本發(fā)明涉及一種治療肥胖癥藥物，具體是一類治療肥胖癥藥物五環(huán)三萜化合物。
背景技術：
長梗冬青苷(Pedunculoside)和救必應酸(Rotundic acid)屬于五環(huán)三萜為化合物，具有近似的分子結(jié)構(gòu)，分子式分別為C36H58O10和C30H48O5，分子量分別為650.84和488.71，可提取自中藥救必應(冬青科冬青屬植物鐵冬青Ilex rotunda Thunb.的干燥樹皮)，含量較高，也可從其他冬青科冬青屬植物中得到，鐵冬青植物資源在中國嶺南地區(qū)較為豐富。
長梗冬青苷和救必應酸等五環(huán)三萜化合物有著廣泛用途。專利文獻CN101961340A公開了長梗冬青苷具有治療心律失常、心肌缺血、腦缺血等疾病的作用；專利文獻CN101856357A公開了救必應酸用于預防和治療缺血性心腦血管疾病，如心絞痛、心肌梗死、腦梗死的用途。專利文獻CN105125567A公開了長梗冬青苷具有一定的抗炎效果；專利文獻CN102127142A公開了救必應酸及其衍生物具有抗腫瘤活性；專利文獻CN101342186A表明長梗冬青苷或救必應酸具有顯著的降血脂作用。同時，文獻報道長梗冬青苷服用安全，無溶血性，未見相關不良安全事件目前尚無長梗冬青苷、救必應酸或其衍生物具有治療肥胖癥作用的報道。
肥胖是全球增長最快速的健康問題之一，與高血脂、糖尿病、心臟病等一系列疾病密切相關，但市場上多數(shù)抗肥胖藥物副作用較多。奧利司他是較為常用的治療肥胖癥藥物，為強效的全合成胃腸道脂肪酶抑制劑[Henness S,Perry C M.Orlistat:a review of its use in the management of obesity.[J].Drugs,2006,66(12):1625-56]，其常見不良反應主要為酶抑制作用較強導致的胃腸道紊亂，表現(xiàn)為油性斑點、胃腸排氣增多、脂肪瀉等，臨床發(fā)生率約為26％，且與高脂飲食合用時，發(fā)生胃腸道反應概率會增加，少見的不良反應有嚴重的肝損傷、過敏、代謝和內(nèi)分泌系統(tǒng)異常等。此外，奧利司他的服用也會減少脂溶性維生素包括維生素K的吸收[訾梅,李祥霞.奧利司他的不良反應及安全應用[J].藥物不良反應雜志,2007,9(3):182-185.]。目前，更為安全有效的治療肥胖癥藥物或減肥功能性食品有待研究開發(fā)。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明公開了一類五環(huán)三萜化合物在制備治療肥胖癥藥物中的應用，包括長梗冬青苷和救必應酸在制備治療肥胖癥藥物中的應用。
所述五環(huán)三萜化合物的結(jié)構(gòu)通式為：
式中，R為COOH、COO―β―D―葡萄糖基或其他藥學上可接受的基團，COO―β―D―葡萄糖基的結(jié)構(gòu)為：
當式中的R為COOH時，化合物名為救必應酸(Rotundic acid)，當式中R為COO―β―D―葡萄糖基時，化合物名為長梗冬青苷(Pedunculoside)。
本發(fā)明包括以上述以一種五環(huán)三萜為母核的同類化合物為原料的治療肥胖癥的各種藥物制劑。藥物劑型包括片劑、膠囊劑、顆粒劑、口服液體制劑和注射劑等。
