本發(fā)明涉及一種治療和預(yù)防中樞神經(jīng)系統(tǒng)的急慢性神經(jīng)變性疾病藥物索法地爾的雜質(zhì)及其制備方法，尤其涉及一種索法地爾雜質(zhì)B及其制備方法和應(yīng)用，屬于醫(yī)藥化工領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

索法地爾(Salfaprodil)，化學(xué)名為2-羥基-5-{[2,3,5,6-四氟-4-(三氟甲基)芐基]氨基}苯甲酸鉀，其結(jié)構(gòu)式如下所示：

索法地爾是一種中等強(qiáng)度的N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑，也是一種強(qiáng)力的抗氧化劑，具備雙重神經(jīng)保護(hù)作用，可同時(shí)阻斷NMDA受體介導(dǎo)的興奮毒性和機(jī)體的氧化應(yīng)激反應(yīng)，其保護(hù)神經(jīng)功能的效果可持續(xù)超過(guò)28天，提供了廣泛的神經(jīng)保護(hù)作用，擴(kuò)大了治療時(shí)間窗。

公告號(hào)為CN1309703C的中國(guó)專利申請(qǐng)公開(kāi)了索法地爾可用于治療腦血管和神經(jīng)系統(tǒng)疾病和癥狀中的常規(guī)或病理性神經(jīng)性疾病。具體而言，索法地爾用于預(yù)防和治療血栓栓塞、缺血性中風(fēng)、出血性中風(fēng)、腦血管痙攣、腦老化、外傷性腦損傷、外傷性脊髓損傷、心搏停止、動(dòng)脈低血壓、低血糖癥、缺氧癥和組織缺氧。索法地爾還可以有效地用于緩解神經(jīng)變性疾病，如亨廷頓癥、阿爾茨海默氏癥、老年癡呆、小腦退化癥、肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化、帕金森癥、唐氏綜合癥、癲癇、多發(fā)梗塞性癡呆和腦炎。

藥物中所含有的雜質(zhì)一般會(huì)降低藥物的療效，甚至在有些情況下會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重的毒副作用，隨著人們的健康意識(shí)越來(lái)越高，對(duì)藥物中的雜質(zhì)含量的要求越來(lái)越高。因此，確定索法地爾藥物中未知雜質(zhì)的準(zhǔn)確結(jié)構(gòu)具有重要的意義，一方面可以對(duì)雜質(zhì)含量進(jìn)行更有效的控制，另一方面可以確定雜質(zhì)的毒副作用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明提供了一種新的化合物索法地爾雜質(zhì)B及其制備方法和應(yīng)用，該化合物可以用于索法地爾質(zhì)量分析時(shí)的對(duì)照品。

一種索法地爾雜質(zhì)B，其結(jié)構(gòu)如式(Ⅰ)所示：

所述索法地爾雜質(zhì)B的分子式為C₁₅H₉F₆NO₃。

試驗(yàn)結(jié)果表明，式(I)所示的新化合物為現(xiàn)有的索法地爾生產(chǎn)過(guò)程中出現(xiàn)的一項(xiàng)雜質(zhì)(記為索法地爾雜質(zhì)B)，該雜質(zhì)含量大小關(guān)系到索法地爾的成品的質(zhì)量。本發(fā)明確定了該雜質(zhì)的準(zhǔn)確結(jié)構(gòu)，從而可以對(duì)索法地爾中該雜質(zhì)的含量進(jìn)行準(zhǔn)確的定量，以幫助生產(chǎn)過(guò)程中對(duì)該雜質(zhì)含量的控制。此外，如有必要還可以深入分析該雜質(zhì)的存在可能對(duì)活性產(chǎn)生何種影響，提高索法地爾的用藥安全性。

所述的索法地爾雜質(zhì)B具有¹HNMR(500MHz，DMSO)δ(ppm):7.72(t,1H,Ar),7.07(d,1H,Ar),6.93(dd,1H,Ar),6.76(d,1H,Ar),4.34(s,2H,CH₂),其中各峰±0.1ppm。

