相關申請的交叉引用

本專利申請根據(jù)35u.s.c.§119(e)要求于2014年12月22日提交的，名稱為“fluorinatedsiliconefilmforoxygenpermeablematerial”的美國序列號62/095,116，以及于2015年12月21日提交的us14/976,372的權益，所述申請的內容以引用的方式全文并入本文

本發(fā)明一般涉及氣體可滲透性材料以及對細胞培養(yǎng)儀器和細胞培養(yǎng)方法的應用。

背景技術：

體外細胞培養(yǎng)是細胞通過其在受控條件下生長的復雜過程，所述受控條件一般在其天然環(huán)境之外，但盡可能接近其天然的體內條件。在實踐中，細胞培養(yǎng)指源自多細胞真核生物的細胞，尤其是動物細胞的培養(yǎng)。然而，還存在植物、真菌、昆蟲和微生物的培養(yǎng)，所述微生物包括病毒、細菌和原生生物。

體外細胞培養(yǎng)提供了藥理學、生理學和毒理學中的研究和應用所必需的材料。這包括需要當細胞培養(yǎng)必要時的生物加工和細胞療法。

細胞在細胞培養(yǎng)箱中在合適的溫度和氣體混合物中生長并且維持。通常，哺乳動物細胞在37℃下溫育，其中ph維持在7.2和7.4之間。通常使用在培養(yǎng)基中的碳酸氫鹽緩沖體系與按體積計大約5-7％二氧化碳的培養(yǎng)箱氣氛一起來控制ph。二氧化碳與水反應以形成碳酸，所述碳酸反過來又與培養(yǎng)基中的碳酸氫根離子相互作用，以形成將ph維持接近生理水平的緩沖體系。氧對細胞代謝和生長是必需的。培養(yǎng)條件對于每種細胞類型可變，并且對于特定細胞類型，條件的變化可導致不同的表型。

各種細胞類型在培養(yǎng)中生長，包括結締組織細胞、骨骼細胞、心臟細胞、上皮細胞、神經(jīng)細胞、內分泌細胞、免疫細胞、淋巴細胞、黑素細胞和許多類型的腫瘤細胞。類似地，取決于細胞的特定生長需要和生長條件，各種培養(yǎng)基是可獲得的。

商購可得的氣體可滲透性細胞培養(yǎng)袋目前是用于細胞培養(yǎng)的標準裝置形式。用氣體可滲透性膜構造的細胞培養(yǎng)袋有利地提供用于氣體交換的大的表面積，同時維持封閉的體系。一次性使用還幫助降低細胞培養(yǎng)和環(huán)境污染的風險。

細胞培養(yǎng)袋從origenbiomedicalgroup(origenpermalife^tmbags)、baxter(與美國專利號4,829,002、4,937,194、5,935,847、6,297,046b1相關的x-fold^tm)、medtronic(si-culture^tm，美國專利號5,686,304)、biovectra(vectracell^tm)、以及americanfluoroseal(由美國專利號4,847,462和4,945,203涵蓋的vuelife^tmculturebagsystem)商購可得。

氣體可滲透性膜應根據(jù)各種特性進行選擇，所述特性包括氣體可滲透性、濕蒸汽透過性、對于所需細胞與細胞的相互作用改變的能力、光學透明度、物理強度等等。存在描述已成功地用于細胞培養(yǎng)的氣體可滲透性材料類型的廣泛多樣信息。

在各種橡膠材料中，在大多數(shù)情況下，硅橡膠在其電性質、低成本、精密成型性以及反復彎曲中的耐久性和釋放遷移方面是優(yōu)選的。

用于細胞培養(yǎng)袋的硅酮膜具有高的氧可滲透性、良好的光學透明度、良好的抗穿透性、通常不結合細胞，并且可容易地制成各種各樣的形狀。在其中需要氣體轉移的表面區(qū)域中，硅酮膜可小于約3mm、約2mm、約1mm或約0.8mm。材料的最佳選擇取決于應用。

含氟聚合物膜具有使得其成為培養(yǎng)袋的普遍選擇的期望特性。與硅酮相比，含氟聚合物膜是更生物學、化學和免疫學惰性的，以及是疏水性的。含氟聚合物膜如fep(氟化乙烯-丙烯)不會在免疫細胞和祖先免疫細胞中引發(fā)免疫應答。然而，含氟聚合物膜更昂貴，比硅酮膜氣體可滲透性更小，并且難以粘附至其他聚合物。

因此，需要減輕單獨使用硅酮或含氟聚合物用于細胞培養(yǎng)袋的缺點。

技術實現(xiàn)要素：

在一個方面，本發(fā)明提供了氧可滲透性組合物。在另一個方面，本發(fā)明提供了具有第一彈性體層和第二流體接觸層的兩部分復合材料，其中所述第二流體接觸層具有小于1mg/cm²的在水中的總有機碳(toc)。具有低toc的第二流體接觸層可為含氟聚合物，并且第一彈性體層和第二含氟聚合物層粘附在一起。更特別地，本文公開的實施例涉及能夠粘結到彈性體橡膠的表面的含氟聚合物膜。含氟聚合物涂層顯示出高的粘結強度，伴隨或不伴隨粘合劑的使用。

在另一個實施例中，外部彈性體層是天然聚異戊二烯橡膠(nr)、合成聚異戊二烯橡膠(ir)、聚丁二烯橡膠(br)、氯丁橡膠(cr)、丁基橡膠(iir)、鹵化丁基橡膠(ciir、biir)、丁苯橡膠(sbr)、丁腈橡膠(nbr)和氫化丁腈橡膠(hnbr)、乙丙橡膠(epm)、三元乙丙橡膠(epdm)、表氯醇橡膠(eco)、聚丙烯酸酯橡膠(acm、abr)、硅橡膠(si、q、vmq)、氟硅橡膠(fsr、fvmq)、含氟彈性體(fkm、fepm)、全氟彈性體(ffkm)、聚醚嵌段酰胺(peba)、氯磺化聚乙烯(csm)、乙烯-乙酸乙烯酯(eva)、環(huán)烯烴共聚物、聚烯烴彈性體、彈性體pet或其混合物。

在另一個實施例中，外部彈性體層是聚甲基戊烯聚合物(pmp)。

在另一個實施例中，氧可滲透性膜包括外部硅橡膠層和內部含氟聚合物層，其中內部含氟聚合物層涂布在外部硅橡膠層上。

在另一個實施例中，氧可滲透性膜的硅橡膠是高稠度橡膠(hcr)、氟硅橡膠(fsr)、液體硅橡膠(lsr)、或室溫硫化的橡膠(rtv)、熱塑性硅橡膠(tpe)、鉑固化的硅橡膠或過氧化物固化的硅橡膠。

在另一個實施例中，氧可滲透性膜的硅橡膠是熱固性的、固化的、硫化的、催化的或注射成型的。

在另一個實施例中，膜的含氟聚合物層是氟化乙烯-丙烯(fep)、聚四氟乙烯(ptfe)、四氟乙烯-全氟(丙基乙烯基醚)(pfa)、聚偏氟乙烯，六氟丙烯/四氟乙烯/亞乙烯基共聚物(thv)或具有官能化聚合物端基的全氟(1-丁烯基乙烯基醚)均環(huán)聚合物(homocyclopolymer)。

在另一個實施例中，氧可滲透性膜的彈性體例如pmp或硅酮層和含氟聚合物層是粘結的。

在再一個實施例中，氧可滲透性膜的彈性體(例如pmp或硅酮)層和含氟聚合物層的粘結是通過涂布、rf焊接、超聲波焊接、熱棒焊接、化學粘結、粘合劑粘結、熱熔粘結、溶劑焊接、激光焊接、電暈放電、輻射、層壓(例如通過極熱、帶)或熔融層壓、蝕刻、等離子體處理、潤濕、粘合劑、輻射、擠出、共擠出或其組合進行的。