本發(fā)明用于治療肥胖癥的制劑中藥用輔料包括賦形劑、防腐劑、抗氧劑、矯味劑、芳香劑、助溶劑、乳化劑、增溶劑、崩解劑、填充劑、潤滑劑等。具體有羥丙纖維素、羧甲淀粉鈉、聚維酮K30、十二烷基硫酸鈉、滑石粉、預膠化淀粉、微粉硅膠和硬脂酸鎂等。
本發(fā)明所述的化合物占藥物制劑總質(zhì)量的1％-99％，優(yōu)選為50％-70％。
本發(fā)明所述的化合物對脂肪酶有較強的抑制作用，可以有效抑制高脂飲食誘導的肥胖癥大鼠對脂肪的吸收能力，降低體重增加。據(jù)此，本發(fā)明表明所述的化合物可用于制備治療肥胖癥的藥物制劑或減肥功能性食品，其治療肥胖癥效果涉及由高脂飲食等因素引起的肥胖或體重超標疾病，降低糖尿病、高血脂癥等代謝綜合癥，心血管疾病，肌肉骨骼疾病，非酒精性脂肪肝疾病的風險。且無現(xiàn)有其他減肥藥物的副作用。
附圖說明
圖1最后四周各組脂肪排出比統(tǒng)計圖。
具體實施方式
下面結(jié)合具體的實施例對本發(fā)明做進一步的詳細說明，但本發(fā)明并不局限于此。
實施例1-3中所采用比例均在50％-70％的優(yōu)選范圍內(nèi)。
實施例1
片劑的制備：將60g長梗冬青苷與20g預膠化淀粉混合均勻，加入粘合劑50％的乙醇，制軟材，過20目篩，制成顆粒，得到的濕顆粒置于75℃烘箱中干燥2h，在顆粒中加入適量微粉硅膠和硬脂酸鎂，并混合均勻，壓片分裝。
實施例2
脂肪酶抑制率測定實驗：取100μl豬胰脂肪酶(PL)溶液(5mg/mL)加入20μL不同濃度的待測樣品溶液，用pH＝7.4的Tris-HCl緩沖液定容至900μl，混勻，于37℃孵育5min，然后加入100μLp-硝基苯基丁酸酯(p-NPB)溶液(10mol/L),充分震蕩，迅速轉(zhuǎn)移200μL至96孔酶標板中，用酶標儀測定其在410nm的吸光度數(shù)，每1分鐘讀取一次，至少測定5次(1至15分鐘)。每組每個濃度的測定相同操作重復3次，吸光度取平均值。以時間為橫坐標，以實驗組中吸光度減去相應空白組吸光度的差值為縱坐標作圖，計算吸光度差值隨時間的變化率K,根據(jù)以下公式計算抑制率：
胰脂肪酶抑制率(％)＝(K正常組-K實驗組)/K正常組×100％
計算得到胰脂肪酶抑制率后，以待測樣品最終濃度為橫坐標，胰脂肪酶抑制率為縱坐標作圖，計算胰脂肪酶抑制率為50％時對應的待測樣品的濃度，即抑制劑的半抑制濃度(IC50)。
反應體系中以不加胰脂肪酶溶液為空白對照，不加待測樣品溶液為正常對照，長梗冬青苷實驗組加入長梗冬青苷溶液最終濃度為2.02、25.32、50.64、71.76、101.28μg/mL，救必應酸實驗組加入救必應酸溶液最終濃度為1.95、24.35、48.70、78.20、97.4μg/mL，陽性藥物實驗組加入奧利司他(orlistat)溶液最終濃度為0.01138、0.1138、0.2276、0.5690、1.138μg/mL。實驗結(jié)果表明，不同濃度的長梗冬青苷和救必應酸均對胰脂肪酶具有明顯的抑制作用，長梗冬青苷的胰脂肪酶半抑制濃度(IC50)為80.83μg/mL，救必應酸的胰脂肪酶半抑制濃度(IC50)為101.28μg/mL，奧利司他的胰脂肪酶半抑制濃度(IC50)為0.53μg/mL。長梗冬青苷和救必應酸是常用中藥救必應的主要有效成分，安全可靠，通過文獻對比，其抑制脂肪酶能力在天然產(chǎn)物中較強，但相比于合成藥物奧利司他較溫和，推測其可能在發(fā)揮抗肥胖作用的同時，對胃腸道的不良影響較合成藥物小，適于長期服用。
