本發(fā)明涉及新型化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽及其在抑制17β-羥基類固醇脫氫酶的療法中的用途。本發(fā)明還涉及包含這些化合物的藥用組合物。
背景技術(shù)：
：17β-羥基類固醇脫氫酶(17β-hsd)，也稱作17-酮類固醇還原酶(17-ksr)，是nad(h)-和/或napd(h)-依賴性醇氧化還原酶，其催化所有雌激素和雄激素的形成的最后和關(guān)鍵一步。更具體而言，17β-hsd催化17-羥基類固醇脫氫(氧化)形成相應(yīng)的17-酮類固醇或催化無活性17-酮類固醇?xì)浠?還原)形成相應(yīng)的活性17-羥基類固醇。因?yàn)榇萍に睾托奂に鼐谔幱?7β-羥基形式時(shí)對(duì)其受體具有最高親和力，因而17β-hsd/ksr調(diào)控性激素的生物活性。目前，已經(jīng)記載有17β-hsd的15個(gè)人類成員(1～15型)。不同類型的17β-hsd/ksr在其底物和輔因子特異性方面有所區(qū)別。17ksr活性將低活性前體轉(zhuǎn)化為更強(qiáng)力的形式，而17β-hsd活性則降低雌激素和雄激素的效力，從而可以保護(hù)組織免受過度的激素作用。每種類型的17β-hsd均具有選擇性的底物親和性和獨(dú)特的(盡管在一些情況下有重疊)組織分布。1型17β-羥基類固醇脫氫酶(17β-hsd1)在卵巢中的發(fā)育中的卵泡的卵巢顆粒細(xì)胞中和人胎盤中(二者均為雌激素的生物合成組織)表達(dá)最豐富。另外，17β-hsd1在雌激素靶組織(包括乳房、子宮內(nèi)膜和骨骼)中表達(dá)。人17β-hsd1對(duì)雌激素底物有特異性，在體內(nèi)催化雌酮還原成雌二醇。另一方面，2型17β-羥基類固醇脫氫酶(17β-hsd2)將雌二醇、睪酮和5a-二氫睪酮分別轉(zhuǎn)化為其活性較低形式雌酮、雄甾烯二酮和5a-雄甾烷二酮。由于其在大量的各種雌激素和雄激素靶組織(例如子宮、胎盤、肝臟和胃腸道以及尿道)中廣泛且豐富的表達(dá)，已揭示2型酶保護(hù)組織免受過度的類固醇作用。雌二醇(e2)在其雌激素效果方面是雌酮(e1)效力的約10倍且是雌三醇(e3)效力的約80倍。與某些其他雌激素不同的是，雌二醇對(duì)雌激素受體erα和erβ均結(jié)合較好，因此調(diào)控多種基因的表達(dá)。盡管17β-hsd1和17β-hsd2均存在于健康的絕經(jīng)前人類中，但在多個(gè)研究中已顯示出在患有激素依賴性乳腺癌的絕經(jīng)后患者的腫瘤中17β-hsd1與17-hsd2之比增大。17hsd1基因擴(kuò)增和17hsd2等位基因的雜合性的喪失是與乳腺腫瘤中還原性雌激素合成途徑的增加有關(guān)的潛在機(jī)理。增大的1型酶與2型酶之比增加了雌二醇水平，其然后通過雌激素受體(er)促進(jìn)癌組織的增殖。于是高水平的雌激素支持某些癌癥，例如乳腺癌和子宮內(nèi)層的癌癥(即子宮內(nèi)膜癌和子宮癌)。類似地，已揭示17β-hsd2在子宮內(nèi)膜異位癥中下調(diào)，而與正常子宮內(nèi)膜相比，芳香酶和17β-hsd1均表達(dá)或上調(diào)。這再次導(dǎo)致存在高濃度的雌二醇(e2)，其驅(qū)動(dòng)組織的增殖。類似的機(jī)理已經(jīng)在子宮平滑肌瘤(子宮肌瘤)和子宮內(nèi)膜增生中得到闡明。在受影響的組織中，內(nèi)源性雌二醇濃度的降低將導(dǎo)致所述組織中17β-雌二醇細(xì)胞的增殖減少或削弱，于是可以用于預(yù)防和治療惡性和良性的雌二醇依賴性病癥。由于已提出17β-雌二醇參與多種惡性和良性病狀，對(duì)于17β-羥基類固醇脫氫酶的抑制劑存在巨大需求，其可以用于削弱由雌酮內(nèi)源性生成雌二醇，可以在預(yù)防或治療這類病癥或疾病方面具有治療價(jià)值。在poirierd.(2003)currmedchem10:453-77和poirierd.(2010)expertopin.ther.patents20(9):1123-1145中已經(jīng)鑒定并綜述了17β-hsd1酶的一些小分子抑制劑。而且，在wo2001/42181、wo2003/022835、wo2003/033487、wo2004/046111、wo2004/060488、wo2004/110459、wo2005/032527和wo2005/084295中已經(jīng)披露了17β-hsd的小分子抑制劑。wo2004/085457披露了能夠抑制17β-羥基類固醇脫氫酶的類固醇化合物。wo2006/003012披露了適用于治療可以因抑制1型17β-羥基類固醇脫氫酶而受到影響的雌激素依賴性疾病的2-取代d-同型雌三烯(homo-estriene)衍生物。類似地，wo2006/003013提出了可用于預(yù)防和治療受1型17β-羥基類固醇脫氫酶抑制所影響的雌激素依賴性疾病的2-取代雌三烯酮。在wo2004/085345中提出了充當(dāng)局部活性雌激素的15-取代的雌二醇類似物。wo2006/027347披露了具有選擇性雌激素活性的15b-取代的雌二醇衍生物，用于治療或預(yù)防雌激素受體相關(guān)疾病和生理狀況。另外，wo2005/047303披露了能夠抑制1型17β-羥基類固醇脫氫酶的3,15-取代的雌酮衍生物。國際申請(qǐng)wo2008/034796涉及適用于治療和預(yù)防需要抑制17β-羥基類固醇脫氫酶(例如17β-hsd1型、2型或3型酶)的類固醇激素依賴性疾病或病癥的雌甾三烯三唑。在wo99/46279中已經(jīng)公開了17β-hsd3型酶的抑制劑。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的是提供具有提高的治療性的新型化合物，可用于治療與增加的雌二醇水平有關(guān)的和/或可通過抑制17β-hsd1酶來治療的病癥和疾病。本發(fā)明的另一目的是提供對(duì)17β-hsd2酶沒有或幾乎沒有顯示出抑制效果的化合物。本發(fā)明的化合物可以充當(dāng)前藥。借助掩蔽部分(maskingmoiety)的特性，當(dāng)包括在本發(fā)明的化合物中時(shí)，掩蔽的生物活性實(shí)體可以遞送至有需要的患者。此外，與相應(yīng)的裸的生物活性實(shí)體相比，本發(fā)明的化合物將有利地表現(xiàn)出更好的溶解性并由此表現(xiàn)出更好的體內(nèi)生物利用度。因此本發(fā)明提供式(i)的新型化合物其中r1、r2、r3和r4如權(quán)利要求中所定義。本發(fā)明還涉及包含有效量的一種或多種式(i)的化合物的藥用組合物。另外，本發(fā)明涉及用作藥物的式(i)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明還涉及用于治療雌二醇依賴性惡性或良性疾病和病癥的式(i)的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽。最后，本發(fā)明提供了制備式(i)的化合物的方法。具體實(shí)施方式本發(fā)明的化合物含有具有限定的立體化學(xué)(其是雌激素的天然構(gòu)型)的類固醇核心結(jié)構(gòu)。本發(fā)明的化合物在c15處以β構(gòu)型帶有甲基噻唑基側(cè)鏈，其與a環(huán)的特定取代模式一起提供了本發(fā)明的化合物的創(chuàng)造性。另外，天然雌酮核心的c-17羰基核被掩蔽為c-17酮亞胺。該特定的c-17部分強(qiáng)化了本發(fā)明的化合物的代謝性和/或抑制性。并且特別是活性實(shí)體的c-3oh部分被無毒性的保護(hù)基掩蔽，從而有利地改變化合物的溶解性。我們之前指出，pct/fi2014/050518(在此通過援引并入其全部內(nèi)容和公開)中披露的化合物可用于治療與增加的雌二醇水平有關(guān)的和/或可通過抑制17β-hsd1酶來治療的病癥和疾病。這些化合物對(duì)17β-hsd2酶沒有或幾乎沒有顯示出抑制效果。pct/fi2014/050518中披露的此類化合物的具體實(shí)例是式(viv)的化合物：其中r1是c1-6-烷基；r3是h或鹵素；和r4是h或c1-3-烷基。但是，pct/fi2014/050518中披露的化合物是難溶或不溶于水，因此限制了施用途徑和/或藥物配制。例如對(duì)于口服施用，pct/fi2014/050518中披露的化合物必須與表面活性劑一起施用，表面活性劑可能對(duì)一些患者造成嚴(yán)重副作用。因此，高度期望開發(fā)出水溶性化合物以改善生物利用度。本發(fā)明的目的是提供包含式(viv)的治療活性實(shí)體的化合物。在本發(fā)明的一個(gè)方面，本發(fā)明的化合物是水溶性前藥化合物。特定的水溶性化合物可以口服施用而無需不期望的溶解助劑。本發(fā)明化合物在向受試者施用后轉(zhuǎn)化為基本上不溶于水的選擇性17β-hsd1抑制化合物。本發(fā)明的化合物在體內(nèi)被酯酶水解以遞送活性成分。所述化合物也可以本身具有生物活性。因此，本發(fā)明的化合物可以本身是活性實(shí)體，也可以遞送具有生物活性的母體分子。具有下述結(jié)構(gòu)式(i)的本發(fā)明化合物本身可顯示對(duì)17β-hsd1的弱或強(qiáng)的體外抑制活性，而經(jīng)掩蔽的活性實(shí)體(viv)對(duì)17β-hsd1具有強(qiáng)抑制活性，但對(duì)17β-hsd2沒有或幾乎沒有顯示出抑制效果。