在另一個實施例中，氧可滲透性容器包括外部彈性體層和具有低toc的內部流體接觸層。在一個方面，流體接觸層是含氟聚合物層，其中內部含氟聚合物層粘附到容器的外部彈性體層。

在另一個實施例中，容器的外部彈性體層是天然聚異戊二烯橡膠(nr)、合成聚異戊二烯橡膠(ir)、聚丁二烯橡膠(br)、氯丁橡膠(cr)、丁基橡膠(iir)、鹵化丁基橡膠(ciir、biir)、丁苯橡膠(sbr)、丁腈橡膠(nbr)和氫化丁腈橡膠(hnbr)、乙丙橡膠(epm)、三元乙丙橡膠(epdm)、表氯醇橡膠(eco)、聚丙烯酸酯橡膠(acm、abr)、硅橡膠(si、q、vmq)、氟硅橡膠(fsr、fvmq)、含氟彈性體(fkm、fepm)、全氟彈性體(ffkm)、聚醚嵌段酰胺(peba)、氯磺化聚乙烯(csm)、乙烯-乙酸乙烯酯(eva)、環(huán)烯烴共聚物、聚烯烴彈性體、彈性體pet或其組合。

在另一個實施例中，容器的外部彈性體層是聚甲基戊烯聚合物(pmp)。

在另一個實施例中，容器的外部彈性體層是硅橡膠。

在再一個實施例中，氧可滲透性容器的硅橡膠是高稠度橡膠(hcr)、氟硅橡膠(fsr)、液體硅橡膠(lsr)、或室溫硫化的橡膠(rtv)、熱塑性硅橡膠(tpe)、鉑固化的硅橡膠或過氧化物固化的硅橡膠。

在再一個實施例中，氧可滲透性容器的硅橡膠是熱固性的、固化的、硫化的、催化的或注射成型的。

在另一個實施例中，容器的含氟聚合物層是氟化乙烯-丙烯(fep)、聚四氟乙烯(ptfe)、聚偏二氟乙烯(pvdf)、四氟乙烯-全氟(丙基乙烯基醚)(pfa)、聚偏氟乙烯(pvf)、聚三氟氯乙烯(pctfe)、四氟乙烯/六氟丙烯/乙烯共聚物(hte)、三氟氯乙烯/偏二氟乙烯共聚物、三氟氯乙烯/六氟丙烯、乙烯/三氟氯乙烯共聚物(ectfe)、乙烯/三氟乙烯共聚物、乙烯/四氟乙烯共聚物(etfe)、四氟乙烯/丙烯共聚物(tfe/p)、四氟乙烯/六氟丙烯共聚物(fep/hfp)、六氟丙烯/四氟乙烯/亞乙烯基共聚物(thv)或具有官能化聚合物端基的全氟(1-丁烯基乙烯基醚)均環(huán)聚合物。

在另一個實施例中，氧可滲透性容器的彈性體層例如硅酮或pmp層以及含氟聚合物層是粘結的。

在另一個實施例中，氧可滲透性容器的粘結是通過涂布、rf焊接、超聲波焊接、熱棒焊接、化學粘結、粘合劑粘結、熱熔粘結、溶劑焊接、激光焊接、電暈放電、輻射、層壓(例如通過極熱、帶)或熔融層壓、蝕刻、等離子體處理、潤濕、粘合劑、輻射、擠出、共擠出或其組合進行的。

在另一個實施例中，氧可滲透性容器包括袋、燒瓶或管。

在另一個實施例中，氧可滲透性袋、燒瓶或管含有可密封的進入端口。

本發(fā)明提供了在氧可滲透性容器中培養(yǎng)細胞的方法。該方法包括以下步驟：a)將培養(yǎng)基加入容器中，和b)將細胞加入容器中，其中所述容器包括外部彈性體層、具有低toc的內部流體接觸層。在一個方面，內部流體接觸層是含氟聚合物層，其中所述內部含氟聚合物層涂布到外部彈性體層上，并且其中細胞和培養(yǎng)基與內部含氟聚合物層接觸。

在該方法的另一個實施例中，容器的外部彈性體層是天然聚異戊二烯橡膠(nr)、合成聚異戊二烯橡膠(ir)、聚丁二烯橡膠(br)、氯丁橡膠(cr)、丁基橡膠(iir)、鹵化丁基橡膠(ciir、biir)、丁苯橡膠(sbr)、丁腈橡膠(nbr)和氫化丁腈橡膠(hnbr)、乙丙橡膠(epm)、三元乙丙橡膠(epdm)、表氯醇橡膠(eco)、聚丙烯酸酯橡膠(acm、abr)、硅橡膠(si、q、vmq)、氟硅橡膠(fsr、fvmq)、含氟彈性體(fkm、fepm)、全氟彈性體(ffkm)、聚醚嵌段酰胺(peba)、氯磺化聚乙烯(csm)、乙烯-乙酸乙烯酯(eva)、環(huán)烯烴共聚物、聚烯烴彈性體、彈性體pet或其組合。

在該方法的另一個實施例中，容器的外部彈性體層是聚甲基戊烯聚合物(pmp)。

在該方法的另一個實施例中，容器的外部彈性體層是硅橡膠。

在該方法的再一個實施例中，氧可滲透性容器的硅橡膠是高稠度橡膠(hcr)、氟硅橡膠(fsr)、液體硅橡膠(lsr)、或室溫硫化的橡膠(rtv)、熱塑性硅橡膠(tpe)、鉑固化的硅橡膠或過氧化物固化的硅橡膠。

在該方法的再一個實施例中，氧可滲透性容器的硅橡膠是熱固性的、固化的、硫化的、催化的或注射成型的。

在該方法的另一個實施例中，容器的含氟聚合物層是氟化乙烯-丙烯(fep)、聚四氟乙烯(ptfe)、3m^tmdyneon^tmtfm^tm改性ptfe、聚偏二氟乙烯(pvdf)、四氟乙烯-全氟(丙基乙烯基醚)(pfa)、聚偏氟乙烯(pvf)、聚三氟氯乙烯(pctfe)、四氟乙烯/六氟丙烯/乙烯共聚物(hte)、三氟氯乙烯/偏二氟乙烯共聚物、三氟氯乙烯/六氟丙烯、乙烯/三氟氯乙烯共聚物(ectfe)、乙烯/三氟乙烯共聚物、乙烯/四氟乙烯共聚物(etfe)、四氟乙烯/丙烯共聚物(tfe/p)、四氟乙烯/六氟丙烯共聚物(fep/hfp)、六氟丙烯/四氟乙烯/亞乙烯基共聚物(thv)或具有官能化聚合物端基的全氟(1-丁烯基乙烯基醚)均環(huán)聚合物。

在該方法的另一個實施例中，氧可滲透性容器的彈性體例如pmp或硅酮層以及含氟聚合物層是粘結的。

在該方法的另一個實施例中，氧可滲透性容器的粘結是通過化學粘結、粘合劑粘結、熱熔粘結、溶劑粘結、激光焊接、表面處理、擠出、共擠出、涂布、層壓、帶層壓、涂布或其組合進行的。

