本發(fā)明涉及作為惡性腫瘤治療藥有用的新型peg衍生物和含有其的醫(yī)藥品。

背景技術(shù)：

阿糖胞苷、1－(2’－氰基－2’－脫氧－β－d－阿拉伯呋喃糖基)胞嘧啶、吉西他濱、地西他濱、5－氮胞苷、rx－3117(rexahn)、sgi－110(astex)等的胞嘧啶衍生物具有抑制癌的dna聚合酶、或者調(diào)節(jié)癌的細(xì)胞周期(g2/m阻滯)、誘導(dǎo)白血病細(xì)胞的分化的作用，因此，作為急性骨髄性白血病、急性淋巴細(xì)胞性白血病、惡性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、胰腺癌、肺癌、乳腺癌等的惡性腫瘤治療藥是有用的(專利文獻(xiàn)1、非專利文獻(xiàn)1～3)。利用這些胞嘧啶衍生物的惡性腫瘤的治療方法通常進(jìn)行數(shù)小時(shí)～數(shù)周的持續(xù)點(diǎn)滴靜脈內(nèi)注射的給藥(非專利文獻(xiàn)1等)。

另外，絲裂霉素c是用于慢性淋巴細(xì)胞性白血病、慢性骨髄性白血病、胃癌、結(jié)腸–直腸癌、肺癌、胰腺癌、肝癌、子宮頸癌、子宮癌、頭頸部腫瘤、膀胱腫瘤的治療的抗癌劑。然而，絲裂霉素c通常也進(jìn)行連日靜脈內(nèi)給藥。另外，吉非替尼、厄洛替尼是選擇性地抑制表皮生長因子受體(egfr)的酪氨酸激酶的分子靶向抗癌劑，被用于非小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、腦膠質(zhì)瘤病、頭頸部扁平上皮癌等。進(jìn)一步而言，拉帕替尼、舒尼替尼也是酪氨酸激酶抑制劑，被用于乳腺癌等。然而，這些分子靶向藥也具有急性肺損傷、間質(zhì)性肺炎等副作用的問題。

另外，紫杉醇、多西他賽是被用于肺癌、卵巢癌、乳腺癌、頭頸部癌、進(jìn)行性卡波西肉瘤(progressivekaposi'ssarcoma)等的治療的抗癌劑。然而，這些紫杉系的抗癌劑也具有白細(xì)胞減少等的骨髄抑制、末梢神經(jīng)病變(peripheralnervedisorder)等的副作用，除此之外，水溶性也不足，不得不使用溶解輔助劑的克列莫佛(cremophor)，但由于出現(xiàn)嚴(yán)重的過敏癥狀，利用組胺h1、h2的拮抗劑的預(yù)處理是必不可少的，給藥時(shí)在臨床現(xiàn)場要求繁雜的作業(yè)。另外，也存在作為溶解輔助劑使用人血清白蛋白的情況，但有人血清白蛋白不足和艾滋病等的病毒感染的危險(xiǎn)等的擔(dān)憂。

現(xiàn)有的由低分子化合物形成的抗癌劑通過靜脈內(nèi)給藥、經(jīng)口給藥等進(jìn)行臨床應(yīng)用，但現(xiàn)狀是其有效利用率極低，只有所給藥量的極少一部分的量到達(dá)腫瘤。另外，由于分布于全身，結(jié)果，全身毒性成為問題，根據(jù)效果與毒性的權(quán)衡來決定用量，因此，大多數(shù)情況是產(chǎn)生全身毒性而無法給藥顯現(xiàn)藥效所需要的充分的量的抗癌劑。

近年來，以克服以上的問題為目的，開發(fā)了幾種藥物傳遞系統(tǒng)。例如其代表例是，利用將低分子的抗癌劑在物理上包埋于由生物相容性的原材料成分形成的磷脂脂質(zhì)體、高分子膠束或者水溶性高分子中或者在化學(xué)上形成共價(jià)鍵的方法的藥物傳遞系統(tǒng)(以下，稱為dds)。

在靜脈內(nèi)給藥用的脂質(zhì)體制劑的情況下，為了沒有問題地在毛細(xì)血管內(nèi)通過，另外，以能夠通過腫瘤附近的新生血管的方式，將顆粒尺寸控制在200～300nm，除此以外，脂質(zhì)體顆粒的膜表面還被分子量2,000左右的聚乙二醇(以下，稱為peg)覆蓋，因此，能夠基本避免向生物體內(nèi)的吞噬細(xì)胞的攝入。

在高分子膠束制劑的情況下，報(bào)告有：將粒徑控制在50nm，該顆粒的膜表面還被peg覆蓋，因此，基本避免向生物體內(nèi)的吞噬細(xì)胞的攝入，能夠容易地通過腫瘤附近的新生血管。

然而，現(xiàn)狀是使用了以上的納米微粒的制劑的血中半衰期比較短，對(duì)腫瘤的靶向也不充分，無法充分地達(dá)到本來的目的。

另一方面，最近開始了將抗癌劑與生物體適應(yīng)性高且水溶性也高的合成高分子的peg、特別是不容易形成高粘度溶液的4條鏈的peg(分子量為4萬)在化學(xué)上共價(jià)結(jié)合的衍生物的臨床應(yīng)用嘗試。

