本發(fā)明涉及一種加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基配方,特別涉及一種加入在常規(guī)培養(yǎng)基而促進(jìn)氧化硫硫桿菌快速增殖的營(yíng)養(yǎng)液。
背景技術(shù):
氧化硫硫桿菌是一種礦質(zhì)化能自養(yǎng)菌,專性好氧,嗜酸,革蘭氏染色陰性,呈桿狀,寬0.3~0.5μm,氧化硫硫桿菌以氧化單質(zhì)硫或還原態(tài)的硫化物來(lái)獲得自身細(xì)胞生長(zhǎng)和代謝所需要的能量,以NH4+為氮源,以空氣中CO2為碳源。氧化硫硫桿菌被廣泛應(yīng)用于輸油管道、儲(chǔ)油罐和飛機(jī)油箱中,在微生物浸礦、微生物脫硫方面也多有應(yīng)用。人們發(fā)現(xiàn),氧化硫硫桿菌在污水治理、土壤治理方面也具有顯著的效果。近年來(lái),氧化硫硫桿菌在醫(yī)藥、環(huán)保、農(nóng)業(yè)、生物能源等方面的應(yīng)用得到重視,許多國(guó)家加大對(duì)氧化硫硫桿菌微生物資源的開(kāi)發(fā)和利用。
氧化硫硫桿菌是一種專性化能自養(yǎng)菌,常用的培養(yǎng)基有Waksman medium、Staeky medium、9K-medium等常規(guī)培養(yǎng)基。但是,用這些常規(guī)培養(yǎng)基培養(yǎng)氧化硫硫桿菌,其生長(zhǎng)速度慢,難以達(dá)到滿足工業(yè)化制備的需要。因此,氧化硫硫桿菌微生物的快速培養(yǎng)技術(shù)備受關(guān)注。目前,對(duì)如何加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)方法很少有研究報(bào)道。本發(fā)明通過(guò)向常規(guī)培養(yǎng)基中添加復(fù)合營(yíng)養(yǎng)液,這些營(yíng)養(yǎng)液參與氧化硫硫桿菌的生長(zhǎng)代謝過(guò)程而加速其生長(zhǎng)繁殖速度,從而解決氧化硫硫桿菌常規(guī)培養(yǎng)增殖速度慢的問(wèn)題。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的是提供一種加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基配方。
一種加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基配方按以下步驟實(shí)現(xiàn)。
一種能加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基:在常規(guī)培養(yǎng)基中加入營(yíng)養(yǎng)液,所述營(yíng)養(yǎng)液為蛋白胨和酵母粉。所述的促進(jìn)氧化硫硫桿菌快速增殖的營(yíng)養(yǎng)液,是以重量百分?jǐn)?shù)計(jì)蛋白胨和酵母粉在常規(guī)培養(yǎng)基中的添加量均為0.5%~1%。即本發(fā)明的能加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基配方為:按重量百分含量計(jì),0.2%(NH4)2SO4、 0.3% KH2PO4、0.05% MgSO4·7H2O、0.001% FeSO4·7H2O、0.025% CaCl·2H2O、1%硫磺粉、0.5%~1%蛋白胨和0.5%~1%酵母粉。
作為優(yōu)選,在上述的一種能加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基中加以重量百分?jǐn)?shù)計(jì)為5%~10%的紅糖。
