本實(shí)用新型涉及一種試劑盒，具體涉及一種細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

為了節(jié)約時(shí)間、方便使用，越來越多的實(shí)驗(yàn)步驟與檢測方法被開發(fā)為試劑盒，但是傳統(tǒng)的試劑盒為簡單的單層包裝盒，內(nèi)部空間為封閉的單一結(jié)構(gòu)，所有內(nèi)容物被疊放于盒內(nèi)。在使用過程中，技術(shù)人員很難準(zhǔn)確迅速的獲得所需組分，給實(shí)際操作帶來不便，而且在產(chǎn)品運(yùn)輸過程中，里面各種組分容易出現(xiàn)相互碰撞而造成損壞，對運(yùn)輸條件要求較高。從培養(yǎng)細(xì)胞或組織中抽提細(xì)胞膜蛋白和細(xì)胞漿蛋白，抽提的膜蛋白不僅包括質(zhì)膜上的膜蛋白，也包括線粒體膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和高爾基體膜等上的膜蛋白，操作過程復(fù)雜，因此，亟需提供一種相關(guān)的試劑盒。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本實(shí)用新型要解決的技術(shù)問題是克服現(xiàn)有的細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒很難準(zhǔn)確迅速的獲得所需組分，給實(shí)際操作帶來不便的缺陷，提供一種細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒。

為了解決上述技術(shù)問題，本實(shí)用新型提供了如下的技術(shù)方案：

本實(shí)用新型提供了一種細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒，包括盒體、鉸鏈、盒蓋、固定座、第一孔槽、裝膜蛋白抽提試劑A的試管、標(biāo)簽、第二孔槽、裝膜蛋白抽提試劑B的試管、說明書安放槽、細(xì)胞刮子、移液器和玻璃勻漿器，所述盒蓋通過所述鉸鏈連接所述盒體，所述盒體的底部設(shè)有所述固定座，所述固定座的頂部設(shè)有所述第一孔槽，所述第一孔槽的內(nèi)部設(shè)置有所述裝膜蛋白抽提試劑A的試管，所述第一孔槽的一側(cè)設(shè)有所述第二孔槽，所述第二孔槽的內(nèi)部設(shè)有所述裝膜蛋白抽提試劑B的試管，所述第二孔槽的一側(cè)設(shè)有所述說明書安放槽，所述說明書安放槽的一側(cè)放置有所述玻璃勻漿器，所述玻璃勻漿器的邊側(cè)設(shè)有所述細(xì)胞刮子，所述細(xì)胞刮子的一側(cè)設(shè)有所述移液器。

作為本實(shí)用新型的一種優(yōu)選技術(shù)方案，所述盒蓋的邊側(cè)連接卡扣，所述盒體的側(cè)邊設(shè)有與所述卡扣相對應(yīng)的卡槽。

作為本實(shí)用新型的一種優(yōu)選技術(shù)方案，所述裝膜蛋白抽提試劑A的試管和所述裝膜蛋白抽提試劑B的試管的頂端均粘貼有對應(yīng)的所述標(biāo)簽，所述裝膜蛋白抽提試劑A的試管和所述裝膜蛋白抽提試劑B的試管的殼體上均設(shè)有刻度。

本實(shí)用新型所達(dá)到的有益效果是：該種細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒提供了一種比較簡單、方便地從培養(yǎng)細(xì)胞或組織中抽提細(xì)胞膜蛋白和細(xì)胞漿蛋白的方法，抽提的膜蛋白不僅包括質(zhì)膜上的膜蛋白，也包括線粒體膜、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜和高爾基體膜等上的膜蛋白。通過勻漿適度破碎細(xì)胞，經(jīng)低速離心去除細(xì)胞核和少數(shù)未破碎的細(xì)胞產(chǎn)生的沉淀，隨后取上清高速離心獲得細(xì)胞膜沉淀和含有細(xì)胞漿蛋白的上清，然后通過優(yōu)化的膜蛋白抽提試劑從沉淀中抽提獲取膜蛋白。約90分鐘即可完成培養(yǎng)細(xì)胞或組織的細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白的分離和抽提。本試劑盒按照本說明書的操作步驟可以抽提100個(gè)細(xì)胞或組織樣品。

附圖說明

附圖用來提供對本實(shí)用新型的進(jìn)一步理解，并且構(gòu)成說明書的一部分，與本實(shí)用新型的實(shí)施例一起用于解釋本實(shí)用新型，并不構(gòu)成對本實(shí)用新型的限制。在附圖中：

圖1是本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)示意圖；

圖中：1、盒體；2、鉸鏈；3、盒蓋；4、固定座；5、第一孔槽；6、裝膜蛋白抽提試劑A的試管；7、標(biāo)簽；8、第二孔槽；9、裝膜蛋白抽提試劑B的試管；10、說明書安放槽；11、細(xì)胞刮子；12、移液器；13、玻璃勻漿器。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合附圖對本實(shí)用新型的優(yōu)選實(shí)施例進(jìn)行說明，應(yīng)當(dāng)理解，此處所描述的優(yōu)選實(shí)施例僅用于說明和解釋本實(shí)用新型，并不用于限定本實(shí)用新型。

