯-1,3-苯并噁唑-2-基)-n-環(huán)己基-n-[3-(二甲基氨基)丙基]苯磺酰胺；
3-[3-氨基丙基(環(huán)己基)氨磺?；鵠-n-甲基-苯甲酰胺；
4-氯-2-[4-[3-(1-哌啶基磺?；?苯基]三唑-1-基]苯酚；
3-[3-氨基丙基(環(huán)己基)氨磺?；鵠-n-(3-氯苯基)苯甲酰胺；
n-(3-氨基丙基)-3-溴-n-環(huán)己基-苯磺酰胺；
3-[3-氨基丙基(環(huán)己基)氨磺酰基]苯甲酰胺；
4-氯-2-[4-[3-(1-哌啶基磺?；?苯基]嘧啶-2-基]苯酚；
3-[3-氨基丙基(環(huán)己基)氨磺?；鵠-n-苯基-苯甲酰胺；
n-(3-氨基丙基)-3-(1,3-苯并噻唑-2-基)-n-環(huán)己基-苯磺酰胺；
3-[3-氨基丙基(環(huán)己基)氨磺酰基]-n-(2-甲氧基苯基)苯甲酰胺；
n-(3-氨基丙基)-n-環(huán)己基-3-(1h-四唑-5-基)苯磺酰胺；
3-(1,3-苯并噁唑-2-基)-n-環(huán)己基-n-甲基-苯磺酰胺；
3-[3-氨基丙基(環(huán)己基)氨磺?；鵠-n-(2-羥基苯基)苯甲酰胺；
n-(3-氨基丙基)-3-(1,3-苯并噁唑-2-基)-n-環(huán)己基-苯磺酰胺；
3-[3-氨基丙基(環(huán)己基)氨磺?；鵠-n,n-二甲基-苯甲酰胺；
3-[3-氨基丙基(環(huán)己基)氨磺?；鵠-n-(2-羥基-3-甲氧基-苯基)苯甲酰胺；
n-(3-氨基丙基)-n-環(huán)己基-3-(7-甲氧基-1,3-苯并噁唑-2-基)苯磺酰胺；
n-(3-氨基丙基)-n-環(huán)己基-3-噻唑并[5,4-b]吡啶-2-基-苯磺酰胺；
2-[3-(1-哌啶基磺?；?苯基]苯并三唑；
n-(3-氨基丙基)-n-環(huán)己基-3-噻唑并[4,5-c]吡啶-2-基-苯磺酰胺；
n-(3-氨基丙基)-n-環(huán)己基-3-(7-羥基-1,3-苯并噁唑-2-基)苯磺酰胺；
3-[3-氨基丙基(環(huán)己基)氨磺?；鵠-n-(4,5-二氯-2-羥基-苯基)苯甲酰胺；
n-(3-氨基丙基)-n-環(huán)己基-3-(5,6-二氯-1,3-苯并噁唑-2-基)苯磺酰胺；
n-(3-氨基丙基)-3-(1h-苯并咪唑-2-基)-n-環(huán)己基-苯磺酰胺；
n-(3-氨基丙基)-3-溴-n-甲基-苯磺酰胺；
n-(3-氨基丙基)-3-溴-n-環(huán)己基-苯甲酰胺；
n-(3-氨基丙基)-2-溴-n-環(huán)己基-苯磺酰胺；
n-(3-氨基丙基)-4-溴-n-環(huán)己基-苯磺酰胺；
n'-[(3-溴苯基)甲基]-n'-環(huán)己基-丙烷-1,3-二胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[環(huán)己基(3-嗎啉代丙基)氨磺酰基]苯甲酰胺；
3-(5-氯-1,3-苯并噁唑-2-基)-n-環(huán)己基-n-(3-嗎啉代丙基)苯磺酰胺；
3-(5-氯-1,3-苯并噁唑-2-基)-n-環(huán)己基-n-(3-羥基丙基)苯磺酰胺；
n-(3-氨基丙基)-n-環(huán)己基-苯磺酰胺；
3-[5-(5-氯-2-羥基-苯基)-1h-1,2,4-三唑-3-基]-n-環(huán)己基-n-甲基-苯磺酰胺；
n-[5-氯-2-羥基-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[環(huán)庚基(甲基)氨磺?；鵠苯甲酰胺；
(2-氨基-4-氯-苯基)甲基3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酸酯；
n-(2-乙酰胺基-5-氯-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
4-氯-2-[[3-(1-哌啶基磺酰基)苯甲?；鵠氨基]苯甲酸乙酯；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[(4-羥基-1-哌啶基)磺?；鵠苯甲酰胺；
4-氯-2-[[3-(1-哌啶基磺?；?苯甲?；鵠氨基]苯甲酸；
n-(3,5-二氯-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-[5-氯-2-(羥基甲基)苯基]-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氯-1h-苯并咪唑-2-基)-3-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[(4,4-二氟-1-哌啶基)磺?；鵠苯甲酰胺；
n-(3-乙?；?5-氯-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺酰基)苯甲酰胺；
n-(5-氯-2-羥基-3-甲基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-[5-氯-2-(1h-四唑-5-基)苯基]-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-[5-氯-2-(n-羥基甲脒基(carbamimidoyl))苯基]-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
n-(5-氯-3-氟-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺；
[4-氯-2-[[3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰基]氨基]苯基]磷酸二氫鹽；
本發(fā)明還涉及用作藥物(即，用于治療疼痛病癥、癌癥或自身免疫性疾病)的通式(1)的化合物，
其中所有取代基如前面所定義。
可使用常規(guī)方法制備式(1)化合物，例如通過以下例示的方法，其中各個(gè)取代基如前面對式(1)化合物所定義，除非另外規(guī)定。
根據(jù)第一種方法，通過包括以下步驟的方法制備式(1)的化合物(其中x表示conh，y表示so2，r7和r8與它們連接的n原子一起形成下式的基團(tuán))
(i)使式(3)的化合物
與通式(4)的化合物反應(yīng)
以獲得式(5)的化合物
(ii)使式(5)的化合物與式(6)的化合物反應(yīng)
以獲得式(7)的化合物
根據(jù)第二種方法，通過在buchwald-hartwig交叉偶聯(lián)反應(yīng)中使式(8)的化合物，
與通式(9)的化合物
反應(yīng)制備式(1)的化合物，其中q是具有下式的基團(tuán)
且y表示so2，且r7和r8與它們所連接的n原子一起形成具有下式的基團(tuán)：
可通過在醋酸銨的存在下，使式(10)的化合物
與n,n-羰基二咪唑反應(yīng)獲得通式(9)的化合物。
根據(jù)第三種方法，根據(jù)以下步驟制備式(1)化合物(其中r1與x一起形成雜環(huán)芳族或非芳族環(huán)并且y表示so2)：
可由有機(jī)合成領(lǐng)域的技術(shù)人員從已知或可商購的起始原料和試劑制備本文提供的化合物。這些方法包括重結(jié)晶、柱色譜或hplc。以下方案詳細(xì)描述了代表性的取代的三唑(11)、咪唑(12)、苯并噁唑(13)或苯并咪唑(14)的制備。
根據(jù)以下反應(yīng)方案制備在本發(fā)明的范圍內(nèi)的其他化合物。
用于5-芳基-三唑-3-基-n-苯磺酰胺衍生物的制備的一般合成方案
根據(jù)上述反應(yīng)方案，使苯甲酰肼衍生物16與苯甲脒衍生物18反應(yīng)，產(chǎn)生具有通式11的三唑化合物。該反應(yīng)優(yōu)選在105℃下在etoh和氯苯1/1的混合物中進(jìn)行過夜。
根據(jù)有機(jī)工藝與研發(fā)(organicprocess&development),2009,13,1206-1208中的出版物，在lihmds的存在下，可容易地從相應(yīng)的苯甲腈衍生物17獲得苯甲脒衍生物18。
可按兩步順序從容易獲得的3-氯磺?；郊姿狨パ苌?5制備苯甲酰肼衍生物16。
此外，可能需要常規(guī)保護(hù)基以防止某些官能團(tuán)經(jīng)歷不期望的反應(yīng)。對于特定官能團(tuán)，合適的保護(hù)基以及用于保護(hù)和脫保護(hù)的合適條件的選擇是本領(lǐng)域熟知的。例如，在t.w.greene和p.g.m.wutz，有機(jī)合成中的保護(hù)基(protectinggroupsinorganicsynthesis)，第三版，wiley，neyyork，1999及其中引用的參考文獻(xiàn)中描述了許多保護(hù)基及它們的引入和去除。
用于4-芳基-3-咪唑-2基-n-苯磺酰胺衍生物的制備的一般合成方案
根據(jù)上述反應(yīng)方案，在諸如碳酸氫鈉的堿的存在下使通式23的苯甲脒衍生物與適當(dāng)取代的苯甲酰甲基溴衍生物24反應(yīng)，產(chǎn)生通式12的咪唑化合物。按照方案2的方法，可按照經(jīng)典文獻(xiàn)步驟從3-氯磺?；郊姿嵫苌?9按四步順序制備通式23的化合物。
用于3-(苯并噁唑-2基)n-芳基磺酰胺衍生物的制備的一般合成方案
根據(jù)上述反應(yīng)方案，將通式20的磺酰胺苯甲酸衍生物與適當(dāng)取代的2-羥基-苯胺衍生物25偶聯(lián)，產(chǎn)生相應(yīng)的通式26的n-(2-羥基苯基)苯甲酰胺衍生物。例如，在hünig堿(n-乙基二異丙基胺)的存在下，偶聯(lián)劑如hatu可以在惰性溶劑(dmf)的存在下用于這種酰胺鍵的形成?？墒褂帽绢I(lǐng)域已知的大量可能性通過22的環(huán)化獲得通式13的3-(苯并噁唑-2基)n-芳基磺酰胺衍生物。一種方便的方法是在微波照射下使用tfa。
用于3-(苯并咪唑-2基)n-芳基磺酰胺衍生物的制備的一般合成方案
根據(jù)上述反應(yīng)方案，使通式28的3-甲?；蓟酋０费苌锱c適當(dāng)?shù)谋?-2二胺衍生物29反應(yīng)，產(chǎn)生通式14的苯并咪唑衍生物。一種方便的方法包括在質(zhì)子溶劑(etoh/h2o)中使用焦亞硫酸鈉na2s2o5。該協(xié)議導(dǎo)致在較溫和條件下苯并咪唑的更好產(chǎn)率。
可按照文獻(xiàn)步驟從3-氯磺?；郊姿嵫苌?0按兩步順序制備3-甲酰基苯磺酰胺衍生物28。例如，用氯甲酸異丁酯將羧酸衍生物20轉(zhuǎn)化為混合酸酐，并用硼氫化鈉原位還原，提供相應(yīng)的伯醇衍生物27。在swern條件下(草酰氯，net3，dmso，-78℃)氧化伯醇衍生物27，產(chǎn)生醛衍生物28。
用于n-(3-氨磺酰基苯基)苯甲酰胺衍生物32的制備的一般合成
根據(jù)上述反應(yīng)方案，將通式31的3-磺?；桨费苌锱c適當(dāng)取代的酰氯偶聯(lián)，產(chǎn)生相應(yīng)的通式32的n-(3-氨磺?；交?苯甲酰胺衍生物。
用于3-(n-環(huán)烷基-n-烷基氨磺酰基)苯甲酰胺衍生物33的制備的一般合成
根據(jù)上述反應(yīng)方案，用適當(dāng)取代的鹵代烷基衍生物將通式34的3-環(huán)烷基氨磺酰基苯甲酸酯衍生物烷基化，產(chǎn)生相應(yīng)的通式35的n-(3-氨磺?；?n-烷基)苯甲酰胺衍生物?？砂凑瘴墨I(xiàn)步驟從衍生物35按三步順序制備衍生物33。
可通過以下試驗(yàn)評價(jià)化合物的藥理活性：
表達(dá)snap標(biāo)記的flt3的細(xì)胞的共價(jià)標(biāo)記
貼壁細(xì)胞的標(biāo)記
從96孔板中去除細(xì)胞培養(yǎng)基，并以100μl/孔加入預(yù)先稀釋在tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基中的100nm的snap-lumi4tb，并在37℃，5％co2下進(jìn)一步孵育1h。通過用100μl的tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基洗滌每個(gè)孔4次除去過量的snap-lumi4-tb。
一批細(xì)胞的標(biāo)記和細(xì)胞冷凍
從含有貼壁細(xì)胞的燒瓶中除去細(xì)胞培養(yǎng)基后，將5ml的含有100nm的snap-lumi4-tb的tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基加入至燒瓶，并在37℃，5％co2下孵育1h。通過用5ml的tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基洗滌每個(gè)燒瓶4次除去過量的snap-lumi4-tb。分離細(xì)胞，通過離心(1,300rpm下5分鐘)顆?；腋≡诤?0％dmso的細(xì)胞培養(yǎng)基中。然后，將細(xì)胞以每小瓶5百萬細(xì)胞分配，并在異丙醇中緩慢冷凍至-80℃，然后轉(zhuǎn)移至液氮中儲存。
在它們的使用之前，將冷凍的細(xì)胞在37℃下快速解凍，從小瓶中去除培養(yǎng)基，將細(xì)胞以1百萬細(xì)胞/ml的細(xì)胞密度懸浮在tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基中。
tag-lite結(jié)合測定