現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)

專利文獻(xiàn)

非專利文獻(xiàn)1：j.med.chem.1991年，34卷，2917-2919

非專利文獻(xiàn)2：j.med.chem.1993年，36卷，4813-4819

非專利文獻(xiàn)3：cylocide^tm注射劑藥品說明書

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

發(fā)明所要解決的課題

然而，因過于關(guān)注在血中的緩釋，該peg與抗癌劑之間的化學(xué)結(jié)合限于比較容易被血中內(nèi)的酯酶和羧化酶等的分解酶分解的酯鍵和氨基甲酸酯鍵，在血中的長時(shí)間穩(wěn)定性不足，對(duì)腫瘤組織的靶向效率也不太好，無法達(dá)到dds本來的目的。

另外，最近有利用不容易被酸和堿分解的氨基甲酸酯鍵使4條鏈的peg與作為抗癌劑(cpt－11)的活性成分的sn－38共價(jià)結(jié)合的報(bào)告，但這僅僅是在某種程度上克服了氨基甲酸酯鍵的弱點(diǎn)。而且，合成氨基甲酸酯鍵合體時(shí)的化學(xué)反應(yīng)的條件過于苛刻(強(qiáng)堿條件)，不適合于分子內(nèi)酯結(jié)合或?qū)A敏感的抗癌劑的結(jié)合。

因此，本發(fā)明的課題在于：提供一種嚴(yán)重的消化道毒性和骨髄毒性等的副作用少、抗腫瘤效果持續(xù)、能夠改善給藥方法、給藥次數(shù)的新型惡性腫瘤治療藥。

用于解決課題的方法

因此，本發(fā)明的發(fā)明人著眼于peg衍生物在血中的持續(xù)性和對(duì)腫瘤組織的高的集聚性，為了提高抗腫瘤劑的作用持續(xù)性，鑒于伴隨血中的酶分解的血中的緩釋性，研究了利用酯鍵或氨基甲酸酯鍵對(duì)作為cpt－11的活性物質(zhì)的sn－38等的羥基和聚乙二醇的修飾等，但血中的抗腫瘤活性物質(zhì)的釋放在人體中預(yù)想不到地早，需要大量投予該聚乙二醇衍生物，沒有獲得充分的作用持續(xù)性的提高效果和安全性提高。

進(jìn)一步重復(fù)研究的結(jié)果發(fā)現(xiàn)，使末端導(dǎo)入有甲基羧基的4條鏈的聚乙二醇與胞嘧啶衍生物、絲裂霉素c、紫杉醇等的抗腫瘤劑、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、舒尼替尼等的癌的分子靶向藥的伯氨基或仲氨基直接、或隔著β－丙氨酸等的氨基酸系間隔基形成酰胺鍵的式(1)所示的化合物，其抗腫瘤效果的持續(xù)性優(yōu)異，并且安全性也高，與現(xiàn)有的抗腫瘤劑相比，以少的給藥量和少的給藥次數(shù)實(shí)現(xiàn)更優(yōu)異的惡性腫瘤治療效果，完成了本發(fā)明。

即，本發(fā)明提供以下的〔1〕～〔11〕。

〔1〕一種通式(1)所示的化合物或其鹽，其中，

〔式中，r¹表示單鍵、－n(r³)(ch2)n1co－或－n(r⁴)(ch2)n2n(r⁵)co(ch2)n3co－(其中，r³表示氫原子或烷基，r⁴和r⁵相同或不同，表示氫原子或烷基，或者r⁴和r⁵一起表示碳原子數(shù)1～4的亞烷基，n1、n2和n3相同或不同，表示1～3的整數(shù))；

r²表示式(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)所示的基團(tuán)，

(其中，r⁶表示羥基、氰基或鹵原子，r⁷表示氫原子或鹵原子，r⁸表示氫原子或乙炔基，r⁹和r¹⁰相同或不同，表示氫原子或三烷基甲硅烷基，或者r⁹和r¹⁰一起表示四烷基甲硅烷氧基甲硅烷基，r¹¹表示鹵原子或乙炔基，r¹²表示氫原子或鹵原子，r¹³表示烷基或烷氧基烷基，r¹⁴表示烷氧基烷基或嗎啉代烷基，r¹⁵表示烷基，r¹⁶表示氫原子或烷?；?；

m表示10～1000的數(shù)；

箭頭表示鍵合部位?！场?/p>

〔2〕如〔1〕所述的化合物或其鹽，其中，r²為式(a)或(b)所示的基團(tuán)。

〔3〕如〔1〕或〔2〕所述的化合物或其鹽，其中，r²為式(a)所示的基團(tuán)。

〔4〕如〔1〕～〔3〕中任一項(xiàng)所述的化合物或其鹽，其中，r²為式(a)所示的基團(tuán)，r⁶為羥基、氰基或鹵原子，r⁷為氫原子或鹵原子，r⁸為氫原子或乙炔基，r⁹和r¹⁰為氫原子。

