本發(fā)明涉及一種2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物及其制備方法，以及該2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：有機(jī)錫是一類含有Sn-C鍵的金屬有機(jī)化合物?？蒲泄ぷ髡咴诤茉缰熬妥⒁獾搅擞袡C(jī)錫化合物的體外抗癌活性。有機(jī)錫(IV)化合物抗腫瘤活性的研究可追溯到1929年。1967年，Kanisawa等認(rèn)為氯化錫對小鼠和大鼠的原發(fā)性腫瘤無效。但在1972年，Brown發(fā)現(xiàn)，通過食物或注射給藥，乙酸三苯基錫Ph3SnOOCCH3能抑制小鼠的腫瘤生長，而氯化三苯基錫則不能。1972~1977年間，荷蘭學(xué)者研究了大量的有機(jī)錫化合物，但未發(fā)現(xiàn)有進(jìn)一步篩選價值的化合物。他們繼續(xù)深入研究，最終發(fā)現(xiàn)兩個有機(jī)基團(tuán)配位的錫化合物，如錫氧化物(R2SnO)，錫氫氧化物［SnR2(OH)X］等有抗腫瘤活性，并查明它們都含有或水解能產(chǎn)生錫氧鍵。1980年，Crowe等又發(fā)現(xiàn)了一些有機(jī)錫化合物具有較好的抗癌活性，從此，關(guān)于有機(jī)錫抗癌活性的研究成為繼順鉑之后又一極為活躍的熱點(diǎn)。1989年，美國國家抗癌研究所(NationalCancerInstitute)對兩千多種有機(jī)錫化合物進(jìn)行了抗腫瘤活性篩選，結(jié)果表明一些有機(jī)錫化合物對P388淋巴細(xì)胞性白血病有抑制作用。2002年，Gielen等人在對有機(jī)錫羧酸酯化合物的活性做了全面總結(jié)，研究后認(rèn)為許多有機(jī)錫化合物的確具有較好的體外抗癌活性。研究表明，有機(jī)錫原子上連接的有機(jī)基團(tuán)及參與配位的配體決定著有機(jī)錫化合物的生物活性，選擇一些本身具有良好生物活性的有機(jī)配體與有機(jī)錫中的錫原子配位引起了人們的極大興趣。酰腙類化合物是由酰肼類化合物改性而成的一類Schiff堿化合物，它們由醛或酮和酰肼縮合而成，分子中具有與肽鍵類似的鍵型，具有良好的生物活性、較強(qiáng)的配位能力和多樣的配位形式，并且在醫(yī)藥、農(nóng)藥、材料和分析試劑等方面有著廣泛的應(yīng)用。近年來，國內(nèi)外許多研究人員對其在生物活性方面進(jìn)行了比較深入地研究，研究發(fā)現(xiàn)酰腙類化合物具有抗癌、殺菌、消炎等多種活性。因此，將酰腙類Schiff堿配體與有機(jī)錫結(jié)合，試圖得到生物活性更強(qiáng)的新化合物，成為人們感興趣的一個研究方向。中國專利CN102718794A公開了一種雙酰腙類Schiff堿二苯基錫配合物及其在制備抗肺腺癌、結(jié)腸癌、白血病細(xì)胞的藥物中的應(yīng)用。中國專利CN101851251A公開了一種酰腙類Schiff堿配體的二正丁基錫配合物及其在制備治療肝癌、肺腺癌、乳腺癌、前列腺癌、結(jié)腸癌或早幼粒白血病的藥物中的應(yīng)用。文獻(xiàn)(JournalofOrganometallicChemistry,2014,75:83-91)報(bào)道，有機(jī)錫酰腙類Schiff堿配合物對人結(jié)腸癌細(xì)胞(HCT-116)、人肺腺癌細(xì)胞(A549)、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)具有較強(qiáng)生物活性，并且優(yōu)于卡鉑。文獻(xiàn)(JournalofOrganometallicChemistry,2013,724:23-31)報(bào)道，系列有機(jī)錫酰腙類Schiff堿配合物、有機(jī)錫化合物以及酰腙類Schiff堿配體分別對人肺腺癌細(xì)胞(A549)、人結(jié)腸癌細(xì)胞(HCT-8)、人早幼粒白血病細(xì)胞(hl-60)等癌細(xì)胞的抑制作用。文獻(xiàn)(Bioorganic&MedicinalChemistryLetters,2015,25:4461-4463)報(bào)道，多種酰腙類Schiff堿配體對人肝癌細(xì)胞(HuH-7)和人肺腺癌細(xì)胞(A549)的抗癌活性。文獻(xiàn)(JournalofOrganometallicChemistry,2016,804:48-58)報(bào)道，二烴基錫酰腙類Schiff堿配合物對人肺腺癌細(xì)胞(A549)、人宮頸癌細(xì)胞(HeLa)、人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)等癌細(xì)胞的抑制作用?；邗ｋ觐怱chiff堿有機(jī)錫配合物是經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明具有抗癌活性的物質(zhì)，本發(fā)明選擇苯甲酰肼、苯丙酮酸鈉與二丁基氧化錫在一定條件下反應(yīng)，合成得到了對人肺癌細(xì)胞(H460)、人肝癌細(xì)胞(HepG2)和人乳腺癌細(xì)胞(MCF7)具有一定抑制活性的配合物，為開發(fā)抗癌藥物提供了新的途徑。