轉(zhuǎn)染后24小時(shí),在新鮮細(xì)胞上進(jìn)行tag-lite結(jié)合測定。當(dāng)使用冷凍細(xì)胞時(shí)，在細(xì)胞解凍后立即進(jìn)行結(jié)合測定。當(dāng)在96孔板中的貼壁細(xì)胞上進(jìn)行測定時(shí)，細(xì)胞密度為每孔50,000個(gè)細(xì)胞，而每孔10,000個(gè)細(xì)胞的密度用于在384孔小體積板中，在懸浮液中進(jìn)行結(jié)合測定。
飽和結(jié)合測定
通過用遞增濃度的稀釋在tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基中的red-fl孵育細(xì)胞進(jìn)行飽和結(jié)合實(shí)驗(yàn)。對于各個(gè)濃度，通過加入在相同緩沖液中稀釋的0.3μm未標(biāo)記的fl來測定非特異性結(jié)合。在含有標(biāo)記細(xì)胞的板中，加入50μl(或在384孔板中10μl)的tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基，加入25μl(或?qū)τ?84孔板5μl)的未標(biāo)記的fl或tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基，隨后加入25μl(或在384孔板中5μl)的red-fl。在信號檢測前，將板在室溫下孵育4小時(shí)或過夜。
競爭結(jié)合測定
在tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基中稀釋red-fl和待測試的化合物二者。在遞增濃度的待測化合物的存在下，用0.5nm的red-fl孵育細(xì)胞。在含有標(biāo)記細(xì)胞的板中，加入50μl(或在384孔板中10μl)的tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基，加入25μl(或在384孔板中5μl)的待測試的化合物，并在加入25μl(或在384孔板中5μl)的red-fl之前在室溫下孵育1小時(shí)。然后，在信號檢測前，將板在室溫下孵育4小時(shí)或過夜。
自動(dòng)磷酸化測定
對表達(dá)內(nèi)源性flt3受體的rs4-11細(xì)胞上進(jìn)行自身磷酸化測定。使用50,000個(gè)細(xì)胞/孔的密度在384孔小體積板中，在懸浮液中進(jìn)行該測定，以測定flt3的磷酸化程度。為了發(fā)現(xiàn)拮抗劑化合物和開發(fā)該測定，我們確定了fl對rs4-11細(xì)胞的效率。
fl的效率
在tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基中稀釋rh-fl。在遞增濃度的rh-fl的存在下孵育細(xì)胞。在含有rs4-11細(xì)胞的板(10μl/孔)中，加入2μl的rh-fl并在室溫下孵育3分鐘。加入4μl/孔的裂解緩沖液，并在室溫下孵育2小時(shí)。將分別用稀釋在tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基中的lumi4-tb和d2(4μl)標(biāo)記的抗flt3和抗tyr-969flt3抗體的混合物加入至細(xì)胞裂解物。然后，在信號檢測前，將板在室溫下孵育2小時(shí)或過夜。
競爭測定
在tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基中稀釋rh-fl和待測試的化合物二者。在遞增濃度的待測化合物的存在下，用0.1μm的rh-fl孵育細(xì)胞。在含有rs4-11細(xì)胞的板(5μl/孔)中，加入5μl待測化合物，并在加入2μl的0.1μm的rh-fl之前在室溫下孵育1小時(shí)。在室溫下用rh-fl孵育3分鐘后，加入4μl的裂解緩沖液，并在室溫下孵育2小時(shí)。將分別用稀釋在tag-lite標(biāo)記培養(yǎng)基中的lumi4-tb和d2(4μl)標(biāo)記的抗flt3和抗tyr-969flt3抗體的混合物加入至細(xì)胞裂解物。然后，在信號檢測前，將板在室溫下孵育2小時(shí)或過夜。
信號檢測
使用裝備有htrf光學(xué)模塊的先進(jìn)熒光酶標(biāo)儀(rubystar，bmglabtech)檢測信號，允許在337nm的供體激發(fā)和在665nm和620nm二者的信號采集。選擇20次閃爍/孔的頻率用于激光激發(fā)。使用以下時(shí)間分辨設(shè)置在665nm和620nm二者采集信號：延遲50μs，積分時(shí)間400μs。通過將受體信號(665nm)除以供體信號(620nm)并將該值乘以10,000獲得htrf比。10,000的放大系數(shù)僅用于更容易處理數(shù)據(jù)的目的。
數(shù)據(jù)分析和統(tǒng)計(jì)
使用graphpadprism軟件(graphpadsoftware，inc.，sandiego，ca)從特異性結(jié)合的飽和曲線確定熒光配體的kd值。根據(jù)cheng和prusoff方程從結(jié)合競爭實(shí)驗(yàn)確定化合物的ki值。使用graphpadprism軟件(graphpadsoftware，inc.，sandiego，ca)，從s形劑量-反應(yīng)曲線確定rh-fl和化合物的ec50和ic50值。
可例如通過進(jìn)行生物化學(xué)激酶結(jié)合測定來測定flt3受體拮抗劑的選擇性，如在fabian等人，2005和karaman等人，2008中描述的kinomescan激酶結(jié)合測定。對于flt3測定，可使用僅跨越催化結(jié)構(gòu)域的激酶構(gòu)建體(np_004110.2中的氨基酸592至969)。該構(gòu)建體不包括近膜結(jié)構(gòu)域，并且被設(shè)計(jì)為測量開放flt3活性位點(diǎn)對抑制劑的內(nèi)在結(jié)合親和力，如先前在zarrinkar等人，2009中描述的。
式(1)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括其酸加成鹽和堿鹽。合適的酸加成鹽由形成無毒鹽的酸形成。實(shí)例包括乙酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、硼酸鹽、樟腦磺酸鹽(camsylate)、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、乙磺酸鹽(esylate)、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、六氟磷酸鹽、海苯酸鹽、鹽酸鹽/氯化物、氫溴酸鹽/溴化物、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘二甲酸鹽(naphthylate)、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、乳清酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、蔗糖酸鹽(saccharate)、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽和三氟乙酸鹽以及昔萘酸鹽。
關(guān)于合適的鹽的綜述，參見stahl和wermuth的“藥物鹽手冊：性質(zhì)、選擇及用途(handbookofpharmaceuticalsalts：properties,selection,anduse)”(wiley-vch，weinheim，germany，2002)。
式(1)化合物的藥學(xué)上可接受的鹽可以通過三種方法中的一種或多種制備：
(i)通過使式(1)的化合物與所需的酸或堿反應(yīng)；
(ii)通過使用所需的酸或堿從式(1)的化合物的合適前體中去除酸或堿不穩(wěn)定保護(hù)基或通過將諸如內(nèi)酯或內(nèi)酰胺的合適的環(huán)狀前體開環(huán)；或者
(iii)通過與合適的酸或堿反應(yīng)或通過合適的離子交換柱將式(1)的化合物的一種鹽轉(zhuǎn)化為另一種。
通常在溶液中進(jìn)行所有三種反應(yīng)。所得的鹽可沉淀析出并通過過濾收集，或可通過蒸發(fā)溶劑回收。所得的鹽中的離子化程度可從完全離子化變化到幾乎無離子化。
本發(fā)明的化合物可以非溶劑化和溶劑化兩種形式存在。術(shù)語“溶劑化物”在本文中用于描述包含本發(fā)明的化合物和化學(xué)計(jì)量的諸如乙醇的一種或多種藥學(xué)上可接受的溶劑分子的分子復(fù)合物。當(dāng)所述溶劑是水時(shí)，使用術(shù)語“水合物”。
包括在本發(fā)明范圍內(nèi)的是復(fù)合物，例如籠形包合物，藥物-主體包合物(drug-hostinclusioncomplexes)，其中與上述溶劑化物相比，藥物和主體以化學(xué)計(jì)量或非化學(xué)計(jì)量的量存在。還包括含有兩種或多種有機(jī)和/或無機(jī)組分的藥物的復(fù)合物，其可以是化學(xué)計(jì)量或非化學(xué)計(jì)量的量。所得的復(fù)合物可以是電離的，部分電離的或非電離的。關(guān)于這種復(fù)合物的綜述，參見haleblian的jpharmsci，64(8)，1269-1288(1975年8月)。
在下文，對式(1)化合物的所有提及包括對其鹽，溶劑化物和復(fù)合物以及對其鹽的溶劑合物和復(fù)合物的提及。
本發(fā)明的化合物包括如上文所定義的式(1)化合物，當(dāng)相關(guān)時(shí)包括其所有多晶型物和晶體習(xí)性、其前藥和異構(gòu)體。
式(1)化合物的所謂“前藥”也在本發(fā)明的范圍內(nèi)。因此，自身具有很少或沒有藥理活性的式(1)化合物的某些衍生物，當(dāng)被施用至身體之中或之上時(shí)，可被轉(zhuǎn)化為具有所需活性的式(1)化合物，例如通過水解斷裂。將這種衍生物稱為“前藥”。關(guān)于前藥的使用的進(jìn)一步信息可在“pro-drugsasnoveldeliverysystems，vol.14，acssymposiumseries(t.higuchi和w.stella)和“bioreversiblecarriersindrugdesign”，pergamonpress，1987(編輯e.broche，americanpharmaceuticalassociation)中獲悉。
根據(jù)本發(fā)明的前藥可例如通過用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的某些部分取代式(1)化合物中存在的合適官能團(tuán)來制備，如例如在h.bundgaard的“designofprodrugs“(elsevier，1985)中描述的“前-部分”。
根據(jù)本發(fā)明的前藥的一些實(shí)例包括其酰胺，例如其中當(dāng)式(1)化合物的氨基官能團(tuán)的氫被(c1-c10)烷?；〈那闆r時(shí)的化合物。
根據(jù)前述實(shí)例和其他前藥類型的實(shí)例的取代基的其他實(shí)例可在上述參考文獻(xiàn)中獲悉。
此外，式(1)的某些化合物本身充當(dāng)式(1)的其他化合物的前藥。
本發(fā)明范圍內(nèi)還包括式(1)化合物的代謝物，即在施用藥物時(shí)在體內(nèi)形成的化合物，例如其伯氨基衍生物或其苯酚衍生物，或羧酸衍生物。
根據(jù)本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的溶劑合物包括其中結(jié)晶溶劑可以是諸如d2o的同位素取代的那些。
式(1)化合物，它們的藥學(xué)上可接受的鹽和/或衍生形式是有價(jià)值的藥學(xué)活性化合物，其適合于治療和預(yù)防疼痛病癥。
式(1)化合物，它們的藥學(xué)上可接受的鹽和/或衍生形式是適合于治療和預(yù)防癌癥的進(jìn)一步有價(jià)值的藥學(xué)活性化合物。
式(1)化合物，它們的藥學(xué)上可接受的鹽和/或衍生形式是適合于治療和預(yù)防自身免疫性疾病的進(jìn)一步有價(jià)值的藥學(xué)活性化合物。
因此，本發(fā)明還涉及一種包含本發(fā)明的化合物和藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑的藥物組合物。
“藥學(xué)上”或“藥學(xué)上可接受的”是指當(dāng)適當(dāng)?shù)厥┯糜诓溉閯?dòng)物，尤其是人時(shí)不產(chǎn)生不利的、過敏的或其他不良反應(yīng)的分子實(shí)體和組合物。藥學(xué)上可接受的載體或賦形劑是指無毒的固體、半固體或液體填充劑、稀釋劑、包封材料或任何類型的制劑助劑。
還可將本發(fā)明的化合物與諸如可生物降解的聚合物的持續(xù)釋放基質(zhì)組合以形成治療組合物。
除了本發(fā)明的化合物之外，藥物組合物還可包含用于治療與本發(fā)明的化合物相同的疾病或不同的疾病的另外的活性成分。
本發(fā)明的組合物優(yōu)選包含本發(fā)明的化合物和用于治療疼痛病癥的另外的活性成分以及藥學(xué)上可接受的載體的組合。
本發(fā)明的組合物還可包含本發(fā)明的化合物和用于治療癌癥的另外的活性成分以及藥學(xué)上可接受的載體的組合。
本發(fā)明的組合物還可包含本發(fā)明的化合物和用于治療自身免疫性疾病的另外的活性成分以及藥學(xué)上可接受的載體的組合。
活性成分用于同時(shí)或相繼施用。
可通過任何合適的途徑施用本發(fā)明的化合物。