實(shí)施例1

如圖1所示，本實(shí)用新型提供一種細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒，包括盒體1、鉸鏈2、盒蓋3、固定座4、第一孔槽5、裝膜蛋白抽提試劑A的試管6、標(biāo)簽7、第二孔槽8、裝膜蛋白抽提試劑B的試管9、說明書安放槽10、細(xì)胞刮子11、移液器12和玻璃勻漿器13，盒蓋3通過鉸鏈2連接盒體1，盒體1的底部設(shè)有固定座4，固定座4的頂部設(shè)有第一孔槽5，第一孔槽5的內(nèi)部設(shè)置有裝膜蛋白抽提試劑A的試管6，第一孔槽5的一側(cè)設(shè)有第二孔槽8，第二孔槽8的內(nèi)部設(shè)有裝膜蛋白抽提試劑B的試管9，第二孔槽8的一側(cè)設(shè)有說明書安放槽10，說明書安放槽10的一側(cè)放置玻璃勻漿器13，玻璃勻漿器13的邊側(cè)設(shè)有細(xì)胞刮子11，細(xì)胞刮子11的一側(cè)設(shè)有所述移液器12。

盒蓋3的邊側(cè)連接卡扣，盒體1的側(cè)邊設(shè)有與卡扣相對應(yīng)的卡槽，使該試劑盒密封。

裝膜蛋白抽提試劑A的試管6和裝膜蛋白抽提試劑B的試管9的頂端均粘貼有對應(yīng)的標(biāo)簽7，裝膜蛋白抽提試劑A的試管6和裝膜蛋白抽提試劑B的試管9的殼體上均設(shè)有刻度，便于操作人員準(zhǔn)確提取。

具體原理：該種細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提試劑盒，進(jìn)行細(xì)胞膜蛋白與細(xì)胞漿蛋白抽提操作時(shí)，首先需準(zhǔn)備試劑，室溫融解并混勻膜蛋白抽提試劑A和B，融解后立即置于冰浴上。取適量的膜蛋白抽提試劑A和B備用，在使用前數(shù)分鐘內(nèi)加入PMSF。再準(zhǔn)備細(xì)胞或組織樣品，對于貼壁細(xì)胞，培養(yǎng)約2000-5000萬細(xì)胞，用PBS洗一遍，用細(xì)胞刮子11刮下細(xì)胞或用含有EDTA但不含胰酶的細(xì)胞消化液處理細(xì)胞使細(xì)胞不再貼壁很緊，并用移液器12吹打下細(xì)胞。離心收集細(xì)胞，吸除上清，留下細(xì)胞沉淀備用。對于懸浮細(xì)胞，培養(yǎng)約2000-5000萬細(xì)胞，直接離心收集細(xì)胞，吸除上清，留下細(xì)胞沉淀備用。然后用適量冰浴預(yù)冷的PBS輕輕重懸細(xì)胞沉淀，取少量細(xì)胞用于計(jì)數(shù)，剩余細(xì)胞4℃，600g離心5分鐘沉淀細(xì)胞。棄上清，隨后4℃，600g離心1分鐘，以沉淀離心管管壁上的殘留液體并進(jìn)一步沉淀細(xì)胞，盡最大努力吸盡殘留液體。接著對細(xì)胞預(yù)處理，把1毫升臨用前添加了PMSF的膜蛋白抽提試劑A加入至2000-5000萬細(xì)胞中，輕輕并充分懸浮細(xì)胞，冰浴放置10-15分鐘。對于組織，取約100毫克組織，用剪刀盡量小心剪切成細(xì)小的組織碎片。加入1毫升臨用前添加了PMSF的膜蛋白抽提試劑A，輕輕懸浮組織碎片，冰浴放置10-15分鐘。把細(xì)胞懸液或組織樣品轉(zhuǎn)移到冰浴預(yù)冷玻璃勻漿器13中，勻漿約30-50下，直到細(xì)胞破碎的程度大于70％。然后去除細(xì)胞核和未破碎的細(xì)胞，4℃，700g離心10分鐘，小心收集上清液至一新的離心管中。沉淀細(xì)胞膜碎片，4℃，14000g離心30分鐘，以沉淀細(xì)胞膜碎片。最后吸取上清即為細(xì)胞漿蛋白，可-70℃保存?zhèn)溆?。抽提膜蛋白?℃，14000g離心10秒，盡最大努力吸盡上清。加入膜蛋白抽提試劑B200微升最高速劇烈Vortex 5秒重懸沉淀，冰浴5-10分鐘。重復(fù)前述步驟的vortex和冰浴孵育1-2次，以充分抽提膜蛋白。隨后，4℃，14000g離心5分鐘，收集上清即為細(xì)胞膜蛋白溶液?？?70℃保存?zhèn)溆谩?/p>

最后應(yīng)說明的是：以上所述僅為本實(shí)用新型的優(yōu)選實(shí)施例而已，并不用于限制本實(shí)用新型，盡管參照前述實(shí)施例對本實(shí)用新型進(jìn)行了詳細(xì)的說明，對于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說，其依然可以對前述各實(shí)施例所記載的技術(shù)方案進(jìn)行修改，或者對其中部分技術(shù)特征進(jìn)行等同替換。凡在本實(shí)用新型的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本實(shí)用新型的保護(hù)范圍之內(nèi)。