本發(fā)明涉及生物工程技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌及其方法和用途。

背景技術(shù)：

所謂生物碳，是由有機垃圾，如動物糞便，動物骨頭，植物根莖，木屑和麥秸稈等生物量經(jīng)過熱化學(xué)效應(yīng)，被高溫分解，成為可用做肥料的類似于碳球狀的物質(zhì)。其中由植物形成的，以固定碳元素為目的的木炭被稱為“生物碳”。土地中自然存在大量的碳元素，但是這些碳是不穩(wěn)定的，受氣候影響會釋放二氧化碳。而生物碳則可以固定碳元素長達(dá)幾百年。

生活在巴西亞馬遜河流域的人們長期使用一種特殊的肥料。這種肥料來源于當(dāng)?shù)兀哂袠O強的恢復(fù)貧瘠土壤肥力的能力。當(dāng)?shù)厝税阉Q為“印第安人的黑土壤”。它多產(chǎn)、肥沃，與當(dāng)?shù)叵∈?、貧瘠的土壤形成鮮明的對比?，F(xiàn)代研究證明，黑土壤是2500年，甚至6000年以前由生活在亞馬遜流域的人們制造的。一般認(rèn)為，他們使用的材料包括動物糞便，魚，動物骨頭和植物廢物。但是生產(chǎn)黑土壤最關(guān)鍵的原料，也是黑土壤之所以呈現(xiàn)黑色的原因，是木炭的使用。黑土壤中的木炭可以使土壤肥力維持一個世紀(jì)之久。幾個世紀(jì)以來，生活在南美亞馬遜流域的人們都靠這些原生態(tài)材料制造“黑土壤”來肥沃土地。幾千年過去了，那兒的土壤不需耕耘灌溉，依舊十分肥沃。佐治亞大學(xué)的科學(xué)家Steiner解釋道：“千百年過去，這個區(qū)域依舊沃土依然，那是因為土壤中富含碳元素”。因此，生物碳使人們看到了無需砍伐森林也可開拓農(nóng)耕地的希望。

生物碳可以保護(hù)環(huán)境。鑒于其高含碳量和多孔的特性，它不僅可提高土壤蓄水儲養(yǎng)的能力，還可保護(hù)土壤中的微生物。它像一個地下碳水槽，鎖住二氧化碳，最終達(dá)到增加作物產(chǎn)量的效果。生物碳可吸收有機物質(zhì)腐爛時釋放至大氣的二氧化碳；并幫助植物有效儲存其光合作用所需的二氧化碳。通過這兩種方式，生物碳起到了潔凈空氣的作用生物碳是面向未來的，低成本，可持續(xù)性的環(huán)保能源。而它的起源則可追溯到幾千年前。

硅酸鹽細(xì)菌也叫膠質(zhì)芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)，在選擇培養(yǎng)基平板上，菌落表面濕潤而光滑，質(zhì)地粘稠并有彈性，無色透明隆起度大，像半顆玻璃珠；菌體長桿形，大小為4～7微米×1～1.2微米，連同莢膜，大小為7～10微米×5～7微米，莢膜比菌體大10～15倍，有時甚至有2～4層莢膜。

硅酸鹽細(xì)菌作為菌肥，在前蘇聯(lián)和我國研究較早、應(yīng)用較多。一些研究認(rèn)為硅酸鹽細(xì)菌(Silicate bacteria)由于其生命活動作用可將含鉀礦物中的難溶性鉀溶解出來供作物利用，并將其稱為鉀細(xì)菌，用這類菌種生產(chǎn)出來的肥料叫硅酸鹽菌肥，俗稱鉀細(xì)菌肥。

硅酸鹽細(xì)菌一方面由于其生長代謝產(chǎn)生的有機酸類物質(zhì)，能夠?qū)⑼寥乐泻浀拈L石、云母、磷灰石、磷礦粉等礦物的難溶性鉀及磷溶解出來為作物和菌體本身利用，菌體中富含的鉀在菌死亡后又被作物吸收；另一方面它所產(chǎn)生的激素、氨基酸、多糖等物質(zhì)促進(jìn)作物的生長。同時，細(xì)菌在土壤中繁殖，抑制其它病原菌的生長。這些都對作物生長、產(chǎn)量提高及品質(zhì)改善有良好作用。

目前的硅酸鹽細(xì)菌肥料劑型主要是草炭吸附的固體劑型，其生產(chǎn)條件、工藝要求、質(zhì)量要求和使用條件同于一般的微生物肥料，主要用于缺鉀地區(qū)。我國農(nóng)業(yè)土壤中的缺鉀問題日趨明顯，而我國鉀素化肥生產(chǎn)能力嚴(yán)重不足，每年需要進(jìn)口。實際上土壤中鉀的總含量并不缺乏，只是速效鉀供應(yīng)不足，研究和開發(fā)利用解鉀微生物，闡明其作用機理是微生物肥料研究和應(yīng)用中的一個重要課題。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供一種利用生物碳吸附，無需外加設(shè)備，而且可以實現(xiàn)分批高密度培養(yǎng)的方法，通過該方法培養(yǎng)硅酸鹽菌體密度可以達(dá)到1×10¹³～1×10¹⁵cfu/mL。現(xiàn)提出如下技術(shù)方案：