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的第一目的是提供了一種2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物。本發(fā)明的第二目的是提供上述2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物制備方法。本發(fā)明的第三目的是提供上述2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。作為本發(fā)明的第一方面的一種2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物，為結(jié)構(gòu)式(I)的配合物(I)其中Ph為苯基，R為正丁基。本發(fā)明的2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物經(jīng)元素分析、紅外光譜、核磁共振譜及X-射線單晶衍射結(jié)構(gòu)分析，結(jié)果如下：元素分析(C50H68N4O8Sn2)：計(jì)算值：C55.07，H6.29，N5.14；實(shí)測值：C55.14，H6.24，N5.19。FT-IR(KBr,ν/cm-1):3446,3084,3028,2956,2924,2856,1616,1589,1579,1492,1388,1344,1172,1074,860,754,711,698,630,586,551,491,457。1HNMR(500MHz,CDCl3,δ/ppm):8.26(d,J=7.5Hz,2H),7.49~7.60(m,5H),7.26~7.29(m,2H),7.21(m,1H),4.45(s,2H),3.50(d,3H),1.59~1.62(m,4H),1.46~1.52(m,4H),1.20~1.28(m,4H),1.07~1.10(q,1H),0.78(t,J=7.3Hz,6H)。13CNMR(125MHz,CDCl3,δ/ppm):175.06,164.19,155.66,135.04,132.56,129.88,128.72,128.67,128.43,127.03,50.89,33.07,26.60,26.34,21.57,13.40。119SnNMR(187MHz,CDCl3,δ/ppm):-158.08。本發(fā)明的2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物為晶體結(jié)構(gòu)，其晶體為單斜晶系，空間群P2(1)/c，a=1.14677(6)nm，b=2.04929(11)nm，c=1.09850(5)nm，α=γ=90°，β=98.536(5)°，Z=2，V=2.5529(2)nm3，Dc=1.419Mg·m-3，m(MoKα)=1.032mm-1，F(xiàn)(000)=1120。本發(fā)明的2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是：分子中錫原子為七配位畸變五角雙錐構(gòu)型。本發(fā)明的2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物具有一定的熱穩(wěn)定范圍，在91℃以下能穩(wěn)定存在。作為本發(fā)明的第二方面的一種2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的制備方法，在有氮?dú)獗Ｗo(hù)的反應(yīng)容器中加入二丁基氧化錫、苯甲酰肼、苯丙酮酸鈉及溶劑無水甲醇，在溫度為45~65℃的條件下反應(yīng)5~24h，冷卻，過濾，在20~35℃的條件下控制溶劑揮發(fā)結(jié)晶，得黃色透明晶體，即為2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物。本發(fā)明的2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的制備特點(diǎn)是：從相對簡單易得的原料出發(fā)，不經(jīng)中間體的分離，直接獲得結(jié)構(gòu)復(fù)雜的分子，即一鍋法；這樣的反應(yīng)在經(jīng)濟(jì)上和環(huán)境友好上較為有利。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施例中，所述二丁基氧化錫、苯甲酰肼、苯丙酮酸鈉三者的物質(zhì)的量比為1:(1~1.05):(1.05~1.15)。在本發(fā)明的一個優(yōu)選實(shí)施例中，所述溶劑無水甲醇用量為每毫摩爾二丁基氧化錫加15~35毫升。作為本發(fā)明的第三方面的一種2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。