因此，可將本發(fā)明的化合物配制為用于口服、頰、鼻內(nèi)、胃腸外(例如，靜脈內(nèi)，肌內(nèi)或皮下)、局部或直腸施用或適于通過吸入或吹入施用的形式的藥物組合物。
對于口服施用，藥物組合物可采取以下形式，例如通過使用藥學(xué)上可接受的賦形劑的常規(guī)方法制備的片劑或膠囊劑，所述賦形劑例如粘結(jié)劑(例如，預(yù)膠化玉米淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或羥丙基甲基纖維素)；填料(例如，乳糖、微晶纖維素或磷酸鈣)；潤滑劑(例如，硬脂酸鎂，滑石或二氧化硅)；崩解劑(例如，馬鈴薯淀粉或羥基乙酸淀粉鈉)；或潤濕劑(例如，十二烷基硫酸鈉)?？赏ㄟ^本領(lǐng)域熟知的方法包衣片劑。用于口服施用的液體制劑可采取以下形式，例如溶液劑、糖漿劑或懸浮劑的形式，或者它們可以干產(chǎn)品形式存在，在使用前用水或其他合適的介質(zhì)配制。
可通過常規(guī)方法用藥學(xué)上可接受的添加劑制備這種液體制劑，所述添加劑例如懸浮劑(例如，山梨醇糖漿、甲基纖維素或氫化可食用脂肪)，乳化劑(例如，卵磷脂或阿拉伯樹膠)，非水性介質(zhì)(例如，杏仁油、油酯或乙醇)；和防腐劑(例如，甲基或丙基對羥基苯甲酸酯或山梨酸)。
對于頰施用，組合物可采取以常規(guī)方式配制的片劑或錠劑的形式。還可根據(jù)本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟知的方法配制本發(fā)明的化合物用于持續(xù)遞送。
這種制劑的實(shí)例可在美國專利3,538,214、4060,598、4,173,626、3,119,742和3,492,397中獲悉，其通過引用整體內(nèi)容并入本文。
本發(fā)明的化合物可配制成用于通過注射的腸胃外施用，包括使用常規(guī)的導(dǎo)管插入技術(shù)或輸注?？梢詥挝粍┬吞峁┳⑸溆弥苿?，例如在安瓿或多劑量容器中，并且添加防腐劑。組合物可采取在油性或水性介質(zhì)中的懸浮液、溶液或乳液的形式，并且可含有諸如懸浮劑、穩(wěn)定劑和/或分散劑的配制劑?？蓚溥x地，活性成分可以是粉末形式，用于在使用前使用諸如無菌無熱原水的合適的介質(zhì)重構(gòu)，胃腸外制劑通常是可含有諸如鹽、碳水化合物和緩沖劑(優(yōu)選達(dá)到3-9的ph)的賦形劑的水溶液，但是對于一些應(yīng)用，可更適當(dāng)?shù)貙⑺鼈兣渲茷闊o菌非水溶液或干燥形式以與諸如無菌、無熱原水的合適載體聯(lián)合使用。
本發(fā)明還涉及一種通過施用一劑本發(fā)明的拮抗劑從而調(diào)節(jié)flt3受體的活性來抑制或緩解受試者的疼痛的方法。
因此，本發(fā)明的化合物可潛在地用于治療多種疼痛病癥，特別是急性疼痛、慢性疼痛，神經(jīng)性疼痛、炎性疼痛、醫(yī)源性疼痛例如癌癥疼痛、感染性疼痛例如皰疹性疼痛內(nèi)臟疼痛、中樞性疼痛、功能障礙性疼痛例如纖維肌痛、傷害性疼痛例如手術(shù)后疼痛以及涉及內(nèi)臟、胃腸道、顱結(jié)構(gòu)、肌肉骨骼系統(tǒng)、脊柱、泌尿生殖系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)的混合性疼痛類型以及cns例如癌癥疼痛、背部及口頜面疼痛。
可用本發(fā)明化合物治療的其他疼痛病況包括自身免疫性疾病，包括多發(fā)性硬化、神經(jīng)退化性疾病、神經(jīng)性疾病例如癲癇和感覺運(yùn)動(dòng)病狀、腸易激綜合征、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、神經(jīng)病理學(xué)疾病、功能性腸病、炎性腸病、與痛經(jīng)相關(guān)的疼痛、骨盆疼痛、膀胱炎、胰腺炎、偏頭痛、叢集性和緊張性頭痛、糖尿病性神經(jīng)病、外周神經(jīng)性疼痛、坐骨神經(jīng)痛、灼痛和下尿路功能障礙病況。
疼痛通?？煞譃榧毙曰蚵?。急性疼痛突然開始并且是短暫的(通常12周或更短)。它通常與諸如特定損傷的特定原因相關(guān)，并且通常是劇烈和重度的。這是在手術(shù)、牙科治療、拉傷或扭傷所致的特定損傷后可能發(fā)生的疼痛類型。急性疼痛通常不會導(dǎo)致任何持續(xù)的心理反應(yīng)。相比之下，慢性疼痛是長期疼痛，通常持續(xù)超過三個(gè)月，并導(dǎo)致顯著的心理和情緒問題。慢性疼痛的常見實(shí)例是神經(jīng)性疼痛(例如，疼痛性糖尿病神經(jīng)病變、帶狀皰疹后神經(jīng)痛)、腕管綜合征、背痛、頭痛、癌癥疼痛、關(guān)節(jié)炎疼痛和慢性手術(shù)后疼痛。
當(dāng)通過疾病或創(chuàng)傷對身體組織產(chǎn)生實(shí)質(zhì)性損傷時(shí)，傷害感受器激活的特征被改變，并且在外圍、損傷周圍局部和傷害感受器終止處的中心存在敏化。這些效應(yīng)導(dǎo)致疼痛感覺增強(qiáng)。在急性疼痛中，這些機(jī)制可用于促進(jìn)可更好地使修復(fù)過程發(fā)生的保護(hù)行為。正常的期望是，一旦損傷愈合，敏感性就恢復(fù)正常。然而，在許多慢性疼痛狀態(tài)中，超敏性遠(yuǎn)遠(yuǎn)比愈合過程更持久，并且通常由神經(jīng)系統(tǒng)損傷所致。這種損傷通常導(dǎo)致與適應(yīng)不良和異?；钚韵嚓P(guān)的感覺神經(jīng)纖維的異常(woolf&salter，2000，science，288，1765-1768)。
當(dāng)患者的癥狀中不適和異常敏感性突出時(shí)，呈現(xiàn)臨床疼痛?；颊叱３Ｏ喈?dāng)不均勻并且可能呈現(xiàn)各種疼痛癥狀。這種癥狀包括：1)自發(fā)性疼痛，其可以是鈍痛、灼痛或刺痛；2)對傷害性刺激的過度疼痛反應(yīng)(痛覺過敏)；3)由通常無害刺激產(chǎn)生的疼痛(異常性疼痛-meyer等人，1994，textbookofpain，13-44)。盡管患有各種形式的急性和慢性疼痛的患者可能具有類似癥狀，但是潛在的機(jī)制可能不同，因此可能需要不同的治療策略。因此，根據(jù)不同的病理生理學(xué)，疼痛也可被分為許多不同的亞型，包括傷害性疼痛、炎性和神經(jīng)性疼痛。
傷害性疼痛是由組織損傷或由強(qiáng)烈刺激引起的，具有引起損傷的可能性。疼痛傳入通過轉(zhuǎn)導(dǎo)位于損傷部位的傷害感受器的刺激而被激活，并以它們的終止水平激活脊髓中的神經(jīng)元。然后，這被向上轉(zhuǎn)送到脊髓束直到感知疼痛的大腦(meyer等人，1994，textbookofpain，13-44)。傷害感受器的激活激活兩種類型的傳入神經(jīng)纖維。有髓a-δ纖維迅速傳導(dǎo)并且負(fù)責(zé)劇烈和刺痛的疼痛感覺，而無髓c纖維以較慢的速率傳導(dǎo)并且傳達(dá)鈍痛或酸痛。中度至重度急性傷害性疼痛是來自中樞神經(jīng)系統(tǒng)創(chuàng)傷、拉傷/扭傷、灼傷、心肌梗死和急性胰腺炎、手術(shù)后疼痛(任何類型的外科手術(shù)后的疼痛)、創(chuàng)傷后疼痛、腎絞痛、癌癥疼痛和背痛的疼痛的突出特征。癌癥疼痛可以是慢性疼痛，例如腫瘤相關(guān)的疼痛(例如，骨痛、頭痛、面部疼痛或內(nèi)臟疼痛)或與癌癥治療相關(guān)的疼痛(例如，化療后綜合征、慢性手術(shù)后疼痛綜合征或放射后綜合征)。癌癥疼痛也可能響應(yīng)化療、免疫治療、激素治療或放射治療而發(fā)生。背痛可能是由于椎間盤突出或破裂、或腰椎小關(guān)節(jié)、骶髂關(guān)節(jié)、椎旁肌或后縱韌帶的異常所致。背痛可以自然消退，但在一些患者中，它持續(xù)超過12周，從而變成可以導(dǎo)致特別虛弱的慢性病況。
神經(jīng)性疼痛目前被定義為由神經(jīng)系統(tǒng)中的原發(fā)性損傷或功能障礙引發(fā)或所致的疼痛。神經(jīng)損傷可由創(chuàng)傷和疾病所致，因此術(shù)語“神經(jīng)性疼痛”包括具有多種病因的許多病癥。這些包括但不限于外周神經(jīng)病變、糖尿病性神經(jīng)病、皰疹后神經(jīng)痛、三叉神經(jīng)痛、背痛、癌性神經(jīng)病變、hiv神經(jīng)病變、幻肢痛、腕管綜合征、中樞性中風(fēng)后疼痛和與慢性酒精中毒相關(guān)的疼痛、甲狀腺功能減退、尿毒癥、多發(fā)性硬化、脊髓損傷、帕金森氏病、癲癇和維生素缺乏病。神經(jīng)性疼痛是病理性的，因?yàn)樗鼪]有保護(hù)作用。它通常在原始原因已消失之后充分呈現(xiàn)，通常持續(xù)多年，顯著降低患者的生活質(zhì)量(woolf和mannion，1999，lancet，353,1959-1964)。神經(jīng)性疼痛的癥狀難以治療，因?yàn)樗鼈兺ǔＪ钱愘|(zhì)的，甚至在患有相同疾病的患者之間(woolf&decosterd，1999，painsupp.，6，s141-s147；woolf和mannion，1999，lancet，353，1959-1964)。它們包括自發(fā)性疼痛，其可以是持續(xù)性、陣發(fā)性或異常誘發(fā)性疼痛，例如痛覺過敏(對傷害性刺激的敏感性增加)和異常性疼痛(對正常無害刺激的敏感性)。
炎性過程是一系列復(fù)雜的生物化學(xué)和細(xì)胞事件，響應(yīng)于組織損傷或外來物質(zhì)的存在而被激活，這導(dǎo)致腫脹和疼痛(levine和taiwo，1994，textbookofpain，45-56)。關(guān)節(jié)炎疼痛是最常見的炎性疼痛。類風(fēng)濕性疾病是發(fā)達(dá)國家中最常見的慢性炎性病況之一，并且類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎是殘疾的常見原因。類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的確切病因是未知的，但目前的假設(shè)表明遺傳和微生物因素二者可能是重要的(grennan&jayson，1994，textbookofpain，397-407)。據(jù)估計(jì)，近1600萬美國人患有癥狀性骨關(guān)節(jié)炎(oa)或退行性關(guān)節(jié)病，其中大多數(shù)人的年齡大于60周歲，隨著人口年齡的增加，這一比例預(yù)計(jì)將增加到4000萬，這使其成為巨大的公眾衛(wèi)生問題(houge&mersfelder，2002，annpharmacother.，36，679-686；mccarthy等人，1994，textbookofpain，387-395)。
大多數(shù)骨關(guān)節(jié)炎患者由于相關(guān)的疼痛而尋求醫(yī)療照顧。關(guān)節(jié)炎對社會心理和身體功能具有顯著影響，并且已知是晚年殘疾的主要原因。強(qiáng)直性脊柱炎也是引起脊柱和骶髂關(guān)節(jié)的關(guān)節(jié)炎的風(fēng)濕性疾病。它從整個(gè)生命中發(fā)生的間歇性背痛發(fā)作變化到侵害脊柱、外周關(guān)節(jié)和其他身體器官的嚴(yán)重慢性疾病。
另一種類型的炎性疼痛是內(nèi)臟痛，其包括與炎性腸病(ibd)相關(guān)的疼痛。內(nèi)臟痛是與包括腹腔的器官的內(nèi)臟有關(guān)的疼痛。這些器官包括性器官、脾臟和消化系統(tǒng)的一部分。與內(nèi)臟相關(guān)的疼痛可被分為消化性內(nèi)臟痛和非消化性內(nèi)臟痛。引起疼痛的常見胃腸道(gi)病癥包括功能性腸病(fbd)和炎性腸病(ibd)。這些gi病癥包括目前僅被適度控制的廣泛的疾病狀態(tài)，包括關(guān)于fbd，胃食管反流、消化不良，腸易激綜合征(ibs)和功能性腹痛綜合征(faps)，以及關(guān)于ibd，克羅恩氏病、回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎，所有這些都定期產(chǎn)生內(nèi)臟痛。其他類型的內(nèi)臟痛包括與痛經(jīng)、膀胱炎和胰腺炎以及骨盆疼痛相關(guān)的疼痛。
應(yīng)當(dāng)注意，一些類型的疼痛具有多種病因，因此可被分類在多于一個(gè)區(qū)中，例如，背痛和癌性疼痛具有傷害性和神經(jīng)性成分二者。
其他類型的疼痛包括：
-由肌肉-骨骼疾病引起的疼痛，包括肌痛、纖維肌痛、脊椎炎、血清陰性(非類風(fēng)濕性)關(guān)節(jié)病、非關(guān)節(jié)風(fēng)濕病、肌營養(yǎng)不良病，糖原貯積病、多發(fā)性肌炎和膿性肌炎；-心臟和血管疼痛、包括由心絞痛、心肌梗死、二尖瓣狹窄、心包炎、雷諾氏現(xiàn)象、硬皮病和骨骼肌缺血引起的疼痛；
-頭痛，例如偏頭痛(包括有先兆的偏頭痛和無先兆的偏頭痛)、叢集性頭痛、緊張型頭痛混合型頭痛和與血管疾病相關(guān)的頭痛；以及
-口頜面疼痛，包括牙痛、耳痛、灼口綜合征和顳下頜肌筋膜痛。
本發(fā)明還涉及一種通過施用一劑本發(fā)明的拮抗劑從而調(diào)節(jié)flt3受體的活性來抑制或緩解受試者的癌癥的方法。
癌癥特別是急性骨髓性白血病。
本發(fā)明還涉及一種通過施用一劑本發(fā)明的拮抗劑從而調(diào)節(jié)flt3受體的活性來抑制或緩解受試者的自身免疫性疾病的方法。
