本發(fā)明涉及生物工程
技術領域：
，具體涉及一種藥物緩釋載體水凝膠及其制備方法。
背景技術：
：近年來，超分子水凝膠的研究受到了人們的廣泛關注。能形成超分子水凝膠的化合物多稱為凝膠因子，凝膠因子通常是一些小分子化合物；在合適條件下，凝膠因子能夠自組裝形成三維網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)，使水失去流動性而得到超分子水凝膠。與傳統(tǒng)的化學凝膠不同的是，小分子凝膠因子網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)是通過氫鍵、靜電相互作用或范德華力等非化學鍵作用形成的，因此就避免了凝膠形成過程中輻射、及其它化學交聯(lián)劑對凝膠后續(xù)應用的影響和限制。作為生物活性物質(zhì)，氨基酸類物質(zhì)的生物相容性好，來源廣泛，應用前景廣。因此將兩親性氨基酸及多肽作為一種超分子凝膠因子的研究受到人們的普遍關注。近年來，學者們制備并研究了RGD(peptidesarginine-glycine-asparticacid，精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸多肽)序列、賴氨酸、組氨酸、纈氨酸及異亮氨酸等氨基酸基凝膠因子。然而，由于超分子水凝膠是通過非化學鍵作用力形成的網(wǎng)絡結(jié)構(gòu)，這類凝膠材料的粘彈性及硬度較弱，持水性能通常很差，大大限制了其應用。因此如何提高超分子水凝膠的機械性能成為研究熱點?，F(xiàn)有技術中，有如下改良方案：通過分子識別作用增強小分子水凝膠的彈性；通過與納米金粒子雜化來調(diào)節(jié)凝膠的粘彈性；通過其與瓊脂糖共混來提高凝膠的機械性能；通過將其與粘土以及葡聚糖共混來提高凝膠的粘彈性等。然而目前研究對凝膠力學性能提高有限，限制了其應用。技術實現(xiàn)要素：為克服目前水凝膠的力學性能較差的問題，本發(fā)明提供一種藥物緩釋載體水凝膠及其制備方法。本發(fā)明為解決上述技術問題的一技術方案是提供一種藥物緩釋載體水凝膠，其至少由多糖衍生物、Fmoc-L-苯丙氨酸(N-芴甲氧羰基-L-苯丙氨酸，F(xiàn)moc-L-phenylalanine)溶液制得；所述多糖衍生物由多糖與Fmoc-L-苯丙氨酸通過脫水縮合反應制得。優(yōu)選地，所述Fmoc-L-苯丙氨酸溶液的濃度為0.015-0.02g/mL，F(xiàn)moc-L-苯丙氨酸溶液及多糖衍生物的用量比為1mL:2-10mg；所述水凝膠的彈性模量為20-6000Pa。優(yōu)選地，所述水凝膠的微觀結(jié)構(gòu)為細絲狀纖維的規(guī)整排列。本發(fā)明為解決上述技術問題提供又一技術方案：一種藥物緩釋載體水凝膠的制備方法，其包括如下步驟：提供多糖、Fmoc-L-苯丙氨酸、Fmoc-L-苯丙氨酸溶液及葡萄糖酸內(nèi)酯；通過多糖與Fmoc-L-苯丙氨酸的脫水縮合反應，獲得多糖衍生物；利用所得多糖衍生物、Fmoc-L-苯丙氨酸溶液及葡萄糖酸內(nèi)酯制得藥物緩釋載體水凝膠。優(yōu)選地，在多糖與Fmoc-L-苯丙氨酸的脫水縮合反應中，多糖與Fmoc-L-苯丙氨酸的質(zhì)量比為1:0.3-0.5。優(yōu)選地，獲得所述多糖衍生物的步驟進一步包括：將多糖溶于有機溶劑中，向其加入Fmoc-L-苯丙氨酸；待Fmoc-L-苯丙氨酸溶解后，再依次加入二環(huán)己基碳二亞胺和4-二甲氨基吡啶溶解得到混合溶液；將混合溶液于室溫下反應18-36h后，獲得多糖衍生物。優(yōu)選地，所述多糖、二環(huán)己基碳二亞胺及4-二甲氨基吡啶的質(zhì)量比為1:(0.2-0.3):(0.06-0.1)。優(yōu)選地，所述Fmoc-L-苯丙氨酸溶液的濃度為0.015-0.02g/mL，所述Fmoc-L-苯丙氨酸溶液與多糖衍生物的用量比為1mL:2-10mg。