申請人對上述2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物進(jìn)行了體外抗癌活性確定研究，確認(rèn)了2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物具有一定的抗癌生物活性，也就是說上述配合物的用途是在制備抗癌藥物中的應(yīng)用，具體的說就是在制備抗人肺癌、人肝癌和人乳腺癌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明的2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物對人肺癌細(xì)胞、人肝癌細(xì)胞和人乳腺癌細(xì)胞顯示出良好的抗癌活性，本發(fā)明的2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物抗癌活性高、成本低、制備方法簡單等特點(diǎn)，為開發(fā)新的抗癌藥物提供了新途徑。附圖說明圖1為2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的IR譜圖。圖2為2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的1HNMR譜圖。圖3為2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的13CNMR譜圖。圖4為2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的119SnNMR譜圖。圖5為2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的晶體結(jié)構(gòu)圖。圖6為2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的TG-DTG曲線。具體實(shí)施方式通過以下具體實(shí)施方式對本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說明。實(shí)施例1：2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的制備：在有氮?dú)獗Ｗo(hù)的100mL三口燒瓶中加入0.248g(1.0mmol)二丁基氧化錫、0.136g(1.0mmol)苯甲酰肼、0.205g(1.1mmol)苯丙酮酸鈉及15mL溶劑無水甲醇，在溫度為45~65℃的條件下反應(yīng)8h，冷卻，過濾，在20~35℃的條件下控制溶劑揮發(fā)結(jié)晶，得黃色透明晶體，即為2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物。產(chǎn)率：77.6%。熔點(diǎn)：91~93℃(dec)。元素分析(C50H68N4O8Sn2)：計(jì)算值：C55.07，H6.29，N5.14；實(shí)測值：C55.14，H6.24，N5.19。FT-IR(KBr,ν/cm-1):3446,3084,3028,2956,2924,2856,1616,1589,1579,1492,1388,1344,1172,1074,860,754,711,698,630,586,551,491,457。1HNMR(500MHz,CDCl3,δ/ppm):8.26(d,J=7.5Hz,2H),7.49~7.60(m,5H),7.26~7.29(m,2H),7.21(m,1H),4.45(s,2H),3.50(d,3H),1.59~1.62(m,4H),1.46~1.52(m,4H),1.20~1.28(m,4H),1.07~1.10(q,1H),0.78(t,J=7.3Hz,6H)。13CNMR(125MHz,CDCl3,δ/ppm):175.06,164.19,155.66,135.04,132.56,129.88,128.72,128.67,128.43,127.03,50.89,33.07,26.60,26.34,21.57,13.40。119SnNMR(187MHz,CDCl3,δ/ppm):-158.08。晶體學(xué)數(shù)據(jù)：單斜晶系，空間群P2(1)/c，a=1.14677(6)nm，b=2.04929(11)nm，c=1.09850(5)nm，α=γ=90°，β=98.536(5)°，Z=2，V=2.5529(2)nm3，Dc=1.419Mg·m-3，m(MoKα)=1.032mm-1，F(xiàn)(000)=1120。實(shí)施例2：2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的制備：在有氮?dú)獗Ｗo(hù)的100mL三口燒瓶中加入0.248g(1.0mmol)二丁基氧化錫、0.136g(1.0mmol)苯甲酰肼、0.195g(1.05mmol)苯丙酮酸鈉及35mL溶劑無水甲醇，在溫度為45~65℃的條件下反應(yīng)5h，冷卻，過濾，在20~35℃的條件下控制溶劑揮發(fā)結(jié)晶，得黃色透明晶體，即為2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物。產(chǎn)率：78.5%。熔點(diǎn)：91~93℃(dec)。元素分析(C50H68N4O8Sn2)：計(jì)算值：C55.07，H6.29，N5.14；實(shí)測值：C55.14，H6.24，N5.19。FT-IR(KBr,ν/cm-1):3446,3084,3028,2956,2924,2856,1616,1589,1579,1492,1388,1344,1172,1074,860,754,711,698,630,586,551,491,457。