所述索法地爾雜質(zhì)B具有¹³CNMR(125MHz，DMSO)δ(ppm):171.95,153.26,140.36,122.52,120.36,117.64,112.49 111.17,109.45,36.03，其中各峰±0.1ppm。

本發(fā)明還提供了一種索法地爾雜質(zhì)B的制備方法，以索法地爾為起始原料，經(jīng)酸化，還原反應(yīng)得到該雜質(zhì)B，具體包括以下步驟：

步驟A：化合物(Ⅱ)在酸存在下經(jīng)酸化得到化合物(Ⅲ)，反應(yīng)式如下：

步驟B：化合物(Ⅲ)在堿和催化劑存在下經(jīng)還原得到化合物(Ⅰ)，反應(yīng)式如下：

步驟A操作過(guò)程如下：化合物(Ⅱ)溶于水中，加酸調(diào)節(jié)至pH 2～4，萃取，得到化合物(Ⅲ)溶液，直接進(jìn)入步驟B進(jìn)行反應(yīng)。

進(jìn)一步的，步驟A中，化合物(Ⅲ)溶液可進(jìn)行適當(dāng)濃縮。

步驟A中，所述的酸為鹽酸、硫酸、磷酸、氫溴酸、硝酸、草酸、甲酸中的至少一種，優(yōu)選為鹽酸。

步驟A中，萃取所用溶劑為C₁-C₆脂肪醇與C₁-C₆脂肪酸形成的酯(例如醋酸異丙脂或乙酸乙酯)、C₆-C₁₀醚類中的至少一種。

步驟A中，濃縮的化合物(Ⅲ)溶液可直接用于下一步反應(yīng)；也可將化合物(Ⅲ)溶液濃縮至干，純化后進(jìn)行下一步反應(yīng)。

步驟B操作過(guò)程如下：將化合物(Ⅲ)溶液、催化劑與堿混合，在氫氣存在下進(jìn)行還原反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后，反應(yīng)液經(jīng)過(guò)濾，濃縮濾液，濃縮液用水溶解，調(diào)pH至酸性(pH2～4)，萃取，濃縮得到粗產(chǎn)品，再經(jīng)過(guò)柱層析精制得到雜質(zhì)B。

步驟B中，以純化的化合物(Ⅲ)為原料時(shí)，需加入溶劑進(jìn)行反應(yīng)，所述溶劑為步驟A萃取選用的溶劑。

步驟B中，所述催化劑為：1％-30％的鈀碳，鈀黑，以及其它載體負(fù)載的鈀，醋酸鈀，氫氧化鈀，氯化鈀等鈀鹽，鎳，鉑等中的一種或其組合物；優(yōu)選5％-20％的鈀碳，雷尼鎳。

步驟B中，所述堿為無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿，所述無(wú)機(jī)堿為鋰、鈉、鉀相應(yīng)的氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽、氨水中的至少一種；

所述的有機(jī)堿為C₁-C₆脂肪酸的鋰、鈉、鉀鹽，三乙胺，二乙胺，吡啶，2-甲基吡啶，4-二甲氨基吡啶，N-甲基嗎啉，四甲基乙二胺中的至少一種。

步驟B中，反應(yīng)溶劑為C₁-C₆脂肪醇以及其與C₁-C₆脂肪酸形成的酯、C₆-C₁₀脂肪烴、醚類中的一種或兩種及以上的混合物。

步驟B后處理中，萃取所用溶劑為C₁-C₆脂肪醇與C₁-C₆脂肪酸形成的酯，C₆-C₁₀醚類中的至少一種。

步驟B中，反應(yīng)溫度為10℃～200℃，反應(yīng)壓力為常壓～10Mpa。

步驟B中，打漿精制所用的溶劑為C₆-C₁₀脂肪烴、鹵代烴、芳香烴或取代芳香烴。

本發(fā)明所述索法地爾雜質(zhì)B的制備方法，反應(yīng)原料的用量并沒(méi)有嚴(yán)格的限定，一般按照化學(xué)反應(yīng)計(jì)量比進(jìn)行反應(yīng)，也可過(guò)量進(jìn)行反應(yīng)；各步的反應(yīng)溶劑和反應(yīng)試劑的用量并沒(méi)有嚴(yán)格的限定，可根據(jù)反應(yīng)原料的用量調(diào)整：反應(yīng)原料較多增加反應(yīng)溶劑和反應(yīng)試劑的用量，反應(yīng)原料較少減少反應(yīng)溶劑和反應(yīng)試劑的用量；各步驟的反應(yīng)溶劑可根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員的只是進(jìn)行選擇，如醇類、酮類、醚類等；各步驟的后處理方法可根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員的知識(shí)進(jìn)行選擇，如萃取，蒸餾等。