優(yōu)選地，進一步包括所述Fmoc-L-苯丙氨酸溶液的配制：將Fmoc-L-苯丙氨酸加入去離子水中，于35-50℃下攪拌，并加入堿性溶液，溶解后獲得Fmoc-L-苯丙氨酸溶液。優(yōu)選地，所述藥物緩釋載體水凝膠的制備方法進一步包括：取所得多糖衍生物加入去離子水中，70-90℃下攪拌5-20min得到多糖衍生物水溶液，并冷至室溫后，依次加入葡萄糖酸內(nèi)酯和Fmoc-L-苯丙氨酸溶液，攪拌均勻靜止后形成藥物緩釋載體水凝膠。相對于現(xiàn)有技術，本發(fā)明所提供的一種藥物緩釋載體水凝膠及其制備方法中，使用的主要原料為來源廣泛，具有良好的生物相容性及可生物降解性的多糖和Fmoc-L-苯丙氨酸；所制得的水凝膠力學性能好。因此該水凝膠適合用作載藥凝膠，能使藥物在較長的時間內(nèi)緩慢釋放，達到藥物緩釋的效果，從而使得藥物得到充分利用。【附圖說明】圖1是實驗組1中所制備水凝膠掃描電子顯微鏡的照片。圖2是實驗組2中所制備水凝膠掃描電子顯微鏡的照片。圖3是實驗組3中所制備水凝膠掃描電子顯微鏡的照片。圖4是對比組1中所制備水凝膠掃描電子顯微鏡的照片。圖5是對比組2中所制備水凝膠掃描電子顯微鏡的照片。圖6是實驗組1-3及對比組1、2載藥凝膠的藥物緩釋曲線示意圖。【具體實施方式】為了使本發(fā)明的目的，技術方案及優(yōu)點更加清楚明白，以下結(jié)合附圖及實施實例，對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應當理解，此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明，并不用于限定本發(fā)明。本發(fā)明第一實施例提供了一種藥物緩釋載體水凝膠，其由多糖衍生物、Fmoc-L-苯丙氨酸(清亮)溶液制得；所述多糖衍生物由多糖與Fmoc-L-苯丙氨酸通過脫水縮合反應制得。多糖衍生物結(jié)構(gòu)如下式所示：即Fmoc-L-苯丙氨酸接枝于多糖上，使得所得的多糖衍生物具有調(diào)控Fmoc-L-苯丙氨酸所形成水凝膠的性能。該水凝膠的力學性能與Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液與多糖衍生物的用量比相關，通過改變該用量比能調(diào)節(jié)水凝膠的力學性能。其中，所述Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液的濃度為0.015-0.02g/mL，F(xiàn)moc-L-苯丙氨酸清亮溶液與多糖衍生物的用量比的范圍為1mL:2-10mg；所述水凝膠的彈性模量范圍為20-6000Pa。優(yōu)選地，F(xiàn)moc-L-苯丙氨酸清亮溶液與多糖衍生物用量比的范圍為1mL:5-10mg，在該范圍內(nèi)水凝膠彈性模量的調(diào)節(jié)效果明顯，制得水凝膠的彈性模量范圍為50-6000Pa。所述水凝膠的微觀結(jié)構(gòu)為細絲狀纖維的規(guī)整排列。該實施例中，所述多糖可以為葡萄糖，也可以是殼聚糖、淀粉、甲基纖維素、羥乙基纖維素或者糖原中任意一種或幾種的混合物。本發(fā)明第二實施例提供一種藥物緩釋載體水凝膠的制備方法，即第一實施例中所述水凝膠的制備方法，提供多糖、Fmoc-L-苯丙氨酸、Fmoc-L-苯丙氨酸溶液及葡萄糖酸內(nèi)酯；通過多糖與Fmoc-L-苯丙氨酸的脫水縮合反應，獲得多糖衍生物；利用所得多糖衍生物、Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液及葡萄糖酸內(nèi)酯制得藥物緩釋載體水凝膠。通過將Fmoc-L-苯丙氨酸接枝于多糖上，制得的多糖衍生物具有調(diào)控Fmoc-L-苯丙氨酸所形成水凝膠的性能。多糖與Fmoc-L-苯丙氨酸的用量比則能影響接枝數(shù)量，進而影響其調(diào)控Fmoc-L-苯丙氨酸所形成水凝膠的性能。優(yōu)選地，所述多糖與Fmoc-L-苯丙氨酸用量的質(zhì)量比為1:0.3-0.5。