本發(fā)明涉及生物儀器管路清洗領域,具體涉及一種生物儀器管路清洗液及其制備方法。
背景技術:
隨著生物技術日新月異的發(fā)展,生物儀器的應用領域也越來越廣泛,但是涉及蛋白微流控制的生物儀器,對精度要求比較高,對污染物很敏感,而其管路的流暢與否以及殘留蛋白的附著會直接影響其精度及后續(xù)使用的效果。管路中殘留的細小氣泡會影響管路內(nèi)部的壓力平衡,進而影響出液精度;而蛋白殘留會對儀器后續(xù)的使用造成污染,直接影響實驗結果的準確性。
傳統(tǒng)的用于清洗生物儀器管路的清洗液主要有兩類:第一類是酸堿類物質(zhì),通過酸堿的加入,并反復沖洗,使殘留蛋白變性,失去生物活性,以避免管路后續(xù)使用對實驗結果的影響,但是該類清洗液有幾點不足之處:其一,酸堿清洗會對金屬管路造成腐蝕,會破壞玻璃管路內(nèi)表面的光潔程度,長期使用也會導致塑料管路的加速老化,造成管路密封性不好;其二,酸堿雖然能讓生物蛋白分子失活,但無法完全清除,久而久之,蛋白越積越多,會堵塞微細管路的孔徑,造成排液不暢;其三,用酸堿清洗之后,需要用純化水將殘留酸堿清洗干凈,當把純化水排空后,管路內(nèi)表面由于表面張力會殘留水珠,在后續(xù)使用時,殘留的水珠能稀釋蛋白濃度,造成初始排液蛋白濃度不準確,進而影響實驗結果。第二類是高濃度的表面活性劑,高濃度表面活性劑雖然可以暫時有效的清除管路里面產(chǎn)生的氣泡,并能溶解大部分殘留的蛋白分子,但對于頑固性的蛋白吸附(如難溶于水的蛋白),效果不佳。在用表面活性劑清洗管路之后,仍然需要用純化水反復沖洗管路直至去掉表面活性劑殘留,此時,一些頑固性的蛋白殘留仍然會導致氣泡的重新出現(xiàn)。
技術實現(xiàn)要素:
為解決上述問題,本發(fā)明提供了一種生物儀器管路清洗液及其制備方法,能有效去除生物儀器管路內(nèi)壁蛋白殘留的清洗液,通過清洗后,管路內(nèi)壁無蛋白殘留,不會產(chǎn)生氣泡,并且不掛水珠,對后續(xù)管路使用無污染,對實驗結果無影響,且具有一定的殺菌功能。
為實現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采取的技術方案為:
一種生物儀器管路清洗液,由以下質(zhì)量百分比的原料制備而成:
竹醋粉0.4-0.8%、丙烯海松(2-對硝基苯基)噻二唑5-15%、金盞花提取物0.3-0.6%、脫氧膽酸鈉1-2%、大葉棗素0.3-0.6%、三羥甲基氨基甲烷0.6-0.8%、β-環(huán)糊精1-3%、純化水余量。
優(yōu)選地,所述金盞花提取物通過以下步驟制備:
S1、將洗凈瀝干的金盞花置于汽爆罐內(nèi),先通入氮氣至汽爆罐內(nèi)壓力為0.6-1.4MPa,爆破處理8-25min;然后迅速通入蒸汽至汽爆罐內(nèi)壓力為1.4-1.8MPa,蒸汽爆破處理0.5-2.5min后,室溫濃縮至相對密度1.10-1.20,噴霧干燥濃縮液,得粉體;
S2、向粉體中加入3-8倍水,按質(zhì)量百分比為2-3%的比例加入中性蛋白酶,按質(zhì)量百分比為1-2%加入風味蛋白酶,30-50℃下酶解1-2h,過濾,得酶解液;
S3、將所得的發(fā)酵液迅速冷凍后再自然解凍,使提取物中淀粉老化沉淀;收集上清液,剩余部分離心,收集離心液體并合并于上清液中;
S4、將上清液以3-7BV/h的流速通過大孔樹脂柱,動態(tài)吸附飽和后,用去離子水以5-8BV/h的流速淋洗上述大孔樹脂柱至流出液無色,再用體積分數(shù)為50%-70%的有機溶劑以8-12BV/h的流速進行洗脫,收集洗脫液,得金盞花提取物。
優(yōu)選地,所述有機溶劑為天然來源的松節(jié)油衍生物,松節(jié)油衍生物為蒎烯的異構、歧化產(chǎn)物。
本發(fā)明還提供了一種生物儀器管路清洗液的制備方法,包括如下步驟:
S1、按權利要求1所述的配方進行各組分的稱取;
