本發(fā)明屬于新藥物發(fā)現(xiàn)與創(chuàng)新藥物合成技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種氧氟沙星醛縮氨基硫脲類(lèi)衍生物，同時(shí)還涉及上述氧氟沙星醛縮氨基硫脲類(lèi)衍生物的制備方法，以及其在抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
新藥創(chuàng)新起源于先導(dǎo)物的發(fā)現(xiàn)，而基于優(yōu)勢(shì)藥效團(tuán)骨架的拼合構(gòu)建先導(dǎo)物分子是最經(jīng)濟(jì)和有效的策略。由醛或酮與氨基硫脲類(lèi)構(gòu)建的縮氨基硫脲類(lèi)衍生物因其與大分子或金屬離子易產(chǎn)生配合物或螯合作用而表現(xiàn)出廣泛的藥理活性備受關(guān)注。然而，構(gòu)建縮氨基硫脲分子的醛或酮多為常見(jiàn)的苯類(lèi)或雜環(huán)芳香類(lèi)的醛和酮，而對(duì)喹啉醛，尤其是氟喹啉酮醛類(lèi)形成的縮氨基硫脲類(lèi)目前尚未見(jiàn)報(bào)道。另一方面，喹啉優(yōu)勢(shì)藥效團(tuán)骨架不僅是重要天然產(chǎn)物生物堿，如奎寧和喜樹(shù)堿類(lèi)的重要結(jié)構(gòu)單元，也是抗菌氟喹諾酮類(lèi)藥物的藥效團(tuán)骨架。同時(shí)，氟喹諾酮類(lèi)藥物因有親水性的哌嗪基存在而增大其水溶性，提高生物利用度。尤其是氟喹諾酮類(lèi)藥物的作用靶點(diǎn)—拓?fù)洚悩?gòu)酶也是抗腫瘤藥物的重要作用靶點(diǎn)，可將其抗菌活性轉(zhuǎn)化為抗腫瘤活性。為此，將氟喹諾酮C-3羧基轉(zhuǎn)化為甲?；纬上鄳?yīng)的氟喹諾酮C-3醛，然后與氨基硫脲或取代的氨基硫脲縮合，進(jìn)而實(shí)現(xiàn)喹啉與縮氨基硫脲藥效團(tuán)的拼合，以期達(dá)到不同藥效團(tuán)間的活性疊加，從中發(fā)現(xiàn)具有抗腫瘤活性的氟喹諾酮候選化合物。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
為此，本發(fā)明的目的是提供一種氧氟沙星醛縮氨基硫脲類(lèi)衍生物，其具有抗腫瘤的作用和功效，同時(shí)還提供了上述氧氟沙星醛縮氨基硫脲類(lèi)衍生物的制備方法。
為了實(shí)現(xiàn)以上目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種氧氟沙星醛縮氨基硫脲類(lèi)衍生物，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如通式(I)所示：
其中，取代基R為氫原子、1～5個(gè)碳原子的烴基或環(huán)丙基。
上述的氧氟沙星醛縮氨基硫脲類(lèi)衍生物，具體為以下的結(jié)構(gòu)的化合物：
本發(fā)明氧氟沙星醛縮氨基硫脲類(lèi)衍生物的制備方法，以式(II)所示的氧氟沙星(Ofloxacin)為原料制備而成，具體制備步驟如下：
1)將式(II)所示的氧氟沙星與水合肼進(jìn)行肼解反應(yīng)制得式(III)所示的氧氟沙星酰肼；
2)將式(III)所示氧氟沙星酰肼與鐵氰化鉀在氯仿的氨水堿性介質(zhì)中發(fā)生氧化反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，經(jīng)后處理可得式(IV)所示的中間體氧氟沙星醛粗品，直接用于下步反應(yīng)；
3)水合肼與二硫化碳在堿性介質(zhì)中縮合后與硫酸二甲酯反應(yīng)制得式(V)所示的肼基二硫代甲酸甲酯中間體；
4)式(IV)所示的氧氟沙星醛粗品與式(V)所示的肼基二硫代甲酸甲酯發(fā)生縮合反應(yīng)，待反應(yīng)完全經(jīng)后處理可分別制得(VI)所示的氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯；
5)將式(VI)所示的氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯與胺類(lèi)化合物在正丁醇中進(jìn)行親核取代反應(yīng)，或式(IV)所示的氧氟沙星醛粗品與氨基硫脲進(jìn)行縮合反應(yīng)，待反應(yīng)完全后經(jīng)處理制得如式(I)所示的目標(biāo)化合物，其制備的詳細(xì)操作步驟見(jiàn)實(shí)施例部分；
