本發(fā)明涉及紅棗深加工技術(shù)領(lǐng)域。更具體地，涉及從南疆駿棗中提取及分離純化降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的方法。
背景技術(shù)：
高脂血癥表現(xiàn)為人體內(nèi)脂質(zhì)代謝發(fā)生異常，血漿里某一種或多種脂質(zhì)成份濃度高低超過(guò)正常范圍的病癥，是冠心病和動(dòng)脈粥硬化的主要發(fā)病因素之一。由于血漿中總膽固醇和甘油三酯過(guò)高，高密度脂蛋白膽固醇過(guò)低從而出現(xiàn)的一種疾病狀態(tài)。主要是因?yàn)橹|(zhì)不溶或微溶于水，它必須與蛋白質(zhì)結(jié)合形成脂蛋白才能存在人體。常見的高血脂癥主要主要指標(biāo)變化有：血清總膽固醇(TC)、低密度脂蛋白(LDL-C)和甘油三酯(TG)的含量升高；高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)降低等。
高血脂癥的危害不言而喻，可引起很多種疾病，如高血壓、糖尿病、動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病等疾病。血脂中主要指標(biāo)含量超出正常范圍，容易使血液出現(xiàn)“血稠”，可能會(huì)堵塞血管，使血管壓力變高，而血液流速變慢，很容易引起高血壓癥狀，嚴(yán)重時(shí)將會(huì)導(dǎo)致血管中血流中斷，若發(fā)生在人體中的不同器官，產(chǎn)生不同類型的病癥。若發(fā)生在腦部，會(huì)發(fā)生腦中風(fēng)；若發(fā)生在心臟，很可能容易出現(xiàn)冠心??；若發(fā)生在下肢，就會(huì)引起肢體潰爛、壞死等；高血脂還會(huì)引起肝功能損傷，如果肝功能紊亂，則會(huì)發(fā)生脂質(zhì)和脂蛋白代謝紊亂，長(zhǎng)期如此容易引起脂肪肝，甚至肝癌。
紅棗是一種藥食同源的食品，作為藥物，已有2000多年歷史，有著豐富的營(yíng)養(yǎng)成分和活性成分，有“補(bǔ)品王”、“上等補(bǔ)品”的美稱。中醫(yī)認(rèn)為紅棗具有很多種食用和藥用作用。研究表明，紅棗中含有黃酮類、糖類、環(huán)磷酸腺苷等生物活性成分，有很好的藥用作用，具有增強(qiáng)免疫力、抗腫瘤、降血脂等多種生物活性。
目前，對(duì)紅棗的研究主要為中東部地區(qū)紅棗，并未分離純化，而對(duì)于生長(zhǎng)在自然條件優(yōu)越，光照充沛、鹽堿程度高的天山南麓南疆紅棗降血脂活性研究未見報(bào)道。南疆駿棗種植面積廣，產(chǎn)量高，品質(zhì)好，與內(nèi)地大棗化學(xué)成份含量相比較，有顯著差異，因此對(duì)南疆駿棗降血脂活性成分的應(yīng)用研究迫在眉睫。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種南疆駿棗中提取及分離純化降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的方法。
為達(dá)到上述目的，本發(fā)明采用下述技術(shù)方案：
從南疆駿棗中提取及分離純化降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的方法，包括如下步驟：
(Ⅰ)南疆駿棗中提取降血脂活性物質(zhì)；
(1-1)將棗肉和棗核分離；
(1-2)用醇溶液對(duì)棗肉進(jìn)行提取，得醇提取物溶液和固體殘?jiān)?，將醇提取物溶液濃縮得干浸膏；
(Ⅱ)山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的分離及純化。
上述從南疆駿棗中提取及分離純化降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的方法，在步驟中(Ⅰ)，還包括如下步驟：
(1-3)將干浸膏按照料液比為1：4g/mL溶于水中得干浸膏溶液，用醚對(duì)干浸膏溶液進(jìn)行萃取，得醚相和醚提取剩余水相。
上述從南疆駿棗中提取及分離純化降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的方法，還包括如下步驟：