在該方法的另一個實施例中，氧可滲透性容器包括袋、燒瓶或管。

在該方法的另一個實施例中，氧可滲透袋、燒瓶或管包含可密封的進入端口。

在培養(yǎng)細胞的方法的另一個實施例中，步驟a)將培養(yǎng)基加入容器中和b)將細胞加入容器中是可互換的。

在培養(yǎng)細胞的方法的另一個實施例中，步驟a)和b)隨后為容器的溫育。

雖然公開了多個實施例，但根據(jù)下文詳細描述，本發(fā)明的另外其他實施例對于本領域的技術人員將變得顯而易見。如顯而易見的，本發(fā)明能夠在各個明顯方面進行修改，全都不背離本發(fā)明的精神和范圍。相應地，詳細描述被視為舉例說明性的而不是限制性的。

附圖說明

圖1顯示了含氟聚合物涂布的彈性體膜的側視圖。

圖2顯示了含氟聚合物涂布的彈性體培養(yǎng)容器。

圖3顯示氧初始進入現(xiàn)有fep袋內的圖示。

圖4顯示了具有氣體可滲透性層壓材料的原型袋中氧的初始進入的圖示。

圖5顯示了用氣體可滲透性層壓材料制成的原型袋中的平衡方法的圖示。

具體實施方式

在說明書和權利要求書中，術語“包括”和“包含”是開放式術語，并且應被解釋為意指“包括但不限于……”。這些術語包括更嚴格的術語“基本上由……組成”和“由……組成”。

必須指出，如本文和所附權利要求中所使用的，單數(shù)形式“一個”、“一種”和“該/所述”包括復數(shù)參考，除非上下文另有明確說明。同樣地，術語“一個”(或“一種”)、“一個或多個/一種或多種”和“至少一個/種”在本文中可互換使用。還應指出，術語“包含”、“包括”、“特征在于”和“具有”可互換使用。

除非另有定義，否則本文使用的所有技術和科學術語均具有與本發(fā)明所屬領域的普通技術人員通常理解的相同的含義。本文具體提及的所有出版物和專利出于所有目的以引用的方式全文并入本文，包括描述和公開出版物中報道的可與本發(fā)明粘結使用的化學品、器械、統(tǒng)計分析和方法。本說明書中引用的所有參考文獻均被視為本領域技術水平的指示。本文的任何內容不應被解釋為承認本發(fā)明由于在先發(fā)明而無權早于這種公開內容。

應用于細胞培養(yǎng)袋的含氟聚合物和彈性體膜的有益性質的組合在本領域中是所需的，并且在本文中提供。

關于本文所述的第一方面的氣體可滲透性膜包括含氟聚合物涂布的彈性體膜。氧是培養(yǎng)基中的細胞生長所必需的，并且二氧化碳是培養(yǎng)基緩沖ph所必需的。大多數(shù)正常的哺乳動物細胞系在ph7.4下生長良好，并且不同細胞株中存在極小的變異性。然而，一些經(jīng)轉化的細胞系已顯示在稍微更酸性的環(huán)境(ph7.0–7.4)下生長得更好，并且一些正常的成纖維細胞系更喜歡稍微更堿性的環(huán)境(ph7.4–7.7)。因為培養(yǎng)基的ph取決于溶解的二氧化碳和碳酸氫鹽的微妙平衡，所以二氧化碳濃度的變化可改變培養(yǎng)基的ph。因此，用于細胞培養(yǎng)袋中的含氟聚合物涂布的彈性體膜對于氧和二氧化碳具有良好的氣體可滲透性是必要的。

本領域技術人員將認識到，氣體可滲透材料應基于各種特性來選擇，所述特性包括柔性、確保氣密性的密封性、允許顯微鏡檢查細胞生長的良好透明度、不含對細胞可能有害的增塑劑(例如鄰苯二甲酸二辛酯和鄰苯二甲酸二異癸酯)、濕蒸汽透過性、對于所需細胞與細胞的相互作用改變的能力、光學透明度、物理強度等等。

彈性體是具有粘彈性和非常弱的分子間力的聚合物，與其他材料相比一般具有低楊氏模量和高破壞應變。術語彈性體可與術語橡膠交換使用，盡管當提及硫化橡膠時，橡膠是優(yōu)選的。彈性體是由碳、氫、氧和/或硅的單體構成的無定形聚合物。

彈性體包含可通過硫磺硫化固化的不飽和橡膠，例如天然(nr)和合成聚異戊二烯(ir)、聚丁二烯(br)、氯丁橡膠(cr)、丁基橡膠(iir)、鹵化丁基橡膠(ciir、biir)、丁苯橡膠(sbr)、丁腈橡膠(nbr)和氫化丁腈橡膠(hnbr)。

彈性體包括不能通過硫磺硫化固化的不飽和橡膠，例如乙丙橡膠(epm)、三元乙丙橡膠(epdm)、表氯醇橡膠(eco)、聚丙烯酸酯橡膠(acm、abr)、硅橡膠(si、q、vmq)、氟硅橡膠(fsr、fvmq)、含氟彈性體(fkm、fepm)、全氟彈性體(ffkm)、聚醚嵌段酰胺(peba)、氯磺化聚乙烯(csm)、熱塑性聚氨基甲酸酯(tpu)(包括熱塑性硅酮例如)、環(huán)烯烴共聚物、聚烯烴彈性體、彈性體pet和乙烯-乙酸乙烯酯(eva)。

熱塑性聚氨基甲酸酯(tpu)是本領域已知的。通常，通過使多元醇與異氰酸酯反應形成熱塑性聚氨基甲酸酯。聚氨基甲酸酯的總體性質將取決于多元醇和異氰酸酯的類型、聚氨基甲酸酯中的結晶度、聚氨基甲酸酯的分子量和聚氨基甲酸酯主鏈的化學結構。

取決于存在的交聯(lián)度，聚氨基甲酸酯可為熱塑性的或熱固性的。取決于反應物的官能度，熱塑性聚氨基甲酸酯(tpu)不具有主要交聯(lián)，而熱固性聚氨基甲酸酯具有不同程度的交聯(lián)。

熱塑性聚氨基甲酸酯通常基于亞甲基二異氰酸酯(mdi)或甲苯二異氰酸酯(tdi)，并且包括聚酯和聚醚等級的多元醇兩者。熱塑性聚氨基甲酸酯可通過異氰酸酯和多元醇之間的“單擊(one-shot)”反應或通過“預聚物”體系形成，其中將固化劑(curative)加入部分反應的多元醇異氰酸酯(polyolisocyanate)復合物中，以完成聚氨基甲酸酯反應。基于“預聚物”的一些普通的熱塑性聚氨基甲酸酯彈性體的例子是"texin"，bayermaterialsscience的商品名，"estane"，lubrizol的商品名，"pellethane"，dowchemicalco.的商品名和"elastollan"，basf,inc的商品名。

熱塑性硅酮包括但不限于140硅酮tpe、200硅酮tpe彈性體(90％聚二甲基硅氧烷和異氰酸酯)、60硅酮tpe、80硅酮tpe和145tpe，這些都包含90％的聚二甲基硅氧烷和異氰酸酯。

聚甲基戊烯(pmp)是甲基戊烯單體單元的熱塑性聚合物，并且是高氣體可滲透的和透明的。

硅橡膠已證明是用于氣體可滲透性膜的特別好的材料。為了保證足夠的氧和二氧化碳交換，最薄的可能的氣體交換膜是優(yōu)選的。厚度在0.1mm至1mm之間的膜已證明是成功的。

硅酮膜可通過注射成型以任何所需的形狀經(jīng)濟地制造。硅酮在商業(yè)上以多種厚度、形狀和特定的氣體可滲透性可獲得。它對細胞培養(yǎng)中通常使用的培養(yǎng)基具有高耐撕裂性和良好的耐化學腐蝕性，并且因此也尤其容易處理。