更好的是，所述多糖與Fmoc-L-苯丙氨酸用量的質(zhì)量比為1:0.4，能制備出接枝數(shù)量更為穩(wěn)定且一致的多糖衍生物，能有效保證其調(diào)控效果。優(yōu)選地，獲得所述多糖衍生物的步驟進一步包括：將多糖溶于有機溶劑中，向其加入Fmoc-L-苯丙氨酸，具體為將0.5-1g葡萄糖溶于15-30mL二甲基亞砜中，并向其中加入0.15-0.5gFmoc-L-苯丙氨酸。其中葡萄糖可以換成殼聚糖、淀粉、甲基纖維素、羥乙基纖維素或者糖原中任意一種或幾種的混合物，二甲基亞砜可以換成二甲基甲酰胺。待Fmoc-L-苯丙氨酸溶解后，再依次加入0.1-0.3g二環(huán)己基碳二亞胺和0.03-0.1g4-二甲氨基吡啶溶解得到混合溶液。其中二環(huán)己基碳二亞胺為脫水劑，4-二甲氨基吡啶為催化劑；脫水劑也可以選用N,N'-二異丙基碳二亞胺或者1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺，當然也可以不添加催化劑或者選用其他催化劑，如4-四氫吡咯基吡啶或者1,8-二氮雜二環(huán)十一碳-7-烯。優(yōu)選地，所述多糖、二環(huán)己基碳二亞胺及4-二甲氨基吡啶用量的質(zhì)量比為1:(0.2-0.3):(0.06-0.1)。更好的是，所述多糖、二環(huán)己基碳二亞胺及4-二甲氨基吡啶用量的質(zhì)量比為1:(0.25-0.3):(0.05-0.08)，該比例范圍內(nèi)，反應較為穩(wěn)定且迅速。將混合溶液于室溫下反應18-36h后，得到含有葡萄糖衍生物的反應產(chǎn)物，從該反應產(chǎn)物中即可得到所需的葡萄糖衍生物。該操作可以是，先過濾反應產(chǎn)物以除去二環(huán)己基脲沉淀；所得濾液用乙醇沉淀并洗滌，除去未反應的Fmoc-L-苯丙氨酸，當然也可以使用乙醚或丙酮進行沉淀并洗滌，經(jīng)多次重復洗滌后得到的沉淀在35-60℃真空干燥器中干燥36-60h，得到白色粉末狀的葡萄糖衍生物。當然也可以通過其他方式從反應產(chǎn)物中獲得的葡萄糖衍生物，如抽濾。利用該方法制得的水凝膠，其力學性能與Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液與多糖衍生物的用量比相關，通過改變該用量比能調(diào)節(jié)水凝膠的力學性能。其中所述Fmoc-L-苯丙氨酸溶液的濃度為0.015-0.02g/mL，所述Fmoc-L-苯丙氨酸溶液與多糖衍生物的用量比為1mL:2-10mg。所制得水凝膠的彈性模量范圍為20-6000Pa。通過增加多糖衍生物用量，能提高水凝膠的力學性能。具體的，所述Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液與多糖衍生物用量比的范圍為1mL:2-5mg，制得水凝膠的彈性模量范圍為20-50Pa；所述Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液與多糖衍生物用量比的范圍為1mL:5-6.7mg，制得水凝膠的彈性模量范圍為50-300Pa；所述Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液與多糖衍生物用量比的范圍為1mL:6.7-10mg，制得水凝膠的彈性模量范圍為300-6000Pa。因此，當所述Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液與多糖衍生物用量比的范圍為1mL:5-10mg，制得水凝膠的彈性模量具有較大的變化區(qū)間，也就是說該范圍內(nèi)水凝膠彈性模量的調(diào)節(jié)效果明顯。在本發(fā)明所提供的所述藥物緩釋載體水凝膠的制備方法中，可以直接使用現(xiàn)成的Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液，也可以自行配制。Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液的配制具體可以為，將0.1-0.5gFmoc-L-苯丙氨酸加入4-20mL去離子水中，于35-50℃下攪拌，加入1.5-6mLNaOH溶液，攪拌使Fmoc-L-苯丙氨酸溶解，利用針頭過濾器過濾除去未溶解的Fmoc-L-苯丙氨酸，當然也可以靜置后取上層清液，即可得到Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液。其中NaOH溶液可以由KOH溶液、Na2CO3溶液及NaHCO3溶液中任意一種替換，其作用在于利用所提供的堿性，提高Fmoc-L-苯丙氨酸的溶解度。優(yōu)選地，所述藥物緩釋載體水凝膠的制備方法進一步包括：取所得多糖衍生物加入去離子水中，70-90℃下攪拌5-20min得到多糖衍生物水溶液，也可以是利用超聲波進行溶解；并冷至室溫后，依次加入葡萄糖酸內(nèi)酯和Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液，攪拌均勻靜止后形成水凝膠。所述葡萄糖酸內(nèi)酯的用量進一步為1-5mg。本發(fā)明所提供的藥物緩釋載體水凝膠，具有良好的生物相容性及可生物降解性，具有力學性能好的優(yōu)點。該水凝膠適合用作載藥凝膠，能使藥物在較長的時間內(nèi)緩慢釋放，達到藥物緩釋的效果，使藥物得到充分利用。本發(fā)明所提供的藥物緩釋載體水凝膠的制備方法中，利用來源廣泛且具有良好的生物相容性及可生物降解性的多糖和Fmoc-L-苯丙氨酸，通過脫水縮合反應獲得多糖衍生物。該多糖衍生物能有效調(diào)控Fmoc-L-苯丙氨酸所形成水凝膠的性能，即有效調(diào)控水凝膠的力學性能。所制得的水凝膠具有力學性能好的優(yōu)點。下面對采用本發(fā)明所提供的水凝膠及其制備方法進行實驗和相應的測試。實驗組1：采用如本發(fā)明第二實施例中所提供的藥物緩釋載體水凝膠的制備方法，其具體包括：步驟S1，將0.5g葡萄糖溶于20mL二甲基亞砜中，并向其中加入0.2gFmoc-L-苯丙氨酸。待Fmoc-L-苯丙氨酸溶解后，再依次加入0.15g二環(huán)己基碳二亞胺和0.05g4-二甲氨基吡啶，并使之溶解得到混合溶液。將混合溶液于室溫下反應24h后，得到含有葡萄糖衍生物的反應產(chǎn)物。先過濾反應產(chǎn)物以除去二環(huán)己基脲沉淀；所得濾液用乙醚沉淀，并重復洗滌三次，除去未反應的Fmoc-L-苯丙氨酸，得到的沉淀在35℃真空干燥器中干燥48h，得到白色粉末狀的葡萄糖衍生物。步驟S2，制備Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液，將0.1gFmoc-L-苯丙氨酸加入4mL去離子水中，于35℃下攪拌，加入1.5mL的0.1mol/L的NaOH溶液，攪拌使Fmoc-L-苯丙氨酸溶解，利用針頭過濾器過濾除去未溶解的Fmoc-L-苯丙氨酸，得到Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液；然后取5mg步驟S1中所得的葡萄糖衍生物，并加入0.5mL去離子水；70℃下攪拌5min后，冷至室溫；然后向其加入1mg葡萄糖酸內(nèi)酯，并取1mL所述Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液，攪拌均勻并靜置后得到水凝膠。實驗組2：采用如本發(fā)明第二實施例中所提供的藥物緩釋載體水凝膠的制備方法，其具體包括：步驟S1，將0.8g葡萄糖溶于20mL二甲基亞砜中，并向其中加入0.3gFmoc-L-苯丙氨酸。待Fmoc-L-苯丙氨酸溶解后，再依次加入0.2g二環(huán)己基碳二亞胺和0.06g4-二甲氨基吡啶，并使之溶解得到混合溶液。將混合溶液于室溫下反應24h后，得到含有葡萄糖衍生物的反應產(chǎn)物。先過濾反應產(chǎn)物以除去二環(huán)己基脲沉淀；所得濾液用乙醇沉淀，并重復洗滌三次，除去未反應的Fmoc-L-苯丙氨酸，得到的沉淀在45℃真空干燥器中干燥48h，得到白色粉末狀的葡萄糖衍生物。