(1-4)用氯仿對(duì)醚提取剩余水相進(jìn)行提取，得氯仿相和氯仿提取剩余水相。
上述從南疆駿棗中提取及分離純化降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的方法，還包括如下步驟：
(1-5)用酯對(duì)氯仿提取剩余水相進(jìn)行提取，得酯相和酯提取剩余水相。
上述從南疆駿棗中提取及分離純化降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的方法，步驟(1-2)中：醇的水溶液為乙醇水溶液，料液比為1:(2～4)g/mL，乙醇水溶液中乙醇的體積分?jǐn)?shù)為60-80％，回流提取。
上述從南疆駿棗中提取及分離純化降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的方法，步驟(1-3)中：醚為石油醚，干浸膏與石油醚的料液比為4:(0.5～2)g/mL。
上述從南疆駿棗中提取及分離純化降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的方法，步驟(1-4)中：干浸膏與氯仿的料液比為4:(0.5～2)g/mL。
上述從南疆駿棗中提取及分離純化降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的方法，步驟(1-5)中：酯為乙酸乙酯，干浸膏與乙酸乙酯的料液比為4:(0.5～2)g/mL；將得到的乙酸乙酯相濃縮之后得降血脂活性物質(zhì)。
上述從南疆駿棗中提取及分離純化降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的方法，在步驟(Ⅱ)中，包括如下步驟：
(2-1)將步驟(Ⅰ)中提取得到的降血脂活性物質(zhì)過(guò)第一硅膠柱，洗脫劑為石油醚和丙酮的混合物，石油醚和丙酮的體積比為5:1；
(2-2)將步驟(2-1)中得到的洗脫液過(guò)第二硅膠柱，洗脫劑為氯仿和甲醇的混合物，氯仿和甲醇的體積比為5:1；
(2-3)將步驟(2-2)中得到的洗脫液過(guò)凝膠柱，洗脫劑為氯仿和甲醇的混合物，氯仿和甲醇的體積比為1:1，每10mL收集一管，將第41管至第123管洗脫液收集合并；
(2-4)將步驟(2-3)中得到的第41管至第123管洗脫液過(guò)中壓柱，洗脫劑為甲醇水溶液，甲醇的體積分?jǐn)?shù)為70％，每10mL收集一管，將第54管至第62管洗脫液收集合并；
(2-5)將步驟(2-4)中得到的第54管至第62管洗脫液過(guò)高效液相色譜柱，收集洗脫液，將洗脫液蒸干濃縮的得淺黃色粉末，即為降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷。
上述從南疆駿棗中提取及分離純化降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的方法，
步驟(2-1)中：所述第一硅膠柱為粗孔zcx-Ⅱ型硅膠柱，外徑為4.5厘米，洗脫劑流速為5-10mL/min；
步驟(2-2)中：所述第一硅膠柱為粗孔zcx-Ⅱ型硅膠柱，外徑為4厘米，洗脫劑流速為1-2mL/min；
步驟(2-3)中：所述凝膠柱為Sephadex LH-20型凝膠柱，外徑為2.5厘米，洗脫劑流速為0.5-1mL/min；
步驟(2-4)中：所述中壓柱外徑為4厘米，柱壓為3-4MPa，洗脫劑流速為3-4mL/min；
步驟(2-5)中：
高效液相色譜柱為如下之一：a)色譜柱：Agilent Eclipse Plus C18 RRHD柱，2.1mm×100mm，1.7μm；或者b)色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C18柱，2.1mm×50mm，1.7μm；
流動(dòng)相為如下之一：a)由A相和B相組成，A相為水，B相為乙腈和甲醇的混合溶液；b)由A相和B相組成，A相為水和乙腈的混合溶液，B相為甲醇；c)由A相和B相組成，A相為水和乙腈的混合溶液，B相為乙腈和甲醇的混合溶液；乙腈和甲醇的混合溶液中乙腈的體積分?jǐn)?shù)為5％，水和乙腈的混合溶液中乙腈的體積分?jǐn)?shù)為10％；