本發(fā)明作為一種促進(jìn)氧化硫硫桿菌快速增殖的培養(yǎng)基,與常規(guī)培養(yǎng)基相比有著明顯的促進(jìn)菌株生長(zhǎng)、縮短培養(yǎng)時(shí)間的效果。利用該培養(yǎng)基培養(yǎng)氧化硫硫桿菌的結(jié)果表明,在培養(yǎng)過(guò)程中,隨著菌體生長(zhǎng)、漂浮在水面的硫磺粉顆粒逐漸下沉并分散于水中、溶液由澄清逐漸變?yōu)闇啙岬臅r(shí)間,與常規(guī)培養(yǎng)基相比,提前了5-7天,菌株生長(zhǎng)速度顯著高于常規(guī)培養(yǎng)基。
具體實(shí)施方式
本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式,還包括各具體實(shí)施方式間的任意組合。
實(shí)施例1。
本實(shí)施方式的一種加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基配方按以下步驟實(shí)現(xiàn)。
常規(guī)培養(yǎng)基配方:按重量百分含量計(jì),0.2%(NH4)2SO4、 0.3% KH2PO4、0.05% MgSO4·7H2O、0.001% FeSO4·7H2O、0.025% CaCl·2H2O、1%硫磺粉。
添加營(yíng)養(yǎng)液的培養(yǎng)基配方:按重量百分含量計(jì),0.2%(NH4)2SO4、 0.3% KH2PO4、0.05% MgSO4·7H2O、0.001% FeSO4·7H2O、0.025% CaCl·2H2O、1%硫磺粉、0.5%蛋白胨和0.5%酵母粉。
在添加蛋白胨和酵母粉的培養(yǎng)基中接種氧化硫硫桿菌,以常規(guī)培養(yǎng)基為對(duì)照,培養(yǎng)條件為30℃、180rpm恒溫振蕩培養(yǎng)。與常規(guī)培養(yǎng)基相比,添加蛋白胨和酵母粉的培養(yǎng)基,漂浮在水面的硫磺粉顆粒下沉并分散于水中、溶液由清澈變?yōu)闇啙幔?xì)菌數(shù)量增加,OD600達(dá)到2.8以上,與常規(guī)培養(yǎng)基比較,細(xì)菌總數(shù)提高,時(shí)間提前了5天。結(jié)果表明,在常規(guī)培養(yǎng)基中添加蛋白胨和酵母粉,可明顯提高氧化硫硫桿菌的生長(zhǎng)繁殖速度,縮短培養(yǎng)時(shí)間,實(shí)現(xiàn)氧化硫硫桿菌的快速繁殖生長(zhǎng)。
實(shí)施例2。
本實(shí)施方式的一種加快氧化硫硫桿菌增殖的培養(yǎng)基配方按以下步驟實(shí)現(xiàn)。
常規(guī)培養(yǎng)基配制:按重量百分含量計(jì),0.2%(NH4)2SO4、 0.3% KH2PO4、0.05% MgSO4·7H2O、0.001% FeSO4·7H2O、0.025% CaCl·2H2O、1%硫磺粉。
添加營(yíng)養(yǎng)液的培養(yǎng)基配制:按重量百分含量計(jì),0.2%(NH4)2SO4、 0.3% KH2PO4、0.05% MgSO4·7H2O、0.001% FeSO4·7H2O、0.025% CaCl·2H2O、1%硫磺粉、0.5%蛋白胨、0.5%酵母粉和10%紅糖。
在添加紅糖的培養(yǎng)基中接種氧化硫硫桿菌,以常規(guī)培養(yǎng)基為對(duì)照,30℃、180rpm恒溫振蕩培養(yǎng)氧化硫硫桿菌。與常規(guī)培養(yǎng)基相比,添加紅糖的培養(yǎng)基,漂浮在水面的硫磺粉顆粒下沉并分散于水中、溶液由清澈變?yōu)闇啙?,溶液由清澈變?yōu)闇啙?,?xì)菌數(shù)量增加,OD600達(dá)到2.5以上,與常規(guī)培養(yǎng)基比較,細(xì)菌總數(shù)提高,時(shí)間提前了7天。結(jié)果表明,在常規(guī)培養(yǎng)基中添加紅糖,可明顯提高氧化硫硫桿菌的生長(zhǎng)繁殖速度,縮短培養(yǎng)時(shí)間,實(shí)現(xiàn)氧化硫硫桿菌的快速繁殖生長(zhǎng)。