此處和下文直接使用的術(shù)語“烷基”或者作為鹵代烷基、全鹵代烷基或烷氧基的一部分使用的術(shù)語“烷基”是具有指定數(shù)量的碳原子的脂肪族直鏈、支化或環(huán)狀(特別是直鏈或支化)烴基，例如c1-6-烷基在烷基部分具有1～6個(gè)碳原子，于是，例如，c1-3-烷基包括甲基、乙基、正丙基和異丙基，c1-6-烷基還包括支化和直鏈的正丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基、戊基和己基。此處和下文使用的術(shù)語“鹵代烷基”指的是一個(gè)或多個(gè)氫原子被鹵素(具體而言，i、br、f或cl)替代的任何上述烷基。鹵代烷基的實(shí)例包括且不限于氯甲基、氟甲基和-ch2cf3。術(shù)語“全鹵代烷基”應(yīng)理解為指的是所有氫原子都被鹵素原子替代的烷基。優(yōu)選實(shí)例包括三氟甲基(-cf3)和三氯甲基(-ccl3)。此處和下文直接使用或者作為其它基團(tuán)的一部分使用的術(shù)語“鹵素”是指viia族元素，并且包括f、cl、br和i。此處和下文使用的術(shù)語“c3-6-環(huán)烷基”指的是具有3～6個(gè)碳原子的環(huán)烷基，因而包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。此處和下文使用的術(shù)語“烯基”是在任何兩個(gè)碳原子之間具有至少一個(gè)烯屬雙鍵并具有指定數(shù)量的碳原子的不飽和直鏈或支化烴基，例如c2-6-烯基在烯基部分具有2～6個(gè)碳原子，例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基和己烯基。優(yōu)選的烯基的實(shí)例包括但不限于具有末端雙鍵的直鏈烯基，例如乙烯基和烯丙基。此處和下文在苯基的上下文中使用的術(shù)語“可選地經(jīng)取代”指的是未取代或獨(dú)立地取代有一個(gè)或多個(gè)(特別是1、2或3個(gè))取代基的苯基，這些取代基在任何可用的原子處連接以生成穩(wěn)定化合物，例如苯基可以一次取代有連接到苯環(huán)的鄰、對(duì)和間位的指定取代基。通?！敖?jīng)取代的”指的是如本文所定義的取代基，除非另有說明，所述取代基中所含有的與氫原子鍵合的一個(gè)或多個(gè)鍵被與非氫原子鍵合的鍵所替代。取代基各自獨(dú)立地選自由鹵素、c1-4-烷基(特別是甲基)、oh、c1-4-烷氧基(特別是甲氧基)、cn、no2和乙酰氧基組成的組。優(yōu)選的是，所述苯基可選地取代有乙酰氧基?！翱蛇x的"或"可選地"指的是后述事件或情況可以但不一定發(fā)生，并且該表述包括了所述事件或情況發(fā)生的情形以及不發(fā)生的情形?！鞍被颉鞍ā敝傅氖呛笫黾峡梢缘⒎潜仨毎ㄆ渌亍１硎?藥學(xué)上可接受的"表示可用于制備通常安全、無毒性并且在生物學(xué)或其他方面并非不期望的藥用組合物，包括可用于獸醫(yī)用途以及人類醫(yī)藥用途。術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”指的是已知無毒性并且常用于藥學(xué)文獻(xiàn)中的鹽。通常這些是所指化合物的酸加成鹽或堿加成鹽。表述“酸加成鹽”包括式(i)的化合物可以形成的任何無毒性的有機(jī)和無機(jī)酸加成鹽。形成適當(dāng)?shù)柠}的示例性無機(jī)酸包括但不限于鹽酸、氫溴酸、硫酸和磷酸。形成適當(dāng)?shù)柠}的示例性有機(jī)酸包括但不限于乙酸、乳酸、丙二酸、琥珀酸、戊二酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、馬來酸、苯甲酸、苯基乙酸、肉桂酸、甲磺酸和水楊酸等。此處使用的術(shù)語“酸加成鹽”還包括化合物及其鹽所能夠形成的溶劑化物，例如，水合物和醇合物等。這些鹽還包括可用于手性拆分外消旋體的鹽。表述“堿加成鹽”包括式(i)的化合物可以形成的任何無毒性的堿加成鹽。適合的堿鹽包括但不限于源自無機(jī)堿的那些，例如鋁、銨、鈣、銅、鐵、鋰、鎂、錳、鉀、鈉和鋅鹽，特別是鈉鹽和銨鹽。有機(jī)堿加成鹽的其他實(shí)例包括三烷基胺(例如三乙胺和三甲胺)的鹽和膽堿鹽。本發(fā)明的目的可以通過具有式(i)的新型化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽來實(shí)現(xiàn)其中r1是c1-6-烷基；r2選自由so2oh、so2r”、so2n(r’)2、(ch2o)mpo(or’)2、coor”’、c(o)n(r’)2、c(o)(ch2)nn(r’)2、c(o)ch2nr’c(o)r’、c(o)ch2nr’c(o)or”和c(o)r”’組成的組；r3是h或鹵素；和r4是h或c1-3-烷基；在此r’是h或者c1-6-烷基、c1-3-鹵代烷基或c1-3-全鹵代烷基，或者當(dāng)r’是任何n(r’)2的一部分時(shí)，兩個(gè)r’與它們所連接的氮一起可以形成包含1或2個(gè)雜原子的5～6元脂肪族或芳香族雜環(huán)，所述雜原子各自獨(dú)立地選自n和o，或者形成帶電的n(r’)3+基團(tuán)，其中r’如上定義；r”是c1-6-烷基、c1-3-鹵代烷基、c1-3-全鹵代烷基或可選地經(jīng)取代的苯基；r”’是c1-6-烷基；c2-6-烯基；-(ch2)n-c3-6-環(huán)烷基；包含1或2個(gè)雜原子的5～6元脂肪族或芳香族雜環(huán)，所述雜原子各自獨(dú)立地選自n和o，所述雜環(huán)可選地在任何n原子處取代有c(o)r’，其中r’如上定義；或可選地經(jīng)取代的苯基；m是0或1；并且n是1或2。在本發(fā)明的一個(gè)方面，r1是叔丁基。r1是叔丁基時(shí)的式(i)化合物顯示出特別優(yōu)異的17β-hsd1抑制作用。在本發(fā)明的另一方面，r4是甲基或乙基，特別是甲基。r4是甲基或乙基(特別是甲基)時(shí)的式(i)化合物對(duì)17β-hsd2酶沒有或幾乎沒有顯示出抑制效果。在本發(fā)明的另一方面，r3是h。因此，本發(fā)明的特定方面提供具有式(ia)的式(i)化合物：其中r2選自由so2oh、so2r”、so2n(r’)2、(ch2o)mpo(or’)2、coor”’、c(o)n(r’)2、c(o)(ch2)nn(r’)2、c(o)ch2nr’c(o)r’、c(o)ch2nr’c(o)or”和c(o)r”’組成的組；r3是h或鹵素；和r4是h或c1-3-烷基；在此r’是h或者c1-6-烷基、c1-3-鹵代烷基或c1-3-全鹵代烷基，或者當(dāng)r’是任何n(r’)2的一部分時(shí)，兩個(gè)r’與它們所連接的氮一起可以形成包含1或2個(gè)雜原子的5～6元脂肪族或芳香族雜環(huán)，所述雜原子各自獨(dú)立地選自n和o，或者形成帶電的n(r’)3+基團(tuán)，其中r’如上定義；r”是c1-6-烷基、c1-3-鹵代烷基、c1-3-全鹵代烷基或可選地經(jīng)取代的苯基；r”’是c1-6-烷基；c2-6-烯基；-(ch2)n-c3-6-環(huán)烷基；包含1或2個(gè)雜原子的5～6元脂肪族或芳香族雜環(huán)，所述雜原子各自獨(dú)立地選自n和o，所述雜環(huán)可選地在任何n原子處取代有c(o)r’，其中r’如上定義；或可選地經(jīng)取代的苯基；m是0或1；并且n是1或2；或者其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明的又一方面提供式(i)和(ia)的化合物，其中r2選自由(ch2o)mpo(or’)2、c(o)(ch2)nn(r’)2、c(o)ch2nr’c(o)r’和c(o)ch2nr’c(o)or”組成的組。優(yōu)選式(i)和(ia)的化合物為其中r2是c(o)(ch2)nn(r’)2的化合物。這些化合物展示出水溶解性。還優(yōu)選的是式(i)和(ia)的化合物，其中r2是(ch2o)mpo(or’)2，其中r’是h、c1-6-烷基、c1-3-鹵代烷基或c1-3-全鹵代烷基，并且m是0或1。這些化合物顯示出特別優(yōu)異的水溶解性，這將如下文所證明。本發(fā)明的一方面涉及選自由以下化合物組成的組的式(i)化合物：化合物1磷酸單{(13s,15r)-2-叔丁基-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-[2-(5-甲基噻唑-2-基氨基甲?；?乙基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基}酯；化合物2(叔丁氧基羰基)甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物3甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物4二甲基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物5n-(叔丁氧基羰基)-n-(甲基)-甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物6甲基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物72-嗎啉代乙酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物8三乙基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯，鹽酸鹽；化合物9異丙基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物10乙酸(13s,15r)-2-叔丁基-13-甲基-17[(e)-甲氧基亞氨基]-15-[2-(5-甲基-噻唑-2-基氨基甲?