本申請(qǐng)是申請(qǐng)?zhí)枮?01280073373.0、進(jìn)入中國(guó)國(guó)家階段日期為2014年11月21日、國(guó)際申請(qǐng)?zhí)枮閜ct/us2012/061912、國(guó)際申請(qǐng)日為2012年10月25日的發(fā)明專利申請(qǐng)的分案申請(qǐng)。

相關(guān)申請(qǐng)的交叉引用

本申請(qǐng)要求2012年5月22日提交的美國(guó)申請(qǐng)系列號(hào)13/477,095(“＇095申請(qǐng)”)的優(yōu)先權(quán)，所述申請(qǐng)的完整內(nèi)容通過引用并入本文。＇095申請(qǐng)要求2011年5月24日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?1/489,284的優(yōu)先權(quán)；所述申請(qǐng)的完整內(nèi)容通過引用并入本文。＇095申請(qǐng)是2009年2月17日提交的美國(guó)申請(qǐng)?zhí)?2/372,717的部分繼續(xù)申請(qǐng)；所述申請(qǐng)的完整內(nèi)容通過引用并入本文。ussn12/372,717要求2008年2月14日提交的美國(guó)臨時(shí)專利申請(qǐng)?zhí)?0/066,101的優(yōu)先權(quán)，所述申請(qǐng)也通過引用并入本文。

背景技術(shù)：

目前，癡呆的主因阿爾茨海默氏病(ad)在65-69歲的群體的百分之一中發(fā)展，并且在那些95歲和更老年的人中增加至40-50％。ad患者展示標(biāo)志(telltale)臨床癥狀，這包括認(rèn)知損害和記憶功能中的缺陷。在這些患者中，通過尸檢組織病理學(xué)檢查驗(yàn)證的大腦皮質(zhì)中發(fā)現(xiàn)的嚴(yán)重老年斑沉著證實(shí)ad的存在。成熟老年斑由衍生自過度磷酸化tau蛋白的纖維的細(xì)胞內(nèi)神經(jīng)原纖維纏結(jié)(nft)和衍生自淀粉樣蛋白前體蛋白的酶促處理的細(xì)胞外β淀粉狀蛋白肽組成。有趣的是，盡管在具有正常認(rèn)知功能的老年人中發(fā)展和存在老年斑，但nft的嚴(yán)重性和老年斑沉積據(jù)稱與認(rèn)知功能的喪失和神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)退化相關(guān)。

ad的神經(jīng)學(xué)成像已見到顯像示蹤劑的出現(xiàn)，其看起來基于斑塊和原纖維介導(dǎo)的示蹤劑攝取證實(shí)ad的存在，且隨后是目前進(jìn)行中的廣泛臨床檢查。這些示蹤劑中的許多包含衍生自熒光染料的化學(xué)型(表1)。

目前大量ad顯像劑僅可證實(shí)ad充分確定的表現(xiàn)，該晚期階段診斷對(duì)36個(gè)月后進(jìn)一步疾病進(jìn)展提供很少防御。其次，老年斑和纏結(jié)的檢測(cè)可不與ad早期的發(fā)展關(guān)聯(lián)。最近的數(shù)據(jù)表明，淀粉樣蛋白級(jí)聯(lián)模型[hardy，j.和d.selkoe，theamyloidhypothesisofalzheimer＇sdisease：progressandproblemsontheroadtotherapeutics.science，2002.297：p.353-356]沒有準(zhǔn)確地描繪出導(dǎo)致ad患者中的認(rèn)知衰退的主要因素，并且其它影響因素，諸如神經(jīng)毒性可溶性寡聚體和聚集體可能在神經(jīng)變性中發(fā)揮貢獻(xiàn)性作用。[talaga，p.，inhibitorsofbeta-amyloidaggregation：stillanissueofstructureandfunction？drugdiscoverytoday：therapeuticstrategies，2004.1：p.7-12]。迄今為止，未知fddnp和pib結(jié)合神經(jīng)毒性可溶性寡聚體并聚集，因此沒有預(yù)期其在患者中ad早期和ad晚期之間準(zhǔn)確地區(qū)分。

包括pet和spect的許多醫(yī)學(xué)診斷程序利用放射性標(biāo)記的化合物。pet和spect是非常靈敏的技術(shù)，并且需要少量放射性標(biāo)記的化合物，其稱為示蹤劑。標(biāo)記的化合物以與相應(yīng)非放射性化合物完全相同的方式在體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)、積累且轉(zhuǎn)化。示蹤劑或探針可以放射性標(biāo)記有對(duì)于pet成像有用的放射性核素，諸如¹¹c、¹³n、¹⁵o、¹⁸f、⁶⁴cu和¹²⁴i，或?qū)τ趕pect成像有用的放射性核素，諸如⁹⁹tc、⁷⁷br、⁶¹cu、¹⁵³gd、¹²³i、¹²⁵i、¹³¹i和³²p。

基于攜帶發(fā)射正電子的同位素的分子成像示蹤劑在患者的組織中的分布，pet產(chǎn)生圖像。pet方法具有檢測(cè)在研究的組織或器官中細(xì)胞水平上的功能失常的潛力。pet已在臨床腫瘤學(xué)中使用，諸如用于腫瘤和轉(zhuǎn)移的成像，并且已用于某些腦疾病的診斷，以及映射腦和心功能。類似地，spect可以用于完成任何γ成像研究，其中真實(shí)3d表示可以幫助例如成像腫瘤、感染(白細(xì)胞)、甲狀腺或骨。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

附圖簡(jiǎn)述

圖1顯示[18f]-t794的放射自顯影。

圖2顯示[18f]-t794與tau和淀粉樣蛋白負(fù)荷和kd(30nm)的相關(guān)性。

圖3顯示小鼠中的[18f]-t794pk。

圖4顯示[18f]-t805的放射自顯影。

圖5顯示[18f]-t805與tau和淀粉樣蛋白負(fù)荷的相關(guān)性。

圖6顯示小鼠中的[18f]-t805pk。

圖7顯示[18f]-t807的放射自顯影。

圖8顯示[18f]-t807與tau和淀粉樣蛋白負(fù)荷的相關(guān)性。

圖9顯示小鼠中的[18f]-t807pk。

圖10顯示人腦切片上化合物t687和phf-tauihc染色的雙重標(biāo)記。

圖11顯示人腦切片上化合物t794和總-tauihc染色的雙重標(biāo)記。

圖12顯示小鼠中的18f-t805：腦攝取。

圖13顯示小鼠中的18f-t807：腦攝取。

圖14顯示wt和tau小鼠中的18f-t794。

概述

在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了式7的放射性標(biāo)記的化合物：

及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體，

其中

l為n或cr⁵；

m為n或cr⁶；

p為n或cr⁷；和

q為n或cr⁸；

x為鍵或?yàn)閏1-14烷基，其中至少一個(gè)碳任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基所替代，并且其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、c1-6烷基所替代；

r⁹為h、保護(hù)基團(tuán)、離去基團(tuán)、疊氮化物、炔烴、oh、鹵素、nh2、n(c1-8烷基)2、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、so2、nh2或c1-6烷基所替代，其中c1-6烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素或c3-8環(huán)烷基所替代，其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素所替代，并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被o、oh、s、sh、nh、n-c1-8烷基所替代；

r¹-r⁸獨(dú)立地為h、oh、鹵素、nh2、ch3、so2、no2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)、芳基、雜芳基、nhr¹²、n(r¹²)2c3-8環(huán)烷基、(-ch2)1-12-r¹²，其中r¹²為ch3、芳基、h或雜芳基，其中(-ch2)1-12-r¹²、c3-8環(huán)烷基、芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)和c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，和

其中(-ch2)1-12-r¹²的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基、n(c1-8烷基)2所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s或nh、n-c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

其中至少一個(gè)鹵素任選地被放射性核素或熒光標(biāo)記物所替代。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明為式7a的化合物：

及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體，

其中：

l為n或cr⁵；

m為n或cr⁶；

x為鍵或?yàn)閏1-14烷基，其中至少一個(gè)碳任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基所替代，并且其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、c1-6烷基所替代；

r⁹為h、保護(hù)基團(tuán)、離去基團(tuán)、疊氮化物、炔烴、oh、鹵素、nh2、n(c1-8烷基)2、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、so2、nh2、或c1-6烷基或c1-6烷基所替代，其中c1-6烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素或c3-8環(huán)烷基所替代，其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素所替代，并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被o、oh、s、sh、nh、n-c1-8烷基所替代；

r²、r³、r⁷和r⁸獨(dú)立地為h、oh、鹵素、nh2、ch3、so2、no2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)、芳基、雜芳基、nhr¹²、n(r¹²)2c3-8環(huán)烷基、(-ch2)1-12-r¹²，其中r¹²為ch3、芳基、h或雜芳基，

其中(-ch2)1-12-r¹²、c3-8環(huán)烷基、芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)和c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，和

其中(-ch2)1-12-r¹²的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基、n(c1-8烷基)2所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s或nh、n-c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

其中至少一個(gè)鹵素任選地被放射性核素或熒光標(biāo)記物所替代。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明為式8的化合物：

及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體，

其中：

l為n或cr⁵；

m為n或cr⁶；

x為鍵或?yàn)閏1-14烷基，其中至少一個(gè)碳任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基所替代，并且其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、c1-6烷基所替代；

r⁹為h、保護(hù)基團(tuán)、離去基團(tuán)、疊氮化物、炔烴、oh、鹵素、nh2、n(c1-8烷基)2、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、so2、nh2、或c1-6烷基或c1-6烷基所替代，其中c1-6烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素或c3-8環(huán)烷基所替代，其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素所替代，并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被o、oh、s、sh、nh、n-c1-8烷基所替代；

r³為鍵或?yàn)閛、s、c(o)、so2、nh、n-c1-8烷基、(ch2)1-12中的至少一個(gè)，其中(ch2)1-12的至少一個(gè)c任選地被c(o)、o、s、so2、nh、n-c1-8烷基所替代，并且其中至少一個(gè)h任選地被c1-8烷基或鹵素所替代，

r²⁰為芳基或雜芳基；

r²¹為h、oh、鹵素、nh2、ch3、so2、no2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)、(-ch2)1-12-ch3、c3-8環(huán)烷基，

其中(-ch2)1-12-ch3或c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)和c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

并且其中(-ch2)1-12-ch3的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基、n(c1-8烷基)2所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s、so2、或nh、n-c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，其中至少一個(gè)鹵素任選地被放射性核素或熒光標(biāo)記物所替代。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明為式7b的化合物：

及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體，

其中：

l為n或cr⁵；

m為n或cr⁶；

r⁹為h、保護(hù)基團(tuán)、離去基團(tuán)、鹵素或ch3；

r²、r³、r⁵和r⁶獨(dú)立地為h、oh、鹵素、nh2、ch3、so2、no2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)、芳基、雜芳基、nhr¹²、n(r¹²)2c3-8環(huán)烷基、(-ch2)1-12-r¹²，其中r¹²為ch3、芳基、h或雜芳基，

其中(-ch2)1-12-r¹²、c3-8環(huán)烷基、芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)和c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，和

其中(-ch2)1-12-r¹²的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基、n(c1-8烷基)2所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s或nh、n-c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

其中至少一個(gè)鹵素任選地被放射性核素或熒光標(biāo)記物所替代。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明為式7c的化合物：

及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體，

其中：

l為n或cr⁵；

m為n或cr⁶；

p為n或cr⁷；和

q為n或cr⁸；

x為鍵或?yàn)閏1-14烷基，其中至少一個(gè)碳任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基所替代，并且其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、c1-6烷基所替代；

r⁹為h、保護(hù)基團(tuán)、離去基團(tuán)、oh、nh2、n(c1-8烷基)2、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被so2、nh2或c1-6烷基所替代，其中c1-6烷基的至少一個(gè)h任選地被c3-8環(huán)烷基所替代，其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被o、oh、s、sh、nh、n-c1-8烷基所替代；

r³和r⁵-r⁸獨(dú)立地為h或(-ch2)1-12-r¹³，其中r¹³為疊氮化物或炔烴，

其中(-ch2)1-12-r¹³的至少一個(gè)h任選地被oh、nh2和c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被oh、nh2所替代，和

其中(-ch2)1-12-r¹³的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基、n(c1-8烷基)2所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被oh、nh2所替代。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明是用于體內(nèi)成像淀粉樣蛋白沉積物和tau纏結(jié)的藥物組合物，其包含(a)本文中和/或權(quán)利要求1-43中顯示的任何式的化合物和(b)藥學(xué)上可接受的載體。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明是診斷哺乳動(dòng)物中的阿爾茨海默氏病或其易患性的方法，所述方法包括：a)向所述哺乳動(dòng)物施用診斷有效量的放射性標(biāo)記的本文中任何式的化合物，其中所述化合物通過血腦屏障并優(yōu)先結(jié)合腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊和/或tau纏結(jié)，并且其中所述化合物選自放射性標(biāo)記的式7的化合物，例如；b)使所述化合物分布到腦組織中；和c)成像腦組織，其中所述化合物與腦組織的結(jié)合相比于結(jié)合的正常對(duì)照水平的增加表明所述哺乳動(dòng)物患有阿爾茨海默氏病或處于發(fā)展阿爾茨海默氏病的風(fēng)險(xiǎn)中。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明是診斷哺乳動(dòng)物中的阿爾茨海默氏病或其易忠性的方法，所述方法包括：a)向所述哺乳動(dòng)物施用診斷有效量的放射性標(biāo)記的權(quán)利要求1-43中任一項(xiàng)的化合物，其中所述化合物通過血腦屏障并優(yōu)先結(jié)合腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊和/或tau纏結(jié)，并且其中所述化合物選自放射性標(biāo)記的式1的化合物；b)使所述化合物分布到腦組織中；和c)成像腦組織，其中所述化合物與腦組織的結(jié)合相比于結(jié)合的正常對(duì)照水平的增加表明所述哺乳動(dòng)物患有阿爾茨海默氏病或處于發(fā)展阿爾茨海默氏病的風(fēng)險(xiǎn)中。

具體實(shí)施方式

詳述

“鹵素”或“鹵代”意指f、cl、br和i。

“烷基”意指具有直鏈或支鏈部分的飽和單價(jià)烴基。烷基的實(shí)例包括，但不限于，甲基、乙基、正丙基、異丙基和叔丁基。

“烯基”意指具有至少一個(gè)碳-碳雙鍵的烷基部分，其中烷基如上定義。烯基的實(shí)例包括，但不限于，乙烯基和丙烯基。

“炔基”意指具有至少一個(gè)碳-碳三鍵的烷基部分，其中烷基如上定義。炔基的實(shí)例包括，但不限于，乙炔基和2-丙炔基。

“亞烷基”或“亞烯基”意指具有直鏈或支鏈部分的飽和的二價(jià)烴基，即，通常作為兩個(gè)其它基團(tuán)之間的橋連或連接基團(tuán)存在。亞烷基的實(shí)例包括-ch2-(亞甲基)；-ch2ch2-(亞乙基)；-ch2ch2ch2-(亞丙基)，-ch(ch3)ch2-(亞異丙基)等。

“氨基”意指具有兩個(gè)附加取代基的氮部分，其中氫或碳原子連接于氮。例如，代表性的氨基包括-nh2，-nhch3，-n(ch3)2，-nhc2-3-烷基，-n(c2-3-烷基)2等。除非另外指明，否則含有氨基部分的本發(fā)明化合物可包括它們的受保護(hù)的衍生物。氨基部分的合適保護(hù)基團(tuán)包括乙?；?，叔丁氧基羰基，芐基氧基羰基等。

“芳基”意指通過去除一個(gè)氫衍生自芳族烴的有機(jī)基團(tuán)，諸如苯基、萘基、茚基、茚滿基和芴基。“芳基”涵蓋稠環(huán)基團(tuán)，其中至少一個(gè)環(huán)是芳族的。

“環(huán)烷基”意指由一個(gè)或多個(gè)環(huán)組成的非芳族飽和環(huán)烷基部分，其中所述環(huán)(如果多于一個(gè))共有至少一個(gè)碳原子，其中烷基如上定義。環(huán)烷基的實(shí)例包括，但不限于，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、雙環(huán)-[3.1.0]-己基、雙環(huán)-[2.2.1]-庚-1-基、降冰片基、螺[4.5]癸基、螺[4.4]壬基、螺[4.3]辛基、螺[4.2]庚基和金剛烷基。

“鹵代c1-6烷基”意指在烷基的碳原子上被至少一個(gè)鹵素原子取代的c1-6烷基。此類鹵代c1-6烷基的非排他性、代表性實(shí)例包括f-ch2-、f-ch2ch2-、f-ch2ch2ch2-、chf2-、chf2ch2-、chf2ch2ch2-、br-ch2-、br-ch2ch2-、br-ch2ch2ch2-、chbr2-、chbr2ch2-、chbr2ch2ch2-等。

“雜環(huán)”或“雜環(huán)烷基”意指由一個(gè)或多個(gè)環(huán)組成的非芳族環(huán)狀基團(tuán)，其中所述環(huán)(如果多于一個(gè))共有一個(gè)或兩個(gè)原子，并且每個(gè)環(huán)含有至多4個(gè)雜原子(即從零個(gè)至四個(gè)雜原子，條件是至少一個(gè)環(huán)含有至少一個(gè)雜原子)。本發(fā)明的雜環(huán)基團(tuán)也可以包括被作為雜原子的一個(gè)或多個(gè)o、s(o)0-2和/或n-r¹⁰取代的環(huán)系統(tǒng)，其中r¹⁰如本文定義，且其中s(o)0-2的下標(biāo)＂0-2＂代表0、1或2的整數(shù)。因此，s(o)2代表由s、s(＝o)和s(o)2組成的組。非芳族雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例為非芳族雜環(huán)基團(tuán)的實(shí)例是氮雜環(huán)丙烯基、氮雜環(huán)丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、氮雜環(huán)庚三烯基(azepinyl)、哌嗪基、1，2，3，6-四氫吡啶基、環(huán)氧乙烷基(oxiranyl)、氧雜環(huán)丁烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、嗎啉代、硫代嗎啉基、噻噁烷基(thioxanyl)、吡咯啉基、吲哚啉基、2h-吡喃基、4h-吡喃基、二氧雜環(huán)己烷基、1，3-二氧雜環(huán)己烷基、吡唑啉基、二氫吡喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮雜雙環(huán)[3.1.0]己烷基、3-氮雜雙環(huán)[4.1.0]庚烷基、喹嗪基、奎寧環(huán)基、1，4-二氧雜螺[4.5]癸基、1，4-二氧雜螺[4.4]壬基、1，4-二氧雜螺[4.3]辛基和1，4-二氧雜螺[4.2]庚基。

“雜芳基”意指含有一個(gè)或多個(gè)雜原子(o、s或n)、優(yōu)選一至四個(gè)雜原子的芳族基團(tuán)。雜芳基可以是單環(huán)或多環(huán)基團(tuán)。雜芳基的實(shí)例為吡啶基、噠嗪基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、喹啉基、異喹啉基、1，2，3，4-四氫guinolyl、四唑基、呋哺基、噻吩基、異噁唑基、噻唑基、噁唑基、異噻唑基、吡咯基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、吲唑基、吲嗪基、酞嗪基、三嗪基、1，3，5-三嗪基、異吲哚基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并三唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、二氫喹啉基、四氫喹啉基、二氫異喹啉基、四氫異喹啉基、苯并呋喃基、呋喃并吡啶基、吡咯并嘧啶基和氮雜吲哚基。在本申請(qǐng)的某些方面，雜芳基是4-取代的-1h-1，2-3-三唑-1-基。

