本發(fā)明涉及低聚肽制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種從蝦中提取優(yōu)質(zhì)蝦低聚肽的方法。

背景技術(shù)：

蝦(Shrimp)，是一種生活在水中的節(jié)肢動(dòng)物，屬節(jié)肢動(dòng)物甲殼類(lèi)，種類(lèi)很多，包括南極紅蝦、青蝦、河蝦、草蝦、對(duì)蝦、明蝦、龍蝦等。蝦是甲殼亞門(mén)十足目游泳亞目動(dòng)物，有近2000個(gè)品種，生物儲(chǔ)存量大，分布廣，營(yíng)養(yǎng)價(jià)值高?，F(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證實(shí)，蝦的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值極高，能增強(qiáng)人體的免疫力和性功能，補(bǔ)腎壯陽(yáng)，抗早衰。并可以用做于中藥材，可醫(yī)治腎虛陽(yáng)痿、畏寒、體倦、腰膝酸痛等病癥。且蝦深加工后的蝦低聚肽具有抗氧化和清除自由基的功能，可增強(qiáng)人體抗衰老、抗疾病的能力。蝦低聚肽不僅可以加工成營(yíng)養(yǎng)補(bǔ)充劑，而且也可以作為制備抗氧化、抗衰老的保健品或化妝品的原料，具備廣闊的開(kāi)發(fā)利用潛力。

蝦還被譽(yù)為是人類(lèi)最大的一個(gè)動(dòng)物蛋白庫(kù)，具有巨大的應(yīng)用和開(kāi)發(fā)潛力，但當(dāng)前對(duì)蝦的利用僅局限于生產(chǎn)蝦仁，利用其廢料生產(chǎn)魚(yú)類(lèi)餌料等初等加工。目前國(guó)內(nèi)外對(duì)蝦低聚肽的提取還處于開(kāi)發(fā)階段，文獻(xiàn)中報(bào)道的也是以蝦低聚肽功能為主要研究方向，蝦低聚肽的工業(yè)化生產(chǎn)還未見(jiàn)報(bào)道，如何讓優(yōu)質(zhì)的蝦低聚肽實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，走入生活是需要解決的一個(gè)問(wèn)題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于為蝦低聚肽的工業(yè)化生產(chǎn)提出一種可實(shí)行的方法，經(jīng)過(guò)脫色、脫苦、脫腥處理提高產(chǎn)品的色澤和口感，增加了產(chǎn)品的推廣性。

為了達(dá)到上述目的，一種適合工業(yè)化生產(chǎn)的優(yōu)質(zhì)蝦低聚肽粉制備方法，包括以下步驟：

S1、取新鮮蝦肉，清洗、斬拌、膠體磨磨成漿料，得到蝦肉漿液，采用凱氏定氮測(cè)得所述蝦肉漿液中總蛋白含量；

S2、向步驟S1制得的蝦肉漿液中加水，所述蝦肉漿液與水的質(zhì)量比為1:1～10，調(diào)整溫度至40～60℃，用質(zhì)量濃度為10％的鹽酸調(diào)整pH至5.0～7.0，加入占所述蝦肉漿液蛋白總質(zhì)量0.5～4.0％的復(fù)合蛋白酶，攪拌酶解3～6小時(shí)，得到蝦肉酶解液；

所述復(fù)合蛋白酶組成及質(zhì)量配比為：酸性蛋白酶15～65％、木瓜蛋白酶20～70％、胰酶10～20％、風(fēng)味酶5～10％；

S3、將步驟S2制得的蝦肉酶解液升溫70～90℃滅酶15～30分鐘；過(guò)濾、收集濾液并離心，收集上清液；

S4、將步驟S3收集的上清液通過(guò)1kDa～5kDa超濾膜進(jìn)行膜分離；收集透過(guò)液，向截留液中加入等質(zhì)量的水稀釋后再過(guò)濾，重復(fù)3～5次；合并收集的透過(guò)液，即為蝦低聚肽液；

