本發(fā)明屬于農業(yè)領域，具體涉及一種農業(yè)殺菌劑及其制備方法。

背景技術：

農作物的病害由于不像害蟲和雜草那樣容易被人們及時察覺，所以往往造成防治上的忽視和困難，因而其危害就更為嚴重。據(jù)報道，全世界單是由病原真菌引起的植物病害就多達一萬種，所造成的損失占作物年度總損失的10％～30％。如果把病毒、細菌和線蟲等引起的植物病害也算在內，其損失就更為可觀。

為了滿足人們對糧食和其它生活物質日益增長的需要，不得不采用化學品以保護作物不受有害生物的侵襲，其中殺菌劑起著重要作用。具有農用殺菌活性的天然產物，一般易被植物吸收和傳導，對植物藥害小或無藥害，因此倍受重視。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種可以開發(fā)成農業(yè)殺菌劑的天然產物以及該天然產物的制備方法，該天然產物可以制成殺菌劑，以有效保護農作物不受有害生物的侵襲。

本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術方案得以實現(xiàn)的：

一種天然產物，化學結構式如下：

一種農業(yè)殺菌劑，含有如上所述的天然產物和農藥助劑或農藥賦形劑。

進一步地，所述的農業(yè)殺菌劑為乳油、懸浮劑、水乳劑、可濕性粉劑、微乳劑或水分散顆粒劑。

上述的天然產物在防治農業(yè)真菌性病害方面的應用。

進一步地，所述的農業(yè)真菌性病害為油菜菌核病、水稻紋枯病、草莓灰霉病、小麥赤霉病、辣椒炭疽病和番茄早疫病。

上述的農業(yè)殺菌劑在防治農業(yè)真菌性病害方面的應用。

進一步地，所述的農業(yè)真菌性病害為油菜菌核病、水稻紋枯病、草莓灰霉病、小麥赤霉病、辣椒炭疽病和番茄早疫病。

本發(fā)明的優(yōu)點：

本發(fā)明提供的天然產物對農業(yè)病害具有優(yōu)異的防治效果，可以開發(fā)成農業(yè)殺菌劑，用于保護農作物不受有害生物的侵襲。

具體實施方式

下面結合實施例進一步說明本發(fā)明的實質性內容，但并不以此限定本發(fā)明保護范圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術方案的實質和范圍。

實施例1：天然產物的制備和結構確證

分離方法：(a)將山茱萸的干燥成熟果實粉碎，用90％乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；(b)步驟(a)中正丁醇萃取物用D101型大孔樹脂除雜，先用10％乙醇洗脫8個柱體積，再用75％乙醇洗脫12個柱體積，收集75％洗脫液，減壓濃縮得75％乙醇洗脫濃縮物；(c)步驟(b)中75％乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為60:1(8個柱體積)、30:1(8個柱體積)、15:1(8個柱體積)和8:1(10個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；(d)步驟(c)中組分3用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為20:1(8個柱體積)、15:1(10個柱體積)和10:1(5個柱體積)的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；(e)步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為70％的甲醇水溶液等度洗脫，收集10～15個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮即得。

結構確證：白色粉末；HR-ESI-MS顯示[M+Na]⁺為m/z 457.2206，結合核磁特征可得分子式為C₂₄H₃₄O₇，不飽和度為8。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δ_H(ppm，CDCl₃，500MHz)：H-1a(1.12，m)，H-1b(1.34，m)，H-2a(1.68，m)，H-2b(1.70，m)，H-3(5.66，s)，H-5(2.33，dd，J＝13.6，4.3Hz)，H-6a(2.24，m)，H-6b(3.06，dd，J＝15.3，3.4Hz)，H-9(2.26，m，2H)，H-12(1.83，s)，H-13(2.07，s)，H-14(0.99，s)，H-15a(5.18，d，J＝13.1Hz)，H-15b(5.38，d，J＝13.1Hz)，H-3’(5.23，q，J＝6.3Hz)，H-4’(1.26，d，J＝6.3Hz)，H-5’(1.63，s)，2’-AcO(2.07，s)，3’-AcO(2.09，s)；核磁共振碳譜數(shù)據(jù)δ_C(ppm，CDCl₃，125MHz)：32.8(CH₂，1-C)，27.6(CH₂，2-C)，77.9(CH，3-C)，142.4(C，4-C)，51.3(CH，5-C)，29.4(CH₂，6-C)，131.7(C，7-C)，202.4(C，8-C)，57.8(CH₂，9-C)，38.2(C，10-C)，146.4(C，11-C)，23.1(CH₃，12-C)，23.8(CH₃，13-C)，14.4(CH₃，14-C)，111.2(CH₂，15-C)，168.6(C，1’-C)，82.6(C，2’-C)，72.4(CH，3’-C)，14.9(CH₃，4’-C)，20.7(CH₃，5’-C)，170.3(C，2’-AcO)，21.3(CH₃，2’-AcO)，169.3(C，3’-AcO)，21.0(CH₃，3’-AcO)。紅外波譜中的1715cm^-1與1680cm^-1吸收帶表明結構中存在羰基與雙鍵片段。¹³C-NMR、DEPT和HSQC譜中顯示有24個碳信號，包括七個甲基，五個亞甲基(一個烯烴碳)，三個次甲基(兩個連氧碳)，以及九個季碳(四個羰基碳，三個烯烴碳和一個含氧季碳)。以上功能結構再結合不飽和數(shù)表明該化合物為雙環(huán)結構。¹H-NMR譜結合HSQC譜顯示五個甲基質子信號δ_H 0.99(3H，s)、1.26(3H，d，J＝6.3Hz)、1.63(3H，s)、1.83(3H，s)、2.07(3H，s)，兩個乙?；谆|子信號δ_H 2.07(3H，s)與2.09(3H，s)，一個烯屬亞甲基質子信號δ_H 5.18(1H，d，J＝13.1Hz)與5.38(1H，d，J＝13.1Hz)，兩個連氧次甲基質子信號δ_H 5.23(1H，q，J＝6.3Hz)與5.66(1H，s)，以上NMR數(shù)據(jù)可以確認該化合物為闊苞菊酮衍生物。HMBC譜中的H₃-12與C-11，H₃-13與C-11，H₃-14與C-10，H₂-15與C-4相關信號可以歸屬為闊苞菊酮上的片段，C-3位質子信號移向低場說明C-3羥基被酯化，而通過HMBC譜中H-3與C-1’的相關信號得到進一步確認。此外，通過HMBC譜中H-3’與C-3’的相關信號以及移向低場的H-3’與C-2’信號可知該化合物中存在2’,3’-二乙?；?2’-甲基丁酰氧基邊鏈結構，而質子信號δ_H 1.63與1.26(J＝6.3Hz)可以歸屬為H₃-5’與H₃-4’的甲基信號。NOESY譜中H_β-1/H₃-14，H_β-1/H-3相關信號表明H-3和H₃-14在闊苞菊酮骨架的同側，并且H_α-1/H-5相關信號暗示H-5在H-3和H₃-14的異側。該化合物的相對構型進一步通過X-單晶衍射確認，C-3位的絕對構型通過酸解反應與Mosher法可以確認為R構型。綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和NOESY譜，以及文獻關于相關類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化合物如下所示，立體構型進一步通過ECD試驗確定，理論值與實驗值基本一致。該天然產物化學結構和碳原子標記如下：

