本發(fā)明涉及一種葡萄糖醚類化合物即2-(乙酰氧基甲基)-6-(取代苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯類化合物及其制備與應(yīng)用。
(二)
背景技術(shù)：
葡萄糖類化合物在未來新農(nóng)藥發(fā)展中具有較好的發(fā)展前景，而在葡萄糖類化合物中，葡萄糖醚類衍生物占據(jù)較重要的部分。2-(乙酰氧基甲基)-6-(取代苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯類化合物也有很重要的生物活性，可誘導(dǎo)植物產(chǎn)生主動免疫，對煙草花葉病毒、稻瘟病病菌、黑脛病、核盤霉菌、炭疽病等具有廣譜抗性。在農(nóng)藥方面的應(yīng)用，已經(jīng)成為了近年來越來越熱門的研究領(lǐng)域之一。因此，探索2-(乙酰氧基甲基)-6-(取代苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯類化合物的合成，具有重要的理論和應(yīng)用價值。
然而，關(guān)于2-(乙酰氧基甲基)-6-(取代苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯類衍生物的合成及其生物活性研究鮮有文獻報道。
(三)
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明目的在于提供一種具有植物誘導(dǎo)抗性的2-(乙酰氧基甲基)-6-(取代苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯類衍生物及其制備方法與應(yīng)用。
本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
式(I)所示的葡萄糖醚類化合物：
式(I)中：R為甲氧基、硝基、氨基、羧基、醛基、甲酰基、C1～3的烷基、鹵素及被鹵素取代的C1～3的烷基，n為1～5。
進一步，優(yōu)選所述式(I)所示的R選自下列之一：3-甲氧基、4-硝基、3-氨基、4-羧基、2-醛基、2-甲基、3-甲基、4-甲基、2，5-二甲基、2，6-二甲基、3，5-二甲基、4-異丙基、2-氯、4-氯、2，3，4，5，6-五氯或4-氯-3-甲基。
本發(fā)明所述式(I)所示的化合物的制備方法按如下步驟進行：
(a)將式(II)所示的化合物和式(III)所示的化合物混合完全，電磁攪拌，于110℃下反應(yīng)，通過TLC監(jiān)測反應(yīng)完全后，待反應(yīng)混合物冷卻至室溫，將其分批倒入冰水中，劇烈攪拌，加入飽和碳酸氫鈉溶液，待溶液無明顯氣泡產(chǎn)生后靜置過濾，用少量冰水洗滌沉淀，將濾餅重結(jié)晶，所得固體經(jīng)過濾、干燥得到式(IV)所示的中間體五乙酯葡萄糖；所述式(II)所示的化合物與式(III)所示的化合物的物質(zhì)的量之比為1∶2～1000；
(b)將步驟(a)所得式(IV)所示的中間體五乙酯葡萄糖溶于有機溶劑A中，電磁攪拌，在冰浴下加入溴化劑，在室溫下反應(yīng)，通過TLC監(jiān)測反應(yīng)完全后，加入三氯甲烷萃火，再將反應(yīng)混合物緩慢倒入大量冰水中，并不斷攪拌，靜置分層，取下層液用飽和碳酸氫鈉溶液除酸，再用無水硫酸鈉干燥，減壓過濾，取濾液進行旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到粘稠狀半固體，將所述粘稠狀半固體重結(jié)晶，收集重結(jié)晶進行減壓過濾，得濾餅干燥得到式(V)所示的一溴代化合物；所述溴化劑的體積用量以式(IV)所示的化合物的物質(zhì)的量計為1∶1～20mL/mmol；
(c)將步驟(b)所得式(V)所示的一溴代化合物和式(VI)所示的化合物與有機溶劑C混合完全，加入碘化鉀和碳酸鉀，在50℃條件下，氮氣保護下攪拌反應(yīng)，通過TLC監(jiān)測反應(yīng)完全后，將混合物減壓過濾除去固體，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)得到褐色半固體，將其重結(jié)晶，減壓過濾，濾餅干燥即得式(I)所示的化合物；所述式(V)所示的化合物、式(VI)所示的化合物、碘化鉀、碳酸鉀的物質(zhì)的量之比為1∶1.0～1.1∶0.1～1.5∶1～2。