1HNMR(500MHz,CDCl3,δ/ppm):8.26(d,J=7.5Hz,2H),7.49~7.60(m,5H),7.26~7.29(m,2H),7.21(m,1H),4.45(s,2H),3.50(d,3H),1.59~1.62(m,4H),1.46~1.52(m,4H),1.20~1.28(m,4H),1.07~1.10(q,1H),0.78(t,J=7.3Hz,6H)。13CNMR(125MHz,CDCl3,δ/ppm):175.06,164.19,155.66,135.04,132.56,129.88,128.72,128.67,128.43,127.03,50.89,33.07,26.60,26.34,21.57,13.40。119SnNMR(187MHz,CDCl3,δ/ppm):-158.08。晶體學(xué)數(shù)據(jù)：單斜晶系，空間群P2(1)/c，a=1.14677(6)nm，b=2.04929(11)nm，c=1.09850(5)nm，α=γ=90°，β=98.536(5)°，Z=2，V=2.5529(2)nm3，Dc=1.419Mg·m-3，m(MoKα)=1.032mm-1，F(xiàn)(000)=1120。實(shí)施例3：2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的制備：在有氮?dú)獗Ｗo(hù)的100mL三口燒瓶中加入0.248g(1.0mmol)二丁基氧化錫、0.143g(1.05mmol)苯甲酰肼、0.214g(1.15mmol)苯丙酮酸鈉及25mL溶劑無水甲醇，在溫度為45~65℃的條件下反應(yīng)24h，冷卻，過濾，在20~35℃的條件下控制溶劑揮發(fā)結(jié)晶，得黃色透明晶體，即為2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物。產(chǎn)率：76.0%。熔點(diǎn)：91~93℃(dec)。元素分析(C50H68N4O8Sn2)：計(jì)算值：C55.07，H6.29，N5.14；實(shí)測值：C55.14，H6.24，N5.19。FT-IR(KBr,ν/cm-1):3446,3084,3028,2956,2924,2856,1616,1589,1579,1492,1388,1344,1172,1074,860,754,711,698,630,586,551,491,457。1HNMR(500MHz,CDCl3,δ/ppm):8.26(d,J=7.5Hz,2H),7.49~7.60(m,5H),7.26~7.29(m,2H),7.21(m,1H),4.45(s,2H),3.50(d,3H),1.59~1.62(m,4H),1.46~1.52(m,4H),1.20~1.28(m,4H),1.07~1.10(q,1H),0.78(t,J=7.3Hz,6H)。13CNMR(125MHz,CDCl3,δ/ppm):175.06,164.19,155.66,135.04,132.56,129.88,128.72,128.67,128.43,127.03,50.89,33.07,26.60,26.34,21.57,13.40。119SnNMR(187MHz,CDCl3,δ/ppm):-158.08。晶體學(xué)數(shù)據(jù)：單斜晶系，空間群P2(1)/c，a=1.14677(6)nm，b=2.04929(11)nm，c=1.09850(5)nm，α=γ=90°，β=98.536(5)°，Z=2，V=2.5529(2)nm3，Dc=1.419Mg·m-3，m(MoKα)=1.032mm-1，F(xiàn)(000)=1120。實(shí)施例4：2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物的制備：在有氮?dú)獗Ｗo(hù)的500mL三口燒瓶中加入2.480g(10.0mmol)二丁基氧化錫、1.400g(10.3mmol)苯甲酰肼、2.046g(11.0mmol)苯丙酮酸鈉及200mL溶劑無水甲醇，在溫度為45~65℃的條件下反應(yīng)22h，冷卻，過濾，在20~35℃的條件下控制溶劑揮發(fā)結(jié)晶，得黃色透明晶體，即為2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物。產(chǎn)率：75.3%。熔點(diǎn)：91~93℃(dec)。元素分析(C50H68N4O8Sn2)：計(jì)算值：C55.07，H6.29，N5.14；實(shí)測值：C55.14，H6.24，N5.19。FT-IR(KBr,ν/cm-1):3446,3084,3028,2956,2924,2856,1616,1589,1579,1492,1388,1344,1172,1074,860,754,711,698,630,586,551,491,457。1HNMR(500MHz,CDCl3,δ/ppm):8.26(d,J=7.5Hz,2H),7.49~7.60(m,5H),7.26~7.29(m,2H),7.21(m,1H),4.45(s,2H),3.50(d,3H),1.59~1.62(m,4H),1.46~1.52(m,4H),1.20~1.28(m,4H),1.07~1.10(q,1H),0.78(t,J=7.3Hz,6H)。