S5、將步驟S4制得的蝦低聚肽液進(jìn)行電滲析二級(jí)除鹽，得到脫鹽蝦低聚肽液；

一級(jí)除鹽電導(dǎo)率為1500～2000μs/cm，二級(jí)除鹽電導(dǎo)率降至500μs/cm以下；

S6、調(diào)節(jié)步驟S5制得的脫鹽蝦低聚肽液溫度至60～80℃，加入質(zhì)量濃度為10％的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH至6.0～8.0，加入占所述脫鹽蝦低聚肽液質(zhì)量0.2～0.5％的活性炭，攪拌25min～40min，脫碳，得到蝦低聚肽精制液；

S7、將步驟S6制得的蝦低聚肽精制液進(jìn)行雙效濃縮后，蒸發(fā)濃縮至固含量為30～50％，噴霧干燥，得到優(yōu)質(zhì)蝦低聚肽粉。

優(yōu)選方式下，步驟S1所述斬拌的具體操作為：將洗干凈的蝦肉放入高速斬拌機(jī)，斬拌2～5分鐘。

優(yōu)選方式下，步驟S3所述過(guò)濾采用100目網(wǎng)式過(guò)濾器；所述離心采用高速管式離心機(jī)，轉(zhuǎn)速為10000～20000轉(zhuǎn)/分鐘。

優(yōu)選方式下，步驟S6所述電滲析的具體參數(shù)為：一級(jí)電滲析電壓為10～70V；二級(jí)電滲析電壓為40～80V。

優(yōu)選方式下，步驟S6所述脫碳為：將經(jīng)過(guò)活性炭處理的所述脫鹽蝦低聚肽液通過(guò)板框式壓濾機(jī)、鈦棒精濾器脫碳精制。

優(yōu)選方式下，步驟S7所述噴霧干燥的條件為：進(jìn)風(fēng)溫度150～180℃，溫差為2℃；出風(fēng)溫度70～90℃，溫差為1℃。

本發(fā)明的有益效果是：

1、提供了一種適合工業(yè)化生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)蝦低聚肽的制備方法，該方法制備工藝簡(jiǎn)單、設(shè)計(jì)合理、生產(chǎn)安全性高，無(wú)有害化學(xué)添加劑，為提供優(yōu)質(zhì)蝦低聚肽的工業(yè)化生產(chǎn)提供可能。

2、肽分子量的大小是衡量酶解率的標(biāo)準(zhǔn)，目前文獻(xiàn)上報(bào)道的蛋白質(zhì)酶解后所得肽相對(duì)于原料總蛋白的收率一般在60％～80％之間，本發(fā)明用的復(fù)合蛋白酶對(duì)蝦蛋白的酶解后肽對(duì)總蛋白收率達(dá)90％以上，且分子量小于2kDa的小肽含量占90％以上。納米級(jí)的蝦低聚肽在食用時(shí)，由于分子量小，不會(huì)產(chǎn)生抗原性，且具有抗氧化和清除自由基的功能，能夠有效的增強(qiáng)人體抗衰老、抗疾病的能力，可讓人放心食用。

3、膜分離后的蝦低聚肽透過(guò)液中除含有蝦低聚肽外，還含有無(wú)機(jī)離子，本發(fā)明采用電滲析設(shè)備去除肽液中的無(wú)機(jī)離子和可能原料蝦受到污染后的重金屬離子去除，提高產(chǎn)品的安全性。

4、采用活性炭脫碳工藝，對(duì)肽液進(jìn)行脫色、脫苦。脫腥處理，使產(chǎn)品無(wú)論在色澤還是口感上大大提升，增加了產(chǎn)品的推廣性。

5、蝦作為海洋中的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)源，采用現(xiàn)代酶解工藝，全程物理工藝，把海洋中的優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)變成人體更容易吸收的小分子肽，提高的稀有蛋白質(zhì)源的人體利用率。