進一步，所述方法中所述步驟(b)及步驟(c)中所述重結(jié)晶均以無水乙醇或乙醚為重結(jié)晶溶劑。
進一步，所述步驟(b)所述有機溶劑A選自下列之一：冰醋酸；再進一步，所述有機溶劑A的體積用量以式(IV)所示的中間體五乙酯葡萄糖的質(zhì)量計為15～25mL/mmol。
進一步，所述步驟(b)所述溴化劑為三溴化磷、溴素、三溴氧磷或五溴化磷。
進一步，所述步驟(a)得到的式(IV)所示的中間體五乙酯葡萄糖及所述步驟(b)得到式(V)所示的一溴代化合物的純度均通過HPLC測定；再進一步，所述純度均為99％以上。
再進一步，所述步驟(c)所述有機溶劑B選自下列之一：乙腈、四氫呋喃、二氧六環(huán)或乙醚；更進一步，所述有機溶劑B的體積用量以式(V)所示的化合物的物質(zhì)的量計為2～10mL/mmol。
再進一步，本發(fā)明提供式(I)所示的葡萄糖醚類化合物在防治黃瓜細菌性角斑病、黃瓜褐斑病、黃瓜灰霉病、黃瓜炭疽病中的應(yīng)用。
更進一步，本發(fā)明推薦優(yōu)選R為4-異丙基的式(I)所示的化合物在防治黃瓜灰霉病中的應(yīng)用。
更進一步，本發(fā)明推薦優(yōu)選R為2，5-二甲基的式(I)所示的化合物在防治黃瓜炭疽病中的應(yīng)用。
本發(fā)明提供含有式(I)所示的葡萄糖醚類化合物的植物誘抗劑，其還包含至少一種農(nóng)藥上可接受的助劑。
與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在：本發(fā)明提供了一種葡萄糖醚類化合物及中間體的其制備方法及應(yīng)用，該化合物為具有植物誘導(dǎo)抗性的新化合物，為新農(nóng)藥的研發(fā)提供了基礎(chǔ)。
(四)具體實施方式
下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明進行進一步描述，但本發(fā)明的保護范圍并不僅限于此：
本發(fā)明實施例所述中間產(chǎn)物純度均為99％以上，按照100％來計算。
本發(fā)明的葡萄糖醚類化合物(I)具體按照如下步驟進行合成：
(a)取無水乙酸鈉加入干燥潔凈的100mL三口燒瓶中，加入式(III)所示的化合物III，攪拌加熱至110℃。繼續(xù)攪拌20min，分批緩慢加入式(II)所示的化合物II，待固體溶解，溶液變澄清后繼續(xù)攪拌2h，TLC監(jiān)測，原料點消失后關(guān)閉加熱器。將反應(yīng)混合物在室溫下冷卻，冷至室溫后有大量固體析出。然后將混合物分批移入200mL冰水中，劇烈攪拌，并緩慢加入飽和碳酸氫鈉水溶液，待溶液中無明顯氣泡產(chǎn)生后靜置10min。隨后減壓過濾，用少量冰水洗滌沉淀3次，用無水乙醇重結(jié)晶2次，將重結(jié)晶所得固體減壓過濾，干燥，得式(IV)所示的中間體IV；
(b)取步驟(a)所得式(IV)所示的中間體IV加入干燥潔凈的50mL圓底燒瓶中，加入有機溶劑A，使其完全溶解，然后在冰浴條件下，分三次滴加溴化劑，在室溫下攪拌，反應(yīng)過夜。反應(yīng)完成后向混合物中加入三氯甲烷淬火，攪拌30min，然后將混合物倒入大量冰水中，攪拌30min，靜置分液，取下層液。上層液加入三氯甲烷再次萃取，合并下層液。下層液先用飽和碳酸氫鈉溶液除酸，再用無水硫酸鈉干燥，然后減壓過濾，濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、冷卻后得粘稠狀固體，用少量乙醚重結(jié)晶，然后減壓過濾，在過濾的同時用乙醚洗滌濾餅，濾餅烘干得式(V)所示的化合物V；
(c)取步驟(b)所得式(V)所示的化合物V加入到100mL干燥潔凈的圓底燒瓶中，再依次加入式(VI)所示的化合物VI、碘化鉀、碳酸鉀，最后加入有機溶劑B，在氮氣保護下，50℃水浴加熱下攪拌反應(yīng)，TLC監(jiān)測，待反應(yīng)完全后，將混合物減壓抽濾除去固體，將得到的濾液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)并用無水乙醇重結(jié)晶，減壓過濾，烘干得固體粉末化合物I。
所述反應(yīng)步驟中具體加入的物質(zhì)及配比條件如下表所示：
