1.一種云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA3,其特征在于,所述抗氧化多肽AOP-OA3的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。
2.一種如權(quán)利要求1所述的云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA3的制備方法,其特征在于,包括以下步驟:
1)原料預(yù)處理:取云南臭蛙皮膚分泌物,溶解于質(zhì)量濃度為0.9%的生理鹽水,真空冷凍干燥濃縮至干粉,-80℃保存?zhèn)溆茫?/p>
2)Sephadex G50分子篩:將步驟1)中制備得到的云南臭蛙皮膚分泌物凍干粉溶解于去離子水中,上Sephadex G50柱子,用Tris-HCl緩沖液進(jìn)行洗脫,流速為2.0毫升/10分鐘,每10分鐘收集一管,測(cè)定其在280nm下的吸光度,收集合并具有抗氧化活性的洗脫峰;
3)高效液相色譜反相層析:將步驟2)中制備得到的洗脫液上樣于Hypersil ODS2柱子,實(shí)驗(yàn)儀器為Waters 1525高壓液相系統(tǒng),在流速為1毫升/分鐘的條件下,用乙腈在線性梯度條件下進(jìn)行洗脫,監(jiān)測(cè)波長(zhǎng)為215納米,收集合并具有抗氧化活性的洗脫峰,濃縮干燥后得到目標(biāo)物。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA3的制備方法,其特征在于,步驟2)中的Sephadex G50柱子預(yù)先用20mM、pH6.8、含0.1M NaCl的Tris-HCl緩沖液平衡24小時(shí)。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA3的制備方法,其特征在于,步驟3)中的Hypersil ODS2色譜柱需預(yù)先用含0.1%三氟乙酸的超純水平衡。
5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA3的制備方法,其特征在于,步驟3)中的乙腈為含0.1%三氟乙酸的乙腈。
6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA3的制備方法,其特征在于,步驟3)中的線性梯度洗脫具體為:乙腈濃度從0%升至60%所消耗的時(shí)間為60分鐘。
7.一種如權(quán)利要求1所述的云南臭蛙皮膚抗氧化多肽AOP-OA3在制備抗氧化相關(guān)藥物、保健品、化妝品中的應(yīng)用。