本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及一種糞大腸菌群培養(yǎng)基及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：糞大腸菌群為總大腸菌群的一個(gè)亞種；糞大腸菌群細(xì)菌來源于人和溫血?jiǎng)游锏募S便。檢出糞大腸菌群表明該化妝品已被糞便污染，有可能存在其他腸道致病菌或寄生蟲等病原體的危險(xiǎn)?？紤]到總大腸菌群中的細(xì)菌除生活在腸道中外，在自然環(huán)境(水與土壤)中亦經(jīng)常存在。在糞大腸菌群這一組群細(xì)菌中大腸埃希氏菌(E.coli)數(shù)量最多，是較理想的指示菌，但欲正確鑒定此細(xì)菌，手續(xù)較繁復(fù)，因此在化妝品檢驗(yàn)中采用糞大腸菌群列為重要的衛(wèi)生指標(biāo)菌。中華人民共和國(guó)衛(wèi)生部在1987-7-1就頒布實(shí)施了在化妝品中必須要檢測(cè)糞大腸菌群，但許多檢驗(yàn)人員對(duì)這項(xiàng)目的檢驗(yàn)技術(shù)要求細(xì)節(jié)存在著的這樣那樣的問題，菌落的判斷及識(shí)別主要依賴于檢驗(yàn)人員的肉眼觀察和經(jīng)驗(yàn)判斷，對(duì)于不典型形態(tài)特征的菌落可能會(huì)造成漏檢。因此，開發(fā)一種培養(yǎng)時(shí)間短、特異性好、對(duì)主觀依賴較小的糞大腸菌群的培養(yǎng)基意義重大。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提供一種糞大腸菌群培養(yǎng)基，解決現(xiàn)有的化妝品糞大腸菌群檢測(cè)中依賴于檢驗(yàn)人員的主觀判斷的問題、檢測(cè)準(zhǔn)確性不高的問題。為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明的技術(shù)方案為：一種糞大腸菌群顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：蛋白胨10～20g/L，動(dòng)物組織消化物2～4g/L，乳糖5～15g/L，膽鹽0.5～1.5g/L，十二烷基硫酸鈉0.2～0.4/L，溴甲酚紫0.03～0.06g/L，卵磷脂1～3g，吐溫8010～15g/L，其余為去離子水，pH值7.4±0.2。其中，優(yōu)選地，所述動(dòng)物組織消化物為肝浸粉。其中，優(yōu)選地，一種糞大腸菌群顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：蛋白胨12～18g/L，動(dòng)物組織消化物2～4g/L，乳糖8～12g/L，膽鹽0.8～1.2g/L，十二烷基硫酸鈉0.2～0.4/L，溴甲酚紫0.04～0.06g/L，卵磷脂1～3g，吐溫8012～14g/L，其余為去離子水，pH值7.4±0.2。一種糞大腸菌群顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：蛋白胨15g/L，動(dòng)物組織消化物3g/L，乳糖10g/L，膽鹽1.0g/L，十二烷基硫酸鈉0.3/L，溴甲酚紫0.05g/L，卵磷脂2g，吐溫8013g/L，其余為去離子水，pH值7.4±0.2。一種糞大腸菌群顯色培養(yǎng)基在檢測(cè)糞大腸菌群中的應(yīng)用。其中，優(yōu)選地，是將糞大腸菌群接種至顯色培養(yǎng)基，44±0.5℃中培養(yǎng)24～48小時(shí)，培養(yǎng)基變黃色的含有糞大腸菌群，培養(yǎng)基為紫色不變色不含有糞大腸菌群。因自然環(huán)境中生活的大腸菌群培養(yǎng)的最合適溫度為25℃左右，如在37℃培養(yǎng)則仍可生長(zhǎng)，但如將培養(yǎng)溫度再升高至44.5℃，則不再生長(zhǎng)，而直接來自糞便的大腸菌群細(xì)菌也就是糞大腸菌群，習(xí)慣于37'C左右生長(zhǎng)，如將培養(yǎng)溫度升高至44.5℃仍可繼續(xù)生長(zhǎng)。因此，可用提高培養(yǎng)溫度方法將自然環(huán)境中的大腸菌群與糞便中的大腸菌群區(qū)分。