實施例1(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(3-(三氟甲氧基)苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F1)：白色粉末，產(chǎn)率65.1％，熔點123～124℃；1H NMR(500MHz，CDCl3)δ：2.05(s，3H，-CH3)，2.08(s，3H，-CH3)，2.10(s，3H，-CH3)，2.13(s，3H，-CH3)，3.88-3.92(m，1H，-CH)，4.18-4.21(m，1H，-CH2-)，4.25-4.28(m，1H，-CH2-)，5.09-5.10(d，J＝7.4Hz，1H，-CH)，5.14-5.18(t，J＝5.0Hz，1H，-CH)，5.26-5.34(m，2H，-CH)，6.89-6.97(m，3H，Ph-H)，7.30-7.34(t，J＝16.8Hz，1H，Ph-H).
實施例2
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(2，5-二甲基苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F2)：棕黃色粉末，產(chǎn)率31.2％，熔點171～172℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：2.03(s，3H，-CH3)，2.05(s，3H，-CH3)，2.10(s，3H，-CH3)，2.11(s，3H，-CH3)，3.85-3.90(m，1H，-CH)，4.14-4.19(m，1H，-CH2-)，4.27-4.31(m，1H，-CH2-)，5.10-5.11(d，J＝7.5Hz，1H，-CH)，5.17-5.21(m，1H，-CH)，5.28-5.37(m，1H，-CH)，5.57-5.61(m，1H，-CH)，7.04-7.09(m，2H，Ph-H)，7.48(s，1H，Ph-H).
實施例3
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(3-氨基苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F3)：棕黃色粉末，產(chǎn)率36.5％，熔點181～182℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：2.01(s，3H，-CH3)，2.03(s，3H，-CH3)，2.07(s，3H，-CH3)，2.09(s，3H，-CH3)，3.72-3.77(m，1H，-CH)，4.08-4.13(m，1H，-CH2-)，4.21-4.28(m，1H，-CH2-)，4.74-4.75(d，J＝8.0Hz，1H，-CH)，5.10-5.15(m，1H，-CH)，5.23-5.34(m，1H，-CH)，5.47-5.56(m，1H，-CH)，6.23(s，2H，-NH2)，6.27-6.32(m，1H，Ph-H)，6.63-6.70(m，1H，Ph-H)，6.97-6.99(m，1H，Ph-H)，7.12(s，1H，Ph-H).
實施例4
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(4-異丙基苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F4)：棕黃色粉末，產(chǎn)率34.2％，熔點165～166℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：0.91(s，6H，-CH3)，2.03(s，3H，-CH3)，2.05(s，3H，-CH3)，2.10(s，3H，-CH3)，2.11(s，3H，-CH3)，2.21-2.26(m，1H，-CH)，3.95-3.98(m，1H，-CH)，4.16-4.21(m，1H，-CH2-)，4.30-4.35(m，1H，-CH2-)，4.85-4.89(m，1H，-CH)，5.08-5.10(m，2H，-CH)，5.50-5.67(m，1H，-CH)，6.59-6.60(d，J＝8.8Hz，2H，Ph-H)，7.02-7.11(m，2H，Ph-H).
