本發(fā)明涉及物質(zhì)制備技術(shù)領(lǐng)域,具體為一種大黃中提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的方法。
背景技術(shù):
唐古特大黃又名雞爪大黃,耐寒力強,多生長在2000—3900米的山地林緣、灌叢、草坡地帶,冬天能耐負(fù)20℃以下的低溫。極似掌葉大黃,但本變種的葉片深裂,裂片通常窄長,呈三角狀披針形或窄線形。唐古特大黃葉片掌缺刻深裂;花小,淡黃至白色,瘦果橢圓狀三棱形,沿棱有刺,暗褐色。因唐古特大黃多為野生,故在栽培技術(shù)上應(yīng)以野生變家種為主。
傳統(tǒng)的大黃中提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的制備方法過程復(fù)雜,且提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品所需要的時間較長,費時費力,從而降低了二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的生產(chǎn)效率。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的在于提供一種大黃中提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的方法,以解決傳統(tǒng)的大黃中提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的制備方法過程復(fù)雜,且提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品所需要的時間較長,費時費力,從而降低了二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品生產(chǎn)效率的問題。
為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明提供如下技術(shù)方案:一種大黃中提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的方法,包括以下步驟:
S1、提取:選取質(zhì)量好且干凈的唐古特大黃的根進行干燥,干燥后再進行粉碎,粉碎后再進行篩選,并在預(yù)定溫度下用乙醇溶液回流提取,且提取次數(shù)為3次,每次2h,再將提取液減壓濃縮后得到粗提物。
S2、富集:將所述提取步驟中的粗提物用5-10倍去離子水充分溶解,再使用正丁醇溶液進行萃取,并將萃取后的去離子水進行過柱操作,用乙醇溶液對分離柱進行洗脫,得到洗脫液,將所述洗脫液減壓濃縮,以得到含有目標(biāo)成分的富集物。
S3、分離純化:將所述富集物通過制備色譜儀,以將富集物中的二苯乙烯苷類化合物進行分離純化。
其中,在通過制備色譜儀進行分離時,采用質(zhì)量濃度為32%的甲醇溶液進行等度洗脫。
優(yōu)選的,所述提取步驟中,乙醇溶液中乙醇的質(zhì)量濃度的范圍為50%-90%,且預(yù)定溫度的范圍為50℃-85℃,且每1g大黃的干燥的根采用10mL-15mL的乙醇溶液進行回流提取。
優(yōu)選的,所述分離純化步驟中,甲醇溶液中甲醇的質(zhì)量濃度為32%,且在通過制備色譜儀進行分離時采用的色譜柱為C18色譜柱。
優(yōu)選的,所述富集步驟中,所述分離柱采用非極性大孔樹脂柱,所述非極性大孔樹脂柱包括D101型大孔樹脂、AB-8型大孔樹脂和X-5型大孔樹脂。
優(yōu)選的,所述富集步驟中,所述乙醇溶液的體積是所述分離柱中柱床的體積的5倍-20倍。
優(yōu)選的,所述富集步驟中,所述乙醇溶液中乙醇的質(zhì)量濃度為50%-90%。
優(yōu)選的,所述富集步驟中,在采用質(zhì)量濃度為90%的乙醇溶液對分離柱進行洗脫前,依次用去離子水、質(zhì)量濃度為50%的乙醇溶液和質(zhì)量濃度為70%的乙醇溶液對分離柱進行洗脫,且所述去離子水的體積是所述分離柱中柱床的體積的5倍-20倍,所述質(zhì)量濃度為50%的乙醇溶液的體積是所述分離柱中柱床的體積的5倍-20倍,所述質(zhì)量濃度為70%的乙醇溶液的體積是所述分離柱中柱床的體積的5倍-20倍。
優(yōu)選的,所述富集步驟中,所述水和正丁醇的體積比為1:3。
與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果是:本發(fā)明通過配合制備色譜儀以及采用分離、富集和分離純化的三步操作,使二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的制備方法更加簡便和快捷,且省時省力,節(jié)約人力成本,而且節(jié)省了二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的生產(chǎn)成本,且極大的縮短了二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的制備時間,從而提高了二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的生產(chǎn)效率。
采用本發(fā)明方法獲得的單體化合物desoxyrhaponticin采用1H-NMR和1C-NMR鑒定符合其化合物結(jié)構(gòu)(參見圖3),同時,利用HPLC檢測其純度在95%以上(參見圖2)。
附圖說明
圖1本發(fā)明粗提取分離圖;