一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，所述制備方法以生物碳作為吸附載體，以硅酸鹽細(xì)菌作為出發(fā)菌株，依次經(jīng)過試管擴大培養(yǎng)、液體搖瓶培養(yǎng)和種子罐擴大培養(yǎng)、發(fā)酵培養(yǎng)、包裝工藝制備。

對上述方案的進(jìn)一步改進(jìn)，所使用的生物碳是污泥、動物糞便、動物骨頭、植物根莖和木屑中的任一種；所使用的菌種是硅酸鹽細(xì)菌的任意一種。

上述的一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，其制備方法包括如下步驟：

(1)試管擴大培養(yǎng)：將硅酸鹽細(xì)菌斜面菌種接種于硅酸鹽細(xì)菌試管斜面培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，制得硅酸鹽細(xì)菌試管斜面菌種；

(2)液體搖瓶培養(yǎng)：將步驟(1)所制得的硅酸鹽細(xì)菌試管斜面菌種接種到裝有含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基的搖瓶中，進(jìn)行培養(yǎng)，制得硅酸鹽細(xì)菌液體搖瓶菌種；

(3)種子罐擴大培養(yǎng)：將步驟(2)所制得的硅酸鹽細(xì)菌液體搖瓶菌種接種到含有生物碳的種子罐培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，制成硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種；

(4)液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(3)所制得的硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種接種到含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，并混合均勻，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，制得硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液；

(5)干燥：將步驟(4)制得的硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液經(jīng)過離心、噴霧干燥、包裝制得硅酸鹽細(xì)菌干粉。

對上述方案的進(jìn)一步改進(jìn)，所述制備方法具體如下：

(1)試管擴大培養(yǎng)：接種一環(huán)硅酸鹽細(xì)菌斜面菌種到硅酸鹽細(xì)菌試管斜面培養(yǎng)基中，30～45℃培養(yǎng)2～10天，制得試管斜面菌種，該試管斜面4℃保存?zhèn)溆茫?/p>

(2)液體搖瓶培養(yǎng)：接種一環(huán)步驟(1)所制得的試管斜面菌種接種于裝有20～150mL含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基的三角瓶中，三角瓶在轉(zhuǎn)速為50～200轉(zhuǎn)/分，溫度30～45℃的條件下，搖床培養(yǎng)18-86h，制成硅酸鹽細(xì)菌液體搖瓶菌種；

(3)種子罐擴大培養(yǎng)：將步驟(2)所制得的液體搖瓶菌種接種于含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基中，且所述液體搖瓶菌種與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基按體積比為0.2～10％的接種量接種，在溫度為30～45℃，攪拌轉(zhuǎn)速為50～160轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為0.2～1.8:1的通氣量條件下，培養(yǎng)18～96h，制成硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種；

(4)液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(3)所制得的硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種按體積比為0.2～10％接種量接入含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在溫度30～45℃，攪拌轉(zhuǎn)速為50～160轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為0.2～1.8:1的通氣量條件下，培養(yǎng)48～96小時，制得硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液，該發(fā)酵液菌體濃度為10¹³～10¹⁵cfu/mL；

(5)干燥：將步驟(4)所制得的硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液4000～10000轉(zhuǎn)/分鐘離心10～30分鐘，調(diào)節(jié)菌體濃度為10¹⁴～10¹⁶cfu/mL，進(jìn)風(fēng)溫度110-120℃，進(jìn)樣速度600～800mL/h，霧化壓力0.08～0.2MPa，熱風(fēng)流量20～40M³/h；在此條件下，噴霧干燥后產(chǎn)物活菌量達(dá)10¹⁵～10¹⁷cfu/g，將干燥后的產(chǎn)物進(jìn)行包裝即成成品。

對上述方案的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟(2)中所述含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基是在100～130℃條件下滅菌10～60min制得，且每升含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基中含有蔗糖5～20g，磷酸二氫鈉1～10g，硫酸鎂0.1～2克，碳酸鈣0.1～0.5克，玻璃粉2～8克，生物碳3～30克。

對上述方案的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟(3)中所述含有生物碳的含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基是在100～130℃條件下滅菌10～60min制得，且每升含有生物碳的種子罐培養(yǎng)基中含有蔗糖5～20g，蛋白胨1～5克，磷酸二氫鈉1～10g，硫酸鎂0.1～2克，碳酸鈣0.1～0.5克，玻璃粉2～8克，生物碳3～30克。

對上述方案的進(jìn)一步改進(jìn)，步驟(4)中所述含有生物碳的含有生物碳的發(fā)酵培養(yǎng)基是在100～130℃條件下滅菌10～60min制得，且每升含有生物碳的發(fā)酵培養(yǎng)基中含有甘油5～20g，玉米淀粉3～8克，酵母浸膏3～10克，硫酸鎂0.1～2克，鉬酸鈉0.01～0.05克，碳酸鈣0.1～0.5克，玻璃粉2～8克，生物碳5～50克。

一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌是由上述一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法所制得。

上述方案所培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌用作生物肥料的活菌劑或與其他菌種共同作為生物肥料的活菌劑。

