本發(fā)明設(shè)計利用血球通過酶解法制備血紅素的新方法,特別是采用酶解打開珠蛋白中對血紅素包裹的蛋白結(jié)構(gòu)及利用堿性條件血紅素溶解后,采用分子篩分級篩選的方法,有效獲取分子量適中的肽類,該類肽類較好的結(jié)合了血紅素,有利于血紅素的吸收,屬于血紅素生產(chǎn)領(lǐng)域。
背景技術(shù):
中國作為一個人口大國,隨著人們生活水平的提高,對肉制品的需求量的大幅增加,國內(nèi)的生豬出欄量早已成為一個龐大的數(shù)字,據(jù)養(yǎng)殖行業(yè)信息披露,2011年我國生豬出欄量為66170萬頭,產(chǎn)生豬血量約為200萬噸,有著龐大的血液原料,血液制品之一的血漿蛋白粉中含有的免疫蛋白等功能性組份廣泛應(yīng)用與教槽料配方中,其另一產(chǎn)品血球蛋白粉成為水產(chǎn)飼料配方中一個重要的蛋白原料,產(chǎn)生著巨大的經(jīng)濟效益,但也應(yīng)該看到中國目前的血液加工業(yè)整體水平還處在一個相對低端的業(yè)態(tài),產(chǎn)品方向基本以飼料為主,附加值一般。
血紅素為動物血液中珠蛋白的組成部分和功能成份,具有易吸收、動物體利用率高等特點,作為補鐵劑具有較好的優(yōu)勢,目前國內(nèi)血紅素以有機試劑提取方法生產(chǎn),具有成本高、有機試劑殘留、雜質(zhì)有毒害,產(chǎn)生大量廢渣廢水等特點。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明是一種通過生物酶水解制備生產(chǎn)血紅素的新方法,它克服了有機試劑提取方法的各種弊病,具有生產(chǎn)成本低、蛋白原料綜合利用、產(chǎn)品安全衛(wèi)生條件較高,生產(chǎn)環(huán)境安全性高等特點。
一種通過酶解法結(jié)合分子篩篩分法生產(chǎn)血紅素的方法,該方法包括以下步驟:步驟一:將新鮮血液按比例加入0.6~0.8%抗凝劑攪拌均勻防止血液凝結(jié),將抗凝血液溫度制冷到4~6℃保持,低溫條件下通過管式離心機分離出血漿液、血球液;步驟二:將血球液按2倍體積加水,升溫使血球蛋白變性;步驟三:將變性處理后物料將溫至55℃,加入動物蛋白復(fù)合酶酶解反應(yīng)10小時,升溫至90℃,保持30分鐘滅酶;步驟四:將步驟三中酶解液通過分離設(shè)備分離出上清液和沉淀性物質(zhì),并對沉淀性物質(zhì)加水洗脫;步驟五:將步驟四中沉淀性物料加NaOH調(diào)PH,過膜設(shè)備(分子篩)分離出血紅素和小分子肽類;步驟六:將步驟五通過分離設(shè)備出的血紅素和小分子肽類過膜設(shè)備脫落鹽分及部分小分子肽類,獲取血紅素和特定分子量段肽類;步驟七:將步驟六收集的血紅素干燥、粉粹,制備的血紅素產(chǎn)品。
進一步而言,在步驟一中,升溫到72~90℃保持30分鐘進行滅菌、蛋白變形處理,使血球蛋白變性的方法。
進一步而言,在步驟三中,按血球量的0.3%加入動物蛋白復(fù)合酶(木瓜蛋白酶:中性蛋白酶1:1)的酶組合方法。
進一步而言,在步驟四中,將反應(yīng)液先調(diào)整PH4.3~6.0,通過膜設(shè)備進行分離并加水洗脫,設(shè)備截留孔徑50~500nm的設(shè)備匹配方案。
進一步而言,在步驟五中,物料用加NaOH調(diào)PH10~13,過膜設(shè)備,設(shè)備截留孔徑10~50nm分離出血紅素和小分子肽類。
進一步而言,在步驟六中,通過截留孔徑500~1000Doa分子篩脫離鹽分及部分小分子肽類,獲取血紅素和特定分子量段肽類。
進一步而言,在步驟七中,采用沉淀壓力式(含造粒)的干燥方法。
本發(fā)明有益效果:通過酶解法生產(chǎn)血紅素,將血球蛋白中的蛋白類成分轉(zhuǎn)化為肽及氨基酸類,可作為蛋白原料用于飼料、蛋白胨、食品添加劑等,具有水溶性好,易于消化吸收等性,在堿性條件下利用兩級分子篩篩分出血紅素和分子量大小適中的肽類,該結(jié)合物及控制了血紅素的有效流失,又有利于血紅素在動物體內(nèi)的釋放和吸收,血紅素利用率高,制劑方便,項目匹配的工藝及設(shè)備具有滅菌、潔凈加工、物料循環(huán)套用等特點,具備較好的生物安全性和高效環(huán)保的特點。
發(fā)明實施方法
以下結(jié)合實施例對本發(fā)明進行說明,應(yīng)當理解,此處所描述的優(yōu)選實施例僅用于說明和解釋本發(fā)明,并不用于限定本發(fā)明。
實施例
一種通過酶解法結(jié)合分子篩篩分法生產(chǎn)血紅素的方法,該生產(chǎn)方法包括以下步驟:
步驟一:將新鮮血液按比例加入0.6~0.8%抗凝劑攪拌均勻防止血液凝結(jié)、將抗凝血液溫度制冷到4~6℃保持、低溫條件下通過管式離心機分離出血漿液、血球液;
步驟二:將血球液按2倍體積加水,升溫到72~90℃保持30分鐘進行滅菌、蛋白變形處理,使血球蛋白變性;
步驟三:將變性處理后物料將溫至55℃,按血球量的0.3%加入動物蛋白復(fù)合酶(木瓜蛋白酶:中性蛋白酶1:1),酶解反應(yīng)8~12小時,升溫至90℃,保持30分鐘滅酶;
步驟四:將步驟三中調(diào)PH至4.3~6.0,通過膜設(shè)備(膜設(shè)備截留孔徑50~500nm)分離出上清液和沉淀性物質(zhì),并對沉淀性物質(zhì)加水洗脫;
步驟五:將步驟四中沉淀性物料加加NaOH調(diào)PH10~13,過膜設(shè)備,設(shè)備截留孔徑10~50nm分離出血紅素和小分子肽類;
步驟六:將步驟五中透過液通過截留孔徑500~1000Doa分子篩脫離鹽分及部分小分子肽類,獲取血紅素和特定分子量段肽類;
步驟七:將步驟六中收集的沉淀采用壓力式(含造粒)的干燥干燥、制粒,制備的血紅素產(chǎn)品。
步驟八:通過此方法可以制備血紅素含量45~60%血紅素,血紅素收率60~75%。
本發(fā)明不局限于上述最佳實施方式,任何人在本發(fā)明的啟示下都可得出其他各種形式的產(chǎn)品,但不論在其細節(jié)上作任何變化,凡是具有與本申請相同或相近似的技術(shù)方案,均落在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。