13CNMR(125MHz,CDCl3,δ/ppm):175.06,164.19,155.66,135.04,132.56,129.88,128.72,128.67,128.43,127.03,50.89,33.07,26.60,26.34,21.57,13.40。119SnNMR(187MHz,CDCl3,δ/ppm):-158.08。晶體學(xué)數(shù)據(jù)：單斜晶系，空間群P2(1)/c，a=1.14677(6)nm，b=2.04929(11)nm，c=1.09850(5)nm，α=γ=90°，β=98.536(5)°，Z=2，V=2.5529(2)nm3，Dc=1.419Mg·m-3，m(MoKα)=1.032mm-1，F(xiàn)(000)=1120。試驗(yàn)例：本發(fā)明的2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物，其體外抗癌活性測定是通過MTT實(shí)驗(yàn)方法實(shí)現(xiàn)的。MTT分析法：以代謝還原3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide為基礎(chǔ)?；罴?xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚，用酶標(biāo)儀測定特征波長的光密度，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。采用MTT法來測定實(shí)施例1制備的2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物對人肺癌細(xì)胞(H460)、人肝癌細(xì)胞(HepG2)和人乳腺癌細(xì)胞(MCF7)的抑制活性。細(xì)胞株及培養(yǎng)體系：H460、HepG2和MCF7細(xì)胞株取自美國組織培養(yǎng)庫(ATCC)。用含10%胎牛血清的RPMI1640(GIBICO公司)培養(yǎng)基，在5%(體積分?jǐn)?shù))CO2、37℃飽和濕度培養(yǎng)箱內(nèi)進(jìn)行體外培養(yǎng)。測試過程：將測試藥液(1nM~10μM)按照濃度的濃度梯度分別加入到各個孔中，每個濃度設(shè)6個平行孔。實(shí)驗(yàn)分為藥物實(shí)驗(yàn)組(分別加入不同濃度的測試藥)、對照組(只加培養(yǎng)液和細(xì)胞，不加測試藥)和空白組(只加培養(yǎng)藥，不加細(xì)胞和測試藥)。將加藥后的孔板置于37℃，5%CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)72h。對照藥物的活性按照測試樣品的方法測定。在培養(yǎng)了72h后的孔板中，每孔加MTT40μL(用D-Hanks緩沖液配成4mg/mL)。在37℃放置4h后，移去上層清液。每孔加150μLDMSO，振蕩5min，使Formazan結(jié)晶溶解。最后，利用自動酶標(biāo)儀在570nm波長處檢測各孔的光密度。數(shù)據(jù)處理：數(shù)據(jù)處理使用GraphPadPrismversion7.0程序，配合物IC50通過程序中具有S形劑量響應(yīng)的非線性回歸模型進(jìn)行擬合得到。以MTT分析法對人肺癌細(xì)胞(H460)、人肝癌細(xì)胞(HepG2)和人乳腺癌細(xì)胞(MCF7)細(xì)胞株進(jìn)行分析，測定其IC50值，結(jié)果如表1所示，結(jié)論為：由表中數(shù)據(jù)可知，以本發(fā)明的2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物用作抗癌藥物，對人肺癌細(xì)胞(H460)、人肝癌細(xì)胞(HepG2)和人乳腺癌細(xì)胞(MCF7)具有一定的藥效，可作為抗癌藥物的候選化合物。表12-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物抗癌藥物體外活性測試數(shù)據(jù)。人肺癌人肝癌人乳腺癌細(xì)胞株H460HepG2MCF7IC50(μM)0.84±0.080.45±0.150.53±0.15其余實(shí)施例制備的2-羰基-3-苯基丙酸苯甲酰腙二正丁基錫配合物以MTT法對人肺癌細(xì)胞(H460)、人肝癌細(xì)胞(HepG2)和人乳腺癌細(xì)胞(MCF7)的抗癌活性測試方法同試驗(yàn)例，測試結(jié)果與表1基本相同。以上僅為本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施例和試驗(yàn)例，并不用于限制本發(fā)明，顯然，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以對本發(fā)明進(jìn)行各種改動、變型而不脫離本發(fā)明的精神和范圍。倘若對本發(fā)明的這些修改和變型屬于本發(fā)明權(quán)利要求及其等同技術(shù)的范圍之內(nèi)，均屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3