如本文中所使用，當(dāng)二價(jià)基團(tuán)，諸如例如接頭，由如下所示生物結(jié)構(gòu)-a-b-代表時(shí)，還意在代表可以以兩種可能排列連接的基團(tuán)，如以下兩種結(jié)構(gòu)中所示。

例如，當(dāng)提供二價(jià)基團(tuán)，諸如基團(tuán)“-n(r¹⁰)c(o)-”時(shí)，例如，該基團(tuán)意在還包括二價(jià)基團(tuán)-n(r¹⁰)c(o)-和還有二價(jià)基團(tuán)-c(o)n(r¹⁰)-。

變量r¹、r²、r³、r⁴、r⁵、r⁶、r⁷、r⁸、r⁹和r¹⁰的取代基或基團(tuán)c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、c3-12環(huán)烷基c1-5烷基、c6-14芳基、c6-14芳基氧基、c6-10芳基c1-4烷基、雜芳基、雜芳基氧基等也任選進(jìn)一步被選自氨基、鹵素、氰基、硝基、羥基、-sh、-sc1-6烷基、-c(o)nh2、-c(s)nh2、鹵代c1-6烷基、全鹵代c1-6烷基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、c3-12環(huán)烷基、c6-14芳基和雜芳基的取代基所取代。

例如，在本申請(qǐng)的某些方面，雜芳基取代基是4-取代的-1h-1，2-3-三唑-1-基。在放射性標(biāo)記的本申請(qǐng)的化合物中，放射性核素可以被連接到式i化合物的芳基，如2-¹⁸f-＇咔唑衍生物，諸如表示為如下的化合物：

或2-(¹⁸f-氟乙基)-‘咔唑、2-(¹⁸f-氟甲基)-‘咔唑、¹¹c-甲氧基-基團(tuán)，例如，和/或放射性核素可以通過¹⁸f-氟乙基-基團(tuán)、¹⁸f-氟甲基-基團(tuán)、¹¹c-甲氧基-基團(tuán)、4-[(¹⁸f-氟乙基)-1h-1，2-3-三唑-1-基]-乙氧基-基團(tuán)、4-[(¹⁸f-氟乙基)-1h-1，2-3-三唑-1-基]-丙基氧基-基團(tuán)、¹²³i、¹²⁴i、¹²⁵i或¹³¹i基團(tuán)等的方式被連接到變量r¹、r²、r³、r⁴、r⁵、r⁶、r⁷、r⁸、r⁹和r¹⁰中的任何一個(gè)或多個(gè)。除非另作說明，否則被表示為被原子(諸如在f-ch2ch2-(＇咔唑)或f-ch2ch2o-(＇咔唑)中的原子氟所一般表示的)取代的化合物，例如，用于覆蓋天然存在的元素¹⁹f(氟-19)以及元素本身的¹⁸f(氟-18)同位素。

術(shù)語“任選取代的”或“取代的”是指特定取代基或基團(tuán)，其中基團(tuán)中的一個(gè)至四個(gè)氫原子可被一個(gè)至四個(gè)取代基取代，例如，所述取代基獨(dú)立地選自取代基氨基、鹵代、氰基、硝基、羥基、-sh、-sc1-6烷基、-c(o)nh2、-c(s)nh2、鹵代c1-6烷基、全鹵代c1-6烷基、c1-6烷基、c3-6環(huán)烷基、c3-12環(huán)烷基、c6-14芳基和雜芳基，或如本文中具體公開。此外，取代基還可以包括烷基、芳基、亞烷基-芳基、羥基、烷氧基、芳基氧基、全鹵代烷氧基、雜環(huán)基、疊氮基、氨基、胍基、脒基、鹵代、烷基硫基、氧代、?；榛?、羧基酯、羧基、酰胺基、酰氧基、氨基烷基、烷基氨基芳基、烷基氨基烷基、烷氧基芳基、芳基氨基、膦?；?、磺酰基、酰胺基芳基、羥基烷基、鹵代烷基、烷氧基烷基和全鹵代烷基。此外，關(guān)于變量r¹、r²、r³、r⁴、r⁵、r⁶、r⁷、r⁸、r⁹和r¹⁰的術(shù)語“任選取代的”或“取代的”包括被一個(gè)至四個(gè)取代基取代的基團(tuán)，如上所鑒定，其進(jìn)一步包含正電子或γ發(fā)射體。此類正電子發(fā)射體包括，但不限于，¹¹c、¹³n、¹⁵o、¹⁸f、¹²³i、¹²⁴i、¹²⁵i、¹³¹i和⁷⁷br。

如本文所使用，術(shù)語“放射性標(biāo)記的化合物”是指具有原子或基團(tuán)的化合物，所述原子或基團(tuán)可以提供放射性標(biāo)記，或者可以被轉(zhuǎn)化為放射性標(biāo)記，諸如從非放射性原子轉(zhuǎn)化為具有活性的放射性核素，諸如例如，¹¹c、¹³n、¹⁵o、¹⁸f、¹²³i、¹²⁴i、¹²⁵i、¹³¹i和⁷⁷br。此外，對(duì)于本申請(qǐng)的目的，此類“放射性標(biāo)記的化合物”也可指原子或基團(tuán)，所述原子或基團(tuán)包含非活性核素，諸如鹵素，諸如例如¹⁹f，其中所述化合物可以治療有效量使用和施用。

本文中公開的式的化合物可以具有光學(xué)中心，因此可以以不同對(duì)映體和非對(duì)映體構(gòu)型存在。本發(fā)明包括此類本文中公開的式的化合物的所有對(duì)映體、非對(duì)映體和其它立體異構(gòu)體，以及其立體異構(gòu)體的外消旋化合物和外消旋混合物以及其它混合物。本文中公開的式的化合物的藥學(xué)上可接受的鹽包括其酸加成鹽和堿鹽。合適的酸加成鹽由形成無毒鹽的酸形成。實(shí)例包括，但不限于，乙酸鹽、己二酸鹽、天冬氨酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、硼酸鹽、檸檬酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡萄糖酸鹽、葡糖醛酸鹽、鹽酸鹽/氯化物、氫溴酸鹽/溴化物、氫碘酸鹽/碘化物、乳酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘酸鹽(naphthylate)、草酸鹽、棕櫚酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、焦谷氨酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、磺酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽和三氟乙酸鹽。合適的堿鹽由形成無毒鹽的堿形成。實(shí)例包括，但不限于，鋁鹽、精氨酸鹽、芐星青霉素鹽、鈣鹽、膽堿鹽、二乙胺鹽、二乙醇胺鹽、甘氨酸鹽、賴氨酸鹽、鎂鹽、鉀鹽、鈉鹽、氨丁三醇鹽和鋅鹽。也可以形成酸和堿的半鹽，例如，半硫酸鹽和半鈣鹽。對(duì)于關(guān)于合適鹽的綜述，參見handbookofpharmaceuticalsalts：properties，selection，anduse，stahl和wermuth(wiley-vch，2002)。本文中公開的式的化合物的藥學(xué)上可接受的鹽可以通過三種方法中的一種或多種來制備：(i)通過本文中公開的式的化合物與期望的酸或堿反應(yīng)；(ii)通過從本文中公開的式的化合物的合適前體去除酸-或堿-不穩(wěn)定的保護(hù)基團(tuán)；或(iii)通過經(jīng)由與適當(dāng)?shù)乃峄驂A反應(yīng)或借助合適的離子交換柱將本文中公開的式的化合物的一種鹽轉(zhuǎn)化為另一種鹽。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，成像通過采用選自正電子發(fā)射斷層成像(pet)和單光子發(fā)射計(jì)算斷層成像(spect)的熒光成像技術(shù)或核成像技術(shù)，用于監(jiān)測(cè)或可視化腦內(nèi)或在其部分內(nèi)放射性標(biāo)記的或標(biāo)記物的化合物的分布的熒光成像技術(shù)和/或核成像技術(shù)。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明是用于在有需要的哺乳動(dòng)物中治療疾病或狀況的方法，所述疾病或狀況選自焦慮癥、抑郁癥、精神分裂癥、阿爾茨海默氏病、應(yīng)激相關(guān)疾病、恐慌、恐懼癥、強(qiáng)迫癥、肥胖癥、創(chuàng)傷后應(yīng)激綜合征、或癲癇，其包括向所述哺乳動(dòng)物施用治療有效量的式7-8的化合物。

在一個(gè)實(shí)施方案中，提供了放射性標(biāo)記的下式的化合物：

及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體，

其中：

l為n或cr⁵；

m為n或cr⁶；

p為n或cr⁷；和

q為n或cr⁸；

x為鍵或?yàn)閏1-14烷基，其中至少一個(gè)碳任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基所替代，并且其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、c1-6烷基所替代；

r⁹為h、保護(hù)基團(tuán)、離去基團(tuán)、疊氮化物、炔烴、oh、鹵素、nh2、n(c1-8烷基)2、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、so2、nh2或c1-6烷基所替代，其中c1-6烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素或c3-8環(huán)烷基所替代，其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素所替代，并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被o、oh、s、sh、nh、n-c1-8烷基所替代；

r¹-r⁸獨(dú)立地為h、oh、鹵素、nh2、ch3、so2、no2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)、芳基、雜芳基、nhr¹²、n(r¹²)2c3-8環(huán)烷基、(-ch2)1-12-r¹²，其中r¹²為ch3、芳基、h或雜芳基，其中(-ch2)1-12-r¹²、c3-8環(huán)烷基、芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)和c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，和

其中(-ch2)1-12-r¹²的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基、n(c1-8烷基)2所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s或nh、n-c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

其中至少一個(gè)鹵素任選地被放射性核素或熒光標(biāo)記物所替代。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明為下式的化合物：

及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體，

其中：

l為n或cr⁵；

m為n或cr⁶；

x為鍵或?yàn)閏1-14烷基，其中至少一個(gè)碳任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基所替代，并且其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、c1-6烷基所替代；

r⁹為h、保護(hù)基團(tuán)、離去基團(tuán)、疊氮化物、炔烴、oh、鹵素、nh2、n(c1-8烷基)2、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、so2、nh2、或c1-6烷基或c1-6烷基所替代，其中c1-6烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素或c3-8環(huán)烷基所替代，其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素所替代，并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被o、oh、s、sh、nh、n-c1-8烷基所替代；

r²、r³、r⁷和r⁸獨(dú)立地為h、oh、鹵素、nh2、ch3、so2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)、芳基、雜芳基、nhr¹²、n(r¹²)2c3-8環(huán)烷基、(-ch2)1-12-r¹²，其中r¹²為ch3、芳基、h或雜芳基，

其中(-ch2)1-12-r¹²、c3-8環(huán)烷基、芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)和c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，和

其中(-ch2)1-12-r¹²的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基、n(c1-8烷基)2所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s或nh、n-c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

其中至少一個(gè)鹵素任選地被放射性核素或熒光標(biāo)記物所替代。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明為下式的化合物：

及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體，

其中：

l為n或cr⁵；

m為n或cr⁶；

x為鍵或?yàn)閏1-14烷基，其中至少一個(gè)碳任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基所替代，并且其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、c1-6烷基所替代；

r⁹為h、保護(hù)基團(tuán)、離去基團(tuán)、疊氮化物、炔烴、oh、鹵素、nh2、n(c1-8烷基)2、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、so2、nh2、或c1-6烷基或c1-6烷基所替代，其中c1-6烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素或c3-8環(huán)烷基所替代，其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素所替代，并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被o、oh、s、sh、nh、n-c1-8烷基所替代；

r³為鍵或?yàn)閛、s、c(o)、so2、nh、n-c1-8烷基、(ch2)1-12中的至少一個(gè)，其中(ch2)1-12的至少一個(gè)c任選地被c(o)、o、s、so2、nh、n-c1-8烷基所替代，并且其中至少一個(gè)h任選地被c1-8烷基或鹵素所替代，

r²⁰為芳基或雜芳基；

r²¹為h、oh、鹵素、nh2、ch3、so2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)、(-ch2)1-12-ch3、c3-8環(huán)烷基，

其中(-ch2)1-12-ch3或c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)和c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

并且其中(-ch2)1-12-ch3的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基、n(c1-8烷基)2所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s、so2、或nh、n-c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，

其中至少一個(gè)鹵素任選地被放射性核素或熒光標(biāo)記物所替代。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明為下式的化合物：

及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體，

其中：

l為n或cr⁵；

m為n或cr⁶；

r⁹為h、保護(hù)基團(tuán)、離去基團(tuán)、鹵素或ch3；

r²、r³、r⁵和r⁶獨(dú)立地為h、oh、鹵素、nh2、ch3、so2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)、芳基、雜芳基、nhr¹²、n(r¹²)2c3-8環(huán)烷基、(-ch2)1-12-r¹²，其中r¹²為ch3、芳基、h或雜芳基，

其中(-ch2)1-12-r¹²、c3-8環(huán)烷基、芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)和c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，和

其中(-ch2)1-12-r¹²的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基、n(c1-8烷基)2所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、nh2、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，并且其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s或nh、n-c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、離去基團(tuán)、保護(hù)基團(tuán)所替代，其中至少一個(gè)鹵素任選地被放射性核素或熒光標(biāo)記物所替代。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明為下式的化合物：

及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體，

其中：

l為n或cr⁵；

m為n或cr⁶；

p為n或cr⁷；和

q為n或cr⁸；

x為鍵或?yàn)閏1-14烷基，其中至少一個(gè)碳任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基所替代，并且其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被鹵素、oh、c1-6烷基所替代；

r⁹為h、保護(hù)基團(tuán)、離去基團(tuán)、oh、nh2、n(c1-8烷基)2、芳基或雜芳基，其中芳基或雜芳基的至少一個(gè)h任選地被so2、nh2或c1-6烷基所替代，其中c1-6烷基的至少一個(gè)h任選地被c3-8環(huán)烷基所替代，其中c3-8環(huán)烷基的至少一個(gè)ch2任選地被o、oh、s、sh、nh、n-c1-8烷基所替代；

r³和r⁵-r⁸獨(dú)立地為h或(-ch2)1-12-r¹³，其中r¹³為疊氮化物或炔烴，

其中(-ch2)1-12-r¹³的至少一個(gè)h任選地被oh、nh2和c1-8烷基所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被oh、nh2所替代，和

其中(-ch2)1-12-r¹³的至少一個(gè)ch2任選地被c(o)、o、s、so2或nh、nh-c1-8烷基、n(c1-8烷基)2所替代，其中c1-8烷基的至少一個(gè)h任選地被oh、nh2所替代。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明是用于體內(nèi)成像淀粉樣蛋白沉積物和tau纏結(jié)的藥物組合物，其包含(a)上述或權(quán)利要求1-43中顯示的任何式的化合物和(b)藥學(xué)上可接受的載體。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明是診斷哺乳動(dòng)物中的阿爾茨海默氏病或其易患性的方法，所述方法包括：a)向所述哺乳動(dòng)物施用診斷有效量的放射性標(biāo)記的化合物，其中所述化合物通過血腦屏障并優(yōu)先結(jié)合腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊和/或tau纏結(jié)，并且其中所述化合物選自放射性標(biāo)記的式7(例如)的化合物；b)使所述化合物分布到腦組織中；和c)成像腦組織，其中所述化合物與腦組織的結(jié)合相比于結(jié)合的正常對(duì)照水平的增加表明所述哺乳動(dòng)物患有阿爾茨海默氏病或處于發(fā)展阿爾茨海默氏病的風(fēng)險(xiǎn)中。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明是診斷哺乳動(dòng)物中的阿爾茨海默氏病或其易患性的方法，所述方法包括：a)向所述哺乳動(dòng)物施用診斷有效量的放射性標(biāo)記的以下提供的權(quán)利要求1-43中任一項(xiàng)的化合物，其中所述化合物通過血腦屏障并優(yōu)先結(jié)合腦組織中的淀粉樣蛋白斑塊和/或tau纏結(jié)，并且其中所述化合物選自放射性標(biāo)記的式7(例如)的化合物；b)使所述化合物分布到腦組織中；和c)成像腦組織，其中所述化合物與腦組織的結(jié)合相比于結(jié)合的正常對(duì)照水平的增加表明所述哺乳動(dòng)物患有阿爾茨海默氏病或處于發(fā)展阿爾茨海默氏病的風(fēng)險(xiǎn)中。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明是用于成像和檢測(cè)腦組織中老年斑和/或神經(jīng)原纖維纏結(jié)的方法，所述方法包括用式7-8的化合物處理所述組織，用于檢測(cè)神經(jīng)病癥。

神經(jīng)病癥可以通過測(cè)量式7-8的化合物對(duì)于tau聚集體的親和力來測(cè)量。

在一個(gè)實(shí)施方案中，檢測(cè)可以通過用pet或spect的γ成像。

表1

表1：已知的ad陽性熒光染料和成像劑。

表2：可用于體內(nèi)檢測(cè)ad生物標(biāo)志物的化合物的實(shí)例。這些化合物可以被放射性標(biāo)記或是“冷的”。

本發(fā)明的其它實(shí)施方案包括下表3：

本發(fā)明的其它實(shí)施方案包括下表4：

應(yīng)當(dāng)理解的是，這些基于咔唑的化合物的鹵素，例如f，可以是放射性的，或者它可以是“冷的”。具體而言，它可以是¹⁸f。其它合適的放射性原子可以包括¹¹c、¹³n、¹⁵o、¹⁸f、⁶¹cu、⁶²cu、⁶⁴cu、⁶⁷cu、⁶⁸ga、¹²⁴i、¹²⁵i、¹³¹i、⁹⁹tc、⁷⁵br、¹⁵³gd和³²p。

例如，放射性標(biāo)記的化合物可以包括：

本發(fā)明的化合物也可以是前體：

其它前體可以包括：

本發(fā)明的化合物也可以是：

其中r13是鹵代或放射性核素。

當(dāng)靜脈內(nèi)注入小鼠時(shí)，基于咔唑的化合物，具體而言t807、t805和t794已經(jīng)顯示優(yōu)異的腦攝取。這些化合物還展示對(duì)于tau原纖維的高結(jié)合親和力。使用本發(fā)明化合物的放射自顯影術(shù)表明在ad腦切片中nfts的標(biāo)記。熒光測(cè)定數(shù)據(jù)顯示這些試劑與tau聚集體和aβ原纖維的結(jié)合能力。在神經(jīng)病理學(xué)染色中，本發(fā)明的化合物染色淀粉樣蛋白斑塊和/或tau聚集體。