步驟S2，制備Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液，將0.2gFmoc-L-苯丙氨酸加入10mL去離子水中，于45℃下攪拌，加入3mL的0.2mol/L的NaOH溶液，攪拌使Fmoc-L-苯丙氨酸溶解，利用針頭過濾器過濾除去未溶解的Fmoc-L-苯丙氨酸，得到Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液；然后取10mg步驟S1中所得的葡萄糖衍生物，并加入1mL去離子水；80℃下攪拌10min后，冷至室溫；然后向其加入2mg葡萄糖酸內(nèi)酯，并取1.5mL所述Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液，攪拌均勻并靜置后得到水凝膠。實驗組3：采用如本發(fā)明第二實施例中所提供的藥物緩釋載體水凝膠的制備方法，其具體包括：步驟S1，將1g葡萄糖溶于20mL二甲基亞砜中，并向其中加入0.4gFmoc-L-苯丙氨酸。待Fmoc-L-苯丙氨酸溶解后，再依次加入0.27g二環(huán)己基碳二亞胺和0.08g4-二甲氨基吡啶，并使之溶解得到混合溶液。將混合溶液于室溫下反應24h后，得到含有葡萄糖衍生物的反應產(chǎn)物。先過濾反應產(chǎn)物以除去二環(huán)己基脲沉淀；所得濾液用丙酮沉淀，并重復洗滌三次，除去未反應的Fmoc-L-苯丙氨酸，得到的沉淀在60℃真空干燥器中干燥48h，得到白色粉末狀的葡萄糖衍生物。步驟S2，制備Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液，將0.5gFmoc-L-苯丙氨酸加入20mL去離子水中，于50℃下攪拌，加入6mL的0.5mol/L的NaOH溶液，攪拌使Fmoc-L-苯丙氨酸溶解，利用針頭過濾器過濾除去未溶解的Fmoc-L-苯丙氨酸，得到Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液；然后取20mg步驟S1中所得的葡萄糖衍生物，并加入2mL去離子水；90℃下攪拌20min后，冷至室溫；然后向其加入5mg葡萄糖酸內(nèi)酯，并取2mL所述Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液，攪拌均勻并靜置后得到水凝膠。在上述實驗組1-3的基礎上，在本發(fā)明中，設置如下對比組進行比對：對比組1：制備水凝膠，具體步驟如下：(1)將0.5gFmoc-L-苯丙氨酸加入20mL去離子水中，于50℃下攪拌，加入6mL的0.5mol/L的NaOH溶液，攪拌使Fmoc-L-苯丙氨酸溶解，利用針頭過濾器過濾除去未溶解的Fmoc-L-苯丙氨酸，得到Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液。(2)取20mgFmoc-L-苯丙氨酸,向其中加入2mL去離子水；90℃下攪拌20min后，冷至室溫；然后向其加入5mg葡萄糖酸內(nèi)酯，并取2mL步驟(1)中得到的Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液，攪拌均勻并靜置后得到水凝膠。對比組2：制備水凝膠，具體步驟如下：(1)將0.5gFmoc-L-苯丙氨酸加入20mL去離子水中，于50℃下攪拌，加入6mL的0.5mol/L的NaOH溶液，攪拌使Fmoc-L-苯丙氨酸溶解，利用針頭過濾器過濾除去未溶解的Fmoc-L-苯丙氨酸，得到Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液。(2)取20mg葡萄糖,向其中加入2mL去離子水；90℃下攪拌20min后，冷至室溫；然后向其加入5mg葡萄糖酸內(nèi)酯，并取2mL步驟(1)中得到的Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液，攪拌均勻并靜置后得到水凝膠。