本發(fā)明屬于微生物發(fā)酵領(lǐng)域，具體涉及一種裂殖弧菌株及利用其生產(chǎn)DHA的方法。
背景技術(shù)：
：二十二碳六烯酸((Docosahexaenoicacid,DHA)是一種人體必需的極其重要的ω-3系列高度不飽和脂肪酸，具有促進(jìn)嬰幼兒腦部發(fā)育、保護(hù)視力、提高機(jī)體免疫能力等重要生理功能，其在心腦血管疾病預(yù)防和治療中的作用也十分顯著。但目前全世界的DHA產(chǎn)量供不應(yīng)求，價(jià)格昂貴。美國(guó)、日本等國(guó)家對(duì)DHA的研發(fā)開始較早，積累了大量的研發(fā)經(jīng)驗(yàn)，產(chǎn)量高，占據(jù)了大量的DHA銷售市場(chǎng)。DHA最初的來源主要是深海魚油提取物，其后又發(fā)展為在海藻類植物中提取。但是在深海魚油中和海藻類植物中提取成本比較高，產(chǎn)品不易獲得。在深海魚中提取，受魚類繁殖數(shù)量的影響；海藻類植物的生長(zhǎng)受自然條件的制約，DHA的獲取量十分有限，并且受其飼養(yǎng)場(chǎng)地的限制，不能夠順利擴(kuò)大其規(guī)模。目前，研究最多的是使用海洋真菌發(fā)酵生產(chǎn)DHA，并且現(xiàn)在可以規(guī)模生產(chǎn)。裂殖壺菌(Schizochytrium)是屬于真菌門(Eumycota)、卵菌綱(Oomycetes)水霉目(Saprolegniales)、破囊壺菌科(Thraustochytriaceae)的一類類藻的海洋真菌。目前已分離出處五種，分別是：S.aggregatum、S.minutum、S.octosporum、S.mangrovei和S.limacinum。裂殖壺菌是一類屬于破囊壺菌科的海洋真菌，與其他的破囊壺菌比較，其具有更好的生長(zhǎng)優(yōu)勢(shì)和更高的DHA含量。因此，研究出產(chǎn)生高含量的DHA方法仍是目前亟需解決的難題。專利文獻(xiàn)CN103880648A公開了一種從裂壺藻中分離純化DHA的生產(chǎn)工藝，包括裂壺藻預(yù)處理，尿素包合法分離飽和脂肪酸和低不飽和脂肪酸，銀離子絡(luò)合法分離DHA的步驟。制備出的DHA純度高達(dá)90％以上，成本較低，供應(yīng)穩(wěn)定，適合大批量工業(yè)化生產(chǎn)。但所述的裂壺藻生物量產(chǎn)量低，無法滿足現(xiàn)代社會(huì)測(cè)需求。專利文獻(xiàn)CN102888348B公開了一種裂殖壺菌及利用其高密度發(fā)酵生產(chǎn)DHA油脂的方法，該裂殖壺菌(Aurantiochytriumsp.SD116，已保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管委員會(huì)普通微生物中心，其保藏編號(hào)為CGMCCNo：6208)，及利用其高密度發(fā)酵生產(chǎn)DHA油脂的方法，其發(fā)酵培養(yǎng)基由葡萄糖、酵母提取物、蛋白胨、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、檸檬酸鈉、海水晶、維生素B1、維生素B6、維生素B12和生物素組成。制備得到的DHA占總脂肪酸含量高于35％，且含有β-胡蘿卜素，蝦青素和角鯊烯等生物活性物質(zhì)。但是，該裂殖壺菌發(fā)酵產(chǎn)生的DHA含量仍然不能滿足現(xiàn)代人的要求。鑒于目前利用裂殖壺菌產(chǎn)生的DHA的含量較低，菌種發(fā)酵能力不穩(wěn)定，無法保證DHA的產(chǎn)量問題。因此，提高裂殖壺菌的DHA發(fā)酵能力是當(dāng)前仍需解決的問題。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：為了克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種裂殖弧菌株及利用其生產(chǎn)DHA的方法，以解決上述缺陷。本發(fā)明提供的裂殖弧菌株，于2016年11月21日保藏在廣東省微生物菌種保藏中心，分類學(xué)名稱為：裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)，保藏號(hào)為：GDMCCNo：60114，保藏地址：廣州市先烈中路100號(hào)大院59號(hào)樓5樓，廣東省微生物研究所。另外，本發(fā)明還提供了裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)生產(chǎn)DHA的方法，其是以GDMCCNo：60114菌株為出發(fā)菌株，在液體培養(yǎng)基中高密度發(fā)酵獲得菌體細(xì)胞，收集細(xì)胞經(jīng)破碎、萃取、獲得DHA。