使氣體可滲透性硅酮膜滅菌的能力也是尤其有利的。特別地，可在高壓滅菌器中有效地滅菌而無形狀中的基本變化，并且可重復使用數(shù)次。

優(yōu)選所使用的硅橡膠具有盡可能低的可浸出和可提取曲線。

在一個實施例中，細胞培養(yǎng)容器可包含單層彈性體，例如熱塑性硅酮(例如通過wackerchemieag的聚二甲基硅氧烷/脲共聚物)或如本文所述的具有toc和滲透性的含氟聚合物。

還應當注意，熱塑性塑料(彈性體和非彈性體)的其他構造和含氟聚合物構造也可用于控制復合材料的氣體可滲透性，同時含有低toc流體接觸層。氣體可滲透性的控制可用于產(chǎn)生高或低氣體可滲透性復合材料的目的。熱塑性彈性體(tpe)的例子包括苯乙烯嵌段共聚物(tpe-s)、烯烴(tpe-o)、合金(tpe-v或tpv)、聚氨基甲酸酯(tpu)、共聚酯和聚酰胺。非彈性體熱塑性塑料的例子包括丙烯酸、丙烯腈丁二烯苯乙烯(abs)、尼龍、聚乳酸(pla)、聚苯并咪唑(pbi)、聚碳酸酯(pc)、聚醚砜(pes)、聚醚醚酮(peek)、聚醚酰亞胺(pei)、聚乙烯(pe)、聚苯醚(ppo)、聚苯硫醚(pps)、聚丙烯(pp)、聚苯乙烯(ps)和聚氯乙烯(pvc)、乙烯乙烯基醇(evoh)以及其單體結構已改進以降低結晶度并增加靈活性的任何傳統(tǒng)的剛性聚合物。

微孔、疏水性含氟聚合物，例如3m^tmdyneon^tmtfm^tm改性ptfe、hte或thv，也已證明作為氣體交換膜的材料是有利的。含氟聚合物的疏水性確保氣體交換膜對水性培養(yǎng)基是不滲透性的。對于給定的氣體可滲透性，氣體交換膜所需的幾何形狀取決于細胞呼吸導致的氣體需求，以及細胞呼吸中涉及的氣體的分壓，尤其是對從外部作用于其上的氧分壓。

圖1顯示了含氟聚合物涂布的彈性體膜1的側視圖。應當理解，含氟聚合物層10可設置在彈性體層20上以形成膜1。含氟聚合物層10可來自可流延的溶液?？蛇x地，也可將彈性體流延/設置在含氟聚合物層上。

通常，含氟聚合物層10具有約0.001mm至約0.7mm，更特別地約0.005mm至約0.4mm，且最特別地約0.01mm至約0.1mm的厚度，以及兩者之間的所有厚度，包括0.02mm、0.03mm、0.04mm、0.05mm、0.06mm、0.07mm、0.08mm和0.09mm。在特定方面，含氟聚合物是fep層，并且含氟聚合物層的厚度為0.0254mm或1mil。

彈性體層20一般具有約0.01mm至約5mm，更特別地約0.05mm至約1mm，且最特別地約0.1mm至約0.5mm的厚度，以及兩者之間的所有厚度，包括0.15mm、0.2mm、0.25mm、0.3mm、0.35mm、0.4mm和0.45mm。在特定方面，彈性體是熱固性硅酮層，并且彈性體層的厚度為0.127mm至0.254mm或5至10mil。

術語“可流延的”預期意指能夠在液體載體培養(yǎng)基中分散、溶解、懸浮、乳化或以其他方式分布的含氟聚合物或非含氟聚合物。液體載體培養(yǎng)基可為水，有機溶劑或其中聚合物可分散、溶解、懸浮、乳化或以其他方式分布的任何其他液體。液體載體培養(yǎng)基可為合適液體的混合物。一旦分布在載體培養(yǎng)基內，聚合物和培養(yǎng)基然后就能夠在支撐材料上設置或流延以形成膜。聚合物可與第一載液混合。該混合物可包括在第一載液中的聚合物顆粒的分散體、聚合物的液滴的乳液、或第一載液中的聚合物的單體或低聚物前體或者第一載液中的聚合物溶液。使得聚合物“可流延的”另外/等價情況將是如果它被加熱到高于其熔點或在液態(tài)下加工，然后通過uv、ir、引發(fā)劑或電子束固化，使得它變成固體。

可流延聚合物也可為分散在載液內的聚合物的單體或低聚物前體。最常見的可流延組合物是在水性培養(yǎng)基中的乳液或分散體。

第一載液的選擇基于特定的聚合物和材料要引入本發(fā)明的流延組合物的形式。如果需要溶液，則選擇特定含氟聚合物的溶劑作為載液。合適的載體包括例如dmac、nmp、二醇醚或水等等。如果需要分散體，則合適的載體是聚合物不溶于其中的載體。水溶液將是用于聚合物顆粒分散的合適載液。

大多數(shù)通常可流延的組合物是在水性培養(yǎng)基中的乳液或分散體。表面活性劑可用于制備以有效改進載液的表面張力的量的分散體。合適的表面活性劑化合物包括離子表面活性劑、兩性表面活性劑、陽離子表面活性劑和非離子表面活性劑。

含氟聚合物一般由于其疏水性而選擇作為流體接觸層，并且因為它們是生物學、化學和免疫學惰性的。

短語“含氟聚合物”是本領域已知的，并且預期包括例如氟化乙烯-丙烯(fep)、聚四氟乙烯(ptfe)、聚偏二氟乙烯(pvdf)、聚三氟氯乙烯(pctfe)、聚偏氟乙烯(pvf)、四氟乙烯/六氟丙烯/乙烯共聚物(hte)、三氟氯乙烯/偏二氟乙烯共聚物、三氟氯乙烯/六氟丙烯、乙烯/三氟氯乙烯共聚物(ectfe)、乙烯/三氟乙烯共聚物、乙烯/四氟乙烯共聚物(etfe)、四氟乙烯/丙烯共聚物(tfe/p)、四氟乙烯/六氟丙烯共聚物(fep/hfp)、四氟乙烯-全氟(烷基乙烯基醚)共聚物(例如pfa；四氟乙烯-全氟(丙基乙烯基醚)、聚偏氟乙烯、六氟丙烯/四氟乙烯/亞乙烯基共聚物(thv)及其混合物。

短語“含氟聚合物”還包括當通過dsc測量時非結晶的或其熔融熱小于2j/g的無定形聚合物。這些包括tfe與官能或非官能單體如具有2-8個碳原子的氟烯烴和其中烷基含有1或3至5個碳原子的氟代烷基乙烯基醚的共聚物。非官能單體的例子包括六氟丙烯(hfp)、三氟氯乙烯(ctfe)、peve、pmve和全氟-(丙烯乙烯基醚)(ppve)。官能單體包括全氟乙基乙烯基醚(eve)、cf2cfocf2cfcf3ocf2cf2cooch3(eve-氨基甲酸酯)、cf2cfocf2cfcf3ocf2cf2so2f(psepve)、cf2cfocf2cfcf3ocf2cf2cn(8cnve)、n3(cf2cfocf2cfcf3ocf2cf2)3(eve-三嗪)、cf2cfocf2cfcf3ocf2cf2cn(eve-cn)、cf2cfocf2cfcf3ocf2cf2ch2oh(eve-oh)、cf2cfocf2cfcf3ocf2cf2ch2po2(oh)2(eve-p)cf2cfocf2cfcf3ocf2cf2ch2cooh(eve-cooh)和2,2-雙三氟甲基-4,5-二氟-1,3-二氧雜環(huán)戊烯(pdd)。