加入中和劑卵磷脂和吐溫80后，含中和劑的乳糖膽鹽培養(yǎng)基中能夠檢出糞大腸菌群的最低細(xì)菌濃度，比標(biāo)準(zhǔn)乳糖膽鹽培養(yǎng)基下降了1個(gè)級(jí)數(shù)。其中，膽鹽和十二烷基硫酸鈉具有抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的作用，二者共同使用，有效的抑制其它雜菌的生長(zhǎng)，提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。膽鹽的品種來源及用量不同，其抑菌效果也不同。本發(fā)明中的膽鹽為豬、牛或羊的膽鹽。本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明的糞大腸菌群顯色培養(yǎng)基糞大腸菌群的培養(yǎng)時(shí)間為24～48小時(shí)，培養(yǎng)時(shí)間短，且檢測(cè)靈敏度高、特異性好，直接根據(jù)培養(yǎng)基顏色就可對(duì)菌株作出鑒別，檢測(cè)周期短，適用于處理大批量的樣本、易于產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，可對(duì)化妝品中的糞大腸菌群進(jìn)行全面、系統(tǒng)、準(zhǔn)確的檢測(cè)和初步的鑒定，為化妝品檢測(cè)提供了新的途徑。具體實(shí)施方式下面對(duì)本發(fā)明實(shí)施例中的技術(shù)方案進(jìn)行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實(shí)施例僅僅是本發(fā)明一部分實(shí)施例，而不是全部的實(shí)施例?；诒景l(fā)明中的實(shí)施例，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動(dòng)前提下所獲得的所有其他實(shí)施例，都屬于本發(fā)明保護(hù)的范圍。實(shí)施例1本實(shí)施例提供一種糞大腸菌群顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：蛋白胨15g/L，肝浸粉3g/L，乳糖10g/L，膽鹽1.0g/L，十二烷基硫酸鈉0.3/L，溴甲酚紫0.05g/L，卵磷脂2g，吐溫8013g/L，其余為去離子水，pH值7.4±0.2。其中，所述膽鹽的豬的膽鹽。上述培養(yǎng)基的使用方法：1.稱取本培養(yǎng)基75.0g，加入去離子水1L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝至帶導(dǎo)管的試管中，每管裝培養(yǎng)基10ml，115℃，20min高壓蒸汽滅菌，備用。2.取合適稀釋度的化妝品10ml(含有糞大腸菌群)，加到含有培養(yǎng)基的試管中，混勻，于44±0.5℃中培養(yǎng)24～48小時(shí)，并將活化后的金黃色葡萄球菌、變形桿菌、變形桿菌、蠟樣芽孢桿菌分別加入上述培養(yǎng)基中，44±0.5℃中培養(yǎng)24～48小時(shí)。結(jié)果：菌種類別生長(zhǎng)情況培養(yǎng)基顏色化妝品(含有糞大腸菌群)+++黃色金黃色葡萄球菌++紫色綠膿桿菌--紫色變形桿菌++紫色沙門氏菌+紫色實(shí)施例2本實(shí)施例提供一種糞大腸菌群顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：蛋白胨10g/L，肝浸粉4g/L，乳糖5g/L，膽鹽1.5g/L，十二烷基硫酸鈉0.2/L，溴甲酚紫0.06g/L，卵磷脂1g，吐溫8015g/L，其余為去離子水，pH值7.4±0.2。其中，所述膽鹽的豬的膽鹽。上述培養(yǎng)基的使用方法：1.稱取本培養(yǎng)基75.0g，加入去離子水1L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝至帶導(dǎo)管的試管中，每管裝培養(yǎng)基10ml，115℃，20min高壓蒸汽滅菌，備用。2.取合適稀釋度的化妝品10ml(不含有糞大腸菌群)，加到含有培養(yǎng)基的試管中，混勻，于44±0.5℃中培養(yǎng)24～48小時(shí)，并將活化后的金黃色葡萄球菌、變形桿菌、變形桿菌、蠟樣芽孢桿菌分別加入上述培養(yǎng)基中，44±0.5℃中培養(yǎng)24～48小時(shí)。