本發(fā)明涉及一種植物提取物的制備方法，具體是一種從綠咖啡豆中提取綠原酸的方法。

背景技術(shù)：

綠原酸是由咖啡酸與奎尼酸組成的縮酚酸，是植物體在有氧呼吸過程中經(jīng)莽草酸途徑產(chǎn)生的一種苯丙素類化合物。綠原酸是一種重要的生物活性物質(zhì)，具有廣泛的藥理作用和生物活性，不僅是眾多藥材和中成藥抗菌解毒、消炎利膽的主要有效成分，還具有抗病毒、增高白血球、抗腫瘤、降血壓、降血脂、清除自由基和興奮中樞神經(jīng)系統(tǒng)等作用。綠原酸廣泛存在于植物中，以金銀花、杜仲、綠咖啡豆中的含量較高，從天然植物中高效提取綠原酸是國內(nèi)外的研究熱點。

綠咖啡豆來源于茜草科植物小果咖啡、中果咖啡及大果咖啡的種子。在綠咖啡豆中含有較多的綠原酸，可作為綠原酸提取物的原料。例如，中國專利CN103497106B，公開了一種從綠咖啡豆中提取綠原酸的方法。該方法的步驟為：將原料粉碎后用亞硫酸鈉水溶液超聲逆流連續(xù)提取，提取液經(jīng)震蕩篩過濾、臥螺離心、碟片離心后進(jìn)入XAD-16大孔樹脂吸附，流失液用LX-28大孔樹脂吸附，吸附飽和后用純化水沖洗干凈，用50％～80％乙醇洗脫，濃縮洗脫液，回收乙醇后噴霧干燥。該方法提取耗時較短、提取率在3.5％左右，產(chǎn)品純度在90％左右，但還可以有進(jìn)一步的提升空間，以獲得更高品質(zhì)的綠原酸。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種從綠咖啡豆中提取綠原酸的方法，能獲得高收率和高純度的綠原酸提取物。

為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

一種從綠咖啡豆中提取綠原酸的方法，包括以下步驟：

1)以綠咖啡豆為原料，粉碎后用含1wt‰～5wt‰鹽酸的熱水回流提取1～3次，每次的熱水用量為原料重量的8～10倍，每次的提取時間為1～3h；

2)將提取液濃縮至3～5倍原料重后離心，離心液用鹽酸調(diào)節(jié)pH＝2～3，進(jìn)D100大孔樹脂，然后水洗至流出液澄清，先用10％～20％乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮至15～18波美度，得到浸膏A；再用45％～55％乙醇溶液洗脫，洗脫液濃縮至1～2倍原料重，用鹽酸調(diào)節(jié)PH＝2.5～3.5，然后進(jìn)LX-207樹脂脫咖啡因，收集流出液并濃縮至15～18波美度，得到浸膏B；

3)合并浸膏A和浸膏B，加入其重量3～4倍的90％～99％乙醇溶液、1‰～1.5‰的活性炭，加熱回流脫色20～30min，過濾，將濾液濃縮至原體積的1/3～1/2，趁熱加入低極性的有機(jī)溶劑調(diào)節(jié)極性至4.6～4.8，靜置冷卻，析晶，晶體干燥得到成品。

步驟1)中，所述原料粉碎后的粒度優(yōu)選為10～30目，以20目為最佳。所述熱水中的鹽酸含量優(yōu)選為3wt‰。所述回流提取的次數(shù)優(yōu)選為2次，每次2h。

步驟2)中，優(yōu)選的，濃縮后的洗脫液用鹽酸調(diào)節(jié)PH＝3。

步驟3)中，所述的低極性的有機(jī)溶劑優(yōu)選為石油醚、乙醚、苯或二甲苯。

進(jìn)一步的，所述離心液進(jìn)D100大孔樹脂的流速為1BV/h，水洗的流速為0.5～1BV/h，兩次乙醇溶液洗脫的流速為1BV/h，濃縮后的洗脫液進(jìn)LX-207樹脂的流速為0.5～1BV/h。

進(jìn)一步的，所述回流提取時的熱水溫度為90～100℃，以100℃為最佳；所述回流脫色時的溫度為75～85℃，以80℃為最佳。

進(jìn)一步的，步驟2)中，第一次洗脫時，所用乙醇溶液優(yōu)選為15％乙醇溶液，第二次洗脫時，所用乙醇溶液優(yōu)選為50％乙醇溶液；步驟3)中，所用乙醇溶液優(yōu)選為95％乙醇溶液。

進(jìn)一步的，步驟2)中和步驟3)中所提及的濃縮方式均為減壓濃縮，步驟3)中的干燥方式為減壓干燥。

本發(fā)明的有益效果為：

本發(fā)明經(jīng)過鹽酸水溶液回流提取、D100大孔樹脂吸附、LX-207樹脂脫咖啡因、活性炭乙醇溶液回流脫色等過程，所用時間短，所用有機(jī)試劑主要為乙醇溶液，對環(huán)境和產(chǎn)品的污染少，制得產(chǎn)品的收率4％～5％，綠原酸含量在98％以上，收率和純度高，更適合工業(yè)生產(chǎn)。

