本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一類4，6-二苯基嘧啶類化合物。該類化合物可作為選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑，治療或預(yù)防多種與絕經(jīng)后綜合癥相關(guān)的醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥，特別是適用于治療ER-(+)型乳腺癌。同時(shí)，該類化合物也可用于制備作為血管生成抑制劑藥物的用途。
背景技術(shù)：
腫瘤是以異常細(xì)胞失控增生和擴(kuò)散為特征的疾病。美國(guó)癌癥學(xué)會(huì)2014年的《全球癌癥事實(shí)和數(shù)據(jù)》報(bào)告顯示：2012年全世界共新增1400萬(wàn)癌癥病例并有820萬(wàn)人死亡，其中中國(guó)新增307萬(wàn)癌癥患者并造成約220萬(wàn)人死亡，分別占全球總量的21.9％和26.8％。報(bào)告預(yù)測(cè)全球癌癥病例將呈現(xiàn)迅猛增長(zhǎng)態(tài)勢(shì)，由2012年的1400萬(wàn)人，逐年遞增至2025年的1900萬(wàn)人，到2035年將達(dá)到2400萬(wàn)人。癌癥已經(jīng)成為嚴(yán)重危害人類健康和生命的重大疾病，迄今仍沒(méi)有非常滿意的治療方法。因此，在必要的手術(shù)治療之外，藥物治療途徑越來(lái)越成為預(yù)防和抑制乳腺癌的一種重要手段，開(kāi)發(fā)低毒高效的抗腫瘤藥物迫在眉睫。
研究發(fā)現(xiàn)，乳腺癌與雌激素及雌激素信號(hào)通路有著異常密切的聯(lián)系。在正常情況下，雌激素對(duì)生殖系統(tǒng)的發(fā)育與維持起著至關(guān)重要的作用，如促進(jìn)乳腺內(nèi)皮細(xì)胞和子宮內(nèi)膜細(xì)胞的生長(zhǎng)、分化；對(duì)骨骼、心血管系統(tǒng)、神經(jīng)系統(tǒng)也有一定的影響：如保持骨密度和減少骨質(zhì)疏松癥發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)，通過(guò)降低膽固醇水平來(lái)保護(hù)心血管系統(tǒng)，并能調(diào)節(jié)認(rèn)知功能和行為。這一系列生理作用是通過(guò)雌激素信號(hào)通路來(lái)實(shí)現(xiàn)的，雌激素受體(ER)是雌激素信號(hào)通路中一個(gè)重要的蛋白，屬于轉(zhuǎn)錄因子核受體超家族成員，是一類能與DNA應(yīng)答原件相結(jié)合的配體依賴轉(zhuǎn)錄因子，在生殖、發(fā)育和代謝等生命過(guò)程中起著重要的調(diào)節(jié)作用。
ER-(+)型乳腺癌一種雌激素依賴性的多發(fā)性腫瘤，嚴(yán)重危害女性健康。相關(guān)研究揭示雌激素與ER結(jié)合會(huì)促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞生長(zhǎng)。經(jīng)典的ER介導(dǎo)信號(hào)傳導(dǎo)通路如下：雌激素在胞漿中與ER結(jié)合后，促使ER從熱休克蛋白上解離，然后雌激素與其受體形成的復(fù)合物[Estradiol(E2)-ER]構(gòu)象發(fā)生變化并使受體發(fā)生同源二聚體化，這種同源二聚體復(fù)合物與靶基因上雌激素反應(yīng)元件(ERE)結(jié)合，并募集相關(guān)共激活因子，啟動(dòng)靶基因的轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)。
選擇性雌激素調(diào)節(jié)劑(SERMs)是一類能與ER結(jié)合，在不同的靶組織依據(jù)細(xì)胞種類和激素環(huán)境的不同，可以表現(xiàn)為ER激動(dòng)劑或拮抗劑的化合物。目前已上市的SERMs藥物包括Tamoxifen、Raloxifene、Lasofoxifene、Bazedoxifene等十余種，其中Tamoxifen是第一代SERMs的代表藥物，自1977年批準(zhǔn)上市以來(lái)，成為預(yù)防及輔助治療女性ER-(+)型乳腺癌的首選藥物，但是研究發(fā)現(xiàn)：長(zhǎng)期使用Tamoxifen易誘發(fā)子宮內(nèi)膜癌及耐藥性，還會(huì)發(fā)生靜脈血栓、血管舒張等副作用；以Raloxifene為代表的第二代SERMs，相比Tamoxifen其誘導(dǎo)子宮內(nèi)膜癌的幾率要低，但其臨床治療效果不如Tamoxifen，自2007年批準(zhǔn)上市以來(lái)主要用于絕經(jīng)后女性乳腺癌和骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防和治療。綜上，研究新型作用顯著、副作用小的SERMs 是藥物預(yù)防和治療乳腺癌的一個(gè)熱點(diǎn)。
乳腺癌不僅是一種激素依賴性腫瘤，還是血管依賴性腫瘤，在乳腺癌的生長(zhǎng)、侵襲、進(jìn)展和轉(zhuǎn)移的整個(gè)過(guò)程中，腫瘤的血管生成是其中的重要步驟。體內(nèi)血管生成被內(nèi)源性的促血管生成因子和抗血管生成因子所調(diào)控，兩者之間的平衡掌控著血管生成的“開(kāi)關(guān)”。在合適的刺激原(主要為缺氧、炎癥和代謝性應(yīng)激)作用下，諸多的促血管生成因子和抗血管生成因子平衡被打破，促血管生成因子呈明顯優(yōu)勢(shì)，腫瘤開(kāi)始形成新生血管。截止目前，與腫瘤血管生成有關(guān)的因子有30多種，其中血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)是目前已知的最強(qiáng)的作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞的生長(zhǎng)因子。不同的血管生成因子往往在腫瘤發(fā)展過(guò)程中的不同階段優(yōu)先表達(dá)，而VEGF作為促腫瘤血管生成的關(guān)鍵因子，在腫瘤發(fā)展過(guò)程中全程表達(dá)。
