本發(fā)明涉及發(fā)現(xiàn)了990207-22-1化合物在固體狀態(tài)下存在的一種新晶vii型物質(zhì)狀態(tài)形式；涉及發(fā)明了一種990207-22-1晶vii型的制備方法；涉及發(fā)明了含有990207-22-1晶vii型或含任意非零比例晶vii型的混合晶型的藥物組合物；本發(fā)明還涉及990207-22-1晶型物質(zhì)作為活性成分在制備抗腫瘤和腫瘤預(yù)防疾病藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

990207-22-1(化學(xué)名：1-哌嗪二硫代甲酸-3-氰基-3，3-二苯基丙酯鹽酸鹽)

氨基二硫代甲酸酯類(lèi)化合物在許多領(lǐng)域都有著廣泛的應(yīng)用，特別是在農(nóng)藥領(lǐng)域中常用作殺菌劑。然而，有關(guān)該類(lèi)化合物的抗腫瘤活性方面的研究卻很少。

gerhauserc等人從十字花科植物中分離出一種氨基二硫代甲酸酯類(lèi)化合物brassinium，該化合物具有較強(qiáng)的腫瘤預(yù)防作用(cancerresearch1997，57，272-278)?；谶@一工作，我們發(fā)現(xiàn)了抗腫瘤作用顯著的哌嗪基二硫代甲酸酯類(lèi)化合物，在中國(guó)專(zhuān)利cn1328999a(公開(kāi)號(hào))中記載了北京大學(xué)李潤(rùn)濤等發(fā)明的“哌嗪基二硫代甲酸酯類(lèi)化合物，它們的制備方法和在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用”。其中，涉及了新穎的哌嗪基二硫代甲酸酯類(lèi)化合物及其可藥用鹽和包含該化合物的藥用組合物，該類(lèi)化合物可用于抑制腫瘤生長(zhǎng)，化合物990207-22-1是最優(yōu)秀的化合物之一。

在中國(guó)專(zhuān)利cn1727332a(公開(kāi)號(hào))中記載了北京大學(xué)李潤(rùn)濤等發(fā)明的“芳甲氨基二硫代甲酸酯類(lèi)化合物及其制備方法和應(yīng)用”。其中，涉及了一類(lèi)結(jié)構(gòu)全新的具有抗腫瘤活性的氨基二硫代甲酸酯類(lèi)化合物或其可藥用鹽及其包含該化合物的藥物組合物。

上述文獻(xiàn)和專(zhuān)利是從化合物的分離提取、合成純化等制備方法和臨床治療作用方面進(jìn)行描述，而本發(fā)明切入點(diǎn)與上述文獻(xiàn)和專(zhuān)利存在本質(zhì)差異，即是從990207-22-1固體化學(xué)物質(zhì)存在狀態(tài)研究入手，通過(guò)多晶型篩選技術(shù)研究，在藥物活性成分的原料層面上尋找、發(fā)現(xiàn)990207-22-1固體物質(zhì)的新晶型種類(lèi)與狀態(tài)特征，并將晶型研究與臨床和保健應(yīng)用結(jié)合，為尋找、發(fā)現(xiàn)、開(kāi)發(fā)具有最佳功效的990207-22-1物質(zhì)狀態(tài)提供基礎(chǔ)科學(xué)研究數(shù)據(jù)；同時(shí)，也為從990207-22-1固體晶型原料物質(zhì)基礎(chǔ)上申請(qǐng)國(guó)家或國(guó)際的知識(shí)產(chǎn)權(quán)發(fā)明專(zhuān)利保護(hù)提供科學(xué)依據(jù)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的之一：是提供990207-22-1晶vii型的固體物質(zhì)存在狀態(tài)和描述方式。

本發(fā)明目的之二：是提供990207-22-1晶vii型的制備工藝方法。

本發(fā)明目的之三：是提供含有990207-22-1晶vii型純品、或含有任意非零比例晶vii型的混合晶型的固體藥物及其組合物。

本發(fā)明目的之四：提供使用990207-22-1晶型固體物質(zhì)作為藥物活性成分的每日用藥劑量在1-300mg范圍內(nèi)。

本發(fā)明目的之五：提供使用990207-22-1的晶型固體物質(zhì)作為藥物活性成分原料而制備開(kāi)發(fā)出供臨床使用的各種片劑、膠囊、丸劑、針劑、緩釋或控釋制劑藥物。

