技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開一種利用piggyBac轉(zhuǎn)座子在CHO細(xì)胞中獲得表達(dá)目標(biāo)蛋白的穩(wěn)定細(xì)胞群的方法，步驟包括：1)構(gòu)建含有待表達(dá)的編碼目標(biāo)蛋白基因和抗生素篩選基因的基因片段的質(zhì)粒，和含有piggyBac轉(zhuǎn)座子序列的質(zhì)粒；2)將步驟1)中構(gòu)建的質(zhì)粒轉(zhuǎn)染同時(shí)引入CHO細(xì)胞中；3)對(duì)步驟2)中轉(zhuǎn)染后細(xì)胞直接在搖瓶中進(jìn)行抗生素篩選。本方法能夠在一到兩周時(shí)間內(nèi)構(gòu)建穩(wěn)定的細(xì)胞群，并能夠高效的表達(dá)目標(biāo)蛋白。以及，本發(fā)明還公開一種利用piggyBac轉(zhuǎn)座子在CHO細(xì)胞中獲得表達(dá)目標(biāo)蛋白的穩(wěn)定細(xì)胞群并直接放大生產(chǎn)目標(biāo)蛋白的方法，可滿足50升以上的生產(chǎn)。

技術(shù)研發(fā)人員：張崢;李曉璐;蔡潔行;周偉昌;陳智勝
受保護(hù)的技術(shù)使用者：上海藥明生物技術(shù)有限公司;無(wú)錫藥明康德生物技術(shù)股份有限公司
文檔號(hào)碼：201611183175
技術(shù)研發(fā)日：2016.12.20
技術(shù)公布日：2017.05.31