本發(fā)明的有益效果在于：

(1)本發(fā)明把生物吸附與液態(tài)發(fā)酵有機結(jié)合，提高了液體發(fā)酵的菌體密度，在不添加任何設(shè)備和不使用連續(xù)培養(yǎng)和半連續(xù)培養(yǎng)實現(xiàn)了硅酸鹽細(xì)菌的高密度培養(yǎng)。

(2)本發(fā)明所述的一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，不是單純的利用生物碳作為吸附劑，它還利用生物碳固定二氧化碳的作用降低了發(fā)酵液中CO₂的濃度，提高了培養(yǎng)基中的溶解氧濃度提高了菌體密度。

(3)本發(fā)明所述的一種利用生物碳培養(yǎng)得硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，其發(fā)酵液菌體濃度為1×10¹³～1×10¹⁵cfu/mL。所制備的發(fā)酵液可以經(jīng)過離心噴霧干燥，干燥的菌體粉活菌量達(dá)10¹⁵～10¹⁷cfu/g。

附圖說明

圖1為本發(fā)明一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法的制備流程圖。

具體實施方式

為使本發(fā)明實現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體實施方式，進(jìn)一步闡述本發(fā)明。

實施例1

如附圖1所示的一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，其制備步驟如下：

(1)試管擴大培養(yǎng)：接種一環(huán)硅酸鹽細(xì)菌(Bacillus mucilaginosus Krassilnikov AS1.231)斜面菌種到硅酸鹽細(xì)菌試管斜面培養(yǎng)基中，30℃培養(yǎng)10天，制得試管斜面菌種，該試管斜面4℃保存?zhèn)溆?；所述的試管斜面菌種是采用的一般硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基(盛下放,黃為一.硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株釋鉀條件的研究.中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,35(6):673～677)；

(2)液體搖瓶培養(yǎng)：接種一環(huán)步驟(1)所制得的試管斜面菌種接種于裝有20mL含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，三角瓶在轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分，溫度30℃的條件下，搖床培養(yǎng)86h，制成硅酸鹽細(xì)菌液體搖瓶菌種；；所述含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基是在在100℃條件下滅菌60min制得，且每升含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基中含有蔗糖5g，磷酸二氫鈉1g，硫酸鎂0.1克，碳酸鈣0.1克，玻璃粉2克，污泥生物碳3克；

(3)種子罐擴大培養(yǎng)：將步驟(2)所制得的液體搖瓶菌種接種于含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基中，且所述液體搖瓶菌種與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基按體積比為0.2％的接種量接種，在溫度為45℃，攪拌轉(zhuǎn)速為160轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為1.8:1的通氣量條件下，培養(yǎng)18h，制成硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種；所述含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基是在124℃條件下滅菌44min制得，且每升含有生物碳的種子罐培養(yǎng)基中含有蔗糖6g，蛋白胨1克，磷酸二氫鈉10g，硫酸鎂2克，碳酸鈣0.5克，玻璃粉2克，污泥生物碳3克；

(4)液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(3)所制得的硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種按體積比為0.2％接種量接入含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在溫度45℃，攪拌轉(zhuǎn)速為160轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為1.8:1的通氣量條件下，培養(yǎng)48小時，制得硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液，該發(fā)酵液菌體濃度為5×10¹³cfu/mL；所述含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基是在100℃條件下滅菌60min制得，且每升含有生物碳的發(fā)酵培養(yǎng)基中含有甘油20g，玉米淀粉8克，酵母浸膏10克，硫酸鎂2克，鉬酸鈉0.05克，碳酸鈣0.5克，玻璃粉8克，污泥生物碳50克；

(5)干燥：將步驟(4)所制得的硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液4500轉(zhuǎn)/分鐘離心15分鐘，調(diào)節(jié)菌體濃度為10¹⁴cfu/mL，進(jìn)風(fēng)溫度112℃，進(jìn)樣速度620mL/h，霧化壓力0.09MPa，熱風(fēng)流量27M³/h；在此條件下，噴霧干燥后產(chǎn)物活菌量達(dá)10¹⁶cfu/g；

(6)包裝：將步驟(5)進(jìn)行干燥過后的產(chǎn)物進(jìn)行包裝；

(7)成品：包裝后即成成品。

一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌是由上述實施例所述的制備方法制得的。

上述實施例所述的制備方法制得的硅酸鹽細(xì)菌用作生物肥料的活菌劑或與其他菌種共同作為生物肥料的活菌劑。

實施例2

如附圖1所示的一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，其制備步驟如下：

(1)試管擴大培養(yǎng)：接種一環(huán)硅酸鹽細(xì)菌(Bacillus mucilaginosus BNCC111621)斜面菌種到硅酸鹽細(xì)菌試管斜面培養(yǎng)基中，45℃培養(yǎng)2天，制得試管斜面菌種，該試管斜面4℃保存?zhèn)溆?；所述的試管斜面菌種是采用的一般硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基(盛下放,黃為一.硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株釋鉀條件的研究.中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,35(6):673～677)；