在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及包括如本文公開的式的化合物和組合物，其中所述化合物是淀粉樣蛋白和/或tau蛋白結(jié)合化合物。本發(fā)明的淀粉樣蛋白和/或tau蛋白結(jié)合化合物可以以適合于淀粉樣蛋白沉積物和/或ntfs的體內(nèi)成像的量施用于患者，并且區(qū)分具有淀粉樣蛋白沉積物和/或ntfs的神經(jīng)組織與正常神經(jīng)組織。

aβ化合物一般在使用合成aβ1-42原纖維的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合測(cè)定中評(píng)估(ic50)。情況對(duì)于tau更復(fù)雜，因?yàn)樵赼d腦中潛在存在tau的6種同種型，其為單個(gè)tau基因的可變剪接產(chǎn)物。在文獻(xiàn)中的大多數(shù)報(bào)道從而僅依賴于一種重組同種型，tau-441。增加更多復(fù)雜性的是，各種tau同種型在體內(nèi)是高磷酸化的，一些是在體外難以模擬的。此外，關(guān)于這些tau原纖維的結(jié)構(gòu)信息缺乏，使得難以解釋化合物的結(jié)合。

天然形式的tau(各種同種型，高磷酸化的)和淀粉樣蛋白聚集體存在于腦切片中且從而對(duì)于化合物測(cè)試是優(yōu)選的。使用測(cè)試化合物的自熒光可以給出化合物是否與tau纏結(jié)/phfs和/或淀粉樣蛋白斑塊結(jié)合的指示。這通過用aβ和tau抗體的免疫染色和重疊圖像進(jìn)一步證實(shí)。缺點(diǎn)是熒光信號(hào)不能用于定量，因?yàn)橐恍┗衔锟梢哉故颈绕渌鼜?qiáng)的熒光信號(hào)以及aβ斑塊和tau纏結(jié)在ad腦中的共存。然而，有可能定量地“評(píng)級(jí)(rate)”信號(hào)強(qiáng)度且區(qū)分顯示與這些聚集體結(jié)合的化合物。

此外，選擇性可以在僅包含aβ斑塊/無tau聚集體、aβ斑塊/和tau聚集體的腦以及對(duì)照腦中進(jìn)行評(píng)估。不幸的是，不存在僅具有tau和不存在aβ的ad腦。通過測(cè)試這些腦切片中的放射性標(biāo)記的示蹤劑，可以更定量評(píng)估相對(duì)結(jié)合強(qiáng)度(信號(hào)強(qiáng)度)和各種測(cè)試化合物的選擇性，因?yàn)樗鼈兌及嗤姆派湫允聚檮?。例如，如果測(cè)試示蹤劑僅與tau結(jié)合而不與淀粉樣蛋白結(jié)合，那么它在僅有aβ斑塊的腦切片中應(yīng)顯示無信號(hào)。如果化合物僅與淀粉樣蛋白結(jié)合，那么它在2個(gè)類型的腦中應(yīng)顯示攝取。鑒定和進(jìn)一步定量選擇性化合物的困難在于淀粉樣蛋白與tau比較的相對(duì)豐度，這是難以測(cè)量的。

本發(fā)明的淀粉樣蛋白和/或tau蛋白探針可以用于檢測(cè)且定量疾病中的淀粉樣蛋白沉積物和/或ntfs，所述疾病包括但不限于地中海熱、mucklewells綜合征、特發(fā)性骨髓瘤、淀粉樣多神經(jīng)病、淀粉樣心肌病、全身性老年性淀粉樣變性(systemicsenilemyloidosis)、淀粉樣多神經(jīng)病、遺傳性腦出血伴淀粉樣變性、唐氏綜合癥、羊瘙癢癥、克-雅二氏(creutzfeldt-jacob)病、庫(kù)魯病、gerstamnn-straussler-scheinker綜合征、甲狀腺髓樣癌、孤立性心房淀粉樣變性、在透析患者中的β2-微球蛋白淀粉樣變性、包含體肌炎、在肌萎縮疾病中的β2-淀粉樣蛋白沉積物、慢性創(chuàng)傷性腦病(cte)、和胰島ii型糖尿病胰島素瘤。

在本發(fā)明的其它實(shí)施方案中，標(biāo)記的化合物以可檢測(cè)的量引入患者內(nèi)，并且在對(duì)于化合物變得與淀粉樣蛋白沉積物和/或tau蛋白結(jié)合的足夠時(shí)間已過去后，非侵入性檢測(cè)標(biāo)記的化合物。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，將本文公開的標(biāo)記的式的化合物引入患者內(nèi)，允許足夠時(shí)間使化合物變得與淀粉樣蛋白沉積物結(jié)合，并且隨后從患者中取出組織樣品，并且遠(yuǎn)離患者檢測(cè)組織中的標(biāo)記化合物。在本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案中，從患者中取出組織樣品，并且例如將標(biāo)記的式7化合物引入組織樣品內(nèi)。在對(duì)于化合物變得與淀粉樣蛋白沉積物和/或tau蛋白結(jié)合足夠量的時(shí)間后，檢測(cè)到化合物。

配體和它們的標(biāo)記前體的合成：

鹵化和放射性鹵化：

如本文中公開，對(duì)于許多不同的ad配體，諸如如本文中公開的黃酮類、香豆素類、咔唑類、喹啉酮類、chromenone類、三取代的咪唑類和它們的衍生物，放射性標(biāo)記的原子，諸如鹵素原子，例如，可以使用本領(lǐng)域眾所周知的許多不同方法容易地引入配體。因此，放射性標(biāo)記的式7-8的化合物可以使用本領(lǐng)域已知用于制備此類具有特定取代基的放射性標(biāo)記的化合物的標(biāo)準(zhǔn)方法來制備，其中所述化合物可以并入選自¹¹c、¹³n、¹⁵o、¹⁸f、¹²³i、¹²⁶i、¹²⁵i、¹³¹i和⁷⁷br的特定放射性核素。

在一個(gè)具體實(shí)例中，鹵素可以通過使用錫的用于鹵素交換過程的方法來引入。例如，非放射性鹵素，諸如碘，可以經(jīng)由金屬諸如鈀組合物被有機(jī)錫化合物替代，以形成放射性標(biāo)記的錫前體，如下表示。該前體然后經(jīng)受經(jīng)由用na¹²⁵i源的替代的放射性鹵化，例如，以得到放射性配體。

或者，放射性標(biāo)記的鹵素可以經(jīng)由直接鹵化容易地引入。例如，對(duì)于包含芳族環(huán)作為支架部分或配體的芳族取代基的配體，芳族環(huán)可以使用良好確立的放射性碘化程序直接碘化。一種此類實(shí)例在下面使用咔唑配體表示。

對(duì)于¹¹c-標(biāo)記的化合物，標(biāo)記的化合物可以通過羥基諸如用[¹¹c]ch3i的烷基化或甲基化來制備，以提供相應(yīng)的c-11標(biāo)記的甲氧基衍生物。例如，此類方法通過如下顯示的黃酮衍生物的反應(yīng)來表示。

制備放射性標(biāo)記的配體的其它方法是本領(lǐng)域眾所周知的。此類方法的實(shí)例公開于，例如：

本文中引用的所有參考文獻(xiàn)的主題都以其整體通過引用并入本文。

ad-cb-wz01013的合成

向1mlnmp中的羥基咔唑(73mg，0.4mmol)中添加cs2co3(130mg，0.4mmol)和溴氟乙烷(51mg，0.4mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢?5h，并且用et2o(50ml)稀釋。將其用1mhcl(30ml)和水(2x40ml)洗滌，經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物用硅膠層析(己烷中4％etoac至25％)純化以得到作為灰白色固體的所需產(chǎn)物(36mg)。

ad-c-wz01011的合成

向4mlnmp中的羥基咔唑(183mg，1mmol)中添加cs2co3(326mg，1mmol)和亞乙基二-甲苯磺?；?370mg，1mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢?5h，并且用et2o(80ml)稀釋。將其用1mhcl(50ml)和水(2x50ml)洗滌，經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物用硅膠層析(己烷中50％dcm至100％dcm)純化以得到作為灰白色固體的所需產(chǎn)物(75mg)。

18f-標(biāo)記的ad-cb-001p-wz-01019([¹⁸f]2-(2-氟-乙氧基)-9h-咔唑)的合成

將作為h2¹⁸o中富集溶液的[¹⁸f]氟化物(600-900mci)遞送至合成模塊。將[¹⁸f]氟化物捕獲在離子交換柱上，然后使用碳酸鉀水溶液(0.4mlh2o中3.0mg)洗脫至反應(yīng)容器中。添加kryptofix-2.2.2相轉(zhuǎn)移試劑(1.0mlmecn中20.0mg)，并將水-乙腈共沸物蒸發(fā)至干燥。將甲苯-4-磺酸2-(9h-咔唑-2-基氧基)-乙酯前體(0.9mlmecn/0.1mldmso中4mg)添加至反應(yīng)器，然后將氟化反應(yīng)在115℃加熱10min。然后，通過半制備hplc(柱：phenomenexlunac-18，250mmx10mm；流動(dòng)相梯度95∶5h2o(+0.05％tfa)∶mecn(+0.05％tfa)至100％mecn(+0.05％tfa)；流速：5ml/min)純化粗反應(yīng)混合物。

將對(duì)應(yīng)于[¹⁸f]2-(2-氟-乙氧基)-9h-咔唑的峰收集，并同時(shí)用無菌水(10ml)稀釋。將所得混合物通過c-18sep-pak，從而使得將產(chǎn)物捕獲，并將殘余乙腈用額外水(10ml)洗掉。然后將[¹⁸f]2-(2-氟-乙氧基)-9h-咔唑用usp級(jí)乙醇(0.5ml)洗脫至產(chǎn)物小瓶中，并用無菌水(9.5ml)稀釋，以提供適合用于注射(7.5％衰減校正產(chǎn)率(decaycorrectedyield)，100％放射化學(xué)純度)的最終制劑(10ml中19-34mci)。

通過配備放射活性檢測(cè)器的分析型hplc測(cè)定純度，并通過與對(duì)應(yīng)未標(biāo)記的參考標(biāo)準(zhǔn)品的hplc數(shù)據(jù)比較而驗(yàn)證身份(ussn12/372,717的圖3a和圖3b)。

ad-cb-002p-wz01031的合成

向2mlnmp中的羥基咔唑(92mg，0.5mmol)中添加cs2co3(163mg，0.5mmol)和疊氮基乙基甲苯磺?；?121mg，0.5mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢?5h，并且用et2o(50ml)稀釋。將其用0.5mhcl(50ml)和水(2x50ml)洗滌，經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物用硅膠層析(己烷中80％dcm至100％dcm)純化以得到作為白色固體的所需產(chǎn)物(76mg)。

ad-cb-002s-wz01033的合成

向0.5mldmf中的疊氮基咔唑(32mg，0.127mmol)中添加cui(7.6mg，0.04mmol)、dipea(16.4mg，0.127mmol)和氟戊炔(16.4mg，0.19mmol)。將反應(yīng)混合物劇烈攪拌1h，并且用etoac(30ml)稀釋。將其用水(50ml)、0.5mhcl(30ml)、水(2x50ml)洗滌，經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物預(yù)吸附在硅膠(3g)上并上樣在4g硅膠柱上并用己烷中30％至50％etoac洗脫，以得到所需化合物(20mg)。

18f-標(biāo)記的ad-cb-002s-wz01033的合成：

[¹⁸f]5-氟-戊-1-炔的制備

將作為h2¹⁸o中富集溶液的[¹⁸f]氟化物(600-900mci)遞送至合成模塊。將[¹⁸f]氟化物捕獲在離子交換柱上，然后使用碳酸鉀水溶液(0.4mlh2o中3.0mg)洗脫至反應(yīng)器中。添加kryptofix-2.2.2相轉(zhuǎn)移試劑(1.0mlmecn中20.0mg)，并將水-乙腈共沸物蒸發(fā)至干燥。

將甲苯-4-磺酸戊-4-炔基酯(0.8mlmecn中20mg)添加至反應(yīng)器并將氟化反應(yīng)在110℃加熱5min。氟化之后，將粗反應(yīng)混合物通過蒸餾純化并得到作為乙腈中溶液的[¹⁸f]5-氟-戊-1-炔(由于產(chǎn)物的揮發(fā)性而在-78℃捕獲)。

三唑的制備：

將dmf(0.4ml)和水(0.1ml)中疊氮化物前體(5mg)、抗壞血酸鈉(40mg)、三-(芐基三唑基甲基)胺(tbta，25mg)和硫酸銅水溶液(0.1m，0.25ml)的混合物添加至如上所述的冷卻的戊炔溶液中。然后，將反應(yīng)混合物升溫至室溫并攪拌30min。該時(shí)間之后，將反應(yīng)通過半制備hplc純化。將對(duì)應(yīng)于產(chǎn)物的峰收集，并同時(shí)用無菌水(10ml)稀釋。將所得混合物通過c-18sep-pak，并將殘余乙腈用額外水(10ml)洗掉。將產(chǎn)物用usp級(jí)乙醇(0.5ml)洗脫至產(chǎn)物小瓶中，并用無菌水(9.5ml)稀釋，提供適合用于注射的最終制劑。

通過配備放射活性檢測(cè)器的分析型hplc測(cè)定純度，并通過與對(duì)應(yīng)未標(biāo)記的參考標(biāo)準(zhǔn)品的hplc數(shù)據(jù)比較而驗(yàn)證身份。

¹⁸f-標(biāo)記的cb-003的合成

將作為h2¹⁸o中富集溶液的[¹⁸f]氟化物(600-900mci)遞送至合成模塊。將[¹⁸f]氟化物捕獲在離子交換柱上，然后使用碳酸鉀水溶液(0.4mlh2o中3.0mg)洗脫至反應(yīng)器中。添加kryptofix-2.2.2相轉(zhuǎn)移試劑(1.0mlmecn中20.0mg)，并將水-乙腈共沸物蒸發(fā)至干燥。將前體(0.9mlmecn/0.1mldmso中4mg)添加至反應(yīng)器并將氟化反應(yīng)在115℃加熱10min。將混合物冷卻至55℃，并如前面將大部分乙腈在真空和氬氣流下蒸發(fā)。向粗boc-保護(hù)的產(chǎn)物中添加鹽酸水溶液(1.0m，1.0ml)，并將混合物加熱至105℃持續(xù)3分鐘。冷卻至35℃之后，在攪拌下添加乙酸鈉水溶液(2.0m，0.5ml)。然后，通過半制備型hplc(柱：phenomenexlunac-18，250mmx10mm；流動(dòng)相梯度95∶5h2o(+0.05％tfa)∶mecn(+0.05％tfa)至100％mecn(+0.05％tfa)；流速：5ml/min；時(shí)間＝25min)純化粗反應(yīng)混合物。將對(duì)應(yīng)于最終產(chǎn)物的峰收集，并同時(shí)用無菌水(10ml)稀釋。將所得混合物通過c-18sep-pak，從而使得將產(chǎn)物捕獲，并將殘余乙腈用額外水(10ml)洗掉。然后，將產(chǎn)物用usp級(jí)乙醇(0.5ml)洗脫至產(chǎn)物小瓶中，并用無菌水(9.5ml)稀釋，提供適合用于注射的最終制劑(31％衰減校正產(chǎn)率，100％放射化學(xué)純度)。通過配備放射活性檢測(cè)器的分析型hplc測(cè)定純度，并通過與對(duì)應(yīng)未標(biāo)記的參考標(biāo)準(zhǔn)品的hplc數(shù)據(jù)比較而驗(yàn)證身份。

¹⁸f-標(biāo)記的cb-004的合成

將作為h2¹⁸o中富集溶液的[¹⁸f]氟化物(600-900mci)遞送至合成模塊。將[¹⁸f]氟化物捕獲在離子交換柱上，然后使用碳酸鉀水溶液(0.4mlh2o中3.0mg)洗脫至反應(yīng)器中。添加kryptofix-2.2.2相轉(zhuǎn)移試劑(1.0mlmecn中20.0mg)，并將水-乙腈共沸物蒸發(fā)至干燥。將前體(0.9mlmecn/0.1mldmso中4mg)添加至反應(yīng)器并將氟化反應(yīng)在115℃加熱10min。將混合物冷卻至55℃，并如前面將大部分乙腈在真空和氬氣流下蒸發(fā)。向粗boc-保護(hù)的產(chǎn)物中添加鹽酸水溶液(1.0m，1.0ml)，并將混合物加熱至105℃持續(xù)3分鐘。冷卻至35℃之后，在攪拌下添加乙酸鈉水溶液(2.0m，0.5ml)。然后，通過半制備型hplc(柱：phenomenexlunac-18，250mmx10mm；流動(dòng)相梯度95∶5h2o(+0.05％tfa)∶mecn(+0.05％tfa)至100％mecn(+0.05％tfa)；流速：5ml/min；時(shí)間＝25min)純化粗反應(yīng)混合物。將對(duì)應(yīng)于最終產(chǎn)物的峰收集，并同時(shí)用無菌水(10ml)稀釋。將所得混合物通過c-18sep-pak，從而使得將產(chǎn)物捕獲，并將殘余乙腈用額外水(10ml)洗掉。然后，將產(chǎn)物用usp級(jí)乙醇(0.5ml)洗脫至產(chǎn)物小瓶中，并用無菌水(9.5ml)稀釋，提供適合用于注射的最終制劑(3％衰減校正產(chǎn)率，100％放射化學(xué)純度)。通過配備放射活性檢測(cè)器的分析型hplc測(cè)定純度，并通過與對(duì)應(yīng)未標(biāo)記的參考標(biāo)準(zhǔn)品的hplc數(shù)據(jù)比較而驗(yàn)證身份。

¹⁸f-標(biāo)記的cb-007的合成

將作為h2¹⁸o中富集溶液的[¹⁸f]氟化物(600-900mci)遞送至合成模塊。將[¹⁸f]氟化物捕獲在離子交換柱上，然后使用碳酸鉀水溶液(0.4mlh2o中3.0mg)洗脫至反應(yīng)器中。添加kryptofix-2.2.2相轉(zhuǎn)移試劑(1.0mlmecn中20.0mg)，并將水-乙腈共沸物蒸發(fā)至干燥。將前體(0.9mlmecn/0.1mldmso中4mg)添加至反應(yīng)器并將氟化反應(yīng)在115℃加熱10min。將混合物冷卻至55℃，并如前面將大部分乙腈在真空和氬氣流下蒸發(fā)。向粗boc-保護(hù)的產(chǎn)物中添加鹽酸水溶液(1.0m，1.0ml)，并將混合物加熱至105℃持續(xù)3分鐘。冷卻至35℃之后，在攪拌下添加乙酸鈉水溶液(2.0m，0.5ml)。然后，通過半制備型hplc(柱：phenomenexlunac-18，250mmx10mm；流動(dòng)相梯度95∶5h2o(+0.05％tfa)∶mecn(+0.05％tfa)至100％mecn(+0.05％tfa)；流速：5ml/min；時(shí)間＝25min)純化粗反應(yīng)混合物。將對(duì)應(yīng)于最終產(chǎn)物的峰收集，并同時(shí)用無菌水(10ml)稀釋。將所得混合物通過c-18sep-pak，從而使得將產(chǎn)物捕獲，并將殘余乙腈用額外水(10ml)洗掉。然后，將產(chǎn)物用usp級(jí)乙醇(0.5ml)洗脫至產(chǎn)物小瓶中，并用無菌水(9.5ml)稀釋，提供適合用于注射的最終制劑(1.2％衰減校正產(chǎn)率，100％放射化學(xué)純度)。通過配備放射活性檢測(cè)器的分析型hplc測(cè)定純度，并通過與對(duì)應(yīng)未標(biāo)記的參考標(biāo)準(zhǔn)品的hplc數(shù)據(jù)比較而驗(yàn)證身份。