〔5〕如〔1〕～〔4〕中任一項(xiàng)所述的化合物或其鹽，其中，r¹為單鍵、－nh(ch2)n1co－、－nh(ch2)n2nhco(ch2)n3co－或

(n1、n2和n3與上述意義相同)。

〔6〕一種含有〔1〕～〔5〕中任一項(xiàng)所述的化合物或其鹽的醫(yī)藥。

〔7〕如〔6〕所述的醫(yī)藥，其特征在于：其為惡性腫瘤治療藥。

〔8〕一種醫(yī)藥組合物，其特征在于：含有〔1〕～〔5〕中任一項(xiàng)所述的化合物或其鹽、以及藥學(xué)上允許的鹽。

〔9〕〔1〕～〔5〕中任一項(xiàng)所述的化合物或其鹽在制造惡性腫瘤治療藥中的應(yīng)用。

〔10〕如〔1〕～〔5〕中任一項(xiàng)所述的化合物或其鹽，其特征在于：其用于惡性腫瘤治療。

〔11〕一種惡性腫瘤的治療方法，其特征在于：

給藥有效量的〔1〕～〔5〕中任一項(xiàng)所述的化合物或其鹽。

發(fā)明效果

本發(fā)明的化合物(1)具有優(yōu)異的抗惡性腫瘤效果，并且其作用持續(xù)性優(yōu)異，與現(xiàn)有的抗腫瘤劑相比，以少的給藥量(以原抗腫瘤劑的活性物質(zhì)的量換算)、少的給藥次數(shù)、少的給藥頻率發(fā)揮優(yōu)異的抗惡性腫瘤作用，并且副作用也少。因此，使用本發(fā)明的化合物(1)進(jìn)行惡性腫瘤治療時(shí)，患者的負(fù)擔(dān)和醫(yī)生的負(fù)擔(dān)均被減輕，并可以獲得優(yōu)異的抗惡性腫瘤效果。

附圖說明

圖1表示化合物(1a)的nmr譜圖。

圖2表示化合物(1b)的nmr譜圖。

圖3表示化合物(1c)的nmr譜圖。

圖4表示化合物(1d)的nmr譜圖。

圖5表示化合物(1e)的nmr譜圖。

圖6表示化合物(1f)的nmr譜圖。

圖7表示化合物(1g)的nmr譜圖。

圖8表示化合物(1h)的nmr譜圖。

圖9表示化合物(1i)的nmr譜圖。

圖10表示化合物(1j)的nmr譜圖。

圖11表示腫瘤移植后的腫瘤體積的變化。括號(hào)內(nèi)的給藥量表示換算成dfp－10917的給藥量。

圖12表示腫瘤移植后的體重變化率(％)。括號(hào)內(nèi)的給藥量表示換算成dfp－10917的給藥量。

圖13表示腫瘤移植后的腫瘤體積的變化。括號(hào)內(nèi)的給藥量表示換算成mmc的給藥量。

圖14表示腫瘤移植后的體重變化率(％)。括號(hào)內(nèi)的給藥量表示換算成mmc的給藥量。

圖15表示腫瘤移植后的腫瘤體積的變化。

圖16表示腫瘤移植后的體重變化率(％)。

具體實(shí)施方式

通式(1)中，r¹表示單鍵、－n(r³)(ch2)n1co－或－n(r⁴)(ch2)n2n(r⁵)co(ch2)n3co－(其中，r³表示氫原子或烷基，r⁴和r⁵相同或不同，表示氫原子或烷基，或者r⁴和r⁵一起表示碳原子數(shù)1～4的亞烷基，n1、n2和n3相同或不同，表示1～3的整數(shù))。

作為r³、r⁴和r⁵所示的基團(tuán)，優(yōu)選氫原子，在為烷基的情況下，可以列舉碳原子數(shù)1～6的直鏈或支鏈的烷基。其中，優(yōu)選碳原子數(shù)1～4的直鏈或支鏈的烷基，更優(yōu)選甲基、乙基、異丙基等。

另外，作為r⁴和r⁵一起形成的碳原子數(shù)1～4的亞烷基，可以列舉亞甲基、亞乙基、三亞甲基或四亞甲基，更優(yōu)選亞乙基。

作為r³，更優(yōu)選氫原子。作為r⁴和r⁵，更優(yōu)選兩者表示氫原子，或者r⁴和r⁵形成c1-3亞烷基。

n1、n2和n3分別表示1、2或3的整數(shù)，其中更優(yōu)選2。

如果列舉r¹的更優(yōu)選的例子，可以列舉單鍵、－nh(ch2)n1co－、－nh(ch2)n2nhco(ch2)n3co－或

r¹的進(jìn)一步優(yōu)選的具體例為單鍵、－nhch2ch2co－或

r²表示式(a)、(b)、(c)、(d)、(e)或(f)所示的基團(tuán)，

(其中，r⁶表示羥基、氰基或鹵原子，r⁷表示氫原子或鹵原子，r⁸表示氫原子或乙炔基，r⁹和r¹⁰相同或不同，表示氫原子或三烷基甲硅烷基，或者r⁹和r¹⁰一起表示四烷基甲硅烷氧基甲硅烷基，r¹¹表示鹵原子或乙炔基，r¹²表示氫原子或鹵原子，r¹³表示烷基或烷氧基烷基，r¹⁴表示烷氧基烷基或嗎啉代烷基，r¹⁵表示烷基，r¹⁶表示氫原子或烷?；?，箭頭表示鍵合部位。)。