；?-乙基]-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物11硫酸一氫(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物12氨基磺酸(13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物133-環(huán)戊基丙酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物14磷酸(二叔丁酯)((((13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)氧基)甲酯)；化合物15二氫磷酸(((13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)氧基)甲酯；化合物16碳酸(叔丁酯)((13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)酯；化合物17吡咯烷-1,2-二甲酸1-(叔丁酯)2-((13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)酯；化合物18脯氨酸(13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；和其藥學(xué)上可接受的鹽。本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選方面涉及選自由以下化合物組成的組的式(i)化合物：化合物1磷酸單{(13s,15r)-2-叔丁基-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-[2-(5-甲基噻唑-2-基氨基甲?；?乙基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基}酯；化合物2(叔丁氧基羰基)甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物3甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物4二甲基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物5n-(叔丁氧基羰基)-n-(甲基)-甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物6甲基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物72-嗎啉代乙酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物8三乙基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯，鹽酸鹽；化合物9異丙基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物14磷酸(二叔丁酯)((((13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)氧基)甲酯)；化合物15二氫磷酸(((13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)氧基)甲酯；化合物17吡咯烷-1,2-二甲酸1-(叔丁酯)2-((13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)酯；化合物18脯氨酸(13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；和其藥學(xué)上可接受的鹽。在本發(fā)明的另一方面涉及選自由以下化合物組成的組的式(i)化合物：化合物1磷酸單{(13s,15r)-2-叔丁基-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-[2-(5-甲基噻唑-2-基氨基甲酰基)乙基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基}酯；化合物1a磷酸單{(13s,15r)-2-叔丁基-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-[2-(5-甲基噻唑-2-基氨基甲?；?乙基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基}酯二鈉鹽；化合物2(叔丁氧基羰基)甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物3a甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯三氟乙酸鹽；化合物3b甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯鹽酸鹽；化合物4二甲基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物4a二甲基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯鹽酸鹽；化合物5n-(叔丁氧基羰基)-n-(甲基)-甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物6a甲基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯鹽酸鹽；化合物72-嗎啉代乙酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物8三乙基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯，鹽酸鹽；化合物9異丙基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物9a異丙基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯鹽酸鹽；化合物10乙酸(13s,15r)-2-叔丁基-13-甲基-17[(e)-甲氧基亞氨基]-15-[2-(5-甲基-噻唑-2-基氨基甲?；?-乙基]-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物11a硫酸一氫(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯，三乙基銨鹽；化合物12氨基磺酸(13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物133-環(huán)戊基丙酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯；化合物14磷酸(二叔丁酯)((((13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)氧基)甲酯)；化合物15二氫磷酸(((13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)氧基)甲酯；化合物15a二氫磷酸(((13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)氧基)甲酯二鈉鹽；化合物16碳酸(叔丁酯)((13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)酯；化合物18a脯氨酸(13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯2,2,2-三氟乙酸鹽；和化合物18b脯氨酸(13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯鹽酸鹽.式(viv)的治療活性實(shí)體的實(shí)例由式(i)的化合物釋放的活性物質(zhì)的代表性實(shí)例在表1中示出。表1:本發(fā)明的實(shí)例式(i)化合物的代表性實(shí)例在表2中示出。表2:式(i)的化合物的實(shí)例一般制備方法本發(fā)明的化合物可以用本領(lǐng)域已知的方法制備。以下實(shí)例闡述了式(i)的化合物的制備。一般信息商品級(jí)試劑和溶劑在不經(jīng)進(jìn)一步純化的情況下使用。在merck板、預(yù)涂鋁片上進(jìn)行薄層色譜(tlc)。通過以下技術(shù)完成板的可視化：1)紫外照射(254nm)，2)將板浸入茴香醛或香草醛溶液中然后加熱。使用指定溶劑用brukerdpx(200mhz)光譜儀測量1h-nmr譜。本發(fā)明的化合物可以由相應(yīng)的c-17羰基衍生物制備，所述c-17羰基衍生物中r2是h，然后需要用烷基將r2衍生化并修飾c3–oh基團(tuán)。合成原料和前體的制備化合物vii化合物vii可以按照messinger等，molcellendocrinol.2009(301)216-224中所披露的合成。以雌酮為起點(diǎn)合成化合物vii的詳細(xì)內(nèi)容記載于solvaypharmaceuticals的pct申請(qǐng)wo2005/047303和wo2006/125800中。芐基-c15-c16-脫氫雌酮ii按前述方法由雌酮分五步制備。在-78℃溫度下在碘化亞銅和氯化鋰的存在下用烯丙基格氏試劑處理化合物ii。