¹⁸f-標(biāo)記的cb-012的合成

將作為h2¹⁸o中富集溶液的[¹⁸f]氟化物(600-900mci)遞送至合成模塊。將[¹⁸f]氟化物捕獲在離子交換柱上，然后使用碳酸鉀水溶液(0.4mlh2o中3.0mg)洗脫至反應(yīng)器中。添加kryptofix-2.2.2相轉(zhuǎn)移試劑(1.0mlmecn中20.0mg)，并將水-乙腈共沸物蒸發(fā)至干燥。將甲苯-4-磺酸2-(9h-咔唑-2-基氧基)-乙酯前體(0.9mlmecn/0.1mldmso中4mg)添加至反應(yīng)器，然后將氟化反應(yīng)在115℃加熱10min。然后，通過半制備型hplc(柱：phenomenexlunac-18，250mmx10mm；流動(dòng)相梯度95∶5h2o(+0.05％tfa)∶mecn(+0.05％tfa)至100％mecn(+0.05％tfa)；流速：5ml/min)純化粗反應(yīng)混合物。將對(duì)應(yīng)于產(chǎn)物的峰收集，并同時(shí)用無菌水(10ml)稀釋。將所得混合物通過c-18sep-pak，從而使得將產(chǎn)物捕獲，并將殘余乙腈用額外水(10ml)洗掉。然后將[¹⁸f]2-(2-氟-乙氧基)-9h-咔唑用usp級(jí)乙醇(0.5ml)洗脫至產(chǎn)物小瓶中，并用無菌水(9.5ml)稀釋，以提供適合用于注射(2％衰減未校正產(chǎn)率(decayuncorrectedyield)，100％放射化學(xué)純度)的最終制劑(10ml中19-34mci)。通過配備放射活性檢測(cè)器的分析型hplc測(cè)定純度，并通過與對(duì)應(yīng)未標(biāo)記的參考標(biāo)準(zhǔn)品的hplc數(shù)據(jù)比較而驗(yàn)證身份。

咔唑衍生物的測(cè)定：

從biacore測(cè)定法來看，兩種咔唑衍生物顯示出與寡聚體/聚合物和原纖維的有希望的結(jié)合親和力(表4)。β-咔啉harmol，harmala生物堿的成員，是駱駝蓬堿的尿代謝物。harmala生物堿類是mao抑制劑，且在通常在敘利亞蕓香peganumharmala和南美藤banisteriopsiscaapi中發(fā)現(xiàn)，這兩者都被聲稱具有強(qiáng)烈的致幻效果。β-咔啉(β-carbolenes)對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)具有不同的效果，包括與5-ht2、5-ht1a、谷氨酸nmda和咪唑啉受體的結(jié)合；抑制mao-a酶和干擾多巴胺能傳遞。并且盡管β-咔啉被認(rèn)為是細(xì)胞毒性的，但它們還維持神經(jīng)保護(hù)特性，推測(cè)提供針對(duì)多巴胺和谷氨酸鹽的神經(jīng)保護(hù)，并且此外通過清除活性氧種類。最近的報(bào)道表明，β-咔啉生物堿類誘導(dǎo)促進(jìn)小鼠中物體識(shí)別任務(wù)的短期和長(zhǎng)期記憶，盡管生物堿類正在發(fā)揮其效果的方式是不清楚的。moura，d.j.，等人，effectsofb-carbolinealkaloidsintheobjectrecognitiontaskinmice.lifesciences，2006，79：p.2099-2104。

該測(cè)定中發(fā)現(xiàn)的第二種活性咔唑?yàn)?-羥基咔唑。2-羥基咔唑最近已經(jīng)顯示通過獨(dú)特的藥理學(xué)途徑來從骨骼肌和心肌釋放ca²⁺離子。通用咔唑骨架存在于幾種治療劑中，包括非甾體抗炎卡洛芬、卡拉洛爾(β-阻斷劑)和ym-53601(角鯊烯合成酶抑制劑)。最近的工作已經(jīng)顯示，咔唑衍生物可以充當(dāng)γ分泌酶調(diào)節(jié)劑。[narlawar，r.，等人.，n-substitutedcarbazolyloxyaceticacidsmodulatealzheimerassociatedg-secretas.bioorganic&medicinalchemistryletters，2007，17：p.176-182]。在另一個(gè)ad相關(guān)項(xiàng)目中，howlett發(fā)現(xiàn)高度闡明的咔唑類，諸如卡維地洛，抑制原纖維形成，盡管沒有測(cè)定與原纖維的結(jié)合親和力。[howlett，d.r.，等人.，commonstructuralfeaturesdeterminetheeffectivenessofcarvedilol，daunomycinandrotiletracyclineasinhibitorsofalzheimerb-amyloidfibrilformation.biochemicaljournal，1999，343：p.419-423]。有趣的是，意在確定基于細(xì)胞通透性使用咔唑作為原纖維抑制劑的實(shí)用性的論文表明，咔唑不可能透過血腦屏障，因?yàn)樗鼈兪莗gp底物，這排除了它們作為用于原纖維抑制的治療劑的用途。[saengkhae，c.，等人.，abilityofcarbazolesalts，inhibitorsofalzheimerb-amyloidfibrilformation，tocrosscelhdarmembranes.europeanjournalofpharmacology，2007，559：p.124-131]。

通過使用適當(dāng)?shù)某上衲Ｊ剑聚檮┑纳锓植寄Ｊ阶兊昧⒓纯梢姾涂山咏?。例如，通過使用¹⁸f-標(biāo)記的示蹤劑，可以使用正電子發(fā)射斷層成像(pet)容易定量示蹤劑攝入腦部和從腦部洗出。在正常腦中具有高攝取和慢洗脫的示蹤劑生成低信噪比。在正常腦中具有高攝取和快洗脫的示蹤劑具有高信噪比，且被認(rèn)為是理想的。¹⁸f-標(biāo)記的咔唑具有理想的腦成像特性。例如，制備¹⁸f-標(biāo)記的咔唑且施用于正常白色sprague-dawley大鼠(ussn12/372,717的圖6)。數(shù)分鐘內(nèi)，該示蹤劑進(jìn)入腦部，并經(jīng)幾分鐘被洗出。

非放射性咔唑還成功地競(jìng)爭(zhēng)掉腦組織切片中的硫磺素t和fddnp兩者，表明該示蹤劑結(jié)合類似的結(jié)合位點(diǎn)(ussn12/372,717的圖4和5)。

表4：從biacore測(cè)定的基于咔唑的命中。“+”符號(hào)表示命中，且“+”符號(hào)的增加涉及增加的結(jié)合親和力?！?”符號(hào)代表沒有結(jié)合。

基于咔唑的成像劑的實(shí)例列表顯示在表5中。許多化合物是¹⁸f-或¹¹c-標(biāo)記的。

表5：基于咔唑的成像劑的實(shí)例。任何這些可包括鹵素和/或放射性核素或者可以是“冷的”。鹵素可以被放射性核素諸如¹⁸f替代。

詳細(xì)的biacore測(cè)定方案：

β-淀粉樣蛋白(aβ42)可溶性聚集體(寡聚體/水溶性聚合物)。將生物素-lc-aβ42與aβ42以3∶2的比率混合。溶解在1％nh4oh和dh2o中后，將混合物(40um濃度)在室溫在1xpbs(ph7.4)緩沖液中孵育6小時(shí)，以形成寡聚體/可溶性聚合物。樣品中aβ42的游離單體使用mw截止值為10kda的microcon離心過濾管去除。將生物素-lc-aβ42寡聚體/聚合物通過鏈霉親和素-生物素捕獲固定在sa芯片上。

β-淀粉樣蛋白(aβ42)不溶性聚集體(原纖維)。根據(jù)先前出版的方法(agdeppaed等人.2001)制備原纖維。徇而言之，將0.5mgaβ42(生物素-lc-aβ42∶aβ42＝1∶1)溶解在1mlpbs，ph7.4中，并用磁力攪拌棒在37℃混合3天，導(dǎo)致產(chǎn)生明顯渾濁溶液。原纖維沉淀通過離心收集。將生物素-lc-aβ42原纖維通過鏈霉親和素-生物素捕獲固定在sa芯片上。

用biacore篩選淀粉樣蛋白結(jié)合化合物(表面等離子共振分析)。將aβ42寡聚體/可溶性聚合物或原纖維固定在傳感器芯片的流動(dòng)池2(fc2)或流動(dòng)池3(fc3)，其中fcl充當(dāng)對(duì)照。使10μm濃度的篩選化合物以30ul/分鐘的流速流過fc1、fc2、和fc32分鐘。然后將流動(dòng)池用運(yùn)行緩沖液(1xpbs)洗滌2分鐘，并且用50mmnaoh再生30秒。篩選化合物和在芯片表面上固定的淀粉樣蛋白聚集體之間的實(shí)時(shí)相互作用記錄在傳感圖中。

用硫磺素t免疫染色腦切片。將來自阿爾茨海默病供體的腦樣品在固定后石蠟滲透。具有嵌入的腦樣品的蠟塊安裝在切片機(jī)上并切片。然后將切片脫蠟并水化，隨后與或不與ad-cb-001s-wz01013孵育。染色用1um硫磺素t實(shí)施。用熒光顯微鏡獲得圖像(ussn12/372,717的圖4)。

用fddnp免疫染色腦切片。將來自阿爾茨海默病供體的腦樣品在固定后石蠟滲透。具有嵌入的腦樣品的蠟塊安裝在切片機(jī)上并切片。然后將切片脫蠟并水化，隨后與或不與ad-cb-001s-wz01013孵育。染色用1umfddnp實(shí)施。用熒光顯微鏡獲得圖像(ussn12/372,717的圖5)。

ad-cb-001的成像結(jié)果

白色sprague-dawley大鼠經(jīng)尾靜脈用10％etoh：水中配制的～850uciad-cb-001注射。動(dòng)態(tài)掃描在r4micropet掃描儀上進(jìn)行30min。數(shù)據(jù)使用1min幀重構(gòu)。數(shù)分鐘內(nèi)，該示蹤劑進(jìn)入大鼠腦部，并快速洗出(ussn12/372,717的圖6)。

ad-cb-002p-wz01031的合成

向2mlnmp中的羥基咔唑(92mg，0.5mmol)中添加cs2co3(163mg，0.5mmol)和乙基疊氮基甲苯磺?；?121mg，0.5mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢?5h，并且用et2o(50ml)稀釋。將其用0.5mhcl(50ml)和水(2x50ml)洗滌，經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物用硅膠層析(己烷中80％dcm至100％dcm)純化以得到作為白色固體的所需產(chǎn)物(76mg)。

ad-cb-002s-wz01033的合成

向0.5mldmf中的乙基疊氮基咔唑(32mg，0.127mmol)中添加cui(7.6mg，0.04mmol)、dipea(16.4mg，0.127mmol)和氟戊炔(16.4mg，0.19mmol)。將反應(yīng)混合物劇烈攪拌1h，并且用etoac(30ml)稀釋。將其用水(50ml)、0.5mhcl(30ml)、水(2x50ml)洗滌，經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物預(yù)吸附在硅膠(3g)上并上樣在4g硅膠柱上并用己烷中30％至50％etoac洗脫，以得到所需化合物(20mg)。

18f-標(biāo)記的ad-cb-002s-wz01033的合成

三唑的制備

將dmf(0.4ml)和水(0.1ml)中疊氮化物前體(5mg)、抗壞血酸鈉(40mg)、三-(芐基三唑基甲基)胺(tbta，25mg)和硫酸銅水溶液(0.1m，0.25ml)的混合物添加至如上所述的冷卻的戊炔溶液中。然后，將反應(yīng)混合物升溫至rt并攪拌30min。該時(shí)間之后，將反應(yīng)通過半制備hplc純化。將對(duì)應(yīng)于產(chǎn)物的峰收集，并同時(shí)用無菌水(10ml)稀釋。將所得混合物通過c-18sep-pak，并將殘余乙腈用額外水(10ml)洗掉。將產(chǎn)物用usp級(jí)乙醇(0.5ml)洗脫至產(chǎn)物小瓶中，并用無菌水(9.5ml)稀釋，提供適合用于注射的最終制劑。

通過配備放射活性檢測(cè)器的分析型hplc測(cè)定純度，并通過與對(duì)應(yīng)未標(biāo)記的參考標(biāo)準(zhǔn)品的hplc數(shù)據(jù)比較而驗(yàn)證身份。

用于咔唑n-boc保護(hù)的一般程序：

向配備有磁力攪拌棒、橡膠隔片和氬入口的含有thf(40vol)的圓底燒瓶中放置咔唑(1.0當(dāng)量)。在0℃向該溶液中添加nah(油中60％分散物，3當(dāng)量)，并允許反應(yīng)在0℃攪拌30min。在0℃向該反應(yīng)添加(boc)2o(1.2當(dāng)量)，并允許反應(yīng)攪拌1h。反應(yīng)通過lcms完成后，傾入水(25vol)并萃取至etoac(3x20vol)中。將合并的有機(jī)提取物用水(2x25vol)洗滌，干燥(na2so4)并真空濃縮。將殘余物使用己烷：etoac作為洗脫液經(jīng)硅膠純化以得到最終產(chǎn)物。

用于咔唑n-甲基化的一般程序：

向配備有磁力攪拌棒、橡膠隔片和氬入口的含有thf(50vol)的圓底燒瓶中放置咔唑(1.0當(dāng)量)。在0℃向該溶液中添加nah(油中60％分散物，3當(dāng)量)，并允許反應(yīng)在0℃攪拌30min。在0℃向該反應(yīng)添加meotf(1.0當(dāng)量)，并允許反應(yīng)攪拌1h。反應(yīng)通過lcms完成后，傾入水(25vol)并萃取至etoac(3x20vol)中。將合并的有機(jī)提取物用水(2x25vol)洗滌，干燥(na2so4)并真空濃縮。將殘余物使用己烷：etoac作為洗脫液經(jīng)硅膠純化以得到最終產(chǎn)物。

用于酚烷基化的的一般實(shí)驗(yàn)程序：

向配備有磁力攪拌棒的含有dmf(20vol)的圓底燒瓶中放置苯酚(1當(dāng)量)。向該溶液中添加烷基化劑(1.0當(dāng)量)、cs2co3(1.2當(dāng)量)，并允許反應(yīng)在60℃攪拌16h。然后，將反應(yīng)傾入水(25vol)并萃取至etoac(3x20vol)中。將合并的有機(jī)提取物用水(2x25vol)洗滌，干燥(na2so4)并真空濃縮。將殘余物使用己烷：etoac作為洗脫液經(jīng)硅膠純化以得到最終產(chǎn)物。

用于suzuki偶合反應(yīng)的一般實(shí)驗(yàn)程序：

向配備有磁力攪拌棒、橡膠隔片和氬入口的含有甲苯：h2o(1∶1，40vol)的圓底燒瓶中放置氯化合物(1.0當(dāng)量)。向該溶液中添加硼酸(1.5當(dāng)量)、pd(pph3)4(0.02當(dāng)量)、k2co3，并允許反應(yīng)在110℃攪拌16h。然后，將反應(yīng)傾入水(25vol)并萃取至etoac(3x20vol)中。將合并的有機(jī)提取物用水(2x25vol)洗滌，干燥(na2so4)并真空濃縮。將殘余物使用己烷：etoac作為洗脫液經(jīng)硅膠純化以得到最終產(chǎn)物。

用于使用p(oet)3形成咔唑的一般實(shí)驗(yàn)程序：

向配備有磁力攪拌棒的含有p(oet)3(25vol)的圓底燒瓶中放置聯(lián)芳基(biaryl)(1當(dāng)量)。允許該反應(yīng)在150℃攪拌16h。反應(yīng)完成后，將p(oet)3真空去除。將殘余物使用己烷：etoac作為洗脫液經(jīng)硅膠純化以得到最終化合物。

cb1-硝基苯磺酸酯前體的合成：

乙烷-1，2-二基雙(2-硝基苯磺酸酯)(dhk-4-14)的制備：

向配備有磁力攪拌棒的含有dcm(10ml)的50ml圓底燒瓶中放置1，2-乙烷二醇(0.25g，4.0mmol)。在0℃向該溶液中添加硝基苯磺酸氯化物(nosylchloride)(1.9g，8.5mmol)和et3n(0.90g，8.9mmol)，并允許反應(yīng)在室溫?cái)嚢?6h。反應(yīng)完成后，將白色固體過濾，用dcm(100ml)洗滌并真空干燥以得到作為無色固體的dhk-4-14(1.3g，75％)。

2-硝基苯磺酸2-(9h-咔唑-2-基氧基)乙酯(dhk-4-15)的制備：

向配備有磁力攪拌棒的含有dmf(5vol)的25ml圓底燒瓶中放置咔唑(0.2g，1.1mmol)。向該溶液中添加dhk-4-14(0.52g，1.2mmol)、cs2co3(0.43g，1.3mmol)，并允許反應(yīng)在室溫?cái)嚢?6h。然后，將反應(yīng)傾入水(25ml)并萃取至etoac(4x50ml)中。將合并的有機(jī)萃取物干燥(na2so4)，并真空濃縮。將粗殘余物使用己烷∶etoac(50∶50)在combiflash純化系統(tǒng)上通過快速層析純化，以得到作為白色固體的dhk-4-15(0.28g，62％)。ms：[m+na]⁺：435.0。

cb-5的合成：

2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑-9-甲酸叔丁酯：cb-5：dhk-4-27的制備

遵循咔唑n-boc保護(hù)的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.03g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combiflash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在30-35％etoac：己烷混合物中。分離作為無色油狀物的0.03g(74％)cb-5。ms：[m+h]⁺：418.0。

cb-6：dhk-4-28的合成

2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9-甲基-9h-咔唑：cb-6的制備

遵循咔唑n-甲基化的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.05g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combiflash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在40-45％etoac：己烷混合物中。分離作為白色固體的0.04g(78％)cb-6。ms：[m+h]⁺：332.1。

n-boc-保護(hù)的cb-3前體的合成：

2-(2-(2-(2-(甲苯磺?；趸?乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑-9-甲酸叔丁酯：dhk-4-32的制備

遵循咔唑n-boc保護(hù)的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.07g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combiflash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在40％etoac：己烷混合物中。分離作為白色固體的0.07g(82％)dhk-4-32。ms：[m+na]⁺：592。

n-甲基cb-3前體的合成：

4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(9-甲基-9h-咔唑-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯：dhk-4-30的制備

遵循咔唑n-甲基化的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.075g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combifiash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在40％etoac：己烷混合物中。分離作為白色固體的0.07g(91％)dhk-4-30。ms：[m+h]⁺：484.2。

cb-7std的合成：

1-氯-4-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-2-硝基苯：dhk-4-51的制備

遵循酚烷基化的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.25g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combifiash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在20-30％etoac：己烷混合物中。分離作為黃色油狀物的0.44g(99％)dhk-4-51。ms：[m+h]⁺：308.0。

4′-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-n，n-二甲基-2′-硝基聯(lián)苯基-4-胺：dhk-4-26的制備