(2)液體搖瓶培養(yǎng)：接種一環(huán)步驟(1)所制得的試管斜面菌種接種于裝有150mL含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，三角瓶在轉(zhuǎn)速為200轉(zhuǎn)/分，溫度45℃的條件下，搖床培養(yǎng)18h，制成硅酸鹽細(xì)菌液體搖瓶菌種；；所述含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基是在在130℃條件下滅菌10min制得，且每升含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基中含有蔗糖20g，磷酸二氫鈉10g，硫酸鎂2克，碳酸鈣0.5克，玻璃粉8克，動物糞便生物碳30克；

(3)種子罐擴大培養(yǎng)：將步驟(2)所制得的液體搖瓶菌種接種于含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基中，且所述液體搖瓶菌種與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基按體積比為10％的接種量接種，在溫度為30℃，攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為0.2:1的通氣量條件下，培養(yǎng)96h，制成硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種；所述含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基是在103℃條件下滅菌60min制得，且每升含有生物碳的種子罐培養(yǎng)基中含有蔗糖17g，蛋白胨4.5克，磷酸二氫鈉1g，硫酸鎂0.1克，碳酸鈣0.5克，玻璃粉8克，動物糞便生物碳27.8克；

(4)液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(3)所制得的硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種按體積比為10％接種量接入含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在溫度30℃，攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為0.2:1的通氣量條件下，培養(yǎng)96小時，制得硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液，該發(fā)酵液菌體濃度為1×10¹⁵cfu/mL；所述含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基是在130℃條件下滅菌10min制得，且每升含有生物碳的發(fā)酵培養(yǎng)基中含有甘油5g，玉米淀粉3克，酵母浸膏3克，硫酸鎂0.1克，鉬酸鈉0.015克，碳酸鈣0.1克，玻璃粉2克，動物糞便生物碳5克；

(5)將步驟(4)所制得的硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液4000～10000轉(zhuǎn)/分鐘離心10～30分鐘，調(diào)節(jié)菌體濃度為10¹⁴～10¹⁶cfu/mL，進(jìn)風(fēng)溫度110-120℃，進(jìn)樣速度600～800mL/h，霧化壓力0.08～0.2MPa，熱風(fēng)流量20～40M³/h；在此條件下，噴霧干燥后產(chǎn)物活菌量達(dá)10¹⁵～10¹⁷cfu/g；

(6)包裝：將步驟(5)進(jìn)行干燥過后的產(chǎn)物進(jìn)行包裝；

(7)成品：包裝后即成成品。

一種利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌是由上述的利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌的方法所制得。

上述方案所培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌用作生物肥料的活菌劑或與其他菌種共同作為生物肥料的活菌劑。

實施例3

如附圖1所示的一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，其制備步驟如下：

(1)試管擴大培養(yǎng)：接種一環(huán)硅酸鹽細(xì)菌(Bacillus mucilaginosus BNCC183950)斜面菌種到硅酸鹽細(xì)菌試管斜面培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)6天，制得試管斜面菌種，該試管斜面4℃保存?zhèn)溆?；所述的試管斜面菌種是采用的一般硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基(盛下放,黃為一.硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株釋鉀條件的研究.中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,35(6):673～677)；

(2)液體搖瓶培養(yǎng)：接種一環(huán)步驟(1)所制得的試管斜面菌種接種于裝有80mL含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，三角瓶在轉(zhuǎn)速為125轉(zhuǎn)/分，溫度37℃的條件下，搖床培養(yǎng)52h，制成硅酸鹽細(xì)菌液體搖瓶菌種；所述含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基是在在120℃條件下滅菌30min制得，且每升含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基中含有蔗糖13g，磷酸二氫鈉6g，硫酸鎂1克，碳酸鈣0.3克，玻璃粉5克，動物骨頭生物碳16克；

(3)種子罐擴大培養(yǎng)：將步驟(2)所制得的液體搖瓶菌種接種于含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基中，且所述液體搖瓶菌種與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基按體積比為5％的接種量接種，在溫度為37℃，攪拌轉(zhuǎn)速為110轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為1:1的通氣量條件下，培養(yǎng)56h，制成硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種；所述含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基是在118℃條件下滅菌30min制得，且每升含有生物碳的種子罐培養(yǎng)基中含有蔗糖10g，蛋白胨3克，磷酸二氫鈉5g，硫酸鎂1克，碳酸鈣0.8克，玻璃粉4克，動物骨頭生物碳18克；

(4)液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(3)所制得的硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種按體積比為5％接種量接入含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在溫度為37℃，攪拌轉(zhuǎn)速為110轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為1:1的通氣量條件下，培養(yǎng)72小時，制得硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液，該發(fā)酵液菌體濃度為6×10¹⁴cfu/mL；所述含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基是在120℃條件下滅菌30min制得，且每升含有生物碳的發(fā)酵培養(yǎng)基中含有甘油12g，玉米淀粉5克，酵母浸膏6克，硫酸鎂1克，鉬酸鈉0.03克，碳酸鈣0.3克，玻璃粉5克，動物骨頭生物碳26克；

(5)將步驟(4)所制得的硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液8500轉(zhuǎn)/分鐘離心27分鐘，調(diào)節(jié)菌體濃度為10¹⁶cfu/mL，進(jìn)風(fēng)溫度118℃，進(jìn)樣速度750mL/h，霧化壓力0.16MPa，熱風(fēng)流量37M³/h；在此條件下，噴霧干燥后產(chǎn)物活菌量達(dá)10¹⁷cfu/g；