實施例3
以一種五環(huán)三萜為母核的同類化合物對高脂飲食誘導的大鼠肥胖癥的影響：清潔級的Wistar大鼠54只，3至4月齡，體重180g～200g，雄性，購于廣東省實驗動物中心?；緺I養(yǎng)飼料脂肪能量含量為10％，高脂營養(yǎng)飼料脂肪能量含量為45％。以基本營養(yǎng)飼料適應性喂養(yǎng)一周后，小鼠隨機分為9組(n＝6)，分組情況如下：
組1：以基本營養(yǎng)飼料喂養(yǎng)12周，作為正常組。
組2：以高脂營養(yǎng)飼料喂養(yǎng)12周，其中最后4周每日給予等容量0.5％羥甲基纖維素鈉溶液灌胃，作為空白對照組。
組3：以高脂營養(yǎng)飼料喂養(yǎng)12周，其中最后4周每日給予10mg·kg-1奧利司他(orlistat)溶液灌胃，作為陽性藥物對照組。
組4：以高脂營養(yǎng)飼料喂養(yǎng)12周，其中最后4周每日給予10mg·kg-1長梗冬青苷溶液灌胃，作為長梗冬青苷低劑量組。
組5：以高脂營養(yǎng)飼料喂養(yǎng)12周，其中最后4周每日給予20mg·kg-1長梗冬青苷溶液灌胃，作為長梗冬青苷中劑量組。
組6：以高脂營養(yǎng)飼料喂養(yǎng)12周，其中最后4周每日給予40mg·kg-1長梗冬青苷溶液灌胃，作為長梗冬青苷高劑量組。
組7：以高脂營養(yǎng)飼料喂養(yǎng)12周，其中最后4周每日給予10mg·kg-1救必應酸溶液灌胃，作為救必應酸低劑量組。
組8：以高脂營養(yǎng)飼料喂養(yǎng)12周，其中最后4周每日給予20mg·kg-1救必應酸溶液灌胃，作為救必應酸中劑量組。
組9：以高脂營養(yǎng)飼料喂養(yǎng)12周，其中最后4周每日給予40mg·kg-1救必應酸溶液灌胃，作為救必應酸高劑量組。
高脂飲食誘導的大鼠肥胖癥模型，周期為12周。每周對每組大鼠稱重，計算大鼠平均體重；測量最后4周每組大鼠攝入食物中的脂肪的質(zhì)量和排出糞便的脂肪的質(zhì)量，計算脂肪排出比例。
計算公式為：
大鼠平均體重＝該組大鼠體重之和/該組大鼠個體數(shù)
脂肪排出比＝排出糞便的脂肪的質(zhì)量/攝入食物中的脂肪的質(zhì)量×100％
結(jié)果表明不同劑量給藥的長梗冬青苷與救必應酸均對高脂飲食誘導的肥胖癥大鼠的脂肪排出比有顯著提高作用，抑制了脂肪的腸道吸收(見圖1)。
同時，不同劑量給藥的長梗冬青苷與救必應酸對高脂飲食誘導的肥胖癥大鼠的體重增加有顯著的降低作用，表明長梗冬青苷與救必應酸的實際抗肥胖藥效較強，有廣闊的應用前景。最后四周平均體重情況見下表：
表1 最后4周各實驗組大鼠平均體重(g)
結(jié)論：長梗冬青苷與救必應酸對脂肪吸收強度有顯著的抑制作用，對肥胖癥大鼠體重增加有明顯的降低作用。
長梗冬青苷與救必應酸對高脂飲食誘導的肥胖、體重超標疾病有明顯的治療和預防作用，能降低糖尿病、高血脂癥等代謝綜合癥，心血管疾病，肌肉骨骼疾病，非酒精性脂肪肝疾病的風險。