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PCR反應(yīng)管及包含其的固相載具的制作方法

文檔序號:11038800閱讀:894來源:國知局
PCR反應(yīng)管及包含其的固相載具的制造方法與工藝

本實用新型涉及酶學(xué)或微生物學(xué)裝置,具體涉及PCR反應(yīng)管及包含其的固相載具。



背景技術(shù):

PCR反應(yīng)管是PCR擴增反應(yīng)實施中最普遍使用的一個反應(yīng)器皿,目前現(xiàn)有得PCR管僅由一個潔凈的PCR反應(yīng)管本體構(gòu)成,在使用其進行擴增反應(yīng)時,通常需要將引物、探針、緩沖鹽離子、酶混合物和模板分別加入PCR反應(yīng)管內(nèi),混合均勻后將PCR反應(yīng)管放入PCR儀上進行PCR反應(yīng),上述過程中各物質(zhì)的添加量都有嚴格的要求,一旦添加量不符合標準,便會導(dǎo)致擴增反應(yīng)的失敗。因此操作人員在進行上述物質(zhì)添加時,都異常小心,從而導(dǎo)致實驗進度緩慢,通常一個PCR擴增反應(yīng)實驗需要超過一個小時。



技術(shù)實現(xiàn)要素:

本實用新型要解決的技術(shù)問題是提供一種能夠提高PCR擴增反應(yīng)實驗速度的PCR反應(yīng)管及包含其的固相載具。

本實用新型一種PCR反應(yīng)管,包括:PCR反應(yīng)管本體;所述PCR反應(yīng)管本體的內(nèi)腔底端固定有預(yù)留反應(yīng)物;所述預(yù)留反應(yīng)物包含的物質(zhì)有緩沖鹽離子、酶混合物、引物和探針。

本實用新型一種PCR反應(yīng)管,其中所述預(yù)留反應(yīng)物為緩沖鹽離子、酶混合物、引物和探針的結(jié)晶混合物。

本實用新型一種PCR反應(yīng)管,其中所述預(yù)留反應(yīng)物包括自上而下依次貼合設(shè)置的隔離層和混合層;其中所述隔離層為緩沖鹽離子材質(zhì)的冰層;所述混合層為酶混合物、引物和探針的結(jié)晶混合物層。

本實用新型一種PCR反應(yīng)管,其中所述PCR反應(yīng)管本體的內(nèi)壁設(shè)置有卡槽;所述預(yù)留反應(yīng)物表面設(shè)有卡突;所述預(yù)留反應(yīng)物通過所述卡槽和所述卡突的配合固定設(shè)置于所述PCR反應(yīng)管本體的內(nèi)腔。

本實用新型一種固相載具,包括:承載板和多個所述的PCR反應(yīng)管;多個所述PCR反應(yīng)管矩形陣列排布,并分別固定于所述承載板上。

本實用新型一種固相載具,其中所述PCR反應(yīng)管的數(shù)量為48個、96個或384個。

本實用新型所提供的PCR反應(yīng)管,由于反應(yīng)管本體內(nèi)腔底端固定有預(yù)留反應(yīng)物,因此在進行PCR擴增反應(yīng)時,只需要將待檢測的模板加入PCR反應(yīng)管本體內(nèi)腔即可,避免了添加預(yù)留反應(yīng)物的繁瑣程序,從而提高了PCR擴增反應(yīng)的速度。

附圖說明

為了更清楚地說明本實用新型具體實施方式或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案,下面將對具體實施方式或現(xiàn)有技術(shù)描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹。在所有附圖中,類似的元件或部分一般由類似的附圖標記標識。附圖中,各元件或部分并不一定按照實際的比例繪制。

圖1為本實用新型一種PCR反應(yīng)管當預(yù)留反應(yīng)物為緩沖鹽離子、酶混合物、引物和探針的固態(tài)混合物時的結(jié)構(gòu)示意圖;

圖2為本實用新型一種PCR反應(yīng)管當預(yù)留反應(yīng)物為隔離層和混合層時的結(jié)構(gòu)示意圖;

圖3為本實用新型一種PCR反應(yīng)管中PCR反應(yīng)管本體的結(jié)構(gòu)示意圖;

圖4為圖3中P處的局部放大圖;

圖5為當圖3所示的PCR反應(yīng)管本體內(nèi)存在預(yù)留反應(yīng)物時P處的局部放大圖;

圖6為本實用新型一種固相載具的結(jié)構(gòu)示意圖。

附圖標記:

