1.一種基于illumina二代測序平臺的DNA文庫構(gòu)建試劑盒，其特征在于，在打斷DNA樣品末端修復(fù)反應(yīng)中采用3-4酶的修飾酶系統(tǒng)進(jìn)行末端快速修復(fù)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述illumina二代測序平臺的DNA文庫構(gòu)建試劑盒，其特征在于，所述DNA樣品末端修復(fù)反應(yīng)結(jié)束后不經(jīng)過純化，直接加入鏈接buffer及T4DNA鏈接酶進(jìn)行接頭鏈接。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述illumina二代測序平臺的DNA文庫構(gòu)建試劑盒，其特征在于，所述修飾酶為T4DNA聚合酶、T4多聚核苷酸激酶、Taq DNA聚合酶的組合；或者是T4DNA聚合酶、T4多聚核苷酸激酶、Klenow片段(3′→5′exo-)的組合；或者是T4DNA聚合酶、T4多聚核苷酸激酶、Taq DNA聚合酶、Klenow片段(3′→5′exo-)的組合。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述illumina二代測序平臺的DNA文庫構(gòu)建試劑盒，其特征在于，所述修飾酶各組分濃度分別是2U-5U T4DNA聚合酶、5U-15U T4多聚核苷酸激酶、1U-5U Taq DNA聚合酶、1U-5U Klenow片段(3′→5′exo-)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述illumina二代測序平臺的DNA文庫構(gòu)建試劑盒，其特征在于，修飾溫度第一階段為20℃-25℃，第二階段為65℃-75℃。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述illumina二代測序平臺的DNA文庫構(gòu)建試劑盒，其特征在于，修飾時間第一階段為5分鐘-40分鐘，第二階段為5分鐘-40分鐘。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述illumina二代測序平臺的DNA文庫構(gòu)建試劑盒，其特征在于，所述DNA樣品末端修復(fù)反應(yīng)所用的修飾bufer含有2％-8％的PEG6000。
8.根據(jù)權(quán)利要求2所述illumina二代測序平臺的DNA文庫構(gòu)建試劑盒，其特征在于，所述鏈接bufer含有2％-8％的PEG6000。
9.一種基于illumina二代測序平臺的超快速DNA文庫構(gòu)建方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)采用Covaris超聲打斷系統(tǒng)將樣品基因組DNA打斷，樣本要求：1ng-1μg打斷的雙鏈DNA，溶于EB(10mM Tris-HCl pH 8.0)或去離子水中；DNA純度要求：OD260/OD280＝1.8～2.0；
(2)將步驟1打斷的DNA片段用多重DNA末端修復(fù)試劑進(jìn)行DNA末端修復(fù)；
(3)向步驟2修復(fù)試劑的修復(fù)反應(yīng)液中加入文庫接頭及鏈接試劑進(jìn)行接頭鏈接；
(4)DNA片段的選擇性回收：采用PCR產(chǎn)物分離和純化試劑，包括在PCR反應(yīng)液條件下AMPure XP磁珠與PCR產(chǎn)物的結(jié)合，分離出DNA產(chǎn)物，然后分別經(jīng)過80％乙醇漂洗、EB或去離子水洗脫得到純化的DNA片段；
(5)PCR擴(kuò)增：采用多重PCR引物和多重PCR擴(kuò)增反應(yīng)試劑進(jìn)行PCR擴(kuò)增。
(6)PCR產(chǎn)物的純化：采用PCR產(chǎn)物分離和純化試劑，包括在PCR反應(yīng)液條件下AMPure XP磁珠與PCR產(chǎn)物的結(jié)合，而分離出DNA產(chǎn)物，然后分別經(jīng)過80％乙醇漂洗、EB或去離子水洗脫得到純化的DNA樣本；
(7)文庫質(zhì)量檢測：通過Real-time PCR方法或使用熒光染料法對DNA文庫進(jìn)行定量。用瓊脂糖凝膠電泳或Agilent 2100Bioanalyzer或Fragment Analyzer全自動毛細(xì)管電泳系統(tǒng)檢測DNA文庫中的片段分布范圍。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述基于illumina二代測序平臺的超快速DNA文庫構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟2中所用的修復(fù)試劑為：T4DNA聚合酶，T4多聚核苷酸激酶，Taq DNA聚合酶，Klenow片段(3′→5′exo-)，ATP，dATP，dCTP，dTTP，dGTP，Enhancer，10x T4DNA連接酶反應(yīng)緩沖液，修飾條件為22℃10分鐘，72度10分鐘；所述步驟3中文庫接頭Adapter濃度為15μM，若起始DNA樣本量少于100ng，Adapter濃度為1.5μM，所述鏈接試劑為ATP，Enhancer，10x T4DNA連接酶反應(yīng)緩沖液，鏈接溫度為20℃溫浴15min；所述步驟5中PCR擴(kuò)增反應(yīng)試劑為ExHiFi Reaction Buffer，ExHiFi Hot Start DNA Pol，DMSO，Enhancer，dATP，dCTP，dTTP，dGTP；引物為Index primer，Univesial primer。