因此我們結(jié)合常見(jiàn)的SERMs以及VEGFR抑制劑的結(jié)構(gòu)特征，合成了一類4，6-二苯基嘧啶類化合物，以起到SERMs的作用，同時(shí)對(duì)血管生成有一定的抑制作用。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
本發(fā)明公開(kāi)了通式I或通式II的4，6-二苯基嘧啶類化合物。經(jīng)藥理實(shí)驗(yàn)證明該類化合物可對(duì)于ER-(+)型乳腺癌的有一定的治療作用。同時(shí)，可用于制備作為血管生成抑制劑藥物的用途。
本發(fā)明通式I的化合物結(jié)構(gòu)如下：
其中R1、R2各自獨(dú)立地代表H、OH、鹵素、CF3直鏈或支鏈C1-C8的烷氧基或芐氧基；
R3代表未取代或Y取代直鏈或支鏈C1-C6烷基；
其中Y代表
其中R4、R5各自獨(dú)立地代表H、直鏈或支鏈的C1-C6烷基、苯基；或者R4、R5與其相連的N一起構(gòu)成5-7元飽和或不飽和雜環(huán)，所述雜環(huán)進(jìn)一步含有1-3個(gè)選自O(shè)、N、S的雜原子；且所述雜環(huán)被1-3個(gè)選自鹵素、OH、NO2、直鏈或支鏈C1-C4烷基、CF3的取代基取代；
所述鹵素為F、Cl、Br、I。
優(yōu)選的，
R1、R2各自獨(dú)立地代表H、OH、C1-C4的烷氧基；
R3代表未取代或Y取代直鏈或支鏈C1-C3烷基；
其中Y代表
其中R4、R5各自獨(dú)立地代表H、直鏈或支鏈的C1-C4烷基；或者R4、R5與其相連的N一起構(gòu)成5-6元飽和雜環(huán)，所述雜環(huán)進(jìn)一步含有1-3選自O(shè)、N、S的雜原子；且所述雜環(huán)被1-3個(gè)C1-C4烷基取代。
更優(yōu)選的，
R1、R2各自獨(dú)立地代表OH、OCH3；
R3代表Y單取代的甲基；其中Y代表N(CH3)2、N(CH2CH3)2、N(CH2)4、N(CH2)5、N(CH2CH2)2O、N(CH2CH2)2NCH3。
本發(fā)明化合物的結(jié)構(gòu)及編號(hào)如下：
藥理實(shí)驗(yàn)及實(shí)施例中化合物的代號(hào)等同于以上代號(hào)所對(duì)應(yīng)的化合物結(jié)構(gòu)。
本發(fā)明的通式I、通式II化合物形成的藥學(xué)上可接受的鹽和前藥同樣包括在本發(fā)明內(nèi)。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及通式I的化合物與藥學(xué)上可接受的載體組成的藥用組合物。
下面是本發(fā)明化合物的部分藥理學(xué)試驗(yàn)及結(jié)果：
MTT法測(cè)試MCF-7乳腺癌細(xì)胞增殖試驗(yàn)
測(cè)試方法：MCF-7乳腺癌細(xì)胞以含10％胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液培養(yǎng)，取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞用于實(shí)驗(yàn)，調(diào)整細(xì)胞密度為2×104個(gè)/mL，接種于96孔板，培養(yǎng)12小時(shí)后，加入100μl/孔的含藥培養(yǎng)基，樣品最終濃度為2×10-4mol/L、1×10-4mol/L、1×10-5mol/L、1×10-6mol/L和1×10-7mol/L，每個(gè)濃度3個(gè)復(fù)孔，以相同體積的培養(yǎng)基代替測(cè)試藥物作為對(duì)照組，繼續(xù)培養(yǎng)48小時(shí)后加入20μl/孔MTT(濃度為5mg/ml)，培養(yǎng)4h后，棄上清液，加入DMSO 150μl/孔，用酶標(biāo)檢測(cè)儀于492nm波長(zhǎng)處測(cè)定每孔吸光度(A)值，按公式計(jì)算細(xì)胞增殖抑制率：抑制率＝(對(duì)照組A值-實(shí)驗(yàn)組A值)/(對(duì)照組A值-空白組A值)×100％，并計(jì)算出IC50。
MTT法測(cè)試HUVEC細(xì)胞抗增殖活性實(shí)驗(yàn)
人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(human umbilical vein endothelial cell，HUVEC)是VEGF/VEGFR的作用靶標(biāo)，常被用來(lái)測(cè)試VEGFR-2抑制劑的抗血管生成活性。MTT法測(cè)試方法同MCF-7細(xì)胞。
ERα受體親和力測(cè)試
測(cè)試方法：待測(cè)化合物每種精確稱量，加入DMSO溶劑成母液，然后使用ES2Screening Buffer配制待測(cè)化合物溶液至濃度為100μM。使用ES2Screening Buffer配制2X熒光配基與ERα混合液使最終熒光配基濃度為9nM，ERα濃度為30nM。于384孔黑色微孔板先每孔加入50μl化合物，再每孔加入50ul 2X熒光配基與ERα混合溶液。同時(shí)加入50ul雌二醇溶液(100μM)，50ul 2X熒光配基與ERα混合溶液作為100％競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合對(duì)照、加入50ul Buffer，50ul 2X熒光配基與ERα混合溶液作為0％競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合對(duì)照以及加入100ul Buffer作為空白對(duì)照。避光操作。室溫(20-25℃)孵育2h，測(cè)得熒光偏振值mP。ERα受體相對(duì)親和力＝(空白組mP-實(shí)驗(yàn)組mP)/(空白組mP-雌二醇組mP)×100％。
本發(fā)明化合物的部分藥理實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