(6)包裝：將步驟(5)進(jìn)行干燥過后的產(chǎn)物進(jìn)行包裝；

(7)成品：包裝后即成成品。

一種利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌是由上述的利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌的方法所制得。

上述方案所培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌用作生物肥料的活菌劑或與其他菌種共同作為生物肥料的活菌劑。

實施例4

如附圖1所示的一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，其制備步驟如下：

(1)試管擴大培養(yǎng)：接種一環(huán)硅酸鹽細(xì)菌(Bacillus mucilaginosus Krassilnikov AS1.231)斜面菌種到硅酸鹽細(xì)菌試管斜面培養(yǎng)基中，34℃培養(yǎng)8天，制得試管斜面菌種，該試管斜面4℃保存?zhèn)溆?；所述的試管斜面菌種是采用的一般硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基(盛下放,黃為一.硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株釋鉀條件的研究.中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,35(6):673～677)；

(2)液體搖瓶培養(yǎng)：接種一環(huán)步驟(1)所制得的試管斜面菌種接種于裝有130mL含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，三角瓶在轉(zhuǎn)速為180轉(zhuǎn)/分，溫度40℃的條件下，搖床培養(yǎng)25h，制成硅酸鹽細(xì)菌液體搖瓶菌種；；所述含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基是在在125℃條件下滅菌15min制得，且每升含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基中含有蔗糖18g，磷酸二氫鈉8g，硫酸鎂1.6克，碳酸鈣0.4克，玻璃粉7克，植物根莖生物碳28克；

(3)種子罐擴大培養(yǎng)：將步驟(2)所制得的液體搖瓶菌種接種于含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基中，且所述液體搖瓶菌種與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基按體積比為0.2％的接種量接種，在溫度為30℃，攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為0.2:1的通氣量條件下，培養(yǎng)18h，制成硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種；所述含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基是在110℃條件下滅菌50min制得，且每升含有生物碳的種子罐培養(yǎng)基中含有蔗糖18g，蛋白胨2克，磷酸二氫鈉1g，硫酸鎂2克，碳酸鈣0.5克，玻璃粉7克，植物根莖生物碳13克；

(4)液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(3)所制得的硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種按體積比為0.2％的接種量接入含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在溫度為30℃，攪拌轉(zhuǎn)速為50轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為0.2:1的通氣量條件下，培養(yǎng)48小時，制得硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液，該發(fā)酵液菌體濃度為6×10¹³cfu/mL；所述含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基是在120℃條件下滅菌30min制得，且每升含有生物碳的發(fā)酵培養(yǎng)基中含有甘油5.2g，玉米淀粉3.6克，酵母浸膏3.6克，硫酸鎂0.2克，鉬酸鈉0.01克，碳酸鈣0.1克，玻璃粉2.8克，植物根莖生物碳7克；

(5)將步驟(4)所制得的硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液7000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘，調(diào)節(jié)菌體濃度為10¹⁶cfu/mL，進(jìn)風(fēng)溫度120℃，進(jìn)樣速度800mL/h，霧化壓力0.08MPa，熱風(fēng)流量40M³/h；在此條件下，噴霧干燥后產(chǎn)物活菌量達(dá)10¹⁵cfu/g；

(6)包裝：將步驟(5)進(jìn)行干燥過后的產(chǎn)物進(jìn)行包裝；

(7)成品：包裝后即成成品。

一種利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌是由上述的利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌的方法所制得。

上述方案所培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌用作生物肥料的活菌劑或與其他菌種共同作為生物肥料的活菌劑。

實施例5

如附圖1所示的一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，其制備步驟如下：

(1)試管擴大培養(yǎng)：接種一環(huán)硅酸鹽細(xì)菌(Bacillus mucilaginosus BNCC111621)斜面菌種到硅酸鹽細(xì)菌試管斜面培養(yǎng)基中，42℃培養(yǎng)4天，制得試管斜面菌種，該試管斜面4℃保存?zhèn)溆?；所述的試管斜面菌種是采用的一般硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基(盛下放,黃為一.硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株釋鉀條件的研究.中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,35(6):673～677)；

(2)液體搖瓶培養(yǎng)：接種一環(huán)步驟(1)所制得的試管斜面菌種接種于裝有35mL含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，三角瓶在轉(zhuǎn)速為65轉(zhuǎn)/分，溫度33℃的條件下，搖床培養(yǎng)24h，制成硅酸鹽細(xì)菌液體搖瓶菌種；所述含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基是在在105℃條件下滅菌50min制得，且每升含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基中含有蔗糖7g，磷酸二氫鈉2g，硫酸鎂0.5克，碳酸鈣0.2克，玻璃粉3克，木屑生物碳5克；

(3)種子罐擴大培養(yǎng)：將步驟(2)所制得的液體搖瓶菌種接種于含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基中，且所述液體搖瓶菌種與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基按體積比為10％的接種量接種，在溫度為45℃，攪拌轉(zhuǎn)速為160轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為1.8:1的通氣量條件下，培養(yǎng)96h，制成硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種；所述含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基是在105℃條件下滅菌50min制得，且每升含有生物碳的種子罐培養(yǎng)基中含有蔗糖8g，蛋白胨3克，磷酸二氫鈉3g，硫酸鎂0.3克，碳酸鈣0.1克，玻璃粉8克，木屑生物碳20克；