進(jìn)一步地，一種利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法，包括以下步驟：S1將權(quán)利要求1所述的裂殖弧菌株接入裝有5mL種子培養(yǎng)基的20mL培養(yǎng)管中，在20～30℃的搖床中，以150～200rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)24～48h，得一級(jí)種子；S2將步驟S1得到的一級(jí)種子按接種量10％(v/v)接入裝有50mL種子培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，在20～30℃的搖床中，以150～200rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)24～48h，得二級(jí)種子；S3將步驟S2得到的二級(jí)種子按接種量10％(v/v)接入裝有250mL種子培養(yǎng)基的1000mL搖瓶中，在20～30℃的搖床中，以150～200rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)24～48h，得三級(jí)種子；S4將步驟S3得到的三級(jí)種子按接種量為10％(v/v)接入裝有種子培養(yǎng)基的一級(jí)種子罐中，通氣量為0.2～2vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為50～150rpm，罐溫為20～30℃，培養(yǎng)24～48h，得一級(jí)種子液；S5將步驟S4得到的一級(jí)種子液按接種量為10％(v/v)接入裝有種子培養(yǎng)基的二級(jí)種子罐中，通氣量為0.2～2vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為100～200rpm，罐溫為20～30℃，培養(yǎng)24～48h，得二級(jí)種子液；S6將步驟S5得到的二級(jí)種子液按接種量為10％(v/v)接入裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，通氣量為0.2～2vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為200～250rpm，罐溫為20～30℃，發(fā)酵5-8天，離心過濾收集菌體，干燥，破碎，萃取，即得。進(jìn)一步地，所述種子培養(yǎng)基由以下組分組成：葡萄糖10-30g/L、蛋白胨5-15g/L、玉米漿3-6g/L和海水晶15-25g/L。進(jìn)一步地，所述種子培養(yǎng)基由以下組分組成：葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、玉米漿5g/L和海水晶20g/L。進(jìn)一步地，所述發(fā)酵培養(yǎng)基由以下組分組成：蜂蜜70～120g/L、甘油50～90g/L、硫酸銨0.35～0.65g/L、酵母提取物5～15g/L、蛋白胨5～15g/L、海水晶10～20g/L、磷酸二氫鉀2.5～4.5g/L、硫酸鎂2～4g/L、維生素B10.003～0.007g/L和維生素B120.003～0.007g/L。進(jìn)一步地，所述發(fā)酵培養(yǎng)基由以下組分組成：蜂蜜100g/L、甘油70g/L、硫酸銨0.55g/L、酵母提取物10g/L、蛋白胨10g/L、海水晶15g/L、磷酸二氫鉀3.5g/L、硫酸鎂3g/L、維生素B10.005g/L和維生素B120.005g/L。進(jìn)一步地，所述步驟S6中的干燥為在-40℃下冷凍干燥。進(jìn)一步地，所述步驟S6中的萃取液為氯仿甲醇萃取溶液。進(jìn)一步地，所述步驟S6中的萃取液為氯仿與甲醇的體積為2:1的氯仿甲醇萃取溶液。經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，利用本發(fā)明提供的裂殖壺菌株(Schizochytriumsp.)生產(chǎn)DHA的方法得到的發(fā)酵產(chǎn)物的生物量大于20.4g/L，脂質(zhì)含量大于52.8％，DHA含量大于25.1％，與市售裂殖弧菌株相比，本發(fā)明提供的裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)的生物量平均提高了2.8倍以上，脂質(zhì)含量平均提高了2.7倍以上，DHA含量平均提高了2.9倍以上，說明本發(fā)明提供的裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)是一株生產(chǎn)DHA較為理想的裂殖壺菌種。