本發(fā)明屬于它勃寧的提取工藝
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種從馬鈴果中提取它勃寧的方法。
背景技術(shù)：
：非洲馬鈴果（VoacangaafricanaStapf）為夾竹桃科喬木植物，又名非洲伏康樹，其樹皮為淺灰棕色，分枝具皮孔，葉柄短或無；葉片呈倒卵狀長圓形或倒卵狀橢圓形，先端鈍或銳尖，背面的兩面無毛或短柔毛。非洲馬鈴果主要分布于非洲，在中國的華南植物園、海南熱帶經(jīng)濟植物園和西雙版納熱帶植物園已經(jīng)引種馴化成功。非洲馬鈴果中因含有生物堿、黃酮、蒽醌、強心苷、皂素、淀粉、單寧等物質(zhì)，因此具有抗菌活性，抗氧化性和抗炎、抗?jié)儭⒅禄?、降壓、抗腫瘤、降血糖、利尿等作用。非洲馬鈴果中生物堿成分主要有伊波加因堿、它勃寧、伏康京堿等，具有較高的藥用價值。其中，它勃寧是一種很好的藥材，有降壓、抗腫瘤、降血糖和利尿作用以及用于治療中風(fēng)后遺癥、缺血性高血壓腦病和腦血管病引起的抑郁、焦慮不安和情緒不穩(wěn)等疾病，適用于早衰性腦退化的癥狀消除，如眩暈、頭疼記憶力衰退等，同時也是合成抗癌藥物長春胺和長春西汀的重要原料。然而通過現(xiàn)有的提取方法提取它勃寧，存在純度低、收率低等問題。技術(shù)實現(xiàn)要素：針對現(xiàn)有技術(shù)中的上述不足，本發(fā)明提供一種從馬鈴果中提取它勃寧的方法，可有效解決現(xiàn)有提取方法中存在的純度低、收率低等問題。為解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為：一種從馬鈴果中提取它勃寧的方法，包括以下步驟：（一）提?。喝●R鈴果種子，粉碎，過20-40目篩，得粉末，向粉末中加入4~8倍粉末重量的50%~95%乙醇，超聲提取0.5~1小時，過濾，得第一濾液和第一濾渣；向第一濾渣中加入4~8倍濾渣重量的50%~95%乙醇，超聲提取0.5~1小時，過濾，得第二濾渣和第二濾液；向第二濾渣中加入4~8倍濾渣重量的50%~95%乙醇，超聲提取0.5~1小時，過濾，得第三濾液和第三濾渣；收集合并第一濾液、第二濾液和第三濾液，減壓濃縮，得到乙醇提取物；（二）萃取：向乙醇提取物中加水溶解，然后用有機溶劑萃取3~5次，每次3~5h，收集有機萃取液，減壓濃縮，得有機萃取物；（三）上柱：將步驟（二）中所得的有機萃取物過大孔樹脂，以20%~80%乙醇作為洗脫劑進行沖洗，減壓濃縮，得乙醇洗脫物；（四）酸化：向步驟（三）中所得的乙醇洗脫物中加入pH值為2~4的酸萃取，過濾，收集酸水萃取液；（五）梯度萃取分離：向步驟（四）所得的酸水萃取液中呈梯度加入堿液，使萃取液以1為梯度在pH值為8~11的范圍內(nèi)增大，向所述各梯度的萃取液中分別加入氯仿進行萃取，收集各梯度萃取液，減壓濃縮，凍干，即得它勃寧。進一步地，步驟（二）中的有機溶劑為石油醚、乙酸乙酯、氯仿、甲醇和正丁醇中的一種或多種。進一步地，步驟（二）中的有機溶劑為石油醚和乙酸乙酯（V:V=1:1）的混合物。進一步地，步驟（三）中洗脫劑的洗脫梯度依次為80%乙醇、60%乙醇、40%乙醇和20%乙醇。進一步地，步驟（三）中的大孔樹脂為HPD-100大孔樹脂。進一步地，步驟（四）中的酸為醋酸、甲酸、鹽酸或硫酸。進一步地，步驟（五）中的堿液為氨水、氫氧化鈉溶液或碳酸鈉溶液。