1.含人APP啟動(dòng)子-luci細(xì)胞系，其特征在于，其具有SEQ ID NO：1所示的氨基酸序列。
2.一種如權(quán)利要求1所述的含人APP啟動(dòng)子-luci細(xì)胞系的構(gòu)建方法，其特征在于，具體按照以下步驟實(shí)施：
步驟1、構(gòu)建含人APP啟動(dòng)子區(qū)-熒光素酶嵌合基因的表達(dá)載體，該表達(dá)載體為：pGL3-APPP_luc-puro質(zhì)粒；
步驟2、將步驟1中構(gòu)建的pGL3-APPP_luc-puro質(zhì)粒與pRL-SV40質(zhì)粒共轉(zhuǎn)染人胚腎細(xì)胞系HEK-293T細(xì)胞系；
步驟3、將步驟2中被轉(zhuǎn)染的HEK-293T細(xì)胞經(jīng)胰酶消化后鋪種于10cm培養(yǎng)皿中，并采用嘌呤霉素加壓篩選獲得基因組中有可能穩(wěn)定整合人APP啟動(dòng)子區(qū)-熒光素酶嵌合基因的細(xì)胞系，共五株，分別為：1A3、2A3、2A6、1B3和2B3；通過對(duì)篩選得到的五株細(xì)胞系中螢火蟲熒光素酶及海腎熒光素酶的活性檢測(cè)，得到含人APP啟動(dòng)子-luci細(xì)胞系，即為1A3細(xì)胞系。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含人APP啟動(dòng)子-luci細(xì)胞系的構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟1具體按照以下步驟實(shí)施：
步驟1.1、以pRL-SV40載體為模板，并采用引物1和引物2，經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得SV40增強(qiáng)子/啟動(dòng)子區(qū)序列片段；
引物1為：
TGGTAAAATCGATAAGAGTCCGCGCAGCACCATGGCCTGAA；
引物2為：
GTGGGCTTGTACTCGGTCATGGATCCTTGCAAAAGCCTAGG；
以pBrit-HA/Flag載體為模板，并采用引物3和引物4，經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得嘌呤霉素抗性基因序列片段；
引物3為：
CCTAGGCTTTTGCAAGGATCCATGACCGAGTACAAGCCCAC；
引物4為：
CTCTCAAGGGCATCGGTCGACTCAGGCACCGGGCTTGCGGG；
步驟1.2、待步驟1.1完成，運(yùn)用二次PCR方法，再利用引物1和引物4，以凝膠純化后的SV40增強(qiáng)子/啟動(dòng)子區(qū)序列片段和嘌呤霉素抗性基因序列片段為模板，經(jīng)PCR擴(kuò)增獲得SV40增強(qiáng)子/啟動(dòng)子及嘌呤霉素抗性基因融合片段；
步驟1.3、經(jīng)步驟1.2后，先將pGL3-basic表達(dá)載體用限制性酶切酶BamH I-HF和Sal I-HF進(jìn)行雙酶切，接著采用熱敏堿性磷酸酶對(duì)酶切產(chǎn)物進(jìn)行去磷酸化處理，最后采用凝膠純化方法回收載體片段；
步驟1.4、采用Infusion-HD連接酶連接經(jīng)步驟1.3雙酶切后得到的載體pGL3-basic和目的基因片段SV40增強(qiáng)子/啟動(dòng)子及嘌呤霉素抗性基因融合片段，得到連接產(chǎn)物A；
步驟1.5、將經(jīng)步驟1.4得到的連接產(chǎn)物A轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α感受態(tài)細(xì)胞，并于次日挑取陽性克隆，提取質(zhì)粒并送測(cè)序，獲得的載體命名為pGL3-puro1，獲得的該載體還保留了pGL3-basic載體的原有氨芐抗性基因及螢火蟲熒光素酶基因序列片段；
步驟1.6、提取人膠質(zhì)細(xì)胞系A(chǔ)172細(xì)胞的基因組DNA，具體按照以下方法實(shí)施：
采用引物5和引物6，經(jīng)PCR法擴(kuò)增人APP，即淀粉樣蛋白前體蛋白基因，啟動(dòng)子區(qū)基因片段；
所述引物5為：
CTATCGATAGGTACCGAGCTCTGCATTTTTAGTAGAGATGGGGG；
所述引物6為：