取代基R為H原子、1～5個(gè)碳原子的鏈烴基或環(huán)丙基。
具體的，步驟2)中，式(III)所示的氧氟沙星酰肼與鐵氰化鉀的摩爾比為1:3.0～5.0。
具體的，步驟4)中，(VI)所示的氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯與胺類(lèi)化合物的摩爾比為1:3.0～10.0。所述胺類(lèi)化合物優(yōu)選為脂肪伯胺或環(huán)丙胺。作為進(jìn)一步的改進(jìn)，(VI)所示的氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯與胺類(lèi)化合物在反應(yīng)過(guò)程中，所用溶劑可選擇甲醇、乙醇、正丙醇、異丙醇、異丁醇、正丁醇中的至少一種，其中優(yōu)選正丁醇。
上述的氧氟沙星醛縮氨基硫脲類(lèi)衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。
所述抗腫瘤藥物為治療肝癌、胰腺癌或白血病藥物。
和現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明氧氟沙星醛縮氨基硫脲類(lèi)衍生物基于藥效團(tuán)的拼合理性藥物分子設(shè)計(jì)原理，將三環(huán)氟喹諾酮、亞胺席夫堿及硫脲等三種不同藥效團(tuán)間的有效組合，進(jìn)而設(shè)計(jì)了氧氟沙星醛縮氨基硫脲類(lèi)衍生物，實(shí)現(xiàn)了不同結(jié)構(gòu)藥效團(tuán)的互補(bǔ)和活性的疊加，從而達(dá)到了增效降毒的效果，可作為全新結(jié)構(gòu)的抗腫瘤藥物開(kāi)發(fā)。
具體實(shí)施方式
下面通過(guò)具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明。
下述實(shí)施例中，式(IV)所示化合物經(jīng)下述步驟獲得：
1)將式(II)所示的氧氟沙星與水合肼進(jìn)行肼解反應(yīng)制得式(III)所示的氧氟沙星酰肼；具體操作步驟可參考文獻(xiàn)(胡國(guó)強(qiáng)等，喹諾酮C-3酰腙的合成與抗菌活性，中國(guó)藥學(xué)雜志，2010,45(11):867-870.)的方法制備；
2)將式(III)所示氧氟沙星酰肼與鐵氰化鉀在氯仿的氨水堿性介質(zhì)中發(fā)生氧化反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，經(jīng)后處理可得式(IV)所示的中間體氧氟沙星醛粗品，直接用于下步反應(yīng)。具體操作步驟為：氧氟沙星酰肼(10.0g，27.0mmol)懸浮于氯仿(200毫升)與濃氨水(22-25％，20毫升)的混合液中，常溫慢慢滴加鐵氰化鉀(38.0g，115.0mmol)的水(120毫升)溶液，常溫?cái)嚢璺磻?yīng)8～12小時(shí)至原料消失(TLC檢測(cè)，V氯仿：V甲醇＝5:1)。分出有機(jī)層，并用飽和食鹽水洗滌，無(wú)水硫酸鈉干燥，減壓蒸除溶劑，得式(IV)所示的氧氟沙星醛粗品，備用。
下述實(shí)施例中，式(VI)所示化合物經(jīng)下述步驟獲得：
1)水合肼與二硫化碳在堿性介質(zhì)中縮合后與硫酸二甲酯反應(yīng)制得式(V)所示的肼基二硫代甲酸甲酯中間體；具體操作步驟可參考文獻(xiàn)(胡惟孝等，縮氨基硫脲化合物的合成及其抗癌活性的研究，高等學(xué)?；瘜W(xué)學(xué)報(bào)，2001，22(12)：2014-2017)的制備方法；
2)式(IV)所示的氧氟沙星醛粗品與式(V)所示的肼基二硫代甲酸甲酯發(fā)生縮合反應(yīng)，待反應(yīng)完全經(jīng)后處理可制得(VI)所示的氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯；具體為：將式(IV)所示的氧氟沙星醛粗品(10.0g)溶于無(wú)水乙醇(150毫升)中，加入式(V)所示的肼基二硫代甲酸甲酯(4.0g，33.0mmol)，回流反應(yīng)10小時(shí)，放置冷卻至室溫。過(guò)濾并收集產(chǎn)生的固體，干燥。粗品用甲醇-氯仿(V/V＝3：1)重結(jié)晶，得淡黃色結(jié)晶式(VI)所示氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯11.5g，mp 216～218℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)：11.37(s,1H,CH＝N),8.86(1H，s，2-H)，8.39(s,1H,NH),7.42(1H，d，5-H)，4.78～4.34(m,3H，OCH2CHN)，3.24(t,4H，piperazine-H)，2.52(t,4H，piperazine-H)，2.23(s,3H，s，N-CH3)，1.86(s,3H,SCH3)，1.42(d,3H,CH3)；MS(m/z)：Calcd.for C20H24FN5O2S2：449.57[M]+；Found：450[M+H]+。