本發(fā)明還提供了一種所述的索法地爾雜質(zhì)B在索法地爾的質(zhì)量控制中的應(yīng)用，所述的索法地爾雜質(zhì)B作為對(duì)照品。采用該索法地爾雜質(zhì)B作為對(duì)照品，可以對(duì)索法地爾中的雜質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析，該定性和定量分析方法為HPLC法。

同現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果體現(xiàn)在：

本發(fā)明合成高純度的索法地爾雜質(zhì)B，可作為索法地爾成品檢測(cè)分析中的雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品，從而提升索法地爾成品檢測(cè)分析對(duì)雜質(zhì)B的準(zhǔn)確定位和定性，有利于加強(qiáng)對(duì)該雜質(zhì)的控制，進(jìn)而提高索法地爾成品質(zhì)量；同時(shí)，可以研究該雜質(zhì)對(duì)藥物活性和毒副作用的影響。

附圖說(shuō)明

圖1為索法地爾雜質(zhì)B的核磁共振氫譜譜圖；

圖2為索法地爾雜質(zhì)B的核磁共振碳譜譜圖；

圖3為按照CN1309703C的方法得到的索法地爾的HPLC譜圖；

圖4為實(shí)施例4索法地爾雜質(zhì)B的HPLC譜圖。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明

實(shí)施例1化合物(Ⅲ)的合成

將42.13g化合物(Ⅱ)溶于210mL水中，降溫至0～10℃，向其中加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH＝2～4，室溫?cái)嚢璋雮€(gè)小時(shí)。用乙酸乙酯萃取三次，合并有機(jī)相，并用飽和食鹽水洗滌一次，無(wú)水硫酸鈉干燥；過(guò)濾除去硫酸鈉，濾液減壓濃縮得到化合物(Ⅲ)38.1g，收率99％，HPLC純度100％。反應(yīng)式如下：

實(shí)施例2化合物(Ⅲ)的合成

將42.13g化合物(Ⅱ)溶于210mL水中，降溫至0～10℃，向其中加入鹽酸，調(diào)節(jié)pH＝2～4，室溫?cái)嚢璋雮€(gè)小時(shí)。用醋酸異丙脂萃取三次，合并有機(jī)相，并用飽和食鹽水洗滌一次，無(wú)水硫酸鈉干燥；過(guò)濾除去硫酸鈉，濾液減壓濃縮得到化合物(Ⅲ)37.2g，收率97％，HPLC純度100％。

實(shí)施例3化合物(Ⅰ)的合成

將38.1g實(shí)施例1制備的化合物(Ⅲ)溶于250mL甲醇中，向其中加入3.8g含量為5％的鈀碳，13.8g無(wú)水碳酸鉀；反應(yīng)釜先用氮?dú)庵脫Q三次，再用氫氣置換三次后，控制壓力1.0～2.0Mpa，溫度40～50℃反應(yīng)。反應(yīng)8h后，取樣進(jìn)行HPLC檢測(cè)，原料含量小于等于5％，停止反應(yīng)。反應(yīng)液過(guò)濾除去鈀碳，濾液減壓濃縮除去甲醇。向濃縮液中加入100mL水，并用鹽酸調(diào)節(jié)pH2～4。用乙酸乙酯萃取三次，合并有機(jī)相，并用飽和食鹽水洗滌一次，無(wú)水硫酸鈉干燥；過(guò)濾除去硫酸鈉，濾液減壓濃縮得到粗品化合物(Ⅰ)23.4g，粗品收率64％。

