本發(fā)明屬于天然產(chǎn)物提取技術領域，涉及一種采用土人參根和莖中提取齊墩果酸的方法。

背景技術：
土人參，又名：櫨蘭、土洋參、福參、申時花、煮飯花、假人參、參草、土高麗參，水人參，紫人參等，屬中央種子目，馬齒莧科一年生或多年生草本。株無毛，高30-100厘米。主根粗壯，圓錐形，有少數(shù)分枝，皮黑褐色，斷面乳白色。莖直立，肉質，基部近木質，多少分枝，圓柱形，有時具槽。葉互生或近對生，具短柄或近無柄，葉片稍肉質，倒卵形或倒卵狀長橢圓形，長5-10厘米，寬2.5-5厘米，頂端急尖，有時微凹，具短尖頭，基部狹楔形，全緣。圓錐花序頂生或腋生，較大形，常二叉狀分枝，具長花序梗；花小，直徑約6毫米；總苞片綠色或近紅色，圓形，頂端圓鈍，長3-4毫米；苞片2，膜質，披針形，頂端急尖，長約1毫米；花梗長5-10毫米；萼片卵形，紫紅色，早落；花瓣粉紅色或淡紫紅色，長橢圓形、倒卵形或橢圓形，長6-12毫米，頂端圓鈍，稀微凹；雄蕊(10-)15-20，比花瓣短；花柱線形，長約2毫米，基部具關節(jié)；柱頭3裂，稍開展；子房卵球形，長約2毫米。蒴果近球形，直徑約4毫米，3瓣裂，堅紙質；種子多數(shù)，扁圓形，直徑約1毫米，黑褐色或黑色，有光澤?；ㄆ?-7月，果期9-10月。根入藥，滋補強壯。土人參栽培容易，繁殖迅速，病少蟲微，根、葉均可食用，可炒、可做湯、可涮、可燉，藥蔬兼用。作為蔬菜食用部分是不斷生長的嫩莖葉為賓館蔬菜。肉質根，是一種藥用補品，具有滋補強壯作用，健脾潤肺，止咳，調經(jīng)。用于脾虛勞倦、泄瀉，肺勞咳痰帶血、眩暈潮熱、盜汗自汗、月經(jīng)不調、帶下。補中益氣，潤肺生津。用于氣虛乏力，體虛自汗，脾虛泄瀉，肺燥咳嗽，乳汁稀少。在土人參根莖中含有齊墩果酸、十八酸單甘酯、β-谷甾醇等有效活性成份。齊墩果酸用于治療傳染性急性黃疸型肝炎，具有明顯的降低谷丙轉氨酶及退黃效果，改善病毒性和慢性遷延性肝炎患者的癥狀，體征和肝功能；還可用于銀屑病，風濕性關節(jié)炎，腎炎水腫，肝硬化腹水，急慢性肝炎，胃痛淋濁，血崩，跌打損傷，癰腫，腰膝酸軟，胎動不安等癥。公開號為CN1045585中國專利公開了一種從植物中提取齊墩果酸的方法，其特征在于它由以下步驟完成：a，水提，含有是齊墩果酸的三萜皂甙的植物加水，用慢火煮，然后濃縮水溶液；b，水解：向濃縮的水溶液加濃硫酸，加熱水解。c，酸性醇液重結晶；水不溶物用乙醇或甲醇溶解，過濾，用NaOH調PH10～11，去沉淀，取上清液，加Hcl至醇溶液的1/2～1/5或加1/5～1/2醇溶液體積的水和1/10～1/15醇溶液體積的濃H2SO4，回流加熱，靜置結晶，過濾，取濾物即為齊教果酸。公開號為CN101450962中國專利公開了一種從秋茄葉片中提取齊墩果酸的方法，包括如下步驟：將秋茄葉片清洗后陰干，加入二氯甲烷提取，過濾得提取液，干燥，得浸膏；將浸膏加入層析用硅膠吸附，研碎成粉，裝柱，以石油醚/丙酮為洗脫劑，進行梯度洗脫，按質量比，以石油醚∶丙酮分別為30∶1，10∶1和4∶1，沖1～5個柱體積，最后以甲醇沖洗，共得18個組分，其中的第12～17組分為齊墩果酸粗品，再經(jīng)硅膠柱層析，以氯仿/甲醇為洗脫劑進行洗脫，最后以甲醇沖洗，共得4個組分，其中的第3組分即為齊墩果酸純品。公開號為CN101857625A中國專利公開了一種從沙棘中提取齊墩果酸的方法，包括如下步驟：(1)沙棘果實的前處理；(2)熊果酸和齊墩果酸的提??；(3)果酸和齊墩果酸的分離。本發(fā)明一種從沙棘中提取齊墩果酸的方法與現(xiàn)有技術相比較有如下有益效果：本發(fā)明利用超臨界CO2萃取法從沙棘果皮中提取熊果酸和齊墩果酸，達到資源優(yōu)化配置，提高沙棘類產(chǎn)品附加值的目的。