梯度洗脫為如下之一：a)以流動(dòng)相B的比例進(jìn)行說(shuō)明：初始體積5％保持5min后，3min增至50％保持3min，3min下降至5％并保持5min；b)以流動(dòng)相B的比例進(jìn)行說(shuō)明：初始體積5％保持4min后，2min增至70％保持5min，3min下降至5％并保持5min；c)以流動(dòng)相B的比例進(jìn)行說(shuō)明：初始體積5％保持4min后，6min增至90％保持1min，3min下降至5％并保持5min；
收集第14-15min的流出相，將得到的流出相蒸干濃縮的得淺黃色粉末，即為降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷。
本發(fā)明的有益效果如下：從南疆駿棗中提取了具有降血脂活性的物質(zhì)，小鼠試驗(yàn)表明其具有一定的降血脂活性，并分離提純出了具有降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷。
具體實(shí)施方式
為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明，下面結(jié)合優(yōu)選實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說(shuō)明。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，下面所具體描述的內(nèi)容是說(shuō)明性的而非限制性的，不應(yīng)以此限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。
第一部分：從南疆駿棗中提取降血脂活性物質(zhì)及降血脂活性試驗(yàn)
從南疆駿棗中提取降血脂活性物質(zhì)
實(shí)施例1
(1-1)所用棗為鮮棗，采集于新疆阿拉爾市塔里木大學(xué)園藝實(shí)驗(yàn)站7年的棗樹，為鼠李科(Rhamnaceae)棗屬(Ziziphus Mill.)植物的果實(shí)—駿棗，將棗肉和棗核分離；
(1-2)用醇的水溶液對(duì)棗肉進(jìn)行提取，得醇提取物溶液和固體殘?jiān)?，將醇提取物溶液濃縮得干浸膏；醇的水溶液為乙醇水溶液，料液比為1：3(g/mL)，乙醇水溶液中乙醇的體積分?jǐn)?shù)為70％，回流提取。
(1-3)將干浸膏按照料液比為1:4(g/mL)溶于水中得干浸膏溶液，用醚對(duì)干浸膏溶液進(jìn)行提取，得醚相和醚提取剩余水相。醚為石油醚，干浸膏與石油醚的料液比為4:1(g/mL)。
(1-4)用氯仿對(duì)醚提取剩余水相進(jìn)行提取，得氯仿相和氯仿提取剩余水相。干浸膏與氯仿的料液比為4:1(g/mL)。
(1-5)用乙酸乙酯對(duì)氯仿提取剩余水相進(jìn)行提取，得酯相和酯提取剩余水相；干浸膏與乙酸乙酯的料液比為4:1(g/mL)；將酯相濃縮得干浸膏，即為降血脂活性物質(zhì)。
實(shí)施例2
(1-1)所用棗為鮮棗，采集于新疆阿拉爾市塔里木大學(xué)園藝實(shí)驗(yàn)站7年的棗樹，為鼠李科(Rhamnaceae)棗屬(Ziziphus Mill.)植物的果實(shí)—駿棗，將棗肉和棗核分離；
(1-2)用醇的水溶液對(duì)棗肉進(jìn)行提取，得醇提取物溶液和固體殘?jiān)瑢⒋继崛∥锶芤簼饪s得干浸膏；醇的水溶液為乙醇水溶液，料液比為1：2(g/mL)，乙醇水溶液中乙醇的體積分?jǐn)?shù)為80％，回流提取。
(1-3)將干浸膏按照料液比為1:10(g/mL)溶于水中得干浸膏溶液，用醚對(duì)干浸膏溶液進(jìn)行提取，得醚相和醚提取剩余水相。醚為石油醚，干浸膏與石油醚的料液比為8:1(g/mL)。
(1-4)用氯仿對(duì)醚提取剩余水相進(jìn)行提取，得氯仿相和氯仿提取剩余水相。干浸膏與氯仿的料液比為8:1(g/mL)。
(1-5)用乙酸乙酯對(duì)氯仿提取剩余水相進(jìn)行提取，得酯相和酯提取剩余水相，干浸膏與乙酸乙酯的料液比為8:1(g/mL)；將酯相濃縮得干浸膏，即為降血脂活性物質(zhì)。
實(shí)施例3
(1-1)所用棗為鮮棗，采集于新疆阿拉爾市塔里木大學(xué)園藝實(shí)驗(yàn)站7年的棗樹，為鼠李科(Rhamnaceae)棗屬(Ziziphus Mill.)植物的果實(shí)—駿棗，將棗肉和棗核分離；