遵循suzuki偶合反應(yīng)的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.11g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combifiash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在50-60％etoac：己烷混合物中。分離作為黃色油狀物的0.06g(43％)dhk-4-26。ms：[m+h]⁺：393.1。

7-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-n，n-二甲基-9h-咔唑-2-胺：dhk-4-29：cb-7的制備

遵循用于使用p(oet)3形成咔唑的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.06g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combifiash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在70-80％etoac：己烷混合物中。分離作為白色固體的0.03g(49％)dhk-4-29cb-7。ms：[m+h]⁺：361.1。

cb-9std的合成：

1-氯-4-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-2-硝基苯：dhk-4-51的制備

遵循酚烷基化的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.25g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combiflash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在20-30％etoac：己烷混合物中。分離作為黃色油狀物的0.44g(99％)dhk-4-51。ms：[m+h]⁺：308.0。

n-(4′-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-2′-硝基聯(lián)苯基-4-基)乙酰胺：dhk-4-31的制備遵循suzuki偶合反應(yīng)的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.11g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combiflash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在80-90％etoac：己烷混合物中。分離作為黃色油狀物的0.14g(100％)dhk-4-31。ms：[m+h]⁺：407.0。

n-(7-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑-2-基)乙酰胺：dhk-4-33：cb-9的制備遵循用于使用p(oet)3形成咔唑的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.15g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combiflash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在90％etoac：己烷混合物中。分離作為白色固體的0.03g(49％)cb-9。ms：[m+h]⁺：375.1。

cb-28std的合成：

1-氯-4-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-2-硝基苯：dhk-4-51的制備

遵循酚烷基化的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.25g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combiflash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在20-30％etoac：己烷混合物中。分離作為黃色油狀物的0.44g(99％)dhk-4-51。ms：[m+h]⁺：308.0。

3-(4-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-2-硝基苯基)吡啶：dhk-4-56的制備

遵循suzuki偶合反應(yīng)的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.095g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combifiash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在40-50％etoac：己烷混合物中。分離作為黃色油狀物的0.01g(9％)dhk-4-56。ms：[m+h]⁺：351.1。

7-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-吡啶并[2，3-b]吲哚dhk-4-58：cb-28的制備

遵循用于使用p(oet)3形成咔唑的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.01g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combifiash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在50％etoac：己烷混合物中。分離作為白色固體的0.002g(22％)cb-28。ms：[m+h]⁺：319。

cb-7-前體的合成

4-(芐基氧基)-1-氯-2-硝基苯：dhk-4-63的制備

遵循酚烷基化的一般實(shí)驗(yàn)程序。在1g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。k2co3用作堿，且丙酮用作溶劑。反應(yīng)時(shí)間為4h。產(chǎn)物在combifiash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在20-30％etoac：己烷混合物中。分離作為白色結(jié)晶固體的1.45g(95％)dhk-4-63。ms：[m+h]⁺：264.0。

34′-(芐基氧基)-n，n-二甲基-2′-硝基聯(lián)苯基-4-胺：dhk-4-66的制備

遵循suzuki偶合反應(yīng)的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.47g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combifiash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在20-30％etoac：己烷混合物中。分離作為橙色固體的0.21g(34％)dhk-4-66。ms：[m+h]⁺：349.1。

7-(芐基氧基)-n，n-二甲基-9h-咔唑-2-胺dhk-4-68的制備：

遵循用于使用p(oet)3形成咔唑的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.21g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combifiash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在20-30％etoac：己烷混合物中。分離作為白色固體的0.13g(68％)dhk-4-68。ms：[m+h]⁺：317.1。

2-(芐基氧基)-7-(二甲基氨基)-9h-咔唑-9-甲酸叔丁酯：dhk-4-69的制備

遵循咔唑n-boc保護(hù)的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.13g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。將反應(yīng)溫度在室溫進(jìn)行16h。產(chǎn)物在combiflash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在10％etoac：己烷混合物中。分離作為白色固體的0.12g(70％)dhk-4-69。ms：[m+h]⁺：417.2。

2-(二甲基氨基)-7-羥基-9h-咔唑-9-甲酸叔丁酯：dhk-4-71的制備

向配備有磁力攪拌棒的含有etoac(50ml)的50ml圓底燒瓶中放置dhk-4-69(0.11g，0.19mmol)。向該溶液中添加pd/c(10％，20mg)，并允許反應(yīng)在h2(1atm)下在rt攪拌16h。反應(yīng)完成后，將反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾，并將揮發(fā)物真空去除以得到作為無色固體的dhk-4-71(0.09g，100％)。

2-(二甲基氨基)-7-(2-(2-(2-(甲苯磺酰基氧基)乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑-9-甲酸叔丁酯：dhk-4-72：cb-7前體的制備：

遵循酚烷基化的一般實(shí)驗(yàn)程序。在0.09g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。產(chǎn)物在combiflash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在45％etoac：己烷混合物中。分離作為白色固體的0.07g(41％)cb-7前體。ms：[m+h]⁺：613.2。

ad-cb-003s-wz0129的合成

向2，2′-(乙烷-1，2-二基雙(氧基))雙(乙烷-2，1-二基)雙(4-甲基苯磺酸酯)(8.7g，19mmol)中添加tbaf(22.8ml，1.0mthf溶液，22.8mmol)。將混合物在ar氣氛下加熱至回流持續(xù)1h，并冷卻至室溫，并在減壓下濃縮。將粗材料用硅膠層析(己烷中5％至40％thf)純化以得到作為澄清油狀物的4-甲基苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙酯(2.5g，43％)。

向0.5mlnmp中的2-羥基咔唑(45mg，0.25mmol)和4-甲基苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙酯(82mg，0.27mmol)中添加cs2co3(82mg，0.25mmol)。將混合物在ar氣氛下在室溫?cái)嚢?5h，并且用et2o(50ml)稀釋。將其用水(3x50ml)洗滌，并且經(jīng)mgso4干燥。將溶劑在減壓下去除，并且將粗產(chǎn)物用硅膠層析(己烷中5％至50％etoac)純化以得到作為白色固體的所需產(chǎn)物(37mg，47％)。

ad-cb-003p-wz0141的合成

向5mlnmp中的2-羥基咔唑(183mg，1mmol)和4-甲基苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙酯(687mg，1.5mmol)中添加cs2co3(326mg，1mmol)。將混合物在ar氣氛下在室溫?cái)嚢?5h，并且用et2o(100ml)稀釋。將其用水(3x100ml)洗滌，并且經(jīng)mgso4干燥。將溶劑在減壓下去除，并且將粗產(chǎn)物用硅膠層析(己烷中5％至60％etoac)純化以得到作為白色固體的所需產(chǎn)物(165mg，35％)。

ad-cb-004s-wz01165

向25ml丙酮中的4-氯-3-硝基苯酚(1.74g，10mmol)和芐基溴(2.05g，12mmol)中添加k2co3(2.76g，20mmol)。將混合物在ar氣氛下在60℃加熱4h，并冷卻至室溫。將其過濾，并將固體用乙醚(80ml)洗滌，并將合并的濾液濃縮且層析(己烷中etoac，3％至30％梯度)，以得到作為淡黃色固體的4-(芐基氧基)-1-氯-2-硝基苯(2.5g，95％)。

向12ml二氧雜環(huán)己烷中的4-(芐基氧基)-1-氯-2-硝基苯(526mg，2mmol)和4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼戊烷-2-基)苯基氨基甲酸叔丁酯(670mg，2.1mmol)添加4ml的1mna2co3(水)溶液和四(三苯基膦)鈀(69mg，0.06mmol)。將懸浮液在ar氣氛下回流加熱15h，并冷卻至室溫。向其添加etoac(100ml)，并用鹽水(80ml)、水(80ml)洗滌，并經(jīng)mgso4干燥。溶劑去除后，將殘余物層析(己烷/etoac)以得到作為黃色固體的4′-(芐基氧基)-2′-硝基聯(lián)苯基-4-基氨基甲酸叔丁酯(740mg，88％)。

將2ml亞磷酸三乙酯中4′-(芐基氧基)-2′-硝基聯(lián)苯基-4-基氨基甲酸叔丁酯(740mg，1.67mmol)的懸浮液在ar氣氛下在145℃加熱15h，并冷卻至室溫。向其添加10ml己烷，并使其靜置10min。經(jīng)過濾將固體收集，并用乙醚/己烷(v∶v1/1，10ml)洗滌，并在高真空下干燥以得到作為灰白色固體的7-(芐基氧基)-9h-咔唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(480mg，74％)。

向50mlmeoh中7-(芐基氧基)-9h-咔唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(220mg，0.56mmol)中添加活性碳上的鈀(80mg)。將混合物在室溫在h2氣氛下攪拌3h。將固體濾出并將濾液濃縮，以得到作為棕色固體的7-羥基-9h-咔唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(165mg，100％)。該材料無需純化即直接用于下一個(gè)反應(yīng)。ms(esi)m/z619(2m+na⁺)。

向2mlnmp中的7-羥基-9h-咔唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(165mg，0.55mmol)和4-甲基苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙酯(202mg，0.66mmol)中添加cs2co3(179mg，0.55mmol)。將混合物在ar氣氛下在室溫?cái)嚢?5h，并且用etoac(50ml)稀釋。將其用水(3x50ml)洗滌，并且經(jīng)mgso4干燥。溶劑去除后，將殘余物層析(己烷/etoac)以得到作為白色固體的7-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(130mg，55％)。

向7-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(130mg，0.3mmol)中添加10ml二氧雜環(huán)己烷溶液中的4mhcl。將混合物在室溫?cái)嚢?h，并在減壓下濃縮。將殘余物用乙醚(15ml)洗滌，并懸浮在etoac(50ml)中。向該懸浮液中添加10mlnahco3(飽和)，并將混合物攪拌5min。將有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥并濃縮，以得到作為棕色固體的7-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑-2-胺(95mg，95％)。ms(esi)m/z333(m+h⁺)。

將8mlmeoh中7-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑-2-胺(95mg，0.28mmol)、多聚甲醛(43mg，1.43mmol)和naome(492mg，25％meoh溶液，2.3mmol)的混合物在ar氣氛下回流加熱1.5h，并冷卻至室溫。向該混合物中添加nabh4(54mg，1.43mmol)，并將混合物回流加熱2h。冷卻至室溫之后，將混合物淬滅至冰上。將其用乙醚(3x30ml)萃取，并將合并的有機(jī)相經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物用層析(己烷/etoac)純化，以得到作為淡棕色固體的7-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-n-甲基-9h-咔唑-2-胺(ad-cb-003p-wz0141)(55mg，56％)。

ad-cb-004pa-wz01179

向7-(芐基氧基)-9h-咔唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(200mg，0.51mmol)中添加10ml二氧雜環(huán)己烷溶液中的4mhcl。將混合物在室溫?cái)嚢?h，并在減壓下濃縮。將殘余物用乙醚(15ml)洗滌，并懸浮在etoac(50ml)中。向該懸浮液中添加10mlnahco3(飽和)，并將混合物攪拌5min。將有機(jī)層經(jīng)mgso4干燥并濃縮，以得到作為棕色固體的7-(芐基氧基)-9h-咔唑-2-胺(150mg，100％)。

將15mlmeoh中7-(芐基氧基)-9h-咔唑-2-胺(150mg，0.52mmol)、多聚甲醛(78mg，2.6mmol)和naome(900mg，25％meoh溶液，4.16mmol)的混合物在ar氣氛下回流加熱2h，并冷卻至室溫。向該混合物中添加nabh4(98mg，2.6mmol)，并將混合物回流加熱2h。冷卻至室溫之后，將混合物淬滅至冰上(30g)。將其用etoac(3x50ml)萃取，并將合并的有機(jī)相經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物用層析(己烷/etoac)純化，以得到作為淡棕色固體的7-(芐基氧基)-n-甲基-9h-咔唑-2-胺(130mg，82％)。

向3ml吡啶中7-(芐基氧基)-n-甲基-9h-咔唑-2-胺(120mg，0.4mmol)、甲酸(55mg，1.2mmol)和dmap(5mg，0.04mmol)中逐份添加edc(230mg，1.2mmol)。將混合物在ar氣氛下在室溫?cái)嚢?h，并在減壓下濃縮。將殘余物用etoac(50ml)稀釋，并用水(2x50ml)、0.5mhcl(2x50ml)和鹽水(50ml)洗滌，并經(jīng)mgso4干燥。將溶劑去除之后，將粗產(chǎn)物用層析(己烷/etoac)純化，以得到作為白色固體的n-(7-(芐基氧基)-9h-咔唑-2-基)-n-甲基甲酰胺(110mg，83％)。

向50mlmeoh中n-(7-(芐基氧基)-9h-咔唑-2-基)-n-甲基甲酰胺(110mg，0.33mmol)中添加活性碳上的鈀(50mg)。將混合物在室溫在h2氣氛下攪拌15h。將固體濾出并將濾液濃縮，以得到作為棕色固體的n-(7-羥基-9h-咔唑-2-基)-n-甲基甲酰胺(75mg，94％)。該材料無需純化即直接用于下一個(gè)反應(yīng)。ms(esi)m/z241(m+h⁺)。

向0.5mlnmp中的n-(7-羥基-9h-咔唑-2-基)-n-甲基甲酰胺(45mg，0.187mmol)和4-甲基苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙酯(172mg，0.38mmol)中添加cs2co3(65mg，0.2mmol)。將混合物在ar氣氛下在室溫?cái)嚢?5h，并且用etoac(50ml)稀釋。將其用水(2x50ml)、0.5mhcl(50ml)和鹽水(50ml)洗滌，并經(jīng)mgso4干燥。在減壓下將溶劑去除，并將粗產(chǎn)物用硅膠層析(己烷/etoac)純化，以得到作為淡棕色油狀物的4-甲基苯磺酸2-(2-(2-(7-(n-甲基甲酰胺基)-9h-咔唑-2-基氧基)乙氧基)乙氧基)乙酯(ad-cb-004pa-wz01179)(48mg，48％)。

ad-cb-004pb-wz01191

在0℃在ar氣氛下向5ml無水thf中的n-(7-(芐基氧基)-9h-咔唑-2-基)-n-甲基甲酰胺(140mg，0.42mmol)中以4份添加nah(50mg，油狀物中60％，1.26mmol)。然后將混合物在室溫?cái)嚢?0min，隨后用注射器添加苯基碳酸叔丁酯(244mg，1.26mmol)。允許該反應(yīng)在室溫?cái)嚢?h，并淬滅至冰上(30g)。將混合物用etoac(2x40ml)萃取，并將合并的有機(jī)相經(jīng)mgso4干燥。溶劑去除后，將殘余物層析以得到作為白色固體的2-(芐基氧基)-7-(n-甲基甲酰胺基)-9h-咔唑-9-甲酸叔丁酯(120mg，66％)。

向50mlmeoh中2-(芐基氧基)-7-(n-甲基甲酰胺基)-9h-咔唑-9-甲酸叔丁酯(120mg，0.28mmol)中添加活性碳上的鈀(50mg)。將混合物在室溫在h2氣氛下攪拌3h。將固體濾出并將濾液濃縮，以得到作為棕色固體的2-羥基-7-(n-甲基甲酰胺基)-9h-咔唑-9-甲酸叔丁酯(95mg，100％)。該材料無需純化即直接用于下一個(gè)反應(yīng)。ms(esi)m/z341(m+h⁺)。

向0.5mlnmp中的2-羥基-7-(n-甲基甲酰胺基)-9h-咔唑-9-甲酸叔丁酯(65mg，0.19mmol)和4-甲基苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙酯(174mg，0.38mmol)中添加cs2co3(68mg，0.21mmol)。將混合物在ar氣氛下在室溫?cái)嚢?5h，并用etoac(80ml)稀釋。將其用水(3x50ml)洗滌，并且經(jīng)mgso4干燥。在減壓下將溶劑去除，并將粗產(chǎn)物用硅膠層析(己烷/etoac)純化，以得到作為澄清油狀物的2-(n-甲基甲酰胺基)-7-(2-(2-(2-(甲苯磺?；趸?乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑-9-甲酸叔丁酯(ad-cb-004pb-wz01191)(75mg，63％)。

ad-cb-010s-wz01183

向6ml二氧雜環(huán)己烷中的4-(芐基氧基)-1-氯-2-硝基苯(394mg，1.5mmol)n-(4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼戊烷-2-基)苯基)甲酰胺(370mg，1.5mmol)中添加3ml1mna2co3(水)溶液和四(三苯基膦)鈀(52mg，0.045mmol)。將懸浮液在ar氣氛下回流加熱15h，并冷卻至室溫。向其添加etoac(80ml)，并用鹽水(50ml)、水(2x80ml)洗滌，并經(jīng)mgso4干燥。溶劑去除后，將殘余物層析(己烷/etoac)以得到作為黃色固體的n-(4′-(芐基氧基)-2′-硝基聯(lián)苯基-4-基)甲酰胺(395mg，75％)。ms(esi)m/z349(m+h⁺)。

將2ml亞磷酸三乙酯中n-(4′-(芐基氧基)-2′-硝基聯(lián)苯基-4-基)甲酰胺(350mg，1mmol)的懸浮液在ar氣氛下在145℃加熱15h，并冷卻至室溫。向其添加10ml己烷，并使其靜置10min。經(jīng)過濾將固體收集，并用乙醚/己烷(v：v1/1，10ml)洗滌，并在高真空下干燥以得到作為淡棕色固體的n-(7-(芐基氧基)-9h-咔唑-2-基)甲酰胺(280mg，88％)。ms(esi)m/z317(m+h⁺)。

向50mlmeoh中n-(7-(芐基氧基)-9h-咔唑-2-基)甲酰胺(250mg，0.79mmol)中添加活性碳上的鈀(60mg)。將混合物在室溫在h2氣氛下攪拌15h。將混合物在減壓下濃縮并在高真空下干燥，以得到作為黑色固體的與催化劑混合的n-(7-羥基-9h-咔唑-2-基)甲酰胺(240mg)。該材料無需純化即直接用于下一個(gè)反應(yīng)。ms(esi)m/z227(m+h)。

向0.3mlnmp中的n-(7-羥基-9h-咔唑-2-基)甲酰胺(30mg)和4-甲基苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙酯(48mg，0.156mmol)中添加cs2co3(42mg，0.13mmol)。將混合物在ar氣氛下在室溫?cái)嚢?5h，并用etoac(30ml)稀釋。將其用水(3x30ml)洗滌，并且經(jīng)mgso4干燥。溶劑去除后，將殘余物層析(己烷/etoac)以得到作為白色固體的n-(7-(2-氟乙氧基)-9h-咔唑-2-基)甲酰胺(ad-cb-010s-wz01183)(17mg，36％)。

ad-cb-012s-wz01185

使用用于制備ad-cb-010s-wz01183的相同程序制備化合物ad-cb-012s-wz01185。

ad-cb-024s-wz02033

使用用于制備ad-cb-010s-wz01183的相同程序制備化合物ad-cb-024s-wz02033。

ad-cb-013s-wz-02001

將5ml二氧雜環(huán)己烷中乙酸鈀(37mg，0.165mmol)和binap(154mg，0.248mmol)的混合物在ar氣氛下攪拌10min。向該混合物中添加1-溴-4-硝基苯(111g，5.5mmol)、4-甲氧基苯胺(745mg，6.07mmol)、csco3(2.5g，7.73mmol)和10ml二氧雜環(huán)己烷。將混合物回流加熱15h，并冷卻并用乙醚(80ml)稀釋。將固體通過過濾去除，并將濾液濃縮。將殘余物層析(己烷/etoac)以得到作為黃色固體的4-甲氧基-n-(4-硝基苯基)苯胺(786mg，58％)。ms(esi)m/z245(m+h⁺)。

