1.一種羊肚菌菌種快速繁育方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)種菇選擇:選取菇柄長1~2厘米、菇帽長3~4厘米、紋路清晰、褶皺緊密的羊肚菌種菇連根拔除,清除雜質(zhì)后攤晾至含水量為60~70%備用;
(2)無糖培養(yǎng)基制備:土豆去皮后切成顆粒,稱取質(zhì)量份數(shù)為200份的土豆顆粒,加水煮沸18~20分鐘,趁熱過濾取濾液,向濾液中補充熱水后加入瓊脂粉,攪拌溶解后趁熱轉(zhuǎn)入三角瓶中滅菌,再趁熱取出三角瓶放入超凈工作臺或者接種箱內(nèi),消毒后將無糖培養(yǎng)基均勻分裝到平板皿中,冷卻備用;
(3)菌種分離:將步驟(1)中的種菇,無糖培養(yǎng)基和分離器具滅菌后,切開種菇菌蓋,鏟取小塊菌肉,接入平板皿中的無糖培養(yǎng)基內(nèi),16~18℃培養(yǎng)4~6天后即可看到組織塊周圍長出白色稀疏纖細(xì)的菌絲,7~8天后待菌絲長到直徑1.5~2cm的菌落時即可提純;
(4)接種:從步驟(3)所得無糖培養(yǎng)基中挑取2塊培養(yǎng)基,放入試管內(nèi)的提純培養(yǎng)基的兩個三分點上,16~18℃下培養(yǎng)1天后即可看到菌種塊周圍長出白色稀疏的菌絲,9~10天菌絲即可長滿試管;
(5)羊肚菌原種制作:將試管中長滿菌絲的提純培養(yǎng)基切成片段,每片段接入1瓶滅菌后的原種培養(yǎng)基內(nèi),溫度16~18℃、濕度60%條件下培養(yǎng),第2天菌絲即吃料,5~7天菌絲即可封面;
(6)搖瓶:菌絲封面后,在培養(yǎng)室內(nèi),緊握菌種瓶,上下?lián)u動8~10次,使菌絲均勻分布在菌種瓶中,繼續(xù)培養(yǎng)3~5天,菌種瓶中有大量黃色菌核產(chǎn)生,即可下地播種,每畝用種量380~410瓶。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種羊肚菌菌種快速繁育方法,其特征在于,步驟(4)中所述提純培養(yǎng)基的制備方法如下:
取20份黃豆打磨成豆?jié){后加入葡萄糖20份、瓊脂粉20份、KH2P041.5份、MgSO41.5份、酵母膏1份充分溶解,采用20mm×200mm的玻璃試管,每個玻璃試管裝入試管高度1/5的溶液,封口滅菌后擺放傾斜,冷卻后即得提純培養(yǎng)基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種羊肚菌菌種快速繁育方法,其特征在于,步驟(5)中所述原種培養(yǎng)基的制備方法如下:
1)選用當(dāng)年無蟲優(yōu)質(zhì)麥粒60份,提前48小時加水浸泡,同時加入石灰1份,浸泡至無白心時撈出瀝干水分備用;
2)取木屑30份提前備好用水淋透,自然堆放至棕黃色備用;
3)將上述步驟中制備好的麥粒、木屑以及草炭土8份、石膏1份混合均勻后裝入750ml菌種瓶,裝瓶時裝至瓶身2/3處即可,種瓶上下松緊一致,最后用棉花或者塑料薄膜封口。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種羊肚菌菌種快速繁育方法,其特征在于:步驟(2)中所述土豆顆粒為0.9~1.1cm3。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種羊肚菌菌種快速繁育方法,其特征在于:步驟(4)中挑取的兩塊無糖培養(yǎng)基體積均為4~5mm3。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種羊肚菌菌種快速繁育方法,其特征在于:步驟(5)中切成片段的提純培養(yǎng)基長度為0.9~1.1cm。