(4)液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(3)所制得的硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種按體積比為10％的接種量接入含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在溫度為45℃，攪拌轉(zhuǎn)速為160轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為1.8:1的通氣量條件下，培養(yǎng)96h，制得硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液，該發(fā)酵液菌體濃度為8×10¹⁴cfu/mL；所述含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基是在120℃條件下滅菌30min制得，且每升含有生物碳的發(fā)酵培養(yǎng)基中含有甘油19g，玉米淀粉7克，酵母浸膏9.6克，硫酸鎂1.8克，鉬酸鈉0.05克，碳酸鈣0.5克，玻璃粉7.8克，木屑生物碳49克；

(5)將步驟(4)所制得的硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液6000轉(zhuǎn)/分鐘離心23分鐘，調(diào)節(jié)菌體濃度為10¹⁶cfu/mL，進(jìn)風(fēng)溫度120℃，進(jìn)樣速度600mL/h，霧化壓力0.08MPa，熱風(fēng)流量36M³/h；在此條件下，噴霧干燥后產(chǎn)物活菌量達(dá)10¹⁷cfu/g；

(6)包裝：將步驟(5)進(jìn)行干燥過后的產(chǎn)物進(jìn)行包裝；

(7)成品：包裝后即成成品。

一種利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌是由上述的利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌的方法所制得。

上述方案所培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌用作生物肥料的活菌劑或與其他菌種共同作為生物肥料的活菌劑。

實施例6

如附圖1所示的一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，其制備步驟如下：

(1)試管擴大培養(yǎng)：接種一環(huán)硅酸鹽細(xì)菌(Bacillus mucilaginosus BNCC183950)斜面菌種到硅酸鹽細(xì)菌試管斜面培養(yǎng)基中，45℃培養(yǎng)4天，制得試管斜面菌種，該試管斜面4℃保存?zhèn)溆茫凰龅脑嚬苄泵婢N是采用的一般硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基(盛下放,黃為一.硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株釋鉀條件的研究.中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,35(6):673～677)；

(2)液體搖瓶培養(yǎng)：接種一環(huán)步驟(1)所制得的試管斜面菌種接種于裝有110mL含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，三角瓶在轉(zhuǎn)速為150轉(zhuǎn)/分，溫度40℃的條件下，搖床培養(yǎng)29h，制成硅酸鹽細(xì)菌液體搖瓶菌種；所述含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基是在在110℃條件下滅菌40min制得，且每升含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基中含有蔗糖7g，磷酸二氫鈉3g，硫酸鎂1.4克，碳酸鈣0.4克，玻璃粉6克，植物根莖生物碳19克；

(3)種子罐擴大培養(yǎng)：將步驟(2)所制得的液體搖瓶菌種接種于含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基中，且所述液體搖瓶菌種與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基按體積比為8％的接種量接種，在溫度為42℃，攪拌轉(zhuǎn)速為120轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為1.4:1的通氣量條件下，培養(yǎng)84h，制成硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種；所述含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基是在125℃條件下滅菌15min制得，且每升含有生物碳的種子罐培養(yǎng)基中含有蔗糖8g，蛋白胨2克，磷酸二氫鈉3g，硫酸鎂0.5克，碳酸鈣0.5克，玻璃粉7克，植物根莖生物碳26克；

(4)液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(3)所制得的硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種按體積比為8％的接種量接入含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在溫度為42℃，攪拌轉(zhuǎn)速為120轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為1.4:1的通氣量條件下，培養(yǎng)84h，制得硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液，該發(fā)酵液菌體濃度為3×10¹⁴cfu/mL；所述含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基是在100℃條件下滅菌10min制得，且每升含有生物碳的發(fā)酵培養(yǎng)基中含有甘油5g，玉米淀粉3克，酵母浸膏3克，硫酸鎂0.1克，鉬酸鈉0.03克，碳酸鈣0.3克，玻璃粉5克，植物根莖生物碳30克；

(5)將步驟(4)所制得的硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液10000轉(zhuǎn)/分鐘離心10分鐘，調(diào)節(jié)菌體濃度為10¹⁴cfu/mL，進(jìn)風(fēng)溫度120℃，進(jìn)樣速度800mL/h，霧化壓力0.2MPa，熱風(fēng)流量40M³/h；在此條件下，噴霧干燥后產(chǎn)物活菌量達(dá)10¹⁵cfu/g；

(6)包裝：將步驟(5)進(jìn)行干燥過后的產(chǎn)物進(jìn)行包裝；

(7)成品：包裝后即成成品。

一種利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌是由上述的利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌的方法所制得。

上述方案所培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌用作生物肥料的活菌劑或與其他菌種共同作為生物肥料的活菌劑。

實施例7

如附圖1所示的一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，其制備步驟如下：

(1)試管擴大培養(yǎng)：接種一環(huán)硅酸鹽細(xì)菌(Bacillus mucilaginosus Krassilnikov AS1.231)斜面菌種到硅酸鹽細(xì)菌試管斜面培養(yǎng)基中，32℃培養(yǎng)9天，制得試管斜面菌種，該試管斜面4℃保存?zhèn)溆茫凰龅脑嚬苄泵婢N是采用的一般硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基(盛下放,黃為一.硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株釋鉀條件的研究.中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,35(6):673～677)；

