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一種Cohn組分四血漿功能蛋白提純的方法與流程

文檔序號(hào):12342422閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種從Cohn組分四中提純血漿功能蛋白的方法,其特征在于,所述方法利用層析原理,同一流程梯度分離多種蛋白。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述血漿功能蛋白包括白蛋白、抗凝血酶III、銅藍(lán)蛋白、α1-抗胰蛋白酶、載脂蛋白B、轉(zhuǎn)鐵蛋白、載脂蛋白E、載脂蛋白A-I。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述血漿功能蛋白提取純度均≥98%。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于,所述方法包括下列步驟:

(1)Cohn組分四預(yù)處理,分離去除助濾劑與雜蛋白得到上清液;

(2)上清液經(jīng)過(guò)層析柱,通過(guò)洗脫液梯度洗脫分離,依次收集血漿功能蛋白;

(3)滅菌,加入凍干保護(hù)劑冷凍干燥,得各功能蛋白干粉。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述的方法步驟(2)中層析柱的填料包括:Sephadex系列凝膠過(guò)濾填料、Superdex系列凝膠過(guò)濾填料、Sephacryl系列凝膠過(guò)濾填料、Sepharose系列凝膠過(guò)濾填料、Superose系列凝膠過(guò)濾填料、Sepharose基架離子交換填料、Source基架離子交換填料、Capto基架離子交換填料、Sephadex基架離子交換填料、Source15系列疏水層析填料、Sepharose系列疏水層析填料。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述的方法步驟(2)中洗脫液為pH 1.0~11.0的緩沖溶液,包括下列一種或者多種:馬來(lái)酸緩沖液、丙二酸緩沖液、檸檬酸緩沖液、乳酸緩沖液、甲酸緩沖液、丁二酸緩沖液、乙酸緩沖液、丙二酸緩沖液、磷酸鹽緩沖液、哌嗪緩沖液、L-組氨酸緩沖液、Tris緩沖液、三乙醇胺緩沖液、二乙醇胺緩沖液、乙醇胺緩沖液以及雙胺丙烷緩沖液。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述方法步驟(3)中所述滅菌方法包括下列一種或者多種:巴斯德消毒法、干熱法、膜過(guò)濾法以及低pH孵放法。

8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法,其特征在于,所述方法步驟(3)中凍干保護(hù)劑包括下列一種或者多種:甘露醇、乳糖、葡萄糖、海藻糖、山梨醇以及蔗糖;其含量為0%~25%。

9.根據(jù)權(quán)利要求1-4所述的方法,其特征在于,所述方法分離純化的功能蛋白干粉可通過(guò)生理鹽水或5%葡萄糖溶液復(fù)溶后用于疾病的治療與預(yù)防:動(dòng)脈粥樣硬化、冠心病、急性心肌梗塞、睡眠呼吸暫停低通氣綜合征、內(nèi)毒素血癥、肝損傷、肝硬化、阿爾茨海默病以及先天性無(wú)轉(zhuǎn)鐵蛋白血癥。

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