在室溫下通過硼烷四氫呋喃復(fù)合物進(jìn)行硼氫化得到化合物iii，然后在堿性條件下進(jìn)行過氧化氫氧化，以超過90％的收率生成二醇iv。在丙酮-水中進(jìn)行jones氧化得到酸v，使用pd/c作為催化劑對(duì)v進(jìn)行氫化脫芐基，得到化合物vi。最后一步為酰胺形成，得到β-噻唑vii。由雌酮合成關(guān)鍵前體(即酚式噻唑vii)的過程如下所示?；衔飗iii-13-((13s,15r)-2-(叔丁基)-3-羥基-13-甲基-17-氧代-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-15-基)-n-(5-甲基噻唑-2-基)丙酰胺在室溫下向化合物vii(2.0g,100mol-％)在干燥二氯甲烷中的攪拌懸浮液中添加叔丁醇(1.5ml)和三氟化硼二乙醚合物(3.2ml)，反應(yīng)后進(jìn)行tlc。在室溫下將混合物攪拌過夜，添加額外量的三氟化硼二乙醚合物(1ml)和叔丁醇(500μl)。將所得的橙色溶液攪拌3小時(shí)，而后小心添加水(40ml)和dcm(40ml)。分層，水層用dcm(3x30ml)萃取。將合并的有機(jī)層用水(3x30ml)、飽和nahco3水溶液(30ml)和鹽水(3x30ml)洗滌。蒸發(fā)掉溶劑，沉淀物用庚烷洗滌，得到1.8g產(chǎn)物viii-1(收率80％)。1h-nmr(dmso-d6):0.97(s,3h),1.2-1.45(m,12h),1.5-2.4(m,16h),2.6-2.95(m,2h),6.47(s,1h),7.01(s,1h),7.11(s,1h),8.97(s,1h),11.92(s,1h,-nh).msm/z(tofes+):517(m+na).c-17(烷基)肟的合成制備c-17甲基肟的一般方法：將酮(0.3mmol)在氮?dú)鈿夥障氯芙庥谝掖?3ml)和thf(2ml)的混合物中。向該溶液中添加吡啶(1.5mmol)和甲氧基胺鹽酸(0.9mmol)。使反應(yīng)混合物回流1-2h。蒸發(fā)掉溶劑。添加水，將產(chǎn)物過濾或用乙酸乙酯萃取，用稀鹽酸洗滌，最后用水洗滌。需要時(shí)通過快速色譜進(jìn)一步純化肟。化合物viv-13-{(13s,15r)-2-叔丁基-3-羥基-17-[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-15-基}-n-(5-甲基噻唑-2-基)丙酰胺使用化合物viii-1作為原料，通過針對(duì)c-17甲基肟所述的方法制備，從而以定量(quantitative)收率提供viv。1h-nmr(cdcl3+meoh-d4):1.09(s,3h),1.3-2.9(m,33h),3.85(s,3h),6.43(s,1h)7.07(s,1h),7.17(s,1h),12.34(br,1h).msm/z(tofes+):546(m+na).化合物viv-23-((13s,15r,e)-2-(叔丁基)-3-羥基-4-碘-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-15-基)-n-(5-甲基噻唑-2-基)丙酰胺將化合物viv-1(100mg,0.191mmol,100mol-％)和p-tsoh(33mg,100mol-％)溶解在干燥acn(2ml)中，在室溫下攪拌15分鐘。分批添加n-碘代琥珀酰亞胺(52mg,0.229mmol,120mol-％)。反應(yīng)在室溫下攪拌2.5小時(shí)，添加額外量的n-碘代琥珀酰亞胺(24mol-％)。繼續(xù)在室溫下攪拌過夜。添加水(5ml)，并添加10％na2co3直到ph8。在etoac(3x10ml)中萃取產(chǎn)物。合并的有機(jī)層用10％na2so3、水和鹽水洗滌，并用na2so4干燥。蒸發(fā)掉溶劑。粗產(chǎn)物(123mg)用快速色譜純化?；衔飗iv-2的量為80mg。1h-nmr(dmso-d6):1.02(s,3h),1.33(s,9h),1.20-2.80(m,21h),3.73(s,3h),7.11(s,1h),7.14(s,1h),7.97(s,1h),11.90(brs,1h).化合物viv-33-{(13s,15r)-2-叔丁基-3-羥基-17-[(e)-羥基亞氨基]-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-15-基}-n-(5-甲基噻唑-2-基)丙酰胺使用化合物viii-1作為原料以及鹽酸羥基胺作為試劑，用上述一般方法制得，收率95％。1h-nmr(cdcl3+meoh-d4):1.11(s,3h),1.3-3.1(m,34h),6.46(s,1h),7.05(s,1h,),7.15(s,1h).msm/z(tofes+):532(m+na).化合物viv-43-{(13s,15r)-2-叔丁基-17-[(e)-乙氧基亞氨基]-3-羥基-13-甲基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-15-基}-n-(5-甲基噻唑-2-基)丙酰胺向viii-1(700mg,100mol-％)和etoh(無水)(30ml)的懸浮液中添加鹽酸乙基羥基胺(670mg,500mol-％)，然后添加吡啶(1.52g,1200mol-％)。將所得溶液回流3小時(shí)，蒸發(fā)掉溶劑。向殘余物添加水。水層用etoac萃取。合并的有機(jī)層用水和鹽水洗滌，以na2so4干燥，過濾并蒸發(fā)。粗產(chǎn)物與庚烷一起研磨。產(chǎn)物的收率為87％。1h-nmr(dmso-d6):1.03(s,3h),1.17(t,3h),1.31(s,9h),1.2-2.8(m,18h),2.33(s,3h),3.99(q,2h),6.46(s,1h),7.00(s,1h),7.11(s,1h),8.97(s,1h),11.91(s,1h).msm/z(tofes+):560(m+na),538(m+1).c-3衍生物的合成化合物1磷酸單{(13s,15r)-2-叔丁基-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-[2-(5-甲基噻唑-2-基氨基甲酰基)乙基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基}酯將viv-1(5.0g,100mol-％)溶解于干thf(75ml)中。添加吡啶(800mol-％)，然后滴加氧氯化磷(800mol-％)。在氮?dú)庀聦⑷芤涸谑覝財(cái)嚢柽^夜，直到反應(yīng)完成。第二天，將溶液冷卻，仔細(xì)添加200ml水。繼續(xù)攪拌過夜。蒸發(fā)掉thf。thf蒸發(fā)后的沉淀物溶液用水(～200ml)稀釋，添加6nhcl溶液(～20ml)，直到白色磷酸酯沉淀完成。將固體材料過濾，用大量水仔細(xì)洗滌，直到濾液為中性。將粗產(chǎn)物與甲苯和乙醇一起共蒸發(fā)。仔細(xì)地在真空下干燥磷酸酯。1的產(chǎn)量為2.6g；收率90％。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.04(s,3h),1.31(s,9h),1.48-2.90(m,23h),3.73(s,3h),7.11-7.15(s+d,3h).11.92(brs,1h).31p-nmr(dmso-d6):-7.04.msm/z(tofes+):604(m+h).化合物1a磷酸單{(13s,15r)-2-叔丁基-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-[2-(5-甲基噻唑-2-基氨基甲?；?乙基-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基}酯二鈉鹽將干燥的1(2.2g,3.6mmol)溶解于無水乙醇(35ml)中，然后添加naoh(400mol-％)在無水乙醇(5ml)中的過濾溶液。在室溫于氮?dú)庀聰嚢?小時(shí)后，蒸發(fā)掉溶劑。沉淀物用et2o和et2o:etoh(4:1)洗滌數(shù)次。1a的產(chǎn)量為2.31g；收率98％。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.11(s,3h),1.43(s,9h),1.60-2.95(m,22h),3.79(s,3h),7.05(d,2h),7.49(s,1h).31p-nmr(meoh-d4):-0.41.msm/z(tofes+):604[(m-2na)+h]+.化合物2(叔丁氧基羰基)甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯將viv-1(500mg,0.95mmol,100mol-％)在室溫下溶解在干燥dcm(10ml)中。添加吡啶(154μl,1.91mmol,200mol-％)、boc-甘氨酸(184mg,1.05mmol,110mol-％)和dcc(236mg,1.15mmol,120mol-％)。反應(yīng)在室溫在氮?dú)鈿夥障聰嚢?小時(shí)。添加額外量的dcc(59mg,30mol-％)，并繼續(xù)攪拌過夜。再添加額外量的boc-甘氨酸(184mg,110mol-％)和dcc(177mg,90mol-％)，繼續(xù)攪拌7小時(shí)。過濾出dhu，用dcm洗滌。添加水(30ml)，進(jìn)行分層。水層用dcm(3x20ml)洗滌。合并的有機(jī)層用1nhcl(5x20ml)、水(3x30ml)和鹽水(2x30ml)洗滌，用na2so4干燥。粗產(chǎn)物(1.0g)通過使用洗脫劑dcm:meoh99:1的快速色譜純化。產(chǎn)物的量為670mg。