以Tamoxifen為陽(yáng)性對(duì)照，對(duì)合成的嘧啶類化合物進(jìn)行了MCF-7細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)，研究結(jié)果表明，絕大部分化合物對(duì)MCF-7細(xì)胞表現(xiàn)出較好的抑制活性。同時(shí)以Sunitinib為陽(yáng)性對(duì)照，對(duì)合成的嘧啶類化合物進(jìn)行HUVEC細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)，實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示大部分化合物對(duì)HUVEC細(xì)胞的增殖有著較好的抑制作用，表明所合成的該類化合物對(duì)于血管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖。在以Tamoxifen為對(duì)照的ERα受體親和力親和力實(shí)驗(yàn)中，大部分化合物在50μM的濃度下，對(duì)于ERα受體有較好的親和力。因此該類化合物可作為選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑，用于治療或預(yù)防多種與絕經(jīng)后綜合癥相關(guān)的醫(yī)學(xué)適應(yīng)癥，特別是適用于治療ER-(+)型乳腺癌。同時(shí)，該類化合物也可用于制備作為血管生成抑制劑藥物。
本發(fā)明提供通式I的嘧啶類化合物的制備方法。所述制備方法包括路線1～路線3。
路線1：
反應(yīng)條件：a)乙腈，F(xiàn)eCl3·6H2O，TMSCl，80℃，10h；b)三氯氧磷，110℃，5h。
路線2：
反應(yīng)條件：c)無(wú)水二氧六環(huán)，Pd(OAc)2，Cs2CO3，BINAP，100℃，8h；d)無(wú)水二氯甲烷，BBr3，0℃/室溫，4h。
路線3：
反應(yīng)條件：e)無(wú)水二氧六環(huán)，Pd(OAc)2，Cs2CO3，BINAP，100℃，8h；f)無(wú)水二氯甲烷，BBr3，0℃/室溫，4h。
具體實(shí)施方式(所述實(shí)施例只是用來(lái)說(shuō)明本發(fā)明，而不是用來(lái)限定本發(fā)明)
部分化合物的制備實(shí)施如下：
1H-NMR核磁共振由Bruker AV300型(300MHz)核磁共振儀測(cè)定(TMS為內(nèi)標(biāo)物)，質(zhì)譜分別由島津GC/MS-QP2010型質(zhì)譜儀(EI-MS)、Agilent1100LC-MSD-Trap/SL型質(zhì)譜儀(ESI-MS)測(cè)定。
柱層析用硅膠為100-200目、200-300目或300-400目硅膠(青島海洋化工廠)，洗脫劑為石油醚-乙酸乙酯體系或氯仿-甲醇體系。薄層層析(TLC)用GF254薄層層析板(煙臺(tái)江友硅膠開(kāi)發(fā)有限公司)；TLC展開(kāi)體系為石油醚-乙酸乙酯系統(tǒng)或氯仿-甲醇系統(tǒng)，必要時(shí)加入少量乙酸；TLC在ZF7型三用紫外分析儀(河南鞏義予華儀器有限公司)下照射顯示。部分化合物純度使用島津HPLC在254nm下檢測(cè)，流動(dòng)相為甲醇/水系統(tǒng)。
實(shí)施例1
4，6-二(4-甲氧基苯基)-3，4二氫嘧啶-2(1H)酮(4)的合成
將4-甲氧基苯甲醛(0.4mL，3.33mmol)溶于12.5mL乙腈，依次向反應(yīng)液中加入六水和氯化鐵(90mg，0.333mmol)、4-甲氧基苯乙酮(0.5g，3.33mmol)、脲(0.3g，5mmol)和三甲基氯硅烷(0.417mL，3.33mmol)，氮?dú)獗Ｗo(hù)下升溫至80℃回流反應(yīng)10h。冷至室溫，將反應(yīng)液加入50mL水?dāng)嚢?，過(guò)濾，濾餅用乙醚洗，得淡黃色固體4(0.6g，58％)。MS(ESI，m/z)：311[M+H]+。
實(shí)施例2
2-氯-4，6-二(4-甲氧基苯基)嘧啶(5)的合成
將化合物4(1g，3.2mmol)和4mL三氯氧磷加入25mL燒瓶，升溫至110℃回流反應(yīng)5h。停止加熱，冷卻到室溫，緩慢加入50mL碎冰中。用乙酸乙酯萃取，有機(jī)層飽和食鹽水洗后用無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓濃縮至干，柱層析得淡黃色固體5(0.6g，58％)。MS(ESI，m/z)：327[M+H]+。
實(shí)施例3
4，6-二(4-甲氧基苯基)-2-(4-(2-二甲胺基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-1a)的合成
將化合物5(0.23g，1eq)、2-二甲氨基-N-(4-氨基苯基)乙酰胺(2eq)、碳酸銫(1eq)、醋酸鈀(0.1eq)，BINAP(0.2eq)加入5mL無(wú)水二氧六環(huán)中。氮?dú)獗Ｗo(hù)下升溫至100℃，反應(yīng)8h。過(guò)濾，濾液減壓濃縮至干，柱層析純化得黃色固體I-1a(0.15g，44.4％)。mp 101-104℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：9.10(s，1H，CONH)，7.01-8.12(m，14H，Ar-H，NH)，3.89(s，6H，OCH3)，3.11(s，2H，COCH2)，2.41(s，6H，N(CH3)2)。MS(ESI，m/z)：484.2[M+H]+。
實(shí)施例4
4-(4-甲氧基苯基)-6-(4-羥基苯基)-2-(4-(2-二甲胺基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-1b)和4，6-二(4-羥基苯基)-2-(4-(2-二甲胺基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-1c)的合成