商購可得的無定形含氟聚合物材料包括來自下述的那些：dupont，wilmington，de：sf60(tfe/pmve/peve,dupont,wilmingtonde)、sf61(tfe/pmve/peve/eve-p)、sf50(tfe/hfp)、af1600(pdd/tfe)和af2130(pdd/ctfe)；來自日本tokyo的asahicorporation：(cytopa型、cytopm型、cytops型或cytopnm)；來自rehovot,israel的mypolymerscorporation(my-133)；或來自carpinteria,ca的nusilcorporation(ls-233)。

含氟聚合物溶液可通過常用的涂布方法施加，包括但不限于噴涂、浸涂、刷涂或擠出/注射成型。

是含有官能化端基的全氟(1-丁烯基乙烯基醚)均環(huán)聚合物。它作為無定形樹脂存在，并且可在全氟化溶劑中以各種濃度得到，并且選擇非氟溶劑體系。例如：在9:5異丙醇/乙酸異丁酯中0.1至1％。

cytopa型含有羧基聚合物端基，并且cytopm型含有氨基-硅烷聚合物端基。任一含氟聚合物均可與促進劑、特殊底漆或用作塑料涂層應用的硅烷偶聯(lián)劑一起使用。cytops型包含用于非粘附抗紫外線和高透明度的全含氟聚合物端基。

硅橡膠制劑包括硅酮聚合物基質。聚合物基質可例如使用非極性硅酮聚合物形成。硅酮聚合物可例如包括聚烷基硅氧烷，例如由前體形成的硅酮聚合物，例如二甲基硅氧烷、二乙基硅氧烷、二丙基硅氧烷、甲基乙基硅氧烷、甲基丙基硅氧烷或其組合。特別地，聚烷基硅氧烷包括聚二烷基硅氧烷，例如聚二甲基硅氧烷(pdms)。一般而言，硅酮聚合物是非極性的，并且不含鹵官能團，例如氯和氟，并且不含苯基官能團。

官能化聚有機硅氧烷包括在兩個端部處由乙烯基二甲基甲硅烷氧基封端的二甲基硅氧烷、在兩個端部處由乙烯基二甲基甲硅烷氧基封端的二甲基硅氧烷-乙烯基甲基硅氧烷共聚物、以及在兩個端部處由乙烯基二甲基甲硅烷氧基封端的二甲基硅氧烷-甲基苯基硅氧烷共聚物。

硅橡膠可包含鉑催化的液體硅橡膠(lsr)或高稠度樹膠橡膠(hcr)。硅橡膠還可包含過氧化物催化的硅橡膠(lsr)或高稠度樹膠橡膠(hcr)。例如，saint-gobain生產(chǎn)由(基于過氧化物的硅酮)制成的醫(yī)療產(chǎn)品。作為hcr的硅橡膠的例子是可從geplastics獲得的ge94506hcr。lsr的例子包括通過adrian,mi的wackersilicone獲得的wacker3003和通過ventura,ca的rhodiasilicones獲得的rhodia4360。

在本發(fā)明的一個方面，當使用硅橡膠作為基礎橡膠時，含氟聚合物涂層的組成可含有與硅橡膠結合的反應性化合物。結合硅橡膠的反應性化合物的例子包括特別優(yōu)選的含烴硅化合物。

這種含硅化合物的例子包括具有硅氧烷鍵的化合物、具有烷氧基甲硅烷基的硅烷偶聯(lián)劑、具有氯甲硅烷基的官能硅烷或硅氮烷、氨基硅烷和甲硅烷基化劑。其中，具有硅氧烷鍵的化合物和具有烷氧基甲硅烷基的硅烷偶聯(lián)劑是優(yōu)選的。具有硅氧烷鍵的這種化合物的例子包括末端改性的二甲基硅氧烷、縮合型或加成型液體硅酮、硅酸鹽和丙烯酸硅酮聚合物。

具有氨基-硅烷末端修飾的含氟聚合物的例子是cytopm型。類似地，具有羧基末端修飾的含氟聚合物的例子是cytopa型。任一均可與偶聯(lián)劑混合或不與偶聯(lián)劑混合，并且經(jīng)由偶聯(lián)劑與硅橡膠直接或間接地粘結?；瘜W粘結可通過縮合、烷基化、酰胺化、硅烷化、醚化或經(jīng)由偶聯(lián)劑通過其任何粘結組合而發(fā)生。例如，可與硅橡膠一起使用的偶聯(lián)劑是與羥基、氨基或硫基反應的異氰酸酯化合物。在含氟聚合物和硅橡膠之間形成化學鍵之后，將實現(xiàn)粘附，并且復合氣體可滲透性膜將具有更高的強度，伴隨最低限度的浸出。水解后的cytopa型或cytopm型也可通過氫鍵合而粘附至硅橡膠。

彈性體層和含氟聚合物層粘結在一起也可通過激光焊接、表面處理、輻射、擠出、共擠出、涂布、層壓、潤濕、粘合劑或其組合來實現(xiàn)。表面處理的優(yōu)選方法包括c處理(saint-gobainperformanceplasticscorporation，美國專利號6,726,979)、電暈放電、等離子體處理、蝕刻或其組合。表面處理還可涉及用可單獨使用或與其他公開的處理方法結合使用的添加劑或底漆的化學處理。

在優(yōu)選的方面，含氟聚合物層是經(jīng)c處理的fep，其也已被預處理并且通過擠出用lsr硅酮涂布。

這些層也可類似于對于complete產(chǎn)品(saint-gobainperformanceplasticscorporation,valleyforge,pa)所描述的那種一起進行預層壓。

總有機碳(toc)是有機化合物中結合的碳量，并且經(jīng)常用作藥物制造設備的非特異性指示劑等等。toc被用作生物技術工業(yè)中的工藝控制屬性，以監(jiān)測采用純化和分配體系的單元操作的性能。

在具體實施例中，toc可根據(jù)uspharmacopeia(usp)643以及設備進行測量，所述設備利用uv促進化學氧化的高溫濕氧化反應(ultra-cleantechnologyhandbook:第1卷：ultra-purewater,ohmi,tadahiro；crcpress,1993，第497-517頁)。純化水在70℃置于在70℃下與聚合物接觸24小時，例如以3cm²的制品表面積與1ml水的比率。水被去除與聚合物的接觸，并且在toc分析儀中進行測試。合適的設備是tekmardohrmann型號phoenix8000toc分析儀。

在特定實施例中，對于本公開內容的體系中采用的容器可測量toc，包括例如通過從容器的內表面積提取(其中反映為mg/cm²的結果是對于toc/內部面積的平方厘米)。在具體實施例中，并且僅作為例子，容器可在純化水70±2℃中提取24±2小時?？赏ㄟ^例如用過硫酸鈉的酸化和化學濕氧化將toc轉換成二氧化碳來分析提取物的toc。從容器釋放的二氧化碳可使用紅外檢測器進行測量。fep容器的提取率的例子為3cm²/ml(典型的提取率)。對于一些容器(如fep袋)，不需要稀釋，因為toc水平低于校準曲線的上限，而對于其他實施例(如硅酮配管)，需要稀釋，因為在提取物中檢測到toc的水平。

fep容器的toc的例子為0.145mg/l(0.00005mg/cm²或0.001mg/g)。對于采用硅酮配管的實施例，提取比例可為14.6cm²/ml(例如對于biosil)，或者可為15.9cm²/ml(例如對于sr139)，并且硅酮biosil管的toc的例子是302mg/l(0.021mg/cm²或0.023mg/cm)，并且硅酮sr139配管的toc的例子為120mg/l(0.008mg/cm²或0.0009mg/cm)。在至少某些硅酮配管實施例中，樣品可被稀釋，因為提取物的體積和濃度導致該值高于機器的最大檢測值。稀釋度和不同提取比需要相反在重量/面積值基礎上作出的這些樣品與袋樣品的比較。

