本發(fā)明屬于多糖提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及桔梗多糖的提取方法。

背景技術(shù)：

桔梗，別名包袱花、鈴鐺花、僧帽花，是多年生草本植物，莖高30-130厘米，通常無毛，偶密被短毛，不分枝，極少上部分枝。葉全部輪生，部分輪生至全部互生，無柄或有極短的柄，葉片卵形，卵狀橢圓形至披針形，葉子卵形或卵狀披針形，花暗藍色或暗紫白色，可作觀賞花卉;其根可入藥，有止咳祛痰、宣肺、排膿等作用，中醫(yī)常用藥。

桔梗是我國傳統(tǒng)常用中藥材，功效具有宣肺、祛痰、利咽、排膿等功能，主治咳嗽痰多、咽喉腫痛等癥狀。藥食兩用，需求量較大。桔梗喜光、喜溫和濕潤涼爽氣候。苗期怕強光直曬，須遮蔭，成株喜陽光，怕積水?？垢珊担蛧篮?，怕風(fēng)害。適宜在土層深厚、排水良好、土質(zhì)疏松而含腐殖質(zhì)的砂質(zhì)壤土上栽培。

多糖是由糖苷鍵結(jié)合的糖鏈，至少要超過10個的單糖組成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式(C6H10O5)n表示。由相同的單糖組成的多糖稱為同多糖，如淀粉、纖維素和糖原;以不同的單糖組成的多糖稱為雜多糖，如阿拉伯膠是由戊糖和半乳糖等組成。多糖不是純粹的化學(xué)物質(zhì)，而是聚合程度不同的物質(zhì)的混合物。多糖類一般不溶于水，無甜味，不能形成結(jié)晶，無還原性和變旋現(xiàn)象。多糖也是糖苷，所以可以水解，在水解過程中，往往產(chǎn)生一系列的中間產(chǎn)物，最終完全水解得到單糖，但現(xiàn)有多糖提取純度受到限制。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

為了解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明提供了得率較高，純度高的桔梗多糖的提取方法。

本發(fā)明桔梗多糖的提取方法是通過下述的技術(shù)方案來實現(xiàn)的：

桔梗多糖的提取方法，包括下述的步驟：

選擇曬干的桔梗，粉碎后過40-80目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1：5-10，在水中浸泡8-16小時，純凈水含有0.1～1組的十二烷基二甲基甜菜堿和5～10%的異丙醇，促進蛋白質(zhì)脫除，從而蛋白含量低，相對的桔梗多糖高純度，再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.5-0.9％、酶解溫度45℃、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h；再加入無花果蛋白酶和菠蘿蛋白酶，無花果蛋白酶的加入量為0.3-0.6%，菠蘿蛋白酶的加入量為0.3-0.5%，酶解溫度45℃、pH值5.5-6.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h，酶解后在100-105℃下滅酶5-10min，得酶解液；將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得桔梗粗多糖濃縮液；在桔梗粗多糖的濃縮液中加入活性炭，活性炭占桔梗粗多糖濃縮液重量的3-6%，攪拌0.3-0.5h，過濾濾出活性炭；離心10-30 min ，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集；取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在60-70℃下濃縮，濃縮至其濃度為60-70%，濃縮液按1：4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-30小時、離心10-30 min ，離心轉(zhuǎn)速為4500rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗3-3次，冷凍干燥至水分含量為4-6%后，再在-1-4℃下進行粉碎，得可溶性多糖；

上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。

優(yōu)選的，桔梗與水的重量比例為1：9；

優(yōu)選的，無花果蛋白酶的用量是0.45%；

菠蘿蛋白酶的添加量為0.4%。

優(yōu)選的，桔梗多糖的提取方法，該方法包括下述的步驟：

選擇曬干的桔梗，粉碎后過60目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1：7，在水中浸泡10小時，加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.8％、酶解溫度45℃、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h；

再加入無花果蛋白酶和菠蘿蛋白酶，無花果蛋白酶的加入量為0.45%，菠蘿蛋白酶的加入量為0.4%，酶解溫度45℃、pH值6.0，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.3h，酶解后在100℃下滅酶6min，得酶解液；

將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得桔梗粗多糖濃縮液；

在桔梗粗多糖的濃縮液中加入活性炭，所述的活性炭占桔梗粗多糖濃縮液重量的4%，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭；離心15 min ，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集；取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65℃下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按1：4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-30小時、離心15 min ，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗3-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在-1-4℃下進行粉碎，得可溶性多糖；

