本發(fā)明涉及的是一種以殼聚糖為基質，表面覆有丙烯酰胺分子印跡材料的新型納米磁珠制備方法，屬于制備技術。

背景技術：

丙烯酰胺，一種白色晶體化學物質，極易溶于有機溶劑中。人體可通過消化道、呼吸道、皮膚黏膜等多種途徑接觸丙烯酰胺，飲水是其中的一條重要接觸途徑。有報道顯示，在一些油炸或燒烤的淀粉類食品，例如薯條、炸土豆片等中檢出的丙烯酰胺的含量超過飲水中允許最大限量的500多倍。目前食品中丙烯酰胺的定量檢測方法主要是色譜法，特別是色質聯(lián)用法大大提高了測定的靈敏度和準確度。雖然色譜檢測技術在諸多檢測方法中最為成熟，得到廣泛的認可，但是樣品前處理方法依然是限制檢測結果的主要因素，傳統(tǒng)的前處理方法以液液萃取和固相萃取為主，樣品回收率低，基質干擾嚴重，亟需一種對丙烯酰胺具有較強專一性的樣品前處理方法，納米磁珠具有使用方式簡單的優(yōu)點，分子印跡材料對丙烯酰胺具有高度的選擇性吸附，本專利將兩者的優(yōu)點結合研發(fā)出一種以硅膠為基質，表面覆有丙烯酰胺分子印跡材料的新型納米磁珠制備方法，可以應用于含有丙烯酰胺的食品樣品的前處理過程，建立高效的丙烯酰胺檢測方法。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種以殼聚糖為基質，表面覆有丙烯酰胺分子印跡材料的新型納米磁珠制備方法，可以克服上述困難。

本發(fā)明是采用以下技術方案來實現(xiàn)的：一種以殼聚糖為基質，表面覆有丙烯酰胺分子印跡材料的新型納米磁珠制備方法，它包括以殼聚糖為基質的納米磁珠的制備、分子印跡聚合物包被納米磁珠兩個步驟。

第一步以殼聚糖為基質的納米磁珠的制備，先是制備Fe₃O₄：稱取10.0～30.0g七水硫酸亞鐵溶解于130.0～140.0ml去離子水中，用磁力攪拌反應浴鍋在90℃下反應1h。同時另取1.4～1.8g硝酸鉀和10.0～12.0g氫氧化鉀溶解于50.0～70.0ml去離子水中，配制好的溶液用恒流泵逐滴(1000μl/min)加入至亞鐵離子溶液中。添加完畢繼續(xù)在90℃下攪拌2h，得黑色渾濁溶液，黑色渾濁即為Fe₃O₄。

然后是殼聚糖包被Fe₃O₄：稱取1～3g殼聚糖超聲溶解于乙酸溶液中，再稱取0.1～0.3g Fe₃O₄磁性納米粒子加入到100～300ml 6～8mol/L的氫氧化鈉溶液中，在磁力攪拌反應浴中攪拌分散。把配制好的殼聚糖溶液逐滴滴加(200μl/min)到亞鐵離子溶液中，滴加完畢繼續(xù)攪拌1h得產物。

第二步分子印跡聚合物包被納米磁珠，有虛擬印跡和真實印跡兩種方法，即分別采用丙酰胺或丙烯酰胺作為模板分子的印跡材料包被納米磁珠。

(1)采用虛擬印跡方法，即選擇丙烯酰胺的結構類似物丙酰胺為模板分子來制備丙烯酰胺分子印跡聚合物(molecularly imprinted polymer，MIP)。稱取0.1～0.4g殼聚糖包被Fe₃O₄納米磁珠，超聲分散于乙腈中，加入模板分子丙酰胺0.01～0.02g，功能單體甲基丙烯酸MAA110.0～112.0μl，交聯(lián)劑二甲基丙烯酸乙二醇酯EGDMA1100～1300μl，引發(fā)劑偶氮二異丁腈AIBN34.0～36.0mg，60℃下攪拌反應12h，磁性分離，乙醇和水洗至中性，用乙醇∶乙酸(8∶1～10∶1)溶液洗脫模板分子。經過冷凍干燥，即得到第一種殼聚糖基質的丙烯酰胺分子印跡納米磁珠。

(2)采用真實印跡方法：稱取0.1～0.4g殼聚糖包被Fe₃O₄納米磁珠，超 聲分散于乙腈水溶液(乙腈∶水＝5∶1～5∶3)中，加入模板分子丙烯酰胺4～6mg，功能單體2-丙烯酰胺基-2-甲基丙磺酸AMPS 0.1～0.3g，交聯(lián)劑EGDMA1000～1100μl，引發(fā)劑AIBN 31.0～32.0mg，通N₂ 15min排除氧氣，將密封好的圓底燒瓶在60℃下攪拌反應17h，磁性分離，乙醇和水洗至中性，用乙醇∶乙酸(9∶1)溶液洗脫模板分子。經過冷凍干燥，即得到第二種殼聚糖基質的丙烯酰胺分子印跡納米磁珠。

本發(fā)明的優(yōu)點和積極效果：

設計新穎，工藝先進，方法獨特，用途廣。不但解決了丙烯酰胺在傳統(tǒng)富集過程中存在的基質干擾、特異性低、成本高等問題，并且實現(xiàn)檢測分析快捷方便、樣品預處理程序簡單、可實現(xiàn)快速檢測批量樣品，同時易操作，生產成本低，且極具實用性、推廣性。

附圖說明

圖例為本發(fā)明一種以殼聚糖為基質，表面覆有丙烯酰胺分子印跡材料的新型納米磁珠制備方法的示意流程圖。

具體實施方式

由圖例給出具體實施例。圖例給出的是一種以殼聚糖為基質，表面覆有丙烯酰胺分子印跡材料的新型納米磁珠制備的工藝流程圖，它包括以殼聚糖為基質的納米磁珠的制備1、分子印跡聚合物包被納米磁珠2。