本領域技術人員認識到toc值可以重量/體積表征。然而，本領域技術人員知道容器(特別是fep袋材料)的比率相對于硅酮配管的比率是可區(qū)分的；硅酮配管值只能在mg/cm²起始基礎上加以考慮，因為該值不依賴于提取比/稀釋度。本領域技術人員可使用重量/面積結果作為基礎并假定標準3cm²/ml提取比(作為例子)來計算“標準化的”重量/體積比，以便比較重量/體積值。

在具體實施例中，熱塑性彈性體(tpe)的toc為0.002mg/cm²(0.032mg/g或5.88mg/ml)。在某些實施例中，fep的toc為制品的內部潤濕表面的0.00005mg/cm²(0.001mg/g或0.145mg/ml的制品)。在具體實施例中，硅酮的toc為在制品的內部潤濕表面上的0.021mg/cm²或63mg/ml。在具體實施例中，pmp膜的toc為0.07ppm(0.00001mg/cm²)。

在具體實施例中，氟化乙烯丙烯(fep)的toc為0.00005mg/cm²(0.001mg/g)；硅酮材料如硅酮配管的toc為0.021mg/cm²(0.023mg/cm)和0.008mg/cm²(0.009mg/cm)；歷史上使用的細胞培養(yǎng)袋的toc為0.002mg/cm²(0.032mg/g)。

本領域技術人員認識到，如果采用mg/cm²單位，則可跨越不同提取比/稀釋度比較toc值。如果單位是mg/l，則必須知道提取比。轉換可如下發(fā)生：機器輸出以mg/l為單位的值，將稀釋度考慮在內，然后使用表面積和總體積將該數(shù)目轉換為mg/cm²以提取。提供了關于硅酮biosil的例子：硅酮biosil樣品：302mg/l*1l/1000ml*23.7ml/347cm²＝.021mg/cm²。

在特定實施例中，以mg/cm²單位比較toc，因為不需要提取比或任何稀釋度。

下文是關于硅酮管biosil樣品和硅酮管sr139樣品的toc計算的例子。

測試制品提取

toc分析結果

下文是關于fep袋和單層袋的toc計算的例子，所述單層袋主要由sebs(苯乙烯嵌段共聚物)組成并且還可包含eva和pp)：

測試制品提取

toc分析結果

在具體實施例中，容器包含內表面，其包含具有小于1mg/cm²、0.9mg/cm2、0.8mg/cm²、0.7mg/cm²、0.6mg/cm²、0.5mg/cm²、0.4mg/cm²、0.3mg/cm²、0.2mg/cm²、0.1mg/cm²、0.09mg/cm²、0.08mg/cm²、0.07mg/cm²、0.06mg/cm²、0.05mg/cm²、0.04mg/cm²、0.03mg/cm²、0.02mg/cm²、0.01mg/cm²、0.009mg/cm²、0.008mg/cm²、0.007mg/cm²、0.006mg/cm²、0.005mg/cm²、0.004mg/cm²、0.003mg/cm²、0.002mg/cm²、0.001mg/cm²等等(或是檢測不到的)的在水中的總有機碳(toc)的聚合物。

在特定實施例中，在水中的toc小于在0.001mg/cm²至0.1mg/cm²、0.001mg/cm²至0.095mg/cm²、0.001mg/cm²至0.075mg/cm²、0.001mg/cm²至0.05mg/cm2、0.001mg/cm²至0.01mg/cm2、0.001mg/cm²至0.005mg/cm²、或0.001mg/cm²至0.025mg/cm²范圍內的量。在特定實施例中，在水中的toc小于在0.01mg/cm²至0.1mg/cm²、0.01mg/cm²至0.075mg/cm²、0.01mg/cm²至0.05mg/cm²、或0.01mg/cm²至0.025mg/cm²范圍內的量。在特定實施例中，在水中的toc小于在0.05mg/cm²至0.1mg/cm²、0.05mg/cm²至0.09mg/cm²、0.05mg/cm²至0.075mg/cm²、或0.05mg/cm²至0.06mg/cm²范圍內的量。在特定實施例中，在水中的toc小于在0.005mg/cm²至0.1mg/cm²、0.005mg/cm²至0.095mg/cm²、0.005mg/cm²至0.075mg/cm²、0.005mg/cm²至0.05mg/cm²、0.005mg/cm²至0.025mg/cm²、或0.005mg/cm²至0.01mg/cm²范圍內的量。

用于當前實施例的氧可滲透性膜的材料可具有確定的滲透性。氧可滲透彈性體膜的滲透性為至少100cc/m²/天，優(yōu)選至少500cc/m²/天，優(yōu)選至少1000cc/m²/天，優(yōu)選至少1500cc/m²/天，且最優(yōu)選至少2000cc/m²/天，并且甚至更優(yōu)選至少2200cc/m²/天。氧可滲透性彈性體含氟聚合物復合膜的滲透性為至少100cc/m²/天，優(yōu)選至少500cc/m²/天，優(yōu)選至少1000cc/m²/天，優(yōu)選至少1500cc/m²/天，且最優(yōu)選至少2000cc/m²/天，并且甚至更優(yōu)選至少2200cc/m²/天。用moconox-tran2/21h氧分析儀，遵循astmd3985在25℃下測量氧可滲透性。在膜可滲透性的另一個方面，標準化單位(cc-mm/m²-天)可用于顯示任何厚度的膜。例如，在25℃的溫度下，5mil膜的轉換范圍為約12.7cc-mm/m²-天到至少約279cc-mm/m²-天。結構/復合材料的可滲透性可保持在cc/m²的范圍內，因為它將由兩層構成。

圖2是含氟聚合物涂布的彈性體細胞培養(yǎng)容器25的視圖。含氟聚合物層10(未示出)包含與細胞培養(yǎng)物接觸的膜1的內層。含氟聚合物涂布的彈性體細胞培養(yǎng)容器25包括粘結以形成細胞培養(yǎng)區(qū)室30的至少一個氟化彈性體膜1，所述細胞培養(yǎng)區(qū)室30也粘結到允許進入容器內部的至少一個可密封的進入端口40。含氟聚合物涂布的彈性體細胞培養(yǎng)容器25包括細胞培養(yǎng)區(qū)室30，其可為包括封閉體系的袋、燒瓶或管，所述封閉體系還包含至少一個可密封的進入端口40。

膜1形成細胞培養(yǎng)容器30的粘結以及進入端口40形成細胞培養(yǎng)容器30的粘結各自獨立地通過下述來完成：rf焊接、超聲波焊接、熱棒焊接、化學粘結、粘合劑粘結、熱熔粘結、溶劑焊接、激光焊接、電暈放電、輻射、例如通過極熱的層壓或熔融層壓、蝕刻、等離子體處理、潤濕、粘合劑、輻射、擠出、共擠出或其組合。表面處理的優(yōu)選方法包括c處理(saint-gobainperformanceplasticscorporation，美國專利號6,726,979)、電暈放電、等離子體處理、蝕刻或其組合。表面處理還可涉及用可單獨使用或與其他公開的處理方法結合使用的添加劑或底漆的化學處理。進入端口40的粘結可在細胞培養(yǎng)容器30的形成之前、在細胞培養(yǎng)容器30的形成之后或在細胞培養(yǎng)容器30的形成期間發(fā)生。

細胞培養(yǎng)容器30包括允許進入容器內部的至少一個進入端口40。進入端口40可包含可密封的蓋或螺帽、可刺破的材料或隔片、或者允許通過管或注射器進入的閥組件。測量ph/do的一次性使用的傳感器也可包括在容器中以監(jiān)測細胞培養(yǎng)條件。