ACTTAGATCGCAGATCTCGAGGGGTTAAGGTCTTGGGGGGTAT；
步驟1.7、先將經(jīng)步驟1.5獲得的pGL3-puro1表達(dá)載體用限制性酶切酶Sac I-HF和Xho I-HF進(jìn)行雙酶切，然后采用熱敏堿性磷酸酶對(duì)酶切產(chǎn)物進(jìn)行去磷酸化處理，最后采用凝膠純化方法回收載體片段；
步驟1.8、采用Infusion-HD連接酶連接經(jīng)步驟1.7雙酶切后的載體pGL3-puro1和目的基因片段APPP，得到連接產(chǎn)物B；
步驟1.9、將經(jīng)步驟1.8得到的連接產(chǎn)物B轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α感受態(tài)細(xì)胞，次日挑取陽性克隆，提取質(zhì)粒并送測(cè)序，獲得的載體命名為pGL3-APPP_luc-puro，所述pGL3-APPP_luc-puro載體中保留了pGL3-puro1載體原有氨芐抗性基因、嘌呤霉素抗性基因序列及SV40啟動(dòng)子/增強(qiáng)子基因序列片段。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的含人APP啟動(dòng)子-luci細(xì)胞系的構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟1.3中雙酶切的條件為：先于37℃條件下反應(yīng)3.5h～4.5h，再于65℃條件下滅活20min～30min；
所述步驟1.3中去磷酸化處理的反應(yīng)條件為：先于37℃條件下反應(yīng)30min～60min，在于65℃條件下滅活10min～12min。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的含人APP啟動(dòng)子-luci細(xì)胞系的構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟1.4中的反應(yīng)條件具體如下：先于50℃條件下反應(yīng)13min～17min；再于4℃條件下冷卻1min～3min。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的含人APP啟動(dòng)子-luci細(xì)胞系的構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟1.7中的反應(yīng)條件具體如下：
雙酶切條件為：先于37℃條件下反應(yīng)3h～5h，再于65℃條件下滅活20min～30min；
去磷酸化處理的反應(yīng)條件為：先于37℃條件下反應(yīng)50min～70min，再于65℃條件下65℃滅活10min～12min。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的含人APP啟動(dòng)子-luci細(xì)胞系的構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟1.8中的反應(yīng)條件為：先于50℃條件下反應(yīng)15min，再于4℃條件下冷卻2min～4min。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含人APP啟動(dòng)子-luci細(xì)胞系的構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟2具體按照以下步驟實(shí)施：
步驟2.1、將1×105個(gè)HEK-293T細(xì)胞鋪種于24孔板中；
步驟2.2、待24h之后，采用脂質(zhì)體2000將0.8微克的pGL3-APPP_luc-puro質(zhì)粒和0.2微克的pRL-SV40質(zhì)粒轉(zhuǎn)染人胚腎細(xì)胞系HEK-293T細(xì)胞系。
9.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含人APP啟動(dòng)子-luci細(xì)胞系的構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟3具體按照以下步驟實(shí)施i:
步驟3.1、采用胰酶消化經(jīng)步驟2得到的被轉(zhuǎn)染細(xì)胞；