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.05(s,3h),1.26(s,9h),1.39(s,9h),1.10-2.90(m,22h),3.73(s,3h),3.95-3.98(m,2h),6.68(s,1h),7.11(s,1h),7.23(s,1h),11.90(brs,1h).化合物3a甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯三氟乙酸鹽將2(450mg)溶解于干燥dcm(6ml)中。在氮?dú)鈿夥障孪虮浞磻?yīng)混合物中仔細(xì)添加tfa(1.2ml)。反應(yīng)在室溫下攪拌1.5小時(shí)。蒸發(fā)掉溶劑，與甲苯一起共蒸發(fā)2次。粗產(chǎn)物與et2o(5ml)一起研磨。將沉淀物過濾，用et2o(2x2ml)洗滌，產(chǎn)生400mg產(chǎn)物。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.06(s,3h),1.28(s,9h),1.10-2.90(m,21h),3.74(s,3h),4.19(m,2h),6.76(s,1h),7.12(s,1h),7.28(s,1h),8.42(brs,2h),11.92(brs,1h)化合物3b甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯鹽酸鹽將2(300mg,0.52mmol)溶解在含有20滴meoh的無水etoh(10ml)中。在氮?dú)鈿夥障绿砑?mhcl(430μl)，反應(yīng)在室溫下攪拌1.5小時(shí)。蒸發(fā)掉溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)。粗產(chǎn)物與etoac(3x1ml)一起研磨，過濾，用etoac(1ml)洗滌。產(chǎn)物的量為160mg。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.06(s,3h),1.28(s,9h),1.10-2.90(m,21h),3.74(s,3h),4.17(m,2h),6.77(s,1h),7.12(s,1h),7.27(s,1h),8.53(brs,2h),11.93(brs,1h).msm/z(tofes+):603(-hcl+na),581(-hcl；m+h).化合物4二甲基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯使用viv-1作為原料并添加dmap(30mol-％)，使用針對(duì)化合物2所述的dcc方法來制備4。反應(yīng)混合物用草酸處理，將沉淀的dhu濾出。在進(jìn)行了針對(duì)2所述的萃取后，以定量收率分離出產(chǎn)物。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.04(s,3h),1.22(s,9h),1.40-2.90(m,27h),3.46(s,2h),3.72(s,3h),6.70(s,1h),7.09(s,1h),7.10(s,1h),11.89(brs,1h).化合物4a二甲基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯鹽酸鹽將二甲基甘氨酸衍生物4(2.9g,4.8mmol)溶解在etoac(20ml)中。在氮?dú)鈿夥障孪蚍磻?yīng)混合物中滴加在etoac(10ml)中的濃hcl(1.5ml)，在室溫下攪拌10分鐘。蒸發(fā)掉溶劑，并與甲苯共蒸發(fā)。粗產(chǎn)物與etoac(3x1ml)一起研磨，過濾，用少量etoac洗滌數(shù)次。產(chǎn)物的量為2.53g，收率82％。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.05(s,3h),1.27(s,9h),1.48-2.45(m,18h),2.60-2.82(m,3h),2.92(s,6h),3.78(s,3h),4.59(m,2h),6.89(s,1h),7.12(s,1h),7.27(s,1h),10.70(br,1h),11.98(brs,1h).msm/z(tofes+):609[(m-hcl)+h]+化合物5n-(叔丁氧基羰基)-n-(甲基)-甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯使用viv-1作為原料并添加dmap(30mol-％)，使用針對(duì)化合物2所述的dcc方法來制備5。反應(yīng)混合物用草酸處理，將沉淀的dhu濾出。在萃取后將產(chǎn)物分離，收率74％。1h-nmr(dmso-d6):1.04(s,3h),1.26(s,9h),1.37(s,3h),1.47-2.93(m,22h),3.73(s,3h),4.28(d,2h),6.74(s,1h),7.10(s,1h),7.24(s,1h),11.90(brs,1h).化合物6a甲基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯鹽酸鹽使用hcl-etoac溶液用于鹽酸鹽制備，并根據(jù)獲得化合物3b所用的方法制得，收率73％。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.05(s,3h),1.27(s,9h),1.60-2.45(m,21h),3.73(s,3h),4.01(m,2h),4.32(brs,2h),6.80(s,1h),7.12(s,1h),7.27(s,1h),9.44(brs,1h),11.96(brs,1h).c3c(o)(ch2)n(r’)2-衍生物的合成化合物vv-12-氯乙酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯將viv-1(500mg,0.95mmol,100mol-％)溶解在干燥dcm(5ml)中，在氮?dú)鈿夥障绿砑舆拎?230μl,2.9mmol,300mol-％)。反應(yīng)混合物用冰浴冷卻，滴加溶解在干燥dcm(2ml)中的氯乙酰氯(230μl,2.9mmol,300mol-％)。在冰浴中繼續(xù)攪拌2.5小時(shí)。反應(yīng)混合物用dcm(10ml)和水(20ml)稀釋，在有機(jī)相中萃取產(chǎn)物。水相用dcm(3x5ml)萃取。合并有機(jī)相，用1nhcl(30ml)、1nnaoh(3x20ml)、水(3x50ml)洗滌，最后用鹽水(30ml)洗滌。粗產(chǎn)物550mg(96％)無需純化即用于進(jìn)一步反應(yīng)。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.05(s,3h),1.25(s,9h),1.40-2.80(m,21h),3.74(s,3h),4.72(s,2h),6.80(s,1h),7.11(s,1h),7.25(s,1h),11.91(brs,1h).化合物72-嗎啉代乙酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯將vv(200mg,0.33mmol,100mol-％)溶解在干燥thf(4ml)中，添加碘化鈉(150mg,1.0mmol,300mo.％)，在室溫下于氮?dú)庀聰嚢?小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用冰浴冷卻，滴加溶解在thf(1ml)中的嗎啉(43μl,0.50mmol,150mol-％)。繼續(xù)冷攪拌1小時(shí)，然后在室溫下攪拌2小時(shí)。蒸發(fā)掉溶劑，將沉淀物溶劑在etoac(10ml)中，反應(yīng)混合物倒入冰冷的0.1nhcl溶液中。進(jìn)行相分離。水相用etoac(3x5ml)萃取。合并有機(jī)相，用水(3x30ml)洗滌，最后用鹽水(3x20ml)洗滌。用mgso4干燥后，蒸發(fā)掉溶劑，產(chǎn)生產(chǎn)物192mg；收率為89％。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.05(s,3h),1.27(s,9h),1.40-2.92(m,28h),3.73(s,3h),4.59(s,2h),6.89(s,1h),7.12(s,1h),7.27(s,1h),10.67(brs,1h),11.96(brs,1h).化合物8三乙基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯，鹽酸鹽使用vv作為原料并用三乙基胺(150mol-％)作為試劑，使用與針對(duì)化合物7所述的相同方法制備三乙基甘氨酸酯。產(chǎn)物通過色譜進(jìn)行純化。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.05(s,3h),1.27(m,18h),1.48-2.81(m,21h),3.57(q,6h),3.73(s,3h),4.80(s,2h),6.89(s,1h),7.11(s,1h),7.28(s,1h),11.91(brs,1h).化合物9異丙基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯將vv(100mg,0.17mmol,100mol-％)溶劑在干燥thf(4ml)中，添加nai(125mg,0.83mmol,500mol-％)。反應(yīng)在室溫下攪拌0.5小時(shí)。