實施例5
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(2-甲酰基苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F5)：棕黃色粉末，產(chǎn)率36.4％，熔點170～171℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：1.99(s，3H，-CH3)，2.02(s，3H，-CH3)，2.04(s，3H，-CH3)，2.08(s，3H，-CH3)，3.87-3.91(m，1H，-CH)，4.07-4.09(m，1H，-CH2-)，4.24-4.29(m，1H，-CH2-)，4.85-4.87(m，1H，-CH)，5.11-5.19(m，1H，-CH)，5.42-5.44(m，1H，-CH)，5.52-5.53(d，J＝4.3Hz，1H，-CH)，6.94-7.01(m，1H，Ph-H)，7.08-7.15(m，1H，Ph-H)，7.48-7.50(m，1H，Ph-H)，7.81-7.87(m，1H，Ph-H)，9.87(s，1H，-CHO).
實施例6
4-(((2S，3R，4R，5S，6R)-3，4，5-三甲氧基-6-(乙酰氧基甲基)四氫-2H-吡喃-2-基)氧基)苯甲酸(F6)：棕黃色粉末，產(chǎn)率38.5％，熔點157～158℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：2.03(s，3H，-CH3)，2.05(s，3H，-CH3)，2.10(s，3H，-CH3)，2.11(s，3H，-CH3)，3.75-3.78(m，1H，-CH)，4.13-4.18(m，1H，-CH2-)，4.24-4.29(m，1H，-CH2-)，4.87-4.92(m，1H，-CH)，5.08-5.12(m，1H，-CH)，5.49-5.57(m，1H，-CH)，5.86-5.89(m，1H，-CH)，7.48-7.55(m，2H，Ph-H)，7.72-7.74(m，2H，Ph-H).
實施例7
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(4-硝基苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F7)：棕黃色粉末，產(chǎn)率54.9％，熔點167～168℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：1.98(s，3H，-CH3)，2.02(s，3H，-CH3)，2.03(s，3H，-CH3)，2.04(s，3H，-CH3)，4.07-4.10(m，1H，-CH)，4.18-4.22(m，1H，-CH2-)，4.30-4.33(m，1H，-CH2-)，5.02-5.06(t，J＝9.7Hz，1H，-CH)，5.11-5.14(m，1H，-CH-)，5.41-5.45(m，1H，-CH)，5.80-5.82(d，J＝8Hz，1H，-CH)，7.20-7.22(m，2H，Ph-H)，8.25-8.27(m，2H，Ph-H).
實施例8
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(2，3，4，5，6-五氯苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F8)：白色粉末，產(chǎn)率56.7％，熔點150～151℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：1.89(s，3H，-CH3)，1.98(s，3H，-CH3)，2.04(s，3H，-CH3)，2.07(s，3H，-CH3)，3.98-4.05(m，1H，-CH)，4.11-4.15(m，1H，-CH2-)，4.32-4.37(m，1H，-CH2-)，4.96-5.00(t，J＝9.7Hz，1H，-CH)，5.13-5.17(t，J＝9.4Hz，1H，-CH)，5.38-5.41(t，J＝9.6Hz，1H，-CH)，5.55-5.56(d，J＝7.8Hz，1H，-CH).
實施例9
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(2，6-二甲基苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F9)：淡黃色粉末，產(chǎn)率32.5％，熔點179～181℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：2.02(s，3H，-CH3)，2.05(s，3H，-CH3)，2.09(s，3H，-CH3)，2.11(s，3H，-CH3)，2.24(s，3H，-CH3)，2.32(s，3H，-CH3)，3.89-3.93(m，1H，-CH)，4.09-4.13(m，1H，-CH2-)，4.22-4.24(m，1H，-CH2-)，4.68-4.75(m，1H，-CH)，4.89-4.92(m，1H，-CH)，5.10-5.16(m，1H，-CH)，5.52-5.56(m，1H，-CH)，6.73-6.76(m，1H，Ph-H)，6.96-6.98(m，2H，Ph-H).