(1-2)用醇的水溶液對(duì)棗肉進(jìn)行提取，得醇提取物溶液和固體殘?jiān)?，將醇提取物溶液濃縮得干浸膏；醇的水溶液為乙醇水溶液，料液比為1：4(g/mL)，乙醇水溶液中乙醇的體積分?jǐn)?shù)為60％，回流提取。
(1-3)將干浸膏按照料液比為2:5(g/mL)溶于水中得干浸膏溶液，用醚對(duì)干浸膏溶液進(jìn)行提取，得醚相和醚提取剩余水相。醚為石油醚，干浸膏與石油醚的料液比為2:1(g/mL)。
(1-4)用氯仿對(duì)醚提取剩余水相進(jìn)行提取，得氯仿相和氯仿提取剩余水相。干浸膏與氯仿的料液比為2:1(g/mL)。
(1-5)用乙酸乙酯對(duì)氯仿提取剩余水相進(jìn)行提取，得酯相和酯提取剩余水相，干浸膏與乙酸乙酯的料液比為2:1(g/mL)；將酯相濃縮得干浸膏，即為降血脂活性物質(zhì)。
降血脂活性試驗(yàn)
1、材料
動(dòng)物：昆明小白鼠，平均體重(20.0±2.0)g，SPF級(jí)，生產(chǎn)許可證：SCXK(新)2011-0001，與基礎(chǔ)飼料均購(gòu)于新疆疾控中心動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心。自由飲水和攝食。
2、試劑
試劑盒：血清總膽固醇試劑盒、高密度脂蛋白試劑盒、甘油三酯試劑盒、低密度脂蛋白試劑盒、化學(xué)純膽固醇(長(zhǎng)春匯力生物技術(shù)有限公司)。
其他：辛伐他丁市售；高脂飼料(83.0％基礎(chǔ)飼料，10％蛋黃粉，1.5％膽固醇，5％豬油，0.5％脫氧膽酸鈉)。氯仿、無(wú)水乙醇等試劑為分析純?cè)噭?，均?gòu)于天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司。
3、方法
3.1、將降血脂活性物質(zhì)配置成濃度為25mg/Kg的樣品溶液，同時(shí)分為高、低劑量組(0.6mL，0.2mL)。
3.2、小鼠分組及飼喂
選取50只昆明小鼠，雌雄各半，按體重均衡平均分為5組(每組10只)：
空白對(duì)照組，飼以基礎(chǔ)飼料。
陽(yáng)性對(duì)照組，飼以高脂飼料。
高脂模型對(duì)照組，飼以高脂飼料。
低劑量試驗(yàn)組，飼以高脂飼料。
高劑量試驗(yàn)組，飼以高脂飼料。
每10天進(jìn)行體重和血脂動(dòng)態(tài)跟蹤，直到造模成功。然后，高脂模型對(duì)照組停止喂食高脂飼料，改飼基礎(chǔ)飼料；陽(yáng)性對(duì)照組灌胃人體服用量的1/12辛伐他丁溶液；對(duì)低劑量試驗(yàn)組和高劑量試驗(yàn)組開始飼喂不同劑量樣品溶液，低劑量試驗(yàn)組每日喂食0.2mL樣品溶液、高劑量試驗(yàn)組每日喂食0.6mL樣品溶液。
3.3、小鼠血清制備及指標(biāo)測(cè)定
血清的制備：每10天取血，取血前小鼠禁食12h，取小鼠尾靜脈血，靜置30min后，10 000r/min離心15min，將血清移至干凈的血試管。
指標(biāo)測(cè)定：小鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)以及低密度脂蛋白(LDL-C)含量測(cè)定采用現(xiàn)有技術(shù)中已知的方法。
按下式計(jì)算動(dòng)脈硬化指數(shù)：動(dòng)脈硬化指數(shù)＝(TC-HDL-C)/(HDL-C)。
4、結(jié)果
經(jīng)過(guò)30天對(duì)小鼠飼喂，小鼠血清總膽固醇(TC)、甘油三脂(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)以及低密度脂蛋白(LDL-C)如下表所示。
注：*表示與高脂模型組相比的顯著性，*：p<0.05，**：p<0.01；#表示與空白組相比的顯著性，#：p<0.05，##：p<0.01。
第二部分：分離及純化山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷
分離及純化山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷
實(shí)施例4
(2-1)將實(shí)施例1中提取得到的降血脂活性物質(zhì)過(guò)第一硅膠柱，洗脫劑為石油醚和丙酮的混合物，石油醚和丙酮的體積比為5:1；所述第一硅膠柱為粗孔zcx-Ⅱ型硅膠柱，外徑為4.5厘米，洗脫劑流速為5mL/min；