反應(yīng)用冰浴冷卻至0℃，滴加溶解在干燥thf(1ml)中的異丙基胺(165μl,2.01mmol,1200mol-％)。反應(yīng)在0℃攪拌5小時(shí)。添加etoac(5ml)，將反應(yīng)混合物倒入冰冷的水(5ml)中。進(jìn)行分層，水層用etoac(3x5ml)萃取。合并的有機(jī)層用水(3x5ml)和鹽水(3x5ml)萃取，用mgso4干燥。粗產(chǎn)物通過快速色譜純化。產(chǎn)物的量為35mg。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm0.98(s,3h),1.01(s,3h),1.05(s,3h),1.26(s,9h),1.12-2.90(m,23h),3.62(brs,2h),3.73(s,3h),6.71(s,1h),7.11(s,1h),7.23(s,1h),11.90(brs,1h)化合物9a異丙基甘氨酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯鹽酸鹽將9(300mg,0.52mmol)溶解在干燥etoac(1ml)中。添加溶解在干燥etoac(0.2ml)中的濃hcl(34μl)(ph～1)，反應(yīng)在室溫下攪拌1小時(shí)。蒸發(fā)掉溶劑，與甲苯共蒸發(fā)。粗產(chǎn)物與etoac(3x1ml)和et2o(5x1ml)一起研磨。產(chǎn)物的量為41mg。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.05(s,3h),1.29(s,9h),1.31(s,6h),1.49-2.90(m,17h),3.41(m,1h),3.73(s,3h),4.34(t,2h),6.80(s,1h),7.11(s,1h),7.28(s,1h),9.35(brs,2h),11.94(s,1h),11.90(brs,1h).其它c(diǎn)-3衍生物的合成化合物10乙酸(13s,15r)-2-叔丁基-13-甲基-17[(e)-甲氧基亞氨基]-15-[2-(5-甲基-噻唑-2-基氨基甲酰基)-乙基]-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯將viv-1(500mg,0.95mmol,100mol-％)溶解在干燥dcm(10ml)中。添加吡啶(930μl,～11mmol,～1200mol-％)和乙酸酐(450μl,4.8mmol,500mol-％)，反應(yīng)混合物在室溫下攪拌2小時(shí)。用dcm(10ml)稀釋后，產(chǎn)物用2nhcl溶液(3x20ml)、水(3x30ml)洗滌，最后用鹽水(3x20ml)洗滌，用硫酸鈉干燥。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.05(s,3h),1.27(s,9h),1.29-1.47(m,3h),1.79-2.10(m,6h),2.23-2.44(m,13h),2.67-2.83(m,2h),3.73(s,3h),6.71(s,1h),7.11(d,1h),7.23(s,1h),11.90(brs,1h).msm/z(tofes+):588(m+na)+化合物11a硫酸一氫(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯，三乙基銨鹽將viv-1(0.4g,0.76mmol,100mol-％)溶解在干燥dmf(10ml)中。向反應(yīng)混合物中添加三氧化硫三乙基胺復(fù)合物(415mg,2.3mmol,300mol-％)。2小時(shí)后添加額外量的試劑(140mg,0.76mmol,100mol-％)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌過周末。添加硅膠(5克)，蒸發(fā)掉溶劑(浴溫低于+35℃)。使用甲苯-乙醇-三乙胺(v/v3:1:0.05)從硅膠中洗脫出產(chǎn)物，蒸發(fā)掉溶劑。沉淀物與小份乙醇一起研磨數(shù)次。三乙基銨鹽的產(chǎn)量為288mg；收率為53％。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.05(s,3h),1.17(t,9h),1.30(s,9h),1.40-2.81(m,22h),3.09(q,6h),3.73(s,3h),7.08(s,1h),7.11(s,1h),7.31(s,1h),11.91(brs,1h).msm/z(tofes+):705m+化合物12氨基磺酸(13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯將viv-1(100mg,0.191mmol,100mol-％)和三乙胺(240μl,1.72mmol,900mol-％)溶解在干燥dcm(3ml)中。反應(yīng)用冰浴冷卻至0℃。將氨磺酰氯(199mg,1.72mmol,900mol-％)溶解在干燥dcm(3ml)中并添加到反應(yīng)中。反應(yīng)在室溫下攪拌2天，期間添加氨磺酰氯試劑兩次(2x90mol-％)。添加dcm(10ml)，用水(2x10ml)和鹽水(10ml)萃取。粗產(chǎn)物(110mg)通過快速色譜純化。產(chǎn)物的量為25mg。hplc(218nm)9％。1h-nmr(dmso-d6):1.04(s,3h),1.33(s,9h),1.20-2.90(m,21h),3.72(s,3h),7.11(s,1h),7.23(s,2h),8.13(brs,2h),11.90(brs,1h).化合物133-環(huán)戊基丙酸(13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯將viv-1(0.4g,0.76mmol)溶解在干燥dcm(10ml)中。在氮?dú)鈿夥障绿砑舆拎?620μl,7.6mmol)和環(huán)戊烷丙酰氯(590μl,3.8mmol)。將反應(yīng)混合物回流，直到完成反應(yīng)(～6小時(shí))。反應(yīng)混合物用dcm(10ml)洗滌，用水洗滌，并用1nhcl洗滌數(shù)次，然后用水和鹽水洗滌。粗產(chǎn)物通過色譜純化，得到產(chǎn)物254mg；收率為51％。1hnmr(200mhz,dmso-d6)δppm1.04(s,3h),1.25(s,9h),1.44-2.70(m,32h),2.67-2.83(m,2h),3.72(s,3h),6.68(s,1h),7.10(d,1h),7.22(s,1h),11.89(brs,1h).化合物14磷酸(二叔丁酯)((((13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)氧基)甲酯)將viv-1(400mg,0.764mmol,100mol-％)溶解在干燥dmf(10ml)中。添加磷酸(二叔丁酯)(氯甲酯)[85％](300μl,30mol-％)和四丁基碘化銨(bu4ni)(56mg,20mol-％)。反應(yīng)冷卻至0℃。仔細(xì)添加nah[60％](68mg,1.68mmol,220mol-％)。首先將反應(yīng)在0℃攪拌30分鐘，然后在室溫下攪拌5小時(shí)。以小比例(33mol-％)添加額外量的磷酸(二叔丁酯)(氯甲酯)試劑，直到完成反應(yīng)。用10％檸檬酸(20ml)猝滅反應(yīng)，用etoac(3x20ml)萃取。合并的有機(jī)層用10％檸檬酸(1x20ml)、水(2x30ml)和鹽水(2x30ml)萃取，用na2so4干燥。粗產(chǎn)物與庚烷:etoac(8:2)一起研磨，產(chǎn)生310mg產(chǎn)物。1h-nmr(dmso-d6):1.04(s,3h),1.10-2.90(m,21h),1.32(s,9h),1.41(s,18h),3.73(s,3h),5.57-5.63(d,2h),6.83(s,1h),7.11-7.13(m,2h),11.91(brs,1h)化合物15二氫磷酸(((13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)氧基)甲酯將14(300mg)溶解在干燥dcm(3ml)中。反應(yīng)冷卻至0℃。將三氟乙酸(62μl)溶解在干燥dcm(300μl)中，并添加到反應(yīng)中。首先在0℃將反應(yīng)攪拌數(shù)小時(shí)，然后在室溫下攪拌過夜。添加額外量的tfa(111μl)，繼續(xù)攪拌?？偡磻?yīng)時(shí)間為3天。蒸發(fā)掉溶劑。粗產(chǎn)物通過與etoac和et2o一起研磨來純化，產(chǎn)生的產(chǎn)物的量為81mg。1h-nmr(dmso-d6):1.04(s,3h),1.10-2.90(m,23h),1.31(s,9h),3.73(s,3h),5.53-5.59(d,2h),6.84(s,1h),7.11(m,2h),11.91(brs,1h).化合物15a二氫磷酸(((13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)氧基)甲酯二鈉鹽二鈉鹽15a通過與針對(duì)1a所述的方法相同的方法制備。1h-nmr(d2o):0.90(s,3h),0.90-2.80(m,21h),1.30(s,9h),3.75(s,3h),5.44-5.47(d,2h),6.99-7.15(m,3h).31p-nmr(d2o):1.38.msm/z(tofes+):634[(m-2na)+h]+.