公開號為CN103059092A中國專利公開了一種從木瓜中提取齊墩果酸的方法，(1)取榨汁后的木瓜渣烘干后，按質量比1:2的比例放入溫水中浸泡浸泡2小時后壓榨；烘干后的濾餅渣再按質量比1:2的比例放入溫水中浸泡，同時分別加入果膠酶、纖維素酶及半纖維素酶的復合酶，質量比為1:2:3，加入量為1000u/100g濾餅渣，酶解3小時后濾餅渣烘干備用；(2)將干燥的木瓜濾餅渣按質量比1:3的比例放入95％vol的乙醇中減壓萃取2小時，分別重復萃取2次，萃取液真空濃縮，得到膏狀物；(3)將膏狀物加純凈水，進行堿溶酸沉，噴霧干燥、重結晶，即得齊墩果酸純品。本發(fā)明工藝更簡單，齊墩果酸提取率和純度更高。公開號為CN103483412A中國專利公開了一種從女貞子中提取齊墩果酸的新方法，具體涉及一種酶解與加壓技術相結合的方法，在粉碎的女貞子中加入10～15倍的70～90％的乙醇溶液，加鹽酸調PH值為3～5，繼續(xù)加入0.03～0.05％的纖維素酶酶解，加堿調PH值為中性，放入密閉容器內(nèi)，在壓力為20～30MPa條件下提取10～15min，提取液過濾，加入活性炭脫色后過濾，濾液濃縮為原溶劑體積的1/10～15，濃縮液上預處理的大孔吸附樹脂，用90～100％的乙醇洗脫，洗脫液減壓濃縮得粗品，甲醇重結晶得針狀結晶齊墩果酸。本發(fā)明反應條件溫和、提取率高、提取時間短、提取成本低，適用于工業(yè)化生產(chǎn)。公開號為CN104478985A中國專利公開了一種從日本楤木葉片中提取齊墩果酸的方法，步驟如下：將日本楤木葉片碎料加入提取液中加熱到90-95℃，直至混合液體積減少到五分之一，分離提取后的液體，然后在日本楤木葉片粉料中重新加入提取液并加熱到90-95℃，直至混合液體積減少到五分之一，重復上述提取過程3-4次；合并提取后的液體，冷卻至室溫，經(jīng)濾膜過濾得到濾液；將濾液與去離子水混合，90℃水浴使乙醇揮發(fā)直至出現(xiàn)淺棕色漿液；將漿液用乙醚萃取,然后70℃水浴直至乙醚揮發(fā)完全，得到齊墩果酸提取物。本發(fā)明的的優(yōu)點是：該從日本楤木葉片中提取齊墩果酸的方法工藝簡單、耗時短、提取的效率高，檢測結果表明：經(jīng)3次提取、用時2小時，提取率可達到99.81％。公開號為CN104592343A中國專利公開了一種從夏枯草中提取齊墩果酸的方法，包括以下步驟：將干燥的夏枯草粉碎，加入乙醇回流提取，減壓濃縮得浸膏A；加入石油醚淋洗，乙醇溶解過濾，經(jīng)模擬移動床色譜進行分離，得到富含齊墩果酸的組分B；干燥得純度95％以上的齊墩果酸。本發(fā)明所述的齊墩果酸提取方法，采用微波輔助提取和模擬移動床色譜法分離提純結合的工藝，確定了相關工藝參數(shù)，步驟簡單，產(chǎn)品純度較高，提取分離時間較短，生產(chǎn)效率得到提高。目前，已有從山楂、木瓜、夏枯草和女貞子等植物中提取出高純度的齊墩果酸，但在土人參提取分離齊墩果酸的方法未見文獻資料報道。

技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供一種從土人參根莖中提取齊墩果酸的方法，包括如下步驟：(1)粉碎后土人參根莖與兩倍至四倍重量的石油醚進行室溫浸提，過濾去除石油醚浸提液，得土人參殘渣。(2)土人參殘渣加入乙醇進行50～70℃回流提取1～4h，過濾除渣得濾液Ⅰ，取濾液Ⅰ在50℃～65℃下進行真空或減壓濃縮至原有體積的1/10～1/25，獲得濃縮液Ⅰ。(3)將濃縮液Ⅰ用乙酸乙酯進行萃取，得到萃取液Ⅰ，其中濃縮液Ⅰ的體積L與乙酸乙酯的體積L比例為1：1～4。(4)將萃取液Ⅰ上LSA-20大孔樹脂柱進行吸附，用三倍至五倍柱體積的乙醇水溶液進行柱洗脫，得到洗脫液Ⅰ。