將化合物I-1a(0.1g，0.207mmol)溶于5mL無(wú)水二氯甲烷中，冰浴下滴加1mol/L的BBr3/CH2Cl2溶液(2.07mL，2.07mmol)。反應(yīng)4h將反應(yīng)倒入冰水中，乙酸乙酯萃取，有機(jī)層減壓濃縮至干，柱層析純化得黃色固體I-1b(25mg，25.7％)。mp 128-130℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.03(s，1H，OH)，9.60(s，1H，CONH)，9.49(s，1H，NH)，6.93-8.27(m，13H，Ar-H)，3.84(s，3H，OCH3)，3.05(s，2H，COCH2)，2.28(s，6H，N(CH3)2)。MS(ESI，m/z)：470.3[M+H]+。
黃色固體I-1c(34mg，36.1％)。mp 219-221℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.00(s，2H，OH)，9.60(s，1H，CONH)，9.44(s，1H，NH)，6.89-8.16(m，13H，Ar-H)，3.05(s，2H，COCH2)，2.28(s，6H，N(CH3)2)。MS(ESI，m/z)：456.3[M+H]+。
實(shí)施例5
4，6-二(4-甲氧基苯基)-2-(4-(2-二乙胺基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-2a)的合成
合成方法同實(shí)施例3得黃色固體I-2a(0.17g，47.5％)。mp 149-152℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：9.39(s，1H，CONH)，7.02-8.12(m，14H，Ar-H，NH)，3.90(s，6H，OCH3)，3.18(s，2H，COCH2)，2.63-2.71(q，4H，N(CH2CH3)2，J＝7.20)，1.09-1.27(t，6H，N(CH2CH3)2，J＝7.11)。MS(ESI，m/z)：512.4[M+H]+。
實(shí)施例6
4-(4-甲氧基苯基)-6-(4-羥基苯基)-2-(4-(2-二乙胺基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-2b)和4，6-二(4-羥基苯基)-2-(4-(2-二乙胺基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-2c)的合成
合成方法同實(shí)施例4得黃色固體I-2b(27mg，27.8％)。mp 223-226℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.00(s，1H，OH)，9.54(s，1H，CONH)，9.48(s，1H，NH)，6.90-8.28(m，13H，Ar-H)，3.85(s，3H，OCH3)，3.14(s，2H，COCH2)，2.57-2.64(q，4H，N(CH2CH3)2，J＝7.17)，1.01-1.05(t，6H，N(CH2CH3)2，J＝7.11)。MS(ESI，m/z)：498.3[M+H]+。
黃色固體I-2c(33mg，35.0％)。mp 171-174℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.00(s，2H，OH)，9.54(s，1H，CONH)，9.43(s，1H，NH)，6.90-8.17(m，13H，Ar-H)，3.15(s，2H，COCH2)，2.57-2.64(q，4H，N(CH2CH3)2，J＝7.17)，1.01-1.06(t，6H，N(CH2CH3)2，J＝7.11)。MS(ESI，m/z)：484.3[M+H]+。
實(shí)施例7
4，6-二(4-甲氧基苯基)-2-(4-(2-吡咯烷基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-3a)的合成
合成方法同實(shí)施例3得黃色固體I-3a(0.14g，39.2％)。mp 170-172℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：9.09(s，1H，CONH)，7.01-8.12(m，14H，Ar-H，NH)，3.89(s，6H，OCH3)，3.31(s，2H，COCH2)，2.70(brs，4H，2，5-pyrrolidyl-H)，1.87(brs，4H，3，4-pyrrolidyl-H)。MS(ESI，m/z)：510.2[M+H]+。
實(shí)施例8
4-(4-甲氧基苯基)-6-(4-羥基苯基)-2-(4-(2-吡咯烷基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-3b)和4，6-二(4-羥基苯基)-2-(4-(2-吡咯烷基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-3c)的合成
合成方法同實(shí)施例4得黃色固體I-3b(17mg，17.5％)。mp 122-124℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：9.99(s，1H，OH)，9.57(s，1H，CONH)，9.46(s，1H，NH)，6.90-8.27(m，13H，Ar-H)，3.85(s，3H，OCH3)，3.23(s，2H，COCH2)，2.60(brs，4H，2，5-pyrrolidyl-H)，1.75(brs，4H，3，4-pyrrolidyl-H)。MS(ESI，m/z)：496.3[M+H]+。
黃色固體I-3c(39mg，41.3％)。mp 169-172℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：9.99(s，2H，OH)，9.57(s，1H，CONH)，9.43(s，1H，NH)，6.89-8.16(m，13H，Ar-H)，3.22(s，2H，COCH2)，2.60(brs，4H，2，5-pyrrolidyl-H)，1.75(brs，4H，3，4-pyrrolidyl-H)。MS(ESI，m/z)：482.3[M+H]+。