化合物16碳酸(叔丁酯)((13s,15r)-2-(叔丁基)-17[(e)-甲氧基亞氨基]-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)酯將viv-1(100mg,0.191mmol,100mol-％)溶解在干燥dcm(2ml)中。添加三乙胺(133μl,0.955mmol,500mol-％)。反應(yīng)用冰浴冷卻至0℃。添加焦碳酸二叔丁酯(175μl,0.763mmol,400mol-％)和dmap(4mg,0.033mmol,17mol-％)。反應(yīng)在0℃下攪拌30分鐘，然后在室溫下攪拌約25小時(shí)。添加焦碳酸二叔丁酯(175μl)和dmap(4mg)，繼續(xù)攪拌3小時(shí)。將反應(yīng)倒在冰水中，用dcm(3x10ml)萃取。合并的有機(jī)層用水(2x20ml)和鹽水(2x20ml)萃取。粗產(chǎn)物(165mg)通過快速色譜純化。產(chǎn)物的量為114mg。1h-nmr(dmso-d6):1.04(s,3h),1.26(s,9h),1.46(s,9h),1.10-2.90(m,21h),3.73(s,3h),6.73(s,1h),7.10(s,1h),7.21(s,1h),11.90(brs,1h).化合物17吡咯烷-1,2-二甲酸1-(叔丁酯)2-((13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基)酯將viv-1(500mg,0.955mmol,100mol-％)在氮?dú)鈿夥障氯芙庠诟稍飀cm(10ml)中。向反應(yīng)混合物中添加吡啶(616μl,800mol-％)、boc-pro-oh(411mg,200mol-％)和dcc(787mg,400mol-％)。反應(yīng)在室溫下攪拌4小時(shí)，在40℃下攪拌2小時(shí)，并在室溫下攪拌過夜。添加dmap(30mol-％)，在室溫下繼續(xù)攪拌3小時(shí)。添加溶解在meoh(1ml)中的草酸(340mg,395mol-％)，在室溫下繼續(xù)攪拌過夜。濾出沉淀的dhu，蒸發(fā)掉溶劑。將殘余物溶解在dcm中，用0.5nhcl(3x20ml)、水(3x20ml)和鹽水(2x20ml)洗滌。粗產(chǎn)物通過色譜純化，并與庚烷一起研磨。產(chǎn)物的量為467mg。1h-nmr(cdcl3):1.12(s,3h),1.34(s,9h),1.48(s,9h),1.10-2.90(m,25h),3.40-3.65(m,2h),3.85(s,3h),4.50-4.60(m,1h),6.74-6.77(m,1h),7.05(s,1h),7.29(s,1h),11.58(brs,1h).化合物18a脯氨酸(13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯2,2,2-三氟乙酸鹽將17(450mg,0.624mmol)溶解在干燥dcm(5ml)中，用冰浴冷卻。滴加三氟乙酸(1.2ml)，將反應(yīng)混合物在冰浴中攪拌4.5小時(shí)。蒸發(fā)掉溶劑，最后與甲苯一起共蒸發(fā)。沉淀物與et2o一起研磨，得到tfa鹽365mg。收率80％。1h-nmr(cdcl3):1.10(s,3h),1.30(s,9h),1.10-2.90(m,25h),3.40-3.60(m,2h),3.85(s,3h),4.60-4.80(m,1h),6.68(s,1h),7.05(s,1h),7.29(s,1h).化合物18b脯氨酸(13s,15r,e)-2-(叔丁基)-17-(甲氧基亞氨基)-13-甲基-15-(3-((5-甲基噻唑-2-基)氨基)-3-氧代丙基)-7,8,9,11,12,13,14,15,16,17-十氫-6h-環(huán)戊二烯并[a]菲-3-基酯鹽酸鹽將tfa鹽18a(60mg,0.082mmol,100mol-％)溶解在etoac(1ml)中，添加4mhcl溶液(45μl)。反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，蒸發(fā)掉溶劑，然后與甲苯一起共蒸發(fā)。殘余物與etoac一起研磨。將沉淀物過濾，用etoac洗滌，得到hcl鹽(48mg)。收率88％。1h-nmr(dmso-d6):1.05(s,3h),1.27(s,9h),1.10-2.90(m,25h),3.15-3.40(m,2h),3.73(s,3h),4.60-4.80(m,1h),6.90(s,1h),7.11(s,1h),7.27(s,1h),9.27(brs,1h),10.36(brs,1h),11.95(brs,1h).msm/z(tofes+):621(-hcl；m+1).藥理學(xué)試驗(yàn)提供以下試驗(yàn)以說明方式闡述本發(fā)明，不應(yīng)認(rèn)為其限制本發(fā)明的范圍。而且，測定中的化合物濃度是示例性的，不應(yīng)被視為限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以利用本領(lǐng)域已知的方法定義藥學(xué)上相關(guān)的濃度。17β-羥基類固醇脫氫酶1型酶的抑制17β-hsd1的產(chǎn)生和分離:通過“bactobacexpressionsystem”(invitrogen)產(chǎn)生重組桿狀病毒。使用“cellfectin試劑”(invitrogen)將重組桿粒轉(zhuǎn)染到sd9昆蟲細(xì)胞中。60h后，收集細(xì)胞；按照puranen,t.j.,poutanen,m.h.,peltoketo,h.e.,vihko,p.t.和vihko,r.k.(1994)site-directedmutagenesisoftheputativeactivesiteofhuman17β-hydroxy-steroiddehydrogenasetype1.biochem.j.304:289-293的描述分離出微粒體部分。將等分試樣冷凍保存，直到進(jìn)行酶活性測定。測定–重組人17β-hsd1的抑制：在濃度為1μm或0.1μm的潛在抑制劑的存在下，在室溫將蛋白勻漿物(0.1μg/ml)在具有30nm雌酮(包含800000cpm/ml的3h-雌酮)和1mmnadph的20mmkh2po4ph7.4中溫育30分鐘。抑制劑儲(chǔ)備溶液在dmso中制備。將dmso的最終濃度調(diào)節(jié)為在所有樣品中為1％。通過加入10％三氯乙酸(最終濃度)來停止酶反應(yīng)。將樣品在微量滴定板中以4000rpm離心10分鐘。在配備有waterssentryguard柱的waterssymmetryc18柱上對(duì)上清液進(jìn)行反相hplc。在室溫下在作為流動(dòng)溶劑的乙腈:水48:52中以1ml/min的流速運(yùn)行等度(isocratic)hplc。通過packardflowscintillation分析儀監(jiān)測洗出液中的放射性。在每個(gè)樣品中測定雌酮和雌二醇的總放射性，并根據(jù)下式計(jì)算雌酮向雌二醇的百分比轉(zhuǎn)化率：如下計(jì)算百分比抑制率：抑制％＝100-轉(zhuǎn)化％針對(duì)母體化合物測定抑制％數(shù)值，將結(jié)果總結(jié)在表3中。17β-羥基類固醇脫氫酶2型酶的抑制17β-hsd2的產(chǎn)生和分離：與17β-hsd1類似，通過“bactobacexpressionsystem”(invitrogen)產(chǎn)生重組桿狀病毒。使用“cellfectin試劑”(invitrogen)將重組桿粒轉(zhuǎn)染到sd9昆蟲細(xì)胞中。60h后，收集細(xì)胞，通過以下方案將上清液分級(jí)：-將細(xì)胞溶于40ml的a-緩沖液(40mmtris,ph8.0,20％甘油,20μmnad,0.4mmpmsf,150mmnacl,0.5％十二烷基-β-麥芽糖苷+蛋白酶抑制劑混合物)中-將細(xì)胞超聲-將裂解物在冰上溫育15分鐘-將裂解物以5000rpm離心15分鐘，+4℃-將上清液以180000g離心30分鐘，+4℃-將沉淀塊溶于8ml的a-緩沖液中-通過+4℃5000rpm離心15分鐘除去未重懸的材料-將澄清的上清液分成100μl等分試樣，并在酶活性測定前冷凍保存。通過免疫印跡法分析17β-hsd2的量，測定每個(gè)提取批次的總蛋白濃度。測定–重組人17β-hsd2的抑制：在濃度為1μm或0.1μm的潛在抑制劑的存在下，在室溫將蛋白勻漿物(4μg/ml)在含有50nm雌二醇(包含800000cpm/ml的3h-雌二醇)和1mmnadh的20mmkh2po4ph8.5中溫育30分鐘。抑制劑儲(chǔ)備溶液在dmso中制備。將dmso的最終濃度調(diào)節(jié)為在所有樣品中為1％。通過加入10％三氯乙酸(最終濃度)來停止酶反應(yīng)。將樣品在微量滴定板中以4000rpm離心10分鐘。在配備有waterssentryguard柱的waterssymmetryc18柱上對(duì)上清液進(jìn)行反相hplc。在室溫下在作為流動(dòng)溶劑的乙腈:水48:52中以1ml/min的流速運(yùn)行等度hplc。通過packardflowscintillation分析儀監(jiān)測洗出液中的放射性。在每個(gè)樣品中測定雌酮和雌二醇的總放射性，并根據(jù)下式計(jì)算雌二醇到雌酮的百分比轉(zhuǎn)化率：如下計(jì)算百分比抑制率：抑制％＝100-轉(zhuǎn)化％針對(duì)活性實(shí)體測定抑制％數(shù)值，將結(jié)果總結(jié)在表3中。表3：活性實(shí)體的藥理學(xué)活性#1μm時(shí)的17β-hds1抑制％1μm時(shí)的17β-hsd2抑制％viv-18614viv-39541viv-4898雌激素受體結(jié)合測定母體化合物與雌激素受體a(erα)的結(jié)合親和力可以根據(jù)koffmann等ref所述的體外er結(jié)合測定來確定。