自身免疫性疾病包括但不限于以下：(1)諸如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的風(fēng)濕性疾病，系統(tǒng)性紅斑狼瘡，干燥綜合征，硬皮病，混合性結(jié)締組織病，皮肌炎，多發(fā)性肌炎，萊特爾氏綜合征或貝赫切特??；(2)ii型糖尿?。?3)諸如橋本氏甲狀腺炎或格雷夫斯氏病的甲狀腺自身免疫性疾?。?4)諸如多發(fā)性硬化、重癥肌無力或腦脊髓炎的中樞神經(jīng)系統(tǒng)的自身免疫性疾??；(5)諸如尋常型天皰瘡(phemphigus)、增殖型天皰瘡、落葉型天皰瘡、塞-阿二氏綜合征或巴西天皰瘡的多種天皰瘡；(6)牛皮癬；和(7)炎性腸病(例如，潰瘍性結(jié)腸炎或克羅恩氏病)。
通常，以治療有效量施用本發(fā)明的化合物?！爸委熡行Я俊笔侵缸銐蛄康谋景l(fā)明的拮抗劑以適用于任何醫(yī)學(xué)治療的合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比治療和/或預(yù)防疾病。應(yīng)當(dāng)理解，本發(fā)明的化合物和組合物的總?cè)沼昧繉⒂芍髦吾t(yī)師在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)決定。任何特定受試者的具體治療有效劑量水平將取決于多種因素，包括所治療的疾病和疾病的嚴(yán)重程度；所使用的具體化合物的活性；所使用的具體組合物，受試者的年齡、體重、一般健康狀況、性別和飲食；施用時(shí)間、施用途徑和所使用的具體化合物的排泄速率；治療持續(xù)時(shí)間；與所使用的特定多肽聯(lián)合使用或同時(shí)使用的藥物；以及醫(yī)學(xué)領(lǐng)域熟知的類似因素。例如，本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的是，以低于實(shí)現(xiàn)期望的治療效果所需的水平開始化合物的劑量，并逐漸增加劑量直至達(dá)到期望的效果。然而，產(chǎn)品的日劑量可在每個(gè)成人每天0.01mg至1,000mg的寬范圍內(nèi)變化。優(yōu)選地，組合物含有0.01、0.05、0.1、0.5、1.0、2.5、5.0、10.0、15.0、25.0、50.0、100、250和500mg的活性成分，用于對待治療的受試者的劑量進(jìn)行癥狀調(diào)節(jié)。藥物通常包含從約0.01mg至約500mg的活性成分，優(yōu)選地從1mg至約100mg的活性成分。通常，以從0.0002mg/kg至約20mg/kg的體重/天，特別是從約0.001mg/kg至7mg/kg的體重/天的劑量水平提供有效量的藥物。這些劑量基于具有約65kg至70kg的體重的平均人受試者。醫(yī)生能夠容易地確定體重在該范圍之外的受試者(例如，嬰兒和老年人)的劑量。
為了避免疑義，本文中對“治療”的提及包括對治愈性、姑息性治療和預(yù)防性治療的提及。
受試者可以是人患者或動(dòng)物，優(yōu)選是哺乳動(dòng)物。
以下實(shí)施例說明式(1)的化合物的制備及它們的藥理性質(zhì)。
實(shí)施例：
實(shí)施例1：n-(5-氯-2-羥基苯基)-3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酰胺的制備
1-步驟1：3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酸
在0℃下，向攪拌的3-(氯磺?；?苯甲酸(0.3g,1.36mmol)的dcm(5ml)溶液加入哌啶(0.35g,0.4ml,4.08mmol)，并將所得溶液攪拌2小時(shí)。然后，在減壓下蒸發(fā)揮發(fā)物，并用1nkhso4水溶液處理殘余物。然后，用乙酸乙酯萃取水相(×3)，合并的有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空蒸發(fā)，得到白色固體形式的3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酸(0.34g,1.262mmol,90％)。1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.41(1h,br),8.26(1h,dt,j＝8.0hz,1.4hz),7.94(1h,dt,j＝8.0hz,1.6hz),7.61(1h,t,j＝7.7hz),2.98-2.96(4h,m),1.62-1.56(4h,m),1.40-1.34(2h,m)。
13cnmr(100mhz,cdcl3)：170.0,137,6,133.9,132.5,130.3,129.4,129.2,46.9,25.2,23.5。
2-步驟2：n-(5-氯-2-羥基苯基)-3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酰胺
在室溫下，向攪拌的3-(哌啶-1-基磺酰基)苯甲酸(0.15g,0.557mmol)的dcm(3.15ml)溶液加入(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸鹽(bop,0.29g,0.668mmol)、n-甲基嗎啉(0.14g,1.39mmol)，并將所得溶液攪拌15分鐘。然后，加入5-氯-2-羥基苯胺(0.080g,0.557mmol)，并將最終混合物在室溫下攪拌12小時(shí)。然后，在減壓下蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯(15ml)中，并用1nhcl(8ml)、khco31n(8ml)，水(10ml)洗滌。將有機(jī)層干燥(na2so4)，過濾并在減壓下濃縮。通過硅膠快速層析(acoet/庚烷3/7)純化所得殘余物，得到白色固體形式的n-(5-氯-2-羥基苯基)-3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酰胺(160mg,73％)。
1hnmr(400)：8.70(s,h),8.19(1h,t,j＝1.6hz),8.12(1h,dt,,j＝1.6hz,8hz),7.85(1h,dt,,j＝1.6hz,8hz),7.62(t,1h,8hz),7.48(d,1h,j＝2.4hz),7.03(dd,1h,j＝2.4hz,j＝8.8hz)；8.90(d,1h,j＝8.8hz)
13cnmr(100mhz,cdcl3)：166.5,146.9,137.3,134.4,132.1,131.1,129.9,126.9,126.5,126.1,125.5,122.5,120.0,47.0,25.05,23.3。
lc/ms(m+h)＝395.8
實(shí)施例2：n-(5-氯-1h-吲哚-7-基)-3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酰胺的制備
7-溴-4-氯-1h-吲哚
在-45℃，向攪拌的1-溴-4氯-2-硝基苯(1.3g,5.49mmol)的thf(28ml)溶液加入乙烯基溴化鎂(1m的thf溶液,16.5ml,123mmol)，并將反應(yīng)混合物在相同溫度下攪拌1小時(shí)。然后，用飽和nh4cl(20ml)將反應(yīng)混合物淬滅。在減壓下蒸發(fā)揮發(fā)性組分，并向所得殘余物中加入h2o(30ml)。用dcm(2x15ml)萃取粗產(chǎn)物，并用鹽水(50ml)洗滌有機(jī)層，在na2so4上干燥并真空濃縮。通過使用acoet/庚烷(1/19)的快速層析純化殘余物，得到黃色油狀物形式的標(biāo)題化合物(0.6g,47％)
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.35(s,1h,br),7.22(t,1h,j＝2.8hz),7.17(d,1h,j＝8hz)6.94(d,j＝8hz,1h),6.66(t,1h,j＝2.8hz)
13cnmr(100mhz,cdcl3)：135.0,127.5,125.6,125.2,124.7,120.7,102.8
7-溴-4-氯-1h-吲哚-1-羧酸叔丁基酯
在氬氣下，在0℃下，將在礦物油中的60％nah分散體(130mg,5.42mmoll)分批加入到7-溴-4-氯-1h-吲哚(500mg,2.17mmol)的thf(9ml)溶液。在氣體逸出停止后，滴加boc2o(660mg,3mmol)的thf(2ml)溶液。將反應(yīng)在室溫下攪拌過夜，并通過緩慢加入h2o(15ml)進(jìn)行后處理。用et2o(3×10ml)萃取反應(yīng)混合物，并用鹽水洗滌合并的有機(jī)層，用na2so4干燥。在真空下去除溶劑，并將油狀保護(hù)的吲哚用于下一步驟，無需進(jìn)一步純化(550mg,77％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：7.47(d,1hj＝3.6hz),7.36(d,1h,j＝8.4hz),7.03(d,1h,j＝8.4hz),6.62(d,1hj＝3.6hz),1.47(s,9h)。
13cnmr(100mhz,cdcl3):148.1,141.4,132,4,130.7,130.12,129.9,123.7,105.9,105.2,84.9,29.7,27.9
3-(哌啶-1-磺?；?苯甲酰胺
向3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酸(300mg,1.11mmol)的acoet(5ml)溶液加入n,n-羰基二咪唑(198mg,1.22mmol)。將反應(yīng)混合物在回流下攪拌4小時(shí)，然后加入乙酸銨(343.5mg,4.46mmol)。將反應(yīng)混合物在回流下攪拌過夜，然后在減壓下蒸發(fā)揮發(fā)性組分。通過使用acoet/庚烷的快速層析進(jìn)一步純化殘余物，得到白色固體形式的標(biāo)題化合物(240mg,80％)。
1hnmr(400,cdcl3)：8.10(t,1h,j＝2hz),8.03(dt,1h,j＝2hz,8hz),7.84(dt,1h,j＝2hz,8hz),7.57(t,1h,j＝8hz),6.36(s,1h,br),5.94(s,1h,br)。
13cnmr(100mhz,cdcl3)167.6,137.2,134.5,134,8,130.7,129.6,46,9,25.14,23.4
n-(5-氯-1h-吲哚-7-基)-3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酰胺
將含有
1hnmr(400mhz,dmso-d6)：11.3(s,1h,br),10.5(s,1h,br),8.38-8.35(m,2h),7.97(d,1h,j＝7.6hz),7.84(t,1h,j＝7.6hz),7.49(s,1h),7.26(d,1h,j＝8hz),7.10(d,1h,j＝8hz),6.52(s,1h),2.96(m,4h),1.57(m,4h),1.38(m,2h)
13cnmr(100mhz,dmso-d6)：164.4,136.0,135.6,132.3,130.9,130.2,129.6,130,2,127.3,126.7,126,5,121.9,121.4,118.2,117.3,99.8,46.6,24.7,22.9
lc/ms(m+h)＝420.9
實(shí)施例3：n-(2-氯苯基)-3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酰胺的制備
將2-氯苯胺(62.9mg,0.675mmol)溶解于ch2cl2(1ml)中，然后在0℃下加入diea(117μl,0.675mmol)。然后，通過注射器向反應(yīng)混合物滴加在ch2cl2(1ml)的溶液中的間(氯磺?；?苯甲酰氯(113.36μl,0.743mmol)。反應(yīng)30分鐘后，除去冰浴。在25℃下向該溶液中加入diea(117μl,0.675mmol)、dmap(6.81mg,0.0675mmol)、哌啶(66μl,0.675mmol)。通過tlc檢查反應(yīng)，直到起始原料完全轉(zhuǎn)化為產(chǎn)物(1小時(shí))。在減壓下除去ch2cl2后，通過柱層析純化粗混合物，得到目標(biāo)產(chǎn)物(40％)。
白色固體；mp：150–151℃；1hnmr(300mhz,dmso-d6)：δ10.52(s,1h),8.29(d,j＝6hz,2h),7.93(d,j＝9hz),7.84–7.77(m,3h),7.38(t,j＝6hz,2h),7.13(t,j＝6hz,1h),2.93(t,j＝6hz,4h),1.58–1.50(m,4h),1.37–1.32(m,2h)；13cnmr(75mhz,dmso-d6)：δ164.0,138.7,136.0,135.9,132.0,130.1,129.6,128.6,126.4,124.0,120.6,46.6,24.6,22.8；hrms(esi)：計(jì)算值c18h20n2o3s[m-h]-：343.1116，求得值：343.1108；
實(shí)施例4：4-氯-2-(5-(3-(哌啶-1-基磺?；?苯基)-4h-1,2,4-三唑-3-基)苯酚的制備
3-(哌啶-1-基磺酰基)苯甲酸甲酯
在冰冷卻下，向攪拌的3-氯磺酰基甲基苯甲酸酯(300mg,1.28mmol)的dcm(10ml)溶液滴加哌啶(3.84mol，3eq)，將混合物攪拌2小時(shí)。對其加入1nhcl(8ml)。分離后，用鹽水(8ml)洗滌有機(jī)相并干燥(na2so4)。蒸發(fā)溶劑，所得化合物不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。(產(chǎn)率＝91％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.37(1h,s),8.24(2h,dd),7.92(1h,d),7.60(1h,t),2.99(1h,m),1.64(4h,m),1.41(2h,m)。
