本發(fā)明所屬領(lǐng)域為生物制藥領(lǐng)域,涉及一種純化硫酸軟骨素鈉的方法,特別是一種硫酸軟骨素鈉生產(chǎn)工藝方法。
背景技術(shù):
硫酸軟骨素鈉是從動物組織中提取制備的一種酸性粘多糖類物質(zhì),屬糖胺聚糖。臨床主要用于調(diào)血脂藥、關(guān)節(jié)炎、滴眼液等。硫酸軟骨素鈉是目前市場上較為重要的一種生化藥物,制備硫酸軟骨素鈉的方法主要有生物酶法和化學(xué)裂解法。本方法對生物酶法進(jìn)一步進(jìn)行優(yōu)化,最大限度的提高硫酸軟骨素鈉的收率及含量,節(jié)約成本,操作簡便易實現(xiàn)。
技術(shù)實現(xiàn)要素:
本發(fā)明的目的提供一種提高硫酸軟骨素鈉收率方法。本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案來達(dá)到,依次通過以下幾個步驟來實現(xiàn):
(1)溶解:硫酸軟骨素鈉提取液經(jīng)脫色沉淀后,按照其沉淀濕品干重1:1~5(質(zhì)量/體積)比例加入純化水溶解;
(2)升溫:調(diào)節(jié)pH6~10后,按照溶液體積1%~5%(質(zhì)量/體積)比例加入氯化鈉,升溫至50~60℃,攪拌30分鐘;
(3)熱沉淀:維持溫度40-50℃,按照溶液體積50%~80%(質(zhì)量/體積)比例加入95%乙醇趁熱沉淀后,自然降溫;
(4)收集沉淀:維持溫度40-50℃時,緩慢虹吸,排除上清液,控制流速在1-10mL/min,收集沉淀;
(5)沉淀物經(jīng)脫水烘干,即得高含量硫酸軟骨素鈉。
本技術(shù)方案的有益效果是:經(jīng)該方法處理過的硫酸軟骨素鈉,收率在50%以上,產(chǎn)品含量在98%以上。
(1)進(jìn)一步優(yōu)選的,步驟(3)及步驟(4)熱沉淀及收集沉淀的操作溫度須維持40~50℃,可使硫酸軟骨素鈉緩慢沉淀,減少蛋白雜質(zhì)與硫酸軟骨素鈉共沉淀。
(2)進(jìn)一步優(yōu)選的,步驟(4)中,虹吸上清液的流速要控制在2~3mL。此時蛋白雜質(zhì)尚懸浮在上清液中,可隨虹吸過程除去,并且減少硫酸軟骨素鈉的浪費。
具體實施方式
以下實例詳細(xì)說明了本發(fā)明:
實施例1
(1)溶解:硫酸軟骨素鈉提取液經(jīng)脫色沉淀后得100Kg濕品(干重:60Kg),加入200L純化水溶解;
(2)升溫:調(diào)節(jié)pH6.8后,量取溶液體積為200L,加入6Kg氯化鈉,升溫至45℃,攪拌60分鐘;
(3)熱沉淀:維持溫度45℃,邊攪拌邊加入150L95%乙醇趁熱沉淀后,自然降溫;
(4)收集沉淀:維持溫度45℃時,以3mL/min的流速虹吸上清液,收集沉淀;
(5)沉淀物經(jīng)脫水烘干,得硫酸軟骨素鈉產(chǎn)品,其含量為98.3%,收率50.3%。
實施例2
(1)溶解:硫酸軟骨素鈉提取液經(jīng)脫色沉淀后得1Kg濕品(干重:600 g),加入2L純化水溶解;
(2)升溫:調(diào)節(jié)pH6.0后,量取溶液體積為2L,加入60 g氯化鈉,升溫至40℃,攪拌60分鐘;
(3)熱沉淀:維持溫度40℃,邊攪拌邊加入95%乙醇1.5L,趁熱沉淀后;
(4)收集沉淀:維持溫度40℃時,以2 mL/min的流速虹吸上清液,收集沉淀;
(5)沉淀物經(jīng)脫水烘干,得硫酸軟骨素鈉產(chǎn)品,其含量為97.6%,收率51.2%。