r⁶表示羥基、氰基或鹵原子，特別優(yōu)選氰基。r⁷表示氫原子或鹵原子。其中，作為鹵原子，優(yōu)選氟原子。

r⁸表示氫原子或乙炔基。

作為r⁹和r¹⁰所示的三烷基甲硅烷基，可以列舉三甲基甲硅烷基、三乙基甲硅烷基、三異丙基甲硅烷基、二甲基丁基甲硅烷基、二甲基戊基甲硅烷基等。另外，作為r⁹和r¹⁰一起形成的四烷基甲硅烷氧基甲硅烷基，優(yōu)選下式(g)所示的基團(tuán)。

(其中，r¹⁷、r¹⁸、r¹⁹、r²⁰表示烷基，優(yōu)選甲基、乙基、異丙基、丁基、戊基等。)

r¹¹表示鹵原子或乙炔基。r¹²表示氫原子或鹵原子。

r¹³表示烷基或烷氧基烷基。其中，作為烷基，優(yōu)選碳原子數(shù)1～6的烷基，更優(yōu)選甲基。作為烷氧基烷基，優(yōu)選c1-6烷氧基c1-6烷基，更優(yōu)選甲氧基乙基、甲氧基丙基、乙氧基乙基等，特別優(yōu)選甲氧基乙基。

r¹⁴表示烷氧基烷基或嗎啉代烷基。其中，作為烷氧基烷基，優(yōu)選c1-6烷氧基c1-6烷基，更優(yōu)選甲氧基乙基、甲氧基丙基、乙氧基乙基，特別優(yōu)選甲氧基乙基。作為嗎啉代烷基，優(yōu)選嗎啉代c1-4烷基，更優(yōu)選嗎啉代丙基。

作為r¹⁵，優(yōu)選c1-6烷基，更優(yōu)選甲基、乙基、丙基、丁基。

作為r¹⁶，優(yōu)選氫原子或碳原子數(shù)2～6的烷酰基，更優(yōu)選氫原子或乙?；?。

式(a)、(b)、(c)、(d)、(e)和(f)所示的基團(tuán)為來自抗癌劑的基團(tuán)。式(a)為來自阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶系的抗癌劑的基團(tuán)。式(b)為來自絲裂霉素c的基團(tuán)。式(c)為來自吉非替尼、厄洛替尼等的egfr的酪氨酸激酶抑制劑的基團(tuán)。式(d)為來自舒尼替尼等的pdgfr的酪氨酸激酶抑制劑的基團(tuán)。式(e)為來自拉帕替尼等的egfr的酪氨酸激酶抑制劑的基團(tuán)。式(f)為來自紫杉醇、多西他賽等的紫杉系的抗癌劑的基團(tuán)。

作為式(a)所示的結(jié)構(gòu)的優(yōu)選例，可以列舉β－d－阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶、2’－氰基－2’－脫氧－β－d－阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶、2’－脫氧－2’,2’－二氟－β－d－阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶、3’－乙炔基－β－d－阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶。

另外，作為式(c)所示的基團(tuán)的具體例，可以列舉式(c1)或式(c2)所示的基團(tuán)。

作為式(f)所示的基團(tuán)的具體例，可以列舉式(f1)或式(f2)所示的基團(tuán)。

m表示10～1000的數(shù)。更優(yōu)選的m為100～500，進(jìn)一步優(yōu)選的m為200～300。其中，m為來自聚乙二醇基的數(shù)，通常為平均數(shù)。

作為本發(fā)明化合物(1)的鹽，只要是藥學(xué)上允許的鹽就沒有特別限定，可以列舉鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽等的無機(jī)酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、草酸鹽、蘋果酸鹽等的有機(jī)酸鹽。另外，在本發(fā)明化合物(1)或其鹽中，存在不對(duì)稱碳原子，因此，存在立體異構(gòu)體，包括它們的旋光物、對(duì)映體、它們的混合物。

本發(fā)明的化合物(1)或其鹽例如可以按照以下的反應(yīng)式制造。

(式中，x表示羥基、鹵原子或羧基的活性酯殘基，r¹、r²和m與上述意義相同)

即，通過使式(2)所示的四羧酸衍生物的羧基與式(3)所示的化合物的氨基結(jié)合，能夠制造本發(fā)明化合物(1)或其鹽。

四羧酸衍生物(2)例如可以通過使環(huán)氧乙烷與季戊四醇反應(yīng)，接著羧甲基化，然后將羧基鹵化或活性酯化而得到。作為鹵原子，可以列舉氯原子、溴原子。另外，作為活性酯，可以列舉琥珀酰亞胺、混合酸酐等。