實(shí)施例1
6-氟-7-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1,8-(2,1-氧丙基)-喹啉-4(1H)-酮-3-醛縮氨基硫脲(I-1)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：
即式I中的R為H原子。
該化合物的制備方法為：取式(IV)所示氧氟沙星醛粗品(1.0g)溶于無(wú)水乙醇(20毫升)，加入氨基硫脲(0.5g,5.5mmol)，回流反應(yīng)12小時(shí)，趁熱過(guò)濾，固體依次用乙醇洗滌2次，蒸餾水洗滌2次，干燥，用DMF-乙醇(V:V＝5:3)混合溶劑重結(jié)晶，制得淡黃色結(jié)晶物式(I-1)產(chǎn)品0.54g，m.p.238～240℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ:11.45(s,1H,CH＝N),8.75(s,1H，2-H)，8.41(s,1H,NH),8.36(s,1H,NH2),8.31(s,1H,NH2),7.45(d,1H，5-H)，4.91～4.36(m,3H，OCH2CHN)，3.24(t,4H，piperazine-H)，2.54(t,4H，piperazine-H)，2.26(s,3H，N-CH3)，1.43(d,3H,CH3)；MS(m/z)：Calcd.for C19H23FN6O2S：418.50[M]+；Found：419[M+H]+。
實(shí)施例2
6-氟-7-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1,8-(2,1-氧丙基)-喹啉-4(1H)-酮-3-醛縮4-甲氨基硫脲(I-2)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：
即式I中的R為甲基。
該化合物的制備方法為：取式(VI)所示的氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯(1.0g，2.23mmol)溶于無(wú)水正丁醇(20毫升)中，加入甲胺(0.68g,22.0mmol)后混合反應(yīng)物回流反應(yīng)12小時(shí)，趁熱過(guò)濾，固體依次用乙醇洗滌2次，蒸餾水洗滌2次，干燥，用DMF-乙醇(V:V＝1:5) 混合溶劑重結(jié)晶，制得黃色結(jié)晶物式(I-2)產(chǎn)品0.56g，m.p.227～229℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ:11.44(s,1H,CH＝N),8.73(s,1H，2-H)，8.39(s,1H,NH),8.32(s,1H,NH),7.42(d,1H，5-H)，4.55～4.32(m,3H，OCH2CHN)，3.24(t,4H，piperazine-H)，3.06(d,3H,NH-CH3),2.50(t,4H，piperazine-H)，2.23(s,3H，N-CH3)，1.46(d,3H,CH3)；MS(m/z)：Calcd.for C20H25FN6O2S：432.52[M]+；Found：433[M+H]+。
實(shí)施例3
6-氟-7-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1,8-(2,1-氧丙基)-喹啉-4(1H)-酮-3-醛縮4-乙氨基硫脲(I-3)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：
即式I中的R為乙基。