具體實(shí)施方式

以下實(shí)例是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步說(shuō)明。

實(shí)施例1

當(dāng)以海水蝦或者海水蝦和淡水蝦混合投料時(shí)，通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)獲得優(yōu)質(zhì)蝦低聚肽粉：

1.以200kg鮮蝦原料用純水洗凈除掉泥沙等雜物；

2.將洗干凈的蝦放入高速斬拌機(jī)斬拌2.5分鐘；

3.將斬拌好的蝦用膠體磨磨成漿料；采用凱氏定氮測(cè)得蝦肉漿料中總蛋白含量21.33％；

4.將蝦漿料進(jìn)行酶解：向所述的漿料中加入純水，漿料與純水質(zhì)量比為1:5，體系溫度調(diào)整至45℃，用質(zhì)量濃度10％鹽酸調(diào)整pH至5.5，按蝦肉漿料中蛋白總質(zhì)量的3.0％加復(fù)合蛋白酶，攪拌酶解5小時(shí)，得到蝦肉酶解液，復(fù)合蛋白酶質(zhì)量配比為：酸性蛋白酶40％、木瓜蛋白酶35％、胰酶15％、風(fēng)味酶10％；

5.將酶解液升溫85℃滅酶20分鐘；

6.將滅酶后的酶解液經(jīng)100目網(wǎng)式過(guò)濾器過(guò)濾，過(guò)濾后的酶解液經(jīng)高速管式離心機(jī)16000轉(zhuǎn)/分鐘離心，收集上清液；

7.將收集的上清液利用2kDa超濾膜進(jìn)行膜分離，分離完成后截留液加等質(zhì)量水稀釋再過(guò)濾，反復(fù)三次，得到透過(guò)液，即為蝦肽液；

8.將膜分離后的蝦低聚肽液經(jīng)過(guò)電滲析二級(jí)除鹽，除鹽一級(jí)電導(dǎo)率為1600μs/cm以下，二級(jí)電導(dǎo)率要降至600μs/cm以下，將可能受到重金屬污染原料蝦中的重金屬離子去除；

9.將電滲析除鹽后的蝦低聚肽酶解液體系溫度升溫至60℃，用質(zhì)量濃度10％氫氧化鈉調(diào)pH至6.5，加除鹽后的蝦低聚肽酶解液總質(zhì)量的0.3％食品級(jí)活性炭，攪拌30min，利用其吸附性對(duì)酶解液進(jìn)行脫色、脫苦、脫腥處理；采用板框壓濾機(jī)過(guò)濾后，經(jīng)鈦棒過(guò)濾，脫碳得蝦低聚肽精制液；

10.蝦低聚肽精制液經(jīng)雙效濃縮，蒸發(fā)濃縮至固含量50％后，進(jìn)行噴霧干燥后得蝦低聚肽粉，要求噴霧干燥時(shí)進(jìn)風(fēng)溫度控制在150℃±2℃，出風(fēng)溫度控制在80℃±1℃。

本實(shí)施例制得蝦低聚肽粉38.5kg，按照原料中蛋白總量計(jì)算收率則38.5/(21.33％*200)＝0.903＝90.3％，收率為90.3％；采用高效液相色譜法測(cè)得，其中分子量小于2000Da的小肽含量占產(chǎn)品總質(zhì)量的99.17％，更容易被人體吸收；采用原子熒光分光光度計(jì)檢測(cè)，無(wú)重金屬殘留；本實(shí)施例制得蝦低聚肽粉安全性高、無(wú)毒副作用、抗氧化性出色。

本實(shí)施例制得蝦低聚肽粉為黃白色、具有蝦香味的干燥粉末，因采用活性炭吸附工藝，脫去其苦味、腥味，使其無(wú)論在色澤還是口感上大大提升，增加了產(chǎn)品的推廣性。