化合物(3)中，r¹為－n(r³)(ch2)n1co－或－n(r⁴)(ch2)n2n(r⁵)co(ch2)n3co－的化合物，例如，可以通過使hn(r³)(ch2)n1coy或hn(r⁴)(ch2)n2n(r⁵)co(ch2)n3coy與r¹為單鍵的化合物(3)反應(yīng)而得到。其中，r³、r⁴、r⁵、n1、n2和n3的意義與上述意義相同，y表示羥基、鹵原子或活性酯殘基。

該反應(yīng)是羧酸酰胺形成反應(yīng)，可以在堿基的存在下，使用hbtu、dcc等的縮合劑進(jìn)行。

四羧酸衍生物(2)與化合物(3)的反應(yīng)是羧酸酰胺形成反應(yīng)，可以在通常的酰胺化反應(yīng)條件下實(shí)施。例如，可以在三乙胺、n,n－二甲基苯胺等的胺類的存在下，在0℃～150℃的條件下進(jìn)行。

反應(yīng)結(jié)束后，利用清洗、再結(jié)晶、各種色譜法等的方法對(duì)目標(biāo)物進(jìn)行精制、分離。

本發(fā)明的化合物(1)或其鹽具有優(yōu)異的抗惡性腫瘤活性，體重減少等的副作用低，并且不需要多達(dá)數(shù)小時(shí)以上的持續(xù)注入就可以獲得優(yōu)異的抗惡性腫瘤效果。因此，作為對(duì)患者和醫(yī)生的負(fù)擔(dān)少的優(yōu)異的惡性腫瘤治療藥是有用的。

關(guān)于本發(fā)明的化合物(1)或其鹽，peg與抗癌劑之間的結(jié)合只是酰胺鍵，能夠避免由于酯酶或羧化酶等的血中的分解酶引起的迅速的分解，除此以外，還與容易成為吞噬細(xì)胞的攻擊對(duì)象的微粒制劑的脂質(zhì)體或高分子膠束不同，由于其自身的分子尺寸非常小，并且因peg的特性也不容易受到吞噬細(xì)胞的攻擊，在血中頗為穩(wěn)定，而且因分子量大，腎排泄速度也極慢，因此，對(duì)腫瘤的靶向是高效率的。作為其結(jié)果，與現(xiàn)有的利用靜脈內(nèi)給藥或經(jīng)口給藥等方法進(jìn)行的低分子抗癌劑的情況相比，不僅能夠使給藥量變得極少，并且使給藥次數(shù)也大大減少，而且，目前依賴于長時(shí)間的持續(xù)點(diǎn)滴的抗癌劑的每一次的給藥時(shí)間也可以在30分鐘左右內(nèi)完成。

作為本發(fā)明的化合物(1)或其鹽的適用對(duì)象的惡性腫瘤，可以列舉頭頸部癌、食道癌、胃癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肝癌、膽囊–膽管癌、膽道癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、卵巢癌、子宮頸癌、子宮癌、腎癌、膀胱癌、前列腺癌、睪丸瘤、骨與軟組織肉瘤、白血病、惡性淋巴瘤、多發(fā)性骨髓瘤、皮膚癌、腦腫瘤、間皮瘤等。

在將本發(fā)明的化合物(1)或其鹽用作醫(yī)藥時(shí)，根據(jù)需要，可以配合藥學(xué)上允許的載體而制成各種形態(tài)的醫(yī)藥組合物。作為醫(yī)藥組合物的形態(tài)，可以列舉口服劑、注射劑、栓劑、貼劑、軟膏劑，優(yōu)選制成注射劑。

作為藥學(xué)上允許的載體，可以使用作為制劑原材料慣用的各種有機(jī)或者無機(jī)載體物質(zhì)，作為固狀制劑中的賦形劑、結(jié)合劑、崩解劑、光滑劑、著色劑、液狀制劑中的溶劑、溶解輔助劑、懸浮劑、等滲劑、緩沖劑、無痛劑等而配合。另外，根據(jù)需要，也可以使用防腐劑、抗氧化劑、著色劑、甜味劑、穩(wěn)定劑等的制劑添加物。

在制備經(jīng)口用固狀制劑時(shí)，可以在向本發(fā)明的化合物(1)中添加賦形劑、根據(jù)需要的賦形劑、結(jié)合劑、崩解劑、光滑劑、著色劑、矯味矯臭劑等后，利用常用方法制造片劑、包衣片劑、顆粒劑、散劑、膠囊劑等。

在制備注射劑時(shí)，可以向本發(fā)明的化合物(1)中添加ph調(diào)節(jié)劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑、等滲劑、局部麻醉劑等，利用常用方法制造皮下、肌肉內(nèi)和靜脈內(nèi)用注射劑。