進入端口的位置并不限于當前配置，并且端口可被定位為便于使用或制造。進入端口包括含氟聚合物管，其通過rf焊接、超聲波焊接、熱棒焊接、化學粘結、粘合劑粘結、熱熔粘結、溶劑焊接、激光焊接、電暈放電、輻射、例如通過極熱的層壓或熔融層壓、蝕刻、等離子體處理、潤濕、粘合劑、輻射、共擠出或其組合附接到復合容器。

細胞培養(yǎng)容器30體積范圍可為1ml至50l、50ml至10l，但優(yōu)選為50ml至1l。

合適的生長培養(yǎng)基包括例如營養(yǎng)物或者具有添加的激素和/或生長因子的lysogeny。

合適的細胞包括例如結締組織細胞、骨骼細胞、心臟細胞、上皮細胞、神經(jīng)細胞、內分泌細胞、免疫細胞、淋巴細胞、黑素細胞、腫瘤細胞或其混合物。

在一個實施例中，在第一段落(1)中，本發(fā)明提供了氧可滲透性膜，其包括第一彈性體層；具有小于1mg/cm²的在水中的總有機碳(toc)的第二流體接觸層。

2.根據(jù)段落1的膜，其中所述第二流體接觸層是含氟聚合物層，并且其中所述第一彈性體層和所述第二含氟聚合物層粘附在一起。

3.根據(jù)段落1或2的膜，其中所述第一彈性體層包含天然聚異戊二烯橡膠(nr)、合成聚異戊二烯橡膠(ir)、聚丁二烯橡膠(br)、氯丁橡膠(cr)、丁基橡膠(iir)、鹵化丁基橡膠(ciir、biir)、丁苯橡膠(sbr)、丁腈橡膠(nbr)和氫化丁腈橡膠(hnbr)、乙丙橡膠(epm)、三元乙丙橡膠(epdm)、表氯醇橡膠(eco)、聚丙烯酸酯橡膠(acm、abr)、硅橡膠(si、q、vmq)、氟硅橡膠(fsr、fvmq)、含氟彈性體(fkm、fepm)、全氟彈性體(ffkm)、聚醚嵌段酰胺(peba)、氯磺化聚乙烯(csm)、乙烯-乙酸乙烯酯(eva)、環(huán)烯烴共聚物、聚烯烴彈性體、彈性體pet或其混合物。

4.根據(jù)段落1或2的膜，其中所述第一彈性體層是聚甲基戊烯聚合物(pmp)。

5.根據(jù)段落1或2的膜，其中所述第一彈性體層是硅橡膠。

6.根據(jù)段落5的膜，其中所述硅橡膠是高稠度橡膠(hcr)、氟硅橡膠(fsr)、液體硅橡膠(lsr)、室溫硫化的橡膠(rtv)、熱塑性硅橡膠(tpe)、鉑固化的硅橡膠或過氧化物固化的硅橡膠。

7.根據(jù)段落6的膜，其中所述硅橡膠是熱固性的、固化的、硫化的、催化的或注射成型的。

8.根據(jù)段落2至7中任一項的膜，其中所述第二含氟聚合物層是氟化乙烯-丙烯(fep)、聚四氟乙烯(ptfe)、3m^tmdyneon^tmtfm^tm改性ptfe、聚偏二氟乙烯(pvdf)、四氟乙烯-全氟(丙基乙烯基醚)(pfa)、聚偏氟乙烯(pvf)、聚三氟氯乙烯(pctfe)、四氟乙烯/六氟丙烯/乙烯共聚物(hte)、三氟氯乙烯/偏二氟乙烯共聚物、三氟氯乙烯/六氟丙烯、乙烯/三氟氯乙烯共聚物(ectfe)、乙烯/三氟乙烯共聚物、乙烯/四氟乙烯共聚物(etfe)、四氟乙烯/丙烯共聚物(tfe/p)、四氟乙烯/六氟丙烯共聚物(fep/hfp)、六氟丙烯/四氟乙烯/亞乙烯基共聚物(thv)或具有官能化聚合物端基的全氟(1-丁烯基乙烯基醚)均環(huán)聚合物。

9.根據(jù)段落2至8中任一項的膜，其中所述第一彈性體層和所述第二含氟聚合物層通過粘結粘附在一起。

10.根據(jù)段落9的膜，其中所述粘結是通過化學粘結、粘合劑粘結、熱熔粘結、溶劑粘結、激光焊接、表面處理、擠出、共擠出、涂布、層壓或其組合進行的。

11.一種氧可滲透性容器，其包括外部彈性體層；以及具有小于1mg/cm²的在水中的總有機碳(toc)的內部流體接觸層。

12.根據(jù)段落11的容器，其中所述流體接觸層是含氟聚合物層，并且其中所述內部含氟聚合物層粘附到所述容器的外部彈性體層。

13.根據(jù)段落11或12的容器，其中所述外部彈性體層包含天然聚異戊二烯橡膠(nr)、合成聚異戊二烯橡膠(ir)、聚丁二烯橡膠(br)、氯丁橡膠(cr)、丁基橡膠(iir)、鹵化丁基橡膠(ciir、biir)、丁苯橡膠(sbr)、丁腈橡膠(nbr)和氫化丁腈橡膠(hnbr)、乙丙橡膠(epm)、三元乙丙橡膠(epdm)、表氯醇橡膠(eco)、聚丙烯酸酯橡膠(acm、abr)、硅橡膠(si、q、vmq)、氟硅橡膠(fsr、fvmq)、含氟彈性體(fkm、fepm)、全氟彈性體(ffkm)、聚醚嵌段酰胺(peba)、氯磺化聚乙烯(csm)、乙烯-乙酸乙烯酯(eva)、環(huán)烯烴共聚物、聚烯烴彈性體、彈性體pet或其混合物。

14.根據(jù)段落11或12的容器，其中所述外部彈性體層是聚甲基戊烯聚合物(pmp)。

15.根據(jù)段落11或12的容器，其中所述外部彈性體層是硅橡膠。

16.根據(jù)段落15的容器，其中所述硅橡膠是高稠度橡膠(hcr)、氟硅橡膠(fsr)、液體硅橡膠(lsr)、或室溫硫化的橡膠(rtv)、熱塑性硅橡膠(tpe)、鉑固化的硅橡膠或過氧化物固化的硅橡膠。

17.根據(jù)段落16的容器，其中所述硅橡膠是熱固性的、固化的、硫化的、催化的或注射成型的。

18.根據(jù)段落12至17中任一項的容器，其中所述內部含氟聚合物層是氟化乙烯-丙烯(fep)、聚四氟乙烯(ptfe)、3m^tmdyneon^tmtfm^tm改性ptfe、聚偏二氟乙烯(pvdf)、四氟乙烯-全氟(丙基乙烯基醚)(pfa)、聚偏氟乙烯(pvf)、聚三氟氯乙烯(pctfe)、四氟乙烯/六氟丙烯/乙烯共聚物(hte)、三氟氯乙烯/偏二氟乙烯共聚物、三氟氯乙烯/六氟丙烯、乙烯/三氟氯乙烯共聚物(ectfe)、乙烯/三氟乙烯共聚物、乙烯/四氟乙烯共聚物(etfe)、四氟乙烯/丙烯共聚物(tfe/p)、四氟乙烯/六氟丙烯共聚物(fep/hfp)、六氟丙烯/四氟乙烯/亞乙烯基共聚物(thv)或具有官能化聚合物端基的全氟(1-丁烯基乙烯基醚)均環(huán)聚合物。