向5mlacoh中4-甲氧基-n-(4-硝基苯基)苯胺(785mg，3.2mmol)中添加pd(oac)2(1.43g，6.4mmol)。將混合物在100℃在大氣氣氛下加熱15h，并冷卻至室溫，并在減壓下濃縮。將殘余物溶解于etoac(100ml)，并用nahco3(2x100ml)和水(100ml)洗滌。將溶劑去除之后，將粗品用層析(己烷/etoac)純化，以得到作為橙色固體的3-甲氧基-6-硝基-9h-咔唑(495mg，64％)。

向40mlmeoh中3-甲氧基-6-硝基-9h-咔唑(100mg，0.41mmol)中添加活性碳上的鈀(50mg)。將混合物在室溫在h2氣氛下攪拌5h。將固體濾出并將濾液濃縮，以得到作為棕色固體的6-甲氧基-9h-咔唑-3-胺(80mg，92％)。該材料無需純化即直接用于下一個(gè)反應(yīng)。ms(esi)m/z213(m+h⁺)。

向0.3mlnmp中的6-甲氧基-9h-咔唑-3-胺(16mg，0.075mmol)和1-溴-2-氟乙烷(48mg，0.375mmol)中添加cs2co3(30mg，0.09mmol)。將混合物在ar氣氛下在室溫?cái)嚢?2h，并用etoac(30ml)稀釋。將其用水(3x30ml)洗滌，并且經(jīng)mgso4干燥。溶劑去除之后，將殘余物通過反相hplc(緩沖液a：0.05％tfa水溶液；緩沖液b：mecn中的0.05％tfa)純化，以得到淡棕色石蠟(5mg，26％)。

cb14-16、19和20的合成方案

7-((4-氟丁基)(甲基)氨基)-9h-咔唑-2-醇(cb-14)

向含有dmf(1ml)中化合物6(21mg，0.073mmol)的圓底燒瓶中添加碳酸銫(28.5mg，0.087mmol)和1-溴-4-氟丁烷(56.4mg，0.364mmol)。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?0min。用etoac(15mlx3)和水(10ml)進(jìn)行反應(yīng)。將有機(jī)層用鹽水(10ml)洗滌，干燥，并真空濃縮。將殘余物溶解于meoh(10ml)。向反應(yīng)混合物中添加pd/c(22mg)。將混合物在室溫在氫氣(1atm)下攪拌過夜。將反應(yīng)通過硅藻土塞過濾，真空濃縮并在hplc上純化，以得到cb-14(11mg，0.029mmol，40.3％產(chǎn)率)。

7-((2-氟乙基)(甲基)氨基)-9h-咔唑-2-醇(cb-15)

向含有dmf(0.5ml)中化合物6(37mg，0.122mmol)的圓底燒瓶中添加碳酸銫(47.8mg，0.147mmol)和1-溴-2-氟乙烷(78mg，0.612mmol)。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?0min。用etoac(15mlx3)和水(10ml)進(jìn)行反應(yīng)。將有機(jī)層用鹽水(10ml)洗滌，干燥并真空濃縮。將殘余物溶解于meoh(10ml)。向反應(yīng)混合物中添加pd/c(22mg)。將混合物在室溫在氫氣(1atm)下攪拌過夜。將反應(yīng)通過硅藻土塞過濾，真空濃縮并在hplc上純化，以得到cb-15(5mg，0.019mmol，7.3％產(chǎn)率)。

7-(2-氟乙基氨基)-9h-咔唑-2-醇(cb-16)

向含有dmf(1ml)中化合物5(21mg，0.073mmol)的圓底燒瓶中添加碳酸銫(28.5mg，0.087mmol)和1-溴-2-氟乙烷(46mg，0.36mmol)。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?2小時(shí)。用etoac(15mlx3)和水(10ml)進(jìn)行反應(yīng)。將有機(jī)層用鹽水(10ml)洗滌，干燥并真空濃縮。將殘余物溶解于meoh(10ml)。向反應(yīng)混合物中添加pd/c(20mg)。將混合物在室溫在氫氣(1atm)下攪拌過夜。將反應(yīng)通過硅藻土塞過濾，真空濃縮并在hplc上純化，以得到cb-16(5mg，0.015mmol，20％產(chǎn)率)。

7-((2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)(甲基)氨基)-9h-咔唑-2-醇(cb-19)

向含有dmf(0.5ml)中化合物6(41mg，0.14mmol)的圓底燒瓶中添加碳酸銫(53mg，0.16mmol)和4-甲基苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙酯(125mg，0.407mmol)。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?周。用etoac(15mlx3)和水(10ml)進(jìn)行反應(yīng)。將有機(jī)層用鹽水(10ml)洗滌，干燥并真空濃縮。將殘余物溶解于meoh(10ml)。向反應(yīng)混合物中添加pd/c(20mg)。將混合物在室溫在氫氣氣氛(1atm)下攪拌過夜。將反應(yīng)通過硅藻土塞過濾，真空濃縮并在hplc上純化，以得到cb-19(7mg，0.020mmol，14％產(chǎn)率)。

7-(2-氟乙氧基)-n-甲基-9h-咔唑-2-胺(cb-20)

向含有meoh(10ml)中化合物6(90mg，0.29mmol)的圓底燒瓶中添加pd/c(20mg)。將混合物用氫氣吹掃，并在室溫在氫氣氣氛(1atm)下攪拌2h。將反應(yīng)通過硅藻土塞過濾，真空濃縮以得到深色固體(60mg，0.28mmol，95％產(chǎn)率)。向含有dmf(0.5ml)中上述深色固體(15mg，0.071mmol)的圓底燒瓶中添加碳酸銫(21mg，0.65mmol)和2-溴-1-氟乙烷(8.1mg，0.065mmol)。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢柽^夜。將反應(yīng)經(jīng)由mecn共蒸發(fā)真空濃縮。將殘余物在hplc上純化，以得到cb-20(7.0mg，0.027mmol，38％產(chǎn)率)。

cb25、26的合成方案：

4′-(芐基氧基)-2′-硝基聯(lián)苯基-4-醇(化合物7)

將裝入化合物2(1.96g，7.44mmol)、4-羥基苯基硼酸頻哪醇酯(1.56g，7.09mmol)、四(三苯基膦)鈀(0.410g，0.354mmol)的圓底燒瓶用氬氣吹掃。向混合物中添加水(2ml)中的dme(10ml)和碳酸鉀(1.96g，14.2mmol)。將混合物加熱60小時(shí)。將反應(yīng)用hcl(1n，10ml)和鹽水(40ml)稀釋，然后用etoac(50mlx3)萃取。將合并的有機(jī)層用鹽水(50ml)洗滌，干燥(mgso4)并真空濃縮。將殘余物在硅膠柱(etoac∶己烷＝1∶4)上純化以得到作為黃色固體的化合物7(2g，6.22mmol，88％產(chǎn)率)。

7-(芐基氧基)-9h-咔唑-2-醇(化合物8)

向抗壓小瓶中添加化合物7(2.00g，6.22mmol)和亞磷酸三乙酯(6.53ml，37.3mmol)。將混合物加熱至160℃過夜。將反應(yīng)混合物真空濃縮。將殘余物懸浮于氯仿(20ml)，形成固體沉淀物并過濾，并用乙醚(10mlx2)洗滌以得到化合物8(900mg，3.11mmol，50.0％產(chǎn)率)。

7-(2-氟乙氧基)-9h-咔唑-2-醇(cb-25)

向含有dmf(1ml)中化合物8(50mg，0.17mmol)的圓底燒瓶中添加碳酸銫(62mg，0.19mmol)和1-溴-2-氟乙烷(33mg，0.26mmol)。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?5h，然后用水(15ml)稀釋。經(jīng)由過濾收集白色沉淀物(50mg)并真空干燥。將固體溶解于meoh(10ml)。向反應(yīng)中添加pd/c(30mg)和乙酸(5滴)。將混合物在氫氣(1atm)氣氛下攪拌20h，然后通過硅藻土塞過濾，真空濃縮。將殘余物在hplc上純化，以得到cb-25(18mg，0.053mmol，31％產(chǎn)率)。

7-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑-2-醇(cb-26)

向含有dmf(1ml)中化合物8(50mg，0.17mmol)的圓底燒瓶中添加碳酸銫(56mg，0.17mmol)和4-甲基苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙酯(53mg，0.17mmol)。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?5h，然后用水(15ml)稀釋。經(jīng)由過濾收集白色沉淀物(72mg)并真空干燥。將固體溶解于meoh(10ml)。向反應(yīng)中添加pd/c(20mg)和乙酸(5滴)。將混合物在氫氣(1atm)氣氛下攪拌20h，然后通過硅藻土塞過濾，并真空濃縮。將殘余物在hplc上純化，以得到cb-26(20mg，0.046mmol，27％產(chǎn)率)。

cb27的合成方案：

7-羥基-9h-咔唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(化合物9)

向含有meoh(150ml)中化合物4(1.0g，2.6mmol)的圓底燒瓶中添加炭上的鈀(400mg)。將燒瓶用氫氣吹掃，并在氫氣氣氛下攪拌過夜。將反應(yīng)通過硅藻土塞過濾并濃縮，以得到作為灰色固體的化合物9(700mg，2.34mmol，90％產(chǎn)率)。

7-(4-硝基苯氧基)-9h-咔唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(化合物10)

向含有dmf(2ml)中化合物9(80mg，0.268mmol)的圓底燒瓶中添加碳酸鉀(74.1mg，0.536mmol)和4-氟-硝基苯(41.6mg，0.295mmol)。將反應(yīng)混合物在140℃加熱20min。冷卻至室溫之后，將混合物用水(20ml)稀釋，并用etoac(20mlx3)萃取。將有機(jī)層干燥，濃縮。將殘余物在硅膠柱(etoac∶己烷＝3∶7)上純化以得到作為黃色固體的化合物10(50mg，0.12mmol，44％產(chǎn)率)。

7-(4-硝基苯氧基)-9h-咔唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(cb-27)

向含有meoh(5ml)中化合物10(35mg，0.083mmol)的圓底燒瓶中添加炭上的鈀(10mg)。將燒瓶用氫氣吹掃，并在氫氣氣氛下攪拌過夜。將反應(yīng)混合物通過硅膠墊過濾并濃縮，以得到胺中間體(23mg)。向含有dcm(1ml)中2-氟丙酸(10.87mg，0.118mmol)的小瓶中添加edc(22.64mg，0.118mmol)和dmap(1mg)。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?min。將上述胺中間體溶解于dcm(1ml)，并經(jīng)由逐滴添加至反應(yīng)小瓶中。將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物用水(3ml)洗滌并濃縮。將殘余物再溶解于hcl(二氧雜環(huán)己烷中4.0m，5ml)，并攪拌過夜。將殘余物濃縮并在hplc上純化，以得到cb-27(12mg，0.026mmol，31％產(chǎn)率)。

用于制備咔唑衍生物的實(shí)驗(yàn)部分

4-(芐基氧基)-n-(4-硝基苯基)苯胺1：向烘干燒瓶中裝入pd(oac)2(81mg，0.36mmol)和(s)-(-)-binap(336mg，0.54mmol)，隨后裝入甲苯(10ml)。將混合物在ar下在室溫?cái)嚢?min。向該混合物中添加4-硝基碘苯(3.0g，12mmol)、4-芐基氧基苯胺鹽酸鹽(3.39g，14.4mmol)、cs2co3(9.8g，30mmol)和甲苯(40ml)。將所得混合物在ar下在100℃加熱16小時(shí)，然后冷卻至室溫，并傾入h2o(100ml)。分離各層。將水層用etoac(3x20ml)萃取。將合并的有機(jī)層用鹽水(2x20ml)洗滌，干燥(mgso4)并過濾。將濾液濃縮。將殘余物經(jīng)由柱層析(硅膠，5-40％etoac/己烷)純化以得到作為橙色固體的所需產(chǎn)物(1.2g，31％)。

3-(芐基氧基)-9-硝基-9h-咔唑2：將乙酸(20ml)中4-(芐基氧基)-n-(4-硝基苯基)苯胺1(0.5g，1.56mmol)和pd(oac)2(0.8g，3.56mmol)的混合物回流，并通過tlc監(jiān)測(cè)。回流2小時(shí)之后，tlc顯示不存在起始材料。將其真空濃縮以去除乙酸。將殘余物用etoac(50ml)稀釋，用h2o(20ml)、飽和nahco3溶液(2x20ml)、鹽水(20ml)洗滌，然后干燥(mgso4)并過濾。將濾液真空濃縮。將殘余物經(jīng)由柱層析(硅膠，5-40％etoac/己烷)純化以得到作為深黃色固體的所需產(chǎn)物2(100mg，20％)。

3-氨基-6-(芐基氧基)-9h-咔唑3：向etoh(20ml)中3-(芐基氧基)-9-硝基-9h-咔唑2(100mg，0.31mmol)和cu(oac)2(57mg，0.31mmol)的懸浮液中添加nabh4(240mg，6.3mmol)。將所得混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后真空濃縮。將殘余物溶解于h2o(30ml)，用etoac(2x30ml)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(mgso4)，過濾并真空濃縮以得到固體(90mg)。這無需任何進(jìn)一步純化即直接用于下一個(gè)步驟。

6-(芐基氧基)-n-甲基-9h-咔唑-3-胺4：向meoh(20ml)中3-氨基-6-(芐基氧基)-9h-咔唑3(90mg，0.31mmol)和多聚甲醛(47mg，1.57mmol)的懸浮液中添加meoh中naome的溶液(0.32ml，1.56mmol)。將所得混合物在80℃加熱1h，然后添加nabh4(59mg，1.55mmol)。將所得混合物在80℃加熱2小時(shí)，然后冷卻至室溫。向該溶液中添加naoh(1n，30ml)。然后將混合物用ch2cl2(3x20ml)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(mgso4)，過濾。將濾液真空濃縮以得到棕色固體(93mg，100％)。這無需任何進(jìn)一步純化即直接用于下一個(gè)步驟。

6-(甲基氨基)-9h-咔唑-3-醇5：在室溫將meoh(10ml)中6-(芐基氧基)-n-甲基-9h-咔唑-3-胺4(93mg，0.31mmol)、pd/c(10mg)和乙酸(10滴)的混合物氫化1.5小時(shí)。將其通過短硅藻土墊。將濾液真空濃縮以得到所需產(chǎn)物5(66mg，100％)。這無需任何進(jìn)一步純化即直接用于下一個(gè)步驟。ms：m/z＝213(m+h⁺)⁺。

[3-(芐基氧基)-6-(二甲基氨基)-9h-咔唑-9-基]甲醇7：向乙腈(30ml)中6-(芐基氧基)-n-甲基-9h-咔唑-3-胺4(110mg，0.38mmol)和甲醛水溶液(37％，1.0ml)的溶液中添加nab(oac)3(323mg，1.52mmol)。將所得混合物在室溫?cái)嚢?小時(shí)，然后濃縮。將殘余物溶解于h2o(30ml)，用ch2cl2(2x30ml)萃取。將合并的有機(jī)層干燥(mgso4)，過濾。將濾液真空濃縮以得到所需產(chǎn)物(0.12g)。這無需任何進(jìn)一步純化即直接用于下一個(gè)步驟。ms：m/z＝347(m+h⁺)⁺。

6-(二甲基氨基)-9-(甲氧基甲基)-9h-咔唑-3-醇8：在室溫將meoh(15ml)中[3-(芐基氧基)-6-(二甲基氨基)-9h-咔唑-9-基]甲醇7(120mg，)、pd/c(100mg)和乙酸(催化量)的混合物氫化4小時(shí)。將其過濾通過短硅藻土墊。將濾液真空濃縮以得到所需產(chǎn)物(94mg，100％)。

用于制備o-烷基化的咔唑衍生物的一般程序：向dmf(10ml)中咔唑-3-醇衍生物(1當(dāng)量)和cs2co3(1.5當(dāng)量)的溶液中添加dmf(1.0ml)中2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基-4-甲基苯磺酸酯(1.2當(dāng)量)的溶液。將所得混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，然后真空濃縮。將殘余物經(jīng)由柱層析(硅膠，5-50％etoac/己烷)純化以得到所需產(chǎn)物。

6-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-n-甲基-9h-咔唑-3-胺6：(3mg，5％)。

6-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9-(甲氧基甲基)-n,n-二甲基-9h-咔唑-3-胺9：(50mg，36％)。

用于制備?；倪沁蜓苌锏囊话愠绦颍合騞mf(3.0ml)中2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑(1.0當(dāng)量)的溶液中添加nah(過量)。在室溫?cái)嚢?min之后，添加酰基鹵(過量)。將所得混合物在室溫?cái)嚢柽^夜，然后真空濃縮。將殘余物經(jīng)由柱層析(硅膠，0-40％etoac/己烷)純化以得到所需產(chǎn)物。

1-(2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑-9-基)乙酮：(4mg，36％)。

1-(2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-咔唑-9-基)苯基甲酮：(51mg，78％)。

4-甲基苯磺酸2-(7-甲酰胺基-9h-咔唑-2-基氧基)乙酯：ad-cb-012p-wz02039的制備

使用用于從n-(7-羥基-9h-咔唑-2-基)甲酰胺(100mg)和乙烷-1，2-二基雙(4-甲基苯磺酸)(325mg)制備ad-cb-012s-wz01185)的相同程序制備化合物4-甲基苯磺酸2-(7-甲酰胺基-9h-咔唑-2-基氧基)乙酯(ad-cb-012p-wz02039)。(白色固體，22mg，12％)。

n-(7-(4-氟丁氧基)-9h-咔唑-2-基)甲酰胺：ad-cb-30s-wz02055的制備

使用用于從n-(7-羥基-9h-咔唑-2-基)甲酰胺(20mg)和1-溴-4-氟丁烷(27mg)制備ad-cb-012s-wz01185)的相同程序制備化合物n-(7-(4-氟丁氧基)-9h-咔唑-2-基)甲酰胺(ad-cb-30s-wz02055)。(白色固體，11mg，42％)。