圖2本發(fā)明二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品純度檢測圖;
圖3本發(fā)明二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的結(jié)構(gòu)圖。
具體實施方式
下面將結(jié)合本發(fā)明實施例中的附圖,對本發(fā)明實施例中的技術(shù)方案進行清楚、完整地描述,顯然,所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例,而不是全部的實施例?;诒景l(fā)明中的實施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例,都屬于本發(fā)明保護的范圍。
請參閱圖1-3,本發(fā)明提供一種技術(shù)方案:一種大黃中提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的方法,包括以下步驟:
S1、提取:選取質(zhì)量好且干凈的唐古特大黃的根進行干燥,干燥后再進行粉碎,粉碎后再進行篩選,并在預(yù)定溫度下用乙醇溶液回流提取,且提取次數(shù)為3次,每次2h,再將提取液減壓濃縮后得到粗提物,且乙醇溶液中乙醇的質(zhì)量濃度的范圍為50%-90%,且預(yù)定溫度的范圍為50℃-85℃,且每1g大黃的干燥的根采用10mL-15mL的乙醇溶液進行回流提取。
S2、富集:將提取步驟中的粗提物用5-10倍去離子水充分溶解,再使用正丁醇溶液進行萃取,且水和正丁醇的體積比為1:3,并將萃取后的去離子水進行過柱操作,用乙醇溶液對分離柱進行洗脫,且乙醇溶液中乙醇的質(zhì)量濃度為50%-90%,且在采用質(zhì)量濃度為90%的乙醇溶液對分離柱進行洗脫前,依次用去離子水、質(zhì)量濃度為50%的乙醇溶液和質(zhì)量濃度為70%的乙醇溶液對分離柱進行洗脫,且去離子水的體積是分離柱中柱床的體積的5倍-20倍,質(zhì)量濃度為50%的乙醇溶液的體積是分離柱中柱床的體積的5倍-20倍,質(zhì)量濃度為70%的乙醇溶液的體積是分離柱中柱床的體積的5倍-20倍,且乙醇溶液的體積是分離柱中柱床的體積的5倍-20倍,且分離柱采用非極性大孔樹脂柱,非極性大孔樹脂柱包括D101型大孔樹脂、AB-8型大孔樹脂和X-5型大孔樹脂,得到洗脫液,將洗脫液減壓濃縮,以得到含有目標(biāo)成分的富集物。
S3、分離純化:將富集物通過制備色譜儀,以將富集物中的二苯乙烯苷類化合物進行分離純化,其中,在通過制備色譜儀進行分離時,采用質(zhì)量濃度為32%的甲醇溶液進行等度洗脫,且甲醇溶液中甲醇的質(zhì)量濃度為32%,且在通過制備色譜儀進行分離時采用的色譜柱為C18色譜柱。
實施例一
一種大黃中提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的方法,包括以下步驟:
S1、提取:選取質(zhì)量為2kg唐古特大黃的根進行干燥,干燥后再進行粉碎至約40目后,以1g:10mL的比例用質(zhì)量濃度為50%的乙醇在50℃下回流提取3次,每次提取2小時,然后將這兩次提取得到的提取液合并,再將合并后的提取液減壓濃縮,從而得到粗提物。
S2、富集:將提取步驟中的粗提物用5倍去離子水進行充分溶解,再使用正丁醇溶液進行萃取,其中水和正丁醇的體積比為1:3,將萃取的水相部分上D101型大孔吸附樹脂柱,依次用5倍柱床體積的去離子水、5倍柱床體積的質(zhì)量濃度為50%的乙醇、5倍柱床體積的質(zhì)量濃度為70%的乙醇和5倍柱床體積的質(zhì)量濃度為90%的乙醇洗脫,其中90%的乙醇洗脫部分為含有目標(biāo)成分的洗脫液,將含有目標(biāo)成分的洗脫液經(jīng)減壓濃縮至恒重,即得含有目標(biāo)成分的富集物。
S3、分離純化:將富集物通過制備色譜儀,且在通過制備色譜儀進行分離時采用的色譜柱為C18色譜柱,且采用甲醇溶液中甲醇的質(zhì)量濃度為32%,等度洗脫,即可得到二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品,且經(jīng)過鑒定其結(jié)構(gòu)式如圖3所示。
實施例二
一種大黃中提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的方法,包括以下步驟:
S1、提取:選取質(zhì)量為2kg唐古特大黃的根進行干燥,干燥后再進行粉碎至約60目后,以1g:10mL的比例用質(zhì)量濃度為60%的乙醇在60℃下回流提取3次,每次提取2小時,然后將這兩次提取得到的提取液合并,再將合并后的提取液減壓濃縮,從而得到粗提物。
S2、富集:將提取步驟中的粗提物用6倍去離子水進行充分溶解,再使用正丁醇溶液進行萃取,其中水和正丁醇的體積比為1:3,將萃取的水相部分上AB-8型大孔吸附樹脂柱,依次用8倍柱床體積的去離子水、8倍柱床體積的質(zhì)量濃度為50%的乙醇、8倍柱床體積的質(zhì)量濃度為70%的乙醇和8倍柱床體積的質(zhì)量濃度為90%的乙醇洗脫,其中90%的乙醇洗脫部分為含有目標(biāo)成分的洗脫液,將含有目標(biāo)成分的洗脫液經(jīng)減壓濃縮至恒重,即得含有目標(biāo)成分的富集物。
S3、分離純化:將富集物通過制備色譜儀,且在通過制備色譜儀進行分離時采用的色譜柱為C18色譜柱,且采用甲醇溶液中甲醇的質(zhì)量濃度為32%,等度洗脫,即可得到二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品,且經(jīng)過鑒定其結(jié)構(gòu)式如圖3所示。