3-(哌啶-1-基磺酰基)苯甲酰肼
向3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酸甲酯(160mg,0.56mmol)的meoh(0.5ml)溶液加入肼(1.12mmol，2eq)。在室溫下將混合物攪拌1夜。除去溶劑后，用et2o研磨粗產(chǎn)物，并將沉淀的晶體濾出。所得化合物不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。(產(chǎn)率＝81％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.12(2h,m),7.85(1h,d),7.72(1h,t),2.88(4h,m),1.53(4h,m),1.34(2h,m)。
5-氯-2-甲氧基苯甲腈
向商購的5-氯-2-羥基苯甲腈(200mg,1.3mmol)和粉末碳酸鉀(0.5g,3.9mmol)在dmf(4ml)中的懸浮液加入碘甲烷(0.12ml,1.93mmol,1.5eq)，將混合物在室溫下攪拌1夜。加入et2o(20ml)，用1nhcl(15ml)、水(15ml)洗滌所得有機(jī)相，并干燥(na2so4)。蒸發(fā)溶劑，所得苯甲腈衍生物不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。(產(chǎn)率94％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：7,49(1h,d),7.46(1h,d),6.89(1h,d),3.90(3h,s)。
5-氯-2-甲氧基苯甲脒
在室溫下，向5-氯-2-甲氧基苯甲腈(50mg,0.30mmol)的無水thf(1ml)溶液滴加六甲基二硅氮烷鋰(5當(dāng)量的1m的thf溶液)。將反應(yīng)混合物攪拌48小時(shí)，然后用1nhcl酸化至ph＝3。除去溶劑，用naoh2n將溶液堿化至ph＝12。用dcm萃取產(chǎn)物，將有機(jī)層干燥(na2so4)，并除去溶劑(產(chǎn)率87％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：7,52(1h,d),7.27(1h,d),6.83(1h,d),5.70(2h,nh),3.82(3h,s)。
1-(3-(5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-4h-1,2,4-三唑-基)苯基磺?；?哌啶
向3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲?；?61.4mg,0.22mmol)的etoh(1ml)溶液加入(40mg,0.22mmol)，將所得混合物在回流下攪拌6小時(shí)。然后，將溴苯(1ml)加入至5-氯-2-甲氧基苯甲脒，并將混合物在105℃下攪拌一夜。在真空下除去溶劑，并通過快速層析(反相meoh/水)純化粗產(chǎn)物(產(chǎn)率＝41％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.44(1h,s),8.36(1h,dd),7.98(1h,s),7.92(1h,dd),7.70(1h,t),7.48(1h,dd),7.01(1h,d),3.97(3h,s),3.05(4h,m),1.65(4h,m),1.43(2h,m)。
4-氯-2-(5-(3-(哌啶-1-基磺?；?苯基)-4h-1,2,4-三唑-3-基)苯酚
在-78℃下，向1-(3-(5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-4h-1,2,4-三唑-基)苯基磺?；?哌啶(45mg,0.1mmol)的dcm(1ml)溶液加入bbr3(5eq)。將所得溶液在-78℃下攪拌1小時(shí)，在室溫下攪拌2小時(shí)。在用meoh中和后，除去溶劑。通過快速層析(反相meoh/水)純化粗產(chǎn)物，得到最終產(chǎn)物(產(chǎn)率＝55％)。
1hnmr(400mhz,meod)：8.49-8.39(2h,m),8.04-7.76(3h,m),7.98(1h,s),7.48-7.34(1h,dd),7.10-7.02(1h,dd),3.06(4h,m),1.66(4h,m),1.46(2h,m)。
lc-msesi[m+h]+＝418.8
實(shí)施例5：4-氯-2-(2-(3-(哌啶-1-基磺?；?苯基)-1h-咪唑-5-基)苯酚的制備：
1-(5-氯-2-甲氧基苯基)乙酮
向商購的5-氯-2-羥基苯基)乙酮(200mg,1.17mmol)和粉末碳酸鉀(0.5g,3.9mmol)在丙酮(2ml)中的懸浮液加入碘甲烷(0.10ml,1.75mmol,1.5eq)，將混合物在室溫下攪拌1夜。加入et2o(20ml)，用1nhcl(15ml)、水(15ml)洗滌所得有機(jī)相，并干燥(na2so4)。蒸發(fā)溶劑，所得苯甲腈衍生物3不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。(產(chǎn)率79％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：7.66(1h,d),7.38(1h,dd),6.88(1h,dd),3.88(3h,s),2.57(3h,s)。
2-溴-1-(5-氯-2-甲氧基苯基)乙酮
向1-(5-氯-2-甲氧基苯基)乙酮(100mg,0.542mmol)的dcmchcl3(1ml)溶液滴加溴(0.029ml,0.57mmol)，將所得混合物在室溫下攪拌，直到在tlc板上顯示反應(yīng)完全(2小時(shí))。用水、鹽水洗滌有機(jī)相，na2so4干燥，并在真空下蒸發(fā)。所得的溴乙酮衍生物不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。(產(chǎn)率95％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：7.76(1h,d),7.44(1h,dd),6.91(1h,dd),4.53(2h,s),3.90(3h,s)。
3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酸
在0℃下，向攪拌的商購3-(氯磺?；?苯甲酸9(0.3g,1.36mmol)的dcm(5ml)溶液加入哌啶(0.35g,0.4ml,4.08mmol)，并將所得溶液攪拌2小時(shí)。然后，在減壓下蒸發(fā)揮發(fā)物，并用1nkhso4水溶液處理殘余物。然后，用乙酸乙酯萃取水相(×3)，合并的有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空蒸發(fā)，得到白色固體形式的3-(哌啶-1-基磺酰基)苯甲酸(0.34g,1.262mmol,90％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.41(1h,br),8.26(1h,dt,j＝8.0hz,1.4hz),7.94(1h,dt,j＝8.0hz,1.6hz),7.61(1h,t,j＝7.7hz),2.98-2.96(4h,m),1.62-1.56(4h,m),1.40-1.34(2h,m)。
13cnmr(100mhz,cdcl3)：170.0,137,6,133.9,132.5,130.3,129.4,129.2,46.9,25.2,23.5。
3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酰胺
向3-(哌啶-1-基磺酰基)苯甲酸(300mg,1.11mmol)的dmf(5ml)溶液并在4℃下加入diea(0.74ml,4.45mmol)、hatu(466mg，1.22mg)和nh4cl(120mg,2.23mmol)。除去冰浴后，將所得溶液在室溫下攪拌過夜。然后，在真空下蒸發(fā)揮發(fā)物，并向所得粗產(chǎn)物加入acoet(30ml)。用hcl1n、水、鹽水洗滌有機(jī)層，最后干燥(na2so4)。在真空下除去溶劑，所得化合物7不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。(產(chǎn)率＝74％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.14(1h,s),8.05(2h,dd),7.89(1h,d),7.62(1h,t),6.26(1h,nh),5.85(1h,nh),2.99(4h,m),1.63(4h,m),1.40(2h,m)。
3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲腈
向3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酰胺(220mg,0.82mmol)的溶液中加入pocl3(2ml)，并將所得混合物在90℃下攪拌35分鐘。然后，在真空下蒸發(fā)過量的pocl3，并在攪拌下將粗產(chǎn)物滴加到冰水中。用naoh2n中和溶液(ph＝7)后，用acoet將產(chǎn)物萃取兩次。用水、鹽水洗滌有機(jī)層，最后干燥(na2so4)。在真空下除去溶劑，所得苯甲腈不經(jīng)進(jìn)一步純化直接使用。(產(chǎn)率＝95％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.02(1h,s),7.95(2h,dd),7.85(1h,d),7.65(1h,t),3.00(4h,m),1.64(4h,m),1.43(2h,m)。
3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲脒
在室溫下，向3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲腈(195mg,0.78mmol)的無水thf(2ml)溶液滴加六甲基二硅氮烷鋰的溶液(2.6eq,1m的thf溶液)。將反應(yīng)混合物攪拌10小時(shí)，然后用1nhcl酸化至ph＝3。除去溶劑，用naoh2n將溶液堿化至ph＝12。用dcm萃取產(chǎn)物，將有機(jī)層干燥(na2so4)，并除去溶劑(產(chǎn)率60％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.15-7.80(3h,m),7.60(1h,m),4.41(3h,nh),2.97(4h,m),1.60(4h,m),1.39(2h,m)。
5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-2-(3-(哌啶-1-基磺?；?苯基)-1h-咪唑
向3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲脒(51mg,0.19mmol)在thf(0.88ml)和h2o(1ml)的溶液加入nahco3(64mg,0.76mmol)。然后將反應(yīng)混合物在回流下加熱20分鐘。然后，加入2-溴-1-(5-氯-2-甲氧基苯基)乙酮(50mg,0.19mmol)的溶液，并將回流延長另外2小時(shí)。將燒瓶從油浴中移出，冷卻至室溫，并在真空下蒸發(fā)揮發(fā)物。然后，將粗產(chǎn)物溶于acoet(15ml)中，并用水、鹽水洗滌有機(jī)層，干燥(na2so4)并除去溶劑。(產(chǎn)率＝92％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.26(1h,d),8.17(1h,s),7.75-7.67(4h,m),7.18(1h,dd),6.90(1h,d),3.94(3h,s),3.05-2.95(4h,m),1.59(4h,m),1.38(2h,m)。
4-氯-2-(2-(3-(哌啶-1-基磺?；?苯基)-1h-咪唑-5-基)苯酚
在-78℃下，向5-(5-氯-2-甲氧基苯基)-2-(3-(哌啶-1-基磺酰基)苯基)-1h-咪唑(75mg,0.17mmol)的dcm(1ml)溶液加入bbr3(5eq)。將所得溶液在-78℃下攪拌1小時(shí)，在室溫下攪拌2小時(shí)。在用meoh中和后，除去溶劑。通過快速層析(反相meoh/水)純化粗產(chǎn)物，得到最終產(chǎn)物(產(chǎn)率＝30％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.27(1h,s),8.11(1h,d),7.75(1h,d),7.60(1h,t),7.52(1h,s),7.44(1h,s),6.77-6.70(2h,m),2.99(4h,m),1.60(4h,m),1.39(2h,m)。
13cnmr(400mhz,cd3od)：153.3,139.2,131.4,130.0,129.8,129.7,126.8,126.0,125.4,119.0,118.7,48.5,26.5,24.6。
lc-msesi[m+h]+＝418.0
實(shí)施例6：2-3(哌啶-1基磺酰基)苯基苯并[d]噁唑的制備
3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酸