(2)液體搖瓶培養(yǎng)：接種一環(huán)步驟(1)所制得的試管斜面菌種接種于裝有100mL含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，三角瓶在轉(zhuǎn)速為160轉(zhuǎn)/分，溫度34℃的條件下，搖床培養(yǎng)58h，制成硅酸鹽細(xì)菌液體搖瓶菌種；所述含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基是在在125℃條件下滅菌40min制得，且每升含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基中含有蔗糖16g，磷酸二氫鈉4g，硫酸鎂0.6克，碳酸鈣0.1克，玻璃粉8克，動物骨頭生物碳28克；

(3)種子罐擴大培養(yǎng)：將步驟(2)所制得的液體搖瓶菌種接種于含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基中，且所述液體搖瓶菌種與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基按體積比為3％的接種量接種，在溫度為35℃，攪拌轉(zhuǎn)速為65轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為0.5:1的通氣量條件下，培養(yǎng)35h，制成硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種；所述含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基是在115℃條件下滅菌30min制得，且每升含有生物碳的種子罐培養(yǎng)基中含有蔗糖12.5g，蛋白胨3克，磷酸二氫鈉6g，硫酸鎂1克，碳酸鈣0.3克，玻璃粉5克，動物骨頭生物碳16克；

(4)液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(3)所制得的硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種3％的接種量接入含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在溫度為35℃，攪拌轉(zhuǎn)速為65轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為0.5:1的通氣量條件下，培養(yǎng)54h，制得硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液，該發(fā)酵液菌體濃度為7×10¹³cfu/mL；所述含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基是在130℃條件下滅菌60min制得，且每升含有生物碳的發(fā)酵培養(yǎng)基中含有甘油18g，玉米淀粉7.6克，酵母浸膏9.6克，硫酸鎂2克，鉬酸鈉0.06克，碳酸鈣0.6克，玻璃粉5克，動物骨頭生物碳26克；

(5)將步驟(4)所制得的硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液4000轉(zhuǎn)/分鐘離心30分鐘，調(diào)節(jié)菌體濃度為10¹⁶cfu/mL，進(jìn)風(fēng)溫度110℃，進(jìn)樣速度600mL/h，霧化壓力0.08MPa，熱風(fēng)流量20M³/h；在此條件下，噴霧干燥后產(chǎn)物活菌量達(dá)10¹⁷cfu/g；

(6)包裝：將步驟(5)進(jìn)行干燥過后的產(chǎn)物進(jìn)行包裝；

(7)成品：包裝后即成成品。

一種利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌是由上述的利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌的方法所制得。

上述方案所培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌用作生物肥料的活菌劑或與其他菌種共同作為生物肥料的活菌劑。

實施例8

如附圖1所示的一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，其制備步驟如下：

(1)試管擴大培養(yǎng)：接種一環(huán)硅酸鹽細(xì)菌(Bacillus mucilaginosus BNCC111621)斜面菌種到硅酸鹽細(xì)菌試管斜面培養(yǎng)基中，39℃培養(yǎng)4天，制得試管斜面菌種，該試管斜面4℃保存?zhèn)溆?；所述的試管斜面菌種是采用的一般硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基(盛下放,黃為一.硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株釋鉀條件的研究.中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,35(6):673～677)；

(2)液體搖瓶培養(yǎng)：接種一環(huán)步驟(1)所制得的試管斜面菌種接種于裝有48mL含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，三角瓶在轉(zhuǎn)速為110轉(zhuǎn)/分，溫度36℃的條件下，搖床培養(yǎng)57h，制成硅酸鹽細(xì)菌液體搖瓶菌種；；所述含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基是在在108℃條件下滅菌50min制得，且每升含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基中含有蔗糖7g，磷酸二氫鈉10g，硫酸鎂1.8克，碳酸鈣0.1克，玻璃粉2克，污泥生物碳6克；

(3)種子罐擴大培養(yǎng)：將步驟(2)所制得的液體搖瓶菌種接種于含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基中，且所述液體搖瓶菌種與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基按體積比為6％的接種量接種，在溫度為41℃，攪拌轉(zhuǎn)速為110轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為0.4的通氣量條件下，培養(yǎng)72h，制成硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種；所述含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基是在130℃條件下滅菌10min制得，且每升含有生物碳的種子罐培養(yǎng)基中含有蔗糖20g，蛋白胨5克，磷酸二氫鈉10g，硫酸鎂2克，碳酸鈣0.5克，玻璃粉8克，污泥生物碳30克；

(4)液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(3)所制得的硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種按體積比為6％的接種量接入含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在溫度為41℃，攪拌轉(zhuǎn)速為110轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為0.4的通氣量條件下，培養(yǎng)72小時，制得硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液，該發(fā)酵液菌體濃度為2×1014cfu/mL；所述含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基是在100℃條件下滅菌60min制得，且每升發(fā)酵培養(yǎng)基中含有甘油5.4g，玉米淀粉7.5克，酵母浸膏3.4克，硫酸鎂1.6克，鉬酸鈉0.06克，碳酸鈣0.6克，玻璃粉5克，污泥生物碳26克；

