欧美在线观看视频网站,亚洲熟妇色自偷自拍另类,啪啪伊人网,中文字幕第13亚洲另类,中文成人久久久久影院免费观看 ,精品人妻人人做人人爽,亚洲a视频

一種基于微滴數(shù)字PCR方法快速定量篩查草莓中沙門氏菌的方法與流程

文檔序號:12457517閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.用于鑒定沙門氏菌的PCR擴增引物及探針引物,其特征在于,包括沙門氏菌引物正向序列:5′-CTCACCAGGAGATTACAACATGG-3′,反向序列:5′-AGCTCAGACCAAAAGTGACCATC-3′,探針序列:5′-FAM-CACCGACGGCGAGACCGACTTT-TAMRA-3′。

2.一種基于微滴數(shù)字PCR方法快速定量篩查草莓中沙門氏菌的方法,其特征在于它按如下步驟進行:

(1)參照國標GB4789方法稱取草莓樣品25g,加入225mL0.85%滅菌生理鹽水,制成1:10的稀釋液,用均質器充分均質;

(2)取1:10的稀釋液100mL,利用滅菌的集菌器,將100mL 1:10的稀釋液富集于孔徑為0.45μm的集菌膜上,通過Chelex-100法提取集菌膜中草莓細菌DNA;

(3)采用微滴數(shù)字PCR擴增引物及探針引物,對沙門氏菌的DNA進行擴增;

其中的微滴數(shù)字PCR反應體系為20μL,各成分含量為:2×ddPCR Supermix for probes預混液Mix預混液10μL,上下游引物各1.6μL,探針引物0.4μL,模板2μL,無菌超純水補足20μL,混勻后離心。將其小心轉移至微卡發(fā)生器,切忌產(chǎn)生氣泡,同時與微卡發(fā)生器相應位置加入重油70μL,蓋上墊片,放入微滴生成器中生成微滴。吸取40μL生成的微滴,小心轉移至數(shù)字PCR96孔反應板中,170℃熱封后在PCR儀上開始循環(huán),PCR儀爬坡速度設置為2℃/s,循環(huán)參數(shù)為:95℃,10min;40cycles(94℃,30s,60℃,1min);98℃,10min。

3.權利要求2所述的Chelex-100法提取集菌膜中草莓細菌DNA,其中Chelex-100溶液濃度為13%。

當前第2頁1 2 3 
網(wǎng)友詢問留言 已有0條留言
  • 還沒有人留言評論。精彩留言會獲得點贊!
1
高唐县| 葫芦岛市| 涞源县| 阳东县| 孝义市| 阜南县| 京山县| 钦州市| 景东| 贡山| 犍为县| 新郑市| 敦煌市| 伊川县| 罗田县| 察哈| 闻喜县| 云安县| 黄大仙区| 晋中市| 都昌县| 梁河县| 隆尧县| 宁武县| 民勤县| 合水县| 河南省| 塔河县| 香港| 舟曲县| 汤阴县| 邢台市| 辽源市| 大庆市| 盐池县| 阿图什市| 洪洞县| 延庆县| 小金县| 莱西市| 北安市|