在0℃下，向攪拌的3-(氯磺酰基)苯甲酸(0.3g,1.36mmol)的dcm(5ml)溶液加入哌啶(0.35g,0.4ml,4.08mmol)，并將所得溶液攪拌2小時(shí)。然后，在減壓下蒸發(fā)揮發(fā)物，并用1nkhso4水溶液處理殘余物。然后，用乙酸乙酯萃取水相(×3)，合并的有機(jī)相用無水硫酸鎂干燥，過濾并真空蒸發(fā)，得到白色固體形式的3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酸(0.34g,1.262mmol,90％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.41(1h,br),8.26(1h,dt,j＝8.0hz,1.4hz),7.94(1h,dt,j＝8.0hz,1.6hz),7.61(1h,t,j＝7.7hz),2.98-2.96(4h,m),1.62-1.56(4h,m),1.40-1.34(2h,m)。
13cnmr(100mhz,cdcl3)：170.0,137,6,133.9,132.5,130.3,129.4,129.2,46.9,25.2,23.5。
n-(5-氯-2-羥基苯基)-3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酰胺
在室溫下，向攪拌的3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酸(0.15g,0.557mmol)的dcm(3.15ml)溶液加入(苯并三唑-1-基氧基)三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸鹽(bop,0.29g,0.668mmol)、n-甲基嗎啉(0.14g,1.39mmol)，并將所得溶液攪拌15分鐘。然后，加入5-氯-2-羥基苯胺(0.080g,0.557mmol)，并將最終混合物在室溫下攪拌12小時(shí)。然后，在減壓下蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于乙酸乙酯(15ml)中，并用1nhcl(8ml)、khco31n(8ml)，水(10ml)洗滌。將有機(jī)層干燥(na2so4)，過濾并在減壓下濃縮。通過硅膠快速層析(acoet/庚烷3/7)純化所得殘余物，得到白色固體形式的n-(5-氯-2-羥基苯基)-3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酰胺(160mg,73％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.70(s,h),8.19(1h,t,j＝1.6hz),8.12(1h,dt,,j＝1.6hz,8hz),7.85(1h,dt,,j＝1.6hz,8hz),7.62(t,1h,8hz),7.48(d,1h,j＝2.4hz),7.03(dd,1h,j＝2.4hz,j＝8.8hz)；8.90(d,1h,j＝8.8hz)
13cnmr(100mhz,cdcl3)：166.5,146.9,137.3,134.4,132.1,131.1,129.9,126.9,126.5,126.1,125.5,122.5,120.0,47.0,25.05,23.3。
2-3(哌啶-1基磺?；?苯基苯并[d]噁唑
向含有
1hnmr(400mhz,dmso)：8.50(1h,dd),8.41(1h,d),8.00(2h,m),7.91(2h,m),7.53(1h,d),2.96(4h,m),1.55(4h,m),1.37(2h,m)。
lc-msesi[m+h]+＝376.8
實(shí)施例7：n-(3-氨基丙基)-3-(5-氯-1,3-苯并噁唑-2-基)-n-環(huán)己基苯-1-磺酰胺的制備
甲基-3-(環(huán)己基氨磺?；?苯甲酸酯
向攪拌的商購3-氯磺?；谆郊姿狨?1012mg,4.13mmol)的dcm(10ml)溶液滴加環(huán)己基胺(855mg,099ml,8,26mmol)，并將所得溶液在4℃下攪拌2小時(shí)。用hcl1n、鹽水洗滌有機(jī)層，并干燥(na2so4)。除去溶劑，并且產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化使用(產(chǎn)率＝94％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.52(1h,s),8.20(2h,d),8.06(1h,d),7.57(1h,t),3.92(3h,s),3.14(1h,m),1.70(2h,m),1.60(2h,m),1.24-1.05(5h,m)。
甲基-3-(n-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基)-n-環(huán)己基氨磺?；?苯甲酸酯
向上述制備的甲基-3-(環(huán)己基氨磺?；?苯甲酸酯(500mg,1.68mmol)和粉末碳酸鉀(975mg,7.06mmol)在dmf(5ml)中的懸浮液加入tbab(27.1mg,0.085mmol)和商購的n-(3-氯丙基)氨基甲酸叔丁基酯(423mg,2.18mmol)。將所得混合物在70℃下攪拌過夜。
除去溶劑，并加入acoet。用hcl1n、水、鹽水洗滌有機(jī)層，干燥(na2so4)，并蒸發(fā)溶劑。通過硅膠庚烷/acoet90/10至70/30的層析法純化粗產(chǎn)物(產(chǎn)率＝67％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.40(1h,s),8.15(2h,d),7.95(1h,d),7.53(1h,t),4.91(1h,nh),3.90(3h,s),3.56(1h,m),3.16(4h,m),1.77(2h,m),1.67(2h,m),1.50(4h,m),1,39(9h,s),1.26(5h,m),0.97(1h,m)。
3-[(3-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}丙基)(環(huán)己基)氨磺?；鵠苯甲酸
將甲基-3-(n-((叔丁氧基羰基)氨基)丙基)-n-環(huán)己基氨磺?；?苯甲酸酯(510mg,1.12mmol)溶于meoh(10ml)和h2o(8ml)的混合物。加入naoh(5eq,5.60mmol)，并將所得混合物在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)甲醇后，用acoet(8ml)萃取水層。然后，用hcl1n中和水層，并用acoet萃取兩次。將有機(jī)相干燥(na2so4)，并蒸發(fā)溶劑。(產(chǎn)率85％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.49(1h,s),8.23(1h,dd),8.01(1h,d),7.57(1h,t),4.96(1h,m),3.58(1h,m),3.21(4h,m),1.82-0.95(21h,m)。
n-[3-(n-環(huán)己基{3-[(5-氯-2-羥基苯基)-氨基甲?；鵠-苯基}-亞磺酰氨基)-丙基]氨基甲酸叔丁基酯
向上述3-[(3-{[(叔丁氧基)羰基]氨基}丙基)(環(huán)己基)氨磺酰基]苯甲酸(100mg,0.23mmol)的dmf(2ml)并在4℃下加入diea(0.075ml,0.45mmol)、hatu(95mg,0.25mmol)和5-氯-2-羥基苯胺(32.6mg,0.23mmol)。除去冰浴后，將所得溶液在室溫下攪拌45分鐘。然后，在真空下蒸發(fā)揮發(fā)物，并向所得粗產(chǎn)物加入acoet(30ml)。用hcl1n、水、鹽水洗滌有機(jī)層，最后干燥(na2so4)。在真空下除去溶劑，并用庚烷/acoet90/10至60/40的硅膠柱層析純化所得化合物(產(chǎn)率45％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.56(1h,s),8.33(1h,d),8.04(1h,d),7.63(1h,t),6.99(1h,d),6.81(1h,s),6.73(1h,m),4.87(1h,m),3.61(1h,m),3.18(4h,m),1.80-0.80(21h,m)。
n-(3-氨基丙基)-3-(5-氯-1,3-苯并噁唑-2-基)-n-環(huán)己基苯-1-磺酰胺
向含有
1hnmr(400mhz,meod)：8.65(1h,s),8.46(1h,d),8.09(1h,d),7.79(2h,m),7.70(1h,d),7.45(1h,d),3.70(1h,m),3.39(2h,m),3.07(2h,m),2.03(2h,m),1.72(2h,m),1,61-1.25(7h,m),1.08(1h,m)。
13cnmr(400mhz,cd3od)：164.3,151.0,144.1,143.8,132.6,131.8,131.2,129.1,127.6,127.0,121.0,113.2,60.1,42.2,38.4,32.9,31.0,27.2,26.3。
lc-msesi[m+h]+＝448.0
實(shí)施例8：2-[3-(1-哌啶基磺?；?苯基]-3h-苯并咪唑-4-醇的制備
4-(哌啶-1-基磺?；?苯基)甲醇
將3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酸(100mg,0.37mmol)溶于dme(2ml)中，并在冰浴中冷卻。然后，加入n-甲基嗎啉(0.042ml,0.39mmol)和氯甲酸異丁酯(0.050ml,0.39mmol)，將混合物在0℃下攪拌10分鐘。加入nabh4(56mg,1.45mmol)的水(1ml)溶液，并在室溫下繼續(xù)攪拌1小時(shí)。通過緩慢加入hcl1nacoet(15ml)淬滅過量的nabh4，并分離各相。用水洗滌有機(jī)層，在硫酸鈉上干燥，過濾并濃縮(產(chǎn)率：100％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：7.77(1h,s),7.69(1h,d),7.62(1h,d),7.54(1h,t),4.81(2h,s),1.65(4h,m),1.43(2h,m)。
4-(哌啶-1-基磺酰基)苯甲醛
在圓底燒瓶中，將草酰氯(新蒸餾，d＝1.455,0.045ml,0.53mmol)溶于1.8ml無水dcm(在cah2上干燥)中。將溶液冷卻至-78℃，并在氬氣下緩慢加入干燥的二甲基亞砜(0.05ml,0.7mmol)在0.5ml無水dcm中的溶液。在加入期間將內(nèi)部溫度保持低于-70℃。加完后，將混合物在-78℃下攪拌15分鐘，并緩慢加入4-(哌啶-1-基磺?；?苯基)甲醇在0.3ml干燥dcm中的溶液。在-78℃下將反應(yīng)混合物攪拌45分鐘后，緩慢加入net3(d＝0.726,0.2ml,1.4mmol)，將反應(yīng)混合物在-78℃下保持45分鐘，然后除去冷卻浴，并在升溫至室溫后，用150ml的飽和nahco3溶液處理懸浮液。
分離各層，用飽和nahco3水溶液(2x)和鹽水(1x)洗滌有機(jī)層。在na2so4上干燥(攪拌1小時(shí))后，蒸發(fā)溶劑，得到白色固體形式的粗產(chǎn)物醛，其不經(jīng)進(jìn)一步純化使用。(產(chǎn)率：73mg,82％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：10.06(1h,s),8.20(1h,s),8.07(1h,d),7.98(1h,d),7.69(1h,t),3.00(2h,s),1.62(4h,m),1.40(2h,m)。
2-[3-(1-哌啶基磺酰基)苯基]-3h-苯并咪唑-4-醇
向上述4-(哌啶-1-基磺?；?苯甲醛(30mg,0.12mmol)在etoh(1ml)和h2o(0.1ml)的混合物中的溶液加入na2s2o5(0.4mg,0.002和2,3-二氨基苯酚(通過商購的2-氨基-3-硝基苯酚的催化氫化獲得的,16.1mg,0.13mmol))。將所得混合物回流6小時(shí)，除去溶劑，加入acoet(10ml)，用水(8ml)洗滌所得有機(jī)相并干燥(na2so4)。將溶劑蒸發(fā)。通過快速層析(反相meoh/水)純化粗產(chǎn)物，得到最終產(chǎn)物(產(chǎn)率＝76％)。
1hnmr(400mhz,cd3od)：8.51(1h,s),8.37(1h,d),8.04(1h,d),7.90(1h,t),7.36(1h,t),7.21(1h,d),6.91(1h,d),3.03(4h,m),1.61(4h,m),1.41(2h,m)。
13cnmr(400mhz,cd3od)：148.8,147.5,140.0,135.6,133.0,132.8,132.0,129.0,128.2,126.3,124.6,111.6,105.4,48.3,26.5,24.6。
lc-msesi[m+h]+＝358.2
實(shí)施例9：n-[5-氯-2-(1h-1,2,3,4-四唑-5-基)苯基]-3-(哌啶-1-磺酰基)苯甲酰胺的制備
5-氯-2-(1h-1,2,3,4-四唑-5-基)苯胺
將商購的2-氨基-4-氯苯甲腈(1eq.,200mg,1.25mmol)、nan3(1.37eq.,111mg,0.06ml,1.71mmoll)和三乙胺鹽酸鹽(1.37eq.,235mg,1.71mmol)溶于甲苯(5ml)中，并在80-100℃下攪拌過夜。
將溶液冷卻至室溫，然后加入水(5ml)(三次)。將水相重新統(tǒng)一并用濃hcl酸化，得到沉淀。將沉淀濾出并干燥，得到棕色固體形式的5-氯-2-(1h-1,2,3,4-四唑-5-基)苯胺(195mg,80％)。