步驟3.2、經(jīng)步驟3.1后，將被轉(zhuǎn)染細(xì)胞分別鋪種于兩個(gè)直徑為10cm細(xì)胞培養(yǎng)皿中，每個(gè)培養(yǎng)皿中都預(yù)先加入10mL含10％胎牛血清和1μg/mL嘌呤霉素的DMEM培養(yǎng)基；
于1μg/mL嘌呤霉素加壓條件下，篩選細(xì)胞2周，能夠觀察到培養(yǎng)皿中形成多個(gè)陽性細(xì)胞克隆團(tuán)；
步驟3.3、待步驟3.2完成，先將經(jīng)細(xì)胞消化液潤(rùn)濕后的無菌濾紙覆蓋于單一陽性細(xì)胞克隆團(tuán)上，待全部陽性細(xì)胞克隆團(tuán)被濾紙覆蓋后，再將培養(yǎng)皿置于細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育3min～6min后取出培養(yǎng)皿；
然后采用無菌鑷子將沾有陽性細(xì)胞克隆團(tuán)的濾紙轉(zhuǎn)移至24孔板；
最后采用含有1μg/mL嘌呤霉素和10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞；
步驟3.4、篩選經(jīng)步驟3.3得到的細(xì)胞系，初步獲得五株能穩(wěn)定整合人APP啟動(dòng)子區(qū)-螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶基因的細(xì)胞系，簡(jiǎn)稱為含人APP啟動(dòng)子-luci細(xì)胞系，并將這五株細(xì)胞系分別命名為：1A3、2A3、2A6、1B3和2B3；
步驟3.5、將步驟3.4中的五株細(xì)胞系培養(yǎng)于1μg/mL嘌呤霉素含10％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基中；
步驟3.6、經(jīng)步驟3.5后，采用雙熒光素酶報(bào)告系統(tǒng)試劑盒對(duì)步驟3.4中篩選到的五株APPP-luci細(xì)胞系：1A3、2A3、2A6、1B3和2B3進(jìn)行螢火蟲熒光素酶及海腎熒光素酶表達(dá)檢測(cè)，以確定APP啟動(dòng)子區(qū)序列能否正常啟動(dòng)螢火蟲熒光素酶表達(dá)，最終得到一株基因組中確定能穩(wěn)定整合人APP啟動(dòng)子區(qū)-熒光素酶嵌合基因且高效表達(dá)螢火蟲熒光素酶和海腎熒光素酶的細(xì)胞系，即為含人APP啟動(dòng)子區(qū)-熒光素酶嵌合基因的細(xì)胞系；
對(duì)篩選到的五株APPP-luci細(xì)胞系：1A3、2A3、2A6、1B3和2B3進(jìn)行表達(dá)檢測(cè)，具體的方法如下：
步驟a、分別將五株APPP-luci細(xì)胞系：1A3、2A3、2A6、1B3和2B3鋪種于24孔培養(yǎng)板中，每孔1×105個(gè)細(xì)胞，培養(yǎng)24h；
步驟b、經(jīng)步驟a后，去除細(xì)胞培養(yǎng)液，每孔加入50μL細(xì)胞裂解液1×Passive lysis buffer，于室溫條件下反應(yīng)15min～20min；
步驟c、取5μL步驟b中細(xì)胞裂解液，加入白色不透明96孔板中，并在每孔中加入50μL螢火蟲熒光素酶底物液，讀取熒光強(qiáng)度，然后加入50μL海腎熒光素酶底物液，讀取熒光強(qiáng)度；
步驟d、通過比較5株細(xì)胞系中螢火蟲熒光素酶活性相對(duì)強(qiáng)弱RLA來確定插入螢火蟲熒光素酶基因上游的人源APP啟動(dòng)子區(qū)基因序列是否能驅(qū)動(dòng)螢火蟲熒光素酶表達(dá)，螢火蟲熒光素酶活性相對(duì)強(qiáng)弱按照如下算法獲得：
RLA＝螢火蟲熒光素酶活性(LAF)/海腎熒光素酶活性(LAR)；
經(jīng)計(jì)算后得到：篩選到的五株穩(wěn)定細(xì)胞系中1A3、1B3和2B3既表達(dá)螢火蟲熒光素酶，又表達(dá)海腎熒光素酶，其中1A3細(xì)胞株中兩種熒光素酶表達(dá)效率較高，＝該細(xì)胞系可用于篩選具有調(diào)控人APP啟動(dòng)子區(qū)活性作用的化合物。
10.一種如權(quán)利要求1所述的含人APP啟動(dòng)子-luci細(xì)胞系，其特征在于，其在篩選抑制人APP表達(dá)的新型抗老年癡呆化合物及治療性藥物中的應(yīng)用。