本發(fā)明提供的從馬鈴果中提取它勃寧的方法，具有以下益效果：（1）步驟（一）中在超聲條件下利用乙醇進行提取，超聲提取具有提取率高、提取速度快等優(yōu)點，乙醇在超聲條件下可完全提取馬鈴果材料中的親水性和親脂性的化合物；（2）步驟（二）中采用石油醚和乙酸乙酯（V:V=1:1）的混合物作為萃取劑，可使馬鈴果中的它勃寧最大程度的萃取出來，提升產(chǎn)品的收率；（3）步驟（五）采用梯度萃取分離，盡可能的將酸萃取液中的它勃寧萃取出來，達到提升它勃寧純度和收率的目的。具體實施方式下面對本發(fā)明的具體實施方式進行描述，以便于本
技術(shù)領(lǐng)域：
的技術(shù)人員理解本發(fā)明，但應(yīng)該清楚，本發(fā)明不限于具體實施方式的范圍，對本
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來講，只要各種變化在所附的權(quán)利要求限定和確定的本發(fā)明的精神和范圍內(nèi)，這些變化是顯而易見的，一切利用本發(fā)明構(gòu)思的發(fā)明創(chuàng)造均在保護之列。實施例1一種從馬鈴果中提取它勃寧的方法，包括以下步驟：（一）提?。喝?0kg馬鈴果種子粉碎，過40目篩網(wǎng)，得粉末，向粉末中加入6倍粉末重量的95%乙醇，超聲提取0.5小時，過濾，得到第一濾液和第一濾渣；向第一濾渣中加入6倍濾渣重量的95%乙醇，超聲提取0.5小時，過濾，得到第二濾渣和第二濾液；向第二濾渣中加入6倍濾渣重量的95%乙醇，超聲提取0.5小時，過濾，得到第三濾液和第三濾渣；收集合并第一濾液、第二濾液和第三濾液，減壓濃縮，得到乙醇提取物；（二）萃?。合蛞掖继崛∥镏屑铀芙?，用3倍體積的石油醚萃取5次，每次3h，石油醚萃取液為上層，下層為水層，分離石油醚萃取層與水層，得到石油醚萃取層，減壓濃縮，得石油醚萃取物；（三）上柱：將步驟（二）中所得的石油醚萃取物過HPD-100大孔樹脂，采用乙醇為洗脫劑，按照80%乙醇、60%乙醇、40%乙醇和20%乙醇的梯度對大孔樹脂進行洗脫，收集80%~20%乙醇洗脫液，減壓濃縮，得乙醇洗脫物；（四）酸化：向步驟（三）中所得的乙醇洗脫物中加入pH值為2的硫酸，萃取，過濾，收集硫酸萃取液；（五）梯度萃取分離：向步驟（四）所得的硫酸萃取液中加入氨水，使萃取液以1為梯度在pH值為8~11的范圍內(nèi)增大，向所述各梯度的萃取液中加入氯仿進行萃取，收集各梯度的氯仿萃取液，減壓濃縮，利用凍干機凍干，得到它勃寧粉末305g，收率為3.05%，純度為99.2%。實施例2一種從馬鈴果中提取它勃寧的方法，包括以下工藝步驟：（一）提取：取10kg馬鈴果種子粉碎，過40目篩網(wǎng)，得粉末，向粉末中加入4倍粉末重量的85%乙醇，超聲提取0.7小時，過濾，得到第一濾液和第一濾渣；向第一濾渣中加入4倍濾渣重量的85%乙醇，超聲提取0.7小時，過濾，得到第二濾渣和第二濾液；向第二濾渣中加入4倍濾渣重量的85%乙醇，超聲提取0.7小時，過濾，得到第三濾液和第三濾渣；收集合并第一濾液、第二濾液和第三濾液，減壓濃縮，得到乙醇提取物；（二）萃?。合蛞掖继崛∥镏屑铀芙?