實施例三
一種大黃中提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的方法,包括以下步驟:
S1、提?。哼x取質(zhì)量為2kg唐古特大黃的根進行干燥,干燥后再進行粉碎至約80目后,以1g:10mL的比例用質(zhì)量濃度為70%的乙醇在70℃下回流提取3次,每次提取2小時,然后將這兩次提取得到的提取液合并,再將合并后的提取液減壓濃縮,從而得到粗提物。
S2、富集:將提取步驟中的粗提物用7倍去離子水進行充分溶解,再使用正丁醇溶液進行萃取,其中水和正丁醇的體積比為1:3,將萃取的水相部分上X-5型大孔吸附樹脂柱,依次用10倍柱床體積的去離子水、10倍柱床體積的質(zhì)量濃度為50%的乙醇、10倍柱床體積的質(zhì)量濃度為70%的乙醇和10倍柱床體積的質(zhì)量濃度為90%的乙醇洗脫,其中90%的乙醇洗脫部分為含有目標(biāo)成分的洗脫液,將含有目標(biāo)成分的洗脫液經(jīng)減壓濃縮至恒重,即得含有目標(biāo)成分的富集物。
S3、分離純化:將富集物通過制備色譜儀,且在通過制備色譜儀進行分離時采用的色譜柱為C18色譜柱,且采用甲醇溶液中甲醇的質(zhì)量濃度為32%,等度洗脫,即可得到二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品,且經(jīng)過鑒定其結(jié)構(gòu)式如圖3所示。
實施例四
一種大黃中提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的方法,包括以下步驟:
S1、提?。哼x取質(zhì)量為2kg唐古特大黃的根進行干燥,干燥后再進行粉碎至約100目后,以1g:10mL的比例用質(zhì)量濃度為80%的乙醇在70℃下回流提取3次,每次提取2小時,然后將這兩次提取得到的提取液合并,再將合并后的提取液減壓濃縮,從而得到粗提物。
S2、富集:將提取步驟中的粗提物用9倍去離子水進行充分溶解,再使用正丁醇溶液進行萃取,其中水和正丁醇的體積比為1:3,將萃取的水相部分上D101型大孔吸附樹脂柱,依次用15倍柱床體積的去離子水、15倍柱床體積的質(zhì)量濃度為50%的乙醇、15倍柱床體積的質(zhì)量濃度為70%的乙醇和15倍柱床體積的質(zhì)量濃度為90%的乙醇洗脫,其中90%的乙醇洗脫部分為含有目標(biāo)成分的洗脫液,將含有目標(biāo)成分的洗脫液經(jīng)減壓濃縮至恒重,即得含有目標(biāo)成分的富集物。
S3、分離純化:將富集物通過制備色譜儀,且在通過制備色譜儀進行分離時采用的色譜柱為C18色譜柱,且采用甲醇溶液中甲醇的質(zhì)量濃度為32%,等度洗脫,即可得到二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品,且經(jīng)過鑒定其結(jié)構(gòu)式如圖3所示。
實施例五
一種大黃中提取二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的方法,包括以下步驟:
S1、提?。哼x取質(zhì)量為2kg唐古特大黃的根進行干燥,干燥后再進行粉碎至約100目后,以1g:10mL的比例用質(zhì)量濃度為90%的乙醇在85℃下回流提取3次,每次提取2小時,然后將這兩次提取得到的提取液合并,再將合并后的提取液減壓濃縮,從而得到粗提物。
S2、富集:將提取步驟中的粗提物用10倍去離子水進行充分溶解,再使用正丁醇溶液進行萃取,其中水和正丁醇的體積比為1:3,將萃取的水相部分上X-5型大孔吸附樹脂柱,依次用20倍柱床體積的去離子水、20倍柱床體積的質(zhì)量濃度為50%的乙醇、20倍柱床體積的質(zhì)量濃度為70%的乙醇和20倍柱床體積的質(zhì)量濃度為90%的乙醇洗脫,其中90%的乙醇洗脫部分為含有目標(biāo)成分的洗脫液,將含有目標(biāo)成分的洗脫液經(jīng)減壓濃縮至恒重,即得含有目標(biāo)成分的富集物。
S3、分離純化:將富集物通過制備色譜儀,且在通過制備色譜儀進行分離時采用的色譜柱為C18色譜柱,且采用甲醇溶液中甲醇的質(zhì)量濃度為32%,等度洗脫,即可得到二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品,且經(jīng)過鑒定其結(jié)構(gòu)式如圖3所示。
綜上所述:本發(fā)明通過配合制備色譜儀以及采用分離、富集和分離純化的三步操作,使二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的制備方法更加簡便和快捷,且省時省力,節(jié)約人力成本,而且節(jié)省了二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的生產(chǎn)成本,且極大的縮短了二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的制備時間,從而提高了二苯乙烯苷類化合物desoxyrhaponticin對照品的生產(chǎn)效率。
盡管已經(jīng)示出和描述了本發(fā)明的實施例,對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言,可以理解在不脫離本發(fā)明的原理和精神的情況下可以對這些實施例進行多種變化、修改、替換和變型,本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求及其等同物限定。