本發(fā)明目的之六：是提供990207-22-1晶型物質(zhì)在抗腫瘤活性和腫瘤預(yù)防方面中的作用，以及在治療疾病過(guò)程中由于晶型物質(zhì)而提高生物體內(nèi)血藥濃度而發(fā)揮藥物有效治療作用。

本發(fā)明目的之七：是提供使用990207-22-1晶vii型或含有任意非零比例晶vii型的混合晶型固體物質(zhì)作為藥物有效成分的原料，在制備抗腫瘤和腫瘤預(yù)防藥物中的應(yīng)用。

本專(zhuān)利發(fā)明了990207-22-1化合物的一種新晶vii型固體物質(zhì)存在狀態(tài)，并發(fā)明了該晶型樣品的制備方法；本發(fā)明發(fā)現(xiàn)990207-22-1一種新晶vii型固體物質(zhì)在生物體內(nèi)具有吸收優(yōu)勢(shì)；此外，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)了990207-22-1晶vii型制備抗腫瘤和腫瘤預(yù)防藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)特征

1.990207-22-1晶vii型樣品的形態(tài)特征：

1.1本發(fā)明的990207-22-1晶vii型固體物質(zhì)，其特征在于當(dāng)使用粉末x射線(xiàn)衍射分析采用cukα輻射實(shí)驗(yàn)條件時(shí)，圖譜中存在一個(gè)彌散的衍射峰，其height％＝100的峰位置在2-theta＝21.0±0.3°或(圖1)。

1.2本發(fā)明的990207-22-1晶vii型固體物質(zhì)，其特征是在使用紅外光譜技術(shù)分析時(shí)，表現(xiàn)為3383、3056、2917、2690、2599、2456、2235、2114、1806、1594、1492、1463、1447、1415、1367、1338、1308、1263、1239、1188、1140、1082、1018、1009、986、899、858、811、752、695cm^-1±2cm^-1的吸收峰為990207-22-1晶vii型固體物質(zhì)所呈現(xiàn)的紅外光譜特征峰位置(圖2)。

1.3本發(fā)明的990207-22-1晶vii型固體物質(zhì)，其特征是在使用差示掃描量熱技術(shù)分析時(shí)，表現(xiàn)為當(dāng)升溫速率為每分鐘10℃的dsc圖譜中含有1個(gè)peak放熱峰在127℃±3℃，2個(gè)peak吸熱峰分別在171℃±3℃和201℃±3℃處(圖3)。

1.4本發(fā)明的990207-22-1晶vii型固體物質(zhì)，其特征是在使用熱重技術(shù)分析時(shí)，表現(xiàn)為當(dāng)升溫速率為每分鐘5℃的tg圖譜中含有1個(gè)失重臺(tái)階在320℃±3℃處，該失重臺(tái)階為990207-22-1化合物的自身失重峰位置，表明990207-22-1晶vii型固體物質(zhì)不含有結(jié)晶水或結(jié)晶溶劑(圖4)。

1.5本發(fā)明的990207-22-1晶vii型固體物質(zhì)，其特征是使用熔點(diǎn)儀進(jìn)行樣品分析時(shí)，其熔點(diǎn)值為202℃±2℃。

2.990207-22-1晶vii型樣品的制備方法特征：

本發(fā)明的990207-22-1晶vii型的制備方法，使用甲醇、氯仿、二氯甲烷、正丁醇任何一種單一溶劑、或使用甲醇、乙醇、氯仿、二氯甲烷、正丁醇、乙酸乙酯任意兩種或多種經(jīng)不同配比組合制成的混合溶劑，將990207-22-1樣品完全溶解后，經(jīng)環(huán)境溫度10℃～80℃、環(huán)境濕度10％～75％、真空實(shí)驗(yàn)條件下的重結(jié)晶制備工藝獲得晶vii型固體樣品。

3.990207-22-1的晶型成分、給藥劑量及藥物制劑組合物特征：

3.1一種990207-22-1化合物的混晶固體物質(zhì)，含有任意比例的990207-22-1晶vii型成分。

3.2本發(fā)明涉及的藥物組合物，其特征在于，含有有效劑量的990207-22-1晶vii型，或含有990207-22-1混晶固體物質(zhì)和藥學(xué)上可接受的載體。

3.3本發(fā)明涉及的藥物組合物，以990207-22-1晶型固體物質(zhì)作為藥物活性成分，每日用藥劑量在1-300mg范圍內(nèi)。

3.4本發(fā)明涉及的藥物組合物，其特征在于，所述的藥物組合物是片劑、膠囊、丸劑、針劑、緩釋制劑、控釋制劑。

3.5本發(fā)明涉及990207-22-1晶vii型或含有任意比例的990207-22-1晶vii型混晶成分在制備抗腫瘤和腫瘤預(yù)防藥物中的應(yīng)用。