該化合物的制備方法為：取式(VI)所示的氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯(1.0g，2.23mmol)溶于無(wú)水正丁醇(20毫升)中，加入乙胺(0.99g,22.0mmol)后混合反應(yīng)物回流反應(yīng)12小時(shí)，趁熱過(guò)濾，固體依次用乙醇洗滌2次，蒸餾水洗滌2次，干燥，用DMF-乙醇(V:V＝1:5)混合溶劑重結(jié)晶，制得黃色結(jié)晶物式(I-3)產(chǎn)品0.60g，m.p.221～223℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ:11.40(s,1H,CH＝N),8.72(s,1H，2-H)，8.42(d,1H,NH),8.33(s,1H,NH),7.42(d,1H，5-H)，4.56～4.36(m,3H，OCH2CHN)，3.63(m,2H,CH2),3.24(t,4H，piperazine-H)，2.43(t,4H，piperazine-H)，2.23(s,3H，N-CH3)，1.46(d,3H,CH3),1.70(m,3H,CH3)；MS(m/z)：Calcd.for C21H27FN6O2S：446.55[M]+；Found：447[M+H]+。
實(shí)施例4
6-氟-7-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1,8-(2，1-氧丙基)-喹啉-4(1H)-酮-3-醛縮4-異丙氨基硫脲(I-4)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：
即式I中的R為異丙基。
該化合物的制備方法為：取式(VI)所示的氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯(1.0g，2.23mmol)溶于無(wú)水正丁醇(20毫升)中，加入異丙胺(0.83g,14.0mmol)后混合反應(yīng)物回流反應(yīng)10小時(shí)，趁熱過(guò)濾，固體依次用乙醇洗滌2次，蒸餾水洗滌2次，干燥，用DMF-乙醇(V:V＝1:5)混合溶劑重結(jié)晶，制得黃色結(jié)晶物式(I-4)產(chǎn)品0.66g，m.p.235～237℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：11.37(s,1H,CH＝N),8.62(s,1H，2-H)，8.30(s,1H,NH),7.80(d,1H,NH),7.42(d,1H，5-H)，4.64～4.32(m,3H，OCH2CHN)，3.32(m,2H,CH),3.25(t,4H，piperazine-H)，2.43 (t,4H，piperazine-H)，2.23(s,3H，N-CH3)，1.46(d,3H,CH3),1.24(m,6H,2×CH3)；MS(m/z)：Calcd.for C22H29FN6O2S：460.58[M]+；Found：461[M+H]+。
實(shí)施例5
6-氟-7-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1,8-(2,1-氧丙基)-喹啉-4(1H)-酮-3-醛縮4-環(huán)丙氨基硫脲(I-5)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：
即式I中的R為環(huán)丙基。
該化合物的制備方法為：取式(VI)所示的氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯(1.0g，2.23mmol)溶于無(wú)水正丁醇(20毫升)中，加入環(huán)丙胺(0.80g,14.0mmol)后混合反應(yīng)物回流反應(yīng)10小時(shí)，趁熱過(guò)濾，固體依次用乙醇洗滌2次，蒸餾水洗滌2次，干燥，用DMF-乙醇(V:V＝1:5)混合溶劑重結(jié)晶，制得黃色結(jié)晶物式(I-5)產(chǎn)品0.38g，m.p.229～231℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：11.48(s,1H,CH＝N),8.70(s,1H，2-H)，8.42～8.33(m,2H,2×NH),7.41(d,1H，5-H)，4.64～4.34(m,4H，OCH2CHN and CH)，3.24(t,4H，piperazine-H)，2.43(t,4H，piperazine-H)，2.23(s,3H，N-CH3)，1.45(d,3H,CH3),0.72(m,46H,CH2CH2)；MS(m/z)：Calcd.for C22H27FN6O2S：458.56[M]+；Found：459[M+H]+。