實(shí)施例9
4，6-二(4-甲氧基苯基)-2-(4-(2-哌啶基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-4a)的合成
合成方法同實(shí)施例3得黃色固體I-4a(0.19g，51.9％)。mp 101-104℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：9.28(s，1H，CONH)，7.04-8.14(m，14H，Ar-H，NH)，3.92(s，6H，OCH3)，3.11(s，2H，COCH2)，2.58(brs，4H，2，6-piperidyl-H)，1.68(brs，4H，3，5-piperidyl-H)，1.64(brs，2H，4-piperidyl-H)。MS(ESI，m/z)：524.3[M+H]+。
實(shí)施例10
4-(4-甲氧基苯基)-6-(4-羥基苯基)-2-(4-(2-哌啶基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-4b)和4，6-二(4-羥基苯基)-2-(4-(2-哌啶基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-4c)的合成
合成方法同實(shí)施例4得黃色固體I-4b(23mg，23.6％)。mp 126-129℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.03(s，1H，OH)，9.57(s，1H，CONH)，9.51(s，1H，NH)，6.91-8.29(m，13H，Ar-H)，3.86(s，3H，OCH3)，3.06(s，2H，COCH2)，2.47(brs，4H，2，6-piperidyl-H)，1.60(brs，4H，3，5-piperidyl-H)，1.57(brs，2H，4-piperidyl-H)。MS(ESI，m/z)：510.3[M+H]+。
黃色固體I-4c(28mg，29.6％)。mp 163-167℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.02(s，2H，OH)，9.56(s，1H，CONH)，9.46(s，1H，NH)，6.91-8.18(m，13H，Ar-H)，3.06(s，2H，COCH2)，2.47(brs，4H，2，6-piperidyl-H)，1.59(brs，4H，3，5-piperidyl-H)，1.44(brs，2H，4-piperidyl-H)。MS(ESI，m/z)：496.3[M+H]+
實(shí)施例11
4，6-二(4-甲氧基苯基)-2-(4-(2-嗎啉基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-5a)的合成
合成方法同實(shí)施例3得黃色固體I-5a(0.23g，62.6％)。mp 193-195℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：9.06(s，1H，CONH)，7.04-8.14(m，14H，Ar-H，NH)，3.92(s，6H，OCH3)，3.82-3.81(t，4H，N(CH2CH2)2O，J＝4.44)，3.19(s，2H，COCH2)，2.66-2.69(t，4H，N(CH2CH2)2O，J＝4.47)。MS(ESI，m/z)：526.3[M+H]+，548.3[M+Na]+。
實(shí)施例12
4-(4-甲氧基苯基)-6-(4-羥基苯基)-2-(4-(2-嗎啉基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-5b)和4，6-二(4-羥基苯基)-2-(4-(2-嗎啉基乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-5c)的合成
合成方法同實(shí)施例4得黃色固體I-5b(34mg，35.0％)。mp 126-128℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.01(s，1H，OH)，9.63(s，1H，CONH)，9.49(s，1H，NH)，6.92-8.18(m，13H，Ar-H)，3.86(s，3H，OCH3)，3.66(brs，4H，N(CH2CH2)2O)，3.12(s，2H，COCH2)。MS(ESI，m/z)：512.3[M+H]+。
黃色固體I-5c(18mg，19.0％)。mp 164-167℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：9.99(s，2H，OH)，9.62(s，1H，CONH)，9.43(s，1H，NH)，6.90-8.17(m，13H，Ar-H)，3.66(brs，4H，N(CH2CH2)2O)，3.12(s，2H，COCH2)。MS(ESI，m/z)：498.3[M+H]+，520.3[M+H]+。
實(shí)施例13
4，6-二(4-甲氧基苯基)-2-(4-(2-(4-甲基哌嗪基)乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-6a)的合成
合成方法同實(shí)施例3得黃色固體I-6a(0.19g，50.4％)。mp 89-92℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：9.10(s，1H，CONH)，7.03-8.13(m，14H，Ar-H，NH)，3.92(s，6H，OCH3)，3.18(s，2H，COCH2)，2.56-2.70(m，8H，N(CH2CH2)2N)，2.36(s，3H，NCH3)。MS(ESI，m/z)：539.4[M+H]+。
實(shí)施例14
4-(4-甲氧基苯基)-6-(4-羥基苯基)-2-(4-(2-(4-甲基哌嗪基)乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-6b)和4，6-二(4-羥基苯基)-2-(4-(2-(4-甲基哌嗪基)乙酰胺基)苯胺基)嘧啶(I-6c)的合成