4.990207-22-1晶vii型樣品的吸收特征：

本發(fā)明涉及使用了990207-22-1晶vii型物質(zhì)作為活性成分開(kāi)發(fā)的藥物及其藥物組合物經(jīng)口服后的生物學(xué)吸收作用，其特征在于使用了含有如權(quán)利要求1中所述的990207-22-1晶vii型物質(zhì)作為活性成分通過(guò)胃腸道或血液中迅速達(dá)到最大濃度值而在防治疾病中發(fā)揮的優(yōu)勢(shì)作用(圖5)。

附圖說(shuō)明

圖1990207-22-1晶vii型樣品的粉術(shù)x射線(xiàn)衍射圖譜

圖2990207-22-1晶vii型樣品的紅外圖譜

圖3990207-22-1晶vii型樣品的差示掃描量熱圖譜

圖4990207-22-1晶vii型樣品的熱重圖譜

圖5990207-22-1晶vii型樣品經(jīng)口服吸收后在大鼠體內(nèi)的血藥濃度曲線(xiàn)

具體實(shí)施方式

為更好說(shuō)明本發(fā)明的技術(shù)方案，特給出以下實(shí)施例，但本發(fā)明并不僅限于此。

實(shí)施例1

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法1：

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法，其特征在于使用60ml甲醇溶劑將1g的990207-22-1樣品完全溶解后，在50℃溫度的真空條件下去除溶劑制備獲得990207-22-1晶vii型樣品，其粉末x射線(xiàn)衍射圖譜與圖1一致。

實(shí)施例2

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法2：

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法，其特征在于使用50ml三氯甲烷為溶劑將1g的990207-22-1樣品完全溶解后，在45℃溫度的真空條件下去除溶劑制備獲得990207-22-1晶vii型樣品，其粉末x射線(xiàn)衍射圖譜與圖1一致。

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法3：

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法，其特征在于使用20ml正丁醇溶劑將100mg的990207-22-1樣品完全溶解后，在60℃溫度的真空條件下快速去除溶劑制備獲得990207-22-1晶vii型樣品，其粉末x射線(xiàn)衍射圖譜與圖1一致。

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法4：

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法，其特征在于使用20ml二氯甲烷溶劑將200mg的990207-22-1樣品完全溶解后，在45℃溫度的真空條件下快速去除溶劑制備獲得990207-22-1晶vii型樣品，其粉末x射線(xiàn)衍射圖譜與圖1一致。

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法5：

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法，其特征在于使用甲醇∶乙酸乙酯(2∶1)的混合溶劑30ml將100mg的990207-22-1樣品完全溶解后，在50℃溫度的真空條件下快速去除溶劑制備獲得990207-22-1晶vii型樣品，其粉末x射線(xiàn)衍射圖譜與圖1一致。

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法6：

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法，其特征在于使用氯仿∶乙酸乙酯(2∶1)的混合溶劑30ml將100mg的990207-22-1樣品完全溶解后，在50℃溫度的真空條件下快速去除溶劑制備獲得990207-22-1晶vii型樣品，其粉末x射線(xiàn)衍射圖譜與圖1一致。

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法7：

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法，其特征在于使用正丁醇∶乙酸乙酯(1∶1)的混合溶劑40ml將100mg的990207-22-1樣品完全溶解后，在60℃溫度的真空條件下快速去除溶劑制備獲得990207-22-1晶vii型樣品，其粉末x射線(xiàn)衍射圖譜與圖1一致。

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法8：

990207-22-1晶vii型樣品的制備方法，其特征在于使用甲醇∶氯仿(1∶2)的混合溶劑30ml將100mg的990207-22-1樣品完全溶解后，在50℃溫度的真空條件下快速去除溶劑制備獲得990207-22-1晶vii型樣品，其粉末x射線(xiàn)衍射圖譜與圖1一致。

實(shí)施例2

組合藥物制劑的制備方法1(片劑)：

一種組合藥物制劑的制備方法，其特征在于使用幾種賦形劑將990207-22-1晶vii型純品、或含有任意比例晶vii型的混晶固體物質(zhì)作為組合藥物的原料藥，制成每片含藥量在10～300mg的片劑，表2給出片劑配方：