進(jìn)一步地，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，本發(fā)明提供的利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法中的發(fā)酵培養(yǎng)基采用蜂蜜與甘油聯(lián)合使用作為碳源有利于DHA的積累，磷酸二氫鉀可以很好穩(wěn)定的pH值，硫酸銨則可以提高裂殖弧菌細(xì)胞壁的厚度，提高裂殖弧菌種的營(yíng)養(yǎng)吸收能力，防止DHA的流失。同時(shí)，裂殖弧菌種子培養(yǎng)階段，注意增加風(fēng)量，使裂殖弧菌能夠得到充分的氧氣，結(jié)合本發(fā)明提供的裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)的特性，調(diào)節(jié)好發(fā)酵培養(yǎng)基中蜂蜜、甘油、硫酸銨、酵母提取物、蛋白胨、海水晶、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、維生素B1和維生素B12的基本元素的比例，達(dá)到N源、P源和C元素協(xié)調(diào)，使裂殖壺菌充分繁殖，提高裂殖壺菌的發(fā)酵能力，促進(jìn)裂殖壺菌合成DHA。進(jìn)一步地，經(jīng)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，采用本發(fā)明提供的發(fā)酵培養(yǎng)基發(fā)酵得到的生物量大于20.4g/L，脂質(zhì)含量大于52.8％，DHA含量大于25.1％，而發(fā)酵培養(yǎng)基中缺少甘油或者是硫酸銨時(shí)發(fā)酵得到的生物量、脂質(zhì)含量和DHA含量較低，說明本發(fā)明提供的發(fā)酵培養(yǎng)基可以有效的提高裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)的發(fā)酵效率和發(fā)酵能力，可以有效的提高DHA的產(chǎn)量。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明提供的技術(shù)方案具有以下優(yōu)勢(shì)：(1)本發(fā)明提供的裂殖壺菌株具有DHA含量高，發(fā)酵效率高和發(fā)酵能力強(qiáng)的優(yōu)點(diǎn)；(2)本發(fā)明提供的利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法工藝簡(jiǎn)單，成本低，有利于該方法的推廣和應(yīng)用。本發(fā)明提供的裂殖弧菌株，于2016年11月21日保藏在廣東省微生物菌種保藏中心，分類學(xué)名稱為：裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)，保藏號(hào)為：GDMCCNo：60114，保藏地址：廣州市先烈中路100號(hào)大院59號(hào)樓5樓，廣東省微生物研究所。具體實(shí)施方式以下通過具體實(shí)施方式的描述對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但這并非是對(duì)本發(fā)明的限制，本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)本發(fā)明的基本思想，可以做出各種修改或改進(jìn)，但是只要不脫離本發(fā)明的基本思想，均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。本發(fā)明采用的成分均為市售常規(guī)成分，例如：蛋白胨購(gòu)于上海麥克林生化科技有限公司，型號(hào)：HKM050170B，CAS號(hào)：73049-73-7；5-15g/L、玉米漿購(gòu)于上海麥克林生化科技有限公司，型號(hào)：MACKLINC805620，CAS號(hào)：6607-94-1；海水晶購(gòu)于江西鹽通科技有限公司，速溶海水晶B型；蜂蜜為百花牌-中華老字號(hào)，百花蜂蜜；酵母提取物購(gòu)于Oxid公司，貨號(hào)為L(zhǎng)P0021。附圖說明圖1為市售的裂殖壺菌(Schizochytrium)的DHA檢測(cè)的峰圖；圖2為本發(fā)明提供的裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)的DHA檢測(cè)的峰圖。