本發(fā)明涉及芽孢桿菌技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一株解淀粉芽孢桿菌菌株及其在垃圾除臭中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

我國(guó)城市垃圾年產(chǎn)量近1.5億噸，且每年以8％左右的速度遞增，有近2/3的城市陷入垃圾圍城困境。至今，許多城市的垃圾仍采取市郊裸露位置堆放處理，無(wú)任何防護(hù)措施，蚊蠅孽生、老鼠成災(zāi)、臭氣漫天，大量垃圾污水由地表滲入地下，對(duì)大氣、土壤、水體環(huán)境造成了很大的污染，嚴(yán)重危害人類(lèi)健康。

垃圾的臭味因垃圾中的有機(jī)成分由細(xì)菌分解而產(chǎn)生，生活垃圾中有75％～80％是有機(jī)物，主要有果皮、菜葉菜梗、剩飯、剩菜，家禽、動(dòng)物及魚(yú)類(lèi)的皮、毛、內(nèi)臟、脂肪、糞便、下腳料、血水等。樹(shù)葉、廢紙、花草和動(dòng)物的機(jī)體等有一定的水分，在自然消化的過(guò)程中，經(jīng)由好氧、厭氧發(fā)酵等作用下，產(chǎn)生惡臭。垃圾的臭味有氨氣、硫化氫、有機(jī)胺、有機(jī)硫、揮發(fā)性脂肪酸等。

惡臭是一種刺激嗅覺(jué)器官引起人們不愉快及損壞生活環(huán)境的氣體物質(zhì)，它不僅使大量傳播疾病的細(xì)菌滋生繁衍，而且直接通過(guò)嗅覺(jué)系統(tǒng)對(duì)呼吸系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)、循環(huán)系統(tǒng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)產(chǎn)生強(qiáng)烈的刺激作用，己成為一種環(huán)境污染。垃圾填埋場(chǎng)、垃圾中轉(zhuǎn)站和垃圾處理站是產(chǎn)生惡臭氣體的主要場(chǎng)所。隨著人們對(duì)生活環(huán)境的要求越來(lái)越高，惡臭污染治理已經(jīng)非常迫切。以前治理的主要方法有物理法、燃燒法、化學(xué)氧化法、吸收法、吸附法和聯(lián)合法。這些方法大都具有投資高、所需設(shè)備龐大、運(yùn)行困難，工藝復(fù)雜等缺點(diǎn)，在實(shí)際除臭過(guò)程中 難以廣泛應(yīng)用。

目前科研人員開(kāi)始研究用微生物過(guò)濾的方法去除惡臭物質(zhì)，采用微生物除臭劑去除惡臭物質(zhì)，但是目前公開(kāi)的方法以及采用的微生物除臭劑對(duì)惡臭物質(zhì)的去除率較低，并且投資運(yùn)行成本較大，亦不適宜大面積推廣。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的上述缺陷和問(wèn)題，本發(fā)明的目的是提供一株解淀粉芽孢桿菌菌株及其在垃圾除臭中的應(yīng)用。提供了一種新的具有優(yōu)異的復(fù)雜有機(jī)質(zhì)降解能力的解淀粉芽孢桿菌菌株YZ-0001，可改變市政生活垃圾中有機(jī)質(zhì)的分解率，顯著降低有機(jī)質(zhì)分解過(guò)程中產(chǎn)生的臭味氣體。將其培養(yǎng)得到微生物除臭劑應(yīng)用至垃圾除臭中，具有很好的除臭效果。解決了現(xiàn)有的垃圾除臭中惡臭物質(zhì)的去除率較低的技術(shù)問(wèn)題。

為了達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

本發(fā)明的一株解淀粉芽孢桿菌菌株，該菌株為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)YZ-0001，保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，保藏號(hào)為CGMCC 12052，保藏日期為2016年1月14日。

本發(fā)明的一株解淀粉芽孢桿菌菌株，分離自土壤中，在篩選平板(LB平板)上表現(xiàn)的菌落特征是：形態(tài)為圓形，表面光滑，污白色，革蘭氏染色呈陽(yáng)性。

本發(fā)明的一株解淀粉芽孢桿菌菌株的16S rDNA序列如SEQ ID NO：1所示。

本發(fā)明的一株解淀粉芽孢桿菌菌株在垃圾除臭的應(yīng)用。

在垃圾除臭過(guò)程中采用微生物除臭劑；采用的除臭劑是通過(guò)培養(yǎng)保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)為CGMCC 12052的解淀粉芽孢桿菌菌株得到的。