合成方法同實(shí)施例4得黃色固體I-6b(36mg，36.9％)。mp 142-144℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.03(s，1H，OH)，9.58(s，1H，CONH)，9.50(s，1H，NH)，6.91-8.28(m，13H，Ar-H)，3.85(s，3H，OCH3)，3.09(s，2H，COCH2)，2.40-2.50(m，8H，N(CH2CH2)2N)，2.18(s，3H，NCH3)。MS(ESI，m/z)：525.4[M+H]+。
黃色固體I-6c(23mg，24.2％)。mp 295-300℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.03(s，2H，OH)，9.58(s，1H，CONH)，9.45(s，1H，NH)，6.91-8.17(m，13H，Ar-H)，3.10(s，2H，COCH2)，2.41-2.51(m，8H，N(CH2CH2)2N)，2.19(s，3H，NCH3)。MS(ESI，m/z)：511.4[M+H]+。
實(shí)施例15
4，6-二(4-甲氧基苯基)-2-(4-(2-二甲胺基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-1a)的合成
合成方法同實(shí)施例3得黃色固體II-1a(0.19g，57.8％)。mp 146-148℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：6.69-8.12(m，14H，Ar-H，NH)，4.09-4.13(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.76)，3.91(s，6H，OCH3)，2.74-2.78(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.76)，2.37(s，6H，N(CH3)2)。MS(ESI，m/z)：471.3[M+H]+。
實(shí)施例16
4-(4-甲氧基苯基)-6-(4-羥基苯基)-2-(4-(2-二甲胺基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-1b)和4，6-二(4-羥基苯基)-2-(4-(2-二甲胺基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-1c)的合成
合成方法同實(shí)施例4得黃色固體II-1b(18mg，18.6％)。mp 145-147℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.02(s，1H，OH)，9.37(s，1H，NH)，6.89-8.27(m，13H，Ar-H)，4.03-4.07(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.73)，3.85(s，3H，OCH3)，2.66-2.70(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.61)，2.49(s，6H，N(CH3)2)。MS(ESI，m/z)：443.3[M+H]+。
黃色固體II-1c(23mg，24.5％)。mp 149-151℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.02(s，2H，OH)，9.32(s，1H，NH)，6.89-8.15(m，13H，Ar-H)，4.08-4.12(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.52)，2.84-2.88(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.34)，2.40(s，6H，N(CH3)2)。MS(ESI，m/z)：443.3[M+H]+。
實(shí)施例17
4，6-二(4-甲氧基苯基)-2-(4-(2-二乙胺基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-2a)的合成
合成方法同實(shí)施例3得黃色固體II-2a(0.23g，66.0％)。mp 98-101℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：6.93-8.11(m，14H，Ar-H，NH)，4.06-4.10(t，2H，OCH2CH2N，J＝6.36)，3.89(s，6H，OCH3)，2.88-2.93(t，2H，OCH2CH2N，J＝6.33)，2.64-2.71(q，4H，N(CH2CH3)2，J＝7.14)，1.08-1.13(t，6H，N(CH2CH3)2，J＝7.11)。MS(ESI，m/z)：499.4[M+H]+。
實(shí)施例18
4-(4-甲氧基苯基)-6-(4-羥基苯基)-2-(4-(2-二乙胺基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-2b)和4，6-二(4-羥基苯基)-2-(4-(2-二乙胺基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-2c)的合成
合成方法同實(shí)施例4得黃色固體II-2b(14mg，14.5％)。mp 232-236℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.03(s，1H，OH)，9.38(s，1H，NH)，6.90-8.27(m，13H，Ar-H)，4.10(brs，2H，OCH2CH2N)，3.85(s，3H，OCH3)，3.23(brs，2H，OCH2CH2N)，2.77(brs，4H，N(CH2CH3)2)，1.16(brs，6H，N(CH2CH3)2)。MS(ESI，m/z)：485.2[M+H]+。