實施例2：對農業(yè)病害的防治

供試菌株核盤菌(Sclerotioia selerotiorum)從油菜菌核病菌株上分離得到；立枯絲核菌(Thanatephorus cucumeris)從水稻紋枯病病葉上分離；灰霉菌(Botrytis cinerea)，又稱灰葡萄孢菌從草莓灰霉病上分離得到；禾谷鐮孢菌(Fusarium.graminearm)從小麥赤霉病穗上分離得到；禾谷絲核菌(Rhizoctonia solani)從小麥紋枯病葉上分離得到；辣椒疫霉(phytophthora capsici)從辣椒病株上分離；辣椒刺盤孢[Colletotrichum capsici(syd.)Butl.]從辣椒炭疽病果實上分離得到；茄鏈格孢菌(Alternaria solani.)從番茄早疫病葉上分離得到。

將實施例1制備的天然產物溶于甲醇制成1000μg/mL母液，4℃保存?zhèn)溆?。PDA培養(yǎng)基：200g去皮馬鈴薯切成塊，煮沸10min后，取汁，加入20g瓊脂，加熱至熔化，再加入20g葡萄糖，用水定容至1000mL。

采用菌絲生長速率測定法對菌絲生長的抑制測定，從PDA平板上預培養(yǎng)的供試菌邊緣打取菌碟(直徑5mm)，將供試藥劑母液與培養(yǎng)基均勻混合，使供試藥劑最終濃度為30ppm，混合液傾入直徑為9cm的滅菌培養(yǎng)皿中制成平板，每皿接種一菌碟，菌絲面朝上，每處理重復3次。25℃培養(yǎng)至對照菌落布滿培養(yǎng)皿三分之二以上時，十字交叉法測量菌落增長直徑。由菌落直徑平均值(mm)計算生長抑制率。

以蛇床子素Osthol為陽性對照品，從結果中可以看出實施例1制備的天然產物可有效地防治油菜菌核病、水稻紋枯病、草莓灰霉病、小麥赤霉病、辣椒炭疽病、番茄早疫病等，濃度30ppm對這幾種病害抑制率分別為60.91％、66.99％、52.30％、44.67％、70.54％、44.66％，具體實驗結果見表1；通過實驗充分體現(xiàn)了本發(fā)明提供的天然產物的顯著效果，尤其對真菌性病害油菜菌核病、水稻紋枯病及辣椒炭疽病防治效果明顯。

表1對農業(yè)病害的防治

試驗結果表明，本發(fā)明提供的天然產物對農業(yè)病害具有優(yōu)異的防治效果，可以開發(fā)成農業(yè)殺菌劑，用于保護農作物不受有害生物的侵襲。

可以將本發(fā)明提供的天然產物和農藥助劑或農藥賦形劑混合制備成農業(yè)殺菌劑，劑型可以為乳油、懸浮劑、水乳劑、可濕性粉劑、微乳劑或水分散顆粒劑。

上述實施例的作用在于說明本發(fā)明的實質性內容，但并不以此限定本發(fā)明的保護范圍。本領域的普通技術人員應當理解，可以對本發(fā)明的技術方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術方案的實質和保護范圍。