1hnmr(400mhz,d6-dmso)：7.72(d,1h,j＝8.4hz),6.96(d,1h,j＝2hz),6.73(dd,1h,j＝8.4-2hz)
13cnmr(100mhz,d6-dmso)：148.52,136.24,129.73,115.34,115.09
n-[5-氯-2-(1h-1,2,3,4-四唑-5-基)苯基]-3-(哌啶-1-磺酰基)苯甲酰胺
向3-(哌啶-1-磺?；?苯甲酸(1eq.,100mg,0.371mmol)和bop(1.2eq.,197mg,0.446mmol)的dmf(3ml)溶液加入diea(2.5eq.,119mg,0.153ml,0.928mmol)。在加入5-氯-2-(1h-1,2,3,4-四唑-5-基)苯胺(1.1eq.,79.9mg,0.408mmol)之前的15分鐘期間攪拌溶液。將混合物在室溫下攪拌過夜。
蒸發(fā)dmf，并在etoac中稀釋混合物，用水和鹽水萃取。在na2so4上干燥有機(jī)相并過濾。使用快速層析(二氧化硅，etoac:meoh/100:0-90:10，在20分鐘內(nèi))純化產(chǎn)物，得到淺棕色固體形式的n-[5-氯-2-(1h-1,2,3,4-四唑-5-基)苯基]-3-(哌啶-1-磺酰基)苯甲酰胺(141mg,85％)。
1hnmr(400mhz,d6-dmso)：12.66(s,1h),8.75(d,1h,j＝2hz),8.39(m,2h),8.16(d,1h,j＝8.4hz),7.99(dt,1h,j＝7,6–1.6hz),7.90(t,1h,j＝8hz),7.4(dd,1h,j＝8.4–2.4hz),3.02(t,4h,j＝1.4hz),1.59(m,4h),1.39(m,2h)
13cnmr(100mhz,d6-dmso)：163.86,137.48,136.38,135.37,134.24,131.74,130.79,130.26,129.50,126.00,124.01,120.39,115.35,46.71,24.68,22.76
lc-msesi[m+h]+＝447.0
實(shí)施例10：5-氯-2-羥基-n-[3-(哌啶-1磺酰基)苯基]苯甲酰胺的制備
1-((3-硝基苯基)磺?；?哌啶
將3-硝基-苯磺酰氯(800mg,3.61mmol)溶于dcm(20ml)中，并在冰浴中冷卻。加入哌啶(1.07ml,10.83mmol)，并將混合物在0℃下攪拌2小時(shí)，然后在室溫下過夜。蒸發(fā)dcm，在etoac中稀釋混合物，并用khso41n的溶液洗滌。在na2so4上干燥有機(jī)相，并過濾，得到白色固體形式的1-((3-硝基苯基)磺酰基)哌啶(700mg,72％)，mp124℃(etoh)
1hnmr(400mhz,d6-dmso)：8.54(dd,1h,j＝1.2hz；j＝8.2hz),8.36(dd,1h,j＝1.2hz),8.18(d,1h,j＝8.2hz),7.95(t,1h,j＝8.2h)。
13cnmr(100mhz,d6-dmso)：148.07,137.39,133.31,134,47,127,60,121.88,46.50,24.64,22.68。
3-(哌啶-1-基磺?；?苯胺
在乙醇中用pd/c(10％)催化氫化1-((3-硝基苯基)磺酰基)哌啶，定量地得到固體形式的3-(哌啶-1-基磺酰基)苯胺(mp114-115(etoh-h2o)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：7.27(t,1h,j＝7.8hz),7.08(d,1h,j＝7.8hz),6.85(dd,1h,j＝1.7hz),6.85(dd,1h,j＝7.8hz,j＝1.7hz),3.86(bs,2h),2.98(m,4h),1.56(m,4h),1.35(m,2h)
13cnmr(100mhz,cdcl3)：147.04,137.12,129.80,118.78,117.37,113.41,47.00,25.22,23.55。
5-氯-2-羥基-n-[3-(哌啶-1磺?；?苯基]苯甲酰胺
向苯胺衍生物(60mg,1當(dāng)量,0.25mmol)在dcm(2.4ml)中的溶液加入5-氯-2-羥基苯甲酰氯(48mg；1當(dāng)量,0.25mmol)，隨后加入三甲基胺(0.035ml,1當(dāng)量,0.25mmol)，并使反應(yīng)攪拌過夜。用水洗滌有機(jī)層，隨后用飽和碳酸氫鈉溶液洗滌，然后在na2so4上干燥。蒸發(fā)溶劑，通過硅膠快速層析(acoet-己烷3/7)純化殘余物，得到5-氯-2-羥基-n-[3-(哌啶-1磺?；?苯基]苯甲酰胺(40mg(41％))。
1hnmr(400mhz,d6-dmso)：8.19(s,1h),8.00(d,1h,j＝8hz),7.92(d,1h,j＝2.1hz),7.64(t,1h,j＝8hz),7.49(d,2h,j＝8hz),7.03(d,1h,j＝8hz),3.33(s,1h),2.92(m,4h),1.57(m,4h),1.38(m,2h)
13cnmr(100mhz,d6-dmso)：165.39,156.58,138.96,136.12,133.11,129.82,128.41,124.57,122.79,119.91,119.02,46.59,24.69,22.81
實(shí)施例11：n-(5-氯-2-羥基苯基)-3-[環(huán)庚基(甲基)氨磺?；鵠苯甲酰胺的制備
3-(環(huán)庚基氨磺酰基)苯甲酸酯：
在0℃下，將環(huán)庚基胺(1.5eq.,365mg,0.411ml,3.2mmol)和et3n(1.5eq.,323mg,0.444ml,3.2mmol)加入至3-(氯磺?；?苯甲酸甲酯(1eq.,500mg,2.13mmol)的ch2cl2(5ml)的溶液中。將所得混合物在室溫下攪拌1小時(shí)。在真空下蒸發(fā)溶劑。在etoac中稀釋混合物，并用hcl1n和鹽水洗滌。在na2so4上干燥有機(jī)層，在減壓下蒸發(fā)，得到棕色油狀物形式的3-(環(huán)庚基氨磺?；?苯甲酸甲酯(99％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.50(td,1h,j＝2–0.4hz),8.21(ddd,1h,j＝8–2–2hz),8.04(ddd,1h,j＝8–2–2hz),7.58(td,1h,j＝8–0.4hz),4.44(d,1h,j＝8hz),3.94(s,3h),3.38(m,1h),1.50(m,12h)
13cnmr(100mhz,cdcl3)：142.07,133.29,131.33,130.96,129.31,128.03,55.03,52.59,35.96,27.89,23.48
3-[環(huán)庚基(甲基)氨磺?；鵠苯甲酸甲酯
將ch3i(1.5eq.,453mg,0.199ml,3.19mmol)加入到3-(環(huán)庚基氨磺酰基)苯甲酸甲酯(1eq.,663mg,2.13mmol)和k2co3(2eq.,588mg,4.26mmol)的mecn(5ml)的溶液，將所得混合物攪拌過夜。
然后，蒸發(fā)溶劑。將etoac加入到粗殘余物，然后用hcl1n和鹽水洗滌有機(jī)相。在na2so4上干燥有機(jī)層，并在減壓下蒸發(fā)，得到3-[環(huán)庚基(甲基)氨磺酰基]苯甲酸甲酯(550mg,80％)。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.42(t,1h,j＝1.6hz),8.20(dd,1h,j＝8–1.6–1.6hz),7.96(dt,1h,j＝8–1.6–1.6hz),7.57(t,1h,j＝8hz),3.94(m,4h),2.73(s,3h),1.45(m,12h)；
13cnmr(100mhz,cdcl3)：165.84,141.18,133.29,131.48,131.17,129.46,128.21,58.97,52.78,32.69,28.56,27.81,25.21
3-[環(huán)庚基(甲基)氨磺?；鵠苯甲酰氯
將lioh(5eq.,354mg,8.45mmol)加入到3-[環(huán)庚基(甲基)氨磺?；鵠苯甲酸甲酯(1eq.,550mg,1.69mmol)的thf(5ml)和水(5ml)的溶液中。將所得混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。用hcl1n酸化溶液，并用etoac和水萃取。在na2so4上干燥有機(jī)層并在真空下蒸發(fā)，以定量產(chǎn)率得到3-[環(huán)庚基(甲基)氨磺?；鵠苯甲酸甲酯。產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化使用，并在標(biāo)準(zhǔn)條件下用socl2處理，得到相應(yīng)的-3-[環(huán)庚基(甲基)氨磺酰基]苯甲酰氯。
(5-氯-2-羥基苯基)-3-[環(huán)庚基(甲基)氨磺?；鵠苯甲酰胺
將5-氯-2-羥基苯胺(1.1eq.,274mg,1.86mmol)和et3n(1.5eq.,256mg,0.352ml,2.53mmol)加入到3-[環(huán)庚基(甲基)氨磺酰基]苯甲酰氯(1eq.,557mg,1.69mmol)的thf(10ml)溶液。然后，將所得混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。然后，蒸發(fā)溶劑，并用etoac萃取混合物，用hcl1n和鹽水洗滌。在na2so4上干燥有機(jī)層，并在減壓下蒸發(fā)。然后，用etoac研磨固體，得到淡白色固體形式的n-(5-氯-2-羥基苯基)-3-[環(huán)庚基(甲基)氨磺?；鵠苯甲酰胺(170mg,23％)。
1hnmr(400mhz,d6-dmso)：10.08(s,1h),9.87(s,1h),8.33(t,1h,j＝1.6hz),8.24(ddd,1h,j＝8–1.6–1.6hz),7.99(ddd,1h,j＝8–1.6–1.6hz),7.77(t,1h,j＝8hz),7.72(d,1h,j＝2.8hz),7.11(dd,1h,j＝8–2.8hz),6.93(d,1h,j＝8hz),3.86(m,1h),2.70(s,3h),1.45(m,12h)
13cnmr(100mhz,d6-dmso)：163.91,148.92,139.84,135.19,131.62,129.81,129.54,126.55,125.68,125.59,124.39,121.95,116.98,58.15,31.61,28.55,27.06,24.39
lc/msesi[m+h]＝437.0
實(shí)施例12：4-氯-2-(3-(環(huán)己基磺酰基)苯甲酰氨基)苯基磷酸二氫鹽的制備
(4-氯-2-(3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酰氨基)苯基)磷酸二芐酯
向n-(5-氯-2-羥基苯基)-3-(哌啶-1-磺?；?苯甲酰胺(1eq.,100mg,0.253mmol)和et3n(3eq.,76.9mg,0.106ml,0.76mmol)的dcm(1ml)溶液滴加氯代磷酸二芐酯的dcm(1ml)溶液。然后，將所得溶液在室溫下攪拌4小時(shí)。
用水將溶液萃取兩次，在na2so4上干燥有機(jī)層并蒸發(fā)。通過快速層析(硅膠，庚烷:etoac/70:30-0:100，在20分鐘內(nèi))純化產(chǎn)物，得到(4-氯-2-(3-(哌啶-1-基磺酰基)苯甲酰氨基)苯基)磷酸二芐酯。
1hnmr(400mhz,cdcl3)：9.51(s,1h),8.39(m,1h),8.33(m,1h),8.16(m,1h),7.92(m,1h),7.61(t,1h,j＝8hz),7.24(m,10h),6.98(m,2h),5.13(s,2h),5.10(s,2h),3.02(m,4h),1.55(m,4h),1.36(m,2h)
13cnmr(100mhz,cdcl3)：163.55,137.57,135.08,134.71,134.65,131.63,131.34,130.87,130.82,130.77,129.58,129.05,128.72,128.25,126.51,125.07,123.49,122.58,122.55,71.22,71.16,47.05,25.16,23.48
2-(3-(環(huán)己基磺酰基)苯甲酰氨基)苯基磷酸二氫鹽
將(4-氯-2-(3-(哌啶-1-基磺?；?苯甲酰氨基)苯基)磷酸二芐酯稀釋在dcm(3ml)中，并加入tfa(53.2eq.,1535mg,1ml,13.5mmol)。將溶液在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)溶劑，并通過反相快速層析(h2o:mecn)純化產(chǎn)物
hnmr(400mhz,d6-dmso)：10.73(s,1h),8.31(m,2h),8.05(m,1h),8.05(m,1h),7.95(m,1h),7.26(m,2h),2.94(m,4h),1.54(m,4h),1.37(m,2h)
13cnmr(100mhz,d6-dmso)：163.42,(141.87,141.81),136.34,(134.96,134.94),131.56,(131.21,131.16),130.57,129.91,128.06,(126.35,126.29),125.21,123.83,(123.40,123.38),46.59,24.64,22.74
hrms[m+h]+＝475.04841