上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。

本發(fā)明的有益效果在于，采用酶作用條件溫和，采用各種不同的酶將桔梗中的脂肪、纖維素酶解，同時從桔梗中提取多糖，最大限度的利用桔梗，而且采用本發(fā)明的方法得到的多糖，其得率和純度高。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施例對本發(fā)明作更進一步的說明，以便本領(lǐng)域的技術(shù)人員更了解本發(fā)明，但并不因此限制本發(fā)明。

以下的檢測方法，如無特殊說明，采用苯酚-硫酸法測多糖的含量。

實施例1

桔梗多糖的提取方法，該方法包括下述的步驟：

選擇曬干的桔梗，粉碎后過60目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1：7，在水中浸泡10小時，純凈水含有0.1～1組的十二烷基二甲基甜菜堿和5～10%的異丙醇，促進蛋白質(zhì)脫除，從而蛋白含量低，相對的桔梗多糖高純度，再加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.8％、酶解溫度45℃、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h；

再加入無花果蛋白酶和菠蘿蛋白酶，無花果蛋白酶的加入量為0.45%，菠蘿蛋白酶的加入量為0.4%，酶解溫度45℃、pH值6.0，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.3h，酶解后在100℃下滅酶6min，得酶解液；

將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得桔梗粗多糖濃縮液；

在桔梗粗多糖的濃縮液中加入活性炭，活性炭占桔梗粗多糖濃縮液重量的4%，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭；

離心15 min ，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集；

取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65℃下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按1：4比例加入95%乙醇沉淀靜置10-30小時、離心15 min ，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗3-3次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在-1-4℃下進行粉碎，得可溶性多糖；

上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。

多糖的提取率為：36.44%，純度為94.64%。

實施例2

桔梗多糖的提取方法，該方法包括下述的步驟：

選擇曬干的桔梗，粉碎后過40目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1：5，在水中浸泡8小時，加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.5％、酶解溫度45℃、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h；

再加入無花果蛋白酶和菠蘿蛋白酶，無花果蛋白酶的加入量為0.3%，菠蘿蛋白酶的加入量為0.3%，酶解溫度45℃、pH值5.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400W，頻率為800MHZ，酶解0.3h，酶解后在100℃下滅酶5min，得酶解液；

將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得桔梗粗多糖濃縮液；

在桔梗粗多糖的濃縮液中加入活性炭，活性炭占桔梗粗多糖濃縮液重量的4%，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭；離心15 min ，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集；

取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65℃下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按1：4比例加入95%乙醇沉淀靜置10小時、離心15 min ，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗3-5次，冷凍干燥至水分含量為5%后，再在-1-4℃下進行粉碎，得可溶性多糖；

上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。

多糖的提取率為：36.11%，純度為93.15%。

實施例3

桔梗多糖的提取方法，該方法包括下述的步驟：

選擇曬干的桔梗，粉碎后過80目篩，得桔梗粉，在桔梗粉中加水并攪拌均勻，桔梗粉與水的重量比例為1： 10，在水中浸泡16小時，加入纖維素酶，纖維素酶的添加量為0.9％、酶解溫度45℃、pH值5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為400-600W，頻率為800MHZ，酶解0.1-0.5h；

再加入無花果蛋白酶和菠蘿蛋白酶，無花果蛋白酶的加入量為0.6%，菠蘿蛋白酶的加入量為0.5%，酶解溫度45℃、pH值6.5，將上述的原料置于微波提取設(shè)備中提取，微波的功率為500W，頻率為800MHZ，酶解0.3h，酶解后在100℃下滅酶6min，得酶解液；

將上述的酶解液置于真空濃縮器中濃縮，減壓低溫濃縮至酶解液至原體積的1/3，得桔梗粗多糖濃縮液；

在桔梗粗多糖的濃縮液中加入活性炭，活性炭占桔梗粗多糖濃縮液重量的4%，攪拌0.3h，過濾濾出活性炭；離心15 min ，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，將上清液與沉淀分別收集；

取上清液過濾去渣，過濾后得到的濾液在65℃下濃縮，濃縮至其濃度為65%，濃縮液按1：4比例加入95%乙醇沉淀靜置30小時、離心15 min ，離心轉(zhuǎn)速為4500 rpm，收集沉淀并用乙醇反復(fù)清洗3-3次，冷凍干燥至水分含量為5%左右后，再在-1-4℃下進行粉碎，得可溶性多糖；

上述的加酶量均為酶占超微粉碎后的桔梗的重量百分比。

多糖的提取率為：36.38%，純度為93.94%。

雖然本發(fā)明已以實施例公開如上，但其并非用以限定本發(fā)明的保護范圍，任何熟悉本領(lǐng)域的技術(shù)人員，在不脫離本發(fā)明的構(gòu)思和范圍內(nèi)所做的

更動和潤飾，均應(yīng)屬于本發(fā)明所附權(quán)利要求的保護范圍。