進(jìn)一步地，培養(yǎng)解淀粉芽孢桿菌菌株YZ-0001的具體步驟如下：

步驟一、首先將解淀粉芽孢桿菌菌株YZ-0001接種至增菌培養(yǎng)基，30℃振蕩培養(yǎng)至對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期，得到菌濃為106～1010個(gè)/ml的菌種原液；

步驟二、按質(zhì)量百分比，將1％～2％的菌種原液、4％～6％的營(yíng)養(yǎng)劑和92％～95％的水混合均勻，在20～25℃的溫度條件下發(fā)酵48小時(shí)，即微生物除臭劑。

進(jìn)一步地，步驟二中，所述營(yíng)養(yǎng)劑是將包括糖、磷酸二氫鉀、蛋白胨和硫酸鎂的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)加入50～60℃的水中，攪拌溶解得到的；其中，所述糖、磷酸二氫鉀、蛋白胨和硫酸鎂的質(zhì)量比為8-12﹕2-3﹕1-2﹕1，所述營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的總質(zhì)量是水的質(zhì)量的2％-5％。

優(yōu)選地，所述糖、磷酸二氫鉀、蛋白胨和硫酸鎂的質(zhì)量比為10﹕2.5﹕1.5﹕1，所述營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的總質(zhì)量是水的質(zhì)量的3％。

本發(fā)明的一株解淀粉芽孢桿菌菌株，通過(guò)16S rDNA微生物分類(lèi)鑒定，確定為解淀粉芽孢桿菌，其16S rDNA序列如SEQ ID NO：1所示。

本發(fā)明的一株解淀粉芽孢桿菌菌株YZ-0001具有較強(qiáng)的復(fù)雜有機(jī)質(zhì)降解能力，可改變市政生活垃圾中有機(jī)質(zhì)的分解率，從而顯著降低有機(jī)質(zhì)分解過(guò)程中產(chǎn)生的臭味氣體。因此，其可應(yīng)用于垃圾除臭，除臭效果好。而且，該解淀粉芽孢桿菌菌株YZ-0001的擴(kuò)大培養(yǎng)操作簡(jiǎn)單，培養(yǎng)條件不苛刻，利用該菌株進(jìn)行除臭具有投資運(yùn)行成本低，持續(xù)時(shí)間久，無(wú)二次污染等優(yōu)點(diǎn)，培養(yǎng)使用方便，適宜大面積推廣，可作為市政垃圾生物處理技術(shù)，在垃圾處理領(lǐng)域具有廣泛的應(yīng)用前景。

附圖說(shuō)明

為了更清楚地說(shuō)明本發(fā)明實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，下面將對(duì)實(shí)施 例或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單地介紹，顯而易見(jiàn)地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實(shí)施例，對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來(lái)講，在不付出創(chuàng)造性勞動(dòng)性的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1是本發(fā)明的解淀粉芽孢桿菌菌株的菌落形態(tài)圖；

圖2是本發(fā)明的解淀粉芽孢桿菌菌株的菌體形態(tài)特征圖。

具體實(shí)施方式

下面將結(jié)合本發(fā)明的實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒(méi)有作出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。

實(shí)施例1

本實(shí)施例1的一株解淀粉芽孢桿菌菌株，該菌株為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)YZ-0001，保藏在中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏號(hào)為CGMCC 12052，保藏日期為2016年1月14日。