黃色固體II-2c(29mg，30.8％)。mp 132-134℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：10.01(s，2H，OH)，9.32(s，1H，NH)，6.90-8.16(m，13H，Ar-H)，4.02-4.06(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.82)，2.86(brs，2H，OCH2CH2N)，2.65(brs，4H，N(CH2CH3)2)，0.99-1.04(t，6H，N(CH2CH3)2，J＝7.05)。MS(ESI，m/z)：471.3[M+H]+。
實(shí)施例19
4，6-二(4-甲氧基苯基)-2-(4-(2-吡咯烷基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-3a)的合成
合成方法同實(shí)施例3得黃色固體II-3a(0.17g，49.0％)。mp 113-116℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：6.89-8.05(m，14H，Ar-H，NH)，4.06-4.10(t，2H，OCH2CH2N，J＝6.00)，3.83(s，6H，OCH3)，2.85-2.89(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.94)，2.60(brs，4H，2，5-pyrrolidyl-H)，1.77(brs，4H，3，4-pyrrolidyl-H)。MS(ESI，m/z)：497.2[M+H]+。
實(shí)施例20
4-(4-甲氧基苯基)-6-(4-羥基苯基)-2-(4-(2-吡咯烷基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-3b)和4，6-二(4-羥基苯基)-2-(4-(2-吡咯烷基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-3c)的合成
合成方法同實(shí)施例4得黃色固體II-3b(17mg，17.5％)。mp 107-110℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.02(s，1H，OH)，9.35(s，1H，NH)，6.90-8.27(m，13H，Ar-H，)，4.06-4.10(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.70)，3.84(s，3H，OCH3)，2.88-2.92(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.25)，2.65(brs，4H，2，5-pyrrolidyl-H)，1.72(brs，4H，3，4-pyrrolidyl-H)。MS(ESI，m/z)：483.3[M+H]+。
黃色固體II-3c(23mg，24.4％)。mp 147-150℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：9.99(s，2H，OH)，9.30(s，1H，NH)，6.89-8.15(m，13H，Ar-H，)，4.06-4.10(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.76)，2.88(brs，2H，OCH2CH2N)，2.64(brs，4H，2，5-pyrrolidyl-H)，1.72(brs，4H，3，4-pyrrolidyl-H)。MS(ESI，m/z)：469.3[M+H]+。
實(shí)施例21
4，6-二(4-甲氧基苯基)-2-(4-(2-哌啶基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-4a)的合成
合成方法同實(shí)施例3得黃色固體II-4a(0.18g，50.4％)。mp 109-111℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：6.91-8.10(m，14H，Ar-H，NH)，4.16(brs，2H，OCH2CH2N)，3.87(s，6H，OCH3)，2.84(brs，2H，OCH2CH2N)，2.59(brs，4H，2，6-piperidyl-H)，1.67(brs，4H，3，5-piperidyl-H)，1.47(brs，2H，4-piperidyl-H)。MS(ESI，m/z)：511.4[M+H]+。
實(shí)施例22
4-(4-甲氧基苯基)-6-(4-羥基苯基)-2-(4-(2-哌啶基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-4b)和4，6-二(4-羥基苯基)-2-(4-(2-哌啶基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-4c)的合成
合成方法同實(shí)施例4得黃色固體II-4b(20mg，20.6％)。mp 96-99℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.03(s，1H，OH)，9.36(s，1H，NH)，6.90-8.27(m，13H，Ar-H)，4.05-4.09(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.58)，3.85(s，3H，OCH3)，2.73(brs，2H，OCH2CH2N)，1.53(brs，4H，3，5-piperidyl-H)，1.39(brs，2H，4-piperidyl-H)。MS(ESI，m/z)：497.4[M+H]+。
黃色固體II-4c(19mg，20.1％)。mp 148-150℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：10.03(s，2H，OH)，9.32(s，1H，NH)，6.90-8.15(m，13H，Ar-H)，4.09(brs，2H，OCH2CH2N)，2.79(brs，2H，OCH2CH2N)，2.58(brs，4H，3，5-piperidyl-H)，1.55(brs，4H，3，5-piperidyl-H)，1.41(brs，2H，4-piperidyl-H)。MS(ESI，m/z)：483.4[M+H]+。