結(jié)果：菌種類別生長(zhǎng)情況培養(yǎng)基顏色化妝品(含有糞大腸菌群)+++紫色金黃色葡萄球菌++紫色綠膿桿菌--紫色變形桿菌++紫色沙門氏菌+紫色實(shí)施例3本實(shí)施例提供一種糞大腸菌群顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：蛋白胨20g/L，肝浸粉2g/L，乳糖15g/L，膽鹽0.5g/L，十二烷基硫酸鈉0.4g/L，溴甲酚紫0.03g/L，卵磷脂3g，吐溫8010g/L，其余為去離子水，pH值7.4±0.2。其中，所述膽鹽的豬的膽鹽。上述培養(yǎng)基的使用方法：1.稱取本培養(yǎng)基75.0g，加入去離子水1L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝至帶導(dǎo)管的試管中，每管裝培養(yǎng)基10ml，115℃，20min高壓蒸汽滅菌，備用。2.取合適稀釋度的化妝品10ml(含有糞大腸菌群)，加到含有培養(yǎng)基的試管中，混勻，于44±0.5℃中培養(yǎng)24～48小時(shí)，并將活化后的金黃色葡萄球菌、變形桿菌、變形桿菌、蠟樣芽孢桿菌分別加入上述培養(yǎng)基中，44±0.5℃中培養(yǎng)24～48小時(shí)。結(jié)果：菌種類別生長(zhǎng)情況培養(yǎng)基顏色化妝品(含有糞大腸菌群)+++黃色金黃色葡萄球菌++紫色綠膿桿菌--紫色變形桿菌++紫色沙門氏菌+紫色實(shí)施例4本實(shí)施例提供一種糞大腸菌群顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：蛋白胨12g/L，肝浸粉4g/L，乳糖8g/L，膽鹽1.2g/L，十二烷基硫酸鈉0.2g/L，溴甲酚紫0.06g/L，卵磷脂1g，吐溫8014g/L，其余為去離子水，pH值7.4±0.2。其中，所述膽鹽的豬的膽鹽。上述培養(yǎng)基的使用方法：1.稱取本培養(yǎng)基75.0g，加入去離子水1L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝至帶導(dǎo)管的試管中，每管裝培養(yǎng)基10ml，115℃，20min高壓蒸汽滅菌，備用。2.取合適稀釋度的化妝品10ml(含有糞大腸菌群)，加到含有培養(yǎng)基的試管中，混勻，于44±0.5℃中培養(yǎng)24～48小時(shí)，并將活化后的金黃色葡萄球菌、變形桿菌、變形桿菌、蠟樣芽孢桿菌分別加入上述培養(yǎng)基中，44±0.5℃中培養(yǎng)24～48小時(shí)。結(jié)果：菌種類別生長(zhǎng)情況培養(yǎng)基顏色化妝品(含有糞大腸菌群)+++黃色金黃色葡萄球菌++紫色綠膿桿菌--紫色變形桿菌++紫色沙門氏菌+紫色實(shí)施例5本實(shí)施例提供一種糞大腸菌群顯色培養(yǎng)基，是由下述組分組成：蛋白胨18g/L，肝浸粉2g/L，乳糖8g/L，膽鹽1.2g/L，十二烷基硫酸鈉0.4g/L，溴甲酚紫0.04g/L，卵磷脂3g，吐溫8012g/L，其余為去離子水，pH值7.4±0.2。其中，所述膽鹽的豬的膽鹽。上述培養(yǎng)基的使用方法：1.稱取本培養(yǎng)基75.0g，加入去離子水1L，攪拌加熱煮沸至完全溶解，分裝至帶導(dǎo)管的試管中，每管裝培養(yǎng)基10ml，115℃，20min高壓蒸汽滅菌，備用。2.取合適稀釋度的化妝品10ml(含有糞大腸菌群)，加到含有培養(yǎng)基的試管中，混勻，于44±0.5℃中培養(yǎng)24～48小時(shí)，并將活化后的金黃色葡萄球菌、變形桿菌、變形桿菌、蠟樣芽孢桿菌分別加入上述培養(yǎng)基中，44±0.5℃中培養(yǎng)24～48小時(shí)。結(jié)果：菌種類別生長(zhǎng)情況培養(yǎng)基顏色化妝品(含有糞大腸菌群)+++黃色金黃色葡萄球菌++紫色綠膿桿菌--紫色變形桿菌++紫色沙門氏菌+紫色以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例而已，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3