該解淀粉芽孢桿菌菌株，分離自土壤中，在篩選平板上表現(xiàn)的菌落特征是：形態(tài)為圓形，表面光滑，污白色，革蘭氏染色呈陽(yáng)性。

具體地，解淀粉芽孢桿(Bacillus amyloliquefaciens)YZ-0001菌株的分離鑒定過(guò)程如下：

稱(chēng)取10g收集的土壤，加入裝有90mL無(wú)菌生理鹽水的三角瓶中，在28℃恒溫?fù)u床上150r/min振蕩10分鐘后，靜置1分鐘，取1mL上清液轉(zhuǎn)至9mL的滅菌生理鹽水中，混勻后依次進(jìn)行10倍系列稀釋至10^-3。取100μL不同濃度的稀釋液分別涂布在預(yù)先倒好的羧甲基纖維素鈉選擇培養(yǎng)基中，靜置片刻后，將 平板倒置于28℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)5-7d。挑選單菌落至羧甲基纖維素鈉平板上劃線分離進(jìn)一步獲得純培養(yǎng)物，經(jīng)過(guò)多次傳代后，獲得1株對(duì)纖維素降解能力較強(qiáng)的細(xì)菌，并將其命名為YZ-0001。該菌株在LB平板上的菌落特征是：形態(tài)為圓形，表面光滑，污白色，菌株的菌落形態(tài)如圖1所示，菌體形態(tài)特征見(jiàn)圖2所示。細(xì)菌核糖體RNA基因(16S)基因序列的測(cè)定由北京生工生物技術(shù)有限公司完成，測(cè)序結(jié)果如SEQ ID NO:1所示。將該序列在美國(guó)國(guó)家生物技術(shù)信息中心核酸數(shù)據(jù)庫(kù)上進(jìn)行比對(duì)發(fā)現(xiàn)YZ-0001的16S序列與Bacillus amyloliquefaciens的16S序列最為接近。因此根據(jù)形態(tài)學(xué)特征與分子生物學(xué)的鑒定將YZ-0001認(rèn)定為解淀粉芽孢桿。

實(shí)施例2

本實(shí)施例2為解淀粉芽孢桿菌(Bacillus amyloliquefaciens)YZ-0001在垃圾除臭中的應(yīng)用。

制備微生物除臭劑：將實(shí)施例1的解淀粉芽孢桿菌YZ-0001接種至增菌培養(yǎng)基，30℃振蕩培養(yǎng)至對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期(菌濃約為106～1010個(gè)/ml)。以水為溶質(zhì)，按照質(zhì)量濃度，將1％～2％的菌種原液、4％～6％的營(yíng)養(yǎng)劑和水混合均勻，在20～25℃的溫度條件下發(fā)酵48小時(shí)，即獲得微生物除臭劑。其中，營(yíng)養(yǎng)劑的制備方法為：糖200克、磷酸二氫鉀50克、蛋白胨30克、硫酸鎂20克、水10000毫升，先將水加熱至50～60℃，然后把上述各種原料添加至溫水中，并攪拌至原料完全溶解于水中而得營(yíng)養(yǎng)劑。

垃圾除臭應(yīng)用效果試驗(yàn)如下：

1、處理對(duì)象：市政生活垃圾；

2、除臭劑：上述微生物除臭劑，以及空白除臭劑(即水)；

3、處理方式：

處理組：將微生物除臭劑與同等量的清水配成除臭菌液，將除臭菌液放置于噴霧器中，并以霧化狀態(tài)直接噴灑于垃圾物料中，直至垃圾濕透；平行6組；

對(duì)照組：將與處理組中使用的除臭菌液同等量的水，噴灑于垃圾物料中，直至垃圾濕透；平行6組；

4、試驗(yàn)結(jié)果：通過(guò)我國(guó)國(guó)標(biāo)方法《空氣質(zhì)量惡臭的測(cè)定三點(diǎn)比較式臭袋法》(GB/T 14675-1993)對(duì)處理組和對(duì)照組垃圾臭味進(jìn)行檢測(cè)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，處理組相對(duì)對(duì)照組具有顯著差異，處理組的除臭效果明顯好于對(duì)照組，表明該除臭菌液具有明顯的除臭效果。

本發(fā)明中，有關(guān)DNA的標(biāo)準(zhǔn)操作方法和所使用的藥品均參考《分子克隆實(shí)驗(yàn)指南》所描述的內(nèi)容(參見(jiàn)J.薩姆布魯克等，2002，分子克隆實(shí)驗(yàn)指南，第三版，金冬雁等(譯)，科學(xué)出版社，北京)。本發(fā)明中所涉及的其他各種實(shí)驗(yàn)操作，均為本領(lǐng)域的常規(guī)技術(shù)，文中沒(méi)有特別說(shuō)明的部分，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以參照本發(fā)明申請(qǐng)日之前的各種常用工具書(shū)、科技文獻(xiàn)或相關(guān)的說(shuō)明書(shū)、手冊(cè)等加以實(shí)施。

以上所述，僅為本發(fā)明的具體實(shí)施方式，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不局限于此，任何熟悉本技術(shù)領(lǐng)域的技術(shù)人員在本發(fā)明揭露的技術(shù)范圍內(nèi)，可輕易想到變化或替換，都應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。因此，本發(fā)明的保護(hù)范圍應(yīng)所述以權(quán)利要求的保護(hù)范圍為準(zhǔn)。