實(shí)施例1、一種利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法S1將裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)接入裝有5mL種子培養(yǎng)基的20mL培養(yǎng)管中，在22℃的搖床中，以150rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)24h，得一級(jí)種子；所述種子培養(yǎng)基由葡萄糖10g/L、蛋白胨6g/L、玉米漿3g/L和海水晶18g/L組成；S2將步驟S1得到的一級(jí)種子按接種量10％(v/v)接入裝有50mL種子培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，在22℃的搖床中，以150rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)24h，得二級(jí)種子；S3將步驟S2得到的二級(jí)種子按接種量為10％(v/v)接入裝有250mL種子培養(yǎng)基的1000mL搖瓶中，在22℃的搖床中，以150rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)24h，得三級(jí)種子；S4將步驟S3得到的三級(jí)種子按接種量為10％(v/v)接入裝有種子培養(yǎng)基的一級(jí)種子罐中，通氣量為0.8vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為60rpm，罐溫為22℃，培養(yǎng)24h，得一級(jí)種子液；S5將步驟S4得到的一級(jí)種子液按接種量為10％(v/v)接入裝有種子培養(yǎng)基的二級(jí)種子罐，通氣量為0.8vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為100rpm，罐溫為22℃，培養(yǎng)24h，得二級(jí)種子液；S6將步驟S5得到的二級(jí)種子液按接種量為10％(v/v)接入裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，通氣量為0.8vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，罐溫為22℃，發(fā)酵5天，離心過濾收集菌體，在-40℃下冷凍干燥，破碎，使用氯仿甲醇萃取溶液，所述氯仿甲醇萃取溶液中氯仿與甲醇的體積為2:1，所述發(fā)酵培養(yǎng)基由蜂蜜70g/L、甘油50g/L、硫酸銨0.35g/L、酵母提取物5g/L、蛋白胨5g/L、海水晶10g/L、磷酸二氫鉀2.5g/L、硫酸鎂2g/L、維生素B10.003g/L和維生素B120.003g/L組成，即得。實(shí)施例2、一種利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法S1將裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)接入裝有5mL種子培養(yǎng)基的20mL培養(yǎng)管中，在25℃的搖床中，以180rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)40h，得一級(jí)種子；所述種子培養(yǎng)基由葡萄糖20g/L、蛋白胨10g/L、玉米漿5g/L、海水晶20g/L組成；S2將步驟S1得到的一級(jí)種子按接種量10％(v/v)接入裝有50mL種子培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，在25℃的搖床中，以180rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)40h，得二級(jí)種子；S3將步驟S2得到的二級(jí)種子按接種量為10％(v/v)接入裝有250mL種子培養(yǎng)基的1000mL搖瓶中，在25℃的搖床中，以180rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)40h，得三級(jí)種子；S4將步驟S3得到的三級(jí)種子按接種量為10％(v/v)接入裝有種子培養(yǎng)基的一級(jí)種子罐中，通氣量為1.2vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為120rpm，罐溫為25℃，培養(yǎng)40h，得一級(jí)種子液；S5將步驟S4得到的一級(jí)種子液按接種量為10％(v/v)接入裝有種子培養(yǎng)基的二級(jí)種子罐中，通氣量為1.2vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為150rpm，罐溫為25℃，培養(yǎng)40h，得二級(jí)種子液；S6將步驟S5得到的二級(jí)種子液按接種量為10％(v/v)接入裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，通氣量為1.2vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為220rpm，罐溫為25℃，發(fā)酵6天，離心過濾收集菌體，在-40℃下冷凍干燥，破碎，使用氯仿甲醇萃取溶液，所述氯仿甲醇萃取溶液中氯仿與甲醇的體積為2:1，所述發(fā)酵培養(yǎng)基由蜂蜜100g/L、甘油70g/L、硫酸銨0.55g/L、酵母提取物10g/L、蛋白胨10g/L、海水晶15g/L、磷酸二氫鉀3.5g/L、硫酸鎂3g/L、維生素B10.005g/L和維生素B120.005g/L組成，即得。