實(shí)施例6
6-氟-7-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1,8-(2,1-氧丙基)-喹啉-4(1H)-酮-3-醛縮4-叔丁氨基硫脲(I-6)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：
即式I中的R為叔丁基。
該化合物的制備方法為：取式(VI)所示的氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯(1.0g，2.23mmol)溶于無(wú)水正丁醇(20毫升)中，加入叔丁胺(0.88g,12.0mmol)后混合反應(yīng)物回流反應(yīng)10小時(shí)，趁熱過(guò)濾，固體依次用乙醇洗滌2次，蒸餾水洗滌2次，干燥，用DMF-乙醇(V:V＝1:5)混合溶劑重結(jié)晶，制得黃色結(jié)晶物式(I-6)產(chǎn)品0.70g，m.p.221～223℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：11.29(s,1H,CH＝N),8.53(s,1H,2-H),8.34(s,1H,NH),7.58(s,1H,NH),7.42(d,1H，5-H)，4.68～4.32(m,3H，OCH2CHN)，3.24(t,4H，piperazine-H)，2.44(t,4H，piperazine-H)，2.25(s,3H，N-CH3)，1.55～1.42(m,12H,4×CH3)；MS(m/z)：Calcd.for C23H31FN6O2S：474.60[M]+；Found：475[M+H]+。
實(shí)施例7
6-氟-7-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1,8-(2，1-氧丙基)-喹啉-4(1H)-酮-3-醛縮4-正丁基氨基硫脲(I-7)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：
即式I中的R為正丁基。
該化合物的制備方法為：取式(VI)所示的氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯(1.0g，2.23mmol)溶于無(wú)水正丁醇(20毫升)中，加入正丁胺(0.88g,12.0mmol)后混合反應(yīng)物回流反應(yīng)10小時(shí)，趁熱過(guò)濾，固體依次用乙醇洗滌2次，蒸餾水洗滌2次，干燥，用DMF-乙醇(V:V＝1:5)混合溶劑重結(jié)晶，制得黃色結(jié)晶物式(I-7)產(chǎn)品0.68g，m.p.231～233℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：11.33(s,1H,CH＝N),8.62(s,1H，2-H)，8.34～8.13(m,2H,2×NH),7.44(d,1H,5-H),4.67～4.32(m,3H，OCH2CHN)，3.53～3.25(m,6H，CH2and piperazine-H)，2.26(t,4H，piperazine-H)，2.23(3H，s，N-CH3)，1.44(d,3H,CH3),1.25～0.66(m,7H,CH2CH2CH3)；MS(m/z)：Calcd.for C23H31FN6O2S：474.60[M]+；Found：475[M+H]+。
實(shí)施例8
6-氟-7-(4-甲基-哌嗪-1-基)-1,8-(2，1-氧丙基)-喹啉-4(1H)-酮-3-醛縮4-正戊基氨基硫脲(I-8)，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式為：
即式I中的R為正戊基。
該化合物的制備方法為：取式(VI)所示的氧氟沙星醛縮肼基二硫代甲酸甲酯(1.0g，2.23mmol)溶于無(wú)水正丁醇(20毫升)中，加入正戊胺(0.87g,10.0mmol)后混合反應(yīng)物回流反應(yīng)8小時(shí)，趁熱過(guò)濾，固體依次用乙醇洗滌2次，蒸餾水洗滌2次，干燥，用DMF-乙醇(V:V＝1:5)混合溶劑重結(jié)晶，制得黃色結(jié)晶物式(I-7)產(chǎn)品0.65g，m.p.224～226℃。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ：11.32(s,1H,CH＝N),8.62(s,1H，2-H)，8.34～8.12(m,2H,2×NH),7.44(d,1H,5-H),4.67～4.33(m,3H，OCH2CHN)，3.44～3.25(m,5H，CH2and piperazine-H)，2.24(t,4H，piperazine-H)，2.23(3H，s，N-CH3)，1.45(d,3H,CH3),1.23～0.65(m,9H,CH2CH2CH2CH3)；MS(m/z)：Calcd.for C24H33FN6O2S：488.63[M]+；Found：489[M+H]+。