實施例10
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(3-甲基苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F10)：棕黃色粉末，產(chǎn)率34.5％，熔點161～163℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：1.91(s，3H，-CH3)，1.96(s，3H，-CH3)，2.0(s，3H，-CH3)，2.03(s，3H，-CH3)，2.71(s，3H，-CH3)，3.94-3.98(m，1H，-CH)，4.11-4.15(m，1H，-CH2-)，4.32-4.38(m，1H，-CH2-)，4.72-4.75(m，1H，-CH)，4.81-4.88(m，1H，-CH)，5.18-5.21(m，1H，-CH)，5.48-5.56(m，1H，-CH)，6.68-6.70(d，J＝8.5Hz，1H，Ph-H)，6.97-6.99(m，1H，Ph-H)，7.29-7.34(d，J＝9.5Hz，2H，Ph-H).
實施例11
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(4-氯苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F11)：棕黃色粉末，產(chǎn)率36.2％，熔點128～129℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：1.98(s，3H，-CH3)，2.00(s，3H，-CH3)，2.03(s，3H，-CH3)，2.05(s，3H，-CH3)，4.00-4.01(d，J＝5.8Hz，1H，-CH)，4.07-4.18(m，2H，-CH2-)，4.69-4.72(d，J＝13.5Hz，1H，-CH)，4.97-5.04(m，1H，-CH)，5.32-5.39(m，1H，-CH)，5.56-5.58(d，J＝7.9Hz，1H，-CH)，7.01-7.03(d，J＝8.9Hz，2H，Ph-H)，7.39-7.40(d，J＝8.8Hz，2H，Ph-H).
實施例12
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(4-甲基苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F12)：棕黃色粉末，產(chǎn)率38.4％，熔點141～142℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：1.87(s，3H，-CH3)，1.96(s，3H，-CH3)，2.01(s，3H，-CH3)，2.03(s，3H，-CH3)，3.97-4.01(m，1H，-CH)，4.11-4.13(d，J＝9.4Hz，1H，-CH2-)，4.32-4.36(m，1H，-CH2-)，4.69-4.72(m，1H，-CH)，4.85-4.90(m，1H，-CH)，5.21-5.23(d，J＝9.8Hz，1H，-CH)，5.32-5.36(m，1H，-CH)，6.84-6.90(m，2H，Ph-H)，7.29-7.34(d，J＝24.5Hz，2H，Ph-H).
實施例13
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(3，5-二甲基苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F13)：棕黃色粉末，產(chǎn)率33.3％，熔點149～151℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：1.96(s，3H，-CH3)，1.98(s，3H，-CH3)，2.00(s，3H，-CH3)，2.02(s，3H，-CH3)，2.23(s，6H，-CH3)，3.99-4.01(m，1H，-CH)，4.11-4.13(d，J＝9.4Hz，2H，-CH2-)，4.69-4.72(m，1H，-CH)，4.85-4.93(m，1H，-CH)，5.22-5.24(d，J＝9.7Hz，1H，-CH)，5.31-5.37(m，1H，-CH)，6.86(s，1H，Ph-H)，7.22(s，1H，Ph-H)，7.33(s，1H，Ph-H).
實施例14
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(2-甲基苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F14)：棕黃色粉末，產(chǎn)率34.1％，熔點168～169℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：1.98(s，3H，-CH3)，2.00(s，3H，-CH3)，2.02(s，3H，-CH3)，2.04(s，3H，-CH3)，2.35(s，6H，-CH3)，3.97-4.01(m，1H，-CH)，4.11-4.16(m，2H，-CH2-)，4.70-4.72(d，J＝10.7Hz，1H，-CH)，4.91-5.00(m，1H，-CH)，5.02-5.21(m，1H，-CH)，5.33-5.35(m，1H，-CH)，6.96-7.04(m，1H，Ph-H)，7.16-7.17(d，J＝6.9Hz，1H，Ph-H)，7.28-7.30(d，J＝8.3Hz，1H，Ph-H)，7.31-7.34(d，J＝14.4Hz，1H，Ph-H).