實(shí)施例2

當(dāng)全部為淡水蝦投料時(shí)，通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)獲得優(yōu)質(zhì)蝦低聚肽粉：

1.以鮮蝦原料200kg用純水洗凈除掉泥沙等雜物；

2.將洗干凈的蝦放入高速斬拌機(jī)斬拌2分鐘；

3.將斬拌好的蝦用膠體磨磨成漿料；采用凱氏定氮測(cè)得蝦肉漿料中總蛋白含量20.41％；

4.將蝦漿料進(jìn)行酶解：向所述的漿料中加入純水，漿料與純水質(zhì)量比為1:7.5，體系溫度調(diào)整至48℃，用質(zhì)量濃度10％鹽酸調(diào)整pH至5.5，按蝦肉漿料中蛋白總質(zhì)量的2.5％加復(fù)合蛋白酶，攪拌酶解4小時(shí)，復(fù)合蛋白酶質(zhì)量配比為：酸性蛋白酶30％、木瓜蛋白酶45％、胰酶17％、風(fēng)味酶8％；

5.將酶解液升溫85℃滅酶20分鐘；

6.將滅酶后的酶解液經(jīng)100目網(wǎng)式過(guò)濾器過(guò)濾，過(guò)濾后的酶解液經(jīng)高速管式離心機(jī)16000轉(zhuǎn)/分鐘離心，收集上清液；

7.將收集的上清液利用2kDa超濾膜進(jìn)行膜分離，分離完成后截留液加等質(zhì)量水稀釋再過(guò)濾，反復(fù)三次，得到透過(guò)液，即為蝦低聚肽液；

8.將膜分離后的蝦低聚肽液經(jīng)過(guò)電滲析二級(jí)除鹽，除鹽一級(jí)電導(dǎo)率為1000μs/cm以下，二級(jí)電導(dǎo)率要降至300μs/cm以下，將可能受到重金屬污染原料蝦中的重金屬離子去除；

9.將電滲析除鹽后的蝦低聚肽酶解液體系溫度升溫至60℃，用質(zhì)量濃度10％氫氧化鈉調(diào)pH為6.5，加除鹽后的蝦低聚肽酶解液總質(zhì)量的0.2％加食品級(jí)活性炭，攪拌30min，利用其吸附性對(duì)酶解液進(jìn)行脫色、脫苦、脫腥處理，采用板框壓濾機(jī)過(guò)濾后，經(jīng)鈦棒過(guò)濾，脫碳得蝦低聚肽精制液；

10.蝦低聚肽精制液經(jīng)雙效濃縮，蒸發(fā)濃縮至固含量達(dá)到50％后，進(jìn)行噴霧干燥后得蝦低聚肽粉，要求噴霧干燥時(shí)進(jìn)風(fēng)溫度控制在150℃±2℃，出風(fēng)溫度控制在80℃±1℃。

本實(shí)施例制得蝦低聚肽粉37.4kg，按照原料中蛋白總量計(jì)算收率則37.4/(20.41％*200)＝0.916＝91.6％，收率為91.6％；采用高效液相色譜法測(cè)得，其中分子量小于2000Da的小肽含量占產(chǎn)品總質(zhì)量的99.31％，更容易被人體吸收；采用原子熒光分光光度計(jì)檢測(cè)，無(wú)重金屬殘留；本實(shí)施例制得蝦低聚肽粉安全性高、無(wú)毒副作用、抗氧化性出色。

本實(shí)施例制得蝦低聚肽粉為黃白色、具有蝦香味的干燥粉末，因采用活性炭吸附工藝，脫去其苦味、腥味，使其無(wú)論在色澤還是口感上大大提升，增加了產(chǎn)品的推廣性。

以上所述，僅為本發(fā)明較佳的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明披露的技術(shù)范圍內(nèi)，根據(jù)本發(fā)明的技術(shù)方案及其發(fā)明構(gòu)思加以等同替換或改變，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。