19.根據(jù)段落12至18中任一項的容器，其中所述外部彈性體層和所述內部含氟聚合物層通過粘結粘附在一起。

20.根據(jù)段落19的容器，其中所述粘結是通過化學粘結、粘合劑粘結、熱熔粘結、溶劑粘結、激光焊接、以及表面處理、擠出、共擠出、涂布、層壓或其組合進行的。

21.根據(jù)段落11至20中任一項的容器，其中所述容器包括袋、燒瓶或管。

22.根據(jù)段落21的容器，其中所述袋、燒瓶或管包含至少一個可密封的進入端口。

23.一種在氧可滲透性容器中培養(yǎng)細胞的方法，其包括以下步驟：a)將培養(yǎng)基加入容器中；和b)將細胞任選地連同培養(yǎng)基一起加入所述容器中，其中所述容器包括外部彈性體層，以及具有小于1mg/cm²的在水中的總有機碳(toc)的內部流體接觸層。

24.根據(jù)段落23的方法，其中所述內部流體接觸層是含氟聚合物層，并且其中所述內部含氟聚合物層粘附到所述容器的外部彈性體層。

25.根據(jù)段落23或24的方法，其中所述外部彈性體層是天然聚異戊二烯橡膠(nr)、合成聚異戊二烯橡膠(ir)、聚丁二烯橡膠(br)、氯丁橡膠(cr)、丁基橡膠(iir)、鹵化丁基橡膠(ciir、biir)、丁苯橡膠(sbr)、丁腈橡膠(nbr)和氫化丁腈橡膠(hnbr)、乙丙橡膠(epm)、三元乙丙橡膠(epdm)、表氯醇橡膠(eco)、聚丙烯酸酯橡膠(acm、abr)、硅橡膠(si、q、vmq)、氟硅橡膠(fsr、fvmq)、含氟彈性體(fkm、fepm)、全氟彈性體(ffkm)、聚醚嵌段酰胺(peba)、氯磺化聚乙烯(csm)、環(huán)烯烴共聚物、聚烯烴彈性體、彈性體pet和乙烯-乙酸乙烯酯(eva)。

26.根據(jù)段落23或24的方法，其中所述外部彈性體層是聚甲基戊烯聚合物(pmp)。

27.根據(jù)段落23或24的方法，其中所述外部彈性體層是硅橡膠。

28.根據(jù)段落27的方法，其中所述硅橡膠是高稠度橡膠(hcr)、氟硅橡膠(fsr)、液體硅橡膠(lsr)、或室溫硫化的橡膠(rtv)、熱塑性硅橡膠(tpe)、鉑固化的硅橡膠或過氧化物固化的硅橡膠。

29.根據(jù)段落28的方法，其中所述硅橡膠是熱固性的、固化的、硫化的、催化的或注射成型的。

30.根據(jù)任何段落24至29中任一項的方法，其中所述內部含氟聚合物層是氟化乙烯-丙烯(fep)、聚四氟乙烯(ptfe)、3m^tmdyneon^tmtfm^tm改性ptfe、聚偏二氟乙烯(pvdf)、四氟乙烯-全氟(丙基乙烯基醚)(pfa)、聚偏氟乙烯(pvf)、聚三氟氯乙烯(pctfe)、四氟乙烯/六氟丙烯/乙烯共聚物(hte)、三氟氯乙烯/偏二氟乙烯共聚物、三氟氯乙烯/六氟丙烯、乙烯/三氟氯乙烯共聚物(ectfe)、乙烯/三氟乙烯共聚物、乙烯/四氟乙烯共聚物(etfe)、四氟乙烯/丙烯共聚物(tfe/p)、四氟乙烯/六氟丙烯共聚物(fep/hfp)、六氟丙烯/四氟乙烯/亞乙烯基共聚物(thv)或具有官能化聚合物端基的全氟(1-丁烯基乙烯基醚)均環(huán)聚合物。

31.根據(jù)任何段落24至30中任一項的方法，其中所述外部彈性體層和所述內部含氟聚合物層通過粘結粘附在一起。

32.根據(jù)段落31的方法，其中所述粘結是通過化學粘結、粘合劑粘結、熱熔粘結、溶劑粘結、激光焊接、以及表面處理、擠出、共擠出、涂布、層壓或其組合進行的。

33.根據(jù)任何段落23至32中任一項的方法，其中所述容器包括袋、燒瓶或管。

34.根據(jù)段落33的方法，其中所述袋、燒瓶或管包含至少一個可密封的進入端口。

35.根據(jù)段落23的方法，其中步驟a)和b)是可互換的。

36.根據(jù)段落23的方法，其還包括溫育所述容器的步驟。

實例

包括下述實例以證明本發(fā)明的優(yōu)選實施例。本領域技術人員應了解，下述實例中公開的技術代表由發(fā)明人發(fā)現(xiàn)的在本發(fā)明的實踐中運作良好的技術，并且因此可視為構成用于其實踐的優(yōu)選模式。然而，根據(jù)本公開內容，本領域技術人員應當理解，可在所公開的具體實施例中作出許多改變，并且仍然獲得相同或相似的結果，而不背離本發(fā)明的精神和范圍。

實例1

(測試樣品)

表1：toc數(shù)據(jù)

ppm＝mg/l

實例2

(溶解氧實驗)

在頂部和底部由5milfep制成的現(xiàn)有fep袋，以及在頂部由5milfep和在底部由熱塑性硅酮/fep制成的原型袋分別用自來水填充至300ml和190ml。這些體積與當袋平躺時袋中1厘米厚度的水相關，這是業(yè)界眾所周知的建議。從每個袋中切出一個端口，以便在氮管線中進料，以將袋中的水吹掃至低于飽和的水平。使用固定在袋外部的presens探針監(jiān)測溶解氧(do)水平，并且與袋內部上的傳感器點對齊。當水中的do水平達到相當?shù)偷闹?～6-8％)時，將氮管線從袋中取出，并且將端口開口夾緊。對于實驗的剩余部分，將袋和架子放回水平靜止位置。將presens探針編程為在指定的時間點獲取do測量，以便根據(jù)時間測量氧的進入。假設氧進入的唯一途徑是穿過袋的壁。

結果：

下載來自presens系統(tǒng)的測量，并且對于兩個袋在excel中標繪(圖3、4和5)。研究了數(shù)據(jù)并且作出觀察以將數(shù)據(jù)歸入同類。例如，對于原型袋，排除了開始測量，因為袋被移動且操作以便從傳感器上方去除氣泡。另外，因為對原型袋進行了較長時間的測量，所以將數(shù)據(jù)分為兩個線性部分，即“初始進入”和“平衡方法”。為此，與可用現(xiàn)有數(shù)據(jù)作出的最佳比較在圖3和圖4中，其證明了對于相似的時間量(～68-70分鐘)，當以相似do水平(～6-8％)開始時，根據(jù)時間氧進入每個袋內的初始進入。察看圖3和4，可作出斜率的比較，以理解現(xiàn)有袋和原型袋之間的進入速率中的差異。現(xiàn)有袋具有0.008％do/分鐘的速率，而原型袋具有0.06％do/分鐘的速率，差異超過7x。這暗示了更可滲透的材料對氧進入的積極影響。

雖然已參考優(yōu)選實施例描述了本發(fā)明，但本領域技術人員將認識到，可在形式和細節(jié)上作出改變，而不背離本發(fā)明的精神和范圍。在說明書自始至終引用的所有參考文獻，包括在背景中的那些全文并入本文。本領域技術人員使用不超過例行實驗將認識到，或能夠確定與本文具體描述的本發(fā)明的特定實施例的許多等價物。這樣的等價物預期包括在所附權利要求的范圍內。