對于上述實驗組1-3及對比組1、2中所得水凝膠，針對其力學性能進行測定。利用流變法進行水凝膠力學性能的測定，具體為取水凝膠置于流變儀上(平行板夾具，直徑25mm)，空隙(Gap)值設為1mm，頻率設為1Hz，進行應力-應變曲線測定，取最大應力值為凝膠樣品的彈性模量，并對測試所獲得的彈性模量進行記錄。結(jié)果與分析：將記錄所得數(shù)據(jù)制成表1：表1實驗組1-3及對比組1、2彈性模量測試結(jié)果測試對象彈性模量實驗組150Pa實驗組2300Pa實驗組36000Pa對比組11Pa對比組24Pa從上述結(jié)果可知，實驗組的彈性模量明顯高于對比組。對比組1-2與實驗組1-3的區(qū)別在于，實驗組1-3將多糖衍生物加入Fmoc-L-苯丙氨酸所形成的水凝膠中，對比組1-2則是加入Fmoc-L-苯丙氨酸或葡萄糖。由此可見，加入多糖衍生物后水凝膠的力學性能得到很好地提高。即本發(fā)明所提供的水凝膠具有良好的機械性能，有效擴大了水凝膠的應用范圍。在實驗組中，實驗組1力學性能最差，實驗組2力學性能略好于實驗組1，而實驗組3力學性能最好。具體地，實驗組1-3的區(qū)別在于：實驗組1中，F(xiàn)moc-L-苯丙氨酸清亮溶液與多糖衍生物的用量分別為1mL、5mg。實驗組2中，其用量分別為1.5mL、10mg。實驗組3中，其用量分別為2mL、20mg。即當每毫升Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液中，加入越多的多糖衍生物，所制得的水凝膠力學性能越好。因此改變多糖衍生物與Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液的用量，能得到不同力學性能的水凝膠，即實現(xiàn)水凝膠力學性能的可調(diào)控性。具體的，F(xiàn)moc-L-苯丙氨酸溶液的濃度為0.015-0.02g/mL，當Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液與多糖衍生物的用量比范圍在1mL:5-6.7mg之間時，能制得彈性模量為50-300Pa的水凝膠；當用量比范圍在1mL:6.7-10mg之間時，能制得彈性模量為300-6000Pa的水凝膠。對于上述實驗組1-3及對比組1、2中所得水凝膠，利用掃描電子顯微鏡(SEM)進行觀察。結(jié)果與分析：實驗組1-3及對比組1、2中所得水凝膠的SEM像依次如圖1-5所示。從SEM像中可以看出，實驗組SEM像(即圖1-3)中，水凝膠材料顯示出由細絲狀的纖維經(jīng)較規(guī)整排列而形成的微觀形貌。而對比組SEM像(即圖4、5)中，水凝膠的纖維結(jié)構(gòu)較松散。而實驗組1-3中，相較于實驗組1所得的水凝膠，實驗組2、3所得水凝膠的纖維結(jié)構(gòu)排列更為緊密規(guī)整，表明形成凝膠的分子間作用力越強，從而使得水凝膠的力學性能更好。通過與水凝膠力學性能即水凝膠彈性模量測定結(jié)果相對應，可知水凝膠的微觀結(jié)構(gòu)為細絲狀纖維的規(guī)整排列時，具有力學性能好的優(yōu)點，且纖維排列更為規(guī)整時力學性能越好。對于上述實驗組1-3及對比組1、2中所得水凝膠，分別制成載藥凝膠，對所載藥物的緩釋行為進行測定。所述載藥凝膠的制備，即將藥物摻雜于水凝膠中，藥物摻雜時機為葡萄糖衍生物溶解后，添加Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液前。以實驗組1為例，具體為取5mg步驟S1中所得的葡萄糖衍生物，并加入0.5mL去離子水；70℃下攪拌5min后，冷至室溫，向其中加入1mg模型藥物鹽酸阿霉素；待其溶解后，向其中加入1mg葡萄糖酸內(nèi)酯，并取1mL的Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液，攪拌均勻并靜置后得到載藥凝膠。