在將本發(fā)明的醫(yī)藥用于血液系統(tǒng)的惡性腫瘤的治療時(shí)，優(yōu)選以1小時(shí)以內(nèi)的靜脈內(nèi)給藥的方式給藥，或者稀釋于生理鹽水或葡萄糖注射液等，以數(shù)小時(shí)以內(nèi)的點(diǎn)滴靜注的方式給藥。

實(shí)施例

以下，利用實(shí)施例、試驗(yàn)例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行具體說明，但這些只是出于例示的目的所記載的例子，并不限定本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

在氮?dú)夥障拢瑢?－(2’－氰基－2’－脫氧－β－d－阿拉伯呋喃糖基)胞嘧啶鹽酸鹽5.0摩爾、三乙胺10.0摩爾和二甲基甲酰胺8摩爾加入反應(yīng)容器中，再加入四(琥珀酰亞胺基羧甲基聚乙二醇)季戊四醇1.0摩爾。加熱到100℃，反應(yīng)攪拌3小時(shí)。冷卻到20～25℃后，將反應(yīng)混合物投入甲基叔丁基醚100ml中，攪拌1小時(shí)，過濾原料。以50～60°加入乙醇，攪拌后，冷卻到20±5℃，攪拌16小時(shí)，用甲基叔丁基醚清洗，重復(fù)該操作，將乙醇溶液冷卻，以白色粉末的形式獲得化合物(1a)(m＝平均230)(收率88％)。熔點(diǎn)54℃。將化合物(1a)的nmr譜圖示于圖1。

實(shí)施例2

(1)在氮?dú)夥障?，?－(2’－氰基－2’－脫氧－β－d－阿拉伯呋喃糖基)胞嘧啶鹽酸鹽1摩爾和吡啶100ml投入反應(yīng)容器中，以20～25℃滴加二氯四異丙基二硅氧烷1.2摩爾。加熱到45±5℃，攪拌2小時(shí)。以20～25℃加入己烷，分離作為固體的生成物。以20～25℃投入水中，攪拌1小時(shí)30分鐘，過濾后用水和己烷清洗，蒸發(fā)干燥為固體，獲得化合物(3a)。

(2)在氮?dú)夥障?，向反?yīng)容器中投入n－叔丁氧基羰基丙氨酸1.2摩爾、hbtu1.5摩爾、三乙胺2.0摩爾和二氯甲烷300ml，以20～25℃攪拌1小時(shí)。以20～25℃添加化合物(3a)1摩爾，加熱到35±5℃，攪拌16小時(shí)。添加飽和nahco3水溶液，分離有機(jī)相。分別用飽和nahco3水溶液、飽和nh4cl和生理鹽水清洗有機(jī)相，用無水na2so4干燥。過濾后減壓濃縮，應(yīng)用硅膠柱色譜法(用乙酸乙酯洗脫)，獲得化合物(3b)(收率77％)。

(3)在氮?dú)夥障拢蚍磻?yīng)容器中投入化合物(3b)1摩爾、乙酸2摩爾和四氫呋喃200ml，冷卻到0±5℃后，以0±5℃加入四正丁基氟化銨(tbaf)1.5摩爾。反應(yīng)1小時(shí)后，蒸餾除去溶劑。

在氮?dú)夥障?，向反?yīng)容器中投入上述反應(yīng)混合物和乙酸乙酯300ml，以25±5℃加入hcl/乙酸乙酯2m。起始物質(zhì)快速地溶解于濃hcl/乙酸乙酯溶液中，5分鐘后開始分離作為固體成分的目標(biāo)物。攪拌1小時(shí)，過濾后用乙酸乙酯清洗，獲得化合物(3c)。

(4)與實(shí)施例1同樣使化合物(3c)和四(琥珀酰亞胺基羧甲基聚乙二醇)季戊四醇醚反應(yīng)，以白色粉末的形式獲得目標(biāo)化合物(1b)(m＝平均230)(收率83％)。將化合物(1b)的nmr譜圖示于圖2。

實(shí)施例3

(1)在氮?dú)夥障?，將?shí)施例2(1)所得到的化合物(3a)1摩爾、琥珀酰酐4摩爾和吡啶50ml投入反應(yīng)容器中，加熱到40±5℃，攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)混合物添加至水和乙酸乙酯的混合物中，用1m鹽酸將ph調(diào)至5，以30±5℃攪拌30分種。分離有機(jī)相，從水相用乙酸乙酯提取3次，合并有機(jī)相，用生理鹽水清洗。用無水na2so4干燥，過濾后，將濾液減壓濃縮后干燥，獲得化合物(3d)。

(2)在氮?dú)夥障?，將化合?3d)1摩爾、hbtu2摩爾、三乙胺4摩爾和二甲基甲酰胺100ml投入反應(yīng)容器中，以30±5℃攪拌5分鐘。添加哌啶4摩爾，以30±5℃攪拌1小時(shí)。加入乙酸乙酯和水，分離有機(jī)相，將有機(jī)相用生理鹽水清洗2次，用無水na2so4干燥。過濾后將濾液減壓濃縮，應(yīng)用硅膠柱色譜法，用二氯甲烷/meoh洗脫。將溶出部分減壓干燥為固體，獲得化合物(3e)。