通過使用上述方法制備以下另外的化合物
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺
1hnmr(cdcl3)：8.70(s,h),8.19(1h,t,j＝1.6hz),8.12(1h,dt,,j＝1.6hz,8hz),7.85(1h,dt,,j＝1.6hz,8hz),7.62(t,1h,8hz),7.48(d,1h,j＝2.4hz),7.03(dd,1h,j＝2.4hz,j＝8.8hz)；8.90(d,1h,j＝8.8hz)
13cnmr(cdcl3)：166.5,146.9,137.3,134.4,132.1,131.1,129.9,126.9,126.5,126.1,125.5,122.5,120.0,47.0,25.05,23.3。
lc-msesi[m+h]＝395.8
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-[環(huán)己基(甲基)氨磺酰基]苯甲酰胺
1hnmr(cdcl3)：8.55(s,1h),8.28(s,1h),8.11(d,1h),7.96(d,1h),7.92(s,1h),7.64(t,1h),7.51(d,1h),7.09(dd,1h),6.95(d,1h),3.75(tt,1h),2.75(s,3h),1.2-1.7(m,10h)
13cnmr(cdcl3)：165.36,146.88,141.45,134.29,131.56,130.39,130.03,136.88,126.48,125.58,125.42,122.25,120.08,57.18,30.39,28.79,25.69,25.21
lc-ms(esi[m+1]+)：423.1
n-(2-氯苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺
白色固體；mp：150–151℃
1hnmr(dmso-d6)：10.52(s,1h),8.29(d,j＝6hz,2h),7.93(d,j＝9hz),7.84–7.77(m,3h),7.38(t,j＝6hz,2h),7.13(t,j＝6hz,1h),2.93(t,j＝6hz,4h),1.58–1.50(m,4h),1.37–1.32(m,2h)
13cnmr(dmso-d6)：164.0,138.7,136.0,135.9,132.0,130.1,129.6,128.6,126.4,124.0,120.6,46.6,24.6,22.8
hrms(esi)[m-h]-：343.1108
n-(4-氯-2-羥基-苯基)-3-(1-哌啶基磺?；?苯甲酰胺
1hnmr(cdcl3)：8.42(s,1h),8.35(d,1h),8.21(s,1h),8.15(d,1h),7.92(d,1h),7.68(t,1h),7.28(d,1h),7.05(d,1h),6.91(dd,1h),3.00(t,4h),1.62(m,4h),1.43(m,2h)
13cnmr(cdcl3)：165.44,159.51,137.47,134.24,132.50,132.02,131.14,129.99,125.94,124.25,123.42,121.00,119.76,47.01,25.08,23.37
lc-ms(esi[m+1]+)：395.0
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(環(huán)己基氨磺?；?-4-甲基-苯甲酰胺
1hnmr(dmso-d6)：10.11(s,1h),9.72(s,1h),8.41(d,1h),8.08(dd,1h),7.84(d,1h),7.77(d,1h),7.54(d,1h),7.08(dd,1h),6.93(d,1h),2.95(m,1h),2.65(s,3h),0.90-1.59(m,10h)
13cnmr(dmso-d6)：164.07,148.53,140.31,140.29,132.62,132.02,130.94,127.72,126.77,125.30,123.86,121.99,116.90,51.91,33.25,24.82,24.44,19.77
lc-ms(esi[m+1]+)：423.0
4-氯-2-[2-[3-(1-哌啶基磺酰基)苯基]-1h-咪唑-5-基]苯酚
1hnmr(cdcl3)：8.27(1h,s),8.12(1h,d),7.75(1h,d),7.60(1h,t),7.52(1h,s),7.44(1h,s),6.77-6.70(2h,m),2.97(4h,m),1.58(4h,m),1.38(2h,m)。
13cnmr(cd3od)：153.0,147.1,139.8,131.3,130.8,129.5,128.8,127.3(2c),124.0,121.9,119.9,117.8,49.0,24.6,24.1.
lc-msesi[m+h]+＝418.0
2-[3-(1-哌啶基磺?；?苯基]-3h-苯并咪唑-4-醇
1hnmr(cd3od)：8.51(1h,s),8.37(1h,d),8.04(1h,d),7.90(1h,t),7.36(1h,t),7.21(1h,d),6.91(1h,d),3.03(4h,m),1.61(4h,m),1.41(2h,m)。
13cnmr(cd3od)：148.8,147.5,140.0,135.6,133.0,132.8,132.0,129.0,128.2,126.3,124.6,111.6,105.4,48.3,26.5,24.6。
lc-msesi[m+h]+＝358.2
n-(5-氯-2-羥基-苯基)-3-(環(huán)己基磺?；被?苯甲酰胺
1hnmr(cdcl3)：8.69(1h,s),7.70(1h,s),7.63(1h,d),7.43-7.35(4h,m),7.04(1h,d),6.91(1h,d),3.00(1h,m),2.12(2h,m),1.82(2h,m),1.52(1h,m),1.49(2h,m),1.23-1.10(3h,m).
13cnmr(cdcl3)：166.6,147.1,137.8,134.5,130.3,126.8,126.7,125.3,124.0,123.4,122.5,120.1,118.4,61.1,26.3,25.0,24.9.
lc-msesi[m+h]+＝408.8
3-[3-氨基丙基(環(huán)己基)氨磺酰基]-n-(5-氯-2-羥基-苯基)苯甲酰胺
1hnmr(cd3od)：8.36(1h,s),8.14(1h,d),8.03(1h,d),7.93(1h,s),7.70(1h,t),7.00(1h,d),6.85(1h,d),3.65-3.60(1h,m),3.33-3.27(6h,m),3.00(2h,m),1.99(2h,m),1.70(2h,m),1,57-1.21(7h,m),1.05-1.00(1h,m)。
13cnmr(cd3od)：149.0,143.3,137.0,132.4,131.2,131.2,128.0,127.4,126.7,125.2,124.0,117.6,60.0,42.0,38.4,32.8,31.0,27.2,26.4。
lc-msesi[m+h]+＝466.0
n-(3-氨基丙基)-3-(4-氯-7-羥基-1,3-苯并噁唑-2-基)-n-環(huán)己基-苯磺酰胺
1hnmr(cd3od)：8.64(1h,s),8.44(1h,d),8.08(1h,d),7.80(1h,t),7.77(1h,d),7.68(1h,d),7.42(1h,d),3.68(1h,m),3.37(2h,m),3.07(2h,m),2.04(2h,m),1.73(2h,m),1,60-1.25(8h,m),1.07(1h,m)。
13cnmr(cd3od)：164.3,151.0,144.1,143.8,132.6,131.8,131.2,129.1,127.6,127.0,121.0,113.2,60.1,42.2,38.4,32.9,31.0,27.2,26.3。
lc-msesi[m+h]+＝448.0
n-(5-氯-1h-1,3-苯并二唑-2-基)-3-(哌啶-1-磺?；?苯甲酰胺
1hnmr(400mhz,d6-dmso)：12.60(s,2h),8.47(t,1h,j＝1.6hz),8.41(dt,1h,j＝8–1.6hz),7.94(dt,1h,j＝8–1.6hz),7.80(t,1h,j＝8hz),7.49(d,1h,j＝2hz),7.45(d,1h,j＝8hz),7.19(dd,1h,j＝8-2hz),2.94(t,4h,j＝5.6hz),1.55(m,4h),1.36(m,2h)
lc-msesi[m+h]+＝419.0.
n-(5-氯-2-羥基苯基)-3-[(4-羥基哌啶-1-基)磺?；鵠苯甲酰胺
1hnmr(400mhz,d6-dmso)：10.08(s,1h),9.91(s,1h),8.27(m,2h),7.94(dt,1h,j＝8–1.2hz),7.80(t,1h,j＝8hz),7.72(d,1h,j＝2.4hz),7.11(dd,1h,j＝8-2.4hz),6.93(d,1h,j＝8hz),3.54(m,1h),3.18(m,2h),2.79(m,2h),1.74(m,2h),1.44(m,2h)
13cnmr(100mhz,d6-dmso)：163.99,148.99,136.06,135.26,132.03,130.30,129.75,126.51,126.42,125.66,124.51,121.94,117.01,63,67,43.15,32.85
lc-msesi[m+h]+＝411.0
n-[5-氯-2-(n-羥基甲脒基)苯基]-3-(哌啶-1磺酰基)苯甲酰胺
1hnmr(400mhz,d6-dmso)：13.39(s,1h),8.79(d,1h,j＝2hz),8.53(s,1h),8.22(m,2h),7.98(m,3h),7.88(t,1h,j＝8hz),7.31(dd,1h,j＝8–2hz),2.95(t,4h,j＝5.6hz),1.54(m,4h),1.37(m,2h)
13cnmr(100mhz,d6-dmso)：170.71,163.89,141.06,137.66,137.04,135.52,131.79,131.33,131.02,130.93,126.10,123.62,120.12,118.39,47.14,25.10,23.21
n-[5-氯-2-羥基-4-(2-甲氧基乙氧基)苯基]-3-(哌啶-1-磺?；?苯甲酰胺
1hnmr(400mhz,d6-dmso)：9.91(s,2h),8.27(m,2h),7.92(d,1h,j＝8hz),7.79(t,1h,j＝8hz),7.52(s,1h),6.69(s,1h),4.12(t,2h,j＝4hz),3.69(t,2h,j＝4hz),3.35(s,3h),2.93(m,4h),1.55(m,4h),1.37(m,2h)
13cnmr(100mhz,d6-dmso)：164.07,152.17,150.81,135.99,135.27,131.99,130.15,129.62,126.87,126.38,118.52,110.25,102.14,70.19,68.32,58.36,46.58,24.64,22.77
lc-msesi[m+h]+＝369.1188
4-氯-2-{[3-(哌啶-1-磺酰基)苯基]酰胺基}苯甲酸乙酯
1hnmr(400mhz,cdcl3)：8.98(d,1h,j＝2hz),8.38(t,1h,j＝1.6hz),8.21(ddd,1h,j＝8–1.6–1.6hz),8.02(d,1h,j＝8hz),7.95(ddd,1h,j＝8–1.6–1.6hz),7.69(t,1h,j＝8hz),7.11(dd,1h,j＝8-2hz),4.4(q,2h,j＝7,2hz),3.05(t,4h,j＝6hz),1.65(m,4h),1.41(t,3h,j＝7.2hz),1.40(m,2h)
13cnmr(100mhz,cdcl3)：168.38,164.27,142.52,141.42,137.86,135.91,132.27,131.36,131.14,129.92,126.76,123.56,120.56,113.96,62.17,47.28,25.42,23.71,14.38；lc-msesi[m+h]+＝451.0
n-(5-氯-2-羥基苯基)-3-{[4-(嘧啶-2-基)哌嗪-1-基]磺?；鶀苯甲酰胺
1hnmr(400mhz,d6-dmso)：10.07(s,1h),9.89(s,1h),8.33(m,2h),8.26(m,2h),7.95(m,1h),7.79(t,1h,j＝8hz),7.72(d,1h,j＝2.4hz),7.10(dd,1h,j＝8–2.4hz),6.93(d,1h,j＝8hz),6.63(t,1h,j＝4.8hz),3.84(t,4h,j＝4.8hz),3.01(t,4h,j＝4.8hz)
13cnmr(100mhz,d6-dmso)：164.04,160.75,157.98,148.34,135.46,135.30,132.33,130.42,129.86,126.55,126.52,125.34,124.44,121.95,117.00,110.68,45.65,42.53
lc-msesi[m+h]+＝474.0
實(shí)施例13：本發(fā)明化合物的藥理活性。
如前所述評價(jià)本發(fā)明化合物的藥理活性，并在下表中說明
參考文獻(xiàn)：
在整個(gè)本申請中，各個(gè)參考文獻(xiàn)描述了本發(fā)明所屬技術(shù)領(lǐng)域的狀態(tài)。這些參考文獻(xiàn)的公開內(nèi)容通過引用并入本公開內(nèi)容。
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