2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-吡啶并[2，3-b]吲哚-7-胺鹽酸鹽的制備：

wz02045的制備：

向40mldcm中4-氯-3-硝基苯胺(2.5g，14.5mmol)中添加tea(2.9g，29mmol)、dmap(177mg，1.45mmol)和二碳酸二-叔丁酯(4.7g，21.7mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢?4h并濃縮。將殘余物用et2o(100ml)稀釋，用鹽水(100ml)、水(100ml)、0.5mhcl(2x100ml)和鹽水(100ml)洗滌，經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物通過硅膠層析(etoac/己烷)純化以得到作為黃色固體的4-氯-3-硝基苯基氨基甲酸叔丁酯(wz02045)(1.5g，38％)。ms(esi)m/z295(m+na⁺)。

wz02049的制備：

將4-氯-3-硝基苯基氨基甲酸叔丁酯(818mg，3mmol)、2-(芐基氧基)-5-(4，4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼戊烷-2-基)吡啶(933mg，3mmol)、四(三苯基膦)鈀(104mg，0.09mmol)、10ml二氧雜環(huán)己烷和6ml1mna2co3的混合物回流加熱15h。將其用50mlet2o稀釋，并用鹽水(2x50ml)洗滌，并經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物通過硅膠層析(etoac/己烷)純化以得到作為黃色石蠟的4-(6-(芐基氧基)吡啶-3-基)-3-硝基苯基氨基甲酸叔丁酯(wz02049)(1.2g，95％)。ms(esi)m/z444(m+na⁺)。

wz02057的制備：

將2ml亞磷酸三乙酯中上述化合物(800mg，1.9mmol)的懸浮液在148℃加熱15h。冷卻之后，將其在減壓下濃縮以去除揮發(fā)物。將粗產(chǎn)物通過硅膠層析(etoac/己烷)純化以得到作為灰白色固體的2-(芐基氧基)-9h-吡啶并[2，3-b]吲哚-7-基氨基甲酸叔丁酯(wz02057)(400mg，54％)。ms(esi)m/z390(m+h⁺)。

wz02061的制備：

向溶解于80mlmeoh的上述化合物(220mg，0.56mmol)中添加活性碳上的鈀(80mg)。將混合物在室溫在h2氣氛下攪拌15h。將固體濾出并將濾液濃縮，以得到作為白色固體的2-羥基-9h-吡啶并[2，3-b]吲哚-7-基氨基甲酸叔丁酯(wz02061)(105mg，100％)。該材料無需純化即直接用于下一個(gè)反應(yīng)。ms(esi)m/z300(m+h⁺)。

wz02063的制備：

向1nlnmp中上述化合物(50mg，0.167mmol)中添加4-甲基苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙酯(76mg，0.25mmol)和cs2co3(65mg，0.2mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢?5h，并用et2o(40ml)稀釋，用水(3x30ml)洗滌，并經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物通過硅膠層析(etoac/己烷)純化以得到作為澄清石蠟的2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-吡啶并[2，3-b]吲哚-7-基氨基甲酸叔丁酯(wz02063)(45mg，62％)。ms(esi)m/z434(m+h⁺)。

ad-cb-032s-wz02067的制備：

在室溫將上述化合物(45mg，0.1mmol)用2ml二氧雜環(huán)己烷溶液中4mhcl處理5h，并在減壓下濃縮。將殘余物用乙醚(5ml)洗滌，并在高真空下干燥以得到作為淡黃色固體的2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-吡啶并[2，3-b]吲哚-7-胺鹽酸鹽(ad-cb-032s-wz02067)(23mg，62％)。

2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-n-甲基-9h-吡啶并[2，3-b]吲哚-7-胺：ad-cb-034s-wz02069的制備

使用用于從2-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-9h-吡啶并[2，3-b]吲哚-7-胺鹽酸鹽(ad-cb-032s-wz02067，20mg)制備ad-cb-004s的相同程序制備化合物ad-cb-034s-wz02069(10mg，53％)。

6-溴-9h-咔唑-2-醇：w138的制備

wz02013的制備：

在0℃向10mldmf和20mldcm中9h-咔唑-2-醇(915mg，5mmol)中添加tea(1.0g，10mmol)，隨后添加乙酰氯(589mg，7.5mmol)。然后將反應(yīng)混合物在室溫?cái)嚢?h，并傾入至冰上(50g)。將混合物用etoac(2x60ml)萃取，并將合并的有機(jī)相經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物通過硅膠層析純化以得到作為灰白色固體的乙酸9h-咔唑-2-基酯(wz02013)(800mg，71％)。ms(esi)m/z348(m+h⁺)。

wz02025的制備：

在室溫向dcm(40ml)中乙酸9h-咔唑-2-基酯(500mg，2.2mmol)的溶液中逐滴添加25mldcm中nbs的溶液。將反應(yīng)混合物在黑暗中攪拌5h。將其用水(3x50ml)洗滌，并經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物通過硅膠層析(etoac/己烷)純化以得到作為灰白色固體的乙酸6-溴-9h-咔唑-2-基酯(wz02025)(250mg，含有17％二溴化產(chǎn)物)。ms(esi)m/z305(m+h⁺)。

w138的制備：

將30mlmeoh和4ml1.0mlioh水溶液中乙酸6-溴-9h-咔唑-2-基酯(200mg，0.65mmol)的懸浮液攪拌5h。將其用1mhcl中和并濃縮。將粗產(chǎn)物通過硅膠層析(etoac/己烷)純化以得到作為灰白色固體的6-溴-9h-咔唑-2-醇(w138)(125mg，含有15％二溴化產(chǎn)物)。

使用淀粉樣蛋白(ad患者的腦切片)放射自顯影染色的離體競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定法

當(dāng)與其它人進(jìn)行的以前建立的結(jié)果相比時(shí)，ad顯像劑的咔唑系列顯示出令人驚訝地好質(zhì)量?，F(xiàn)有技術(shù)的數(shù)據(jù)表明，具有較高logp值的化合物具有較高淀粉樣蛋白親和力，但這些相同化合物也受高非特異性結(jié)合的影響，即腦洗出較差(j.molecularneuroscience2003,20，255-260)。對(duì)于本申請(qǐng)中公開的研究，clogp值用于代替logp值。

進(jìn)行了一項(xiàng)研究來檢查4種不同示蹤劑的灰質(zhì)：白質(zhì)結(jié)合比率：cb-001、cb-003、fddnp和f-pib(ussn12/372,717的圖7和圖8)。在這項(xiàng)研究中沒有檢查已知含有咔唑的顯像劑18f-氟卡拉洛爾(18f-fluorocarazolol)，因?yàn)槠渑cfddnp和pib相比相對(duì)低的clogp值(2.77)和其競(jìng)爭(zhēng)特異性攝取至β-腎上腺素受體。此外，不存在表明18f-氟卡拉洛爾結(jié)合到ad斑塊的現(xiàn)有技術(shù)數(shù)據(jù)。在來自ad患者的人腦切片與給定示蹤劑孵育30min后，用各種etoh：水溶液洗滌切片，試圖優(yōu)化灰質(zhì)：白質(zhì)比率(ussn12/372,717的圖9)。鑒于其他研究者進(jìn)行的先前工作，結(jié)果是令人驚訝和意外的。cb-001具有比fddnp略高的clogp(3.8vs3.4)，并且基于這些值預(yù)期其具有比fddnp更差的洗出。然而，盡管clogp值存在差異，但cb-001具有較低的非特異性結(jié)合傾向，并且顯示出比fddnp好得多的灰質(zhì)：白質(zhì)比率(參見上面部分，“初始洗滌”)。更具體地，fddnp的白質(zhì)結(jié)合比cb-001的白質(zhì)結(jié)合暗幾個(gè)明暗度，表明cb-001的低非特異性結(jié)合。與此相反，具有3.99的clogp值的f-pib也表現(xiàn)出合理的類似于cb-001的結(jié)合比率，盡管表現(xiàn)出非常弱的總信號(hào)。洗滌數(shù)據(jù)表明，由于咔唑類的獨(dú)特的結(jié)合和洗脫特性，咔唑類是用于成像ad相關(guān)的目標(biāo)的可行且新穎的目標(biāo)。

為了擴(kuò)大這些結(jié)果，制備并測(cè)試cb-003，具有類似于fddnp的clogp值的示蹤劑。使用遠(yuǎn)比苛刻洗滌條件溫和的洗滌條件(ussn12/372,717的圖9)，cb-003表現(xiàn)出遠(yuǎn)優(yōu)于從fddnp、pib和cb-001獲得的效果的優(yōu)異的灰質(zhì)：白質(zhì)結(jié)合比率。這些有利且獨(dú)特的結(jié)果表明，cb-003將在生命系統(tǒng)中具有更有利的腦洗出，導(dǎo)致更多的特異性攝取和降低的非特異性結(jié)合，導(dǎo)致相比于fddnp和pib成像的明顯優(yōu)勢(shì)。

洗滌結(jié)果的總結(jié)：

*公開的fddnp洗滌條件：cb-1或cb-3示蹤劑的30min孵育，pbs洗滌(5min)，70％etoh：水(1min)，90％etoh：水(1min)，70％etoh：水(1min)，pbs(5min)。腦切片厚20um。

**溫和洗滌條件：cb-1或cb-3示蹤劑的30min孵育，pbs洗滌(5min)，30％etoh：水(2min)，40％etoh：水(2min)，20％etoh：水(2min)，pbs(5min)。腦切片厚20um。

結(jié)果表明，1)pib以漸增濃度阻斷[18f]-cb001染色，表明兩種化合物競(jìng)爭(zhēng)相同的淀粉樣蛋白結(jié)合口袋；2)pib看起來以與冷cb001相同強(qiáng)度阻斷示蹤劑結(jié)合，表明兩者具有相似的結(jié)合親和力；3)由于其較低的淀粉樣蛋白結(jié)合親和力，fddnp阻斷[18f]-cb001染色的能力弱得多。

該數(shù)據(jù)表明以下順序的(非特異性)白質(zhì)結(jié)合：

fddnp＞cb001＞[18f]-pib＞cb003

使用放射自顯影染色通過離體競(jìng)爭(zhēng)測(cè)定法用[18f]-pib測(cè)定ic50

為了進(jìn)一步表明采用這些cb相關(guān)示蹤劑作為ad成像劑的效率，使用cb-003來清楚區(qū)分健康腦和ad腦(ussn12/372,717的圖10)。更具體地，通過使用溫和洗滌方案，淀粉樣蛋白沉積物在灰質(zhì)中清楚可見，其中白質(zhì)攝取少。該結(jié)果通過抗體ihc和硫磺素t淀粉樣蛋白染色兩者來證實(shí)，驗(yàn)證了攝取的特異性。這些令人驚訝的結(jié)果表明，該示蹤劑具有從白質(zhì)快速洗出和對(duì)于ad斑塊特異性的灰質(zhì)中的顯著高攝取的獨(dú)特品質(zhì)。

咔唑類針對(duì)18f-pib直接競(jìng)爭(zhēng)人ad腦中的相同結(jié)合位點(diǎn)(ussn12/372,717的圖11)。鑒于它們不同的結(jié)構(gòu)和cb-003缺乏酚oh和末端nh-me基團(tuán)(這被認(rèn)為對(duì)于結(jié)合ad斑塊是必不可少的)，該令人驚訝的結(jié)果無法進(jìn)行預(yù)測(cè)。盡管cb-003缺乏這些官能團(tuán)，但其仍然與18f-pib競(jìng)爭(zhēng)人ad腦中的結(jié)合位點(diǎn)。因?yàn)槠浣Y(jié)構(gòu)的簡(jiǎn)單性，cb-001和cb-003的標(biāo)記率異常高，且好于18f-pib的標(biāo)記率。

表面等離子共振(spr)測(cè)定法

使用biacore儀器開發(fā)測(cè)定法，其在金表面固定化目標(biāo)蛋白上引入配體并測(cè)量所得結(jié)合速率和解離速率，以便測(cè)試結(jié)合可溶性ad寡聚體、聚合物和原纖維的各種化合物(ussn12/372,717的圖12至17)。

咔唑系列還顯示相比于可溶性聚集體(262nm)良好且優(yōu)先結(jié)合不溶性聚集體(9nm)的獨(dú)特且令人驚訝的能力(ussn12/372,717的圖12和圖13)。pib不僅良好結(jié)合不溶性聚集體(16nm)，而且基本上同樣良好地結(jié)合可溶性聚集體(48nm)(ussn12/372,717的圖14和圖15)。對(duì)于優(yōu)先區(qū)分示蹤劑與不溶性聚集體相比于可溶性聚集體的結(jié)合的成像應(yīng)用，cb-003提供了29∶1的較大結(jié)合比，而pib僅提供了3∶1的比率。因此，cb-003可以提供相對(duì)于pib更多的選擇性結(jié)合信息。結(jié)果表明，1)對(duì)于可溶性聚集體結(jié)合，pib＞cb3＞cb4；和2)對(duì)于不溶性聚集體結(jié)合，pib＝cb3＞cb4。

wt和app小鼠中用[18f]-cb-001或[18f]-cb-003的顯微pet成像

結(jié)果表明，1)wt和app小鼠顯示腦中示蹤劑保留的統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著差異(ussn12/372,717的圖18a、圖18b和圖19；2)app小鼠顯示相比于wt小鼠高直至25％的腦/肌肉比率(ussn12/372,717的圖20和圖12)。咔唑類表現(xiàn)出小鼠腦(wt和app兩者)中令人驚訝的高攝取和足夠慢洗出，使得可以區(qū)分wt小鼠和app小鼠(ussn12/372,717的圖22和圖12)。不受本文提出的任何理論所束縛，我們推測(cè)，這些結(jié)果后面的原因可能是cb-003具有比18f-pib更快的洗出率，這與染色數(shù)據(jù)是一致的：18f-pib要求更苛刻的洗滌條件以得到合理的灰質(zhì)：白質(zhì)比率。cb-003的快速洗出據(jù)推測(cè)是其低非特異性結(jié)合的重要因素，但洗出慢到足以區(qū)分wt和app。這表明，咔唑類表現(xiàn)出人ad腦中優(yōu)異的洗出和保留特性的獨(dú)特組合，這從現(xiàn)有技術(shù)數(shù)據(jù)來看不是顯而易見的。cb-003，是中性化合物，也可能具有相比于基于兩性離子的成像劑諸如亞甲基藍(lán)更大的攝取值。

7-(3-氟丙基)-3-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚*tfa：t793

遵循咔唑形成的一般實(shí)驗(yàn)程序。在2-(4-(3-氟丙基)苯基)-5-甲基-3-硝基吡啶的8.9mg規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。分離作為白色固體的3.6mg(45％)t793。

7-(2-氟乙基)-5h-吡啶并[4，3-b]吲哚：t805

遵循咔唑形成的一般實(shí)驗(yàn)程序。(與用于t794的相同。)在3-(4-(2-氟乙基)苯基)-4-硝基吡啶的28.5mg規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。分離作為白色固體的13.3mg(54％)t805。

7-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙基)-5h-吡啶并[4，3-b]吲哚：t813

向dmf(1.0ml)中7-(2-羥基乙基)-5h-吡啶并[4，3-b]吲哚-5-甲酸叔丁酯(9.0mg，0.0288mmol)的溶液中添加nah(礦物油中60％，3.6mg，0.09mmol)。將混合物攪拌15min，然后添加4-甲基苯磺酸2-(2-氟乙氧基)乙酯(23mg，0.0878mmol)。將混合物在室溫?cái)嚢?.5小時(shí)。將混合物用dcm稀釋，并用水洗滌兩次。將dcm層分離并添加tfa(dcm中10％tfa)。將反應(yīng)在室溫?cái)嚢?小時(shí)。將混合物濃縮并通過hplc(乙腈/水)純化，以得到作為白色固體的4.5mg(52％)t813。

t757和t758的合成

3-(3-硝基吡啶-2-基)苯酚的制備。將[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(ii)、w/dcm(0.039g，0.047mmol)添加至含有3-(4，4,5,5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼戊烷-2-基)苯酚(0.292g，1.325mmol)、2-氯-3-硝基吡啶(0.15g，0.946mmol)、碘化銅(i)(0.018g，0.095mmol)和碳酸鉀(0.946ml，1.892mmol)的溶液中。將反應(yīng)加熱至110℃持續(xù)15min。將反應(yīng)冷卻至室溫。用水稀釋，并用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)物，干燥，過濾，濃縮并純化，以得到3-(3-硝基吡啶-2-基)苯酚(0.1g，0.463mmol，48.9％產(chǎn)率)。

2-(3-(2-氟乙氧基)苯基)-3-硝基吡啶的制備。將氫化鈉60％(0.021g，0.925mmol)添加至dmf(體積：3.08ml)中含有3-(3-硝基吡啶-2-基)苯酚(0.2g，0.925mmol)和1-溴-2-氟乙烷(0.138ml，1.850mmol)的溶液中。將反應(yīng)攪拌2小時(shí)。將反應(yīng)用水稀釋，并用乙酸乙酯萃取。合并有機(jī)物，干燥，過濾并使用己烷中35％乙酸乙酯通過isco柱純化，以得到2-(3-(2-氟乙氧基)苯基)-3-硝基吡啶(0.11g，0.419mmol，45.3％產(chǎn)率)。

t757和t758的制備。將亞磷酸三乙酯(1.100ml，6.29mmol)中2-(3-(2-氟乙氧基)苯基)-3-硝基吡啶(0.11g，0.419mmol)加熱至125℃持續(xù)6小時(shí)。將反應(yīng)冷卻至室溫，濃縮并通過prephplc純化，以得到t757(0.005g，0.022mmol，5.18％產(chǎn)率)ms(esi，pos.)m/z：231.0[m+h]⁺和t758(0.005g，0.022mmol，5.18％產(chǎn)率)ms(esi，pos.)m/z：231.0[m+h]⁺。

t789的合成

6′-氟-5-硝基-6-苯基-3，3′-聯(lián)吡啶的制備。將[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(ii)、w/dcm(7.32mg，8.96μmol)添加至dmf(體積：0.597ml)中含有5-溴-3-硝基-2-苯基吡啶(0.05g，0.179mmol)、(6-氟吡啶-3-基)硼酸(0.025g，0.179mmol)、碘化銅(i)(3.41mg，0.018mmol)和碳酸鉀(0.134ml，0.269mmol)的溶液中。將反應(yīng)在微波中在110℃加熱15分鐘。讓反應(yīng)冷卻至室溫。將反應(yīng)用水稀釋，干燥，過濾，濃縮并使用己烷中0％至25％乙酸乙酯通過combiflash純化，以得到6′-氟-5-硝基-6-苯基-3，3′-聯(lián)吡啶(0.03g，0.102mmol，56.7％產(chǎn)率)。

t789的制備。將6′-氟-5-硝基-6-苯基-3,3′-聯(lián)吡啶(0.03g，0.102mmol)和亞磷酸三乙酯(1ml，5.72mmol)加熱至125℃持續(xù)3小時(shí)。讓反應(yīng)冷卻至室溫。濃縮并通過prephplc純化，以得到t789(0.002g，7.60μmol，7.48％產(chǎn)率)ms(esi，pos.)m/z：264.0[m+h]⁺。

t810的合成

5-(芐基氧基)-2-溴吡啶的制備。將芐基溴(1.367ml，11.49mmol)添加至丙酮(體積：38.3ml)中含有6-溴吡啶-3-醇(2g，11.49mmol)和碳酸鉀(2.383g，17.24mmol)的溶液中。讓反應(yīng)攪拌4小時(shí)。濃縮并使用己烷中15％乙酸乙酯通過combiflash純化，以得到5-(芐基氧基)-2-溴吡啶(2.5g，9.47mmol，82％產(chǎn)率)。