(3)與實(shí)施例1同樣使化合物(3e)和四(琥珀酰亞胺基羧甲基聚乙二醇)季戊四醇醚反應(yīng)，以白色粉末的形式獲得目標(biāo)化合物(1c)(m＝平均230)(收率94％)。將化合物(1c)的nmr譜圖示于圖3。

實(shí)施例4

(1)在氮?dú)夥障?，向反?yīng)容器中投入實(shí)施例3(2)的化合物(3e)1摩爾、乙酸2.3摩爾和二甲基甲酰胺50ml，冷卻到0±5℃。以0±5℃加入四正丁基氟化銨(tbaf)1.6摩爾，攪拌1小時(shí)，制造化合物(3g)。

(2)與實(shí)施例1同樣使化合物(3g)和四(琥珀酰亞胺基羧甲基聚乙二醇)季戊四醇醚反應(yīng)，獲得化合物(1d)(m＝平均230)。將化合物(1d)的nmr譜圖示于圖4。

實(shí)施例5

在氮?dú)夥障?，將?羧甲基聚乙二醇)季戊四醇1.0摩爾、絲裂霉素c4.8摩爾、hbtu5.0摩爾、三乙胺8摩爾、二甲基甲酰胺300ml加入反應(yīng)容器中，以40±5℃反應(yīng)3小時(shí)。冷卻到20～25℃后，與實(shí)施例1同樣進(jìn)行處理，以白色粉末的形式獲得化合物(1e)(m＝平均230)(收率91.4％)。將化合物(1e)的nmr譜圖示于圖5。

實(shí)施例6

(1)使用絲裂霉素c代替化合物(3a)，與實(shí)施例3(1)同樣操作，獲得化合物(3h)。

(2)使用化合物(3h)代替化合物(3e)，與實(shí)施例4(1)同樣操作，獲得化合物(3i)。

(3)使用化合物(3i)代替化合物(3g)，與實(shí)施例4(2)同樣操作，獲得化合物(1f)(m＝平均230)。將化合物(1f)的nmr譜圖示于圖6。

實(shí)施例7

使用吉西他濱和四(琥珀酰亞胺基羧甲基聚乙二醇)季戊四醇，與實(shí)施例1同樣操作，以白色粉末的形式獲得化合物(1g)(m＝平均230)(收率82.3％)。熔點(diǎn)57℃。將¹h－nmr譜圖示于圖7。

實(shí)施例8

使用舒尼替尼的脫乙基體和四(琥珀酰亞胺基羧甲基聚乙二醇)季戊四醇，與實(shí)施例1同樣操作，以黃色粉末的形式獲得化合物(1h)(m＝平均230)(收率87％)。熔點(diǎn)55℃。將¹h－nmr譜圖示于圖8。

實(shí)施例9

使用拉帕替尼、四(羧甲基聚乙二醇)季戊四醇和hbtu，與實(shí)施例4同樣操作，以白色粉末的形式獲得化合物(1i)(收率87.8％)。熔點(diǎn)56℃。將¹h－nmr譜圖示于圖9。

實(shí)施例10

(1)使三氟乙酸與紫杉醇反應(yīng)，使紫杉醇的叔丁氧基羰基脫離。

(2)使用紫杉醇叔丁氧基羰基脫離體和四(琥珀酰亞胺基羧甲基聚乙二醇)季戊四醇，與實(shí)施例1同樣操作，獲得化合物(1j)(收率84.2％)。將¹h－nmr圖示于圖10。

試驗(yàn)例1

向balb/c裸鼠的右側(cè)腹部移植5×10⁶個(gè)細(xì)胞的胰腺癌細(xì)胞，7天后在平均腫瘤達(dá)到100mm³時(shí)開始藥物給藥。從藥物給藥至29天后測(cè)定小鼠的體重和腫瘤體積。將其結(jié)果示于圖11、圖12和表1。關(guān)于1－(2’－氰基－2’－脫氧－β－d－阿拉伯呋喃糖基)胞嘧啶鹽酸鹽(dfp－10917)，使用埋入小鼠的體內(nèi)的微型泵，連續(xù)2周以4.5mg/kg/day進(jìn)行向皮下的持續(xù)注入。另一方面，每周1次以100mg/kg、200mg/kg或300mg/kg靜脈內(nèi)給藥化合物(1a)。該化合物(1a)的給藥量換算成dfp－10197為每周1次以2.4mg/kg、4.8mg/kg和7.2mg/kg給藥。關(guān)于對(duì)照，給藥乙酸鈉的緩沖液(ph＝5.0)。

從圖11和圖12可以確認(rèn)，通過每周1次的靜脈內(nèi)給藥，化合物(1a)幾乎沒有使體重減少，顯示優(yōu)異的腫瘤治療效果。

[表1]

注：a.平均±sem；b.tgl：腫瘤生長抑制.c.：與空白對(duì)照之比.

p值：g2vs.g3＝0.027，g2vs.g4＝0.001，g3vs.g4＝0.004.