表2990207-22-1組合藥物片劑的制備配方

將990207-22-1晶vii型純品或含有任意比例晶vii型的混晶原料藥制備成片劑制劑的方法是：將幾種賦形劑與原料藥混合均勻，加入1％羥甲基纖維素鈉溶液適量，制成軟料，過(guò)篩制粒，濕粒烘干，過(guò)篩整粒，加入硬脂酸鎂和滑石粉混合均勻，壓片，即得。

實(shí)施例3

組合藥物制劑的制備方法2(膠囊)：

一種組合藥物制劑的制備方法，其特征在于使用幾種賦形劑將990207-22-1晶vii型純品、或含有任意比例晶vii型的混晶固體物質(zhì)作為組合藥物的原料藥，制成每粒含藥量在10～300mg的膠囊，表3給出膠囊配方：

表3990207-22-1組合藥物膠囊的制備配方

將990207-22-1晶vii型純品、或含有任意比例晶vii型的混晶原料藥制備成膠囊制劑的方法是：將幾種賦形劑與原料藥混合均勻，加入1％羥甲基纖維素鈉溶液適量，制成濕粒，烘干，過(guò)篩整粒，加入硬脂酸鎂，混合均勻，插入膠囊制得?；虿皇褂弥屏２襟E，而直接將原料藥與幾種賦形劑混合均勻，過(guò)篩后，直接裝入膠囊制得。

實(shí)施例4

990207-22-1新晶vii型在大鼠體內(nèi)吸收特征和血藥濃度特征：

采用體重190～210g的spf級(jí)sd大鼠常規(guī)飼養(yǎng)條件飼養(yǎng)，自由飲水，禁食12h后，按150mg/kg灌胃給予藥物，于給藥前及給藥后45min、2h、4h、6h、8h、10h、12h、13.5h、14.5h、16h和24h，由眼內(nèi)眥取血于肝素化試管中，離心，取血漿0.15ml，加內(nèi)標(biāo)10μl混均后，加0.8ml乙酸乙酯，振蕩混均3min，13,400rpm離心10min，取上清液氮?dú)獯蹈桑粤鲃?dòng)相100μl復(fù)溶，上樣20μl進(jìn)行hplc檢測(cè)，用樣品與內(nèi)標(biāo)峰面積比進(jìn)行定量分析。hplc檢測(cè)系統(tǒng)為aligent1200高效液相色譜系統(tǒng)，色譜柱為agilentzorbaxsb-c18(4.6×250mm，5μm)，采用梯度洗脫的流動(dòng)相系統(tǒng)(見(jiàn)表4)，進(jìn)樣量為20μl，流速為1ml/min，檢測(cè)波長(zhǎng)為254nm，柱溫為30℃。結(jié)果顯示，大鼠口服990207-22-1新晶vii型樣品在6h后血液中即可檢測(cè)出活性成分。

表4.梯度洗脫的流動(dòng)相系統(tǒng)數(shù)據(jù)

表5.大鼠口服990207-22-1晶vii型樣品后的藥時(shí)曲線(xiàn)數(shù)據(jù)

實(shí)施例5

990207-22-1新晶vii型物質(zhì)作為活性成分的藥品給藥劑量：

使用990207-22-1新晶vii型樣品作為藥物活性成分制備開(kāi)發(fā)的藥物片劑或其他制劑，其特征是含有990207-22-1新晶vii型作為藥物的活性成分，每日給藥劑量為300mg，可分別制備成每日3次/每次1片100mg普通片劑，每日2次/每次1片150mg普通片劑或每日1次/每次1片300mg的片劑類(lèi)型。

需要說(shuō)明的問(wèn)題：本發(fā)明涉及的990207-22-1新晶vii型藥物組合物在有效成分的給藥劑量上存在有許多因素影響，例如：用于預(yù)防和治療的用途不同而造成每日用藥劑量的不同；患病性質(zhì)與患病嚴(yán)重程度不同而造成每日用藥劑量的不同；患者性別、年齡、體表面積的不同，給藥途徑、給藥次數(shù)、治療目的不同而造成每日用藥劑量的不同；此外，晶型樣品間存在的吸收和血藥濃度不同等，亦造成本發(fā)明在使用990207-22-1新晶vii型成分的每日合適劑量范圍為1～300mg/kg體重，優(yōu)選為10～100mg/kg體重。使用時(shí)應(yīng)根據(jù)實(shí)際的預(yù)防與治療不同情況需求制定990207-22-1新晶vii型有效成分總劑量方案，并可分為多次或一次給藥方式完成。