(2-2)將步驟(2-1)中得到的洗脫液過(guò)第二硅膠柱，洗脫劑為氯仿和甲醇的混合物，氯仿和甲醇的體積比為5:1；所述第二硅膠柱為粗孔zcx-Ⅱ型硅膠柱，外徑為4厘米，洗脫劑流速為1mL/min；
(2-3)將步驟(2-2)中得到的洗脫液過(guò)凝膠柱，洗脫劑為氯仿和甲醇的混合物，氯仿和甲醇的體積比為1:1，每10mL收集一管，將第41管至第123管洗脫液收集合并；所述凝膠柱為Sephadex LH-20型凝膠柱，外徑為2.5厘米，洗脫劑流速為0.5mL/min；
(2-4)將步驟(2-3)中得到的第41管至第123管洗脫液過(guò)中壓柱，洗脫劑為甲醇水溶液，甲醇的體積分?jǐn)?shù)為70％，每10mL收集一管，將第54管至第62管洗脫液收集合并；所述中壓柱外徑為4厘米，柱壓為3MPa，洗脫劑流速為3mL/min；
(2-5)將步驟(2-4)中得到的第54管至第62管洗脫液過(guò)高效液相色譜柱，收集洗脫液，將洗脫液蒸干濃縮的得黃色粉末，即為降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷。
高效液相色譜柱為：a)色譜柱：Agilent Eclipse Plus C18RRHD柱，2.1mm×100mm，1.7μm。
流動(dòng)相為：a)由A相和B相組成，A相為水，B相為乙腈和甲醇的混合溶液，乙腈和甲醇的混合溶液中乙腈的體積分?jǐn)?shù)為5％。
梯度洗脫：a)以流動(dòng)相B的比例進(jìn)行說(shuō)明：初始體積5％保持5min后，3min增至50％保持3min，3min下降至5％并保持5min。
收集第14-15min的流出相，將得到的流出相蒸干濃縮的得淺黃色粉末，所得黃色粉末中降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的純度為92wt％。
實(shí)施例5
本實(shí)施例與實(shí)施例4的區(qū)別在于：色譜柱不同，本實(shí)施例采用如下色譜柱：b)色譜柱：ACQUITY UPLC BEH C18柱，2.1mm×50mm，1.7μm。所得黃色粉末中降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的純度為60wt％。
實(shí)施例4和實(shí)施例5中，優(yōu)選采用實(shí)施例4中使用的色譜柱，山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷與其它成分之間的分離及色譜峰峰形都比較好。而實(shí)施例5中，山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷與其它成分之間的分離效果較差，并且色譜峰拖尾，產(chǎn)物純度及得率均下降。
實(shí)施例6
本實(shí)施例與實(shí)施例4的區(qū)別在于：流動(dòng)相不同，b)由A相和B相組成，A相為水和乙腈的混合溶液，B相為甲醇，水和乙腈的混合溶液中乙腈的體積分?jǐn)?shù)為10％。所得黃色粉末中降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的純度為78wt％。
實(shí)施例7
本實(shí)施例與實(shí)施例4的區(qū)別在于：流動(dòng)相不同，c)由A相和B相組成，A相為水和乙腈的混合溶液，B相為乙腈和甲醇的混合溶液；乙腈和甲醇的混合溶液中乙腈的體積分?jǐn)?shù)為5％，水和乙腈的混合溶液中乙腈的體積分?jǐn)?shù)為10％。所得黃色粉末中降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的純度為98wt％。
實(shí)施例4、實(shí)施例6和實(shí)施例7中，優(yōu)選使用實(shí)施例7中的流動(dòng)相：山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的色譜峰峰形良好，且對(duì)山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的響應(yīng)較大，與其它成分的保留時(shí)間是這三種流動(dòng)相中相差最大的，有利于分離出純度較高的山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷。