括號(hào)內(nèi)的給藥量表示換算成dfp-10917的給藥量。

試驗(yàn)例2

與試驗(yàn)例1同樣操作，研究絲裂霉素c和化合物(1e)的抗腫瘤作用。每周一次以3mg/kg/day靜脈內(nèi)給藥絲裂霉素c(mmc)。另一方面，每周1次以25mg/kg、50mg/kg、100mg/kg和200mg/kg靜脈內(nèi)給藥化合物(1e)。該化合物(1e)的給藥量換算成mmc為每周1次以0.8mg/kg、1.7mg/kg、3.3mg/kg和6.7mg/kg給藥。

從圖13和圖14可以確認(rèn)，通過每周1次的靜脈內(nèi)給藥，化合物(1e)幾乎沒有使體重減少，顯示了優(yōu)異的腫瘤治療效果。

試驗(yàn)例3

向balb/c裸鼠的右側(cè)腹部移植5×10⁶個(gè)細(xì)胞的人肺癌細(xì)胞a549，14天后在平均腫瘤達(dá)到127mm³時(shí)開始藥物給藥?；衔?1a)按1周1次以200mg/kg(換算成dfp－10917的量為4.8mg/kg)靜脈內(nèi)給藥，作為肺癌的標(biāo)準(zhǔn)藥的培美曲塞，按1周1次以300mg/kg腹腔內(nèi)給藥。關(guān)于對(duì)照，1周1次靜脈內(nèi)給藥生理鹽水。觀察2周(合計(jì)2次給藥)。

作為其結(jié)果，化合物(1a)以換算成dfp－10917的量4.8mg/kg給藥，顯示了與培美曲塞300mg/kg給藥組同等的腫瘤治療效果。

[表2]

*：換算成dfp-10917的給藥量

試驗(yàn)例4

向balb/c裸鼠的右側(cè)腹部移植1×10⁷個(gè)細(xì)胞的人乳腺癌細(xì)胞bt474，與試驗(yàn)例3同樣操作，關(guān)于藥物給藥的dfp－10917和化合物(1a)，1周1次靜脈內(nèi)給藥計(jì)2次。關(guān)于對(duì)照，1周1次給藥生理鹽水。

作為其結(jié)果，如(表3)所示，化合物(1a)與dfp－10917本身相比，盡管以17.6/200的換算成dfp－10917的量給藥，也顯示了與吉西他濱同等的抗腫瘤效果。

[表3]

*：換算成dfp－10917的給藥量

試驗(yàn)例5

向balb/c裸鼠的右側(cè)腹部移植5×10⁶個(gè)細(xì)胞的人胰腺癌細(xì)胞panc－1，與試驗(yàn)例3同樣操作，進(jìn)行藥物給藥。關(guān)于化合物(1g)，1周1次靜脈內(nèi)給藥計(jì)2次，或者1周2次靜脈內(nèi)給藥。關(guān)于吉西他濱，將100mg/kg在3天內(nèi)分4次給藥，并將其靜脈內(nèi)給藥總計(jì)4次。關(guān)于對(duì)照，1周1次給藥生理鹽水。

作為其結(jié)果，如(表4)所示，化合物(1g)與吉西他濱本身相比，盡管以1/35～1/40的換算成吉西他濱的量給藥，也顯示了吉西他濱的約1/2的抗腫瘤效果。

[表4]

*：換算成吉西他濱的給藥量

試驗(yàn)例5

向balb/c裸鼠的右側(cè)腹部移植人肺癌細(xì)胞a549細(xì)胞，11天后在平均腫瘤達(dá)到200mm³時(shí)開始給藥。將給藥療程示于表5、表6。

將其結(jié)果示于表5、表6和圖15、圖16。

[表5]

*：換算成舒尼替尼的量

[表6]

*1：換算成拉帕替尼的量

根據(jù)表5，化合物(1h)以換算成舒尼替尼的量4/50～8/50的給藥量，顯示了與舒尼替尼脫乙基體同等的抗腫瘤效果。另外，根據(jù)表6和圖15，化合物(1i)以換算成拉帕替尼的量11.6/100～17.4/100的給藥量，顯示了比拉帕替尼更優(yōu)異的抗腫瘤效果。

還可以確認(rèn)，化合物(1h)和化合物(1i)以上述的給藥量看不到任何體重減少，安全性也高(圖16)。

試驗(yàn)例6

向balb/c裸鼠的右側(cè)腹部移植1×10⁷個(gè)細(xì)胞的人乳腺癌細(xì)胞bt474，在腫瘤體積成為100～150mm³時(shí)進(jìn)行藥物給藥。給藥為1周1次，給藥2周。

作為其結(jié)果，如(表7)所示，可以確認(rèn)化合物(1j)顯示36％～37.5％的腫瘤增殖抑制率，顯示與對(duì)照的紫杉醇的29.8％同等或其以上的效果，是效果與安全性的平衡優(yōu)異的化合物，還可以確認(rèn)，其自身具有高的水溶性，與難溶于水的紫杉醇相比，可以成為能夠大大改善臨床上的給藥方法的新型惡性腫瘤治療藥。

[表7]