，用5倍體積的石油醚和乙酸乙酯（V:V=1:1）的混合物萃取3次，每次5h，石油醚-乙酸乙酯萃取液為上層，下層為水層，分離石油醚-乙酸乙酯萃取層與水層，得到石油醚-乙酸乙酯萃取層，減壓濃縮，得到石油醚-乙酸乙酯萃取物；（三）上柱：將步驟（二）中所得的石油醚-乙酸乙酯萃取物過HPD-100大孔樹脂，采用乙醇為洗脫劑，按照80%乙醇、60%乙醇、40%乙醇和20%乙醇的梯度對大孔樹脂進行洗脫，收集80%~20%乙醇的洗脫液，減壓濃縮，得乙醇洗脫物；（四）酸化：向步驟（三）中所得的乙醇洗脫物中加入pH值為3的硫酸，萃取，過濾，收集硫酸萃取液；（五）梯度萃取分離：向步驟（四）所得的硫酸萃取液中加入氨水，使萃取液以1為梯度在pH值為8~11的范圍內(nèi)增大，向所述各梯度的萃取液中加入氯仿進行萃取，收集各梯度的氯仿萃取液，減壓濃縮，利用凍干機凍干，得到它勃寧粉末350g，收率為3.5%，純度為99.6%。實施例3一種從馬鈴果中提取它勃寧的方法，包括以下工藝步驟：（一）提取：取10kg馬鈴果種子粉碎，過40目篩網(wǎng)，得粉末，向粉末中加入8倍粉末重量的50%乙醇，超聲提取1小時，過濾，得到第一濾液和第一濾渣；向第一濾渣中加入8倍濾渣重量的50%乙醇，超聲提取1小時，過濾，得到第二濾渣和第二濾液；向第二濾渣中加入8倍濾渣重量的50%乙醇，超聲提取1小時，過濾，得到第三濾液和第三濾渣；收集合并第一濾液、第二濾液和第三濾液，減壓濃縮，得到乙醇提取物；（二）萃?。合蛞掖继崛∥镏屑铀芙?，然后添加5倍體積的乙酸乙酯萃取3次，每次5h，乙酸乙酯萃取液為上層，水層為下層，分離乙酸乙酯萃取層與水層，得到乙酸乙酯萃取層，減壓濃縮，得到乙酸乙酯萃取物；（三）上柱：將步驟（二）中所得的乙酸乙酯萃取物過HPD-100大孔樹脂，采用乙醇為洗脫劑，按照80%乙醇、60%乙醇、40%乙醇和20%乙醇的梯度對大孔樹脂進行洗脫，收集80%~20%乙醇的洗脫液，減壓濃縮，得乙醇洗脫物；（四）酸化：向步驟（三）中所得的乙醇洗脫物中加入pH值為3的硫酸，萃取，過濾，收集硫酸萃取液；（五）梯度萃取分離：向步驟（四）所得的硫酸萃取液中加入氨水，使萃取液以1為梯度在pH值為8~11的范圍內(nèi)增大，向所述各梯度的萃取液中加入氯仿進行萃取，收集各梯度的氯仿萃取液，減壓濃縮，利用凍干機凍干，得到它勃寧粉末324g，收率為3.24%，純度為99.4%。實施例4一種從馬鈴果中提取它勃寧的方法，包括以下工藝步驟：（一）提?。喝?0kg馬鈴果種子粉碎，過40目篩網(wǎng)，得粉末，向粉末中加入4倍粉末重量的55%乙醇，超聲提取0.7小時，過濾，得到第一濾液和第一濾渣；向第一濾渣中加入6倍濾渣重量的55%乙醇，超聲提取1小時，過濾，得到第二濾渣和第二濾液；向第二濾渣中加入6倍濾渣重量的55%乙醇，超聲提取1小時，過濾，得到第三濾液和第三濾渣；收集合并第一濾液、第二濾液和第三濾液，減壓濃縮，得到乙醇提取物；（二）萃?。合蛞掖继崛∥镏屑铀芙?，用5倍體積的石油醚萃取4次，每次5h，石油醚萃取液為上層，水層為下層，分離石油醚萃取層與水層，得到石油醚萃取層，減壓濃縮，得到石油醚萃取物；（三）上柱：將步驟（二）中所得的石油醚萃取物過HOD-100大孔樹脂，采用乙醇為洗脫劑，按照80%乙醇、60%乙醇、40%乙醇和20%乙醇的梯度對大孔樹脂進行洗脫，收集80%~20%乙醇的洗脫液，減壓濃縮，得乙醇洗脫物；（四）酸化：向步驟（三）中所得的乙醇洗脫物中加入pH值為4的鹽酸，萃取，過濾，收集鹽酸萃取液；（五）梯度萃取分離：向步驟（四）所得的鹽酸萃取液中加入氨水，使萃取液以1為梯度在pH值為8~11的范圍內(nèi)增大，向所述各梯度的萃取液中加入氯仿進行萃取，收集各梯度的氯仿萃取液，減壓濃縮，利用凍干機凍干，得到它勃寧粉末312g，收率為3.12%，純度為99.2%。