實施例15
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(4-氯-3-甲基苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F15)：棕黃色粉末，產(chǎn)率32.1％，熔點167～169℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：1.95(s，3H，-CH3)，1.97(s，3H，-CH3)，2.00(s，3H，-CH3)，2.02(s，3H，-CH3)，2.36(s，3H，-CH3)，3.99-4.07(m，1H，-CH)，4.10-4.15(m，2H，-CH2-)，4.65-4.69(m，1H，-CH)，4.97-5.03(m，1H，-CH)，5.37-5.39(m，1H，-CH)，5.53-5.56(m，1H，-CH)，6.85(s，1H，Ph-H)，7.00(s，1H，Ph-H)，7.34-7.36(d，J＝8.7Hz，1H，Ph-H).
實施例16
(2S，3R，4R，5S，6R)-2-(乙酰氧基甲基)-6-(2-氯苯氧基)四氫-2H-吡喃-3，4，5-三基三乙酸酯(F16)：棕黃色粉末，產(chǎn)率37.5％，熔點130～131℃；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δ：1.98(s，3H，-CH3)，2.01(s，3H，-CH3)，2.02(s，3H，-CH3)，2.03(s，3H，-CH3)，4.10-4.13(m，1H，-CH)，4.21-4.27(m，2H，-CH2-)，5.01-5.05(t，J＝9.6Hz，1H，-CH)，5.11-5.15(m，1H，-CH)，5.40-5.44(t，J＝9.6Hz，1H，-CH)，5.52-5.54(d，J＝8.1Hz，1H，-CH)，7.09-7.12(m，1H，Ph-H)，7.25-7.27(m，1H，Ph-H)，7.34-7.37(m，1H，Ph-H)，7.46-7.48(m，1H，Ph-H).
殺菌活性測試
試驗對象：黃瓜細菌性角斑病、黃瓜褐斑病、黃瓜灰霉病、黃瓜炭疽病。
試驗方法：按照供試藥劑的有效含量計算出試驗用制劑的稀釋倍數(shù)，按試驗濃度配好藥劑，均勻噴施到葉片的正背面，以葉面霧滴均勻一致為宜，每隔7天誘導(dǎo)1次，連續(xù)誘導(dǎo)3次，第3次誘導(dǎo)后24h接種，黃瓜細菌性角斑病、褐斑病、炭疽病均采用噴霧方式接種，黃瓜灰霉病采用菌苔接種技術(shù)。
藥劑準(zhǔn)備：供試藥：取藥配成100ppm，取16種上述化合物各5mg，加丙酮溶解后再加10％土溫80，最后加水充分溶解。因100ppm為100mg/L所以加水量＝5mg*1000/100mg＝50mL，因有機溶劑最終含量≤1％所以加丙酮的量＝50mL*1％＝0.5mL(溶解)，因吐溫最終含量為0.1％所以50mL水里應(yīng)有吐溫0.05mL，即：應(yīng)加10％吐溫0.05mL.
對照藥劑：
75％百菌WP1000倍液
50％腐霉WP 1000倍液
25％咪鮮胺乳油1500倍液
20％噻唑鋅懸浮劑800倍液
待清水充分發(fā)病后進行病情調(diào)查，并計算病情指數(shù)和防治效果。
表1 目標(biāo)化合物的誘抗活性
從以上結(jié)果可知，濃度為50mg/L時F10、F15對黃瓜褐斑病的防治較好；F4、F9、F11、F15對黃瓜灰霉病的防治效果較好，其中濃度為50mg/L時F4、F11對黃瓜灰霉病的防治效果比50％腐霉利可濕性粉劑更好；濃度為50mg/L時F1、F2、F3、F6對黃瓜炭疽病的防治效果較好，其中濃度為50mg/L時F2對黃瓜炭疽病的防治效果與25％咪鮮胺乳油相近；濃度為50mg/L時F14對黃瓜細菌性角斑病的防治效果較好。