1-PCR反應(yīng)管

11-PCR反應(yīng)管本體

111-卡槽

12-預(yù)留反應(yīng)物

121-混合層

122-隔離層

123-卡突

2-承載板

具體實施方式

下面將結(jié)合附圖對本實用新型技術(shù)方案的實施例進行詳細的描述。以下實施例僅用于更加清楚地說明本實用新型的技術(shù)方案,因此只作為示例,而不能以此來限制本實用新型的保護范圍。

需要注意的是,除非另有說明,本申請使用的技術(shù)術(shù)語或者科學(xué)術(shù)語應(yīng)當為本實用新型所屬領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的通常意義。

在本申請的描述中,需要理解的是,術(shù)語“中心”、“縱向”、“橫向”、“長度”、“寬度”、“厚度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“豎直”、“水平”、“頂”、“底”“內(nèi)”、“外”、“順時針”、“逆時針”、“軸向”、“徑向”、“周向”等指示的方位或位置關(guān)系為基于附圖所示的方位或位置關(guān)系,僅是為了便于描述本實用新型和簡化描述,而不是指示或暗示所指的裝置或元件必須具有特定的方位、以特定的方位構(gòu)造和操作,因此不能理解為對本實用新型的限制。

此外,術(shù)語“第一”、“第二”等僅用于描述目的,而不能理解為指示或暗示相對重要性或者隱含指明所指示的技術(shù)特征的數(shù)量。在本實用新型的描述中,“多個”的含義是兩個以上,除非另有明確具體的限定。

在本申請中,除非另有明確的規(guī)定和限定,術(shù)語“安裝”、“相連”、“連接”、“固定”等術(shù)語應(yīng)做廣義理解,例如,可以是固定連接,也可以是可拆卸連接,或成一體;可以是機械連接,也可以是電連接;可以是直接相連,也可以通過中間媒介間接相連,可以是兩個元件內(nèi)部的連通或兩個元件的相互作用關(guān)系。對于本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員而言,可以根據(jù)具體情況理解上述術(shù)語在本實用新型中的具體含義。

在本申請中,除非另有明確的規(guī)定和限定,第一特征在第二特征“上”或“下”可以是第一和第二特征直接接觸,或第一和第二特征通過中間媒介間接接觸。而且,第一特征在第二特征“之上”、“上方”和“上面”可是第一特征在第二特征正上方或斜上方,或僅僅表示第一特征水平高度高于第二特征。第一特征在第二特征“之下”、“下方”和“下面”可以是第一特征在第二特征正下方或斜下方,或僅僅表示第一特征水平高度小于第二特征。

如圖4所示,在一種具體實施方式中,本實用新型固相載具包括承載板2和多個PCR反應(yīng)管1;多個PCR反應(yīng)管1矩形陣列排布,并分別固定于承載板2上。具體述PCR反應(yīng)管1的數(shù)量可以為48個、96個或384個。本實用新型固相載具中包含的PCR反應(yīng)管1有別于現(xiàn)有的PCR反應(yīng)管,具體而言:

如圖1所示,本實用新型中的PCR反應(yīng)管1,包括:PCR反應(yīng)管本體11;PCR反應(yīng)管本體11的內(nèi)腔底端固定有預(yù)留反應(yīng)物12,其中預(yù)留反應(yīng)物12包含的物質(zhì)有緩沖鹽離子、酶混合物、引物和探針。

更具體地,預(yù)留反應(yīng)物12包含的上述物質(zhì)既可以以如圖1所示的固態(tài)混合物形式存在,也可以以圖2所示的分層形式存在(自上而下依次貼合設(shè)置的隔離層122和混合層121)。其中:

預(yù)留反應(yīng)物以圖1所示的固態(tài)混合物存在的實現(xiàn)方式為:首先對引物單溶、探針單溶、緩沖鹽離子單溶和酶混合物分別精確取量并加入PCR管主體11的內(nèi)腔;然后將PCR管主體11放入離心機進行短暫離心;然后將PCR管主體11放入烘箱中,將PCR管主體11內(nèi)腔的水分蒸干,從而緩沖鹽離子、酶混合物、引物和探針逐漸結(jié)晶并固定在PCR管主體11的內(nèi)腔底部,形成預(yù)留反應(yīng)物12。預(yù)留反應(yīng)物12以圖1所示的固態(tài)混合物存在的優(yōu)勢在于:對PCR反應(yīng)管1保存環(huán)境的溫度沒有特殊要求,但是由于預(yù)留反應(yīng)物12是通過結(jié)晶的形式固定于PCR管主體內(nèi)腔的,預(yù)留反應(yīng)物表面12與PCR管主體11的內(nèi)壁結(jié)合力不強,因此在將PCR反應(yīng)管1倒置或傾斜時,預(yù)留反應(yīng)物12很容易從PCR管主體11的內(nèi)腔脫離。為了避免該問題的發(fā)生,如圖3-4所示,本實用新型于PCR反應(yīng)管本體11的內(nèi)壁設(shè)置有卡槽111;引物單溶、探針單溶、緩沖鹽離子單溶和酶混合物在PCR反應(yīng)管本體11的內(nèi)腔形成結(jié)晶的過程中,會于卡槽111內(nèi)形成與卡槽111相匹配的卡突123,從而通過卡槽111和卡突123的配合將預(yù)留反應(yīng)物12鎖止在PCR管主體11的內(nèi)腔;此時,即使故意對PCR反應(yīng)管1倒置或傾斜,也不會導(dǎo)致預(yù)留反應(yīng)物12從PCR管主體11的內(nèi)腔脫離。