S2、將步驟S1所稱取的竹醋粉、丙烯海松(2-對硝基苯基)噻二唑、金盞花提取物、脫氧膽酸鈉、大葉棗素、三羥甲基氨基甲烷、β-環(huán)糊精置于中速混合器中混合20min,得混合物;
S3、將步驟S2所得的混合物通過超聲波振蕩設備分散于步驟S1所稱取的純化水中形成混合液;
S4、將步驟S3所得的混合液與步驟S1稱取的納米銀混懸液混合攪拌均勻,即得清洗液。
本發(fā)明具有以下有益效果:
能有效去除生物儀器管路內(nèi)壁蛋白殘留的清洗液,通過清洗后,管路內(nèi)壁無蛋白殘留,不會產(chǎn)生氣泡,并且不掛水珠,對后續(xù)管路使用無污染,對實驗結果無影響,且具有一定的殺菌功能。
具體實施方式
為了使本發(fā)明的目的及優(yōu)點更加清楚明白,以下結合實施例對本發(fā)明進行進一步詳細說明。應當理解,此處所描述的具體實施例僅僅用以解釋本發(fā)明,并不用于限定本發(fā)明。
以下實施例中所使用的金盞花提取物通過以下步驟制備:
S1、將洗凈瀝干的金盞花置于汽爆罐內(nèi),先通入氮氣至汽爆罐內(nèi)壓力為0.6-1.4MPa,爆破處理8-25min;然后迅速通入蒸汽至汽爆罐內(nèi)壓力為1.4-1.8MPa,蒸汽爆破處理0.5-2.5min后,室溫濃縮至相對密度1.10-1.20,噴霧干燥濃縮液,得粉體;
S2、向粉體中加入3-8倍水,按質(zhì)量百分比為2-3%的比例加入中性蛋白酶,按質(zhì)量百分比為1-2%加入風味蛋白酶,30-50℃下酶解1-2h,過濾,得酶解液;
S3、將所得的發(fā)酵液迅速冷凍后再自然解凍,使提取物中淀粉老化沉淀;收集上清液,剩余部分離心,收集離心液體并合并于上清液中;
S4、將上清液以3-7BV/h的流速通過大孔樹脂柱,動態(tài)吸附飽和后,用去離子水以5-8BV/h的流速淋洗上述大孔樹脂柱至流出液無色,再用體積分數(shù)為50%-70%的有機溶劑以8-12BV/h的流速進行洗脫,收集洗脫液,得金盞花提取物。其中,所述有機溶劑為天然來源的松節(jié)油衍生物,松節(jié)油衍生物為蒎烯的異構、歧化產(chǎn)物。
實施例1
一種生物儀器管路清洗液,由以下質(zhì)量百分比的原料制備而成:
竹醋粉0.4%、丙烯海松(2-對硝基苯基)噻二唑5%、金盞花提取物0.3%、脫氧膽酸鈉1%、大葉棗素0.3%、三羥甲基氨基甲烷0.6%、β-環(huán)糊精1%、純化水余量。
實施例2
一種生物儀器管路清洗液,由以下質(zhì)量百分比的原料制備而成:
竹醋粉0.8%、丙烯海松(2-對硝基苯基)噻二唑15%、金盞花提取物0.6%、脫氧膽酸鈉2%、大葉棗素0.6%、三羥甲基氨基甲烷0.8%、β-環(huán)糊精3%、純化水余量。
實施例3
一種生物儀器管路清洗液,由以下質(zhì)量百分比的原料制備而成:
竹醋粉0.6%、丙烯海松(2-對硝基苯基)噻二唑10%、金盞花提取物0.45%、脫氧膽酸鈉1.5%、大葉棗素0.45%、三羥甲基氨基甲烷0.7%、β-環(huán)糊精2%、純化水余量。
實施例4
一種生物儀器管路清洗液的制備方法,包括如下步驟:
S1、按實施例1、實施例2或實施例3所述的配方進行各組分的稱?。?/p>
S2、將步驟S1所稱取的竹醋粉、丙烯海松(2-對硝基苯基)噻二唑、金盞花提取物、脫氧膽酸鈉、大葉棗素、三羥甲基氨基甲烷、β-環(huán)糊精置于中速混合器中混合20min,得混合物;
S3、將步驟S2所得的混合物通過超聲波振蕩設備分散于步驟S1所稱取的純化水中形成混合液;
S4、將步驟S3所得的混合液與步驟S1稱取的納米銀混懸液混合攪拌均勻,即得清洗液。
以上所述僅是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式,應當指出,對于本技術領域的普通技術人員來說,在不脫離本發(fā)明原理的前提下,還可以作出若干改進和潤飾,這些改進和潤飾也應視為本發(fā)明的保護范圍。