實(shí)施例8
本實(shí)施例與實(shí)施例7的區(qū)別在于：洗脫梯度不同；b)以流動(dòng)相B的比例進(jìn)行說(shuō)明：b)以流動(dòng)相B的比例進(jìn)行說(shuō)明：初始體積5％保持4min后，2min增至70％保持5min，3min下降至5％并保持5min。所得黃色粉末中降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的純度為89wt％。
實(shí)施例9
本實(shí)施例與實(shí)施例7的區(qū)別在于：洗脫梯度不同，c)以流動(dòng)相B的比例進(jìn)行說(shuō)明：初始體積5％保持4min后，6min增至90％保持1min，3min下降至5％并保持5min。所得黃色粉末中降血脂活性化合物山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的純度為88wt％。
實(shí)施例7、實(shí)施例8和實(shí)施例9中，優(yōu)選采用實(shí)施例7中的洗脫梯度：能夠確保山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷與其它成分分離良好，并且保留時(shí)間最穩(wěn)定。
山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
選擇實(shí)施例7中得到的淺黃色粉末進(jìn)行表征如下：淺黃色黃色粉末，易溶于甲醇，鹽酸-鎂粉反應(yīng)顯陽(yáng)性，初步推斷該化合物為黃酮苷類化合物。三氯化鐵-鐵氰化鉀試劑顯藍(lán)色，說(shuō)明該化合物為酚類化合物，1H-NMR(500MHz，DMSO-d6),7.8(2H,d,J＝8.7Hz,H-2′,6′),6.93(2H,d,J＝8.7Hz,H-3′,5′),6.79(1H,dd,J＝1.9Hz,H-8),6.46(1H,dd,J＝2.0Hz,H-6)為明顯的黃酮信號(hào),5.56(1H,d,J＝1.5Hz,H-1″′),5.31(1H,d,J＝1.4Hz,H-1″)分別為α-L-Rha端基氫兩個(gè)鼠李糖信號(hào)；13C-NMR(125MHz,DMSO-d6)δ(ppm)：178.4(C-4),162.2(C-7),161.4(C-5),160.6(C-4′),158.3(C-2),156.6(C-9),136.03(C-3),131.2(C-4′,6′),120.8(C-1′),115.9(C-3′,5′),106.3(C-10),102.4(C-1″),99.9(C-1″′),98.9(C-6),95.1(C-8),與現(xiàn)有技術(shù)中山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷的測(cè)試結(jié)果一致。
降血脂活性試驗(yàn)
降血脂試驗(yàn)方法與本發(fā)明實(shí)施例“第一部分”中的降血脂活性試驗(yàn)相同，結(jié)果表明：小鼠喂食山奈酚-3,7-O-α-L-二鼠李糖苷2天后，即可明顯降低小鼠血清中總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的水平，且提高高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)的水平。
顯然，本發(fā)明的上述實(shí)施例僅僅是為清楚地說(shuō)明本發(fā)明所作的舉例，而并非是對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方式的限定，對(duì)于所屬領(lǐng)域的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在上述說(shuō)明的基礎(chǔ)上還可以做出其它不同形式的變化或變動(dòng)，這里無(wú)法對(duì)所有的實(shí)施方式予以窮舉，凡是屬于本發(fā)明的技術(shù)方案所引伸出的顯而易見的變化或變動(dòng)仍處于本發(fā)明的保護(hù)范圍之列。