試驗(yàn)例
實(shí)施例1-8提供的氧氟沙星醛縮氨基硫脲類(lèi)衍生物的體外抗腫瘤活性測(cè)定
1、供試樣品
以實(shí)施例1-8提供的氧氟沙星醛縮氨基硫脲類(lèi)衍生物，及經(jīng)典抗腫瘤TOPO抑制劑10-羥基喜樹(shù)堿(HC，羥喜樹(shù)堿)和氧氟沙星(OF)為供試樣品，共10種，其中HC和OF為對(duì)照組，實(shí)施例1-8樣品為實(shí)驗(yàn)組；
實(shí)驗(yàn)癌細(xì)胞株分別為人肝癌Hep-3B細(xì)胞、人胰腺癌Panc-1細(xì)胞和人白血病HL60細(xì)胞株均購(gòu)買(mǎi)自中國(guó)科學(xué)院上海細(xì)胞庫(kù)。正常細(xì)胞采用VERO非洲綠猴腎細(xì)胞，購(gòu)買(mǎi)于上海通派生物科技有限公司。
2、測(cè)定方法
測(cè)定方法的具體步驟為：
(1)首先將上述10種供試樣品分別用二甲基亞砜(DMSO)溶解，配制成1.0×10-2mol·L-1濃度的儲(chǔ)備液，之后用質(zhì)量百分比濃度為10％的小牛血清的RPMI-1640培養(yǎng)液將儲(chǔ)備液稀釋成具有5個(gè)濃度梯度(0.1、1.0、5.0、10.0、50.0μmol·L-1)的工作液；
(2)取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的人肝癌Hep-3B細(xì)胞、人胰腺癌Panc-1細(xì)胞和人白血病HL60細(xì)胞及VERO細(xì)胞株，以每孔6000個(gè)細(xì)胞接種于96孔板，隨后分別加入上述10種樣品的具有5個(gè)濃度梯度的工作液。培養(yǎng)48小時(shí)后每孔加入5g·L–1MTT(噻唑藍(lán))溶液10μL，繼續(xù)培養(yǎng)4小時(shí)后加入100μL質(zhì)量百分比濃度為10％的十二烷基硫酸鈉(SDS)溶液再培養(yǎng)24小時(shí)，然后用酶標(biāo)儀在570nm波長(zhǎng)處測(cè)定各自的吸光度(OD)值；
(3)按下述所示公式計(jì)算不同濃度的供試樣品對(duì)癌細(xì)胞的抑制率，
癌細(xì)胞抑制率＝[(1－實(shí)驗(yàn)組OD值)/對(duì)照組OD值]×100％，
然后以供試樣品的各濃度的對(duì)數(shù)值對(duì)各濃度對(duì)應(yīng)的癌細(xì)胞抑制率作線(xiàn)性回歸，得到劑量-效應(yīng)方程，從所得劑量-效應(yīng)方程計(jì)算出各供試樣品對(duì)實(shí)驗(yàn)癌細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度(IC50)；每個(gè)數(shù)據(jù)平行測(cè)定三次，求其平均值，結(jié)果如表1所示。
表1各供試樣品的抗腫瘤活性(IC50)
從表1的初步體外抗腫瘤活性篩選結(jié)果可以看出，實(shí)施例1-8提供的化合物對(duì)三種實(shí)驗(yàn)癌細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制活性顯著強(qiáng)于母體化合物氧氟沙星(OF)的活性，尤其是取代基較小或環(huán)丙基取代的化合物對(duì)人胰腺癌Panc-1細(xì)胞的抑制活性與對(duì)照羥喜樹(shù)堿的活性相當(dāng)。更有意義的是，實(shí)施例1-8提供的化合物對(duì)正常VERO細(xì)胞顯示出較低的毒性，表明對(duì)腫瘤細(xì)胞具有較強(qiáng)的選擇性，提示化合物具有成藥性的發(fā)展?jié)摿?。因此，按照藥物開(kāi)發(fā)的一般途徑是先進(jìn)行常規(guī)的抗腫瘤體外篩選，然后進(jìn)行針對(duì)性的研究，所以本發(fā)明的化合物具有強(qiáng)的抗腫瘤活性和較低的毒性，可通過(guò)與人體可接受的酸成鹽或與藥用載體混合制備抗腫瘤藥物。