實(shí)施例3、一種利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法S1將裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)接入裝有5mL種子培養(yǎng)基的20mL培養(yǎng)管中，在28℃的搖床中，以200rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)48h，得一級(jí)種子；所述種子培養(yǎng)基由葡萄糖30g/L、蛋白胨15g/L、玉米漿6g/L和海水晶25g/L組成；S2將步驟S1得到的一級(jí)種子按接種量10％(v/v)接入裝有50mL種子培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，在28℃的搖床中，以200rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)48h，得二級(jí)種子；S3將步驟S2得到的二級(jí)種子按接種量為10％(v/v)接入裝有250mL種子培養(yǎng)基的1000mL搖瓶中，在28℃的搖床中，以200rpm的轉(zhuǎn)速，培養(yǎng)48h，得三級(jí)種子；S4將步驟S3得到的三級(jí)種子按接種量為10％(v/v)接入裝有種子培養(yǎng)基的一級(jí)種子罐中，通氣量為1.6vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為140rpm，罐溫為28℃，培養(yǎng)48h，得一級(jí)種子液；S5將步驟S4得到的一級(jí)種子液按接種量為10％(v/v)接入裝有種子培養(yǎng)基的二級(jí)種子罐中，通氣量為1.6vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm，罐溫為28℃，培養(yǎng)48h，得二級(jí)種子液；S6將步驟S5得到的二級(jí)種子液按接種量為10％(v/v)接入裝有發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中，通氣量為1.6vvm，攪拌轉(zhuǎn)速為250rpm，罐溫為28℃，發(fā)酵8天，離心過濾收集菌體，在-40℃下冷凍干燥，破碎，使用氯仿甲醇萃取溶液，所述氯仿甲醇萃取溶液中氯仿與甲醇的體積為2:1，所述發(fā)酵培養(yǎng)基由以下組分組成：蜂蜜120g/L、甘油90g/L、硫酸銨0.65g/L、酵母提取物15g/L、蛋白胨15g/L、海水晶20g/L、磷酸二氫鉀4.5g/L、硫酸鎂4g/L、維生素B10.007g/L和維生素B120.007g/L組成，即得。對(duì)比例1、一種利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法生產(chǎn)方法的不同在于：所述步驟S1中采用市售的裂殖壺菌株(購(gòu)于上海研生實(shí)業(yè)有限公司，英文名稱為Schizochytrium，貨號(hào)為YS-JZ0216)接入裝有50mL種子培養(yǎng)基的250mL搖瓶中，其余步驟與實(shí)施例2類似。對(duì)比例2、一種利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法生產(chǎn)方法的不同在于：所述步驟S6中所述發(fā)酵培養(yǎng)基由蜂蜜170g/L、硫酸銨0.55g/L、酵母提取物10g/L、蛋白胨10g/L、海水晶15g/L、磷酸二氫鉀3.5g/L、硫酸鎂3g/L、維生素B10.005g/L和維生素B120.005g/L組成，其余步驟與實(shí)施例2類似。對(duì)比例3、一種利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法生產(chǎn)方法的不同在于：所述步驟S6中所述發(fā)酵培養(yǎng)基由以下組分組成：蜂蜜100g/L、甘油70g/L、酵母提取物10g/L、蛋白胨10g/L、海水晶15g/L、磷酸二氫鉀3.5g/L、硫酸鎂3.55g/L、維生素B10.005g/L和維生素B120.005g/L組成，其余步驟如實(shí)施例2類似。