實(shí)施例23
4，6-二(4-甲氧基苯基)-2-(4-(2-嗎啉基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-5a)的合成
合成方法同實(shí)施例3得黃色固體II-5a(0.21g，58.6％)。mp 107-109℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：6.88-8.05(m，14H，Ar-H，NH)，4.06-4.10(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.76)，3.84(s，6H，OCH3)，3.69-3.72(t，4H，N(CH2CH2)2O，J＝4.80)，2.75-2.79(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.67)，2.53-2.56(t，4H，N(CH2CH2)2O，J＝4.32)。MS(ESI，m/z)：513.2[M+H]+。
實(shí)施例24
4-(4-甲氧基苯基)-6-(4-羥基苯基)-2-(4-(2-嗎啉基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-5b)和4，6-二(4- 羥基苯基)-2-(4-(2-嗎啉基乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-5c)的合成
合成方法同實(shí)施例4得黃色固體II-5b(15mg，15.4％)。mp 101-103℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：9.93(s，1H，OH)，9.29(s，1H，NH)，6.82-8.19(m，13H，Ar-H)，3.98-4.02(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.94)，3.78(s，3H，OCH3)，3.50-3.53(t，4H，N(CH2CH2)2O，J＝4.02)，2.59-2.63(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.55)，2.43(brs，4H，N(CH2CH2)2O)。MS(ESI，m/z)：499.3[M+H]+。
黃色固體II-5c(17mg，18.0％)。mp 225-227℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：9.90(s，2H，OH)，9.23(s，1H，NH)，6.82-8.08(m，13H，Ar-H)，3.98-4.02(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.55)，3.50-3.53(t，4H，N(CH2CH2)2O，J＝4.32)，2.59-2.63(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.49)，2.43(brs，4H，N(CH2CH2)2O)。MS(ESI，m/z)：485.2[M+H]+。
實(shí)施例25
4，6-二(4-甲氧基苯基)-2-(4-(2-(4-甲基哌嗪基)乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-6a)的合成
合成方法同實(shí)施例3得黃色固體II-6a(0.19g，51.6％)。mp 142-144℃；1H-NMR(300MHz，CDCl3)：6.93-8.11(m，14H，Ar-H，NH)，4.12-4.15(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.25)，3.89(s，6H，OCH3)，2.82-2.86(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.46)，2.52-2.66(m，8H，N(CH2CH2)2N)，2.20(s，3H，NCH3)。MS(ESI，m/z)：526.4[M+H]+。
實(shí)施例26
4-(4-甲氧基苯基)-6-(4-羥基苯基)-2-(4-(2-(4-甲基哌嗪基)乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-6b)和4，6-二(4-羥基苯基)-2-(4-(2-(4-甲基哌嗪基)乙氧基)苯胺基)嘧啶(II-6c)的合成
合成方法同實(shí)施例4得黃色固體II-6b(19mg，19.6％)。mp 78-81℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：9.94(s，1H，OH)，9.29(s，1H，NH)，6.83-8.20(m，13H，Ar-H)，3.96-4.00(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.55)，3.78(s，3H，OCH3)，2.59-2.63(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.37)，2.19-2.43(m，8H，N(CH2CH2)2N)，2.09(s，3H，NCH3)。MS(ESI，m/z)：512.1[M+H]+。
黃色固體II-6c(21mg，22.2％)。mp 151-154℃；1H-NMR(300MHz，DMSO-d6)：9.94(s，2H，OH)，9.24(s，1H，NH)，6.82-8.08(m，13H，Ar-H)，3.96-4.00(t，2H，OCH2CH2N，J＝6.00)，2.59-2.63(t，2H，OCH2CH2N，J＝5.31)，2.29-2.43(m，8H，N(CH2CH2)2N)，2.12(s，3H，NCH3)。MS(ESI，m/z)：498.1[M+H]+。