化合物(Ⅰ)粗品23.4g，經(jīng)硅膠柱層析純化。再經(jīng)120mL正己烷室溫打漿5h，過(guò)濾，濾餅用冷的正己烷洗滌兩次得到化合物(Ⅰ)17.8g，即為索法地爾雜質(zhì)B，收率76％，HPLC純度99％。

¹HNMR(500MHz，DMSO)δ(ppm)：7.72(t,1H,Ar),7.07(d,1H,Ar),6.93(d,1H,Ar),6.76(d,1H,Ar),4.34(s,2H,CH₂)。

¹³CNMR(125MHz，DMSO)δ(ppm)：171.95,153.26,140.36,122.52,120.36,117.64,112.49，111.17,109.45,36.03。

反應(yīng)式如下：

實(shí)施例4化合物(Ⅰ)的合成

將38.1g實(shí)施例1制備的化合物(Ⅲ)溶于250mL乙醇中，向其中加入7.6g活化的雷尼鎳，15.1g三乙胺；反應(yīng)釜先用氮?dú)庵脫Q三次，再用氫氣置換三次后，控制壓力2.5Mpa，溫度60℃反應(yīng)。反應(yīng)20h后，取樣進(jìn)行HPLC檢測(cè)，原料含量小于等于5％，停止反應(yīng)。反應(yīng)液過(guò)濾除去催化劑，濾液減壓濃縮除去乙醇。向濃縮液中加入100mL水，并用鹽酸調(diào)節(jié)pH 2～4。用乙酸乙酯萃取三次，合并有機(jī)相，并用飽和食鹽水洗滌一次，無(wú)水硫酸鈉干燥；過(guò)濾除去硫酸鈉，濾液減壓濃縮得到粗品化合物(Ⅰ)19.0g，粗品收率52％。

化合物(Ⅰ)粗品19.0g，經(jīng)硅膠柱層析純化。再經(jīng)95mL正庚烷室溫打漿5h，過(guò)濾，濾餅用冷的正庚烷洗滌兩次得到化合物(Ⅰ)13.5g，收率71％，色譜純度99％。

實(shí)施例5化合物(Ⅰ)的合成

將38.1g實(shí)施例1制備的化合物(Ⅲ)溶于250mL甲醇中，向其中加入3.8g含量為10％的鈀碳，13.8g無(wú)水碳酸鉀；反應(yīng)釜先用氮?dú)庵脫Q三次，再用氫氣置換三次后，控制壓力1.0～2.0Mpa，溫度40～50℃反應(yīng)。反應(yīng)8h后，取樣進(jìn)行HPLC檢測(cè)，原料含量小于等于5％，停止反應(yīng)。反應(yīng)液過(guò)濾除去鈀碳，濾液減壓濃縮除去甲醇。向濃縮液中加入100mL水，并用鹽酸調(diào)節(jié)pH2～4。用乙酸乙酯萃取三次，合并有機(jī)相，并用飽和食鹽水洗滌一次，無(wú)水硫酸鈉干燥；過(guò)濾除去硫酸鈉，濾液減壓濃縮得到粗品化合物(Ⅰ)24.5g，粗品收率67％。

化合物(Ⅰ)粗品24.5g，經(jīng)硅膠柱層析純化。再經(jīng)120mL甲苯室溫打漿5h，過(guò)濾，濾餅用冷的甲苯洗滌兩次得到化合物(Ⅰ)18.4g，收率75％，HPLC純度99％。

實(shí)施例6索法地爾雜質(zhì)B的定性分析

參照專利CN1309703C的合成方法制備的索法地爾樣品，采用高效液相色譜法測(cè)得該索法地爾樣品的圖譜，見(jiàn)附圖3。

在完全相同的條件下，采用高效液相色譜法測(cè)得實(shí)施例3制備的索法地爾雜質(zhì)B(Ⅰ)的圖譜，見(jiàn)附圖4。

圖3和圖4對(duì)比可知，實(shí)施例3制備的索法地爾雜質(zhì)B的出峰位置為8.5min，與索法地爾樣品中的8.5min處雜質(zhì)出峰時(shí)間的誤差在2s以內(nèi)，兩者為同一種物質(zhì)。