預(yù)留反應(yīng)物以圖2所示的分層形式存在的實現(xiàn)方式為:首先將引物單溶、探針單溶和酶混合物分別精確量取并加入PCR管主體11的內(nèi)腔;然后將PCR管主體11放入離心機進行短暫離心;然后將PCR管主體11放入烘箱中,將PCR管主體11內(nèi)腔的水分蒸干,從而酶混合物、引物和探針結(jié)晶并固定在PCR管主體的內(nèi)腔底部,形成混合層121;然后對溫度低于0℃的緩沖鹽離子單溶精確取量并加入PCR管主體11的內(nèi)腔;然后將PCR管主體11放入冰箱中,使得緩沖鹽離子單溶在混合層上方結(jié)冰形成隔離層122,此時隔離層122邊緣與PCR管主體11的內(nèi)壁之間存在應(yīng)力,對混合層起到固定作用;此時即使將PCR反應(yīng)管倒置或傾斜,隔離層122既不會沿PCR管主體11的內(nèi)壁移動,更不會從PCR管主體11的內(nèi)腔滑出,進而避免了混合層122從PCR管主體11的內(nèi)腔滑出的風(fēng)險;當然為了進一步保證混合層121的牢固性,PCR管主體11也可以進一步采用如圖3-4所示的結(jié)構(gòu)。需要注意的是,當預(yù)留反應(yīng)物12以圖2所示的分層形式存在時,需要保證PCR反應(yīng)管1保存環(huán)境的溫度低于或等于緩沖鹽離子單溶的冰點,否則緩沖鹽離子單溶會因融化而失去對混合層的固定作用。

本實用新型所提供的PCR反應(yīng)管,由于反應(yīng)管本體內(nèi)腔底端固定有預(yù)留反應(yīng)物,因此在進行PCR擴增反應(yīng)時,只需要將待檢測的模板加入PCR反應(yīng)管本體內(nèi)腔即可,避免了添加預(yù)留反應(yīng)物的繁瑣程序,從而提高了PCR擴增反應(yīng)的速度。

本實用新型的說明書中,說明了大量具體細節(jié)。然而,能夠理解,本實用新型的實施例可以在沒有這些具體細節(jié)的情況下實踐。在一些實例中,并未詳細示出公知的方法、結(jié)構(gòu)和技術(shù),以便不模糊對本說明書的理解。

在本說明書的描述中,參考術(shù)語“一個實施例”、“一些實施例”、“示例”、“具體示例”、或“一些示例”等的描述意指結(jié)合該實施例或示例描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點包含于本實用新型的至少一個實施例或示例中。在本說明書中,對上述術(shù)語的示意性表述不必須針對的是相同的實施例或示例。而且,描述的具體特征、結(jié)構(gòu)、材料或者特點可以在任一個或多個實施例或示例中以合適的方式結(jié)合。此外,在不相互矛盾的情況下,本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以將本說明書中描述的不同實施例或示例以及不同實施例或示例的特征進行結(jié)合和組合。

最后應(yīng)說明的是:以上各實施例僅用以說明本實用新型的技術(shù)方案,而非對其限制;盡管參照前述各實施例對本實用新型進行了詳細的說明,本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解:其依然可以對前述各實施例所記載的技術(shù)方案進行修改,或者對其中部分或者全部技術(shù)特征進行等同替換;而這些修改或者替換,并不使相應(yīng)技術(shù)方案的本質(zhì)脫離本實用新型各實施例技術(shù)方案的范圍,其均應(yīng)涵蓋在本實用新型的權(quán)利要求和說明書的范圍當中。

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