實施例5一種從馬鈴果中提取它勃寧的方法，包括以下工藝步驟：（一）提取：取10kg馬鈴果種子粉碎，過40目篩網(wǎng)，得粉末，向粉末中加入4倍粉末重量的90%乙醇，超聲提取0.7小時，過濾，得到第一濾液和第一濾渣；向第一濾渣中加入4倍濾渣重量的90%乙醇，超聲提取0.7小時，過濾，得到第二濾渣和第二濾液；向第二濾渣中加入4倍濾渣重量的90%乙醇，超聲提取0.7小時，過濾，得到第三濾液和第三濾渣；收集合并第一濾液、第二濾液和第三濾液，減壓濃縮，得到乙醇提取物；（二）萃?。合蛞掖继崛∥镏屑铀芙猓缓筇砑?倍量的石油醚和乙酸乙酯（V:V=1:1）的混合物萃取3次，每次5h，石油醚-乙酸乙酯萃取液為上層，水層為下層，分離石油醚-乙酸乙酯萃取層與水層，得到石油醚-乙酸乙酯萃取層，減壓濃縮，得到石油醚-乙酸乙酯萃取物；（三）上柱：將步驟（二）中所得的石油醚-乙酸乙酯萃取物過HPD-100大孔樹脂，采用乙醇為洗脫劑，按照80%乙醇、60%乙醇、40%乙醇和20%乙醇的梯度對大孔樹脂進行洗脫，收集80%~20%乙醇的洗脫液，減壓濃縮，得乙醇洗脫物；（四）酸化：向步驟（三）中所得的乙醇洗脫物中加入pH值為4的硫酸萃取，過濾，收集硫酸萃取液；（五）梯度萃取分離：向步驟（四）所得的硫酸萃取液中加入氨水，使萃取液以1為梯度在pH值為8~11的范圍內(nèi)增大，向所述各梯度的萃取液中加入氯仿進行萃取，收集各梯度的氯仿萃取液，減壓濃縮，利用凍干機凍干，得到它勃寧粉末342g，收率為3.42%，純度為99.4%。對比例取50kg馬鈴果種子粉碎，粉碎目數(shù)為30目，將所得粉末加入150kg濃度為3%的鹽酸水溶液中，于80℃攪拌提取，共提取3次，沒次5h，得到提取液。將上述三次提取液合并，采用濃度為25%的碳酸鈉水溶液調(diào)節(jié)提取液酸堿度，使提取液pH值為9，防止沉淀過夜，離心，棄去上清液，得沉淀，沉淀重6.3kg。向上述濕沉淀中加入25.2kg水，攪成懸濁液，繼而采用31.5kg石油醚和正己烷（V:V=1:1）的混合液，共萃取3次，沒次4h，分離有機層與水層，得萃取液，將三次萃取液合并濃縮至油狀物3kg，將油狀物放入冰箱中過夜，油中析出結(jié)晶，離心干燥，得到淡黃色粉末1.5kg，即為它勃寧，收率為3%，純度為99.1%。現(xiàn)有提取效果與本發(fā)明效果對比，對比結(jié)果見表1：表1提取效果對比收率（%）純度（%）實施例13.0599.2實施例23.599.6實施例33.2499.4實施例43.1299.2實施例53.4299.4對比例3.099.1綜上所述，通過實施例1~5的方法所提取的它勃寧，在收率和純度上均較對比例有所提升，尤其是實施例2的效果最佳，收率達到了3.5%，純度達到了99.6%。雖然上述實施例對本發(fā)明進行了詳細(xì)地描述，但不應(yīng)理解為對本專利的保護范圍的限定。在權(quán)利要求書所描述的范圍內(nèi)，本領(lǐng)域技術(shù)人員不經(jīng)創(chuàng)造性勞動即可做出的各種修改和變形仍屬本專利的保護范圍。當(dāng)前第1頁1 2 3