以相同的方法結(jié)合上述實驗組2、3及對比組1、2，制備獲得對應的載藥凝膠。藥物緩釋行為的測定，具體為取載藥凝膠置于去離子水中，在模擬人體溫度的恒溫裝置中使藥物進行緩慢釋放。每隔一定時間，取出緩釋液，測定其中藥物含量并記錄，將記錄所得數(shù)據(jù)繪制成圖6中所示的曲線圖。結(jié)果與分析：計算累積釋放率，并繪制載藥凝膠的藥物緩釋曲線如圖6。累積釋放率的計算公式為：累積釋放率＝(藥物初始含量-藥物實時含量)/藥物初始含量×100％。從圖6中可以看出，經(jīng)過25h后，實驗組的累計釋放率均低于35％，而對比組則是分別達到了60％和80％。實驗組效果明顯優(yōu)于對比組，因此可知，本發(fā)明所提供的水凝膠，適合用作載藥凝膠，能使藥物在較長的時間內(nèi)緩慢釋放，達到藥物緩釋的效果，使藥物得到充分利用。實驗組1-3中，實驗組2和3的累積釋放率分別為27％和25％，而實驗組1的累積釋放率則為35％。因此實驗組2和3的效果好于實驗組1，其結(jié)果與水凝膠力學性能測定的結(jié)果相一致，也說明了當水凝膠的微觀結(jié)構(gòu)為細絲狀纖維的規(guī)整排列時，能有效減緩藥物的釋放速率。與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明中所提供的水凝膠及其制備方法，具有以下優(yōu)點：(1)本發(fā)明所提供的水凝膠力學性能好；使用的主要原料為來源廣泛、具有良好的生物相容性及可生物降解性的多糖和Fmoc-L-苯丙氨酸。通過脫水縮合反應制得的多糖衍生物，能很好地提高水凝膠的力學性能。該水凝膠適合用作載藥凝膠時，能使藥物在較長的時間內(nèi)緩慢釋放，達到藥物緩釋的效果，使藥物得到充分利用。(2)本發(fā)明所提供的水凝膠，其力學性能與Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液與多糖衍生物的用量比相關；因此可以根據(jù)實際情況的需要，制備相應力學性能的水凝膠，這樣所制備的水凝膠更具有針對性及實用性。(3)本發(fā)明所提供的水凝膠，其微觀結(jié)構(gòu)為細絲狀纖維的規(guī)整排列，使得該水凝膠具有較好的力學性能，能有效減緩藥物釋放速率的優(yōu)點。(4)本發(fā)明所提供水凝膠的制備方法，使用的主要原料為來源廣泛，具有良好的生物相容性及可生物降解性的多糖和Fmoc-L-苯丙氨酸；所制得的水凝膠力學性能好。因此該水凝膠適合用作載藥凝膠，能使藥物在較長的時間內(nèi)緩慢釋放，達到藥物緩釋的效果，使藥物得到充分利用。(5)本發(fā)明所提供水凝膠的制備方法，通過進一步確定多糖與Fmoc-L-苯丙氨酸的質(zhì)量比，得到調(diào)控效果好且穩(wěn)定的多糖衍生物。(6)本發(fā)明所提供水凝膠的制備方法，多糖與Fmoc-L-苯丙氨酸的脫水縮合反應中，通過選用二環(huán)己基碳二亞胺為脫水劑，4-二甲氨基吡啶為催化劑，反應速度快、時間短。(7)本發(fā)明所提供水凝膠的制備方法，通過確定多糖、二環(huán)己基碳二亞胺及4-二甲氨基吡啶的質(zhì)量比，能有效控制反應所得多糖衍生物的結(jié)構(gòu)，即多糖上的接枝位置及數(shù)量，進而保證多糖衍生物的調(diào)控效果。(8)本發(fā)明所提供水凝膠的制備方法，能通過調(diào)節(jié)Fmoc-L-苯丙氨酸清亮溶液與多糖衍生物的用量比，得到不同力學性能的水凝膠，從而實現(xiàn)水凝膠力學性能的可調(diào)控性，明顯增強了水凝膠的實際應用范圍和效果。以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的原則之內(nèi)所作的任何修改，等同替換和改進等均應包含本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。當前第1頁1 2 3