(5)將洗脫液Ⅰ在50℃～65℃下進行真空或減壓濃縮至原有體積的1/5～1/15，室溫靜置15～50min，過濾，得濾渣即為齊墩果酸粗品。(6)向齊墩果酸粗品加入丙酮在40℃下加熱10～20min，趁熱陶瓷膜過濾，濾液放置冰箱中過夜，結晶，重結晶一次，得齊墩果酸。在一個實施方案中，所述過濾是紗布過濾、陶瓷膜過濾，其中，優(yōu)選是三層紗布過濾2次、陶瓷膜過濾1次。在一個具體實施方案中，步驟(2)中所述乙醇使用量，按體積/土人參根莖重量比為2～6L:1kg。在一個具體實施方案中，步驟(4)中所述乙醇水溶液為含有70～90％乙醇的水溶液；如70％乙醇水溶液的配制方法為70mL無水乙醇加入30mL的水混合即可。在一個具體實施方案中，步驟(6)中所述丙酮體積與齊墩果酸粗品重量比為1～3L:1kg。上述所用LSA-20大孔樹脂從鄭州勤實科技有限公司購買的。技術效果1、本發(fā)明能使土人參根莖中齊墩果酸得到充分利用，有效降低其生產(chǎn)成本，充分利用了土人參根莖中主要活性成份。2、通過柱層析與結晶相結合，減少化學試劑的過度使用，保證了產(chǎn)品的純天然性，可以安全的提供給食品、化妝品和制藥等行業(yè)。具體實施方式下面，本發(fā)明將用實施例進行進一步的說明，但是它并不限于這些實施例的任一個或類似實例。實施例1：粉碎后土人參根莖100kg與石油醚300kg進行室溫浸提，過濾去除石油醚浸提液，得土人參殘渣。土人參殘渣加入400L乙醇進行50～70℃回流提取2h，過濾除渣得350L濾液Ⅰ，取濾液Ⅰ在60℃下進行真空或減壓濃縮，獲得20L濃縮液Ⅰ。將濃縮液Ⅰ用40L乙酸乙酯進行萃取，得到萃取液Ⅰ。將萃取液Ⅰ上LSA-20大孔樹脂柱進行吸附，用三倍至五倍柱體積的85％乙醇水溶液進行柱洗脫，得到140L洗脫液Ⅰ。將洗脫液Ⅰ在60℃下進行真空或減壓濃縮至15L，室溫靜置40min，過濾，得濾渣即為齊墩果酸粗品1.84kg。向齊墩果酸粗品加入3L丙酮在40℃下加熱15min，趁熱陶瓷膜過濾，濾液放置冰箱中過夜，結晶，重結晶一次，得齊墩果酸1.46kg，經(jīng)HPLC檢測，齊墩果酸樣品的純度為97.25％。實施例2粉碎后土人參根莖200kg與石油醚500kg進行室溫浸提，過濾去除石油醚浸提液，得土人參殘渣。土人參殘渣加入700L乙醇進行50～70℃回流提取1～4h，過濾除渣得660L濾液Ⅰ，取濾液Ⅰ在55℃下進行真空或減壓濃縮，獲得35L濃縮液Ⅰ。將濃縮液Ⅰ用50L乙酸乙酯進行萃取，得到萃取液Ⅰ。將萃取液Ⅰ上LSA-20大孔樹脂柱進行吸附，用三倍至五倍柱體積的80％乙醇水溶液進行柱洗脫，得到180L洗脫液Ⅰ。將洗脫液Ⅰ在55℃下進行真空或減壓濃縮至20L，室溫靜置50min，過濾，得濾渣即為齊墩果酸粗品3.98kg。向齊墩果酸粗品加入6L丙酮在40℃下加熱20min，趁熱陶瓷膜過濾，濾液放置冰箱中過夜，結晶，重結晶一次，得齊墩果酸2.94kg，經(jīng)HPLC檢測，齊墩果酸樣品的純度為97.46％。實施例3粉碎后土人參根莖400kg與石油醚1000kg進行室溫浸提，過濾去除石油醚浸提液，得土人參殘渣。土人參殘渣加入1000L乙醇進行50～70℃回流提取3h，過濾除渣得900L濾液Ⅰ，取濾液Ⅰ在60℃下進行真空或減壓濃縮，獲得50L濃縮液Ⅰ。將濃縮液Ⅰ用80L乙酸乙酯進行萃取，得到萃取液Ⅰ。將萃取液Ⅰ上LSA-20大孔樹脂柱進行吸附，用三倍至五倍柱體積的85％乙醇水溶液進行柱洗脫，得到250L洗脫液Ⅰ。將洗脫液Ⅰ在55℃下進行真空或減壓濃縮至20L，室溫靜置40min，過濾，得濾渣即為齊墩果酸粗品8.45kg。向齊墩果酸粗品加入15L丙酮在40℃下加熱15min，趁熱陶瓷膜過濾，濾液放置冰箱中過夜，結晶，重結晶一次，得齊墩果酸6.28kg，經(jīng)HPLC檢測，齊墩果酸樣品的純度為97.58％。