本發(fā)明涉及透明質酸生產技術領域，特別是涉及一種馬鏈球菌獸疫亞種及用其制備透明質酸的生產工藝。
背景技術：
目前微生物發(fā)酵法生產透明質酸采用的工藝發(fā)酵周期長，發(fā)酵工藝不能依據菌種特性進行，導致菌種活性不能被激發(fā)，透明質酸產率低，產品質量差。開發(fā)新的發(fā)酵用菌種，同時，依據菌種特性改善生產工藝來提高透明質酸的質量和產量，是本發(fā)明需要解決的技術問題。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的就是針對上述存在的缺陷而提供一種馬鏈球菌獸疫亞種及其制備透明質酸的生產工藝。本發(fā)明采用篩選出的新的馬鏈球菌獸疫亞種，結合改進后的發(fā)酵技術，透明質酸產品產出率高，可達9.5g/L。發(fā)酵得到的透明質酸易于分離純化，生產周期短。生產易于控制，適合工業(yè)化大規(guī)模生產，收率高，并且大大降低了生產成本。
本發(fā)明的一種馬鏈球菌獸疫亞種及其制備透明質酸的生產工藝技術方案為，一種馬鏈球菌獸疫亞種（Streptococcus equi subsp. zooepidemicus）DCS005，目前該馬鏈球菌獸疫亞種在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，郵編：100101，其保藏編號是：CGMCC No.12782，菌種的拉丁文名稱是Streptococcus equi subsp. zooepidemicus，參據的微生物（株）：DCS005，保藏日期是2016年7月14日。
用所述的馬鏈球菌獸疫亞種制備透明質酸的生產工藝，包括以下步驟：
（1）搖瓶種子液培養(yǎng)；
（2）菌種擴大培養(yǎng)；
（3）發(fā)酵，先通入無菌含氧空氣發(fā)酵，再通入氮氣繼續(xù)發(fā)酵；
（4）提純。
步驟（1）、（2）、（3）中的培養(yǎng)液包括按重量百分比的淀粉1%、蔗糖0.5%、牛肉膏0.5%、酵母粉0.5%、磷酸氫二鉀0.02%、氫氧化鈉0.05%，余量為水，pH7.0-7.3。
步驟（1）中，培養(yǎng)條件為：38.5℃培養(yǎng)12-16小時。
步驟（2）中，培養(yǎng)條件為溫度38.5℃、pH7.0-7.3，培養(yǎng)時間為12-16小時。
步驟（2）中，罐壓0.05MPa。
步驟（3）中，發(fā)酵罐罐壓0.05MP。
步驟（3）具體為，通入無菌含氧空氣37-40℃發(fā)酵18-32小時后，通入氮氣39-45℃繼續(xù)發(fā)酵，通入氮氣階段同時加入濃度為800g/L的葡萄糖300mL，發(fā)酵液pH每分鐘下降幅度小于0.01時結束發(fā)酵，檢測發(fā)酵液粘度，將發(fā)酵液壓入沉淀罐中。
本發(fā)明的有益效果為：
本發(fā)明篩選出透明質酸產率高的菌種，結合改進的發(fā)酵技術，透明質酸產品產出率高，可達9.5g/L，生產周期短。本發(fā)明生產工藝簡單，原輔料常見易得，生產易于控制，雜質含量更低，適合工業(yè)化大規(guī)模生產，收率高，并且大大降低了生產成本。
具體實施方式：
為了更好地理解本發(fā)明，下面用具體實例來詳細說明本發(fā)明的技術方案，但是本發(fā)明并不局限于此。
實施例１
一種馬鏈球菌獸疫亞種（Streptococcus equi subsp. zooepidemicus）DCS005，目前該馬鏈球菌獸疫亞種在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，郵編：100101，其保藏編號是：CGMCC No.12782，菌種的拉丁文名稱是Streptococcus equi subsp. zooepidemicus，參據的微生物（株）：DCS005，保藏日期是2016年7月14日。
用所述的馬鏈球菌獸疫亞種制備透明質酸的生產工藝，包括以下步驟：
（1）搖瓶種子液培養(yǎng)；
（2）菌種擴大培養(yǎng)；
（3）發(fā)酵，先通入無菌含氧空氣發(fā)酵，再通入氮氣繼續(xù)發(fā)酵；
（4）提純。
步驟（1）、（2）、（3）中的培養(yǎng)液包括按重量百分比的淀粉1%、蔗糖0.5%、牛肉膏0.5%、酵母粉0.5%、磷酸氫二鉀0.02%、氫氧化鈉0.05%，余量為水，pH7.0-7.3。
步驟（1）中，培養(yǎng)條件為：38.5℃培養(yǎng)12-16小時。
步驟（2）中，培養(yǎng)條件為溫度38.5℃、pH7.0-7.3，培養(yǎng)時間為12-16小時。
步驟（2）中，罐壓0.05MPa。
步驟（3）中，發(fā)酵罐罐壓0.05MP。
步驟（3）具體為，通入無菌含氧空氣37-40℃發(fā)酵18-32小時后，通入氮氣39-45℃繼續(xù)發(fā)酵，通入氮氣階段同時加入濃度為800g/L的葡萄糖300mL，發(fā)酵液pH每分鐘下降幅度小于0.01時結束發(fā)酵，檢測發(fā)酵液粘度，將發(fā)酵液壓入沉淀罐中。
本發(fā)明采用篩選出透明質酸產率高的菌種，結合發(fā)酵技術，透明質酸產品產率達9.5g/L，生產周期短。
本發(fā)明生產工藝簡單，原輔料常見易得，生產易于控制，雜質含量更低，適合工業(yè)化大規(guī)模生產，收率高，并且大大降低了生產成本。