試驗(yàn)例一、裂殖弧菌種的DHA含量測(cè)定試驗(yàn)1、試驗(yàn)對(duì)象：本發(fā)明提供的裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)，裂殖壺菌(Schizochytrium)購(gòu)于上海研生實(shí)業(yè)有限公司，貨號(hào)為YS-JZ0216。2、試驗(yàn)方法：采用氣相色譜儀對(duì)本發(fā)明提供的裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)和購(gòu)于上海研生實(shí)業(yè)有限公司，貨號(hào)為YS-JZ0216的裂殖壺菌(Schizochytrium)進(jìn)行DHA檢測(cè)的氣相色譜圖。3、試驗(yàn)結(jié)果：試驗(yàn)結(jié)果如圖1和圖2所示，圖1為購(gòu)于上海研生實(shí)業(yè)有限公司，貨號(hào)為YS-JZ0216的裂殖壺菌(Schizochytrium)的DHA檢測(cè)的峰圖，圖2為本發(fā)明提供的裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)的DHA檢測(cè)的峰圖，其中27.8分鐘的峰圖為DHA甲酯的峰圖，從圖1和圖2中可以看出，與市售的裂殖壺菌種相比，本發(fā)明提供的裂殖壺菌種的DHA的含量豐富，可以有效的提高DHA的產(chǎn)量。試驗(yàn)例二、裂殖弧菌的產(chǎn)量的檢測(cè)試驗(yàn)1、試驗(yàn)對(duì)象：實(shí)施例1、實(shí)施例2、對(duì)比例1、對(duì)比例2和對(duì)比例3利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法。2、試驗(yàn)方法：使用氣相色譜儀對(duì)采用實(shí)施例1、實(shí)施例2、對(duì)比例1、對(duì)比例2和對(duì)比例3利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法過程中裂殖弧菌種的生物量、脂質(zhì)含量和DHA含量進(jìn)行含量檢測(cè)。所述氣相色譜儀采用脂肪酸甲酯用配有HP624毛細(xì)管柱(30.0m×320um×1.8um)和FID檢測(cè)器的氣相色譜儀，以氮?dú)鉃檩d氣,設(shè)定起始柱溫為200℃，8℃/min升至250℃，保持45min。等進(jìn)樣口溫度和檢測(cè)器溫度均升至250℃后,采用不分流進(jìn)樣，進(jìn)樣量為1μL，以DHA甲酯標(biāo)準(zhǔn)品(標(biāo)準(zhǔn)品來源)為標(biāo)準(zhǔn)，通過與標(biāo)準(zhǔn)品的保留時(shí)間對(duì)照，對(duì)DHA進(jìn)行定性，通過比對(duì)出峰面積對(duì)DHA進(jìn)行定量，從而計(jì)算DHA的百分含量。3、試驗(yàn)結(jié)果：試驗(yàn)結(jié)果如表1所示。表1裂殖弧菌的產(chǎn)量的檢測(cè)試驗(yàn)組別生物量(g/L)脂質(zhì)含量(％)DHA含量(％)實(shí)施例120.452.825.1實(shí)施例222.555.327.4實(shí)施例320.953.225.6對(duì)比例17.519.78.8對(duì)比例216.444.319.4對(duì)比例317.546.121.5由表1可知，采用本發(fā)明實(shí)施例1-3提供的利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法得到的生物量大于20.4g/L，脂質(zhì)含量大于52.8％，DHA含量大于25.1％，其中采用實(shí)施例2提供的利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法得到的生物量為22.4g/L，脂質(zhì)含量為55.3％，DHA含量為27.4％，為最佳實(shí)施例。與市售裂殖弧菌株相比，本發(fā)明提供的裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)的生物量平均提高了2.8倍以上，脂質(zhì)含量平均提高了2.7倍以上，DHA含量平均提高了2.9倍以上，而采用對(duì)比例2-3提供的利用裂殖弧菌生產(chǎn)DHA的方法得到的的生物量、脂質(zhì)含量和DHA含量較低，說明本發(fā)明提供的裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)DHA含量高，同時(shí)本發(fā)明提供的發(fā)酵培養(yǎng)基可以有效的提高裂殖壺菌(Schizochytriumsp.)的發(fā)酵效率和發(fā)酵能力，可以有效的提高DHA的產(chǎn)量。當(dāng)前第1頁(yè)1 2 3