作為另選，雌激素受體結(jié)合測定可以根據(jù)國際專利申請(qǐng)wo2000/07996來進(jìn)行。雌激素受體反式激活測定顯示出對(duì)于雌激素受體的結(jié)合親和力的母體化合物可以進(jìn)一步針對(duì)其各自的雌激素潛力或抗雌激素潛力(對(duì)erα或erβ的激動(dòng)性結(jié)合或拮抗性結(jié)合)來測試。雌激素受體拮抗活性的測定可以使用例如美國專利申請(qǐng)us2003/0170292中記載的mmtv-ere-luc報(bào)告系統(tǒng)根據(jù)體外測定系統(tǒng)來進(jìn)行。代謝穩(wěn)定性測定使用人肝臟微粒體和勻漿溫育對(duì)示例化合物測定母體化合物的體外代謝穩(wěn)定性。與或不與適當(dāng)?shù)妮o因子一起使用的溫育時(shí)間點(diǎn)為0分鐘和60分鐘。在這兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)都收集樣品，使用lc/pda/tof-ms監(jiān)測底物。計(jì)算了化合物的體外代謝穩(wěn)定性(60分鐘后在人肝臟勻漿物或微粒體中的殘余％)，并將結(jié)果總結(jié)在表4中。表4：代謝穩(wěn)定性#體外代謝穩(wěn)定性，60分鐘后的殘余％vii13viv-1100viv-3100式(i)的化合物的酶促水解測試了實(shí)施例1、3a、4a和15a的化合物向其母體化合物化合物viv-1的水解。如供應(yīng)商(sigmaaldrich)規(guī)定那樣使用來自牛腸粘膜的堿性磷酸酶viis型的單位量。將適量的化合物(終濃度通常為50μm)溶解在預(yù)熱的緩沖溶液(ph7.4)中，將溶液置于37℃的恒溫控制水浴中。通過向溶液中加入酶來啟動(dòng)酶促反應(yīng)。在空白溶液中，用相同體積的水代替酶，以確保水解明顯是酶促的。以預(yù)定的時(shí)間間隔，取出200μl樣品，并向各樣品加入200μl冰冷的乙腈以停止酶促水解。將樣品保持在冰上，以14000rpm離心10分鐘，通過hplc分析上清液。從殘留化合物相對(duì)于時(shí)間繪制的對(duì)數(shù)圖的線性部分的斜率計(jì)算化合物水解的偽一階半衰期(t1/2)。所有受測化合物在約3～8分鐘內(nèi)水解成其相應(yīng)的母體分子。水溶解度試驗(yàn)在室溫下在合適的緩沖溶液(0.16m磷酸鹽緩沖液或者0.05mmtris-hcl緩沖液，ph7.4；0.05m乙酸鹽緩沖液，ph5.0；50mm(離子強(qiáng)度0.15)hcl緩沖液，ph1.0)中確定了母體化合物viv-1、viv-2、viv-3和viv-4和實(shí)施例1、1a、3a、4a和15a的化合物的水溶解度。在研究過程中使混合物的ph保持恒定。向1ml或0.5ml的緩沖溶液中添加過量或已知量的每種成分，混合物在室溫下攪拌48小時(shí)以下，過濾(0.45μmmillipore)，通過hplc進(jìn)行分析。結(jié)果顯示在表5中。表5.溶解度數(shù)據(jù)化合物水溶解度，ph7.4的緩沖液viv小于定量極限(0.52μg/ml)1a大于32mg/ml3a8.26μg/ml4a7.99μg/ml15a大于30mg/ml從表5可看出，實(shí)施例1、1a、3a、4a和15a顯示出提高的水溶解性，并且磷酸衍生化合物1a和15顯示出顯著的水溶解度。生物利用度的確定進(jìn)行該研究以確定本發(fā)明化合物的體內(nèi)生物利用度。所有動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均按照倫理行為和適當(dāng)?shù)臋C(jī)構(gòu)動(dòng)物護(hù)理和使用政策標(biāo)準(zhǔn)來進(jìn)行。母體化合物viv-1和本發(fā)明的化合物的藥代動(dòng)力學(xué)研究在食蟹猴中進(jìn)行評(píng)估。以對(duì)應(yīng)于10mg/kg母體藥物的劑量水平口服施用研究化合物。使用共同的水性制劑，0.5％羧甲基纖維素水溶液，作為載劑。通過直接靜脈穿刺在給藥前和口服施用后10個(gè)連續(xù)時(shí)間點(diǎn)獲得血液樣品。根據(jù)bioanalyticalmethodvalidation(fda,2001)和guidelineonbioanalyticalmethodvalidation(europeanmedicinesagency,2011)(歐洲藥物管理局，2011)的指導(dǎo)進(jìn)行血漿樣品的定量生物分析。針對(duì)合適的色譜(峰形，保留)和質(zhì)譜(電離效率)性質(zhì)優(yōu)化了分析方法。使用專業(yè)版6.3(pharsightcorporation)，用單個(gè)的血漿濃度-時(shí)間曲線進(jìn)行非房室(non-compartmental)藥代動(dòng)力學(xué)分析：cmax(最大觀察濃度)和tmax(達(dá)到最大觀察濃度花費(fèi)的時(shí)間)值。使用線性對(duì)數(shù)梯形法則計(jì)算了從0至最后的可測量濃度的濃度-時(shí)間曲線下面積(auct)。研究化合物的所獲得的cmax和auct值顯示在表6中。表6:cmax和auct值從表6可看出，所有本發(fā)明的試驗(yàn)化合物都提供與原樣施用的活性實(shí)體至少相當(dāng)?shù)纳锢枚?。但是，磷酸衍生化合物顯示出生物利用度的顯著提高。本發(fā)明的應(yīng)用性本發(fā)明的化合物(當(dāng)代謝成其母體化合物時(shí)和/或其本身)顯示出對(duì)17β-hsd1酶的選擇性抑制潛力并且對(duì)17β-hsd2酶幾乎沒有或沒有抑制活性，因此可以用于治療類固醇激素依賴性的惡性或良性疾病或病癥，特別是治療和預(yù)防數(shù)種雌激素依賴性疾病和病癥。而且，本發(fā)明的化合物可以用于治療與升高的雌二醇水平有關(guān)的、可以通過17β-hsd1酶的抑制劑來預(yù)防、治療和/或改善的疾病和病癥。炎性疾病和病況的實(shí)例包括但不限于乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌、子宮癌、子宮內(nèi)膜癌、子宮內(nèi)膜增生、子宮內(nèi)膜異位癥、子宮肌瘤、子宮平滑肌瘤、子宮腺肌癥、痛經(jīng)、月經(jīng)過多、子宮不規(guī)則出血、前列腺痛癥(prostadynia)、良性前列腺增生癥、泌尿功能障礙、多囊卵巢綜合征、下泌尿道綜合征、多發(fā)性硬化、肥胖癥、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、結(jié)腸癌、組織創(chuàng)傷、皮膚皺紋和白內(nèi)障。本文使用的"治療或預(yù)防"包括：防治或預(yù)防以及降低個(gè)體患上所述病癥或病況的風(fēng)險(xiǎn)，或一旦確認(rèn)所述病癥后該病癥的緩解、改善、消除或治愈。因此本發(fā)明的化合物可用作藥用組合物中的活性成分，用于治療或預(yù)防需要抑制17β-hsd酶的疾病或病癥。本發(fā)明的化合物可以以約0.1μg/kg體重～約300mg/kg體重的劑量范圍內(nèi)的有效量(優(yōu)選1.0μg/kg體重～10mg/kg體重)施用。本發(fā)明的化合物可以以單一每日劑量施用，或者總的每日劑量可以每日兩次、三次或四次以分開的劑量施用。"有效量"指的是對(duì)治療對(duì)象賦予治療效果的化合物的量。治療效果可以是客觀的(即可通過某些試驗(yàn)或標(biāo)記物測量)或主觀的(即受試對(duì)象指出效果或感覺到效果)。這樣的治療不一定完全改善疾病的狀況。而且，這樣的治療或預(yù)防可以與本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的減輕病況的其他傳統(tǒng)治療聯(lián)合使用。本發(fā)明的化合物最優(yōu)選單獨(dú)使用或與在其他活性成分中使用。本發(fā)明的化合物可以通過各種途徑施用，例如，胃腸外、皮下、靜脈內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、鞘內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)和皮下注射，以及通過透皮、直腸、頰、口腔粘膜、鼻、眼途徑，以及經(jīng)由吸入和經(jīng)由植入。包括本發(fā)明化合物作為活性成分的藥用組合物可進(jìn)一步包括藥學(xué)上可接受的添加劑。可以將化合物配制為適當(dāng)?shù)慕M合物；適當(dāng)?shù)氖┯眯问桨ɡ缛芤?、分散液、懸浮液、粉末、膠囊劑、片劑、丸劑、控釋膠囊、控釋片劑和控釋丸劑。除了藥理學(xué)活性化合物以外，化合物的藥用組合物可以含有合適的藥學(xué)上可接受的載劑，包括有助于將活性化合物加工為可以藥學(xué)上使用的制劑的賦形劑和輔料。另外，式(i)的化合物可以用作制備其他化合物、特別是由式(i)的化合物能夠獲得(例如通過引入取代基或修飾官能團(tuán))的其他藥學(xué)活性成分的合成中間體。本領(lǐng)域技術(shù)人員將明白，隨著技術(shù)進(jìn)步，本發(fā)明構(gòu)思可以以各種方式實(shí)施。本發(fā)明及其實(shí)施方式并不限于上述實(shí)例，而是可以在權(quán)利要求的范圍內(nèi)有所變化。當(dāng)前第1頁12