5-(芐基氧基)-2-(2-硝基苯基)吡啶的制備。將[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(ii)、w/dcm(0.077g，0.095mmol)添加至dmf(體積：6.31ml)中含有(2-硝基苯基)硼酸(0.316g，1.893mmol)、5-(芐基氧基)-2-溴吡啶(0.5g，1.893mmol)、碘化銅(i)(0.036g，0.189mmol)和碳酸鉀(1.420ml，2.84mmol)的溶液中。讓反應(yīng)冷卻至室溫。將反應(yīng)用水稀釋，用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)物，干燥，過濾并濃縮。使用己烷中15％乙酸乙酯通過combiflash純化，以得到5-(芐基氧基)-2-(2-硝基苯基)吡啶(0.3g，0.979mmol，51.7％產(chǎn)率)。

3-(芐基氧基)-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚的制備。將亞磷酸三乙酯(3ml，17.15mmol)和5-(芐基氧基)-2-(2-硝基苯基)吡啶(0.3g，0.979mmol)加熱至125℃持續(xù)4小時(shí)。讓反應(yīng)冷卻至室溫。濃縮并使用乙酸乙酯和隨后dcm中15％甲醇通過combiflash柱純化，以得到3-(芐基氧基)-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚(0.09g，0.328mmol，33.5％產(chǎn)率)。

5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-3-醇的制備。將meoh(體積：5ml)中3-(芐基氧基)-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚(0.09g，0.328mmol)和碳上的10％鈀(0.035g，0.033mmol)在氫氣下攪拌2小時(shí)。過濾并濃縮，以得到5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-3-醇(0.06g，0.326mmol，99％產(chǎn)率)。

t810的制備。將氫化鈉60％(0.019g，0.489mmol)添加至dmf(體積：1.086ml)中含有4-甲基苯磺酸2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙酯(0.100g，0.326mmol)、5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-3-醇(0.06g，0.326mmol)的溶液中。將反應(yīng)攪拌2小時(shí)。濃縮并通過prephplc純化，以得到t810(0.006g，0.019mmol，5.79％產(chǎn)率)ms(esi，pos.)m/z：319.0[m+h]⁺。

3-(4-(4-硝基吡啶-3-基)苯基)丙烷-1-醇。將8ml二氧雜環(huán)己烷中硼酸酯(524mg，2mmol)、溴化物(406mg，2mmol)、pd(0)(116mg，0.1mmol)和na2co3溶液(1m，4ml)的混合物在90℃在微波反應(yīng)器中加熱10min。冷卻至室溫之后，將混合物用etoac(3x20ml)萃取，并將有機(jī)相經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物用硅膠層析(etoac/己烷，5％至90％)純化以得到作為黃色油狀物的標(biāo)題化合物(412mg)。

3-(4-(3-氟丙基)苯基)-4-硝基吡啶。在0℃向2ml無水dcm中3-(4-(4-硝基吡啶-3-基)苯基)丙烷-1-醇(60mg，0.23mmol)中逐滴添加(二乙基氨基)硫三氟化物(111mg，0.69mmol)。將反應(yīng)升溫至室溫并攪拌1h，并在飽和na2co3(20ml)中淬滅至冰上(20g)。將混合物用etoac(2x30ml)萃取，并將有機(jī)相經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將殘余物通過硅膠層析(己烷中etoac，5％至30％)純化以得到作為淺黃色油狀物的3-(4-(3-氟丙基)苯基)-4-硝基吡啶(12mg，20％)。

7-(3-氟丙基)-5h-吡啶并[4，3-b]吲哚。將0.3ml磷酸三乙酯中3-(4-(3-氟丙基)苯基)-4-硝基吡啶(12mg，0.046mmol)的溶液在125℃加熱1h。冷卻至室溫之后，將揮發(fā)物在減壓下去除，并將殘余物通過硅膠層析(dcm中meoh，0％至10％)純化以得到灰白色固體。然后將該材料進(jìn)一步通過反相hplc純化以得到作為白色固體的7-(3-氟丙基)-5h-吡啶并[4，3-b]吲哚(3mg，28％)。

2-(5-氟戊-1-炔-1-基)苯并[4，5]咪唑并[1，2-a]嘧啶(t806)。在0℃向1ml無水dcm中5-(苯并[4，5]咪唑并[1，2-a]嘧啶-2-基)戊-4-炔-1-醇(20mg，0.08mmol)中逐滴添加(二乙基氨基)硫三氟化物(64mg，0.4mmol)。將反應(yīng)升溫至室溫并攪拌1h，并在飽和na2co3(10ml)中淬滅至冰(10g)的混合物上。將混合物用etoac(2x10ml)萃取，并將有機(jī)相經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將殘余物通過硅膠層析(dcm中etoac，5％至50％)純化以得到作為黃色油狀物的2-(5-氟戊-1-炔-1-基)苯并[4，5]咪唑并[1，2-a]嘧啶(3mg，15％)。

4-(5-溴-3-硝基吡啶-2-基)苯酚。將4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼戊烷-2-基)苯酚(300mg，1.36mmol)、2，5-二溴-3-硝基吡啶(383mg，1.36mmol)、四(三苯基膦)鈀(31mg，0.027mmol)、na2co3(4.3ml，2maqueous)、43ml甲苯和2.1mletoh的混合物在55℃劇烈攪拌2h。冷卻至室溫之后，將揮發(fā)物在減壓下去除，并將殘余物通過硅膠層析(己烷中etoac，5％至35％)純化以得到作為黃色石蠟的4-(5-溴-3-硝基吡啶-2-基)苯酚(285mg，71％)。ms(esi)m/z[m+h]⁺295，297。

5-溴-2-(4-(甲氧基甲氧基)苯基)-3-硝基吡啶。在0℃向5ml無水dcm中4-(5-溴-3-硝基吡啶-2-基)苯酚(280mg，0.95mmol)和dipea(360mmg，2.85mmol)的混合物中逐滴添加氯(甲氧基)甲烷(210mg，1.9mmol)。將混合物升溫至室溫，并持續(xù)攪拌3h，并用etoac(30ml)稀釋，用水(3x30ml)洗滌，并經(jīng)mgso4干燥。將溶劑在減壓下去除，并將殘余物通過硅膠層析(己烷中etoac，5％至35％)純化以得到作為黃色石蠟的5-溴-2-(4-(甲氧基甲氧基)苯基)-3-硝基吡啶(260mg，80％)。ms(esi)m/z[m+h]⁺339，341。

6′-氟-6-(4-(甲氧基甲氧基)苯基)-5-硝基-3，3′-聯(lián)吡啶。將5-溴-2-(4-(甲氧基甲氧基)苯基)-3-硝基吡啶(68mg，0.2mmol)、2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼戊烷-2-基)吡啶(45mg，0.2mg)、四(三苯基膦)鈀(12mg，0.01mmol)、na2co3(0.5ml，1m水溶液)和二氧雜環(huán)己烷(1.5ml)的混合物在100℃在微波反應(yīng)器中加熱10min。冷卻至室溫之后，將反應(yīng)用etoac(20ml)稀釋，并用鹽水(20ml)和水(2x20ml)洗滌，并經(jīng)mgso4干燥。將溶劑在減壓下去除，并將殘余物通過硅膠層析(己烷中etoac，5％至40％)純化以得到作為黃色固體的6′-氟-6-(4-(甲氧基甲氧基)苯基)-5-硝基-3，3′-聯(lián)吡啶(48mg，67％)。ms(esi)m/z[m+h]⁺356。

2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼戊烷-2-基)吡啶(t783)。將1ml磷酸三乙酯中6′-氟-6-(4-(甲氧基甲氧基)苯基)-5-硝基-3，3′-聯(lián)吡啶(45mg，0.12mmol)的溶液在125℃加熱4h。冷卻至室溫之后，將揮發(fā)物在減壓下去除，并將殘余物通過硅膠層析(己烷中etoac，10％至100％)純化以得到作為灰白色固體的2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼戊烷-2-基)吡啶(t783)(8mg，20％)。

3-(6-氟吡啶-3-基)-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-7-醇(t784)。將0.5mlhcl(二氧雜環(huán)己烷中4m)中2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧雜硼戊烷-2-基)吡啶(7mg，0.02mmol)的溶液在室溫?cái)嚢?h。將揮發(fā)物在減壓下去除，并將殘余物通過反相hplc(水/mecn與tfa緩沖液)純化以得到作為白色固體的3-(6-氟吡啶-3-基)-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-7-醇(t784)(4mg，71％)。

7-(3-氟丙氧基)-3-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚(t773)。使用用于制備7-(2-氟乙氧基)-3-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚(t703)相同的程序合成標(biāo)題化合物。獲得作為白色固體的7-(3-氟丙氧基)-3-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚(t773)(8mg，15％)。

作為tau示蹤劑的氮雜咔唑衍生物的制備：

化合物經(jīng)由上述方案使用烷基化(或還原性胺化)、硼化、suzuki偶合和氮雜咔唑環(huán)化的一般程序來合成。

用于將芳基溴硼化為芳基硼酸頻哪醇酯的一般實(shí)驗(yàn)程序

向具有磁力攪拌棒的微波小瓶中添加芳基溴起始材料(1當(dāng)量)、pd(dppf)cl2(0.05當(dāng)量)、乙酸鉀(3當(dāng)量)和雙(頻哪醇)硼酸酯(1.2當(dāng)量)。將固體溶解于dmso(5vol)，密封并在油浴中加熱至80℃，持續(xù)40-50小時(shí)。將反應(yīng)用鹽水稀釋，用乙醚/己烷或dcm萃取。將合并的有機(jī)層濃縮，將殘余物使用己烷：etoac或dcm：etoac或dcm：meoh作為洗脫液經(jīng)硅膠純化以得到硼酸酯。

用于從硝基-取代的聯(lián)芳基前體環(huán)化氮雜-咔唑的一般實(shí)驗(yàn)程序：

向具有磁力攪拌棒的微波小瓶中添加硝基-取代的聯(lián)芳基前體芳基/雜環(huán)鹵化物(1當(dāng)量)，亞磷酸三乙酯(4-8當(dāng)量)。將懸浮液在油浴中在120-135℃加熱(根據(jù)起始材料的反應(yīng)性和產(chǎn)物的穩(wěn)定性)2小時(shí)。將反應(yīng)在真空下濃縮以去除所有揮發(fā)物。將殘余物使用己烷：etoac或dcm：etoac或dcm：meoh作為洗脫液經(jīng)硅膠純化以得到氮雜-咔唑。

7-(2-氟乙氧基)-1-甲基-9h-吡啶并[3，4-b]吲哚；t660

7-(2-氟乙氧基)-9h-吡啶并[3，4-b]吲哚t(yī)686

n-(3-氟丙基)-9h-吡啶并[3，4-b]吲哚-7-胺t687

7-(2-氟乙氧基)-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚t(yī)688

7-(2-氟乙氧基)-2-甲氧基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚t(yī)692

7-(2-氟乙氧基)-3-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚t(yī)703

n-(2-氟乙基)-n-甲基-9h-吡啶并[3，4-b]吲哚-7-胺t722

n-(2-氟乙基)-n-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-7-胺t726

n-(2-氟乙基)-n，3-二甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-7-胺t728

n-(2-氟乙基)-2-甲氧基-n-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-7-胺t731

n-(3-氟丙基)-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-7-胺t733

n-(3-氟丙基)-3-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-7-胺t734

n-(3-氟丙基)-2-甲氧基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-7-胺t735

7-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)-3-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚t(yī)740

7-(4-(2-氟乙氧基)苯基)-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚t(yī)741

7-(6-氟吡啶-3-基)-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚t(yī)742

n-(2-氟乙基)-n-甲基-4-(3-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-7-基)苯胺t744

7-(4-氟哌啶-1-基)-3-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚t(yī)fa鹽；t775

7-(3-氟丙氧基)-5h-吡啶并[4，3-b]吲哚t(yī)779

4-(7-(3-氟丙氧基)-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚-3-基)苯胺t787

(e)-7-(3-氟丙氧基)-3-(丙-1-烯基)-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚t(yī)788

3-環(huán)丙基-7-(3-氟丙氧基)-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚t(yī)790

7-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-5h-吡啶并[4，3-b]吲哚t(yī)803

7-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)-5h-吡啶并[4，3-b]吲哚t(yī)804

7-((2-(2-氟乙氧基)乙氧基)甲基)-5h-吡啶并[4，3-b]吲哚t(yī)811

7-(6-氟吡啶-3-基)-5-甲基-h-吡啶并[4，3-b]吲哚t(yī)fa鹽(as-5357-55，t-820)

在160℃將t-8070.010g用dmf中二甲基丙酮(2當(dāng)量)和cs2co3(0.5當(dāng)量)烷基化3小時(shí)。將殘余物使用acn-h2o與0.05％tfa通過hplc純化。

7-(6-氟吡啶-3-基)-5h-吡啶并[4，3-b]吲哚(as-5357-18，t-807)

遵循suzuki偶合的一般實(shí)驗(yàn)程序(方法a)以制備中間體a。在0.6g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。在combiflash純化系統(tǒng)上在己烷-etoac中洗脫出產(chǎn)物，分離作為淡黃色固體的0.600g(72％)中間體a；ms(esi)：277和279(m⁺)和(m+2h⁺)。使用咔唑合成的一般方法(方法cc)環(huán)化0.6g中間體a，得到咔唑b。在combiflash純化系統(tǒng)上用dcm-meoh洗脫咔唑b，分離作為淺棕色固體的0.21g(40％)；

咔唑b進(jìn)一步用于suzuki偶合(方法a)。在0.1g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。在combiflash純化系統(tǒng)上用dcm-meoh洗脫產(chǎn)物t-807，分離作為灰白色固體的0.056g(56％)，將其使用acn-h2o與0.05％tfa通過hplc進(jìn)一步純化；

8-氟-7-(2氟乙氧基)3-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚t(yī)fa鹽(as-5357-14-1，t-801和6-氟-7-(2氟乙氧基)3-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚t(yī)fa鹽as-5357-14-2，t-801)

遵循suzuki偶合的一般實(shí)驗(yàn)程序(方法a)，隨后遵循o-烷基化(方法c)以制備中間體c。在0.172g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。在combiflash純化系統(tǒng)上在己烷-etoac中洗脫出中間體c，分離作為灰白色固體的0.158g(在兩個(gè)步驟中54％)；ms(esi)：295.25(m+h⁺)。使用咔唑合成的一般實(shí)驗(yàn)方法(方法cc)環(huán)化0.030g中間體c，得到咔唑混合物。將產(chǎn)物t-800(0.015g，42％)和t-801(0.006g，16％)使用acn-h2o與0.05％tfa通過hplc純化；

8-氟-7-甲氧基-3-甲基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚t(yī)fa鹽(as-5357-12，t-799)

遵循suzuki偶合的一般實(shí)驗(yàn)程序(方法a)以制備中間體d。在0.172g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。在combiflash純化系統(tǒng)上在己烷-etoac中洗脫出產(chǎn)物，分離作為淡黃色固體的0.185g(70％)中間體d；使用咔唑合成的一般實(shí)驗(yàn)方法(方法cc)環(huán)化0.027g中間體d，得到咔唑混合物，其使用acn-h2o與0.05％tfa通過hplc純化，得到作為灰白色固體的t-999(0.002g，6％)；

7-氟-3-甲基-5h-吡咯并[2，3-b：4，5-b’]聯(lián)吡啶叔丁基-(as-5357-3，t-782)

遵循suzuki偶合的一般實(shí)驗(yàn)程序(方法a)以制備中間體e。在0.172g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)，并在combiflash純化系統(tǒng)上在dcm-etoac中洗脫出作為灰白色固體的0.180g(77％)中間體e；中間體e的使用一般實(shí)驗(yàn)方法(方法cc)環(huán)化0.048g中間體e，得到0.012g(29％)固體，其通過過濾收集；

2-氟-7-甲氧基-5h-吡啶并[3，2-b]吲哚(as-5332-192-1，t-781)

遵循suzuki偶合的一般實(shí)驗(yàn)程序(方法a)以制備中間體f。中間體f在combiflash純化系統(tǒng)中在梯度洗脫中洗脫在12％etoac：己烷混合物中。分離作為淺黃色固體的0.048g(36％)；lc-ms(esi)：249.1[m+h⁺]。使用咔唑合成的一般實(shí)驗(yàn)程序(方法cc)環(huán)化中間體f。在0.048g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。在combiflash純化系統(tǒng)上在15％dcm-etoac中洗脫出作為淡黃色固體的t-781(0.003g，5％)；

7-(2-(2-(2-氟乙氧基)乙氧基)乙氧基)-3-甲基-5h-吡咯并[2，3b：4，5-b’]聯(lián)吡啶tfa鹽(as-5357-10，t-795)

使用用k2co3作為堿且在180℃mw加熱20minn-烷基化t-782的一般實(shí)驗(yàn)程序(方法d)。在0.020g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)后，使用粗殘留物0.032(90％)用于dast反應(yīng)(方法)。在0.010g規(guī)模上進(jìn)行反應(yīng)。反應(yīng)后，產(chǎn)物t-795通過hplc使用acn和h2o與0.05％tfa純化，作為白色固體0.002mg(12％)；

3-(4-(4-硝基吡啶-3-基)苯基)丙烷-1-醇。將8ml二氧雜環(huán)己烷中硼酸酯(524mg，2mmol)、溴化物(406mg，2mmol)、pd(o)(116mg，0.1mmol)和na2co3溶液(1m，4ml)的混合物在90℃在微波反應(yīng)器中加熱10min。冷卻至室溫之后，將混合物用etoac(3x20ml)萃取，并將有機(jī)相經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將粗產(chǎn)物用硅膠層析(etoac/己烷，5％至90％)純化以得到作為黃色油狀物的標(biāo)題化合物(412mg)。

3-(4-(3-氟丙基)苯基)-4-硝基吡啶。在0℃向2ml無水dcm中3-(4-(4-硝基吡啶-3-基)苯基)丙烷-1-醇(60mg，0.23mmol)中逐滴添加(二乙基氨基)硫三氟化物(111mg，0.69mmol)。將反應(yīng)升溫至室溫并攪拌1h，并在飽和na2co3(20ml)中淬滅至冰上(20g)。將混合物用etoac(2x30ml)萃取，并將有機(jī)相經(jīng)mgso4干燥并濃縮。將殘余物通過硅膠層析(己烷中etoac，5％至30％)純化以得到作為淺黃色油狀物的3-(4-(3-氟丙基)苯基)-4-硝基吡啶(12mg，20％)。

7-(3-氟丙基)-5h-吡啶并[4，3-b]吲哚。將0.3ml磷酸三乙酯中3-(4-(3-氟丙基)苯基)-4-硝基吡啶(12mg，0.046mmol)的溶液在125℃加熱1h。冷卻至室溫之后，將揮發(fā)物在減壓下去除，并將殘余物通過硅膠層析(dcm中meoh，0％至10％)純化以得到灰白色固體。然后將該材料進(jìn)一步通過反相hplc純化以得到作為白色固體的7-(3-氟丙基)-5h-吡啶并[4，3-b]吲哚(3mg，28％)。

如此已詳細(xì)描述了本發(fā)明的有利實(shí)施方案，應(yīng)當(dāng)理解由上述段落限定的本發(fā)明并不限于上述說明書中所示的具體細(xì)節(jié)，因?yàn)槠湓S多明顯變異在不背離本發(fā)明的精神或范圍的情況下是可能的。