(5)將步驟(4)所制得的硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液7000轉(zhuǎn)/分鐘離心20分鐘，調(diào)節(jié)菌體濃度為10¹⁵cfu/mL，進(jìn)風(fēng)溫度115℃，進(jìn)樣速度700mL/h，霧化壓力0.13MPa，熱風(fēng)流量30M³/h；在此條件下，噴霧干燥后產(chǎn)物活菌量達(dá)10¹⁶cfu/g；

(6)包裝：將步驟(5)進(jìn)行干燥過后的產(chǎn)物進(jìn)行包裝；

(7)成品：包裝后即成成品。

一種利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌是由上述的利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌的方法所制得。

上述方案所培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌用作生物肥料的活菌劑或與其他菌種共同作為生物肥料的活菌劑。

實施例9

如附圖1所示的一種利用生物碳培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌的制備方法，其制備步驟如下：

(1)試管擴大培養(yǎng)：接種一環(huán)硅酸鹽細(xì)菌(Bacillus mucilaginosus BNCC183950)斜面菌種到硅酸鹽細(xì)菌試管斜面培養(yǎng)基中，35℃培養(yǎng)9天，制得試管斜面菌種，該試管斜面4℃保存?zhèn)溆茫凰龅脑嚬苄泵婢N是采用的一般硅酸鹽細(xì)菌培養(yǎng)基(盛下放,黃為一.硅酸鹽細(xì)菌NBT菌株釋鉀條件的研究.中國農(nóng)業(yè)科學(xué),2002,35(6):673～677)；

(2)液體搖瓶培養(yǎng)：接種一環(huán)步驟(1)所制得的試管斜面菌種接種于裝有90mL含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基的250mL三角瓶中，三角瓶在轉(zhuǎn)速為100轉(zhuǎn)/分，溫度36℃的條件下，搖床培養(yǎng)27h，制成硅酸鹽細(xì)菌液體搖瓶菌種；；所述含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基是在在120℃條件下滅菌30min制得，且每升含有生物碳的液體搖瓶培養(yǎng)基中含有蔗糖16g，磷酸二氫鈉7g，硫酸鎂1.6克，碳酸鈣0.45克，玻璃粉4克，動物糞便生物碳18克；

(3)種子罐擴大培養(yǎng)：將步驟(2)所制得的液體搖瓶菌種接種于含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基中，且所述液體搖瓶菌種與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基按體積比為6％的接種量接種，在溫度為34℃，攪拌轉(zhuǎn)速為62轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為1.3:1的通氣量條件下，培養(yǎng)76h，制成硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種；所述含有生物碳的種子罐擴大培養(yǎng)基是在100℃條件下滅菌60min制得，且每升含有生物碳的種子罐培養(yǎng)基中含有蔗糖5g，蛋白胨1克，磷酸二氫鈉1g，硫酸鎂0.1克，碳酸鈣0.1克，玻璃粉2克，動物糞便生物碳3克；

(4)液體發(fā)酵培養(yǎng)：將步驟(3)所制得的硅酸鹽細(xì)菌種子罐菌種按體積比為6％的接種量接入含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，在溫度為34℃，攪拌轉(zhuǎn)速為62轉(zhuǎn)/分，在每分鐘通入氣體的體積與種子罐擴大培養(yǎng)基體積比為1.3:1的通氣量條件下，培養(yǎng)80h，制得硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液，該發(fā)酵液菌體濃度為9×10¹³cfu/mL；所述含有生物碳的液體發(fā)酵培養(yǎng)基是在130℃條件下滅菌10min制得，且每升含有生物碳的發(fā)酵培養(yǎng)基中含有甘油18g，玉米淀粉3.8克，酵母浸膏9.6克，硫酸鎂0.2克，鉬酸鈉0.06克，碳酸鈣0.6克，玻璃粉5克，動物糞便生物碳26克；

(5)將步驟(4)所制得的硅酸鹽細(xì)菌發(fā)酵液9000轉(zhuǎn)/分鐘離心13分鐘，調(diào)節(jié)菌體濃度為10¹⁴cfu/mL，進(jìn)風(fēng)溫度112℃，進(jìn)樣速度670mL/h，霧化壓力0.12MPa，熱風(fēng)流量25M/h；在此條件下，噴霧干燥后產(chǎn)物活菌量達(dá)10¹⁵cfu/g；

(6)包裝：將步驟(5)進(jìn)行干燥過后的產(chǎn)物進(jìn)行包裝；

(7)成品：包裝后即成成品。

一種利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌是由上述的利用生物碳吸附性高密度培養(yǎng)硅酸鹽細(xì)菌的方法所制得。

上述方案所培養(yǎng)的硅酸鹽細(xì)菌用作生物肥料的活菌劑或與其他菌種共同作為生物肥料的活菌劑。

本技術(shù)領(lǐng)域中的普通技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)認(rèn)識到，以上的實施例僅是用來說明本發(fā)明，而并非用作為對本發(fā)明的限定，只要在本發(fā)明的實質(zhì)精神范圍內(nèi)，對以上所述實施例的變化、變型都將落在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍內(nèi)。