具體實施方式

下面以實施例作進(jìn)一步描述，但本發(fā)明不局限于這些實施例。

實施例1

從綠咖啡豆中提取綠原酸，步驟如下：

1)以綠咖啡豆為原料，粉碎至20目后，用含3wt‰鹽酸的熱水回流提取2次，提取時的熱水溫度為100℃，每次的熱水用量為原料重量的9倍，每次的提取時間為2h；

2)將提取液減壓濃縮至4倍原料重后離心，離心液用鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3，進(jìn)D100大孔樹脂，流速為1BV/h，然后水洗至流出液澄清，流速為0.8BV/h，先用15％乙醇溶液洗脫，流速為1BV/h，洗脫液減壓濃縮至16波美度，得到浸膏A；再用50％乙醇溶液洗脫，流速為1BV/h，洗脫液減壓濃縮至1.5倍原料重，用鹽酸調(diào)節(jié)PH＝3，然后進(jìn)LX-207樹脂脫咖啡因，流速為1BV/h，收集流出液并減壓濃縮至16波美度，得到浸膏B；

3)合并浸膏A和浸膏B，加入其重量3.5倍的95％乙醇溶液、1.5‰的活性炭，加熱(溫度為80℃)回流脫色25min，過濾，將濾液減壓濃縮至原體積的1/2，趁熱加入石油醚調(diào)節(jié)極性至4.7，靜置冷卻，析晶，晶體減壓干燥得到成品，產(chǎn)品收率為5％，綠原酸含量為99％。

實施例2

從綠咖啡豆中提取綠原酸，步驟如下：

1)以綠咖啡豆為原料，粉碎至10目后，用含3wt‰鹽酸的熱水回流提取3次，提取時的熱水溫度為90℃，每次的熱水用量為原料重量的9倍，每次的提取時間為3h；

2)將提取液減壓濃縮至3倍原料重后離心，離心液用鹽酸調(diào)節(jié)pH＝2.5，進(jìn)D100大孔樹脂，流速為1BV/h，然后水洗至流出液澄清，流速為1BV/h，先用10％乙醇溶液洗脫，流速為1BV/h，洗脫液減壓濃縮至16波美度，得到浸膏A；再用55％乙醇溶液洗脫，流速為1BV/h，洗脫液減壓濃縮至1倍原料重，用鹽酸調(diào)節(jié)PH＝3，然后進(jìn)LX-207樹脂脫咖啡因，流速為1BV/h，收集流出液并減壓濃縮至16波美度，得到浸膏B；

3)合并浸膏A和浸膏B，加入其重量3倍的95％乙醇溶液、1.5‰的活性炭，加熱(溫度為75℃)回流脫色25min，過濾，將濾液減壓濃縮至原體積的1/2，趁熱加入苯調(diào)節(jié)極性至4.6，靜置冷卻，析晶，晶體減壓干燥得到成品，產(chǎn)品收率為4.5％，綠原酸含量為98.8％。

實施例3

從綠咖啡豆中提取綠原酸，步驟如下：

1)以綠咖啡豆為原料，粉碎至20目后，用含5wt‰鹽酸的熱水回流提取1次，提取時的熱水溫度為95℃，熱水用量為原料重量的10倍，提取時間為1h；

2)將提取液減壓濃縮至4倍原料重后離心，離心液用鹽酸調(diào)節(jié)pH＝3，進(jìn)D100大孔樹脂，流速為1BV/h，然后水洗至流出液澄清，流速為0.5BV/h，先用15％乙醇溶液洗脫，流速為1BV/h，洗脫液減壓濃縮至18波美度，得到浸膏A；再用45％乙醇溶液洗脫，流速為1BV/h，洗脫液減壓濃縮至1.5倍原料重，用鹽酸調(diào)節(jié)PH＝3.5，然后進(jìn)LX-207樹脂脫咖啡因，流速為0.5BV/h，收集流出液并減壓濃縮至18波美度，得到浸膏B；

3)合并浸膏A和浸膏B，加入其重量3.5倍的99％乙醇溶液、1‰的活性炭，加熱(溫度為80℃)回流脫色30min，過濾，將濾液減壓濃縮至原體積的1/3，趁熱加入乙醚調(diào)節(jié)極性至4.7，靜置冷卻，析晶，晶體減壓干燥得到成品，產(chǎn)品收率為4％，綠原酸含量為98.1％。

實施例4

從綠咖啡豆中提取綠原酸，步驟如下：

1)以綠咖啡豆為原料，粉碎至30目后，用含1wt‰鹽酸的熱水回流提取2次，提取時的熱水溫度為100℃，每次的熱水用量為原料重量的8倍，每次的提取時間為2h；

2)將提取液減壓濃縮至5倍原料重后離心，離心液用鹽酸調(diào)節(jié)pH＝2，進(jìn)D100大孔樹脂，流速為1BV/h，然后水洗至流出液澄清，流速為0.8BV/h，先用20％乙醇溶液洗脫，流速為1BV/h，洗脫液減壓濃縮至15波美度，得到浸膏A；再用50％乙醇溶液洗脫，流速為1BV/h，洗脫液減壓濃縮至2倍原料重，用鹽酸調(diào)節(jié)PH＝2.5，然后進(jìn)LX-207樹脂脫咖啡因，流速為0.8BV/h，收集流出液并減壓濃縮至15波美度，得到浸膏B；

3)合并浸膏A和浸膏B，加入其重量4倍的90％乙醇溶液、1.3‰的活性炭，加熱(溫度為85℃)回流脫色20min，過濾，將濾液減壓濃縮至原體積的1/2，趁熱加入二甲苯調(diào)節(jié)極性至4.8，靜置冷卻，析晶，晶體減壓干燥得到成品，產(chǎn)品收率為4.5％，綠原酸含量為98.6％。