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低血清高效培養(yǎng)豬肺炎支原體培養(yǎng)基及其制備方法與流程

文檔序號:12108485閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種低血清高效培養(yǎng)豬肺炎支原體培養(yǎng)基,其特征在于,包括基礎(chǔ)培養(yǎng)基及添加包,所述基礎(chǔ)培養(yǎng)基包括:M199、腦浸出粉、水解乳蛋白、BSA、葡萄糖、新鮮酵母提取物、Hepes、檸檬酸鐵、氯化鈣.2H2O、酚紅、dd H2O,所述添加包的組份包括膽固醇、亞油酸、亞麻酸、軟脂酸、乙醇、豬血清。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低血清高效培養(yǎng)豬肺炎支原體培養(yǎng)基,其特征在于,所述M199的質(zhì)量濃度為5-17g/L,所述腦浸出粉的質(zhì)量濃度為3-15g/L,所述水解乳蛋白的質(zhì)量濃度為0.5-3g/L,所述BSA的質(zhì)量濃度為2-8g/L,所述葡萄糖的質(zhì)量濃度為4-8g/L,所述新鮮酵母提取物的質(zhì)量濃度為3-60g/L,所述Hepes的質(zhì)量濃度為1-5g/L,所述檸檬酸鐵的質(zhì)量濃度為0.01-5g/L,所述氯化鈣.2H2O的質(zhì)量濃度為0.01-5g/L,所述酚紅的濃度為1-6ml/L,所述dd H2O的質(zhì)量濃度為500-2000ml/L,。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低血清高效培養(yǎng)豬肺炎支原體培養(yǎng)基,其特征在于,所述膽固醇的質(zhì)量濃度為50-90mg/L、所述亞油酸的質(zhì)量濃度為30-100mg/L、所述亞麻酸的質(zhì)量濃度為30-100mg/L、所述軟脂酸的質(zhì)量濃度為30-100mg/L、所述乙醇的濃度為10-15ml/L、所述豬血清的濃度為30-100mg/L。

4.一種利用要求1至3中任意一種所述的低血清高效培養(yǎng)豬肺炎支原體培養(yǎng)基的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:

步驟一、配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基:按照基礎(chǔ)培養(yǎng)基組分配方配制基礎(chǔ)培養(yǎng)基;

步驟二、PH值調(diào)節(jié):用1mol/L氫氧化鈉溶液調(diào)整pH至7.4-7.6;

步驟三、滅菌:對基礎(chǔ)培養(yǎng)基進(jìn)行高溫消毒;

步驟四、加入添加包:無菌條件下加入添加包,即制得成品。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的低血清高效培養(yǎng)豬肺炎支原體培養(yǎng)基,其特征在于,所述步驟四中添加包的制備方法具體為:

步驟一、在一個(gè)容器中加5-30ml的無水乙醇,并且將其溫度控制在10-60℃;

步驟二、將膽固醇、亞油酸、亞麻酸、軟脂酸及乙醇的組分緩慢加入;

步驟三、在恒溫條件下對添加包混合組分進(jìn)行震蕩或攪拌至完全溶解;

步驟四、將步驟三中的溶液冷卻至室溫,同時(shí)加入豬血清;

步驟五、配制好后過濾。

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